Arzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besonderer
BeBeBeBerücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücher
(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)
Arzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und Arzneibuchmethoden
MSc-Studiengang Arzneimittelwissenschaften
Institut für Pharmazeutische und Medizinische ChemieHittorfstr. 5848149 Münster
LLLLeitfadeneitfadeneitfadeneitfaden
zum Praktikumzum Praktikumzum Praktikumzum Praktikum
Arzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besonderer
rücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücher
(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)
5. Semester Pharmazie
und zuund zuund zuund zu
Modul 3:Modul 3:Modul 3:Modul 3:
Arzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und Arzneibuchmethoden
Studiengang Arzneimittelwissenschaften
Institut für Pharmazeutische und Medizinische Chemie Hittorfstr. 58-62 48149 Münster
Arzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besonderer
rücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücher
(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)
Arzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und Arzneibuchmethoden
Studiengang Arzneimittelwissenschaften
2
InhaltInhaltInhaltInhalt
1 Vorwort .........................................................................................................................3 2 Semesterablauf ............................................................................................................4
2.1 Termine ........................................................................................................................4 2.2 Vorbesprechung ...........................................................................................................4 2.3 Seminare ......................................................................................................................4 2.4 Zeitplan des Praktikums ...............................................................................................5 2.5 Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung) ...................................................................6 2.6 Klausur .........................................................................................................................6 2.7 Modulabschlussprüfung ...............................................................................................6
3 PharMSchool ..................................................................................................................7 3.1 Arzneistoffdossier ........................................................................................................7 3.2 Praktische Aufgabe .......................................................................................................7
4 Theoretische Aufgaben - Arzneistoffdossier ..................................................................8 4.1 Vorschläge für das Vorgehen bei der Literatursuche .....................................................9 4.1.1 Daten der Präparate ..................................................................................................9 4.1.2 Pharmakologie und Toxikologie ................................................................................9 4.1.3 Chemische Daten ......................................................................................................9 4.1.4 Nachweis/Analysenmethoden ..................................................................................9 4.1.5 Literatur-Anhang .................................................................................................... 10
5 Analysen und Bewertungsschema ............................................................................. 11 6 Praktikumsstoff und Arzneistoffliste .......................................................................... 15
6.1 Identität ..................................................................................................................... 15 6.2 Reinheit ..................................................................................................................... 17 6.3 Fett- und Wachskennzahlen ...................................................................................... 17 6.4 Gehalt ........................................................................................................................ 17 6.4.1 Säure-Base-Titrationen .......................................................................................... 17 6.4.2 Redoxtitrationen .................................................................................................... 18 6.4.3 Fällungstitrationen ................................................................................................. 18 6.4.4 UV-Vis-Spektroskopie ............................................................................................ 19 6.4.5 Chromatographische Methoden ............................................................................ 19 6.5 Gesamtmonographie ................................................................................................. 19
7 Sondervorschriften und Terminanalysen ................................................................... 20 7.1 Validierung ................................................................................................................ 20 7.1.1 Ibuprofen-HPLC (modifiziert nach USP) .................................................................. 20 7.1.2 Acidimetrie – Ibuprofen (EuAB) .............................................................................. 21 7.1.3 Protokoll ................................................................................................................ 21 7.1.4 Statistische Auswertung ........................................................................................ 21 7.2 Fettkennzahlen .......................................................................................................... 22 7.3 Instrumentelle Methoden/elektrometrische Endpunktsbestimmung ......................... 22 7.4 Wasserfreie Titrationen .............................................................................................. 24 7.5 Dünnschichtchromatographie ................................................................................... 24 7.6 Identitätsreaktionen auf funktionelle Gruppen .......................................................... 25 7.7 Monographien ........................................................................................................... 26 7.7.1 Substanzliste und Aufgaben .................................................................................. 26 7.7.2 Monographie-Analytik ........................................................................................... 28
8 Anhang ...................................................................................................................... 29 8.1 Entsorgungsrichtlinien............................................................................................... 29 8.2 Versuchsauswertung Methodenvergleich Ibuprofen-Gehalt ...................................... 30
3
1111 VorwortVorwortVorwortVorwort
Im Praktikum „Arzneistoffanalytik unter besonderer Berücksichtigung der Arzneibücher“
werden wichtige analytische Methoden des Arzneibuchs hinsichtlich der Bestimmung von
Identität, Reinheit und Gehalt vorgestellt und durchgeführt. Dabei kommen sowohl klassische
nasschemische Verfahren als auch instrumentelle Methoden (u.a. IR, HPLC) zum Einsatz.
