Microorganismos de suelo: alternativa
sustentable para el cultivo de la vid
Dra. María Victoria Salomon
Dr. Iván Funes Pinter
Laboratorio de Bioquímica Vegetal
Instituto de Biología Agrícola de Mendoza-Facultad de Ciencias Agrarias
CONICET-UNCuyo
Introducción
Rizobacterias promotoras del
crecimiento vegetal (PGPR)
Bacterias de suelo que tienen la
capacidad de colonizar la superficie de
las raíces y el suelo que las rodea y,
sin desarrollar una asociación
simbiótica con la planta, producen un
efecto benéfico sobre su crecimiento
(Kloepper y Schroth 1978).
Solubilización de Fosfato
Fijación de Nitrógeno
Producción de Sideróforos
Calidad del suelo
Producción
de reguladores
del crecimiento
Competencia
por nutrientes
Producción de
antibióticos
Respuesta sistémica
inducida
Nutrición y desarrollo
Defensa
Control de patógenos
Remediación Metales
Pesados y metaloides
Respuesta sistemica
inducida
Respuesta sistemica
inducida
Defensa
Proteínas relacionadas
a patógenos
¿Terpenos?
Estres
Defensa
Estres
Metabolitos secundarios Refuerzo de la pared celular
Introducción
• La vitivinicultura es una importante
actividad económica en Argentina.
PGPR
Introducción
Objetivos
Estudiar poblaciones bacterianas aisladas de rizósfera y raíces
de Vitis vinifera L. cv. Malbec, analizando en la interacción
planta-microorganismo los mecanismos de promoción del
crecimiento y de control biológico involucrados, como
alternativa ecológica para aumentar la producción.
Evaluar su capacidad de aumentar la defensa de la planta
frente a diferentes tipos de estrés.
- Escases de agua
- Botrytis cinerea
- Contaminación por Arsénico
Aislar y caracterizar bacterias de un viñedo comercial
Estudiar las respuesta fisiológica y metabólica de la plantas
Secuenciación del gen que codifica ARNr 16 S
Aislamiento y caracterización de bacterias
Caracterización fenotípica y
bioquímica
-Tinción de Gram
-Forma, tamaño y movilidad
-Catalasa
-Citocromo oxidasa
-Solubilización de fosfato
-Sideróforos
Aislamiento
Colonias puras Extracción de muestras
Viñedo comercial cv. Malbec
1450m s.n.m
Siembra
Rz7M10
Rz1M10
Rz19M10
Rz2M10
Rz3M10
Rz8M10
Rt5M10
Rt6M10
Rt9M10
Rt17M10
Rt4M10
Resultados
Paenibacillus sp.
Bacillus sp.
Microbacterium sp.
Micrococcus sp.
Arthrobacter sp.
Pseudomonas sp.
Paenibacillus sp.
Planococcus sp.
Bacillus sp.
Bacillus sp.
Terribacillus sp.
Microbacterium sp.
Brachybacterium sp.
Micrococcus sp.
Arthrobacter sp.
Kocuria sp.
Pseudomonas sp.
99%
100%
Base de datos Nacional Center for
Biotechnology Information
Salomon et al. 2014. Phy Plant
Resultados
Aislamiento y caracterización de bacterias
- Parámetros crecimiento
- Metabolitos secundarios
(terpenos)
-Reguladores del crecimiento
