实验四 缺氧实验

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实实实 实实实实 实实实 实实实实

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实验四 缺氧实验. 【 实验目的 】 1. 复制动物缺氧病理模型的方法,掌握不同缺氧类型主要的发病原因和机制。 2. 观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、活动的改变。 3. 了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影响的关系。. 【 实验动物 】 1 . 体重相近的小白鼠 6 只 。 2 . 新生幼鼠 1 只。 【 药品与器材 】 ■ 钠石灰、玻璃珠、 7% 柠檬酸钠溶液、 CO 、 2% 亚硝酸钠、 0.04% 氰化物、蒸馏水。 ■ 天平称、手术器械一套、试管、 5ml 注射器、青霉素小瓶、广口瓶、三角烧瓶。. 【 实验项目 】 - PowerPoint PPT Presentation

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实验四 缺氧实验实验四 缺氧实验

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【实验目的】【实验目的】

1. 1. 复制动物缺氧病理模型的方法,掌握不同复制动物缺氧病理模型的方法,掌握不同缺氧类型主要的发病原因和机制。缺氧类型主要的发病原因和机制。

2. 2. 观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、观察不同类型缺氧时呼吸、皮肤粘膜颜色、活动的改变。活动的改变。

3. 3. 了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影了解机体功能、代谢特点与缺氧对机体影响的关系。响的关系。

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【实验动物】【实验动物】

11 ..体重相近的小白鼠体重相近的小白鼠 66 只只。。

22 ..新生幼鼠新生幼鼠 11 只。只。

【药品与器材】【药品与器材】

■■ 钠石灰、玻璃珠、钠石灰、玻璃珠、 7%7% 柠檬酸钠溶液、柠檬酸钠溶液、 COCO 、、 2%2% 亚亚硝酸钠、硝酸钠、 0.04%0.04% 氰化物、蒸馏水。氰化物、蒸馏水。

■■ 天平称、手术器械一套、试管、天平称、手术器械一套、试管、 5ml5ml 注射器、青霉素注射器、青霉素小瓶、广口瓶、三角烧瓶。小瓶、广口瓶、三角烧瓶。

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【实验项目】【实验项目】■■ 年龄因素对缺氧耐受性的影响年龄因素对缺氧耐受性的影响

■■ 低张性缺氧实验低张性缺氧实验

■■ 一氧化碳中毒一氧化碳中毒

■■ 亚硝酸钠中毒亚硝酸钠中毒

■■ 氰化钾中毒氰化钾中毒

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11 ..年龄因素对缺氧耐受性的影响年龄因素对缺氧耐受性的影响

■■ 取新生幼鼠取新生幼鼠 11 只,放入青霉素小瓶内,然后将其只,放入青霉素小瓶内,然后将其与成年鼠一起放入广口瓶内,观察动物一般状况。与成年鼠一起放入广口瓶内,观察动物一般状况。

■ ■ 密闭瓶塞,记录时间,观察两鼠状况。密闭瓶塞,记录时间,观察两鼠状况。

■ ■ 记录两鼠死亡时间。记录两鼠死亡时间。

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22 .低张性缺氧实验.低张性缺氧实验 ■■ 取成年鼠取成年鼠 22 只,分别放入钠石灰(只,分别放入钠石灰( AA )和玻璃珠的广口)和玻璃珠的广口瓶内。观察记录动物一般状态后,同时塞闭瓶口,记录时间。瓶内。观察记录动物一般状态后,同时塞闭瓶口,记录时间。每每 3min3min 观察记录动物活动状态、呼吸和皮肤粘膜的颜色变化。观察记录动物活动状态、呼吸和皮肤粘膜的颜色变化。

