第七节 临床常用血清酶、同工酶及其 亚型分析 临床上可根据酶浓度的变化用以辅助诊断。若酶浓度变化由细胞坏死或细胞膜通透性变化引起，表示脏器或组织损伤；若为细胞内酶合成增加所致，提示组织再生、修复、成骨或异位分泌，或提示有恶性肿瘤的可能；若为酶排泄障碍引起者说明有梗阻存在。同工酶的分析与鉴定则能反应疾病的部位、性质和程度。

由于酶广泛分布于全身各器官、组织，在血清中升高的机制又不尽相同，因此单凭某一酶的活性变化，很难做出独立诊断。若同时测定一组性质不同的酶，比较各酶活性的变化，就能根据酶增高或减少的“谱型”做出诊断，此种同时检测一组酶，称为酶谱。

如： (1) 心肌酶谱：传统的心肌酶谱由 CK 、 AST 、LD 和 α-HBD 组成，这一组合在我国临床化学实验室一直应用至今。目前最简单而有效的心肌酶谱可由 CK 、 CK-MB 、 CK-MB 型或 CK-MM 型组成。近年来心肌酶谱在 AMI 的早期诊断中的应用价值受到了心肌肌钙蛋白的挑战。 (2) 肌酶谱：主要用于对骨骼肌疾病的诊断和监护。可供选择的酶有 CK 、 LD 、 AST 及其各自同工酶。若能再加 CK-MM 亚型则更为理想。

(3) 肝酶谱： 主要是用来判断有无肝实质细胞损伤、肝内外胆汁淤积等肝胆疾病。(4) 肿瘤酶谱： 具有器官特异性的有 ACP 及其同工酶、ALP 及其同工酶、 γ-GT 及其同工酶、 AFU 、AMY 及其同工酶、 LPS 等；非器官特异性的有 ALT 、 CK 同工酶、 ALD 同工酶、 LD 同工酶等。

(5) 胰酶谱： 主要用于急性胰腺炎的诊断和鉴别诊断。可供选择的有 AMY 及其同工酶、LPS 、弹力蛋白酶 -1 、磷脂酶 A2 、尿胰蛋白酶原 -2 等。

一、转氨酶及其同工酶( 一 ) 生物化学特性 转氨酶是一组催化氨基在氨基酸与 α- 酮酸间转移的酶类，丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和 (天 )门冬氨酸氨基转移酶 (AST) 是其中最重要的两种。

AST 广泛存在于多种器官中，按含量多少顺序为心、肝、骨骼肌和肾等，肝中 70 ％存在于肝细胞线粒体中。 AST 有两种同工酶 ASTs和 ASTm， ASTs存在于可溶性的细胞质中 ,ASTm存在于线粒体中。细胞轻度损伤时 ASTs升高显著，而严重损伤时，则 ASTm大量出现于血清中。正常血清所含 AST 的同工酶主要为 ASTs，但在病理状态下，如细胞坏死，则血清中以 ASTm为主。 血清 AST 活性升高，多来自心肌或肝脏损伤；肾脏或胰腺细胞损伤时，也可出现很高的 AST 活性。

ALT大量存在于肝脏组织中，其次为肾、心、骨骼肌等。血清 ALT 活性升高，通常表示肝脏损伤。 ALT 有两种不同活性的同工酶 α(ALTs) 、β(ALTm) ，分别存在于细胞质及线粒体，后者的活性为前者的 16倍。肝细胞坏死血清中以 ALTm为主。

　　 (二 ) 测定方法 　转氨酶的测定多用比色法，以赖氏法最常用。目前，国内外实验室多采用连续监测法进行测定。　 ALT速率法测定中酶偶联反应式为：　　　　　　　　　 ALTL-丙氨酸 +α- 酮戊二酸 　 L-谷氨酸 + L-丙酮酸 LD丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+

