Casos de Inmunohematología
Cuando todo aglutina…..
Virginia Callao Molina
D C c E e K k S s AHG
1 + + 0 0 + + + 0 + +
2 + + 0 0 + 0 + 0 + +
3 + 0 + + 0 + + + 0 +
4 + 0 + + 0 0 + + + +
5 0 0 + 0 + 0 + 0 + +
6 0 0 + 0 + + + 0 + +
7 0 0 + 0 + 0 + + 0 +
Panaglutinación
PANAGLUTINACIÓN
ENZIMAS
PANAGLUTINACIÓN AUTO
pos
AUTO neg
ENZIMAS
PANAGLUTINACIÓN AUTO
pos
COOMBS D pos
COOMBS D neg
-Autoanticuerpo -Reactividad tarjeta
-Autoanticuerpo - Alos ocultos
AUTO neg
PATRÓN HETEROGÉNEO
PATRÓN HOMOGÉNEO
- Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia - Mezcla de anticuerpos
- Mezcla de anticuerpos - Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia
ENZIMAS
ENZIMAS
PANAGLUTINACIÓN AUTO
pos
COOMBS D pos
COOMBS D neg
-Autoanticuerpo -Reactividad tarjeta
-Autoanticuerpo
AUTO neg
PATRÓN HETEROGÉNEO
PATRÓN HOMOGÉNEO
- Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia - Mezcla de anticuerpos
- Mezcla de anticuerpos - Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia
Unos ejemplos…
Rafaela
Paciente de 51 años. HEMORRAGIA SUBDURAL. TRANSFUSIONES PREVIAS: 21/06/2013 Envían muestra día 1/diciembre/2013
Al realizar el estudio de anticuerpos irregulares: las tres células positivas
Rafaela
Rafaela
Panaglutinina homogénea. Se potencia en enzimas Autocontrol negativo
PRUEBA DIRECTA ANTIGLOBULINA NEGATIVA.
Rafaela
Rafaela
Cual es la sospecha diagnóstica?
1.Mezcla de aloanticuerpos
2.Aloanticuerpo frente a antígeno de alta incidencia
3.Son ciertas 1 y 2
4.Autoanticuerpo
PANAGLUTININA HOMOGÉNEA. Se potencia con enzimas AUTOCONTROL NEGATIVO. PDAG NEGATIVA
Rafaela
Cual es la sospecha diagnóstica?
1.Mezcla de aloanticuerpos
2.Aloanticuerpo frente a antígeno de alta incidencia
3.Son ciertas 1 y 2
4.Autoanticuerpo
PANAGLUTININA HOMOGÉNEA. Se potencia con enzimas
AUTOCONTROL NEGATIVO. PDAG NEGATIVA
PANAGLUTINACIÓN AUTO
pos
COOMBS D pos
COOMBS D neg
-Autoanticuerpo -Reactividad tarjeta
-Autoanticuerpo
AUTO neg
PATRÓN HETEROGÉNEO
PATRÓN HOMOGÉNEO
- Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia - Mezcla de anticuerpos
- Mezcla de anticuerpos - Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia
ENZIMAS
Rafaela
Qué técnica sería la mas adecuada para completar el estudio? 1. Autoadsorciones
2. Aloadsorciones diferenciales
3.1 y 2 son correctas
4. Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
Rafaela
Qué técnica sería la mas adecuada para completar el estudio? 1. Autoadsorciones
2. Aloadsorciones diferenciales
3.1 y 2 son correctas
4. Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
Panel para adsorción alogénica
anti –Fyª (tapado Kpa)
rr
anti –S y anti –Kpª R2R2
anti –c
(tapado Kpa+S)
R1R1
ALOADSORCIONES DIFERENCIALES
Rafaela
Rafaela
Sospecha:
Mezcla de aloanticuerpos convencionales:
anti-S, -c, -Fya y -Kpa
Qué prueba es imprescindible para confirmar el estudio? 1.Eluido de las células de adsorción
2.Fenotipo eritrocitario
3.Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
4.Conocer el fenotipo de los hematíes transfundidos
Rafaela
Sospecha:
Mezcla de aloanticuerpos convencionales:
anti-S,- c, -Fya y -Kpa