30 días
Plantas de 15 días
Cultivo bacteriano
Respuesta fisiológica y metabólica de vid cv. Malbec
Desarrollo experimental
60 días
Estacas
In vitro
Maceta
PFT (g) PFA (g) PFR (g)
+ Pseudomonas sp. 1.26 ±0.55 a 0.73 ±0.26 a 0.53 ±0.30 a
+ Bacillus sp. 1.56 ±0.43 a 0.89 ±0.23 a 0.67 ±0.24 a
+ Microbacterium sp. 1.43 ±0.50 a 0.82 ±0.33 a 0.52 ±0.10 a
+ Terribacillus sp. 1.06 ±0.29 a 0.60 ±0.16 a 0.41 ±0.08 a
Control 1.22 ±0.45 a 0.70 ±022 a 0.51 ±0.26 a
+ Bacillus sp. Control
Los valores son medias ± SD; n=10. LB=Largo de brote; LR= largo de raíz; AF= área foliar; NºN= número de entrenudos;
LE= largo de entrenudos
LB (cm) LR (cm) AF (cm2) Nº N LE (cm)
+ Pseudomonas sp. 9.23 ±1.80 ab 9.04 ±2.70 b 6.68 ±1.89 ab 7.3 ±1.6 a 1.04 ±0.14 a
+ Bacillus sp. 10.43 ±1.80 a 13.70 ±1.20 a 7.72 ±1.85 a 8.3 ±1.3 a 1.16 ±0.19 a
+ Microbacterium sp. 8.76 ±1.07 b 11.62 ±3.55 ab 6.80 ±2.48 ab 7.9 ±1.7 a 1.06 ±0.22 a
+ Terribacillus sp. 7.76 ±1.10 b 10.36 ±1.80 b 6.17 ±1.42 b 7.3 ±1.4 a 1.01 ±0.16 a
Control 8.35 ±1.80 b 9.33 ±2.78 b 5.22 ±0.88 b 7.3 ±2.0 a 1.09 ±0.18 a
Peso Fresco Total
Peso Fresco Aéreo
Peso Fresco Raíz
Nº hojas
Long. Entrenudos
Pigmentos
30 dpb Ensayo in vitro
Crecimiento
Los valores son medias ± SD; n=10. PFT= Peso fresco total, PFA= Peso fresco aereo; PFR= Peso fresco radical
Resultados
Salomon et al. 2014. Phy Plant
PFT (g) PFA (g) PFR (g)
+ Pseudomonas sp. 175.41 ±0.55 ab 71.41 ±19.10 a 104.00 ±32.08 ab
+ Bacillus sp. 212.05 ±40.90 a 79.25 ±12.11 a 132.80 ±32.45 a
Control 164.31 ±46.19 b 70.31 ±9.49 a 94.00 ±22.64 b
p 0.1 0.5681 0.1
Ensayo en maceta
Crecimiento
PFT= Peso fresco total, PFA= Peso fresco aereo; PFR= Peso fresco radical
Resultados
ABA
30 d pb Hoja
+ Bacillus 3.93±0.75 a
+ Pseudomonas 2.10±0.26 b
Control 0.05±0.01 c
Defensa frente estrés hídrico Ensayo en maceta Ensayo in vitro
Análisis por GC-EIMS
Resultados
Salomon et al. 2014. Phy Plant
+ Bacillus + Pseudomonas sp.
79,68%
62,2 %
16,42%
453,85
658,21
99,5
218,98
12,35
426,54
5,05
8,74
0,98
0,47
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
20 dpb 30 dpb
µg g
-1 P
F h
oja
Eucaliptol
D-limoneno
4-Careno
Aldehído lilac A
Terpinoleno
α-Pineno
28,36%
170,84
104,93
35,2
47,84
3,59
5,73
4,78
10,19
0
50
100
150
200
250
20 dpb 30 dpb
µg g
-1 P
F h
oja
Aldehído lilac A
4-Careno
Terpinoleno
α-Pineno 214,41
570,75
Defensa frente a Patógenos
1313,92
79,52% 50,1%
168,7
Análisis por GC-EIMS
Monoterpenos Ensayo in vitro
17,43%
16,67%
32,46%
Resultados
Salomon et al. 2014. Phy Plant
1109,77
1918,85
1,32
14,28
0,97
10,63
0,84
3,4
0
500
1000
1500
2000
2500
20 dpb 30 dpb
α-Bergamoteno
Farnesol
α-Farneseno
Nerolidol
Sesquiterpenos Ensayo in vitro
+ Bacillus sp. + Pseudomonas sp.
