Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin...

7
American Journal of Medical Genetics Neuropsychiatric Genetics) 114:329±335 2002) Allelic Association Analysis of the Dopamine D2, D3, 5-HT 2A , and GABA A g2 Receptors and Serotonin Transporter Genes With Heroin Abuse in Chinese Subjects Tao Li, 1,2 Xiehe Liu, 2 Jinghua Zhao, 1 Xun Hu, 1 David M. Ball, 3 El-Wui Loh, 3 Pak C. Sham, 1,3 and David A. Collier 1,3 * 1 Division of Psychological Medicine, The Institute of Psychiatry, London, United Kingdom 2 Department of Psychiatry, West China Hospital, School of Medicine, Sichuan University, Sichuan, People's Republic of China 3 Social Genetic and Developmental Psychiatry Centre, The Institute of Psychiatry, London, United Kingdom Five candidate genes, the receptors DRD2, DRD3, HTR2A and GABA A g2, and the seroto- nin transporter 5-HTT) were analyzed for association with heroin abuse. We examined three polymorphisms promoter 141DC, Ser311Cys, and TaqI) in the DRD2 gene, one polymorphism Ser9Gly) in the DRD3 gene, two polymorphisms promoter 1438G/A and T102C) in the HTR2A gene, two polymorphisms VNTR and Del/Ins) in 5- HTT gene, and one polymorphism G3145A) in GABA A g2 gene in 121 Chinese heroin addicts and 194 controls. None of the poly- morphisms differed signi®cantly for allele, genotype, or haplotype frequencies, except for the DRD2 promoter polymorphism 141DC genotype-wise and allele-wise, P 0.05, uncorrected). An additional 344 subjects with heroin abuse and 104 controls were investigated for the 141DC poly- morphism. In the second sample, there were no signi®cant difference of genotype or allele frequencies between subjects with heroin abuse and normal controls. When we divided the sample by route of adminis- tration into nasal inhalers and IM or IV injectors, however, it produced a signi®cant difference between inhalers of heroin and controls genotype-wise, P 0.006, allele- wise, P 0.016) but not for injectors of heroin genotype-wise, P 0.81, allele-wise, P 0.69). We also found that LD between all polymorphisms we examined in the gene was weak, possibly explaining why we see association of this polymorphism with her- oin abuse but not with other markers in the gene. Overall our results indicates that the HTR2A, 5-HTT, DRD3 and GABA A g2 genes are not likely to be a major genetic risk factor for heroin abuse in this population, with the exception of possible association be- tween nasal inhalation and DRD2 promoter 141DC polymorphism. ß 2002 Wiley-Liss, Inc. KEY WORDS: addiction; susceptibility; opiates; opioids; neuro- transmitter; drug abuse INTRODUCTION Drug abuse and dependency has its origins in both genetic and environmental risk factors [Tsuang et al., 1998] although the precise magnitude of genetic in- ¯uence is unclear. There is evidence for both shared and speci®c vulnerabilities to cannabis, sedatives, stimulants and heroin, with the strongest unique genetic in¯uence thought to be for heroin abuse. These vulnerabilities may result from heritable personality and neurochemical system traits that may in¯uence initiation and maintenance of drug use in relation to reward and addiction [Robbins and Everitt, 1999], as well as drug-speci®c pharmacogenetic factors related to metabolism, clearance and site of action of particular drugs [Price-Evans, 1993] such as the role of CYP2D6 de®ciency in protecting against oral codeine addiction [Tyndale et al., 1997]. Grant sponsor: China National Nature and Sciences Founda- tion; Grant sponsor: Doctoral Foundation from the Committee of Education of China; Grant sponsor: New York-China Medical Board and the Psychiatry Research Trust, UK. *Correspondence to: David A. Collier, Reader in Molecular Genetics, Head of Section, The Institute of Psychiatry, De Crespigny Park, Denmark Hill, London SE5 8AF, UK. E-mail: [email protected] Received 10 October 2000; Accepted 15 October 2001 DOI 10.1002/ajmg.10200 ß 2002 Wiley-Liss, Inc.

Transcript of Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin...

Page 1: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

�������� ����� ������� �������� ���������������� ��������� ���������� ��!!��

������� ��������� �������� ��� "������ "�#"�# $%&��# ��� ��'���� (������� ���)������ &��������� ����� *��� %���� �+����� ,������ )�+-����

&� .�#�#� /���� .��#� ��0��� 1��#� /�� %�#� "�2�� �3 '���#� 4�$*�� .�#� 5�6 ,3 )���#�#� ���"�2�� �3 ,������#�7��������� �� ���� ����� ��������� ��� ��������� �� �������� ������� ������ ������������������ �� �������� ���� ���� !������ � "���� �� ��������� "������ ���������� "���������� �#� $���% �� �� ����&"���� '������ ��� ���� ������� ������� ������ ��� ��������� �� �������� ������� ������ �������

8�2� ��������� 0����# ��� �������� "("�#"("�# %&(�� �����'����# ��� ��� ����$��� ���������� � $%&&� 9��� �����:�� ���������� 9��� ����� �+���3 *� �;����������� ����������� ������������,#)�����,��# ��� &�<=� �� ��� "("� 0���#�� ���������� �)������� �� ��� "("�0���# �9 ����������� �����������>�?� ��� &�!�,� �� ��� %&(�� 0���#�9 ����������� �@�&( ���"��?=��� �� $%&& 0���# ��� �� ���������� ����� ���� ��'���� 0��� �� ��� ,������ ������������ ��� ��� ������3 ��� ��� ���$�������� �� ���� ��0��A������ � ������#0������# � �������� ��<�������# �;���� � ��� "("� ������ ���������������, �0������$9��� ��� ������$9���#��!3! # �����������3 �� ��������� �����+-���� 9��� ����� �+��� ��� �!� ������9��� ��2����0���� � ��������, ���$�������3 =� ��� ����� ������# ����� 9���� ��0��A���� �� ������ 0������ ������� ��<������� +��9��� ��+-���� 9�������� �+��� ��� ����� ������3 *���9� ��2���� ��� ������ +� ���� �������$������ ��� ����� �������� ��� =� � =@��-�����# �9�2��# �� ������� � ��0��A����

�� ������ +��9��� �������� ����� ��������� �0������$9���# ��!3!!B# ������$9���# ��!3!�B� +�� �� � ��-����� ����� �0������$9���# ��!3>�# ������$9���#��!3B��3 *� ��� ��� ���� ." +��9��� �������������� 9� �;������ �� ��� 0���9�� 9��6# ����+�� �;�������0 9�� 9� ������������ ���� ���������� 9��� ���$�� �+��� +�� �� 9��� ���� ���6��� �� ���0���3 C2����� �� ������� ��������� ���� ���%&(��# $%&&# "("� ��� ��'���� 0������� �� ��6��� � +� � ��-� 0������ ���6 ���� � ����� �+��� �� ���� ��������#9��� ��� �;������ ����+�� ��������� +�$�9��� ����� ��������� ��� "("� �����������, ����������3 � �!!� *����$.���# =��3

D4E *C(")� ��������F ��������+�����F������F �����F ����$�����������F ���0 �+���

=�&(C"G,&=C�

���� ����� � ����� ��� ��� ������ � ���������� � ���������� ���� ������� ������ �� ��������� �������� ��� ������� ������� �� ������ �� ���� �� ������� ����� �� ������ ��� ���� ������ �����!� �������������� �� ������� ������������������ � ������ "��� ��� �������� ��#�������� � ���� ������� �� �� ��� ����� ������ ������������������� �� ������ ���� ��������� ��������� � ������������ � ���� ������ ���� �� � ������������ � �������� �� ��� ��� � ������� ����"�� � ������ �$����� � %������� ������ ��"��� �� ���������!� �������������� ������� ������ ������������� �������� � ���� �� ����� �� �������������� �&�����%���� ���'� ���� �� ��� ���� �� ()&*�+�!���� � ��������� ������ ���� ����� �������� ��� �� ���� ���,��

-��� ������. (��� /������ /����� � 0������ 1�������2 -��� ������. �������� 1������ ���� ��� (�������� ��%������ �� (���2 -��� ������. /�" )����(��� 3�����4��� � ��� &� ������ $������� ������ 56�

7(���������� ��. ���� 8� (������� $���� � 3��������-������� 9�� �� 0������ ��� :������� �� &� ������ � ��(������ &���� ������ 9���� ;�� 0%< �81� 56� %�����.������=�������������

$������ �> ?������ *>>>2 8������ �< ?������ *>>�

�?: �>��>>*@�A����>*>>

� �!!� *����$.���# =��3

Page 2: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

��� ���������� � ���� �� � ����� ������ ��������� � ���� � ��� ����� ������� �� �� ������� ���� ������ � ��"�� � ��������� ��������� ���� ���� �$����� � %������� ����2 0������ �C����� ����� ����������� � ��� ���������������������� � ��� �������� � ��� ����� �������� "������ ���������� �� ��� �������� ��������� ������� ������ �� ����� �4���� ������ ������� �� ������� �������� �� � ������ �� ����� ������ �������������� ������ � �������� � ���� �� ��� ��������� �� ������ �� ������ ��� �������� �� ������������ �� ������ � ������ ���� ������� 1�� �F������� ���� ������ � ����� ��� ������� �� ��������� ���������� ������ ���������� � � ����� ������ �������� �������� ���� �� ���� ���,��3������� ������ ��������� ������ �$��� �$�*

� �$�'� ���� ��� ��������� � ���� ��������������� : ������ ����� ��������������� � ���������� � ������ ������ �������� ��������� ��� ���D-848E� ��������� � ����� ������ � ������ ������ �F������ "���� ��� ������������������ ������� ���� � ��� �������� �� ��� ������ ��������� �� ����� /�������������� ������������ �������������������� ����������� ���� ������ �������� ��� � ������ ���� ������� "���� ��� ������������� ���� �� ������ ���� ��� "������ ����� ���"���� ���� ������������ ������ ���������"��� ��� ��"��� ������� ������� � ����������������������� �������� ����� �� �������� ��� ������������"�� � ������������ 8���� ����� ���� ��������� �� ������ �������� �� ������� "���� ��������� � �������� ����� ����� � ����� ������������������� 0��� ������ �� ��� �$�* ��� ���� �������� �������� ������ �� ���������� "��� ��������� ������ �/����� *>>>2 C�� �� ���� *>>>����� �$�' �������� ��� ��� ��� ������� �� �� ���������� "��� �������� ����� � ����G������� �6������ ���� ����� � ������ � ����� ����� �����F �� ��������2 (����� �� ���� ����� ��� ������ ���� ��� ������� �� ���������� "��� ����� �� ������ ����9������ �� ���� ���+2 6����� �� ���� ������ : ������ ������ ��� � ��!��� ����������� ���"�� �������������� ���� � ������� �C�� �� ���� *>>>���������� ���� �������� ���� �� ��� �$�*� �H��(��� �������� "����� ������� ����������� �� ��� ���� � �������� ������ � ��� �F������� �8������� ���� ���,�� 0������ ��� ���� ��� � �������G� �� �������� � ����������� �� �������� � �� �"������� �F����� � I/�$ � ��� �������� ����� ����� ������� ���������� ��� � ����� ������ D<�9��;&$E ���� ������ �� ����� ������� �� ����������� �6����� �� ���� ����2 �� �� ���� ������8 ���� ��� ��� -848 � ���� � ������ ������ ���

���� ��� ��������� ?������ ���� ��� � �������G� �������� -848����� ������ "���� � ��� �� ������������������������� ���������� ����� �B���� �/����� ���*�� ����� ������� �������� ��� !��� ������ ���������� ����� � �������� ������ � ��������� ��������� � ������ ��� !��� �� �������� ��������� � ������� �� -848 � ��� ����������� �- ���� � C��� ���'2 0������ �� �������>2 B���� � /����� ���*2 $�� �� ���� ���*2