Qué prueba es imprescindible para confirmar el estudio? 1.Eluido de las células de adsorción
2.Fenotipo eritrocitario
3.Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
4.Conocer el fenotipo de los hematíes transfundidos
Rafaela
R1R1 Kell + Cw- Jka+ JKb-
M+N+P1- Fya- Fyb+ S- s+ Kpa- Kpb+
Fenotipo eritrocitario Rafaela
Qué prueba nos puede ayudar? 1.Eluido de las células de adsorción
2.Fenotipo eritrocitario
3.Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
4.Conocer el fenotipo de los hematíes transfundidos
Rafaela
Con estos datos, no podemos descartar absolutamente la presencia de un
anticuerpo contra antígeno de alta incidéncia
Qué prueba nos puede ayudar? 1.Eluido de las células de adsorción
2.Fenotipo eritrocitario
3.Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
4.Conocer el fenotipo de los hematíes transfundidos
Rafaela
Con estos datos, no podemos descartar absolutamente la presencia de un
anticuerpo contra antígeno de alta incidéncia
Eluido de las células de adsorción R1R1 (Fya pos): Anti-Fy(a). No hay una panaglutinina Se descarta la presencia de ac. contra antígeno de alta incidencia
Rafaela
Revisamos transfusión día 21/06/2013 1 unidad de hematíes con fenotipo: DCcee Kell-, Fy(a+b+), MMSs, JK(a-b+), Le (a-b+), P1+
Rafaela
Diagnóstico: Mezcla de aloanticuerpos Anti –c, anti –Fya, anti –S, anti –Kpa.
Nuevo estudio 7-enero-2014: anti-JK(b)
Sofía
Sofía 84 años. Anemia macrocítica. Transfusión Abril 2013 (estudio previo negativo) 8/10/2013: Hb: 8,8g/dl. Grupo O pos SCR+ (1-2+-2)
Sofía
Panel AHG: panaglutinina heterogénea (3 células mas intensas).
ANTI-KELL ??
Autocontrol
NEGATIVO
Sofía
Enzimas: desaparece todo menos 3 células
ANTI-KELL ??
Sofía
PDAG negativa
Sofía
PANAGLUTININA HETEROGENEA QUE DESAPARECE EN
ENZIMAS + probable ESPECIFICIDAD ANTI-K
AUTOCONTROL NEGATIVO. PDAG NEGATIVA
Cual es la sospecha diagnóstica?
1.Mezcla de aloanticuerpos
2.Aloanticuerpo frente a antígeno de alta incidencia
3.Son ciertas 1 y 2
4.Autoanticuerpo
Sofía
PANAGLUTININA HETEROGENEA QUE DESAPARECE EN
ENZIMAS + probable ESPECIFICIDAD ANTI-K
AUTOCONTROL NEGATIVO. PDAG NEGATIVA
Cual es la sospecha diagnóstica?
1.Mezcla de aloanticuerpos
2.Aloanticuerpo frente a antígeno de alta incidencia
3.Son ciertas 1 y 2
4.Autoanticuerpo
PANAGLUTINACIÓN AUTO
pos
COOMBS D pos
COOMBS D neg
-Autoanticuerpo -Reactividad tarjeta
-Autoanticuerpo
AUTO neg
PATRÓN HETEROGÉNEO
PATRÓN HOMOGÉNEO
- Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia - Mezcla de anticuerpos
- Mezcla de anticuerpos - Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia
ENZIMAS
Sofía
Qué técnica sería la mas adecuada para completar el estudio? 1.Aloadsorciones diferenciales
2.Autoadsorciones
3.Elución-adsorción
4.Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
Sofía
Qué técnica sería la mas adecuada para completar el estudio? 1.Aloadsorciones diferenciales
2.Autoadsorciones
3.Elución-adsorción
4.Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
Panel para adsorción alogénica
Sofía Aloadsorciones diferenciales
Sobrenadante Células R1R1
Kell POS
Sobrenadante Células R2R2 y rr
Kell NEG
Sofía. Adsorbidos frente a células R2R2 y rr.
