8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
1/15
LAPORAN
IDENTIFIKASI MIKROORGANISME BERDASARKAN MORFOLOGI
DAN REAKSI BIOKIMIA
Oleh:
Kelompok A – 3
Tsulsiyh !h"oh Pu#"i $%&''%(%(%()%*
Fe+i Puspi# De,i $%&''%(%(%()3*
-i.y+i+/ D,i As#u#i $%&''%(%(%())*
Lu"esi 0e+y $%&''%(%(%()1*
2e"o+i Bu.i M/4i"oh $%&''%(%(%()5*
E6 -ul+."i $%&''%(%(%(73*
Risk Ill 8 $%&''%(%(%(7)*
I+#+ Fh"i S6i#"i $%&''%(%(%(75*
A+9" Ri+ Rhyu $%&''%(%(%(1%*
Mil Nu" Aih $%&''%(%(%(13*
Mo+i 8i+u".h AS $%&''%(%(%(1)*
A.i+. N.i Nu4li $%&''%(%(%(15*
LABORATORI;M BIOLOGI FARMASI
FAK;LTAS FARMASI
;NI2ERSITAS 0EMBER
'(%)
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
2/15
BAB I
PENDA
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
3/15
%.+. emahami sifat bakteri-bakteri yang dapat diidentifikasi dengan
media selektif.
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
4/15
BAB II
TIN0A;AN P;STAKA
'=% I.e+#i4iksi >k#e"i >e".s"k+ mo"4olo/i
opulasi bakteri tumbuh sangat cepat ketika mereka disertakan dengan
gii dan kondisi lingkungan yang memungkinkan mereka untuk berkembang.
elalui pertumbuhan ini, berbagai !enis bakteri kadang-kadang akan
menghasilkan koloni yang khas dalam penampilan. Beberapa koloni mungkin
akan berarna, ada yang berbentuk lingkaran, sementara yang lain tidak
teratur. arakteristik koloni (bentuk, ukuran, arna, dll) yang diistilahkan
sebagai 0koloni morfologi1. orfologi koloni adalah cara para ilmuan dapat
mengidentifikasi bakteri. orfologi koloni dapat ditin!au dari berbagai aspek
yaitu : shape (bentuk), edge (tepi 2 pinggir), ele3ation (ketinggian), sie
(ukuran), surface (permukaan), consistency (kekentalan 2 kepadatan), odor
(bau), opacity (transparansi) dan chromogenesis (pigmentasi).
'=' I.e+#i4iksi >k#e"i >e".s"k+ u9i >iokimi
&!i biokimia bakteri merupakan suatu cara atau perlakuan yang
dilakukan untuk mengidentifikasi dan mendeterminasi suatu biakan murni
bakteri hasil isolasi melalui sifat - sifat fisiologinya. Suatu bakteri tidak dapat
dideterminasi hanya berdasarkan sifat-sifat morfologinya sa!a, sehingga perlu
diteliti sifat-sifat biokimianya dan faktor-faktor yang mempengaruhi
pertumbuhannya.
Berikut beberapa u!i Biokimia yang digunakan untuk identifikasi
bakteri antara lain:
%. 4eaksi 5ermentasi arbohidrat (6ula-gula)
5ermentasi merupakan salah satu akti3itas biokimia yang
dilakukan oleh mikroba. 5ermentasi adalah proses pengubahan senyaa
makromolekul organik men!adi senyaa yang lebih sederhana oleh
akti3itas mikrobia pada kondisi anaerob.5ermentasi dapat menghasilkan
berbagai senyaa akhir, contohnya fermentasi karbohidrat yang dapat
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
5/15
menghasilkan berbagai senyaa asam seperti asam laktat dan propionet,
ester-ester, keton dan gas (elcar, #$$7).