J� �� ���� ������ ?���� � ��������� ��� ���� ������� -848����� ��������� � ��� ������ ������������ ������ � 6������� ������ � ����������� ��������� ��������� �� ��� -8484 ������ ������������� ����� ����������� �J� � 0���� ����������� 3�������� �� ��� �" ��� ��������� ����������� ���������� -848 ���������� ������ ������ ���������������� � ��� ��� �-�������� �� ��������2 J� � 0���� *>>>��: ��� ������ ��� � "� �F���� !�� ������

����� ��� ��������� �$�*� �$�'� 9�$*8� �-8488�*� � ��� ������� ���������� D<�9��E ������������� ��� ��� "��� ����� ������ � � �"� �������� ���� : ��� !��� ����� "� ���� �� �*� (���������� ����� � ��H �������� � �������� ����������� � �������� !��� � � ���� ����� �������� 'HH ������� ����� � �>H ������� ��������

��&4(=�.) ��" �4&%C")

)�+-����

8�� ���A���� "��� ����� ����� "��� �������� ������������ � �"� �� �������� �������� � (�����0����"��� (���� � "��� ������ �� ����� ����������� ���� �03�:I �������� ���� � ��������������������� �������"� ���� ������ #������� � ��� ��!��� ��� �� ������ ���� � ����� �� ��� �� ������� ������ ���� �� ������ ������ � ���� ���#��� �#����� �� ���� ����� �� ���� ��������� "�����"��������� � ������ � ����������� ����������� ����� �� ����� ������� �� ���� ��� � ���� ���� ������� ������������ &������ ���!���� ����� ��� �� ���� �03�:I �������� ���� � �*����� ����� "��� ������!� �������� 8�� ������� "������ ����������� �� �� ��������� ������� "��� �������� ���� (������ ������������ ������ � ����� �������� � � ��������������� (������ � �� ����� �� �������� ��������" ��� "��� ���� �� ��� �� ���� ��� ��� � ������ ���� ��� ������� ���� � ����� �� ������������������ �� �� ��� ��������� ���� �� ������ ���������� ��� ���� � ������� :����� ����� "�������� ���� ��� ���A�����(���� � ������� "��� ��� 9� (����� ����

0����� &������� (����� ����� ��������� "��� ������� � ��� ������ �� ����� ��� ��������� ����������� ������!������ 8�� ���A���� "��� /������9�� ����� ���� /���� �� ��� )��G� ������ ��� /������9� ��� � ���� ���������� ��������� ��� ���0������ 9� D����� (������ ����������E ���� ����� ������ ��� ��� � ������ ������� �(�������0���G�� ����2 (�� �� ���� ������ ������� ������� ��������� ���F���� "��� ����� 0���� 8��� ����������� 0������ (������� ���� �� ���A���� "��� �+KH> ���� �� D*<�,*�

<��,E ��� ��� �*� ���A���� "��� ����� ����� � ��� !���������� � �<K+H ���� �� D*,�H�� <��<E ��� ��� ���������� ����� ������ D��H+<E� ��� ������� "��� ������"�� �+K,> ���� �� D*��+>���*,E ��� ��� !��� ��H�������� � �+K�< ���� �� DH'�HH�**�H+E ��� ���������� D*��E� -����� �/8 "�� �F������ ���� ����������� ���� �������� ���� ������� � � ��������������������� ���������

��! .� �� ��3

Page 3: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

��������0

:������ � "� ���� �� �*� ���A���� D�, ������'H �������E "��� 9���� ����� � ��H �������D�*, ������ +, �������E ��� ��� �� ��� ��������������� 8 ������� 'HH ���A���� D*** �������** �������E "��� ����� ����� � �>H ������D,* ������ '* �������E "��� ���������� ��� �$�*�������� ��� �������� �� ��� ��������� ������ �������� ���������� ������ ��� ���������� ���"�� ������� �������� � ����� ����� ������ 4���������������� ��� �������� �������

$%&�� � $���>�?� 5���������

&($ �����!����� ��� ���� ��� �������� �0��������� ���� ����� "�� �������� ���� �����"�� �������.'< � ���� �� &($ �����!����� �� � ������ ������������ �� <��( "��� �������� � � &($ ��F �������� <> � �� �������� �/8� *�< �3 �� 3�(�*� �>�* ����@; �� ���� �� ��� �����"�� �������. <��88-�(�-(88--�8-(88(8-(�'� � <��88((88(��8����((�8((8(�'�� ��� H+� �� ������ "�� ������"���3��: � ��� ������� �������� � � *L ������� ����8����� � D8 ����H'�E "�� �� ������ "��� 3��:� �8����� * D- ����H'�E "�� ������ � �"� �������� ��*HH � **H ���

$%&�� �!�&?, 5���������

&($ �����!����� "�� �������� �� ��������C���� �� ���� ���'�� 4��� � &($ ������� "��� ������� � �H�( H ��� <,�( � ��� ,*�( � ��� ���,*�( � �� � � �< �� ������ ������� <> � �������/8� *>> ����@; �� ���� /�&� ��< ����@; 3�(�*�>�* ����@; �� ���� ������ � >�< 5 ��# �/8 ��� ���������� ��� ',* �� ������ "�� ������ "��� �> 53��: �� ��� �<+ �� � *�+ �� ��������� ��� �������"��� �������� "��� � 'L ������� ����

@�&( 5��������� �� =���� � $%&& ���� � $%&& @�&(�

&($ "�� �������� "��� ������� ��#����� <��-�(�8-�8�(88(8--(�-(-8-�'� � <���-��((�8-��(��8(-((8-�-�'� �;���� �� ���� ���H�� � � !�������� �� *< �� ������� ��< �3 3�(�*� <> �3 6(���> �3 �����9(� �9 ��'� >�>>�L "@� ������� *>> �3/�&�� � �3 �� ���� ������ � >�< 5 ��# �/8��� ������� &($ �����!����� ������� �� ���������� �� �<�( ��� H �� �����"� � '> � ���� �� <��(D'> ���E� ,*�( D� ��E� � �H�( D'> ���E ������ � !���F����� ���� �� ,*�( ��� �> ��� 8����!����� �������� ������� �� ����� ������� �� *<> �� D� �������E�*+, �� D�> �������E � '>> �� D�* �������E� 8������ "���������� � 'L ������� ��� ��������������� �F� �� ��/8 ��G� ����� � ������ "��� ������� �������

"������?=������� 5��������� �� ���5����� $%&& ���� � $%&&.5(�

4��� � &($ "�� �������� "��� ������� ��#�����<��--(-��-((-(�(�-88��-(�'� � <��-8---�8(�-8-(�--8(88((8(�'� �(������ �� ���� ���+�� �

� !�� ������ �� *< �� ������� *�<�33�(�*� <>�36(�� �> �3 �����9(� �9��'� >�>>�L "@� �������*>> �3 /�&�� � �3 �� ���� ������ � >�< 5 ��#�/8 ��� ������ "���� ������� H�H � <*� ����������� &($ �����!����� ������� �� ���������� �� �<�( DH ��E �����"� � '> � ���� �� +��(D'> ���E� ,*�( � ��� � �H�( D'> ���E ������ � !���F����� ���� �� ,*�( D�> ��E� 8������ "��� �������� 'L ������� ��� ��������������� �F� �� � �/8 ��G������ � ������ "��� ������� �������

"("������, 5����� 5���������

-��� ��� �� ��� ��� �������� � ��� ������������� �� �$�* "�� ������ ��� � &($ ���� ����������������� <��8(� --( -8- (8- 8(- -�-8-- 8(( (�'� � <���-( -(- (-� -8- -(� -((--� �(- -�'� �� ������� �8����� �� ���� ���,�� &($������� "��� ������ ���� ��� �G �� 4��/:� "������� �H�( ������ ��� ��� �H' �� � �+� �� � �����H��( ������ �����

"("� )�����,�� 5���������

-��� ��� "�� �������� �� ������� �:����"��� ���� ���'� ���� �������������� <��8((8-(�-8(��(�((((-8((--� � <��--88--8(8�--(8-�--88�---8(� ��� ������� "��� ������ "��� ����G �� (���' : "��� ��� 0��'�� ������ ��� ��� ** �� �*>> �� �������� � ��� � �'�� ������ �����

"("� &�<= � 5���������

-��� ��� "�� �������� �� ������� �-�� �� ���� ���'� "��� ������� <��((-�(-8(--(�--(�(88-��-(�(�8 � <��((-�(-8(((��((�-8-��-�(8�(8� ��� '�> �� ������ "�� ������ ������#: "��� ��� 8� ������ ���� � ��� 8* ������ ��� ����'> �� � ��> �� ���������

"("� )��$�$��� 5���������

&($ "�� �������� �� ������� �;����� �� �������*� "��� ������� <��-(�(�8�(�((88(�(�(8(8� <��88-�(�8(�(8(((�((8--��8� ��� H+* ��������� "��� ������ "������: �������� � ��������� ������ '>H �� D0���E �� *>+ �� � �� �� D-� �E�(����� ��� �� H, �� � �� �� "��� ���� �������

��'���� ��� �?� 5���������

8 ���!� ���"�� ������� <��8-8 88� ��8 ((88(� --� (�8 -(( --�'�� � "���� � *H �� ���������8 �� ( �� ������ � ����!����(��: ���������� ���� ������ ���� ����������� �� � '�H< D- �� 8E �(��� �� �������,2 ;�� �� ���� ������ ��� ������� ������ "�� <�888�(8 88� 8�� -�- �(8 �-( ��8 -��'�� &($������� "��� ������ � �<�( DH ��E� �����"� � H> � ���� �� �<�( D'> ���E� <>�( D'> ���E� � ,*�(DH> ���E� ��� ,*�( D�> ��E� ��� *�, �� ������ "�������� ������ "��� /��: �� ��� �"� �������� ��*+' �� � *H �� D'�H<-E �� "��� ��� ���� *�, ��������� D������ '�H<8E� "���� "��� �������� � � 'L������� ����

������� ��������� �������� ���

Page 4: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

)���������� ��������

9�� �C������ �#��������� D9C%E "�� ����� ������ ��� ��������� � ���� � ������� ���� � (����#���� ����� (����#���� ���� "��� ���� �������� ��������� ������� ������ � ���� �� ���#������ �� ������� �������� ���"�� ����� � ������� "��� �������������� ����"��� %���� ������ +� �F���� ��� ���������� �� <�9��;&$ ���� �� ���#������ "���� "���������� ���� (;53& ������� �0��� � (���������<�� "���� �� �������� ��� *7/ ������� ����� "������� ����� ����� ������ ������� :��������� ������� ���#��������� ����� � ������ ��� ������������� ��� ���� � ����� ������ �� ���#������ "����������� ���� � ������ ������� ������� �����#���� ������ ��� ��� ������� %9� ������� ��������� � ����������� ���� ����������� � ��� �������������!���� � � ������� �� ��������� �M��� �� ����*>>>��

(4)G.&)

%*4 &���

9C% ����� "��� �������� � ���� � ������ ������� ����� ��� ��������� ����������� � 8�� ��� ���������� "��� � 9C% � ���� ���� � ������ �������F���� ��� ��� �$�* �������� ������� �H��( D�*���*H� � >�>>*2 :������ D�*� �>��� � >�>>�2 �A�������*�>��*� /�E ��$�' 0��'��( � D�*�H�',� � >�>HE� ������

$%&��

/� ����!��� �������� � ���� ��� � ���������#������ �� �H'�-@8 � �>*�@( ��� ������������"�� ������� � ������ ���A���� "��� �������D����� :E� 9����� �� ��� ��� ����� � ������ >��'���� ��������� ��� ��� � >��>� ��� � ����������� ����� 8� �F������ ���� �H'�-@8 ��� �������� "����� �� �� �������� ������ ���#��������� "��� �������� ����� �� ��� �������� ��>*( D%9� �*�'>,�>������� �>� �� �>��<E�

$%&&

/� ����!��� �������� � ���� ��� � ���������#������ �� ����� �"� ��� �������� �� <�9�� ���

"��� ������� ���"�� ������� � ������ ���A����D����� ::E� 9����� �� ��� ��� ���� � ������ >��>> ������������ ��� ��� � >���+ ��� ����������� �����C� � �� ������� ����!��� ������ ���#������������"�� ��� �"� ��� ��������� � ��� <�9�� ���D%9� �*� >�*�� ����� �>�+<� �� � >�>'E� C� ������� � ���� ����� ������ D��LE �� �����F������ �>>�� ����� ��� ��� ����� <�9��;&$ ������ ������������� �� ��� *> ������ ������ ��� � /��������� ��� �*>>>� � � B������ ���������� ���� ������ ������ <*�� � ��� �������

"("� ����

C�� "� ��� �*� ���A���� "��� 9���� ����� ���> ������� ��� ����� ����� ��� ������� ������� ���$�* ���� �"� ��� ��������� D0��'��( � � ��#:E� �� ����� ����!���� ��� ������ �� ���� ��� ��� ����$�* �������� ��� �������� ���� ���������� ������� �� ���������� "��� ����� ����� D���� ���"���� �������"���� � >�><E� 8 ������� 'HH ���A����"��� ����� ����� � ��� ������ "��� ��� ������������ ��� �������� "� ��� � ����!��� �������� ������ �� �� ������ ���#������ ���"�� ���A���� "�������� ����� � ����� ������� D����� :::E� C�� "��������� ������ �� ��� ��� �� ��� ����� �$�*��� ��������� � ��� ������� ������ ��� ������� "������� �� ����!��� D>�>,H ��� ��������� ��� ��� �>�><� ��� ��� ����������� ����E� C�� "� ������� ������ � ����� �� ����������� ��� ����������� � :3 �� :I �A������� ��"����� "� ��� �����!��� �������� ���"�� ������� �� ����� �������� D���� ���"���� � >�>>+� �������"���� �>�>�+E ��� �� ��� �A������ �� ����� D���� ���"����� >���� �������"���� �>�+�E D����� :IE� ;��������#��������� ���� "�� ������ ��� ���"�� �������� ��������� � �$�* ���� ����� "�� "��� �� ������� ��� ������ ���#��������� ���"�� ���������� ��� ���������� ;�"��� �� ������ "��� >�>�D�>�>�E ���"�� ��������� �H��( � 0��'��( ��>��> D�>�>,E ���"�� ����������H��( � ��#:�� >��H D�>�>>�E ���"�� 0��'��( � � ��#:�

"("� )������

����� "��� � ����!��� �������� �� ���� �� �������� ���#������ �� ��� 0�����-� ��� �������� � ���

�84;% :� ����������� �� -��� ��� � 8����� �� 8��H',- � ��>*( &�� �������� �� <�9�*8 �0��A���� C��� 9���� 8���� � (������

;���� -��� ���@�������0��A���� "�������� ����� (������ �*

��H',8@- -��H',@-��H', �, D>��<E '� D>��+E >��* >��H-��H',@8��H', <' D>�H,E �� D>�H�E8��H',@8��H', H* D>�'�E +� D>�'+E-��H', �, D>�'�E �<' D>�H>E >��* >�,'8��H', �', D>�+�E **, D>�+>E

�>*�@( �>*�@�>*� '' D>�'HE +' D>�''E >�<> >�,��>*�@�>*( H+ D>�H�E �, D>�<*E�>*(@�>*( �, D>���E *� D>��<E�>*� ��* D>�<�E **' D>�<�E >�>< >��*�>*( �> D>�H*E �<' D>�H�E

��� .� �� ��3

Page 5: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

�$�' ��� ���"�� ���A���� "��� ����� ����� ������ ������� D����� IE�

��'���� ��� �?� 5���������

����� "��� � ����!��� �������� �� ���� �� �������� ���#������ ��-'�H<8��� ����������-8488�*��� ���"�� ���A���� "��� ����� ����� � ������������ D����� I:E�

"=),G))=C�

: ��� ������ ��� "� �F���� !�� ���������� ��� ���������� "��� ����� ������ ��� ����������$�*� �$�'� 9�$*8 � -8488�*� � ��� ����������������� D<�9��E� /�� �� ��� ��� ��������� ������� ����!���� ��� ������� ���� ��� �� ������ �����#������� "��� ��� �F������ �� ��� �$�* ����������� ���������� �H��( D���� ���"��� � �������"���� � >�><E� �����H��( �� �� ���������� �������������� ����� �� ������ ���� �� ��� � �������� ������� �$�* ��� �F������� �8����� �� ���� ���,��

4������ �� ��� ����� �� ������� ������ ��"��������� !�� ��� �� ������� ��������� ��� ��������������� 8���� ���� ��� � ������� 'HH ���A����"��� ����� ����� � �>H ������� ����� "��� �����!��� �������� � ���� �� �� ������ ���#��������� ��� �$�* �������� ��� �������� ���"�� ���A����"��� ����� ����� � ����� �������� C�� "����� ��� ������ � ����� �� ����������� ������� ������� � :3 �� :I �A������� ��"����� "���� � ����!��� �������� ���"�� ������ �� ������ ������� D���� ���"���� � >�>>+� �������"����� >�>�+E ��� �� ���"�� ������� � �A������ �������� ?�� ��� ��� �� ������ ���#��������� ������������� � ��� �$�* ��� ������� ���� ;� ���"�� ������ ��������� "� �F���� � ��� ��� �� "���� ������ �F���� "� "� ��� ���������� �� ���� ��� ��������� "��� ������ �� ����� � �� ����� ������� ���� �������� ������ �� ��������� ������� ��� ����������

� ���� �� ������ � ��"�� � ��������� ���������� � ��� ���� �$����� � %������� ����2 0������

�84;% ::� ����������� �� -��� ��� � 8����� �� <�9��I/�$ � <�9��;&$ &�� �������� ��<�9�� -�� � 0��A���� C��� 9���� 8���� � (������7

;���� -��� ���@�������0��A���� "�������� ����� (������ �*

I/�$ ** � D>�>�E ' D>�>*E >�'+ >��H*' �� D>��,E '' D>���E'' �< D>��*E �<* D>���E* *� D>�>�E '� D>��>E >�*< >�+*' *>� D>���E '', D>��>E

�%;@:/0 H�H@H�H +> D>�<+E ��' D>�<�E *��> >�,*H�H@<*� '� D>�'<E +> D>�'�EH�H@<*�� * D>�>*E * D>�>�E<*�@<*� � D>�>,E �, D>�>�E<*�@<*�� > * D>�>�EH�H �+> D>�,HE *�� D>�,HE >�>* >���<*� <H D>�*<E �+ D>�*<E<*�� * D>�>�E H D>�>�E

7<*�� ������ �� � ����� �����F������ *> ������ ������ ���� ��� � B������ ���������� �/������� �� ����*>>>��

�84;% :::� ����������� �� -��� ��� � 8����� �� &���������H��(� 0��'��( � � ��#:&�� ��������� �� �$�* -�� �� 0��A���� C��� 9���� 8���� � (������7

;���� -��� ���@�������0��A���� "�������� ����� (������ �*

&�������� �H��( ��H�(@��H�( ',> D>�,�+E *H< D>��**E +��< >�><��H��(@��H�( �* D>��,+E <* D>��,<E��H��(@��H��( �' D>�>*�E � D>�>>'E��H�( �** D>���HE <H* D>��>�E *�H� >�����H��( �>� D>���+E <H D>�>��E

0��'��( � 0��'��@0��'�� ��� D>��''E �,> D>����E '��� >�*>0��'��@( �'�� , D>�><�E �� D>��>�E( �'��@( �'�� � D>�>>�E > D>E0��'�� **� D>��+*E '<� D>��<>E >�<* >�H,( � '�� � D>�>'�E �� D>�><>E

��#: 8�@8� �* D>�>��E �* D>�>+*E ��<+ >�H+8�@8* H� D>�'�,E ,+ D>�'�HE8*@8* +� D>�<>HE �>< D>�<HHE8� ,* D>�*��E �>> D>�*<�E ���� >�*�8* �,> D>�,>*E *�+ D>�,H�E

7 ������ ��� �"������� � ��������� ��� �������� �������

������� ��������� �������� ���

Page 6: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

� C����� ����� ����������� ��� �������� ���������������� �� ���� �� ����� �4���� ������ C� ��" � ����������������� ��������� "��� ������� �� ����� ��� ���A������ � ��� �$�H �F� ' I/�$ ��� �������� �;��� ���� ���,�� ��� �� "��� ����� ��� ��������� ���� ���� ����� � ������ �������� ��� ���������� :� ����!���� �� �F���� ���� !��� ������� �� ��������� ����� "��� �� � �� �A��� ��� ���� ?� ���������� ������ � ����� ����� �� ��������� ������!����� � �������� ������ ������������� �� ��� ������ ��� ����� �A����� ������ �� ��� ������� ����� �� � ������������ ��� ������!����� �� ����� �� ��� ������� "������ �������� � ��� ���� "� � ��� ������ �� ������� ����� ���� ������ ��� ������� � �A���������"����� "�� ��� ������ ���� ��� ��� ��� �� ���F �� ������� �� �������(����� ��� ��� ��� �� ����������� ������� ���

����� ���������� �� ����� ���� ���������� �� �F������� ��" �$���� �� ���� *>>>�� ����� � ��� ����� ������� ��������� �� � ���������� ��� �� �� ���� ������ �� �����������"�� ��� �������� ������� ���������� ���������� ������ ���������� ���������� ��������������� ��������� � ����� ������ �� ������"��� ��� �������� �F������ �� ��� �� ����� ���������� ����� ���������� �� ���������� �� �������� ����

������� �� >�>< ��� ���� ����� �� �� ����� ������������ ��������� "�� ���� ����� � ������� "������� ��������� ������!����� �� � ������ �����?������ ��� ������� ������� ���� ��� 9�$*8� <�9���

�$�' � -8488�* ���� ��� �� ����� �� �� � ��A�������� ���� ������ ��� ����� ����� � ���� ����������"��� ��� �F������ �� �������� ���������� ���"�� ������������ � �$�* ����������H��( ��� ���������� ������� ���� �������� �������� � ����� ���� ��� ��������� �* ��� � ������ ��� �� ��� ������ ���������� � ��� ��� ��� � ������ ��������"��� ��� � �������� ���� �$�* �� �� � ��A�� ������ ������ ������

�,D�C*.4"��4�&)

���� "��� "�� �������� � ���� ���� ��� (���/������ /����� � 0������ 1������� ��� ��������1������ ���� ��� (�������� �� %������ �� (������� /�" )����(��� 3����� 4��� � ��� &� ������ $������� ������ 56�

(484(4�,4)

8����� �� -�� 3� 9�������� 9� ���� 3� ���,� 8 �������� ��� ��������� � ��� �������� ����� �� ��� ������ �* �������� ��� ����������� "��� ����G�������� 9�� 3�� -��� +.<,,K<�*�

4��� 3�� ����� /������������������� ��������� �� ��� ��"��.�� � ������ � ��� ������ ��������� (��� $�� /�������� �*.',K+,�

(�������0���G� ;;� ����� ��� (����� ���� ����� ������� ���A����&��� /��� 8�� 0�� 508 �<.��<>�K��<>'�

(��� 8�� ;�� %C� (��� ()� C�� )(� 9�� )&� ���,� &�� ���������� ���� ��#����� ���� ��� ����������� ������ �����������F� �� �����* ������ ��� ��� -8488 ���������� 4������ 4���� �$�� (���� *'�.+�'K+�<�

(�� B)� 9���C� 6��� 0N�C�� B3� J� BB� (�� (�� )�� MN� ;� 6N�;� &� C� 3� -�� M(� �� ((� �� $1� B�� ;� ����� %�������. ����������������� �� ���������� � (���� &��� /��� 8�� 0�� 508 �<.��,+'K��,+��

(������ ($� 0������ �3� &�G ���� �$� ���'� 8 �� ������������� ���� ������������ � ���������� 8��� -� &� ������ <>.�,<K��>�

(������ �8� 0����� -� ;� �� 9���� 8� (������ 3� �� 4���� �� 8���G 3B�3���� $3� I����� 9&� 4���� �� 3����� ($� $������ -C� 0������%� 6���� -� 0��� &� ;���� 6&� ���+� 8 ���� �������� ��� ��������"���� ��� �������� �� ��� ������� ���������� ���. �������� ���� �������������� �� ��������� �������� 3�� &� ������ �.H<'KH+>�

(����� �%� -�G���G /� C� 0� 0������ -� B���� &� I��� $�3��3���� B&� ����� 9���G ����� �� ��� ������ �$�' ����������� � ������ ������� 3�� &� ������ H.H�HKH�,�

����� $&� 6������ &C� ����� 8�������������� ������G���� �� �������� ��������� ��������� "���� ��� ���������� ������ � ����� 4���$�� H��.'��K'*,�

����F %� -��"�� &� -����� /� 4����� 3(� 0����� 1� 0������� &�0��"���G B(� 8�� B� ;�� 9� &������ 31� ����� 9���G ����� �� ��������� �' �������� ��� �� ��������� "��� ������ ������� 3��&� ������ '.'''K''+�

-��������3$� 8��� ($ B�� -���� %;� 3���� 3B� 4���� B�� ��"� 0;������ -������� � -848 ������� ��������������� ������ ������������� �������� � ������ �������� ������� 0 ����'H.��K���

-�� �6� M��� )� (������ ?� ���'� &($ ������� �� ��� ��#8 $1;& ����� �$�* ������ 9�� 3�� -��� *.*��,�

- ���� 6� C�� $)� ���'� 3����������� ��������� �� 8�> ����������� � ��� ���� 4��� $�� *,,.���K�*,�

9������ 0� 3�������� �� 3��������� 0� 3��� ��� 3� ���+� /� �������� ���������� ���"�� ���������� ��� �������� �� ��� ������ �'�������� ����� � ���������� � ��� B������� 8� B 3� -��� *+2+,.H�*KH�H�

�84;% :I� ����������� �� -��� ��� � 8����� ��&���������H��( &�� �������� �� �$�* -�� �� 0��A���� C���9���� 8���� ����� � $���� �� 8���������� � (������7

-��� ���@������ :����� :A����� (������

��H�(@��H�( *>� D>�,,E �, D>��HE *H< D>��**E��H��(@��H�( H� D>���E �, D>��+E <* D>��,<E��H��(@���H��( �� D>�>HE > � D>�>>'E��H�( H<� D>��+E ��� D>��*E <H* D>��>�E��H��( ,� D>��HE �, D>�>�E <H D>�>��E

7-��� ���"���. ������ � ������� �*� �>�'+� �>�>>+� �A����� �������2 �*�>�H*� �>���� 8������"���. ������ � ������� �*� <�,�2�>�>�+ �A����� � ������� �*� >��<2 �>�,>�

�84;% I� ����������� �� -��� ��� � 8����� �� 0���-� &�� �������� �� �$�' -�� � 0��A���� C��� 9���� 8����

(������ �� (������7

-��� ���@������ 0��A���� "��� ������ ����� (������

0���@0��� +> D>�<>>E <� D>�<�E0���@-� � H, D>�'�*E H< D>�'�E-� �@-� � �' D>��>�E �* D>��>E0��� �+, D>�+�+E �+� D>�,>E-� � ,' D>�'>HE +� D>�'>E

7-��� ���"���. �*�>�>�� � >���� 8������"���. �*� >�>�� �>��*�

�84;% I:� ����������� �� -��� ��� � 8������ �� -'�H<8&�� �������� �� -8488�* -�� � 0��A���� C��� 9���� 8����

(������ �� (������7

-��� ���@������� 0��A���� "��� ����� ����� (������

'�H<-@'�H<- ', D>�'�E <, D>�'�E'�H<-@'�H<8 +< D>�<HE +, D>�H+E'�H<8@'�H<8 �� D>��<E *' D>��<E'�H<- �'� D>�<�E ��� D>�+*E'�H<8 �>' D>�H*E ��' D>�'�E

7-��� ���"���. �*�*��+� � >�'H� 8������"���. �*� >��H� �>�''�

��� .� �� ��3

Page 7: Allelic association analysis of the dopamine D2, D3, 5-HT2A, and GABAAγ2 receptors and serotonin transporter genes with heroin abuse in Chinese subjects

:����"� 3� 8����� �� 1������� /� 9�������� 9� ���� 3� ���'� 8 ����������� ��� �������� �� ���� �������* ��������� �*D0��'���( �E�4������ 4���� � $�� (���� ��+.�'+�K�',<�

B���� 0C� /���� $8� ���*� ?����� �F���� ������ ����� � � ����������G���� �� ����� ���������� B /������� �*.H�'KH���

6����� 3� (��� 9� 6����� :� 3�� 9� 9���"��G $� ?��� /� -������� :�/����� ;� 6��G 3� %����� $� ����� /� ���������� ���"�� ���������� ���������� �������� ����� D<�9��;&$E � ��� �������' �������� D4��: �'�$E ��� ��������� � ����� ������� 3��&� ������ H.'�'K'�H�

6���� 3?� 0����� 1� 4����� 3(� 0������� &� 0��"���G B(� ?��� B&� ;�� 9�&������ 31� ����� ������� �' �������� ��� ������� � ������������� � ����G�������� 3�� &� ������ '.'',K'H��

;����� ;� 0������� &� 3����� 3&� &��� (� -���� 4� B���� %� 0����� -�0��"��G B(� ���*� 8��� ��� ����������� � ��� ������ �' ����������� �� � ������ ��� �������� ��� ����������� �� �������� ��������&� ������ -��� *.*H�K*<+�

;���� 6&� 4����� 5� -���� B� 0������ 6�C���G� 4;�3���� �;� $������&B� ���H� ?����G���� �� ��� ���� ������� ���������� ����/����� ����� -� �<.�<,K�+*�

;� �� J� 6� ��� 9� (�� -� ;�� B� ;�� J� C�� $� J��� J� M��� B� 3���� $3� 0��� &(� (������ �8� ���,� 8��������� ��� ��� �� ��� �������H ��� �F� ::: I/�$ � ����� ����� � (����� ���A����� 3��&� ������ *.H�'KH�+�

;�� %C� 0���� :� 3���� $� 3�;������ 3� 3�/��� 0� 4��� �� �����8������������"��������������-8488�*�-8488�+�-8488�*��� ������� � ������� ������ � � 0������� ���������� 3��&� ������ H.<'�K<HH�

/������� 3� 5�� 0� 0�� 8� ����� 9� *>>>� ��� ���� ����������������� ��� ���� ��� �������� D<�9��;&$E ���"� �� ����������� �������� 3�� &� ������ <.'*K'��

/���� %&� *>>>� 8����� � ��� ��"�� ������� ������� ��� ����������� ��� �* ������ �������� ���. � �����"� %�� &� ������ �<.,�K���

&�����%��� �8� ���'� -����� ������� � ��� ������ � (�������� 56.(������� 5������� &�����

$��C3�3������ 38� 4���G 8B� ���*� 0 ������ ������� ������ -848������� � ��� ������� ��� �� ��� ����� ������ �� ��� �����������#������� ��� �� ��� ���� 4��� $�� <�H.**�K*'*�

$���� /B� *>>>� 0������� ��� ������ ��������� � ��� �"���������/����� H><.�H,K�<+�

$����� �C� %������ 4B� ����� ���� ������. �� ������ � ��� /�����'��.<+,K<,>�

0��� &(� (����� �� ���<� 3��� (���� ����� ��� ���������� ���"�� ������� � ������� �� ����� ��� ������� ����� 8 9��-��� <�.�,K�><�

0������ $� C���� 1� ����� ��� ������ � �������� �� ��"��. ���� ������� ������� ���� /������� **.<*�K<*,�

0������ $� 9��G 8� 0��������� �0� ���>� ��� ������� �� ����� ������� ������� ������� � ��� ������ ��������. � � ���� �������� ������ � B /�������� <<.�,'HK�,H>�

0������� -� 9���� 8� 9����� &� C������� B� �O0��G� 53� (��� 8�3���� 6(� B��� ;� 4����� &$� 3�-��! &� ;���� 6&� ����� 8����� ���� ���������� ��� �� ��>*( ��� �������� � <9�*8 �����G������� ���� ����!����� �� �" ��� ��������� � ��� ���������� 3�� &� ������ '.H*KH��

�� %(� )�� 46� 9� 46� �� 89� �� (9� ����� %����� ��� � ����������� ���"�� ����� ������ � � I/�$ ��� �������� �� ���������� ���������� ������ 3�� &� ������ H.*�<K*�,�

��� -� &������ 1%� �� (����� -� ���,� (������ � ����� ���������� �� ���������� ������ ���������� � � ����� ��� ������������� ��������� 0����� *,2*,+.*>H�K*><>�

����� 3�� ; �� 3B� 3� �� B3� �� �� �� %��� 08� -������ B� ���� C�;� /� ����� $� %���� ;� ����� (����������� �� ����� �� ����������� � ��. ��� ���� �� ���������!� � ����� ��������������� 8���-� &� ������ <<.�+,K�,*�

� ��� $%� ����� 6&� 0������ %3� ���,� -�������� �!���� ()&*�+���������� ������� ��������� ������ ���� ������ �������&�������������� ,.',<K',��

C���� B� B�� &������ 3;� $������G ;(� 1�� B6� ���'� 8 3��:��� �������� � ��� ���� ������� �������� ��� D9�$*E. �������� �--% � $1;& ��� ���� 9�� 3�� -��� *.''��

C�� 89� 4����� (%� I� ��� 99� *>>>� &�� ��������� � ���������������. "��� � ��� ���� ��P %�� B &�������� H�>.��'K*>'�

J� MJ� 0��� %8� ����� /������ �������� ������ ��������������� � ���������� -8488 ����������� � ���� ��������������� ��� � 4���$�� +2,��.�<+K�+<�

J� MJ� 0��� %8� ����� 4������ ������� ����� ������������������������ � ���������� ������ �������� B &�������� %F� ����*�>.�'+�K�',H�

J� MJ� 0��� %8� *>>>� :������ ���������� -848 ���������� ����������� ���������������� � ��� $��� B &�������� %F� ���� *�H.+�'K+���

J� MJ� 1����� 08� 0��� %8� ����� ������� ������� � ��� �������������� ���� ����� ���������������� �� ������� � ���������� ���������. � � ���� ������ ���� ���������� ��� � B &��������%F� ���� *�H.�<�K�+��

M��� B9� (����� �� 0��� &(� *>>>� 3��� ���� ��� ��� � ��������������� ��� ������� ������������ 9�� 9��� <>.�''K�'��

������� ��������� �������� ��