ANTI-KELL
Sofía Tras aloadsorciones diferenciales… -Anti-Kell
-Reactividad que desaparece con las tres células
Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia que desaparece en enzimas
JMH, Gerbich 2,3,
Chido-Rodgers, Inb, Yta
Sofía
Qué prueba debemos realizar para confirmar el estudio? 1.Eluido de las células de adsorción
2.Fenotipo eritrocitario
3.La 2 y la 4 son correctas
4.Neutralización con plasma normal
Sofía
Qué prueba debemos realizar para confirmar el estudio? 1.Eluido de las células de adsorción
2.Fenotipo eritrocitario
3.La 2 y la 4 son correctas
4.Neutralización con plasma normal
Sofía. Fenotipo eritrocitario
CDEce, K- k+,P1+,
Le(a-b+), Lu(a-b+)
Kp(a-b+), Jk(a+b+),
MMss, Fy(a+b+),
Yta+, Lan+, JMH+
Neutralización
con plasma normal
(frente a hematíes
Kell neg)
Sofía
Desaparece la
reactividad !!
Neutralización con plasma: desaparece la reactividad Que sugiere este estudio? 1.Anticuerpos anti Chido-Rodgers
2.Anticuerpos anti-JMH
3.Anticuerpos anti-HLA
4.Ninguno de ellos
Sofía
Neutralización con plasma: desaparece la reactividad Que sugiere este estudio? 1.Anticuerpos anti Chido-Rodgers
2.Anticuerpos anti-JMH
3.Anticuerpos anti-HLA
4.Ninguno de ellos
Sofía
Una de las unidades transfundidas en abril-
13: Kell positivo
Sofía
CONCLUSION DIAGNÓSTICA
-Anti-Kell
-Anti-Chido Rodgers
Sofía Qué medidas hay que tomar si nos piden transfusión de hematíes para Sofía?
1. Buscar entre los familiares inmediatos o proponer
Autotransfusión.
2. Seleccionar hematíes Kell neg, con PC compatible
cuando sea posible.
3. Transfundir a pesar de que la PC sea incompatible, ya que
los ac anti-Chido Rodgers no tienen significado clínico.
4. La 2 y la 3 son ciertas.
Sofía Qué medidas hay que tomar si nos piden transfusión de hematíes para Sofía?
1. Buscar entre los familiares inmediatos o proponer
autotransfusión
2. Seleccionar hematíes Kell neg, con PC compatible
cuando sea posible.
3. Transfundir a pesar de que la PC sea incompatible, ya que
los ac anti-Chido Rodgers no tienen significado clínico
4. La 2 y la 3 son ciertas
Sistema Chido/Rodgers Antígenos
Los antígenos del sistema Chido/ Rodgers no son verdaderos
antígenos eritrocitarios.
Se localizan en un fragmento del componente 4 del complemento
(C4d), que se adsorbe a los glóbulos rojos desde el plasma.
Su expresión sobre los hematíes es inhibida si se tratan con
enzimas.
El 95% de individuos de raza blanca son Ch+Rg+.
Sistema Chido/Rodgers
Anticuerpos
Los anticuerpos frente a los antígenos Chido/Rodgers no se
han relacionado con reacciones hemolíticas transfusionales ni
EHFRN, pero complican las pruebas inmunohematológicas.
Tienen un comportamiento de HTLA y su reactividad
desaparece en enzimas.
La unión de los anticuerpos a los hematíes es rápidamente
inhibida al añadir plasma de individuos Ch+Rg+.
