Découvrez le vaccin contre le paludisme

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Découvrez le vaccin contre le paludisme Atelier d’expérimentation PROTOCOLE

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En suivant ce protocole, les jeunes participent à la recherche visant à mettre au point un vaccin contre le paludisme qui, associé aux mesures actuelles, pourrait contribuer de manière significative à un meilleur contrôle de cette importante maladie due à un parasite. Les étudiants testeront différents candidats-vaccins en utilisant une technique appelée ELISA, puis décideront quel est le candidat le plus efficace. Le protocole expérimental est l’occasion, pour les centres scientifiques, les musées et les écoles, de reproduire une expérience réelle effectuée dans un laboratoire travaillant à la mise au point d’un vaccin contre le paludisme.

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Atelier d’expérimentationPROTOCOLE

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IntroductionLe paludisme est considéré comme la maladie la plus importante du monde due à un parasite et est responsable du décès de près de 800 000 personnes chaque année, en particulier d’enfants de moins de cinq ans et de femmes enceintes. Selon l’Organisation mondiale de la santé (OMS), près de 3 000 millions de personnes risquent de contracter l’infection, et 225 millions de cas de paludisme se sont produits dans le monde en 2010, dont 90 % ont eu lieu en Afrique.

De nos jours, le paludisme est endémique dans plus de 100 pays localisés en Afrique subsa-harienne et dans les régions du sud de l’Asie, d’Amérique latine et d’Océanie. Les derniers rapports montrent que la moitié de la population mondiale vit dans des zones présentant un risque de contracter la maladie et où le paludisme n’a pas seulement des conséquences sur la santé de la population, mais contribue aussi à fragiliser davantage la situation économique de la zone.

Afin d’éradiquer la maladie dans les zones à haut risque de transmission, plusieurs inter-

Cet atelier vous permettra d’étudier différents candidats-vaccins afin de décider quel candidat est le plus efficace.

ventions sont menées à bien sous la forme de différentes mesures combinées comprenant l’utilisation de moustiquaires imprégnées d’insecticide, d’aérosols insecticides et de trai-tements de prévention, ainsi que l’implantation de programmes éducatifs et d’interventions environnementales, entre autres.

La communauté scientifique travaille inten-sément pour mettre au point un vaccin qui, associé aux mesures actuelles, pourrait contri-buer de manière significative, selon les experts, à un meilleur contrôle du paludisme. Il existe déjà actuellement un vaccin en phase d’étude clinique, qui sera efficace dans 50 % des cas.

Pays ou zones à risque réduit de transmission du paludismePays ou zones où a lieu la transmission du paludisme

Source : Organisation mondiale de la santé (OMS). Données de 2009

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Comment se transmet le paludisme ?

Le paludisme est une maladie infectieuse transmise par la piqûre d’un moustique du genre Anopheles qui transmet des parasites du genre Plasmodium et agit par conséquent comme un vecteur. Au sein de l’organisme humain, les parasites se multiplient dans le foie pour infecter ensuite les globules rouges. Parmi les symptômes du paludisme, les plus signifi catifs sont la fi èvre, les maux de tête et les vomissements, survenant 10 à 15 jours après la piqûre du moustique.

Historiquement, les vaccins ont constitué l’un des moyens les plus effi caces pour prévenir des maladies et sauver des vies, en particulier dans le cas des maladies infectieuses. L’obten-tion d’un vaccin partiellement effi cace pourrait représenter la possibilité de sauver des cen-taines de milliers de vies.

L’obtention d’un vaccin impliquera une avan-cée majeure. Il pourra être ajouté à l’arsenal actuel de mesures utilisées pour la prévention du paludisme, telles que les moustiquaires imprégnées d’insecticide ainsi que le traitement opportun et adéquat des cas diagnostiqués de paludisme.

Comme son effi cacité à court terme sera partielle, il ne remplacera pas ces mesures, mais les complètera, constituant ensemble une réponse complète pour la prévention du palu-disme.

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Des stratégies contre le moustique ou vecteur, telles que la fumigation des espaces fermés à l’aide d’insecticides.

Quelles sont les interventions mises en place pour contrôler le paludisme ?Les principales interventions pour contrôler le paludisme sont réparties en plusieurs groupes :

Des stratégies permettant d’éviter le contact vecteur-hôte, comme l’utilisation de moustiquaires imprégnées d’insecticide.