Nachdem die einzelnen analytischen Verfahren bereits im Grundstudium erlernt wurden,
werden diese Methoden nun konkret in Bezug auf die Anforderungen des Arzneibuchs
angewendet. So werden im Praktikum z.B. exemplarisch komplette Monographien einzelner
Arzneistoffe bearbeitet.
Begleitend zum Praktikum beschäftigen sich Seminare mit dem Europäischen Arzneibuch und
dessen Methoden. Dabei wird die Theorie zu einzelnen Aspekten, wie den Methoden zur
Bestimmung des Gehalts oder dem Nachweis von funktionellen Gruppen, vertieft. Zusätzlich
werden auch Methoden anderer Arzneibücher vorgestellt.
Weitere Seminare beschäftigen sich mit der Beschaffung von Informationen zu
pharmazeutischen Themen, vor allem der pharmazeutisch-chemischen Qualität von
Arzneistoffen sowie der Qualitätskontrolle und der Qualitätssicherung. Außerdem werden die
Prinzipien der Validierung von Prüfverfahren erlernt.
Ein Teil des Praktikums besteht aus theoretischen Aufgaben. In Kleingruppen werden von den
Studierenden Informationen zu einem Arzneistoff beschafft, mit Hilfe derer sie ein
Arzneistoffdossier erarbeiten. Die gesammelten Informationen werden in Form eines Vortrags
von den Studierenden dem Semester vorgestellt.
Im Rahmen der PharMSchool haben die Studierenden des Studiengangs Pharmazie während
des Praktikums die Gelegenheit, die analytisch-chemischen Gesichtspunkte ihres
interdisziplinären Projektthemas eigenständig zu bearbeiten.
Das Praktikum umfasst 112 Stunden einschließlich Seminaren. Weiter vertieft werden die hier
erworbenen Kenntnisse im Praktikum des achten Semesters.
4
2222 SemesterablaufSemesterablaufSemesterablaufSemesterablauf
2.12.12.12.1 TermineTermineTermineTermine
Bitte beachten SieBitte beachten SieBitte beachten SieBitte beachten Sie die aktuellen Aushänge am die aktuellen Aushänge am die aktuellen Aushänge am die aktuellen Aushänge am Schwarzen BrettSchwarzen BrettSchwarzen BrettSchwarzen Brett sowie die sowie die sowie die sowie die
Terminübersicht auf der Internetseite des PraktikumsTerminübersicht auf der Internetseite des PraktikumsTerminübersicht auf der Internetseite des PraktikumsTerminübersicht auf der Internetseite des Praktikums!!!!
2.22.22.22.2 VorbesprechungVorbesprechungVorbesprechungVorbesprechung
Zu Beginn des Semesters findet eine anwesenheitspflichtige Vorbesprechung zum Praktikum
statt. Dabei erfolgt die verbindliche schriftliche Anmeldung zum Praktikum.
Bitte beachten Sie dabei besonders die aktuelle Studienordnung Ihres Studiengangs!
Für Studierende des Studiengangs Pharmazie ist für die Anmeldung zum Praktikum die
Zulassung zum Ersten Abschnitt der Pharmazeutischen Prüfung erforderlich. Nach Ihrer
Anmeldung zum Praktikum legen Sie bitte unverzüglich Ihr Zeugnis über den Ersten Abschnitt
der Pharmazeutischen Prüfung bzw. Ihre Ladung dazu beim Praktikumsleiter bzw. den
Assistenten vor.
Bitte beachten Sie in diesem Zusammenhang auch §15 Abs. 5 AappO:
§ 15 Bestehen und Wiederholung von Prüfungen
(5) Nachweise, die für die Zulassung zum Zweiten Abschnitt der Pharmazeutischen Prüfung
erforderlich sind, können vor Bestehen des Ersten Abschnittes der Pharmazeutischen Prüfung
nur in dem auf die erstmalige Zulassung zum Ersten Prüfungsabschnitt folgenden Semester
erworben werden.