■■ 当其中一只小鼠死亡时,记录其生命持续时间。当其中一只小鼠死亡时,记录其生命持续时间。

■■ 测定氧分压,同时从连接两只瓶子的乳胶管部位分别抽取测定氧分压,同时从连接两只瓶子的乳胶管部位分别抽取2ml2ml 气体,用测氧仪测定气体,用测氧仪测定 AA 、、 BB 瓶内氧分压。观察另一未死小瓶内氧分压。观察另一未死小鼠的活动情况。在该鼠死亡时,再次抽取瓶内的气体各鼠的活动情况。在该鼠死亡时,再次抽取瓶内的气体各 2ml2ml 。。

■■ 尸检:小鼠死后,取一只小鼠打开胸腔,观察其内脏颜色。尸检:小鼠死后,取一只小鼠打开胸腔,观察其内脏颜色。

■■ 血色观察:取出血色观察:取出 22 滴滴 7%7% 柠檬酸钠溶液混匀心脏血加入盛柠檬酸钠溶液混匀心脏血加入盛有有 5ml5ml 蒸馏水的试管内,立即软木盖紧,摇匀,观察、记录试蒸馏水的试管内,立即软木盖紧,摇匀,观察、记录试管内溶液的颜色。管内溶液的颜色。

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33 ..一氧化碳中毒实验一氧化碳中毒实验

■■ 取取 11 只小鼠放入烧瓶内,观察、记录活动、呼吸的频只小鼠放入烧瓶内,观察、记录活动、呼吸的频率等。率等。

■■ 烧瓶内通入煤气玻璃管,玻璃管插入盛水的试管内,烧瓶内通入煤气玻璃管,玻璃管插入盛水的试管内,记录通气时间和速度,观察动物呼吸、皮肤、口唇粘膜记录通气时间和速度,观察动物呼吸、皮肤、口唇粘膜颜色变化,记录死亡时间。颜色变化,记录死亡时间。

■■ 尸检、血色观察。尸检、血色观察。

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44 ..亚硝酸钠中毒亚硝酸钠中毒

■■ 取小鼠取小鼠 11 只,称重,观察其一般状况。皮下注射只,称重,观察其一般状况。皮下注射 2%2%

亚硝酸钠,剂量为亚硝酸钠,剂量为 0.35ml/10g0.35ml/10g 体重,记录时间。观察、体重,记录时间。观察、记录注射后动物一般状况的改变,记录死亡时间。记录注射后动物一般状况的改变,记录死亡时间。

■■ 尸检、血色观察。尸检、血色观察。

55 ..氰化钾中毒氰化钾中毒

■■ 取小白鼠取小白鼠 11 只,称重,观察其一般状况。腹腔内注入只,称重,观察其一般状况。腹腔内注入0.04%0.04% 氰化钾,剂量为氰化钾,剂量为 0.2ml/10g0.2ml/10g 体重,记录时间。观体重,记录时间。观察、记录注射后动物一般状况的改变,记录死亡时间。察、记录注射后动物一般状况的改变,记录死亡时间。

■■ 尸检、血色观察。尸检、血色观察。

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【实验结果总结】【实验结果总结】表表 1 1 年龄因素对缺氧耐受性的影响年龄因素对缺氧耐受性的影响 新生鼠 成年鼠新生鼠 成年鼠活动(行为)活动(行为)生命持续时间生命持续时间 表表 2 2 低张性缺氧两小白鼠的观察指标的变化低张性缺氧两小白鼠的观察指标的变化实验条件 钠石灰瓶 玻璃珠瓶实验条件 钠石灰瓶 玻璃珠瓶体重 体重 呼吸变化呼吸变化皮肤、粘膜颜色皮肤、粘膜颜色血色血色行为改变生命持续时间行为改变生命持续时间

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表表 3 3 不同原因引起的低张性缺氧的耗氧量分析不同原因引起的低张性缺氧的耗氧量分析 实验条件 实验条件 PiPiOO22(mmHg)(mmHg)

钠石灰瓶 玻璃珠瓶钠石灰瓶 玻璃珠瓶

第第 11 只鼠死亡时只鼠死亡时

第第 22 只鼠死亡时只鼠死亡时

表表 44 不同类型缺氧时动物主要观察指标的结果比较不同类型缺氧时动物主要观察指标的结果比较 实验指标 呼吸变化 皮肤粘膜颜色 实验指标 呼吸变化 皮肤粘膜颜色 HbHb 颜色 生命持续时间颜色 生命持续时间

低张性缺氧低张性缺氧

COCO 中毒中毒

NaNONaNO22 中毒中毒

氰化物中毒氰化物中毒

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Discuss and AnalysisDiscuss and Analysis

哪个属于低张性缺氧动物实验?