Des stratégies contre le parasite. Ce dernier groupe comprend le traitement à base d’une association de médicaments mis au point à partir d’une molécule

appelée artémisinine, qui est rapide et effi cace. Un vaccin serait aussi une stratégie de contrôle du parasite qui, en combinaison avec d’autres stratégies, pourrait contribuer de manière signifi cative à l’éradication du paludisme.

Pourquoi un vaccin contre le paludisme est-il nécessaire ?

1 Des stratégies contre le moustique ou vecteur, telles que la fumigation des espaces fermés à l’aide d’

paludisme sont réparties en plusieurs groupes :

2 Des stratégies permettant d’éviter le contact vecteur-hôte, comme l’utilisation de moustiquaires d’insecticide.

3 Des stratégies contre le parasite. Ce dernier groupe comprend le traitement à base d’une association de médicaments à partir d’une molécule

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L’Institut de santé globale de Barcelone (ISGlobal) est une organisation à but non lucratif, dont l’objectif est d’améliorer la santé et le développement des populations les plus vulnérables par la génération, la gestion, la transmission et l’application de connaissances. Sa vision est un monde où nous puissions tous être en bonne santé et il compte avec le soutien de l’œuvre sociale « la Caixa », entre autres institutions. L’un des piliers essentiels de l’ISGlobal est la recherche centrée sur les problèmes de santé affectant les populations les plus vulnérables et elle se déroule au Centre de recherche sur la santé internationale de Barcelone (CRESIB). La recherche sur le paludisme effectuée au CRESIB est consacrée aux travaux suivants :

1. Étude des bases moléculaires de la mala-die, ainsi que des différentes réponses immunitaires.

2. Mise au point de nouveaux médicaments et évaluation de leur sécurité, effi cacité et effectivité.

3. Évaluation des caractéristiques épidémio-logiques du paludisme au sein de différents environnements et des aspects sociocultu-rels qui l’entourent.

4. Analyse de l’effi cacité de différents outils de prévention, ainsi que du rapport coût/effi cacité des interventions.

Dans le cadre du point (4), le CRESIB réalise des études cliniques de sécurité, d’effi cacité et d’effectivité des vaccins. Il participe actuelle-ment à la mise au point du vaccin RTS,S contre le paludisme, qui est effi cace chez plus de 50 % des enfants infectés. Parallèlement, le travail des chercheurs du CRESIB porte sur l’identifi -cation de nouveaux candidats-vaccins.

Que faisons-nous à l’ISGLOBAL, l’Institut de santé globale de Barcelone ?

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Objectifs de l’atelierDans le cadre de cet atelier, nous vous proposons de travailler sur différents candidats-vaccins contre le paludisme en cours d’étude au CRESIB, pour identifi er le meilleur candidat. Les candidats-vaccins du CRESIB ont été obtenus à partir de protéines du parasite préalablement purifi ées.

Afi n de procéder à leur étude, vous disposerez de plusieurs échantillons de sang de personnes résidant dans des zones affectées par le paludisme, qui ont déjà souffert de la maladie à plusieurs reprises et sont immunisées.

Pour confi rmer l’effi cacité de nos candidats-vaccins, nous devons vérifi er si les personnes immunisées ont développé une réponse contre ces candidats. Si une activation de la réponse immunitaire contre les protéines candidates est observée, cela signifi e qu’elles pourraient constituer de bons candidats-vaccins car elles pourraient aussi déclencher la réponse nécessaire à la protection contre de futures infections.

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Le principe fondamental de cette technique repose sur l’interaction du candidat-vaccin, ou antigène (1), avec l’anticorps (2). Un anticorps spécifi que se lie à un antigène spécifi que pour former un complexe antigène-anticorps exclusif.

La technique ELISA nous permet de mettre en évidence la présence des anticorps et, par conséquent, la formation de complexes anti-gène-anticorps lors du contact des échantillons de sang avec les candidats-vaccins.

Pour mener à bien l’identifi cation, nous utili-sons des anticorps liés à une molécule appelée enzyme (3) ayant la capacité de réagir avec une substance appelée substrat (4) que nous ajou-tons, et de produire une couleur.

Ainsi, si l’échantillon contient l’anticorps que nous voulons détecter, celui-ci se lie à celui que nous ajoutons lié à une enzyme, ce qui fait apparaître un changement de couleur du substrat, nous indi-quant de cette manière un résultat positif.

1. Antigène : toute substance étrangère susceptible de se lier de manière spécifi que aux anticorps ou lymphocytes spé-cifi ques et de déclencher une réponse immunitaire. En général, les antigènes ont un poids moléculaire élevé et sont normalement des protéines ou des polysaccharides.