#. &!i katalase
&!i katalase merupakan suatu pengu!ian terhadap bakteri tertentu
untuk mengetahui apakah bakteri tersebut merupakan bakteri aerob,
anaerob fakultatif, atau anaerob obligat. 8an digunakan unrtuk mengetahui
kemampuan mikroorganisme untuk menguraikan hydrogen peroksida
dengan menghasilkan enim katalase. Bakteri yang memerlukan oksigen
manghasilkan hidrogen peroksida (#O#) yang sebenarnya beracun bagi
bakteri sendiri. 9amun mereka dapat tetap hidup dengan adanya
antimetabolit tersebut karena mereka menghasilkan enim katalase yang
dapat mengubah hidrogen peroksida men!adi air dan oksigen dengan
reaksi sebagai berikut :##O ##O O# (;olk dan
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
6/15
BAB III
METODE KER0A
3=% -k#u .+ Temp# Pelks++ P"k#ikum
ari, tanggal : Senin, > 9o3ember #$%>
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
7/15
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
8/15
Pseudomonas
aeruginosa
edia Escherich
ia coli
Staphyloc
occus
aureus
Bacillus
subtilis
Kleb.
pneumoniae
Strep α
haemolyti
cus
ac "onkey
E.coli
Kleb pneumonia
engkilat
, arna
agar
men!adi
merahkarena E.
coli
emecah
laktosa
- - engkilat,
diameter #
mm, arna
agar
men!adikemerahan,
con3eE
-
B' engkilat Suram
(bakteri
tumbuh
dalam
engkilat
, ada ona
bening
- Bentuk
irreguler,
mengkilat,
Bentuk effuse, arna agar !adi hi!au
kebiruan
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
9/15
media
B')
con3eE
edia amilum agar Setelah
ditetesi
iodium
tidak
ter!adi
perubaha
n
- Setelah
ditetesi
iodium,
arna
koloni
bakteri
berubah
men!adi
kuning
keemasan
- -
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
10/15
Skim milk agar - - Suram,
ada ona
beningkarena
bakteri
Bacillus
subtilis
bersifat
proteolitik
- -
&=' Pem>hs+
&='=% Pe">e.+ se#ip y+/ .i/u+k+
edia ac "onkey meruapakan media selektif dan diferensial
yang mempunyai keistimeaan memilah bakteri enteric gram
negatif dari campuran bakteri yang memfermentasikan laktosa,
karena dalam ac "onkey agar terdapat laktosa crystal 3iolet dan
neural red bile salt. Sehingga media ini dapat membedakan bakteriyang memfermentasi laktosa berupa koloni berarna merah muda
dan nonfermentasi laktosa koloni tidak berarna. omposisi media
ac "onkey antara lain :
%. %7 gram/C ancreatic 8igest of 6elatin
#. %$/C Cactose
+. %,>/C ancreatic 8igest of "asein
. %/C "rystal ;iolet
>. %,>/C eptic 8igest of 'nimal issue
@. >/C Sodium "hloride
7. +$ mg/C9eutral 4ed
F. %,>/C Bile Salt iEture
edia B' (Blood 'gar late)
edia agar darah disebut media uni3ersal karena dapat digunakan
untuk menumbuhkan beragam !enis bakteri. edia agar darah !uga
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
11/15
dapat membedakan bakteri hemolitik dan bakteri non hemolitik,
yang ditandai oleh adanya ona (halo) disekitar koloni .edia B'
(Blood 'gar late) digunakan sebagai media isolasibakteri coccus
gram positif.
edia 'milum 'gar
edia amilum agar merupakan media yang dibuat dengan bahan
padat yaitu amilum. edia ini digunakan untuk u!i hidrolisis
amilum dari bakteri yang mampu memproduksi G-amilase sehingga
mampu menguraikan amilum dengan eksoenim amilolitik. ati
yang terhidrolisis di sekeliling koloni akan membentuk areal bening. Sedangkan pati yang tidak terhidrolisis akan
memnghasilkan arana biru tua apabila ditetesi dengan yodium %
H.
edia Skim ilk 'gar
edia skim milk agar merupakan media yang terdiri dari "'
steril dan susu skim. Susu skim digunakan sebagai sumber substrat.
Susu skim merupakan susu yang mengandung protein tinggi +,7H
dan lemak $,%H. Susu skim mengandung kasein sebagai protein
susu dimana akan dipecah oleh mikroorganisme proteolitik men!adi
senyaa nitrogen terlarut sehingga pada koloni dikelilingi area
bening yang menun!ukkan mikroba tersebut memiliki akti3ita
sproteolitik.
edia skim milk mempunyai komposisi > gram kasein, #.> gram
ekstrak yeast, % gram skim milk agar, % gram glukosa, dan %$.>
gram agar.