AST速率法测定中酶偶联反应式为： ASTL-门冬氨酸 +α- 酮戊二酸 草酰乙酸 +L-谷氨酸 MD 草酰乙酸 +NADH+H+ L-苹果酸 +NAD+ 上述偶联反应中， NADH 的氧化速率与标本中酶活性呈正比，可在 340nm检测吸光度下降速率。根据线性反应期吸光度下降速率 (-△A／min) ，计算出 ALT 、 AST 的活性浓度。

(三 ) 临床意义 ALT 是反映肝损伤的一个很灵敏的指标，临床上主要用于肝脏疾病的诊断。 各种急性病毒性肝炎、药物或酒精中毒引起的急性肝损害时，血清 ALT水平可在临床症状 ( 如黄疸 ) 出现之前就急剧升高且 ALT>AST 。

急性肝炎时血清 ALT 高低与临床病情轻重相平行，且往往是肝炎恢复期最后降至正常的酶，是判断急性肝炎是否恢复的一个很好指标。假如能同时测定 AST ，并计算 AST／ ALT之比，则对于急、慢性肝炎的诊断、鉴别诊断以及判断转归也特别有价值。急性肝炎时比值 <1 ，肝硬化时比值≥ 2 ，肝癌时比值≥ 30．　　重症肝炎时由于大量肝细胞坏死，血中 ALT逐渐下降，而胆红素却进行性升高，出现所谓“酶胆分离”现象，常是肝坏死的前兆。

　　 AST 主要存在于心肌，以往多用于 AMI 的诊断。AMI发病 6 ～ 8h即升高， 48 ～ 60h 达到高峰，4～ 5d恢复正常。但由于 AST 在 AMI 时升高迟于 CK ，恢复早于 LD ，故诊断 AMI 价值不大。在急性肝炎时， AST虽亦显著升高，但升高程度不及 ALT ，而在慢性肝炎，特别是肝硬化时， AST 升高程度超过ALT 。胆道疾患时 AST亦可升高。　　临床上血清 ALT 、 AST 表现为轻度增加的有胰腺炎、乙醇性脂肪肝、肝硬化、肉芽肿、肿瘤；中度增加的有传染性淋巴增多症、慢性活动性肝炎、肝外胆道梗塞、心肌梗死；重度增加的有病毒性肝炎、中毒性肝炎等。肝硬化、慢性活动性肝炎和心肌梗死常有 AST>ALT 。

　　二、 γ-谷氨酰转移酶及其同工酶　 ( 一 ) 生物化学特征 γ－谷氨酰转移酶 (γ-GT 或 GGT) 又称 γ-谷氨酰转肽酶，是一种线粒体酶。组织分布以肾脏含量最多，其次为胰、肺、肝等。　　血清中的 γ-GT 则主要来自肝胆，红细胞中几乎无 γ-GT ，因此溶血对其测定影响不大。 γ-GT 催化 γ-谷氨酰基从谷胱甘肽 (GSH) 或其他含 γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。

(二 ) 测定方法 γ-GT 的测定方法有数种，目前国内外多采用连续监测法测定血清 γ-GT 活性。　　 IFCC参考方法采用 L-γ-谷氨酰 -3-羧基—对硝基苯胺作为底物，以甘氨酰甘氨酸(双甘肽 )作为 γ-谷氨酰基的受体。在 pH7.7的条件下， γ-GT 催化底物生成 γ-谷氨酰双甘肽和黄色的 2—硝基 -5- 氨基苯甲酸，在 410nm波长处直接连续监测，吸光度的增高速率与 γ-GT 活性成正比关系。

(三 ) 临床意义 γ-GT 是肝胆疾病检出阳性率最高的酶。胆道疾病如胆石症、胆道炎症、肝外梗阻时， γ-GT 不仅阳性率高，而且升高明显。肝实质疾病如肝炎、脂肪肝、肝硬化时 γ-GT 一般只是中度升高 (ULN的 2～ 5倍 ) ，这点有助于肝胆疾病的鉴别诊断。 若 ALP 升高而 γ-GT正常可完全排除 ALP 的肝来源，若 ALP 和 γ-GT均增加，则应先排除肝外引起 γ-GT 增加的原因，一旦排除，则 γ-GT 增高即为肝病所致。