Carlos
Carlos
Paciente pendiente de trasplante hepático.
VHC. HIV. Politransfundido.
Ultima transfusión: Octubre 2014
Antecedentes de alo anti-C
Muestra enviada en Febrero-2015. Sospecha de AHAI. Hb: 5gr/dl PANAGLUTINACIÓN HOMOGÉNEA. AUTOCONTROL POSITIVO
Carlos
SE POTENCIA EN ENZIMAS
Carlos
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
2+
4+
4+
4+ 4+ 4+ 4+
4+ 4+ 4+ 4+ 4+
2+ 4+ AUTOCONTROL
Carlos
Panaglutinina homogénea
Autocontrol POSITIVO
Se potencia en enzimas
PRUEBA DIRECTA DE
ANTIGLOBULINA
POSITIVA POR IgG
Carlos
Ante una panaglutinación con auto + y PDAG positiva, cual es la sospecha diagnóstica? 1.Aloanticuerpo contra antígeno de alta incidéncia
2.Autoanticuerpo
3.Mezcla de aloanticuerpos
4.Autoanticuerpo que puede ocultar aloanticuerpos
Carlos
Ante una panaglutinación con auto + y PDAG positiva, cual es la sospecha diagnóstica? 1.Aloanticuerpo contra antígeno de alta incidéncia
2.Autoanticuerpo
3.Mezcla de aloanticuerpos
4.Autoanticuerpo que puede ocultar aloanticuerpos
Carlos
PANAGLUTINACIÓN AUTO
pos
COOMBS D pos
COOMBS D neg
-Autoanticuerpo -Reactividad tarjeta
-Autoanticuerpo - Alos ocultos??
AUTO neg
PATRÓN HETEROGÉNEO
PATRÓN HOMOGÉNEO
- Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia - Mezcla de anticuerpos
- Mezcla de anticuerpos - Anticuerpo contra antígeno de alta incidencia
ENZIMAS
El paciente no está transfundido recientemente, pero tiene un hematocrito muy bajo. Cual debería ser el siguiente paso? 1.Descartar la presencia de ALOS con autoadsorciones
2.Descartar la presencia de ALOS con aloadsorciones
3.Se pueden realizar cualquiera de las dos anteriores
4.Elución
Carlos
El paciente no está transfundido recientemente, pero tiene un hematocrito muy bajo. Cual debería ser el siguiente paso? 1.Descartar la presencia de ALOS con autoadsorciones
2.Descartar la presencia de ALOS con aloadsorciones
3.Se pueden realizar cualquiera de las dos anteriores
4.Elución
Carlos
ALOADSORCIONES DIFERENCIALES 3 pases Estudio de los sueros adsorbidos frente a I-II-III
Carlos
Al ver estos resultados, cual es la respuesta FALSA? 1.El autoanticuerpo se ha adsorbido con todas las células
2.La positividad de dos de los tríos sugiere que existen aloanticuerpos junto al autoanticuerpo
3.Es necesario seguir adsorbiendo
4.Hay que realizar paneles de identificación con los adsorbidos frente a R2R2 y rr
Carlos
Al ver estos resultados, cual es la respuesta FALSA? 1.El autoanticuerpo se ha adsorbido con todas las células
2.La positividad de dos de los tríos sugiere que existen aloanticuerpos junto al autoanticuerpo
3.Es necesario seguir adsorbiendo
4.Hay que realizar paneles de identificación con los adsorbidos frente a R2R2 y rr
Carlos
Especificidades posibles:
•Célula R2R2: anti-C + anti-e (tapados JKb, Lea y Lua)
•Célula rr: anti-C + anti-D
R1R1
R2R2
rr
C+e
C+D
Carlos
Cómo podemos descartar las posibles especificidades? 1.Valorando el fenotipo del paciente
2.Realizando Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
3.Las respuestas 1 y 2 son ciertas
Carlos
Cómo podemos descartar las posibles especificidades? 1.Valorando el fenotipo del paciente