2.32.32.32.3 SeminareSeminareSeminareSeminare
Die Seminare sind ein anwesenheitspflichtiger Teil des Praktikums!
Es werden Seminare zu folgenden Themen abgehalten:
• Das Arzneibuch
• Gehaltsbestimmungsmethoden
• Nachweis funktioneller Gruppen/Identitätsreaktionen des Arzneibuchs
• ausgewählte Arzneibuchmonographien
• Qualitätssicherung und Qualitätskontrolle
• Informationsbeschaffung über Arzneimittel, Patentdatenbanken und
Arzneimittelzulassung
5
2.42.42.42.4 Zeitplan des PraktikumsZeitplan des PraktikumsZeitplan des PraktikumsZeitplan des Praktikums
(Änderungen sind vorbehalten)
PraktikumstagPraktikumstagPraktikumstagPraktikumstag AbschnittAbschnittAbschnittAbschnitt AnalysenAnalysenAnalysenAnalysen TageTageTageTage
1111 13 Uhr s.t.
Sicherheitsbelehrung, anschl. Saalführung und Platzübergabe
1
2222 ---- 7777
• Validierung Ibuprofen (Acidimetrie, HPLC) • Bromometrie (Isoniazid) • Periodatometrie (Glycerol) • Fettkennzahlen (Iodzahl) • elektrometrische Endpunktsbestimmung (Promethazin ∙ HCl, Benzocain, Coffein)
• instrumentelle Methoden (Chloramphenicol, Karl-Fischer)
• Substanzidentifizierung mittels IR
1 1 1 1 1 1 1
6
6 und 76 und 76 und 76 und 7 Reagenzienherstellung (Identitätsreaktionen)
8 und 98 und 98 und 98 und 9 DC-Analgetika Identität funktioneller Gruppen Reagenzienherstellung (Monographien)
1 3
2
10101010 Kolloquium
PharmaziePharmaziePharmaziePharmazie ArzneimittelArzneimittelArzneimittelArzneimittel----
wissenschaftenwissenschaftenwissenschaftenwissenschaften
11 11 11 11 und 12und 12und 12und 12 Monographie 1 3 2
13 und 1413 und 1413 und 1413 und 14 Monographie 2 3 2
15151515 Nachkochtag Monographie 3 3 2
16161616
PharMSchool
17171717 Monographie 4 3 2
18181818
19191919 Nachkochtage 2
20202020
21212121 Nachkochtag 1
22222222 13 Uhr s.t.
Reinigung des Laboratoriums, Platzabgabe1 und Entsorgung der Abfälle
1
PraktikumszeitPraktikumszeitPraktikumszeitPraktikumszeit
Montag – Freitag von 13:00 – 18:30 Uhr
1 Am Semesterende muss privates Eigentum aus dem Praktikumsplatz und auch aus dem institutseigenen Spind entfernt werden. Nicht geleerte Spinde werden in den Semesterferien geöffnet und der Inhalt wird entfernt. Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.
6
2.52.52.52.5 Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)
Das Kolloquium findet als Einzelprüfung über ca. 15 – 20 min bei den Praktikumsbetreuern
statt.
Prüfungsstoff:
• alle Themen, die vor dem Kolloquium im Praktikum bearbeitet wurden
• Inhalt des Seminars „Gehaltsbestimmungsmethoden“
Neben den Strukturformeln und der Quantifizierung der darin besprochenen
Arzneistoffe ist auch deren Verwendung Inhalt des Kolloquiums.
• „Identitätsreaktionen des Arzneibuchs“ (Alkaloide, prim. arom. Amine, Barbiturate,
Benzoat, Citrat, Salicylat, Tartrat, Xanthine, reduz. Substanzen)
• Fettkennzahlen (SZ, EZ, OHZ, IZ, POZ, VZ, Unv, Prüfung auf Verdorbenheit)
Bei Nichtbestehen erfolgt das erste Wiederholungskolloquium nach ca. drei Tagen beim
Praktikumsleiter. Wird auch das erste Wiederholungskolloquium nicht bestanden, erfolgt das
zweite Wiederholungskolloquium bei Prof. Dr. K. Müller (ebenfalls etwa nach 2 - 3 Tagen). Bei
endgültigem Nichtbestehen muss das Praktikum inkl. dazugehöriger Seminare und Referate
wiederholt werden.
