6. Tutor Imunologi - Pemeriksaan Hg Dengan Metode Elfa(1)
-
Upload
yondri-mandaku-tasidjawa -
Category
Documents
-
view
313 -
download
48
description
Transcript of 6. Tutor Imunologi - Pemeriksaan Hg Dengan Metode Elfa(1)
-
Tutor Imunologi
PEMERIKSAAN hCG
DENGAN METODE ELFA
Pande Putu Ayu Patria Dewi/
Endang Retnowati K
1
-
PENDAHULUAN
Human chorionic gonadotropin ( hCG)
2
chordata
Setelah lahir
gonadotropin
Berasal dari gonad
-
STRUKTUR hCG
Berat 36.000 dalton
Rantai dan , non kovalen
HormonGliko
protein
Mirip FSH, LH,TSH
3
Sumber: Cole,1997
-
BENTUK hCGhCG
hyperglycosylated hCG
hCG free subunit
hyperglycosylated hCG
free subunit
sulfated hCG
4
Sumber: clinica
chimica acta 2011
Bentuk Hormon hCG.pptx -
FUNGSI hCGmerangsang korpus luteal progesteron
angiogenesis vaskuler uterus
differensiasi cytotrophoblast,
pertumbuhan uterus
merangsang pertumbuhan organ fetus dantali pusat
5
-
6
Diagram Konsentrasi hCG pada masa kehamilan
(Sumber: Taylor and Martin,1997)
-
ARTI KLINIS hCG
Kanker
Eklampsia
Kehamilan Ektopik
Mola Hidatidosa
Gynecomastia
Kehamilan
Abortus
Tidak TerjadiFertilisasi
KehamilandenganRuptur
7
-
METODE ELFA
8
Alat VIDAS dengan metode Enzyme Linked
Fluorescent Assays (ELFA)
-
PRINSIP PEMERIKSAAN
Sampel yang mengandung hCG dimasukkan ke dalamsumuran yang dilapisi antibodi anti-hCG berlabel alkaline phospatase.
Pencucian
Dicampur dengan substrat 4-Methyl-umbelliferyl phosphate
Produk fluoresens : 4-Methyl-umbelliferone
Deteksi dengan 450 nm 9
-
ELFA
(Enzyme-Linked Fluorescent Assay)
(Sumber: Anonim,2009)
-
SPESIMEN Serum
Plasma (EDTA atau Lithium Heparin)
Suhu 2-80C selama 7 hari
Dibekukan pada suhu -2560C
11
-
PROSEDUR KERJA
Kalibrator, Kontrol ,dan Sampel dipipet masing-masing sebanyak 100 L
Kode dimasukkan dan dipilih HCG
Diamkan pada suhu kamar min 30 menit
Reagen dikeluarkan dari refrigerator
12
-
lanjutan
SPRs dan strip yang telah digunakan diambildari alat.
Dilakukan pemeriksaan secara otomatis
SPRs dan strip dimasukkan ke alat
13
-
REAGEN
14
Strip
Reagen
SPR
-
Strip ReagenSumuran Reagen
1 Sumuran sampel
2-3-4 Sumuran kosong
5 Konjugat: alkaline phosphatase-labeled mouse monoclonal
anti-hCG immunoglobins +1 g/l sodium azide (600L )
6-7 Buffer Pencuci: Sodium fosfat (0,01 mol/l,pH 7,4) + 1 g/l sodium
azide (600L )
8 Buffer Pencuci: diethanolamine DEA (1,1 mol/l atau 11,5 %) pH
9,8 +1 g/l sodium azide (600L )
9 Sumuran Kosong
10 Kuvet dengan substrat : 4-Methyl-umbelliferyl phosphate (0.6
mmol/l) + DEA (0,62 mol/l, atau 6.6%, pH 9.2) + 1g/l sodium
azide (300 L). 15
-
HASIL
BackgroundSetelahInkubasi
RFV
( Relative Fluorescence
Value)
16
-
Rentang Nilai Laki-laki: < 3 mIU/ml
Wanita : < 4 mIU/ml
Wanita Menoupase: < 13 mIU/ml
17
-
Lanjutan.
Wanita Hamil
18
Week Mean (mIU/ml)
Limit values
(mIU/ml)
4-5
5-6
6-7
7-8
8-9
9-10
10-11
11-12
12-13
13-14
Second trimester (14-26)
Third trimester (26-39)
7.400
32.800
52.000
74.000
100.000
105.000
96.000
75.300
66.700
65.900
26.150
27.200
1.500-23.000
3.400-135.300
10.500-161.000
18.000-209.000
37.500-219.000
42.800-218.000
33.700-218.700
21.800-193.200
20.300-166.100
15.400-190.000
2.800-176.100
2.800-144.400
-
INTERFERENS Hemolisis (hingga kadar 300 mol/ L),
Lipemia (hingga kadar 2 g/L)
Bilirubinemia(hingga kadar 513
mol/L).
19
-
Keterbatasan Metode
Kehamilan
Kadar Rendah Gejala danPemeriksaan Fisik
Patologis
Penyakit Tropoblastik dan Tumor Germinal
Pemeriksaan > Spesifiik
20
-
Pemantapan Kualitas
Pada kit baru dilakukan kontrol
Kalibrasi
Setiap 14 Hari
21
-
22