哪个属于血液性缺氧动物实验?

哪个属于循环性缺氧动物实验?

哪个属于组织性缺氧动物实验?

Page 12: 实验四     缺氧实验

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Characteristics of blood oxygenCharacteristics of blood oxygen

COCO22maxmax 正常或稍增加(单纯性急性低张性缺氧时);正常或稍增加(单纯性急性低张性缺氧时);

PaPaOO22↓↓ ;; SaOSaO22↓↓ ;; CaOCaO22↓↓ (( PaPaOO22 必须低于必须低于 60mmHg60mmHg ););

PvPvOO22↓↓ ;; SvOSvO22↓↓ ;; CvOCvO22↓↓ ;;

A-VdOA-VdO22↓↓ 。。

低张性缺氧的血气变化有何特点?

Page 13: 实验四     缺氧实验

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Characteristics of blood oxygenCharacteristics of blood oxygen

表 各类血液性缺氧的表 各类血液性缺氧的血氧变化血氧变化

COCO22max max PaPaOO22 SaO SaO22 CaO CaO22 PvPvOO22 SvO SvO22 CvO CvO2 2 A-VdO A-VdO22

贫血 ↓ 正 正 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓ 贫血 ↓ 正 正 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓

COCO 中毒 ↓ 正 正 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓中毒 ↓ 正 正 ↓ ↓ ↓ ↓ ↓

HbHb 与氧亲合力 正 正 正 正与氧亲合力 正 正 正 正 正 ↑ ↑ ↓ 正 ↑ ↑ ↓

血液性缺氧的血气变化有何特点?

Page 14: 实验四     缺氧实验

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Characteristics of blood oxygenCharacteristics of blood oxygen

CaOCaO22max max 正常;正常;

PPaOaO22 、、 CaOCaO22 、、 SaOSaO22 正常;正常;

PPvOvO22 、、 CvOCvO22 、、 SvOSvO22 增高增高;;

A-VA-V 血氧含量差小于正常。血氧含量差小于正常。

组织性缺氧的血气变化有何特点?

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(一)低张性缺氧动物实验(一)低张性缺氧动物实验

【【基本体征基本体征】】

幼鼠对缺氧的耐受性最强。幼鼠对缺氧的耐受性最强。

最终动物死亡; 最终动物死亡;

动物皮肤、黏膜出现明显的紫绀;动物皮肤、黏膜出现明显的紫绀;

呼吸加深加快到变浅边慢,最后呼吸停止;呼吸加深加快到变浅边慢,最后呼吸停止;

出现明显的烦躁不安,心率加快到变慢、停止; 出现明显的烦躁不安,心率加快到变慢、停止;

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动物所处的环境中空气氧消耗出现氧浓度降低;动物所处的环境中空气氧消耗出现氧浓度降低;

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QuestionQuestion

1. 为什么会出现紫绀?为什么会出现紫绀?

2. . 呼吸为什么出现加深加快到变浅边慢?以及心率变化。呼吸为什么出现加深加快到变浅边慢?以及心率变化。

3. 3. 动物为什么死亡?其主要机制是什么?动物为什么死亡?其主要机制是什么?

4. 4. 为什么玻璃珠瓶内小鼠先出现抑制和死亡?二者血气有何为什么玻璃珠瓶内小鼠先出现抑制和死亡?二者血气有何

差异?差异?

5. 5. 在低张性缺氧实验中,为什么成年鼠先出现死亡?在低张性缺氧实验中,为什么成年鼠先出现死亡?

