APLIKASIAPLIKASI

ANALISIS KUALITATIFANALISIS KUALITATIF IDENTIFIKASI : PROFIL SPEKTRAIDENTIFIKASI : PROFIL SPEKTRA PANJ GELPANJ GEL EKSTINGSI SPESIFIKEKSTINGSI SPESIFIK ANALISIS KUANTITATIFANALISIS KUANTITATIF - SENYAWA TUNGGAL- SENYAWA TUNGGAL - MULTI KOMPONEN- MULTI KOMPONEN

Analisis kuantitatif zat tunggal:Analisis kuantitatif zat tunggal:

1. Membandingkan dengan Absor-1. Membandingkan dengan Absor-

bans (A) lar.zat standarbans (A) lar.zat standar

Lar. std diukur Absorbans Lar. std diukur Absorbans Astd Astd

Lar. zat X Lar. zat X Ax Ax

Cx = Ax/Astd X CstdCx = Ax/Astd X Cstd

Harus diusahakan pembacaan Ax Harus diusahakan pembacaan Ax

dan Astd nilainya berdekatandan Astd nilainya berdekatan

2. Dengan membuat kurva baku:2. Dengan membuat kurva baku:

Kurva dibuat dari data Astd Kurva dibuat dari data Astd

pada ordinat thd konsentrasi stdpada ordinat thd konsentrasi std

pada absis.pada absis.

AA

AAxx

CCxx

C C

3. Dengan data Ekstingsi spesifik 3. Dengan data Ekstingsi spesifik

(E(E1%1%1cm1cm))

Espes.= 376 Espes.= 376 lar std 10ppm lar std 10ppm Astd =0,376Astd =0,376

Ax?Ax?

4. Dengan data Ekstingsi molar/ molar4. Dengan data Ekstingsi molar/ molar

absorptivitas (a)absorptivitas (a)

A = a.b.C A = a.b.C a = A/C = 0,525/10 a = A/C = 0,525/10

Ax= 0,0525 Cx Ax= 0,0525 Cx Cx = ………. Cx = ……….

TEKNIK-TEKNIK UTK PENYELESAIAN PD TEKNIK-TEKNIK UTK PENYELESAIAN PD METODE SPEKTROFOTOMETRIMETODE SPEKTROFOTOMETRI

Untuk analisis campuran dua komponenUntuk analisis campuran dua komponen 1. SERAPAN INDIVIDUAL1. SERAPAN INDIVIDUAL 2. SIMULTAN2. SIMULTAN 3. PANJANG GELOMBANG GANDA3. PANJANG GELOMBANG GANDA 4. DERIVATIF4. DERIVATIF 5. DIFFERENSIAL BERDASARKAN PERBEDAAN 5. DIFFERENSIAL BERDASARKAN PERBEDAAN

PELARUTPELARUT 6. PERNAROWSKI6. PERNAROWSKI 7. DLL7. DLL

PENENTUAN TEKNIK TERPILIHPENENTUAN TEKNIK TERPILIH

HARUS MEMPUNYAI SENYAWA STANDARHARUS MEMPUNYAI SENYAWA STANDAR

SPEKTRA SENYAWA MURNI/STANDAR SPEKTRA SENYAWA MURNI/STANDAR (TUNGGAL/MULTI)(TUNGGAL/MULTI)

DITENTUKAN TEKNIK TERPILIHDITENTUKAN TEKNIK TERPILIH

1.SERAPAN INDIVIDUAL:1.SERAPAN INDIVIDUAL:

AA

λλ11 λλ2 2 λλ nm nm

: : zat X : zat Yzat X : zat Y

Metode individual: Metode individual:

AA11= Ax1 + Ay1= Ax1 + Ay1

A2 = Ax2 + Ay2A2 = Ax2 + Ay2

= 0 + Ay2= 0 + Ay2

Ay2 = ay2 . Cy Ay2 = ay2 . Cy Cy= …….Cy= …….

2. SIMULTAN:2. SIMULTAN:

AAX1X1

AAY2Y2

X YX Y

AAX2X2

AAY1Y1

λλ 1 1 λλ 2 2

Pada Pada λλ11 : A : AXY1XY1 = A = AX1 X1 + A + AY1Y1

= a= aX1X1 . c . cXX + a + aY1Y1 . c . cYY ……. Pers. I ……. Pers. I

Pada Pada λλ22 : A : AXY2XY2 = A = AX2X2 + A + AY2Y2

= a= aX2X2 . c . cXX + a + aY2Y2 . c . cY Y ........... Pers.II........... Pers.II