562,26
954,5
0,62
4,6
0,12
1,88
0,04
0,65
0
500
1000
1500
2000
2500
20 dpb 30 dpb
µg g
-1 P
F h
oja
α-Bergamoteno
α-Farneseno
Farnesol
Nerolidol
99,26% 99,72%
98,55%
99,86%
563,04
961,63
1947,16
1112,9
Defensa frente a Patógenos
Resultados
Salomon et al. 2014. Phy Plant
µg g-1 PF Hoja
+ Bacillus sp. + Pseudomonas sp. Control
15 d 62 d 15 d 62 d
MONOTERPENOS
α-Pineno 340.19 ±35.83 b 120.26 ±23.69 b 1982.93 ±535.23 a 241.93 ±70.86 a Nd Nd
Eucaliptol 5.79 ±2.41 b 5.07 ±1.87 a 54.64 ±26.15 a 5.02 ±4.39 a Nd Nd
4-Careno - 0.68 ±0.70 a 25.56 ±5.42 ab 0.38 ±0.66 a Nd Nd
Terpinoleno 287.10 ±90.23 b 61.56 ±24.10 a 1291.47 ±21.57 a 86.05 ±16.75 a Nd Nd
SESQUITERPENOS
Nerolidol 206.38 ±57.00 b 78.08 ±26.77 b 677.45 ±169.97 a 138.47 ±15.84 a Nd Nd
Total 839.46 265.65 4032.05 471.85 Nd Nd
Monoterpenos y Sesquiterpenos Ensayo en maceta
Resultados
Defensa frente a Patógenos
63,3%
85,29%
91,83%
38,85%
48,56%
70,1%
75,01%
57,8%
14,04% 10%
Nerolidol
Pineno
Terpinoleno
Resultados
Defensa frente a Patógenos
Resultados
Defensa frente a Patógenos
+ Bacteria Control + B. cinerea
Salomon et al. 2015. Plant Physiol Biochem
Leaf extract
Concentración de ABA
en hojas
Tasa de pérdida de agua
Conductancia estomática
+ Bacillus sp. + Pseudomonas sp.
Monoterpenos y
Sesquiterpenos
en hojas
Inhibición de B. cinerea
Capacidad antioxidante
(Nerolidol y Terpinoleno)
Conclusiones
Muchas gracias
por su atención
Estudio de bacterias aisladas de raíces y
suelo aledaño de plantas de vid (Vitis
vinifera L.) capaces de proteger a la planta
ante contaminación con As
Dr. Iván Funes Pinter
Laboratorio de Bioquímica Vegetal
Instituto de Biología Agrícola de Mendoza-Facultad de Ciencias Agrarias
CONICET-UNCuyo
Metales pesados y metaloides
Introducción
Toxicidad del As
Similitud con el P
Alta afinidad con los grupos SH
Introducción
Arsénico en el ambiente
Fuente: Smedley et al. 2002
Arsénico en el ambiente
Fuente: Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires
Cuesta del Viento - Jáchal
Viñedo La Ciénaga
Arsénico en viñedos
Objetivo general Determinar la capacidad de bacterias PGPR de
reducir los efectos tóxicos y la concentración de AsIII en Vitis vinifera L. cv. Malbec.
As
Objetivos
http://elantroposofista.blogspot.com.ar
http://1.bp.blogspot.com/-IbWigUX4c2A/Uddxjpsc5AI/ AAAAAAAAFEQ/imLwemK5Phs/s1600/sanjuan_grande.jpg
Cuesta del viento Pachinoca
Viñedo Pachinoca
San José
de Jáchal Viñedo
Otra Banda
Río Jáchal Sur
Viñedo
La Falda
Cebollares
La Falda
Viñedo
Huaco
Viñedo
La Ciénaga
La Ciénaga
Río Jáchal
Río Huaco
San José de Jáchal, San Juan
Área de referencia
Plantación de vid
Suelos
Muestreo de suelo y material vegetal
Muestras de suelo
C.E. Extracto
(μS/cm)
Textura
pH
P
MO
Análisis edáfico fisicoquímico
pH 7,46 – 8,00
C.E. Extracto
(μS/cm)
Culto < 4000 Inculto > 4000
Textura Franco – areno franco
P Bajo
MO < 1% Alta
movilidad del As
Análisis edáfico fisicoquímico
Determinación de As por ICP-MS
Suelo
Vegetal
Digestión ácidos + H2O2
Determinación As en suelos y material vegetal de Jáchal
Contenido de As total en suelos de Jáchal
Lugar Profundidad
(cm) [As] (ppm)
Embalse Iglesia 15 cm 99,82 ±1,36
30 cm 125,71 ±2,34
Pachinoca 15 cm 48,07 ±19,85
30 cm 66,30 ±13,76
La Falda (Cebolla) 15 cm 71,18 ±5,57
30 cm 75,32 ±6,50
La Falda (Viñedo) 15 cm 81,70 ±2,14
30 cm 71,05 ±22,38
La Ciénaga (Viñedo) 15 cm 14,61 ±3,18
30 cm 13,66 ±1,04
La Ciénaga 15 cm 5,885 ±0,39
30 cm 5,31 ±0,16
Río Jáchal Sur 15 cm 6,59333 ±1,99
30 cm 7,38 ±0,28
Ley 24.585 de Protección Ambiental para la Actividad
Minera
Ley 24.051 Residuos Peligrosos Decreto 831/93
As 20 ppm Uso agrícola
Resultados
Contenido de As total en vid
Hoja
ap (H
)
Hoja
ba
(H)
Rac
(H)
Hoja
ap (L
C)
Hoja
ba
(LC)
Rac
(LC)
Hoja
ap (L
F)
Hoja
ba
(LF)
Rac
(LF)
Hoja
ap (O
B)
Hoja
ba
(OB)
Rac
(OB)
Hoja
ap (P
)
Hoja
ba
(P)
Rac
(P)
0
50
100
150
200
250 P(Lugar)=0.0001
P(Órgano)=0.4205
P(LugxOrg)=0.72169
a
abcab
bcdbcdebcde
cdecdecde
de de de
ee e
As
(p
pm
)
Límite CAA 100 ppb
Determinación As en suelos y material vegetal de Jáchal
Análisis elemental
Alta [As] en suelos
Análisis edáfico
Alta movilidad del As
Alta [As] en vid
Conclusiones
El contenido de As total en suelos de Jáchal supera los límites establecidos para uso agrícola.