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1. Colour Change of skin and mucous membranes1. Colour Change of skin and mucous membranes

正常正常 capcap 中中 HHbHHb 平均浓度为平均浓度为 26g/L (2.6g%)26g/L (2.6g%) 。。

低张性缺氧 低张性缺氧 cap cap 内内 HbOHbO22↓↓ 、、 HHbHHb浓度↑浓度↑

HHbHHb 浓度↑>浓度↑> 50g/L(5g%)50g/L(5g%) 、、 SOSO22≤80%≤80% ~~ 85% 85%

紫绀紫绀 (cyanosis) (cyanosis) 皮肤粘膜青紫色 皮肤粘膜青紫色

(( 慢性低张性缺氧很容易出现紫绀。慢性低张性缺氧很容易出现紫绀。 ))

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Page 18: 实验四     缺氧实验

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PaPaOO22 << 60mmHg(8kPa) 60mmHg(8kPa) 刺激刺激外周外周化学感受器化学感受器

呼吸中枢呼吸中枢 ((+) +)

呼吸加深加快呼吸加深加快

2. Changes of respiratory system2. Changes of respiratory system

( 11 )代偿性变化 )代偿性变化 Increased rate & depth of ventilation Increased rate & depth of ventilation

窦神经、迷走神经

PaPaOO22↑↑ P PAAOO22 和和 PaPaOO22↑↑

CC..OO 和肺血流量↑ 静脉回流↑ 胸内负压↑和肺血流量↑ 静脉回流↑ 胸内负压↑

组织供氧↑ 有利于氧的摄取和运输组织供氧↑ 有利于氧的摄取和运输

PaPaCOCO22 ↑ ↑ 刺激刺激中枢中枢化学感受器化学感受器

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( 22 )失代偿性变化 呼吸变浅变慢、呼吸停止)失代偿性变化 呼吸变浅变慢、呼吸停止

PaPaOO22 <30mmHg <30mmHg 中枢能量代谢障碍 呼吸中枢抑制中枢能量代谢障碍 呼吸中枢抑制

( ( Respiratory center suppression inhibition Respiratory center suppression inhibition ))

呼吸肌疲劳、能量不足呼吸肌疲劳、能量不足

钠石灰瓶动物存在钠石灰瓶动物存在呼吸性碱中毒等呼吸性碱中毒等

2. Changes of respiratory system2. Changes of respiratory system

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【昏迷、死亡发生机制】【昏迷、死亡发生机制】 Mechanism of Mechanism of comacoma & death & death

缺氧、脑细胞能量代谢障碍 缺氧、脑细胞能量代谢障碍 ATPATP↓ ↓ 脑细胞水肿 膜电位↓脑细胞水肿 膜电位↓

NN 介质合成↓、酸中毒、溶酶体酶释放介质合成↓、酸中毒、溶酶体酶释放

脑血管通透性↑ 脑间质水肿 颅内压↑ 昏迷、死亡脑血管通透性↑ 脑间质水肿 颅内压↑ 昏迷、死亡

33.. Dysfunction of CNS Dysfunction of CNS

脑量为体重脑量为体重 2%2% ,脑血流占心输出量,脑血流占心输出量 15%15% ,脑耗氧量占总耗氧量,脑耗氧量占总耗氧量 2323%%

灰质耗氧量是白质灰质耗氧量是白质 55 倍,脑完全缺氧倍,脑完全缺氧 5-8min5-8min 后可发生不可逆损伤。后可发生不可逆损伤。

急性缺氧急性缺氧::头痛、情绪激动,思维力、记忆力、判断力↓等。头痛、情绪激动,思维力、记忆力、判断力↓等。

慢性缺氧慢性缺氧::易疲劳、嗜睡、注意力不集中等症状。易疲劳、嗜睡、注意力不集中等症状。

急性缺氧(脑组织损伤)急性缺氧(脑组织损伤)