γ-GT还可用于判断恶性肿瘤有无肝转移，肿瘤患者如有 γ-GT 的升高，常说明有肝转移。 γ-GT 与乙醇的摄取量有关，饮酒时，由于乙醇对肝细胞线粒体的诱导导致 γ-GT 活性升高，故对乙醇性中毒的判定有相当的价值。长期接受巴比妥类药物、含雌激素的避孕药者常有 γ-GT 升高。

用醋纤膜电泳可将 γ-GT 同工酶分为 γ-GTl、 γ-GT2 、 γ-GT3 和 γ-GT4 四种，正常人只见 γ-GT2 和 γ-GT3 。重症肝胆疾病和肝癌时常有 γ-GTl出现，乙醇性肝坏死和胆总管结石时常有 γ-GT2 增加，胆总管结石及胰腺炎时 γ-GT2也增加。 γ-GT4 与胆红素增高密切相关。

三、肌酸激酶及其同工酶和亚型 ( 一 ) 生物化学特性 肌酸激酶 (CK) 催化肌酸和 ATP 或磷酸肌酸和 ADP之间的磷酸转移的可逆性反应，所产生的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。 CK广泛分布于全身，在骨骼肌含量最高，其次是心肌和脑。 CK 是由 M 和 B两类亚基组成的二聚体。在细胞质内存在 3 种同工酶，即 CK-BB(CK1) ， CK-MB(CK2) 和 CK-MM(CK3) 。在细胞线粒体内还存在另一 CK 同工酶，即所谓线粒体 CK(CK-Mt) ，也称 CK4 。各种 CK 同工酶还可进一步根据所带电荷和等电点不同分离数目不等的亚型。

(二 ) 测定方法 CK 的测定方法以酶偶联法最常用，是 CK 的参考方法 .有两种工具酶及指示酶参与反应。原理如下： CK磷酸肌酸 + ADP 肌酸 + ATP HKATP + 葡萄糖 6- 磷酸葡萄糖 + ADP 　 G6PD6- 磷酸葡萄糖 + NADP+ 6- 磷酸葡萄糖酸盐 + NADPH +H+　可在 340nm波长下测定 NADPH 生成速率而计算 CK 活性浓度。

临床常规测定 CK 同工酶多用电泳和免疫抑制法，但两法均会受溶血和巨 CK 的干扰，免疫抑制法还会受到 CK-BB 的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定 CK—MBmass，可不受溶血和巨 CK 的干扰。 CK 同工酶亚型(CK-MM 型和 CK-MB 型 )多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。

　 (三 ) 临床意义 　　 CK 及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶之一，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。　　 AMI 时总 CK 活性升高显著，约在梗死后3～8h即升高， 10 ～ 24h达峰值， 3～ 4d恢复正常。　　 CK极度升高 (>3000U／ L) 主要见于全身疾病，特别是肌肉疾病，此时 CK 测定有助于肌萎缩病因的鉴别，如进行性肌萎缩时可见CK显著升高。

　　此外，病毒、细菌、寄生虫感染引起的肌肉感染性疾病 ( 如心肌炎、皮肌炎等 ) ，都能引起 CK 升高。但神经疾病引起的肌萎缩， CK 活性一般正常。　 　 CK-MM 亚型测定对早期 AMI 的检出更为敏感，一般以 CK-MM3／ CK-MM1>1.0 作为诊断 AMI 的标准，但必须排除急性骨骼肌损伤。 AMI发病 2～ 4h CK-MM3／ CK-MM1 即开始升高， 8 ～ 12h达峰值。 CK-MB2 亚型在 AMI 早期诊断和判断有无再灌注上有很高的灵敏度和特异性。一般 CK-MB2>1.9U／ L 或 CK-MB2／ CK-MBl>1.5 可作为 AMI 的诊断标准之一。