As 100 ppm
Establecer niveles de referencia (Jáchal) de la concentración de As en suelos para ensayos con plantas de vid en maceta.
Conclusiones
Cepas pH [NaAsO2] (mM)
0 5 10 20 30 40
Arthrobacter parietes 7 +++ --- --- --- --- ---
9 +++ --- --- --- --- ---
Bacillus licheniformis 7 +++ +++ +++ +++ --- ---
9 +++ +++ +++ +++ ++- ---
Brachybacterium faecium 7 +++ +++ --- --- --- ---
9 +++ +++ +++ --- --- ---
Kocuria erythromyxa 7 +++ --- --- --- --- ---
9 +++ +-- --- --- --- ---
Microbacterium imperiale 7 +++ +++ --- --- --- ---
9 +++ +++ ++- --- --- ---
Micrococcus luteus 7 +++ +++ +++ +++ +++ ---
9 +++ +++ +++ +++ +++ ++-
Planococcus sp. 7 +++ +++ --- --- --- ---
9 +++ +++ --- --- --- ---
Pseudomonas fluorescens 7 +++ +++ --- --- --- ---
9 +++ +++ --- --- --- ---
Terribacillus saccharophilus 7 +++ +++ --- --- --- ---
9 +++ +++ --- --- --- ---
Selección de PGPR resistentes a As III
Producción de sideróforos - medio CAS modificado
Selección de PGPR resistentes a As III
Fijación de N2 - medio NFB
Selección de PGPR resistentes a As III
Solubilización de fosfato - medio NBRIP
Selección de PGPR resistentes a As III
Vitis vinifera L. cv. Malbec Medio MS + As 150 µM
• Bacillus licheniformis • Micrococcus luteus • Pseudomonas fluorescens
100 µL Cultivo 48 hs (106 UFC mL-1)
Inoculación de plantas in vitro
Biomasa de plantas inoculadas
-As +As
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2pAs= 0.0001
pBact= 0.1066
pAsxBact= 0.5753
aa
ab
bc
cd
d
dd
Pe
so
fre
sc
o t
ota
l (g
)
-As +As
0.0
0.2
0.4
0.6pAs= 0.0005
pBact= 0.0287
pAsxBact= 0.7704
a
ab
abc
bcbc
c
c
c
Pe
so
fre
sc
o d
e r
aiz
(g
)
PF total PF raíz
A
B
C
D
-As +As
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2pAs= 0.0001
pBact= 0.1066
pAsxBact= 0.5753
aa
ab
bc
cd
d
dd
Pe
so
fre
sc
o t
ota
l (g
)
-As +As
0.0
0.2
0.4
0.6pAs= 0.0005
pBact= 0.0287
pAsxBact= 0.7704
a
ab
abc
bcbc
c
c
c
Pe
so
fre
sc
o d
e r
aiz
(g
)
-As +As
0.0
0.2
0.4
0.6
0.8pAs= 0.0001
pBact= 0.3364
pAsxBact= 0.4947
bb
b
b
a
a
a
a
Pe
so
fre
sc
o b
rote
(g
)
-As +As
0.5
1.0
1.5
2.0pAs= 0.0001
pBact= 0.0222
pAsxBact= 0.3574
bc
ab
cc
a
ab
a
abRe
lac
ión
de
pe
so
ra
iz/b
rote
-As +As -As +As
40
60
80
100 pAs= 0.0001
pBact= 0.0025
pMto= 0.0001
pMtoxBact= 0.5040
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.1360
pMtoxAsxBact 0.9206
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
Inicio Final
a
abc
abc
cd
a
ab abababc
abcbcdbcdbcdbcd
d
dddd
d
Are
a f
oli
ar
(cm
2)
Inoculación de plantas in vitro
-As
+A
s
Control B. licheniformis M. luteus P. fluorescens
Inoculación de plantas in vitro
Conclusiones
Vitis vinifera L. cv. Malbec
Riego con H2O + NaAsO2
100 ppm
Asperjado cada 14 días
Bacterización en cuello cada 14
días
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
-As +As -As +As
40
60
80 pAs= 0.0001
pBact= 0.0001
pMto= 0.0001
pMtoxBact= 0.6613
pMtoxAs= 0.0025