2. Anticorps : protéines (immunoglobulines - Ig) du sérum générées en réponse à l’invasion de molécules étrangères dans l’organisme, soit par exposition naturelle à un antigène, soit par immunisation au moyen de vaccins. Ils ont la forme d’un Y et sont constitués de quatre chaînes polypeptidiques liées grâce à des liaisons disulfures intercaténaires. Les anticorps possèdent une région constante et une région variable.

3. Enzyme : protéine contribuant aux réactions spécifi ques du métabolisme.

4. Substrat : solution contenant un composé sur lequel agira une enzyme.

Principes fondamentaux de la technique ELISA

Cet atelier a pour vocation de vous familiariser avec l’une des techniques les plus utilisées dans les laboratoires de biomédecine, la technique ELISA (« Enzima Linked Immuno Sorbent Assay »).

Il s’agit d’une analyse permettant de détecter la présence d’anticorps dans les échantillons de sang. La présence d’anticorps spécifi ques

contre les candidats indique la capacité à déclencher une bonne réponse immunitaire et qu’il peut donc s’agir d’un bon candidat.

Grâce à cette technique, nous découvrirons en particulier lequel des antigènes disponibles dans le laboratoire est un bon candidat-vaccin contre le paludisme.

AnticorpsEnzyme

Substrat

Antigène

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Afin de découvrir lequel des candidats-vac-cins ou antigènes est le plus efficace, nous analysons si les échantillons de sang de per-sonnes immunisées contre le paludisme ont

1. LIAISON DES PROTÉINES CANDIDATES (OU ANTIGÈNES) À LA SURFACE DES PUITSLa première étape consiste à fi xer les protéines candidates faisant l’objet de l’étude sur un support solide.

2. FORMATION DE COMPLEXES ANTIGÈNE-ANTICORPSNous ajoutons ensuite les échantillons de sang, plus précisément le sérum (correspondant aux échantillons de sang après extraction des cellules et des facteurs de la coagulation), et un anticorps marqué par une enzyme que nous appelons anticorps secondaire. Les échantillons de sang conte-nant l’anticorps à étudier présentent la formation de complexes antigène-anticorps, qui se lient à leur tour à l’anticorps marqué par l’enzyme.

3. LECTURE DE LA RÉACTIONEnfi n, nous ajoutons le substrat de l’enzyme, qui, en présence du complexe antigène-anticorps, change de couleur. Nous pouvons ainsi savoir si les échantillons de sang contiennent l’anticorps à étudier et la quantité d’anticorps.

Organisation de l’atelierdes anticorps contre ceux-ci.Pour ce faire, l’expérience est divisée en 3 étapes principales.

Sérum des patients

Substrat de l’enzyme

Anticorps secondaire marqué

par une enzyme

Les résultats obtenus permettent de décider quel candidat-vaccin déclenche une réponse

immunitaire plus intense et peut donc être le meilleur candidat.

Résultats et conclusions

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Instruments et ustensiles de laboratoire

Consommables

1. Si vous ne disposez pas d’agitateurs magnétiques, vous pouvez acheter le PBS liquide2. Si vous ne disposez pas de micropipettes, vous pouvez utiliser des pipettes Pasteur de petit volume

Équipement et matériel nécessaire

Agitateur magnétique (1) (pour préparer le PBS-Tween)

Chronomètre

Pipettes Pasteur en plastique graduées

Feutre permanent

Micropipette de 20 à 200 µl (2)

Barrettes de 12 puits d’ELISA et portoirs

Papier absorbant

Pointes pour micropipette

Gants, lunettes et blouse

Noyau magnétique et « extracteur de noyaux »

EntonnoirÉprouvette de 100 ml

Flacon en verre de 250 ml

Instruments et ustensiles de laboratoire

Agitateur magnétique (1) « extracteur de noyaux »« extracteur de noyaux »

Éprouvette

de 20 à 200 « extracteur de noyaux »« extracteur de noyaux »

Flacon en verre de Entonnoir

Barrettes de 12 puits d’ELISA et portoirs

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Réactifs et échantillons

Solution tampon PBS (3)

Substrat ou solution révélatrice

Détergent Tween-20 (4) Eau distillée

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

immunisées contre la maladie

Candidats-vaccins (antigènes)

Contrôles positifs et négatifs (5)

Anticorps secondaire lié à une enzyme

(peroxydase)

Contrôles positifs Contrôles positifs

Substrat ou solution

Contrôles positifs

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

Échantillons de sérum de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont

A

1 2 3 4

C + C-

Antic

orps

sec

onda

ire

Subs

trat

B

3. Permet de maintenir le pH de la solution grâce aux phosphates de sodium et de potassium. 4. Permet de prévenir des liaisons d’anticorps non spécifi ques.5. C+ : contient un mélange de sérums de personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont immunisées contre la maladie. C- : mélange de sérums de personnes n’ayant jamais été exposées au paludisme.