四、乳酸脱氢酶及其同工酶（一）生物化学特征 乳酸脱氢酶 (LD 或 LDH) 催化乳酸氧化成丙酮酸，同时将氢转移给辅酶而成为 NADH ，依条件不同而有可逆性。反应式如下：L-乳酸 + NAD+ 丙酮酸 + NADH + H+ LD 是一种含锌的糖酵解酶，广泛存在于人体各组织中，以肝、心肌、肾、肌肉、红细胞含量较多。

LD 是由两种不同亚基 (M 和 H) 组成的四聚体，形成 5 种结构不同的同工酶，即 LD1(H4) ，LD2(H3M) ， LD3(H2M2) ， LD4(HM3) 和 LD5(M4) 。 这 5 种同工酶大致可分为三类： 一类以 LD1 为主，主要在心肌，可占总 LD活性 50 ％以上，也存在于红细胞内； 另一类以 LD5 为主，以横纹肌为代表，肝脏中也有； 第三类以 LD3 为主，存在于脾、肺。

(二 ) 测定方法 目前根据 LD 催化反应方向的不同，有两大类测 LD方法，一大类为以丙酮酸为底物的逆向反应 ( 称 LD-P法 ) ；另一大类以乳酸为底物的顺向反应 ( 称 LD-L法 ) 。我国多采用目前 IFCC参考方法 LD-L法，用连续监测法进行测定。 LD 同工酶测定以琼脂糖凝胶电泳法更多用。一般成年人血中 LD 同工酶存在如下规律： LD2>LDl>LD3>LD4>LD5 ，部分正常儿童血中可见LDl>LD2 。

(三 ) 临床意义 临床上测定 LD 及其同工酶常用于诊断和鉴别诊断心、肝和骨骼肌的疾病。 AMI 时， LD 由于分子量较大，在常用心肌酶中升高最迟，通常在梗死 8 ～ 18h升高， 48 ～ 144h达峰值，可显著升高 (>5ULN) ，因其半寿期较长，增高持续时间可达 5～ 10d，此时其他酶已恢复正常，在亚急性心肌梗死诊断上有一定价值。但其诊断 AMI 特异性差，运动后、肾病综合征等可呈现轻度升高 (<3ULN) 。肝炎、休克、白血病、溶血性贫血及晚期恶性肿瘤等均可有中度或显著升高。

测定血清及胸腹水中 LD含量常用来鉴别其为漏出液抑或渗出液，若胸水LD／血清 LD>0.6、腹水 LD／血清 LD>0.4 为渗出液，反之为漏出液。

临床上测定 LD 同工酶有助于相应组织病变的诊断。心肌梗死和心肌炎时以 LD1 和 LD2 升高为主，且绝大多数的 AMI患者血中LD 同工酶都出现 LDl ／ LD2>1 ，即所谓“反转比率”现象，且持续的时间长。

骨骼肌和肝细胞损伤时常出现 LD5>LD4 。 肺、胰、脾、淋巴结坏死和炎症及各种恶性疾病时 LD2 、 LD3 、 LD4 升高； 溶血性疾病时 LD1 和 LD2 升高，但仍为 LD2>LD1 ；恶性肿瘤如转移到肝脏往往伴有 LD4 、 LD5 升高。

五、碱性磷酸酶及其同工酶 ( 一 ) 生物化学特征 碱性磷酸酶 (ALP) 广泛存在于各器官组织中，其含量以肝脏为最多，其次为肾脏、胎盘、小肠、骨骼等。血清中 ALP 主要来自肝脏和骨骼。生长期儿童血清内 ALP大多数来自成骨母细胞和生长中的骨软骨细胞，少量来自肝。尿中 ALP并非来自血液，而是直接来自肾小管细胞。人体各组织 ALP 同工酶可分为 3大类，即胎盘 ALP 、肠 ALP和肝／骨／肾 ALP 同工酶。