pAsxBact= 0.3130
pMtoxAsxBact 0.9166
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
Inicio Final
a
bc
ab
abc abc
bcbc
cdcd
cde
abcabcbc
defefef
ff
fg
g
La
rgo
de
bro
te (
cm
)
-As +As -As +As
20
25
30
35
pAs= 0.0001
pBact= 0.0338
pMto= 0.0106
pMtoxBact= 0.6333
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.2762
pMtoxAsxBact 0.9534
abc
Inicio Final
a
ab
cdbcd
ab
abcd
ef
e
abc
abcd
cdcd
dededede
ef
e
e
N°
de
ho
jas
Largo de brote Cantidad de hojas
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Biomasa foliar Biomasa radical
-As +As
4
6
8
10
12
ab
cde
a
bcbc
cde
cde
cde
dede
pAs= 0.0001
pBact= 0.0390
pAsxBact= 0.5441P
es
o s
ec
o d
e r
aic
es
(g
)
-As +As
5
10
15
20
pAs= 0.0001
pBact= 0.4711
pAsxBact= 0.0933
cd
a
d
a
ab
ab
cd
d
d
Bio
ma
sa
fo
lia
r (g
)
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Control B. licheniformis M. luteus P. fluorescens Consorcio
Trat
amie
nto
s +A
s
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Peso de racimo Bayas por racimo
-As +As
0
10
20
30
40pAs= 0.0005
pBact= 0.1289
pAsxBact= 0.0263
a
ab
ab
abcabc
abcd
bcde
cde
de
e
Pe
so
fre
sc
o r
ac
imo
(g
)
-As +As
0
10
20
30
40
pAs= 0.0306
pBact= 0.3875
pAsxBact= 0.0108
a
ab
abc
abcd
ab
bcdbcd
cd
cd
d
N°
de
ba
ya
s p
or
rac
imo
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Control B. licheniformis M. luteus P. fluorescens Consorcio
Tratamientos + As
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Proteínas
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
-As +As -As +As
0
10
20
30
pAs= 0.0102
pBact= 0.3037
pMto= 0.0001
pMtoxBact= 0.9034
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.7071
pMtoxAsxBact 0.2335
a
bcbc
Inicio Final
aa
ab
aaaa
a
bcd
ab
cdcd
cd
de
ee
e
Co
nt
pro
t (u
g m
g-1
)
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
APX
-As +As -As +As
0
1000
2000
3000
4000
5000
pAs= 0.8759
pBact= 0.2042
pMto= 0.0001
pMtoxBact= 0.4485
pMtoxAs= 0.9937
pAsxBact= 0.3097
pMtoxAsxBact 0.2348
Inicio Final
abcd
abc
aaaa
ab
aaaaa
ef
bcd
cdecde
cdefdefdef
f
Ac
t A
PX
(µ
M m
in-1
mg
-1 p
rot)
CAT
-As +As -As +As
0
100
200
300
400
pAs= 0.4811
pBact= 0.9946
pMto= 0.0001
pMtoxBact= 0.0535
pMtoxAs= 0.8846
pAsxBact= 0.4788
pMtoxAsxBact 0.4034
ab
de
Inicio Final
abcd
abc
aaa
aa
abc
abc abc
abcdabcd
abcd
abcd
abcdebcdecde
cde
e
Ac
t C
AT
(µ
M m
in-1
mg
-1 p
rot)
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
POX
-As +As -As +As
0
50
100
150
200
pAs= 0.8239
pBact= 0.0001
pMto= 0.0002
pMtoxBact= 0.0450
pMtoxAs= 0.7491
pAsxBact= 0.6381
pMtoxAsxBact 0.7831
a
Inicio Final
ab
aaa
aaabcabcabcd
abcdabcd
abcdabcdabcd
cdbcd
de
ef
f
Ac
t P
OX
(µ
M m
in-1
mg
-1 p
rot)
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Peroxidación de lípidos
-As +As
0.12
0.14
0.16
0.18
0.20
a
pAs= 0.0121
pBact= 0.0001
pAsxBact= 0.7064
bcd
abc
cde
aab
abcd
dede
e
MD
A H
oja
(
mo
l g
-1 h