Dengan mengeliminasi salah satu CDengan mengeliminasi salah satu CXX atau C atau CYY

dari kedua pers tsb, akan dapat diperolehdari kedua pers tsb, akan dapat diperoleh

harga C masing2 zat X dan Yharga C masing2 zat X dan Y

3. PANJANG GELOMBANG GANDA:3. PANJANG GELOMBANG GANDA:

AAX1X1

X YX Y

AAY1Y1

AAY2Y2

AAX2X2

λλ 1 1 λλ 22

Yang menjadi permasalahan pada metoda ini Yang menjadi permasalahan pada metoda ini adalah bagaimana cara menentukan lambda adalah bagaimana cara menentukan lambda kerja 1 dan lambda kerja 2, dimana pada kerja 1 dan lambda kerja 2, dimana pada metoda ini memberikan persyaratan sebagai metoda ini memberikan persyaratan sebagai berikut:berikut:

1. Pada lambda kerja I, 1. Pada lambda kerja I,

ΔΔ A A XX = maksimal = maksimal

2. Pada lambda kerja II,2. Pada lambda kerja II,

ΔΔ A A Y Y = 0 = 0

UTK ZAT X PADA PANJ GEL 1 DAN 2 :UTK ZAT X PADA PANJ GEL 1 DAN 2 :

Ax = Ax1 – Ax2Ax = Ax1 – Ax2

UTK ZAT Y PADA PANJ GEL 1 DAN 2 :UTK ZAT Y PADA PANJ GEL 1 DAN 2 :

Ay = Ay1 – Ay2Ay = Ay1 – Ay2

= 0= 0

SHG UTK PK KADAR ZAT X TDK DIGANGGU ZAT YSHG UTK PK KADAR ZAT X TDK DIGANGGU ZAT Y

KADAR ZAT X = (KADAR ZAT X = (ΔΔx )Sampl/ ( x )Sampl/ ( ΔΔx )St x Cx Stx )St x Cx St

Untuk metode Derivatif, Deferensial, Untuk metode Derivatif, Deferensial, maupun Pernarowski, pada maupun Pernarowski, pada umumnya dasar yang digunakan umumnya dasar yang digunakan untuk penyelesaian analisisnya untuk penyelesaian analisisnya adalah sama dengan metode adalah sama dengan metode SimultanSimultan

VALIDASIVALIDASI

1. UJI SELEKTIFITAS1. UJI SELEKTIFITAS 2. UJI LINIERITAS/HOMOGENITAS2. UJI LINIERITAS/HOMOGENITAS 3. LOD/LOQ3. LOD/LOQ 4. AKURASI4. AKURASI 5. PRESISI5. PRESISI 6. RUDGEDNESS6. RUDGEDNESS

Pada metode spektrofotometri untuk Pada metode spektrofotometri untuk analisis kuantitatifnya, validasi yang analisis kuantitatifnya, validasi yang selalu dilakukan adalah akurasi dan selalu dilakukan adalah akurasi dan presisi.presisi.

Sedangkan validasi yang lain tidak Sedangkan validasi yang lain tidak perlu dilakukanperlu dilakukan

AKURASIAKURASI

PENGARUH BAHAN TAMBAHANPENGARUH BAHAN TAMBAHAN MATRIKS BAHAN TAMBAHAN + SENY OBAT MATRIKS BAHAN TAMBAHAN + SENY OBAT

(BERBAGAI PERBANDINGAN)(BERBAGAI PERBANDINGAN) EKTRAKSI, EKSTRAK DIAMATI SERAPANYA DG EKTRAKSI, EKSTRAK DIAMATI SERAPANYA DG

TEHNIK TERPILIHTEHNIK TERPILIH (%) RECOVERY ?(%) RECOVERY ?

PRESISIPRESISI

DG MENGAMATI SERAPAN 10 KALI DARI SATU DG MENGAMATI SERAPAN 10 KALI DARI SATU KONSENTRASI LARUTAN STANDARTKONSENTRASI LARUTAN STANDART

DIHITUNG SERAPAN RATA-RATA, SD DAN KVDIHITUNG SERAPAN RATA-RATA, SD DAN KV

SYARAT SYARAT

KV < 2%KV < 2%

PREPARASIPREPARASI

KONTROL KUALITASKONTROL KUALITAS SAMPLINGSAMPLING

JENIS SEDIAAN : TABLET/KAPSULJENIS SEDIAAN : TABLET/KAPSUL

SIRUP/SUSPENSI SIRUP/SUSPENSI

INFUS/INJEKSIINFUS/INJEKSI

(MENURUT FI IV)(MENURUT FI IV)

CONTOH:CONTOH:

Suatu larutan sampel zat A yang dibuat dari Suatu larutan sampel zat A yang dibuat dari penimbangan 102,54 mg serbuk tablet zat A dan penimbangan 102,54 mg serbuk tablet zat A dan kemudian dilarutkan dalakemudian dilarutkan dalam HCl 0,1 N sampai m HCl 0,1 N sampai volume 100,0 ml dan dilakukan penyaringan, volume 100,0 ml dan dilakukan penyaringan, filtratnya memberifiltratnya memberikan serapan kan serapan

A = 0,496 pada pengukuran dengan A = 0,496 pada pengukuran dengan spektrofotometer Uv pada lambda 254 nm. spektrofotometer Uv pada lambda 254 nm. Larutan Larutan standar/baku zat A dalam HCl 0,1N pada standar/baku zat A dalam HCl 0,1N pada konsentrasi 51,20 bpj memberikan serapan A = konsentrasi 51,20 bpj memberikan serapan A = 0,310 pada 0,310 pada lambda 254 nm.lambda 254 nm.

Berapa Berapa kadar ( % b/b )kadar ( % b/b ) zat A dalam sampel zat A dalam sampel tersebut?tersebut?

Lar. Sample A Lar. Sample A 102,54mg + HCl 0,1N 102,54mg + HCl 0,1N A=0,496 A=0,496 0,496=0,0…. X C 0,496=0,0…. X CAA

Pembanding A kons=51,20 bpj Pembanding A kons=51,20 bpj A=0,310 A=0,310 a aAA= 0,310/51,2= 0,…..= 0,310/51,2= 0,…..

Kons. Samp.A = 0,496/0,310 X 51,20Kons. Samp.A = 0,496/0,310 X 51,20

= 81,92 bpj= 81,92 bpj

= 8,192 mg/100ml= 8,192 mg/100ml

= 8,192/102,54 X 100%= 8,192/102,54 X 100%

=7,99% b/b=7,99% b/b

Cara penyelesaian lain:Cara penyelesaian lain:

Lar.std A pd kons.51,20 bpj Lar.std A pd kons.51,20 bpj A=0,310A=0,310

Lar. Sample A Lar. Sample A 102,54mg 102,54mg A=0,496A=0,496

Jawab:Jawab:

Kons. Sampl.= 0,496/0,31 X 51,2bpj=Kons. Sampl.= 0,496/0,31 X 51,2bpj=

= 81,9 bpj = 81,9 bpj

=8,19mg/100ml=8,19mg/100ml

= 8,19mg/102,54mg X 100%= 8,19mg/102,54mg X 100%

= …….. % b/b= …….. % b/b

Pada analisis spektrometri Uv, larutan zat Pada analisis spektrometri Uv, larutan zat Y (zat tunggal) memberikan harga Y (zat tunggal) memberikan harga

A = 0,306.A = 0,306.

Kalau diketahui harga E (1%,1cm) larutan Kalau diketahui harga E (1%,1cm) larutan tersebut dalam pelarut dan lambda yang tersebut dalam pelarut dan lambda yang sama dengan larutan zat Y adalah = 432, sama dengan larutan zat Y adalah = 432, berapa kadar larutan zat Y tsb?berapa kadar larutan zat Y tsb?

Diket: E spesf = 432 Diket: E spesf = 432 A (1%b/v)=432 A (1%b/v)=432

Absorbans = 0,2 – 0,8Absorbans = 0,2 – 0,8

A ref. A ref. unt kons.( 10bpj) unt kons.( 10bpj) Aref=0,432 Aref=0,432

1% -> 1000mg/100ml1% -> 1000mg/100ml

1 mg/100ml =10 bpj.1 mg/100ml =10 bpj.

Sampl. Sampl. A=0,306 A=0,306

Kons. Sampl = 0,306/0,432 X 10 bpjKons. Sampl = 0,306/0,432 X 10 bpj

= 7,08 bpj= 7,08 bpj

= 0,708mg/100ml= 0,708mg/100ml

= 0,00708% b/v= 0,00708% b/v

Sample Y Sample Y lar lar A=0,306 A=0,306

A=abcA=abc

Std Std E E1%1%1cm1cm = 432 = 432

Kadar Y?Kadar Y?