(二 ) 测定方法 ALP 的测定方法有多种，目前国内应用较多的方法为连续监测法，以磷酸对硝基酚 (4-NPP) 为底物， 2- 氨基 -2-甲基 -1-丙醇 (AMP)或二乙醇胺 (DEA)激活型缓冲液为磷酸酰基的受体。 4-NPP 在碱性溶液中为五色，在 ALP催化下， 4-NPP 分裂出磷酸基团，生成游离的对硝基苯酚。后者在碱性溶液中转变成醌式结构，呈现较深的黄色。在波长 405nm处连续监测吸光度增高速率，计算 ALP 活性。

(三 ) 临床意义 在骨生长、妊娠、成长、成熟和脂肪餐后分泌等生理情况下， ALP 活性可增高。除外上述生理性增高，临床上测定 ALP 主要用于骨骼、肝胆系统疾病等的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。对于原因不明的高 ALP 血清水平，可测定同工酶以协助明确其器官来源。

急性肝炎包括病毒性肝炎和中毒性肝炎，ALP 增高达 2～ 5ULN，而肝硬化、胆石症和肿瘤引起的胆汁淤积， ALP 增高达 ULN的5～ 20 倍。 90％以上的肝外胆道阻塞患者血清 ALP 升高，升高的程度常和阻塞程度及病程成正比。如果血清中 ALP持续低值，则阻塞性黄疸的可能性很小。若血清胆红素逐渐升高，而 ALP 不断下降表示病情恶化。

肝外阻塞性黄疸、转移性肝癌、肝脓肿和胆石症时胆汁 ALP 检出率很高，并伴有肝 ALP增加，而肝内胆汁淤积、急性肝炎、原发性肝癌等主要表现为肝 ALP 增多，大多数不出现胆汁 ALP 。 各种疾病所致骨损伤等，均引起 ALP 活性升高，尤其是骨 ALP 同工酶增高。

　　六、酸性磷酸酶及其同工酶 　　　 ( 一 ) 生物化学特征 酸性磷酸酶 (ACP) 存在于人体不同组织，如前列腺、红细胞等，主要存在于细胞的溶酶体中，以前列腺含量最多。　　正常男性血清中 ACP约主要来自前列腺，其余部分及女子血清中的 ACP 可能来自血小板、红细胞、白细胞及破骨细胞等。　　 ACP 同工酶分前列腺 ACP(PAP) 和非前列腺 ACP( 如红细胞 ACP 、溶酶体 ACP 、破骨细胞或吞噬细胞 ACP 等 )两大类，在前列腺中含有丰富的 PAP ，比其他组织约多 100 倍。测定标本应及时分离血清(浆 )并尽早测定。

(二 ) 测定方法 　　 ACP 的测定底物、原理和方法与 ALP 相似，只是反应 pH 为酸性。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法，因为 PAP 对此底物亲和力高，测定结果基本能反映 ACP含量高低。此外还可通过用L-酒石酸这类抑制剂鉴别和估量 PAP 活性。由于 ACP 不稳定，酶活性测定困难，目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定 ACP( 特别是 PAP) 。

(三 ) 临床意义 　 ACP 及其同工酶测定主要用于诊断前列腺癌。前列腺癌时血清 ACP 活性显著升高，前列腺癌患者血清 PAP也明显增高，其中肿瘤分化较好者增高尤为显著。　急性尿潴留、变形性骨炎、癌肿骨转移及甲亢时 ACP 可轻度升高。是否为抗酒石酸盐的非 PAP 增高为毛细胞性白血病的重要鉴别要点。

七、淀粉酶及其同工酶 　 ( 一 ) 生物化学特征 淀粉酶 (AMY) ：人和动物只含 α-AMY 。人体中胰腺含 AMY 最多，由胰泡细胞合成后通过胰管分泌人小肠，唾液腺也分泌大量 AMY入口腔开始消化多糖化合物。 AMY 是一种需钙的金属酶，其最适 pH 在 6.5～7.5之间，卤素和其他阴离子有激活作用。 AMY分子量较小，易由肾脏排出，半寿期很短，约 2h，所以病变时血清 AMY 增高持续时间很短。除肝素外，其他抗凝剂如枸橼酸、草酸盐及 EDTA 等都有抑制作用，故不宜用去钙血浆测定 AMY 。