2.Realizando Pruebas cruzadas con hematíes de fenotipo seleccionado
3.Las respuestas 1 y 2 son ciertas
Carlos
Se descartan anti-Lea, -Jkb y -Lua con células seleccionadas. Se confirma especificidad anti-e
Carlos
- Auto anti-D
- Auto anti-e
- Alo anti-C
Carlos
Crees que falta alguna prueba para completar el estudio? 1.Completar el fenotipo eritrocitario del paciente
2.Elución
3.Elución de los hematies adsorbidos
4.Son ciertas la 1 y la 2
Carlos
Crees que falta alguna prueba para completar el estudio? 1.Completar el fenotipo eritrocitario del paciente
2.Elución
3.Elución de los hematies adsorbidos
4.Son ciertas la 1 y la 2
Carlos
ELUCIÓN: PANAGLUTINACIÓN HOMOGÉNEA
Carlos
Fenotipo eritrocitario
post-elución
Carlos
• AHAI por autoanticuerpos de clase IgG (con especificidad anti-D+anti-e)
• Aloanticuerpos anti-C (ya conocidos)
• No otros aloanticuerpos
CONCLUSIÓN FINAL
Carlos
En el caso de que se decida transfusión, cual sería la respuesta INCORRECTA? 1.Es imprescindible transfundir hematíes C negativo
2.Es imprescindible transfundir hematíes D y e negativo
3.Es recomendable transfundir hematíes S negativo
4.Hay que intentar evitar la transfusión
Carlos
En el caso de que se decida transfusión, cual sería la respuesta INCORRECTA? 1.Es imprescindible transfundir hematíes C negativo
2.Es imprescindible transfundir hematíes D y e negativo
3.Es recomendable transfundir hematíes S negativo
4.Hay que intentar evitar la transfusión
Carlos
Jose Angel
Varón de 43 años Antecedentes de transfusión en otro centro Diagnóstico: Injerto (Cirugía plástica) 23/01/2012 --SCR positivo. Auto negativo --Anti-Fy(a) --Se transfunden 7 CH Fy(a) neg con PC compatible 2/02/2012 -- En estudio actual: anti -Fy(a) + algo más -- Envían muestra para estudio
Jose Angel
Identificación Gel L/C: anti-Fy(a) + otra especificidad Célula 2: negativa Células 1, 5, 8, 10, 11. -Fy(a) Células 3,4,6,7,9: otro??
Autocontrol positivo
Jose Angel 2/02/2012
Jose Angel
Cual sería el siguiente paso?
1.Realizar un panel con hematíes tratados con enzimas
2.Realizar una PDAG
3.Realizar autoadsorción
4.La 1 y 2 son correctas
Jose Angel
Cual sería el siguiente paso?
1.Realizar un panel con hematíes tratados con enzimas
2.Realizar una PDAG
3.Realizar autoadsorción
4.La 1 y 2 son correctas
Identificación Enzimas: anti-Fy(a)+ otras especificidades Células 1 y 10: desaparecen (anti-Fya) Células: 3-9, 11. se potencian (anti-c?) Células 3-6-11: (anti-E tapado?) Célula 2 sigue negativa
Autocontrol positivo (doble población)
Jose Angel 2/02/2012
Identificación Enzimas: anti-Fy(a)+ otras especificidades Células 1 y 10: desaparecen (anti-Fya) Células: 3-9, 11. se potencian (anti-c?) Células 3-6-11: (anti-E tapado?)
Jose Angel 2/02/2012
Pruebas cruzadas: -Hematíes Fya neg, c neg, E pos: incompatibles -Hematíes Fya neg, c pos, E neg: incompatibles
Destapando el anti-E……
Especificidades identificadas: -Anti-Fy(a) -Anti-c -Anti-E
-Fenotipo: DCCee, Kell neg, Fy(a-b+)
2/02/2012 Jose Angel
ALOANTICUERPOS
Poliespecífica
Monoespecífica
Jose Angel -Auto positivo: hacer PDAG
-Ojo!! Doble población!!!
