Bioprocess EngineeringBioprocess Engineering
基因重組﹝ PCR, host selection ﹞ 或微生物篩選﹝ plasmid selection﹞
Lab. 生產
工廠生產
前處理﹝殺菌等﹞ 生化反應器 破碎細胞
分離及純化
Recombinant protein
metabolites
細胞固定化﹝酵素固定化﹞
蛋白質的沈澱作用 能使蛋白質發生沈澱作用的因素有: 酸 酸性試劑 單寧酸 重金屬離子(汞離子、鉛離子等) 咖啡因 嗎啡 中性鹽 有機溶媒 熱
﹝﹝ 五﹞蛋白質純化五﹞蛋白質純化
Ammonium sulfate
Salting out﹝鹽析﹞
﹝﹝ 五﹞蛋白質純化五﹞蛋白質純化等電點沉澱
蛋白質的溶解度1. pH 值:當 pH 值在其等電點( pI )時,溶解度
最小。 2. 鹽濃度:當在低濃度時,蛋白質的溶解度隨著鹽
濃度的增加而增加,稱為 Salting-in 。當鹽濃度高至某一濃度時,蛋白質的溶解度隨著鹽濃度的增加而減少,稱為 Salting-out 。
3. 溶媒的介電常數( Dielectric contant ):酒精、丙酮的常數較水小,使蛋白質分子在此溶媒中的斥力較小,溶解度較低。
4. 溫度:在一限定的溫度(約 0~40℃)下,大部份的蛋白質溶解度隨溫度的上升而增加。
Ion exchange Ion exchange chromatographychromatography
RR++AA-- + B + B-- R R++BB-- + A + A--
Gel filtration Gel filtration chromatographychromatography
Gel filtration Gel filtration chromatographychromatography
V0 : void volume Ve : elution volume
Affinity chromatographyAffinity chromatography
DialysisDialysis
Cellophanenitrocellulosecollodion