(二 ) 测定方法 国内外目前测定 AMY 应用较多的是以麦芽多糖为底物的方法，如 2-氯 - 对硝基苯麦芽三糖苷 (CNP-G3) 和亚乙基封闭的对硝基苯麦芽庚糖苷 (4NP-C7)法 (亦称 EPS法 ) ，以后者最常用，也是 IFCC 的推荐方法。反应最后生成对硝基苯酚，其生成量在一定范围内与 AMY 活性成比，在 405nm可以进行连续监测即可测出 AMY 的活性。

　　 (三 ) 临床意义 　　长时间以来， AMY水平一直作为评价胰腺外分泌功能的一种辅助诊断指标。人体胰腺和腮腺组织损伤时，血清和尿中的总 AMY可显著增高，肾功能不全患者也有部分 AMY增高。

　　在急性胰腺炎发病后 2～ 3h AMY开始升高，多在 12～ 24h达峰值， 2～ 5d下降至正常。如持续性升高达数周，常提示胰腺炎有反复，或有并发症发生。　　而尿 AMY约于发病后 12～ 24h开始升高，下降也比血清 AMY慢，因此在急性胰腺炎后期测定尿 AMY 更有价值。 　临床上检测 AMY 用于胰腺炎诊断时，应注意 AMY增高幅度与病情不成比例，如原 AMY已升高却发生与症状不相应的降低时，常为凶险的坏死性胰腺炎的预兆。 AMY水平正常也不能完全排除急性胰腺炎。

　　八、脂 肪 酶 　 ( 一 ) 生物化学特征 脂肪酶 (Lipase， LPS 或 LlP) 是胰腺外分泌酶。 LPS 可被巯基化合物、胆汁酸、 Ca2+ 及辅脂肪酶等激活剂激活，而被重金属、丝氨酸所抑制。血清中 LPS 主要来自胰腺，少量来自胃肠粘膜。

　 (二 ) 测定方法 　　迄今测定 LPS 的方法可分为 3类：测定产物 (游离脂肪酸 ) 的增加 ( 如滴定法、比色法、分光光度法、荧光法和 pH电极法等 ) ；测定底物的减少量 ( 如比浊法、扩散法等 ) ；测定 LPS 的实际质量 (双抗体夹心免疫分析法、乳胶凝集法 ) 。目前在国内大多实验室主要以滴定法、比浊法和分光光度法为主。

　　　比浊法以橄榄油悬液为底物，其与水混合常呈乳糜状，血清中的 LPS 分解橄榄油乳剂生成水溶性的甘油和脂肪酸，浊度随之下降，根据浊度降低的程度，可计算出 LPS 活性浓度。此类方法可在 400nm波长下比浊，测出因橄榄油乳剂的变化吸光度的变化。或者以 340nm波长连续监测浊度的变化。以连续监测法为常用。

分光光度法目前有两类比较常用： 　　一类为酶偶联显色比色法，多用 1 ， 2-甘油二酯为底物，在 LPS 和单酸甘油酯脂肪酶的催化下，水解生成甘油和脂肪酸，甘油通过甘油激酶作用生成 3- 磷酸甘油，再通过甘油磷酸氧化酶／过氧化物酶体系和 4-AAP色素原体系产生紫红色。于 550nm波长连续监测吸光度的变化即可计算 LPS 活性浓度。此类方法特异性高，通过双试剂也基本可解决内源性甘油的干扰问题。