Std.Y Std.Y 1mg/100 1mg/100 A= 0,432 A= 0,432

Sample Y Sample Y C Cyy= 0,306/0,432 X 1mg= 0,306/0,432 X 1mg

= 0,708 mg= 0,708 mg

= 0,0007% = 0,0007%

Sampl. Y Sampl. Y A=0,306 A=0,306Diket E spes. Y = 432Diket E spes. Y = 432Kadar Y = ?Kadar Y = ?Jawab:Jawab:E spes. Y =432 E spes. Y =432 Ay = 0,432 Ay = 0,432 (C=10bpj)(C=10bpj)Csampl.y= 0,306/0,432 X 10bpjCsampl.y= 0,306/0,432 X 10bpj = 7,08 bpj= 7,08 bpj = 0,708mg/100ml= 0,708mg/100ml = 0,708%= 0,708%

Suatu sampel sediaan tablet yang mengandung Suatu sampel sediaan tablet yang mengandung zat A dan zat B, akan ditentukan masing- zat A dan zat B, akan ditentukan masing-masing kadarnya dengan spektrofotometri Uv masing kadarnya dengan spektrofotometri Uv dengan metode persamaan simultan.dengan metode persamaan simultan.

Tentukan kadar masing-2 zat A dan zat B Tentukan kadar masing-2 zat A dan zat B dalam tiap tabletnya, kalau diketahui:dalam tiap tabletnya, kalau diketahui:

- berat rata-2 tiap tablet = 825,0 mg- berat rata-2 tiap tablet = 825,0 mg - lambda kerja-1 ( - lambda kerja-1 ( 1 ) = 230 nm ( 1 ) = 230 nm ( max zat A )max zat A ) - lambda kerja-2 ( - lambda kerja-2 ( 2 ) = 268 nm ( 2 ) = 268 nm ( max zat B )max zat B ) - penimbangan sampel 200,0 mg, dilarutkan - penimbangan sampel 200,0 mg, dilarutkan

dalam HCl 0,1 N ad 100 ml, saring, pipet filtrat dalam HCl 0,1 N ad 100 ml, saring, pipet filtrat 1 ml tambah HCl 0,1 N ad 100 ml lagi, maka 1 ml tambah HCl 0,1 N ad 100 ml lagi, maka

larutan ini kemudian diukur absorbansnya (A)larutan ini kemudian diukur absorbansnya (A) pada pada 1, A1 = 0,716 dan 1, A1 = 0,716 dan pada pada 2 , A2 = 0,625;2 , A2 = 0,625;

Diket: bobot rata2 tablet=825,0mgDiket: bobot rata2 tablet=825,0mg Std. zat A: 10,08bpj Std. zat A: 10,08bpj A A11=0,590=0,590

AA22 =0,420 =0,420 Std. zat B: 10,10bp Std. zat B: 10,10bp A A1 1 = 0,375= 0,375

AA 2 2 = 0,520= 0,520

A=a.cA=a.c Zat A: a Zat A: a1A1A= 0,590/10,08=0,058= 0,590/10,08=0,058

aa2A2A= 0,420/10,08=0,042= 0,420/10,08=0,042

Zat B: aZat B: a1B1B = 0,375/10,10 = 0,037 = 0,375/10,10 = 0,037

aa2B2B = 0,520/10,10 = 0,051 = 0,520/10,10 = 0,051

Sample Sample 200,0mg ad 100ml, 200,0mg ad 100ml, 1ml ad 1ml ad 100ml 100ml A A11=0,716; A=0,716; A22 = 0,625 = 0,625

Persamaan didapat:Persamaan didapat:

I. 0,716=aI. 0,716=a1A1A x C x CAA + a + a1B1B x C x CBB

II. 0,625=aII. 0,625=a2A2A x C x CA A +a+a2B 2B x Cx C B B

0,716 = 0,058 C0,716 = 0,058 CAA + 0,037 C + 0,037 CB B (x42)(x42)

0,625 = 0,042 C0,625 = 0,042 CAA + 0,051 C + 0,051 CB B (( x58)x58)

30,072 = 2,436 C30,072 = 2,436 CAA + 1,554 C + 1,554 CBB

36,25 = 2,436 C36,25 = 2,436 CAA + 2,958 C + 2,958 CB __B __

6,178 = 0 + 1,404 C6,178 = 0 + 1,404 CBB

1,404 C1,404 CBB = 6,178 = 6,178 C CBB = 4,400 bpj = 4,400 bpj

0,716 = 0,058 CA + 0,037 x 4,4000,716 = 0,058 CA + 0,037 x 4,400

0058 CA = 0,716 – 0,16280058 CA = 0,716 – 0,1628

CA = 0,5532 / 0,058 = 9,538 bpjCA = 0,5532 / 0,058 = 9,538 bpj

= 0,9538 mg/100ml (II)= 0,9538 mg/100ml (II)

= 95,38 mg/100ml (I)= 95,38 mg/100ml (I)

= 95,38 mg/200,0mg= 95,38 mg/200,0mg

= 95,38/200 X 825 = 393,4425= 95,38/200 X 825 = 393,4425

= 393,44mg/tabet= 393,44mg/tabet

Cb = ………….Cb = ………….