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Pour déterminer la présence ou l’absence d’an-ticorps spécifi ques contre les deux antigènes candidats-vaccins disponibles dans le labora-toire, nous mettons en contact le sang (plus précisément le sérum) de différents patients

résidant dans des zones où le paludisme est endémique avec ces antigènes afi n d’observer si des anticorps spécifi ques contre nos anti-gènes sont présents dans ces sérums.

Les barrettes de micropuits sont recouvertes de candidats-vaccins (antigènes) à analyser pour découvrir s’il s’agit de bons candidats-vaccins contre le paludisme.

La liaison de ces antigènes à la surface des puits se produit facilement car ces derniers sont constitués d’un plastique traité ayant une grande affi nité pour lier des protéines.

Procédures

1 Liaison des antigènes à la surface des puits

PROTOCOLE POUR LA LIAISON DES ANTIGÈNES À LA SURFACE DES PUITS

Annotez ensuite le contenu de chaque puits (contrôles, échantillons de sang et nom des antigènes à étudier).

Étiquetez les puits en marquant le lieu de dépôt de chaque échantillon.

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antigènes à étudier).

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Préparez une solution de lavage (PBS-Tween à 0,05 %).

Remarque : La solution de lavage contient du PBS (phosphate buffer saline) permettant de maintenir les anticorps dans un environnement stable qui aide à la conservation de leur structure. Le Tween-20 est un détergent permettant d’éliminer les pro-téines liées de manière non spécifi que. Il se lie aux parties du puits non recouvertes d’antigène, réduisant ainsi le bruit de fond.

Mesurez 200 ml d’eau distillée à l’aide de l’éprouvette et complétez au volume avec la pipette Pasteur. Versez les 200 ml d’eau distillée dans le fl acon à l’aide de l’entonnoir.

Après dissolution de la pastille, procédez à l’extraction du noyau magnétique et ajoutez 100 µl de Tween-20 à l’aide d’une pipette Pasteur en plastique.

Introduisez le noyau magnétique dans le fl acon et diluez dans l’eau une pastille de PBS à l’aide de l’agitateur magnétique.

Agitez bien le contenu du fl acon en le retournant plusieurs fois.

A

C

B

D

3

Mesurez 200 ml d’eau distillée à l’aide de

A

Mesurez 200 ml d’eau distillée à l’aide de Mesurez 200 ml d’eau distillée à l’aide de

Préparez une solution de lavage (PBS-Tween à 0,05 %).

Introduisez le noyau magnétique dans le

B

Après dissolution de la pastille, procédez à Après dissolution de la pastille, procédez à l’extraction du noyau magnétique et ajoutez l’extraction du noyau magnétique et ajoutez

C

Après dissolution de la pastille, procédez à l’extraction du noyau magnétique et ajoutez l’extraction du noyau magnétique et ajoutez

Agitez bien le contenu du fl acon en le

D

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Lavez pour éliminer l’excès d’antigène non lié à la barrette. Pour ce faire, remplissez les puits avec la solution de lavage à l’aide d’une pipette Pasteur en plastique.

Laissez incuber pendant 5 minutes à température ambiante.

Éliminez la solution de lavage en retournant la barrette sur un papier absorbant.

Éliminez les résidus d’antigène en retournant la barrette sur un papier absorbant.

Répétez une fois les étapes 7 et 8.

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Ajoutez les deux antigènes à étudier aux puits correspondants à l’aide de la micropipette (50 µl par puits). Il est important d’utiliser une pointe propre pour déposer les antigènes, afi n d’éviter des contaminations.

4Ajoutez les deux antigènes à étudier aux puits correspondants à l’aide de la micropipette (50 µl par puits). Il est important d’utiliser une pointe propre pour déposer les antigènes, afi n d’éviter des contaminations.

Éliminez les résidus d’antigène en retournant la barrette sur un papier absorbant.

Éliminez la solution de lavage en retournant la barrette sur un papier absorbant.