另一类采用人工合成底物 1,2-二月桂基 -rac-丙三氧基 -3-戊二酸试灵酯设计的连续监测法。该底物在碱性环境中，在 LPS 和辅脂肪酶作用下，水解生成 1,2-二月桂基甘油和戊二酸 -6’-甲基试卤灵。后者不稳定，可自发分解生成戊二酸和甲基试卤灵。甲基试卤灵在 577nm波长附近有吸收峰，连续监测其吸光度变化可定量测定 LPS 活性浓度。此法具有简便、快速、灵敏、稳定和抗干扰能力强等特点。

(三 ) 临床意义 正常人血清 LPS含量极少，但在急性胰腺炎时，2～ 12h血清 LPS显著升高， 24h至峰值，可达 10ULN，甚至 50 ～ 60ULN，至 48-72h可能恢复正常，但随后又可持续升高 8 ～ 15d。由于血清 LPS在急性胰腺炎时活性升高的时间早，上升的幅度的大，持续的时间长，故其诊断价值优于 AMY 。临床观察发现，凡血清 AMY 升高的病例，其 LPS均升高；而LPS 升高者 AMY 不一定升高，约有 2／ 3AMY正常的胰腺炎病人，其 LPS正常；非胰腺炎的急腹症有血清 AMY 升高而 LPS 不升高。酗酒、乙醇性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌、肝胆疾患等血清 LPS 可有不同程度的升高。

九、胆碱酯酶 ( 一 ) 生物化学特征 胆碱酯酶 (ChE) 是一类催化酰基胆碱水解的酶类。人体主要有两种，即乙酰胆碱酯酶 (AChE) 又称真性胆碱酯酶或胆碱酯酶Ⅰ、丁酰胆碱酯酶 (BuChE) 又称假性胆碱酯酶或称拟乙酰胆碱酯酶 (PChE) 或胆碱酯酶Ⅱ。临床常规检查的胆碱酯酶 (SChE)即指后者，通常简称为 ChE。

AChE主要分布于神经组织、肌肉、红细胞、肺等处，其生理功能是催化水解乙酰胆碱，能使神经细胞反复除极。 ChE／ BuChE主要在肝脏合成，也分布于胰脏、心脏、小肠粘膜、大脑灰质、血浆及淋巴液等处。 ChE的真正生理功能至今尚未阐明。许多抑制剂对两种 ChE有抑制作用，如生物碱 (吗啡、毒扁豆碱 ) 、枸橼酸盐、氟化物、有机磷杀虫剂等

(二 ) 测定方法 主要有两类方法用于临床常规 ChE测定，一类以乙酰胆碱为底物，测定水解反应生成的酸。常用指示剂 ( 如间 -硝基酚或溴百里酚蓝 ) 测 pH法。特别是纸片法简便快速，适用于急诊有机磷中毒的快速筛查。但此类方法准确度较差。另一类以人工合成底物测定胆碱衍生物的生成。

丁酸硫代胆碱 ChE

丁酰硫代胆碱法是目前测定血清 ChE最常用的方法。测定原理如下： 丁酰硫代胆碱 +H2O

*又称 Ellman试剂或简称 DTNB 在 405nm波长连续监测测定吸光度值的变化，即可计算血清 ChE的活性浓度。 本法简便、快速，易于自动化。但只能测定血清 ChE，而不能测定红细胞 AChE。

硝基苯甲酸（黄色）巯基硝基苯甲酸巯代’硫代胆碱 25*25,5 --

(三 ) 临床意义 血浆或血清中 AChE的含量甚微，临床上测定红细胞中的 AChE用于有机磷中毒的诊断。 由于 ChE在肝脏合成后立即释放到血浆中，故是评价肝细胞合成功能的灵敏指标，与清蛋白生成有密切关系，故测定血清 ChE一般用作肝功能试验。肝、胆疾病时 ALT 、 γ-GT均升高，往往难以鉴别，如增加血清 ChE测定，可发现 ChE降低者均为肝脏疾患，而正常者多为胆道疾患。 血清 ChE减少主要见于肝病和有机磷中毒，增加主要见于肾病综合征。