&='=' Pe">e.+ me.i umu+ .+ me.i selek#i4
edia selektif ( selective media) adalah media formulasi untuk
menghambat pertumbuhan mikroba tertentu dan menumbuhkan
mikroba yang diinginkan. edia selektif pada dasarnya adalah
media untuk mikroba yang diinginkan ditambah faktor penghambat
untuk mikroba lain yang dapat hidup di media sama. edia selektif
bermanfaat untuk menyeleksi mikroba tertentu (khususnya galur
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
12/15
tertentu). 8iantara media yang digunakan dalam praktikum yang
termasuk media selektif adalah media ac "onkey.
edia umum adalah media yang digunakan untuk menumbuhkan
satu atau lebih kelompok mikroba secara umum. edia umum
mengandung at-at yang umum diperlukan oleh sebagian besar
mikrooganisme dan dipakai !uga sebagi komponen dasar untuk
membuat media pembiakan lain. 8iantara empat media yang
digunakan dalam praktikum yang termasuk media umum adalah
media B' (blood agar palte).
&='=3 Reksi y+/ #e"9.i p. se#ip me.i selek#i4
Iang termasuk media selektif dari keempat media yang digunakan
dalam praktikum ini adalah media ac "onkey. 4eaksi yang ter!adi
pada media ac "onkey adalah pemecahan laktosa. elalui reaksi
pemecahan laktosaini dapat dibedakan antara bakteri gram negatif dan
gram positif melalu reaksi pemecahan laktosa. bakteri yang
memfermentasi laktosa berupa koloni berarna merah mudasedangkan bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa tidak
berarna.
&='=& Bk#e"i y+/ .p# .ii.e+#i4iksi .e+/+ me.i selek#i4
edia selektif pada praktikum kali iniadalh media ac "onkey.
Bakteri yang dapat diidentifikasi dengan media ac "onkey adalah
bakteri gram negatif yang mempunyai kemampuan memfermentasi
glukosa. oloni bakteri memfermentasikan laktosa berarna merah
bata dan dapat dikelilingi oleh endapan garam empedu. Jndapan ini
disebabkan oleh penguraian laktosa men!adi asam yang akan bereaksi
dengan garam empedu.Bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa
biasanya bersifat patogen. 6olongan bakteri ini tidak memperlihatkan
perubahan pada media. Ani berarti arna koloninya sama dengan
arna media.
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
13/15
Beberapa contoh pertumbuhan koloni pada ac "onkey 'gar :
Salmonella dan Shigella : serupa media
Escherichia coli: merah dikelilingi ona keruh
Enterobacter dan Klebsiella : merah muda dan mukoid
Enterococcus dan Staphylococcus : kecil dan tidak terang tembus
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
14/15
BAB 2
PEN;T;P
)=% Kesimpul+
8ari prktikum yang dilakukan, diperoleh kesimpulan sebagai berikut :
• 'da media yang digunakan dalam identifikasi mikkrooganisme
dalam praktikum kali ini, yaitu media ac "onkey, media B',
media amilum agar, dan skim milk agar.
• 8ari keempat media yang termasuk media selektif adalah media
ac "onkey dan yang termasuk media umum adalah media B'.
)=' S"+
8ari praktikum yang dilakukan diperoleh kesimpulan berikut ini:
• &ntuk keselamatan ker!a setiap praktikan dia!ibkan untuk
mematuhi tata tertib dan tata ker!a di laboratorium mikrobiologi,
• engenalan alat dan bahan sangat berguna bagi praktikan untuk
melakukan berbagai praktikum, khususnya praktikum
mikrobiologi,
• rosedur-prosedur seperti sterilisasi merupakan prosedur yang
harus dilakukan dalam setiap praktikum mikrobiologi.
8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc
15/15
DAFTAR P;STAKA
"olome, DS. Jt al. #$$%. Laboratory Exercises in Microbiology.
Top Related