实　验　四

氨 氮 的 测 定

指导教师：王海云

一、实验目的

1. 了解分光光度计的使用方法。

2. 学会水样的蒸馏预处理。

3. 掌握纳氏试剂光度法测定水样中低浓度氨氮的原理和操作。

二、实验原理

水样中的氨氮在碱性条件下与纳氏试剂作用生成黄棕色络合物，在 420nm 波长处进行光度测定。

水样的色度、浊度和其他干扰物的存在会影响氨氮的测定，必须作适当的处理。对比较清洁的水样，可采用絮凝沉淀法，对污染严的水样，则应采用蒸馏法以消除干扰。

氨氮与纳氏试剂的反应式如下：

2K2(HgI4)+ 3KOH+ NH3=[O NH2] I + 7KI + 2H2OHg

Hg

三、实验仪器

　　氨氮蒸馏装置，分光光度计， 50mL 、 250mL 容量 瓶、移液管等。

蒸馏装置 分光光度计

四、实验试剂

1. 实验水均为无氨水。 2. 1mol/L 的盐酸。 3. 1mol/L 的氢氧化钠溶液。 4. 轻质氧化镁 (MgO) 。 5. 0.05 ％ (m/V) 溴百里酚蓝指示液 (pH6~7.6) 。 6. 防沫剂 ( 如液状石腊油 ) 。 7. 硼酸吸收液。 8. 纳氏试剂。 9. 酒石酸钾钠溶液。 10.铵标准使用溶液 ( 含氨氮 0.010 mg/mL) 。　　

五、实验步骤1. 蒸馏预处理

(1)取 50mL 硼酸溶液于 250mL 容量瓶中作为吸收液。

(2)分取 250mL 接近中性水样 ( 如果氨氮含量较高，可分取适量并加无氨水至 250mL, 使其含量不超过 2.5mg) 移入凯氏烧瓶，加数滴溴百里酚蓝指示液，用氢氧化钠或盐酸溶液调到 pH ＝ 7 左右。加入 0.25g 轻质氧化镁和数粒玻璃珠，立即连接氨氮球和冷凝管，导管下端插入吸收液面下，加热蒸馏，至馏出液达 200mL 左右时，停止蒸馏，定容至 250mL 。

(3)空白液的蒸馏：以无氨水代替水样，其它步骤和水样预蒸馏步骤相同。

•工作曲线的绘制 •分别移取 0 、 0.50 、 1.00 、 3.00 、 5.00 、 7.00 mL

铵标准使用液于 50mL 容量瓶中，再各加入 1.0mL 酒石酸钾钠溶液，并用无氨水加至约 40mL 左右，摇匀，然后再各加入 1.5mL 纳氏试剂，并用无氨蒸馏水稀至标线，摇匀，放置10min 后，在 420nm 处，用光程为 10mm 的比色皿，以空白为参比，测量吸光度。

•绘制以氨氮含量对吸光度的工作曲线。 •水样的测定 •分取　　　 mL( 适量 ) 经蒸馏后的馏出液于 50mL 容量

瓶中，再加入 1.0mL 酒石酸钾钠溶液，用加无氨水至 40mL左右，摇匀。然后再各加入 1.5mL 纳氏试剂，并用无氨蒸馏水稀至标线，摇匀，置放 10min ，同工作曲线步骤测量吸光度。按上述步骤测定空白馏出液，并加以扣除。

六、计算

从工作曲线上查得氨氮含量 (mg)

1000V

mmg/L)，N（ 氨氮

七、注意事项

1. 蒸馏时应避免发生暴沸，否则造成馏出液温度升高氨吸收不完全。

2. 防止在蒸馏时产生泡沫，必要时可加几滴液状石蜡油于凯氏烧瓶中。

3. 水样如含余氯，则应加入适量 0.35 ％硫代硫酸钠溶液，每 0.5mL 可除去 0.25mg 余氯。

4. 加钠氏试剂前，加无氨水不得少于 40mL ，否则会有浊度或沉淀产生。

5. 所用玻璃器皿应避免氨的沾污。