Lavez pour éliminer l’excès d’antigène non

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Répétez une fois les étapes 7 et 8.Éliminez la solution de lavage en retournant

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Au cours de cette étape, nous préparons d’abord le sérum des patients pour détecter la présence d’anticorps contre le candidat-vaccin. Nous appelons anticorps primaires ces anti-corps que nous voulons analyser. Nous ajou-tons ensuite un anticorps secondaire marqué

par une enzyme appelée peroxydase. Comme chaque anticorps primaire peut être lié à plus d’un anticorps secondaire, nous observerons une augmentation de la quantité de couleur obtenue lors de l’étape trois. La technique sera ainsi plus sensible.

2 Formation de complexes antigène-anticorps

PROTOCOLE DE FORMATION DE COMPLEXES ANTIGÈNE-ANTICORPS

Ajoutez les contrôles positifs et négatifs aux puits correspondants à l’aide de la micropipette (50 µl par puits).Le contrôle positif (C+) contient un mélange de sérums de personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique, qui sont immunisées contre la maladie. Le contrôle négatif (C-) contient un mélange de sérums de personnes n’ayant jamais été exposées au paludisme.

Ajoutez les différents échantillons de sérums de quatre personnes résidant dans des zones où le paludisme est endémique aux puits correspondants à l’aide de la micropipette (50 µl par puits).

1 2

PROTOCOLE DE FORMATION DE COMPLEXES ANTIGÈNE-ANTICORPS

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PROTOCOLE DE FORMATION DE COMPLEXES ANTIGÈNE-ANTICORPS

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tons ensuite un anticorps secondaire marqué ainsi plus sensible.

Sérum des patients

Anticorps secondaire marqué

par une enzyme

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Laissez incuber pendant 5 minutes à température ambiante.

Éliminez l’excès d’échantillon par retournement de la barrette sur un papier absorbant.

Lavez tous les puits afi n d’éliminer les anticorps n’ayant pas réagi avec les antigènes, qui sont par conséquent non spécifi ques. Remplissez les puits avec la solution de lavage à l’aide d’une pipette Pasteur en plastique.

Éliminez la solution de lavage par retournement de la barrette sur un papier absorbant.

Répétez deux fois les étapes 5 et 6.

3 4

5 6

7 8

Laissez incuber pendant 5 minutes à Éliminez l’excès d’échantillon par retournement

4

6

Lavez tous les puits afi n d’éliminer les

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Ajoutez l’anticorps secondaire lié à une enzyme à tous les puits à l’aide de la micropipette (50 µl par puits).

3

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Laissez incuber pendant 5 minutes à température ambiante.

Éliminez l’excès d’anticorps secondaire par retournement de la barrette sur un papier absorbant.

Lavez les puits en les remplissant avec la solution de lavage à l’aide d’une pipette Pasteur en plastique.

Éliminez la solution de lavage par retournement de la barrette sur un papier absorbant.

Répétez trois fois les deux étapes précédentes.

9 10

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Éliminez l’excès d’anticorps secondaire par retournement de la barrette sur un

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Éliminez la solution de lavage par retournement de la barrette sur un

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À la fi n du lavage pour éliminer toutes les molécules marquées non liées sous la forme de complexes antigène-anticorps, ajoutez le substrat enzymatique en solution, qui facilitera le changement de couleur.

3 Lecture de la réaction

PROTOCOLE DE LA LECTURE DE LA RÉACTION

Ajoutez le substrat de l’enzyme à l’ensemble des puits à l’aide de la micropipette (50 µl par puits).

Laissez incuber pendant 5 minutes au cours desquelles le substrat se lie à l’enzyme pour faire apparaître la couleur à température ambiante.

1 2

Ajoutez le substrat de l’enzyme à

1

Laissez incuber pendant 5 minutes au

le changement de couleur.

Substrat de l’enzyme

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Annotez les résultats sous la forme d’un graphique à barres.In

tens

itéIn

tens

ité

Échantillons

Échantillons

maximum

maximum

minimum

minimum

C+

C+

C-

C-

M1

M1

M2

M2

M3

M3

M4

M4

3

ANTIGÈNE 1

ANTIGÈNE 2

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Résultats et conclusions

1. Quel antigène parmi ceux que vous avez analysés est, selon vous, le meilleur candidat-vaccin ? Pensez-vous que les antigènes que vous avez analysés sont des bons candidats-vaccins ? Pourquoi ?

