AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DO RECEPTOR DE LEPTINA COMO CANDIDATO A MARCADOR
DE AGRESSIVIDADE TUMORAL EM PACIENTES COM CARCINOMA EPIDEMÓIDE
DE BOCA E OROFARINGE
Aluno: Leandro Ucela Alves
Orientador: Profa. Dra. Adriana Madeira Alvares da Silva
Co-orientador: Profa. Ms. Ana Maria da Cunha Mercante
2009
INTRODUÇÃO
CARCINOMA EPIDERMÓIDE DE BOCA E OROFARINGE
• Representa 90% dos tumores das vias aerodigestivas superiores.
• Considerado o 6º tipo de câncer mais frequente no mundo.
• Com média anual de 540.000 casos e 271.000 mortes.
• Forte relação com o etilismo e tabagismo.
• Atualmente foi descrito relação com o vírus HPV.
INTRODUÇÃO
LEPTINA (Lep) E RECEPTOR DE LEPTINA (Lepr)
• A Leptina (Lep) é produzida predominantemente pelo tecido adiposo branco.
• Sempre atua através de seu receptor (Lepr)
• A ligação entre a proteína e seu receptor no hipotálamo, sinaliza as condições de reserva de gordura corporal.
• Por mecanismos de feedback, essa ligação controla a ingestão de alimentos e o peso corporal, estimulando a saciedade
INTRODUÇÃO
LEPTINA (Lep) E RECEPTOR DE LEPTINA (Lepr)
Estão associados também aos processos de:• Crescimento e mitogênese• Angiogênese• Resposta imunológica e inflamatória• Reprodução• Formação dos tornos musculares• Hematopoiese• Formação dos ossos• Cicatrização
INTRODUÇÃO
VIAS DE SINALIZAÇÃO DA LEPTINA
INTRODUÇÃO
LEPTINA E TECIDOS NORMAIS E NEOPLÁSICOS
• Atua no crescimento, ploriferação e migração das células endoteliais.
• Estimula genes responsáveis pela promoção da angeogênese, aumentando a vascularização endotelial.
• Associada a diversas neoplasias como o câncer de mama, colo, fígado e próstota.
OBJETIVOS
• Avaliar a expressão do gene LEPR através da técnica de imunohistoquímica em carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.
• Relacionar a expressão do gene LEPR com a agressividade tumoral medida pelo TNM e histologia.
• Relacionar a expressão do gene LEPR com a sobrevida global e livre de doença nos pacientes com carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.
LOCAL DE ESTUDO E PACIENTES
• O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biologia Molecular em parceria com o Serviço de Patologia, ambos do Hospital Heliópolis.
• Foram estudados 85 pacientes com carcinoma epidermóide de boca e orofaringe, sem tratamento prévio, tratados no Serviço de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis.
EPIDEMIOLOGIA
Dados epidemiológicosCasos
n %
GêneroMasculino 73 85,9%Feminino 12 14,1%Faixa etária (anos)≤ 55 anos 46 54,1%> 55 anos 39 45,9%TabagismoNão 4 4,7%Sim 81 95,3%EtilismoNão 10 11,8%Sim 75 88,2%
Total 85 100Dados Epidemiológico dos 85 pacientes diagnosticados com carcinoma epidemóide de boca e orofaringe
MATERIAIS E MÉTODOS
HISTOLOGIA
• Pelo método de coloração de hematoxilina-eosina (HE) as lâminas foram analisadas, avaliando suas características histológicas como:• Grau de diferenciação• Desmoplasia• Intensidade de inflamação• Invasão vascular linfática• Invasão vascular sanguínea• Invasão perineural• Necrose
Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x demonstrando um carcinoma bem diferenciado segundo a sua atipia nuclear e queratinização celular.
Foto de lâmina em H&E no aumento de 400 x demonstrando uma desmoplasia leve.
Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando um infiltrado inflamatório moderado.
Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando uma invasão vascular linfática
do carcinoma epidermóide.
Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando uma invasão vascular sanguínea do carcinoma epidermóide.
Foto de lâmina em H&E no aumento de 400 x mostrando uma invasão perineural
MATERIAIS E MÉTODOS
IMUNOHISTOQUÍMICA
• Pelo método de imunohistoquímica (anticorpo anti-Obr) os materiais foram avaliadas segundo a intensidade da marcação, classificadas segundo:• Intensidade de marcação.• Frequência de células tumorais.
• A lâmina com os materiais dos pacientes foi confeccionada pela técnica de tissue microarray
Foto da lâmina da reação do Lepr, contra-corada com hematoxilina no aumento de 100 x, mostrando uma marcação de leve intensidade (marrom).
Foto da lâmina de reação do Lepr, contra-corada com hematoxilina no aumento de 100x, mostrando uma marcação de forte intensidade (marrom).