小 结 　 酶是能催化生物体内化学反应的一类特殊蛋白质。体内大多数酶为结合酶，除含酶蛋白外，还含有辅因子 ( 辅酶和辅基 ) 。酶可分为氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂解酶、异构酶类和合成酶类等六大类。酶促反应具有高效、高度特异性和可调节性等特点，影响因素主要有酶浓度、底物浓度、 pH 、温度、电解质及辅酶、激活剂及抑制剂等。其中底物浓度对酶促反应的影响可用米 -曼氏方程表示。

血浆酶可分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类，后者可再分为外分泌酶和细胞酶等。正常情况下血清中酶活性相对恒定。但一些病理情况常导致血清中酶活性的改变。性别、年龄、运动、妊娠、人种及环境因素等可引起人血清中某些酶的生理性变化。

酶活性浓度测定是临床酶学分析最为常用的方法。根据酶促反应中底物的减少量或产物的生成量，可计算出酶活性浓度的高低。按检测方法分类主要方法有量气法、分光光度法、荧光法和放射性核素法、电极法等，以分光光度法最常用。

按反应时间分类，可分为定时法和连续监测法两大类。其中连续监测法是目前临床实验室最常用的方法，可分为直接法和间接法两大类。 直接法是在不终止酶促反应条件下，直接通过测定吸光度、荧光等，从而计算出酶活性浓度。其中以分光光度法应用最为广泛。 间接法以酶偶联法应用最多。测定酶活性浓度时可受到一些如其他酶和物质的干扰、酶的污染、非酶反应、分析容器的污染和沉淀形成等因素的影响，可通过试剂空白管检出并加以校正或改用双试剂加以解决。

　　通常把酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性的酶称为工具酶。在临床生物化学检验中，许多代谢物浓度的测定往往使用有工具酶的参与的反应，即所谓共通反应途径。 用自动生物化学分析仪进行酶学测定时，要合理选择方法并进行参数的设置。在标本的采集、运输与保存时要特别注意溶血、抗凝剂及温度等技术因素对测定的影响。

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　　用自动生物化学分析仪进行酶学测定时，要合理选择方法并进行参数的设置。在标本的采集、运输与保存时要特别注意溶血、抗凝剂及温度等技术因素对测定的影响。 　酶活性单位有惯用单位、国际单位和 Katal单位。临床上习惯用 U／ L 来表示体液中酶催化浓度。

　　酶测定的标准化工作可从使用推荐方法和参考方法、使用公认的酶校正物或酶参考物两方面人手。近来 IFCC决定建立包括参考测定方法、参考实验室网络和参考物等要素在内的酶催化浓度测定的全球参比体系。

　　临床上还可利用酶的抗原性，通过免疫化学方法直接进行酶浓度测定。与传统的酶活性浓度测定法相比，这些免疫化学法具有灵敏度高、特异性强等特点，能用于一些不表现酶活性或无活性的酶测定，而且特别适用于同工酶的测定。

　　　同工酶是具有相同的催化功能，但其分子组成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布和细胞内定位不同的一类酶。亚型指基因在编码过程中，由于翻译修饰差异所形成的多种形式的一类酶。往往在基因编码产物从细胞内释人血浆时因肽酶的降解作用而形成。 同工酶的分析大致可分为两步，即首先精确地分离出某酶的各同工酶组分，然后测定酶的总活性和各同工酶组分的活性。常用方法有电泳法、色谱法、免疫分析法、动力学分析法和蛋白酶水解法等。临床常规中以电泳法最常用。

　　临床上以检测血清酶和同工酶应用最广，根据需要也可测定其他各种体液 ( 如尿液、胸腔积液、腹水、脑脊液等 ) 中的酶和同工酶或亚型。有时单凭某一酶的活性变化，很难做出独立诊断。若同时测定一组性质不同的酶，比较各酶活性的变化，就能根据酶增高或减少的“谱型”做出诊断，此种同时检测一组酶，称为酶谱。常用的如心肌酶谱、肌酶谱、肝酶谱、肿瘤酶谱和胰酶谱等。

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