2. Quand une réaction est-elle positive ou négative ? Pourquoi ?

3. Pourquoi, selon vous, faut-il utiliser les contrôles ?

Interprétez et notez les résultats

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6. Du sang des collègues de votre classe peut-il être utilisé pour déterminer si nos antigènes de laboratoire sont de bons candidats pour mettre au point un vaccin contre le paludisme ? Justifiez la réponse.

5. Que se passerait-il si les lavages n’étaient pas effectués avant l’ajout du substrat révélateur ?

4. Quelle partie de l’anticorps primaire est reconnue par l’anticorps secondaire : la région constante ou la région variable ? Justifiez la réponse.

7. Pensez-vous que cette expérience ait démontré que le candidat sélectionné déclenche la réponse immunitaire ? Faut-il effectuer un autre type d’expérience en vue d’évaluer s’il est aussi capable de déclencher un autre type de réponse ?

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NOMPBS Tween-20CHK IGY, bagged (= ANTIGÈNE)RB ANTI-CHK, bagged (= PLASMA)GAR-HRP, bagged (= ANTICORPS SECONDAIRE)SUBSTRAT RÉVÉLATEUR

INFORMEZ-VOUSLocalisez les éléments de sécurité du labora-toire ou de l’espace prévu pour effectuer des expériences (extincteurs, douches ou bain, sorties, etc.). Veuillez lire attentivement les ins-tructions avant de commencer une expérience. N’oubliez pas de lire les étiquettes de sécurité des réactifs et des appareils.

UTILISEZ DES VÊTEMENTS ADÉQUATSGants, blouse et lunettes de protection.

RÈGLES GÉNÉRALESIl est interdit de fumer, de manger ou de boire dans le laboratoire ou l’espace prévu pour effectuer des expériences.Lavez-vous les mains avant de sortir du labora-toire. Travaillez de manière ordonnée, propre-ment et calmement. Si un produit se répand sur le sol ou sur la paillasse, nettoyez-le immédia-tement. Nettoyez et rangez le matériel. N’utili-sez jamais un équipement ou un appareil sans connaître parfaitement son fonctionnement.

MANIPULATION DU VERREProtégez-vous les mains lorsque vous manipulez du matériel en verre. N’utilisez pas du verre fi ssuré.

PRODUITS CHIMIQUESN’utilisez jamais un fl acon de réactifs sans étiquette. Ne sentez, n’inhalez, ne goûtez et ne touchez jamais les produits chimiques. Ne pipetez jamais avec la bouche. Mettez des gants

et lavez-vous souvent les mains si vous utilisez des produits toxiques ou corrosifs. N’approchez pas des récipients contenant des réactifs d’une fl amme. Ne chauffez pas des liquides infl am-mables. Transportez les fl acons en les tenant par le fond, en aucun cas par l’ouverture.

ÉLIMINATION DES DÉCHETSDéposez dans des conteneurs prévus à cet effet et dûment identifi és le verre cassé, les réactifs toxiques, nocifs ou néfastes pour l’environ-nement et les déchets biologiques. Ne jetez jamais des résidus solides dans l’évier.

En cas d’accident, prévenez immédiatement l’éducateur. Rappel : en cas de doute, veuillez consulter l’éducateur.

PRÉCAUTIONS SPÉCIFIQUES À PRENDRE LORS DE CET ATELIER Au cours de cette pratique, vous devez manipuler les réactifs en respectant les précautions cou-rantes prévues pour la manipulation des produits chimiques. Seuls les produits présentant les degrés de danger suivants sont indiqués ci-dessous :

• PBS : toxique par ingestion, inhalation et contact avec la peau.

• Tween 20 : toxique par ingestion, inhalation et contact avec la peau. Irritant.

RÉFÉRENCEP4417-50TABP1379-100ML1662406EDU1662407EDU1662408EDU1662402EDU

SOCIÉTÉ COMMERCIALESigmaSigmaBioRadBioRadBioRadBioRad

Consignes de sécurité

Références des réactifs

Annexe I

Annexe II

 

toxique par ingestion, inhalation et contact      

PORT DES LUNETTES OBLIGATOIRE

PORT DE LA BLOUSE OBLIGATOIRE

PORT DES GANTS OBLIGATOIRE

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Chercheurs ayant collaboré avec les contenus : Laura Puyol, chercheuse au CRESIB, ISGlobal.

Cet ouvrage est sous une licence Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Unported de Creative Commons. Pour voir une copie de la licence, consultez le lien suivant : http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/

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