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Page 21: 实验四     缺氧实验

瓶内瓶内 COCO22 很低很低

动物动物 PaOPaO22↓↓ 、、 PaCOPaCO22↓↓

呼吸运动↑ 抑制呼吸中枢呼吸运动↑ 抑制呼吸中枢

呼吸运动增强延迟 单位时间内耗氧量↓呼吸运动增强延迟 单位时间内耗氧量↓

缺氧的耐受性增强(瓶内缺氧的耐受性增强(瓶内 POPO22 更低) 生命持续时间延长 更低) 生命持续时间延长

钠石灰瓶钠石灰瓶

瓶内瓶内 COCO22 浓度↑浓度↑

动物动物 PaOPaO22↓↓ 、、 PaCOPaCO2 2 ↑↑

呼吸中枢很快兴奋呼吸中枢很快兴奋

较早出现呼吸加深加快、烦躁不安较早出现呼吸加深加快、烦躁不安

单位时间内耗氧量↑ 缺氧加重 生命持续时间缩短单位时间内耗氧量↑ 缺氧加重 生命持续时间缩短

玻璃珠瓶玻璃珠瓶

氧解离曲线左移氧解离曲线左移

Page 22: 实验四     缺氧实验

1.1. 因为幼鼠体内无氧酵解能力强;因为幼鼠体内无氧酵解能力强;

2.2. 幼年鼠的组织细胞内线粒体数量较多,所以细胞利用氧幼年鼠的组织细胞内线粒体数量较多,所以细胞利用氧 的能力强;的能力强;

3.3. 幼年鼠幼年鼠 RBCRBC 内内 HbHb 以胎以胎 HbHb 为主(为主(型为主;成年型为主;成年鼠以鼠以

为主);为主);

4. 4. 幼年鼠幼年鼠 CNSCNS 发育不成熟,对缺氧不敏感。发育不成熟,对缺氧不敏感。

为什么成年鼠先出现死亡?

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Page 23: 实验四     缺氧实验

(二)血液性缺氧动物实验(二)血液性缺氧动物实验

【【基本体征基本体征】】

Discuss and AnalysisDiscuss and Analysis

亚硝酸钠中毒时动物皮肤、黏膜出现紫绀; 亚硝酸钠中毒时动物皮肤、黏膜出现紫绀;

COCO 中毒时中毒时动物皮肤、黏膜出现明显的樱桃红; 动物皮肤、黏膜出现明显的樱桃红;

呼吸相对平稳,加深加快出现较晚,最后呼吸停止。呼吸相对平稳,加深加快出现较晚,最后呼吸停止。

出现明显的烦躁不安,心率先加快后变慢和停止; 出现明显的烦躁不安,心率先加快后变慢和停止;

Page 24: 实验四     缺氧实验

QuestionQuestion

11 .. COCO 中毒为什么会引起机体缺氧?中毒为什么会引起机体缺氧?

22 .. COCO 中毒时,呼吸运动增强为什么出现晚和平稳?中毒时,呼吸运动增强为什么出现晚和平稳?

44 .动物黏膜、皮肤出现不同的颜色改变,这是为什么?动物黏膜、皮肤出现不同的颜色改变,这是为什么?

33 .亚硝酸钠中毒为什么会出现缺氧?亚硝酸钠中毒为什么会出现缺氧?

Discuss and AnalysisDiscuss and Analysis

Page 25: 实验四     缺氧实验

皮肤、粘膜颜色变化呈玫瑰红色。皮肤、粘膜颜色变化呈玫瑰红色。

Discuss and AnalysisDiscuss and Analysis

(三)组织中毒性缺氧动物实验(三)组织中毒性缺氧动物实验

【【基本体征基本体征】】

呼吸早期相对平稳,后期挣扎时呼吸深加快出,呼吸早期相对平稳,后期挣扎时呼吸深加快出,

最后呼吸停止。最后呼吸停止。

无明显的烦躁不安,突然心跳、呼吸停止; 无明显的烦躁不安,突然心跳、呼吸停止;