RESULTADOS
Marcação n %Negativo 31 36,47%Positivo 54 63,53%
fraco 20 37,04%forte 34 62,96%
Expressão do anticorpo anti-Lepr (n=85)
RESULTADOSExpressão da Lep-R
Características clínico-patológicas
Negativo Positivop value
n % n %
Tamanho do tumor (pT)
0,84
pT1 1 3,20% 4 7,40%
pT2 11 35,50% 17 31,50%
pT3 7 22,60% 14 25,90%
pT4 12 38,70% 19 35,20%
pT1+2 12 38,70% 21 38,90%0,586
pT3+4 19 61,30% 33 61,10%
Linfonodo acometido
0,156Ausente 9 29,00% 23 42,60%
Presente 22 71,00% 31 57,40%
Invasão extracapsular
0,143Ausente 14 45,20% 25 46,30%
Presente 8 25,80% 6 11,10%
Não avaliável 9 29,00% 23 42,60%
Grau de diferenciação
0,825
Bem diferenciado 12 38,70% 25 46,30%
Moderadamente 15 48,40% 25 46,30%
Pouco diferenciado 3 9,70% 4 7,40%
Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%
Embolização linfática
0,373Ausente 11 35,50% 16 29,60%
Presente 20 64,50% 38 70,40%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Categorização do Lep-R: positivo x negativo
RESULTADOS
Expressão da Lep-R
Características clínico-patológicas
Negativo Positivop value
n % n %
Invasão perineural
0,198Ausente 13 41,90% 20 45,50%
Presente 17 54,80% 24 54,50%
Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%
Infiltrado inflamatório peritumoral
0,37
Escasso 11 35,50% 23 42,60%
Moderado 16 51,60% 21 38,90%
Intenso 3 9,70% 10 18,50%
Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%
Necrose
0,29Ausente 6 19,40% 7 13,00%
Presente 24 77,40% 47 87,00%
Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%
Desmoplasia
0,999
Leve 14 45,20% 25 46,30%
Moderada 10 32,30% 18 33,30%
Intensa 6 19,40% 11 20,40%
Não avaliável 1 3,20% 0 0,00%
Categorização do Lep-R: positivo x negativo
RESULTADOSExpressão da Lep-R
Características clínico-patológicas
Forte Fracop value
n % n %
Tamanho do tumor (pT)
0,58
pT1 2 5,90% 2 5,90%
pT2 12 35,30% 5 35,30%
pT3 7 20,60% 7 20,60%
pT4 13 38,20% 6 38,20%
pT1+2 14 41,20% 7 35,00%0,438
pT3+4 20 58,80% 13 65,00%
Linfonodo acometido
0,282Ausente 16 47,10% 7 35,00%
Presente 18 52,90% 13 65,00%
Invasão extracapsular
0,176Ausente 13 72,20% 12 92,30%
Presente 5 27,80% 1 7,70%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Grau de diferenciação
0,43
Bem diferenciado 14 41,20% 11 55,00%
Moderadamente 18 52,90% 7 35,00%
Pouco diferenciado 2 5,90% 2 10,00%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Embolização linfática
0,4Ausente 11 32,40% 5 25,00%
Presente 23 67,60% 15 75,00%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Categorização do Lep-R: forte x fraco
RESULTADOS
Expressão da Lep-R
Características clínico-patológicas
Forte Fracop value
n % n %
Invasão perineural
0,413Ausente 18 52,90% 12 60,00%
Presente 16 47,10% 8 40,00%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Infiltrado inflamatório peritumoral
0,902
Escasso 14 41,20% 9 45,00%
Moderado 14 41,20% 7 35,00%
Intenso 6 17,60% 4 20,00%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Necrose
0,519Ausente 4 11,80% 3 11,80%
Presente 30 88,20% 17 88,20%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Desmoplasia
0,584
Leve 14 41,20% 11 55,00%
Moderada 12 35,30% 6 30,00%
Intensa 8 23,50% 3 15,00%
Não avaliável 0 0,00% 0 0,00%
Categorização do Lep-R: forte x fraco
Análise da sobrevida global para os pacientes com expressão positiva (verde) e negativa (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,787).
RESULTADOS
Análise da sobrevida global para os pacientes com expressão positiva fraca (verde) e forte (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,406).
RESULTADOS
Análise da sobrevida livre de doença para os pacientes com expressão positiva (verde) e negativa (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,617).
RESULTADOS
Análise da sobrevida livre de doença para os pacientes com expressão positiva forte (verde) e fraca (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,871).
RESULTADOS
CONSIDERAÇÕES FINAIS
• Não foi detectado associação entre a expressão do receptor de Leptina e o carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.
• Também não se encontrou associação entre a presença do receptor nas sélulas neoplásicas com a sobrevida global e livre de doença dos pacientes
• Novos resultados podem ser obtidos se estudos posteriores analisar as margem tumoral.
• O número de casos também pode influenciar esses resultados.
AGRADECIMENTOS
Top Related