oja
)
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
-As +As -As +As
2000
4000
6000
8000
pAs= 0.0090
pBact= 0.0045
pMto= 0.0154
pMtoxBact= 0.1075
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.1336
pMtoxAsxBact 0.9536
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
a
bcd
ef
Inicio Final
b
bcdbc
cdef
bcde
bcdbcdbcdbcdbcd
bcde
bcdef bcdef
ff
def
PI
ab
s
Rendimiento fotosintético y vitalidad
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
-As +As
2.0
2.5
3.0
3.5
4.0
pAs= 0.0001
pBact= 0.0137
pAsxBact= 0.3014a
ab
cd
bc
bc
d
d
cd
cdcd
Ch
l to
tal (
g m
g-1
)
Clorofilas
-As +As -As +As
0.78
0.80
0.82
0.84
pAs= 0.0635
pBact= 0.0046
pMto= 0.0101
pMtoxBact= 0.0156
pMtoxAs= 0.0001
pAsxBact= 0.0059
pMtoxAsxBact 0.2818
bbc
P. fluorescensB. licheniformisControl ConsorcioM. luteus
b
c
bb
a
bbcbc
bc
bc
Inicio Final
b b
bcbcbc
bcbcbc
Fv/F
m
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Contenido de As
Hojas
ContA
s
BliA
s
Mlu
As
PflA
s
ConsA
s
0
20
40
60
a
bb
c
c
As
en
ho
jas
(p
pm
)
LD: 0,05 μg L-1
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Contenido de As
Bayas
ContA
s
BliA
s
Mlu
As
PflA
s
ConsA
s
0
5
10
15
20
a
bb
b
b
As
en
ba
ya
s (
pp
m)
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
La bacterización con las PGPR seleccionadas disminuyen los efectos tóxicos del metaloide en plantas de vid.
Incremento de proteínas, actividad antioxidante, clorofilas y fotosíntesis
BIOMASA
Inoculación de plantas de vid con PGPR resistentes a As III
Discusión y perspectivas
Jáchal
Alta [As] en suelos y plantas
¡¡¡Necesario realizar tareas de
remediación!!!
Discusión y perspectivas
Bacillus licheniformis
Micrococcus luteus
Pseudomonas fluorescens
Producción de sideróforos
Fijación de N2
Solubilización de fosfatos
Discusión y perspectivas
AsIII Proteínas
Actividad antioxidante
Biomasa
Clorofilas
Fotosíntesis
MDA
Discusión y perspectivas
• Bacillus licheniformis • Micrococcus luteus • Pseudomonas fluorescens
Proteínas
Actividad antioxidante
Biomasa
Clorofilas
Fotosíntesis
MDA
Discusión y perspectivas
• Bacillus licheniformis • Micrococcus luteus • Pseudomonas fluorescens
Reducen efectos tóxicos del AsIII en
vid
Candidatos para agentes de
biorremediación
Discusión y perspectivas
• La inoculación con el consorcio fue el tratamiento que incrementó la biomasa en mayor medida
• Micrococcus luteus reduce el contenido de As en la baya
Consorcio con mayor proporción de M. luteus
Discusión y perspectivas
Identificar mecanismos
• Determinaciones de ABA • Especiación del As en la planta y el
efecto de las bacterias
• Cantidad de bacterias, tiempos y formas de aplicación
Aplicación en viñedo
Discusión y perspectivas
Muchas gracias
por su atención
Contactos
Laboratorio de Bioquímica Vegetal
Instituto de Biología Agrícola de Mendoza-Facultad de Ciencias Agrarias
CONICET-UNCuyo
Top Related