-Hay dos tipos celulares!!!!!!!
Jose Angel
En un paciente con antecedente transfusional reciente, la existencia de una prueba directa de antiglobulina.. Señala la respuesta falsa
1.Seguro que se debe a la existencia de autoanticuerpos
2.Puede deberse a la existencia de aloanticuerpos
3.El estudio del eluido es importante
4.La doble población indica mezcla de hematíes por
transfusión reciente
Jose Angel
En un paciente con antecedente transfusional reciente, la existencia de una prueba directa de antiglobulina…. Señala la respuesta falsa
1.Seguro que se debe a la existencia de autoanticuerpos
2.Puede deberse a la existencia de aloanticuerpos
3.El estudio del eluido es importante
4.La doble población indica mezcla de hematíes por
transfusión reciente
Cual sería el siguiente paso??
1.Realizar aloadsorciones diferenciales
2.Estudio del eluido
3.Revisar transfusiones previas
Jose Angel
Cual sería el siguiente paso??
1.Realizar aloadsorciones diferenciales
2.Estudio del eluido
3.Revisar transfusiones previas
Jose Angel
Días 25 y 27 /01/2012 - 5 HCF: c+ (R1r)
- 2 HCF: E+(R1R2)
Revisando las transfusiones previas…
Jose Angel
Eluido enfrentado a panel de AGH. Anti-c (tapado anti-E??: células 3,6,11)
Jose Angel
Jose Angel
En el eluido hay anticuerpos de especificidad anti-c, pero el anti-E no puede descartarse.. Cual es la técnica más indicada??
1.Aloadsorciones diferenciales
2.Aloadsorción con una célula rr ( c pos, e neg)
3.Autoadsorción
4.Las 3 son correctas
Jose Angel
En el eluido hay anticuerpos de especificidad anti-c, pero el anti-E no puede descartarse.. Cual es la técnica más indicada??
1.Aloadsorciones diferenciales
2.Aloadsorción con una célula rr ( c pos, e neg)
3.Autoadsorción
4.Las 3 son correctas
Adsorción del eluido con celulas rr: para eliminar el anti-c y valorar si existe el anti-E tapado Eluido adsorbido enfrentado a panel: Anti-E
b b
2/02/2012 Jose Angel
CONCLUSION -Alo anti-Fy(a) -Alo anti-c -Alo anti-E -Auto y CD positivo por los hematíes de la bolsa R1r y R1R2
Jose Angel
Es posible que en el estudio del día 23 de enero, los anticuerpos anti-c y anti-E no fueran detectables
Jose Angel
Hemos diagnosticado la presencia de aloanticuerpos
adheridos a los hematíes transfundidos
1.Se trata de una reacción hemolítica retardada
2.Se trata de una reacción serológica retardada
3.Para catalogar mejor el tipo de reacción hay que
realizar un estudio de hemólisis al paciente
4. Se trata de una reacción hemolítica aguda
Jose Angel
Hemos diagnosticado la presencia de aloanticuerpos
adheridos a los hematies transfundidos
1.Se trata de una reacción hemolítica retardada
2.Se trata de una reacción serologica retardada
3.Para catalogar mejor el tipo de reacción hay que
realizar un estudio de hemólisis al paciente
4. Se trata de una reacción hemolítica aguda
-Aloanti-Fy(a) -Alo anti-c -Alo anti-E -Auto y CD positivo por los hematíes de la bolsa R1r y R1R2
Reacción serológica retardada por anti-c+E Descartar proceso hemolítico
Jose Angel
Ante una panaglutinación….
Patron de aglutinación: homogéneo/heterogéneo
Autocontrol: positivo/negativo
Reactividad
en enzimas
MIL GRACIAS
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