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INMUNOHEMATOLOGIAAPLICADO A MEDICINA TRANSFUSIONAL
TM. EFRAIN MONTES HIJARHOSPITAL IV ESSALUD HUANCAYO UPLA FARMACIA Y BIOQUIMICA 2010
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GRUPOS SANGUINEOSAPLICACIONES
CLÍNICATransfusiones
Incompatibilidad materno-fetal - EHRN
Transplantes
MEDICINA LEGALExclusión de paternidad
Investigaciones forenses (manchas de sangre, semen)
ANTROPOLOGÍAMarcadores antropológicas de migraciones
En estudios de poblaciones antiguas
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Consideraciones generales
Documentacion y archivo
Tiempo de archivoDocumento de
identificacion del paciente
SolicitudNecesidades
individuales
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OBJETIVOS
Transfusión ABO Compatible
Detectar Anticuerpos en el Receptor
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documentacion
Fecha y hora recepción
Fecha y hora de las pruebas
Identificacion del personal profesional
Componentes sanguineos
Sistema computarizado Sistema ABO,Rh,
problemas de anticuerpos,historia transfusional
Los resultados e interpreatacion deben ser documentados en hojas de trabajo manuales
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LIMITACIONES
No Garantiza– Sobrevida de GR
Transfundidos– Inmunización del
Receptor– Errores en tipaje
ABO– Errores tipaje Rho
No Previene– Reacciones
hemoliticas tardías
– Reacciones febriles
– errores secretariales
– Acs leucocitarios, plaquetarios o plasmaticos
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Fases de P.C.
Identificación del Paciente y colección muestra
Estudio ReceptorSelección de SangrePruebas CruzadasReidentificacion
Receptor y control de la Transfusión
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Requisitos de la muestra
Tipo de muestra
suero: neutralizacion
plasma: coagulos de fibrina
la formacion de pilas celulares
Se recomienda: sueros de muestras coaguladas obtenidas con tubos lisos siliconizados, sin gel para separar suero.
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aspecto
Hemolisis
la utilizacion de suero con hemolisi puede enmascarar hemolisis inducida por anticuerpos.
Lipemia: raramente causa dificultades no es causa de rechazo en una prueba pre tansfusional.
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Antigüedad de la muestra
Según AABB( Menitove 1997)Todas las pruebas deben ser completadas
dentro de las 72 horas.El requerimiento de una nueva muestra de
prueba cruzada en pacientes transfundidos y embarazos es bastante representativos despues de 72 horas.
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Almacenamiento de la muestra
Toda muestra pretransfusional deben ser almacenadas de 1 a 6°c durante al meenos 7 días despues que las pruebas se han completado.
Esto para repetir o realizar pruebas adicionales del donante o el receptor
P ejemp. Anemia hemolítica retardada u otro efecto adverso.
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Seguridad en el laboratorio
cumplir con normas de bioseguridad.
Guardar todos los resultados de qc. De reactivos, componentes sanguineos,
Pruebas de escrutinio de agentes infecciosos.
Actas de eliminación de unidades infestadas
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METODOS
Equipamiento:
portaobjetos o tablas,tubos de ensayo,placas de microtitulación,o técticas de microtipificacion en gel.
Estos procedimientos pueden ser:
Semi automáticos, o completamente automáticos
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incubacion
Muchas pruebas de rx Ag –Abs requieren
incubacion a 37°c rutinariamente}
Normalmente el tiempo es de 15 minutos
Sin potenciadores se realiza en 60 minutos
El uso de solucion liss pueden reducir el tiempo de incubacion de 5 a 10 minutos
.
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centrifugacion
Es el paso finalEl tiempo se determina previa
estandarizacion y calibracion del equipoLa velocidad debe ser controlado
periodicamente.
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Identificación Receptor
Paciente debe ser identificado
Muestras rotuladas a pie de cama
Muestras No deben proceder de líneas de infusión
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Estudio del Receptor
Verificar paso anterior Determinar ABO -Rho Test de Coombs Directo Test de Coombs Indirecto Ver Registros anteriores
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Primera Segunda Tercera0 0A A 0A2 A2 0B B 0
AB AB A o B 0A2B A2B A2 o B 0
Grupo Receptor
Alternativas
SELECCIÓN DE SANGRE PARA TRANSFUSION
* Debe respetarse el Factor Rho** La serología debe ser No Reactiva*** Realizar el TCD y guardar piloto
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PRUEBAS CRUZADAS
PRUEBA CRUZADA MAYOR– Glóbulos rojos del Donate
Vs Suero del Receptor
PRUEBA CRUZADA MENOR– Glóbulos Rojos del
Receptor Vs Suero del Donante
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PRUEBA DE COOMBS DIRECTA
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PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA
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REIDENTIFICACION Y CONTROL TRANSFUSION
Historia TransfusiónVerificar identidad
receptor Inspeccionar
componenteFirmar hoja
transfusión control 15 min.
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OTRAS CONSIDERACIONES
Situaciones Especiales: EmergenciasTransfusión MasivaTransfusión Intrauterina y Recién NacidosPrueba Cruzada Menor
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RECOMENDACIONES PARA EL LABORATORIO DE INMUNOHEMATOLOGIA
En punciones de dedo: limpiar con agua, realizar un corte profundo para que la sangre fluya fácilmente.
Usar material bien limpio y desengrasado.
Controlar la temperatura de trabajo.
Utilizar antisueros de título elevado.
Sistema ABO: realizar pruebas directa e inversa.
Sistema Rh: realizar la determinación por duplicado, por técnicos diferentes.
Recordar que el uso de GR lavados, aunque técnicamente más laborioso, permite eliminar interferentes.
Prueba de secretores puede ayudar a confirmar resultados.
Interferencia de hemólisis: incubar los sueros a 56°C, 30 min, para inactivar el complemento.
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ANOMALÍAS EN LAS DETERMINACIONES DE GRUPOS SANGUINEOS
EN PRUEBA DIRECTA (ABO y RH):· Resultados falsos: GR modificados por enzimas bacterianas (ausencia de Ag), Ag
distintos de ABO (Prueba inversa con panel de GR)
· a) Células de cordón umbilical: interferencia de proteína de Wharton. b) Disproteinemias (mielomas) o proteínas anómalas
(Células lavadas o prueba de hialuronidasa)
· Autoaglutinación: enfermedades autoinmunes, GR sensibilizados (Control de GR en su propio plasma o suero, Prueba de Coombs directa)
a) Subgrupos débiles, en particular, los de A o AB. b) Antígenos debilitados por procesos patológicos (pérdida de características en procesos neoplásicos, mutaciones en enfermedades mieloproliferativas)
(Pruebas en tubo, utilización de técnicas más sensibles, estudio de secreciones)
· Elevada concentración de sustancias A o B solubles en el suero de pacientes con carcinoma de estómago (neutralización del suero tipificador con producción de reacciones muy débiles).
(Células lavadas)
· Herencia anormal (Estudio familiar)
· Problemas técnicos: inadecuada temperatura de reacción, escasos GR, lectura después del tiempo recomendado, presencia de elementos extraños, antisueros vencidos
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EL PRESENTE Y FUTUROType and ScreeningPrueba Cruzada ElectrónicaEmpleo de Substitutos eritrocitarios
– O-poly Hb, FluorocarbonosEmpleo de Anticuerpos monoclonalesModificación Bioquímica de Grupo
SanguíneoUtilización Tecnología recombinante