Post on 07-Jul-2015
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JAISON LOZANO CARDONA
ANGÉLICA MARÍA OMAÑA NIÑO
WILLIAM FERNANDO CUADROS RIVERA
CROMATOGRAFÍA LIQUIDA (HPLC)
• Técnica que separa una mezcla de solutos basada en la
velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se
establece al ser arrastrados por una fase móvil (líquida o
gaseosa).
CROMATOGRAFÍA
• El botánico ruso Mikhail Semenovich Tsweet,(1872-1919) en 1906 empleó por primera vez eltérmino "cromatografía“.
• A comienzos del año 1903 usó columnas deadsorción de líquidos para separar pigmentosvegetales (por ejemplo, clorofilas).
• La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)comenzó a desarrollarse en los años 1960,aumentando su importancia en las décadassiguientes, hasta convertirse en la técnicacromatográfica más empleada.
HISTORIA DE LA CROMATOGRAFÍA
CROMATOGRAFÍA LIQUIDA DE ALTA EFICIENCIA (HPLC)
• Técnica utilizada para separar los componentesde una mezcla. Consiste en una faseestacionaria no polar (columna) y una fase móvillíquida que fluye a través de una columna quecontiene a la fase fija.
• La utilización de los diferentes detectores dependerá de la naturaleza de los
compuestos a determinar.
RENTABILIDAD DE LA TÉCNICA
VENTAJAS
• Se puede utilizar varias veces• Alta versatilidad• Tiempo reducido de análisis• Usado para análisis cualitativo
y cuantitativo• automático
DESVENTAJAS
• Alto costo de los equipos• Alto costo de mantenimiento
de los equipos• No existe un detector
universal • Falta de experiencia del
operador
A diferencia de la cromatografía de gases, la cromatografía de líquidosde alto rendimiento no está limitada por la volatilidad o la estabilidadtérmica de la muestra.
ESQUEMA DEL HPLC
FASE MÓVIL
BOMBA DE PRESIÓN
BOBINA DE INYECCIÓN COLUMNA
DETECTOR
FASE ESTACIONARIA
INFLUENCIA DE LA FASE MÓVIL EN LA SEPARACIÓN
APLICACIONES DE LA TÉCNICA
APLICACIONES DE LA TÉCNICA EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA
Permite muy buenas separaciones e identificaciones desustancias en un tiempo corto, tanto cualitativa comocuantitativamente es la mas utilizada debido a sus cualidades desensibilidad.
• Purificación y caracterización de enzimas y proteínas
• Separación e identificación de azucares.
• Determinación rápida y precisa de la composición de asidosgrasos.
• Identificación y determinación de esteres metílicos
• Separación alfa y beta tocoferol
ARTÍCULOS DONDE SE APLICO LA CROMATOGRAFÍA LIQUIDA
• Determinación de la fluorescencia de la ACRILAMIDA (AA) enlos alimentos procesados con calor. (Universidad de Fuzhou, China).
• Determinación de VITAMINA A (RETINOL) en mielesenriquecidas, por Cromatografía líquida de Alto Rendimiento.(Universidad Nacional del Nordeste, Chaco, Argentina).
• Folatos y su disponibilidad en alimentos evaluados porcromatografía líquida. validación y aplicaciones en cálidadnutricional de alimentos. (Departamento de Tecnología de Alimentos,
Nutrición y Bromatología. Universidad de Murcia)