2.62.62.62.6 KlausurKlausurKlausurKlausur
Voraussetzung für die Teilnahme an der Abschlussklausur ist das erfolgreich beendete
Praktikum.
Bestehensgrenze der Klausur: mind. 50% der mögl. Punkte
Prüfungsrelevanter Stoff:
• Inhalt der Seminare und des Praktikums
• Inhalt der Vorlesung Pharmazeutische/Medizinische Chemie III – VI
(aktuelles Semester)
• Generell werden grundlegende theoretische Hintergründe zu bereits bekannten
analytischen und chemischen Inhalten vorausgesetzt (Grundstudium).
2.72.72.72.7 ModulabschlussprüfungModulabschlussprüfungModulabschlussprüfungModulabschlussprüfung
Für Studierende des Masterstudiengangs Arzneimittelwissenschaften findet eine 20 –
30-minütige mündliche Abschlussprüfung bei Prof. Dr. K. Müller statt.
7
3333 PharPharPharPharMSMSMSMSchoolchoolchoolchool
Das Projekt PharMSchool wurde von den fünf Teildisziplinen der Pharmazie mit dem Ziel ins
Leben gerufen, eigenständiges Arbeiten zu fördern und so forschendes Lernen zu ermöglichen.
Zu Beginn des Hauptstudiums werden gruppenweise Themen vergeben, die die Studierenden
des Studiengangs Pharmazie durch die folgenden vier Semester begleiten. Während jeder
praktischen Übung innerhalb des Hauptstudiums wird den Projektgruppen Zeit für
themenbezogene Laborversuche zur Verfügung gestellt, um Fragestellungen eigenständig in
den vielseitigen Teildisziplinen aufzuarbeiten. Diese Herangehensweise, das Thema unter
verschiedenen Aspekten aufzugreifen, soll dazu führen, dass erworbene Erkenntnisse zur
jeweiligen Thematik aktiver in andere Teilbereiche der Pharmazie übertragen werden und
hierdurch interdisziplinäre Zusammenhänge intensiver wahrgenommen werden.
Im Praktikum „Arzneistoffanalytik unter besonderer Berücksichtigung der Arzneibücher“ soll
das Thema der PharMSchool-Gruppen unter chemisch-analytischen Gesichtspunkten beleuchtet
werden.
3.13.13.13.1 ArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossier
In den PharMSchool-Gruppen werden Arzneistoffdossiers erstellt (siehe Abschnitt 4). Die zu
bearbeitenden Stoffe werden auf das jeweilige PharMSchool-Projekt abgestimmt.
3.23.23.23.2 Praktische AufgabePraktische AufgabePraktische AufgabePraktische Aufgabe
In der für eigenständiges Arbeiten zur Verfügung gestellten Praktikumszeit (Praktikumstage 16
- 20) können Versuche entwickelt werden, um eigenen Fragen nachzugehen und Ideen zu
verfolgen. Bei dieser praktischen Aufgabe soll auf die Erkenntnissee, die während der
praktischen Übungen und in den Seminaren gewonnen wurden, zurückgegriffen werden. So
kann zum Beispiel für bisher nicht monographierte Arzneistoffe eine Monographie erarbeitet
werden, eine Alternative zu einer bestehenden Monographie aufgezeigt oder Monographien
verschiedenen Arzneibücher verglichen werden. Seien Sie kreativ!
Bitte planen Sie die Versuche rechtzeitig in Absprache mit den Assistenten und Koordinatoren,
damit geprüft werden kann, ob die erforderlichen Materialien rechtzeitig organisiert werden
können und eine Umsetzung praktikabel ist. Denken Sie auch daran, von Beginn an Ihre Ideen,
Fragestellungen, die Herangehensweise und die Versuchsdurchführung zu dokumentieren.
Wenn ein Versuch nicht vollständig durchgeführt werden konnte oder nicht die gewünschten
Ergebnisse erzielt wurden, gilt die Aufgabe für die Gruppe als bestanden, wenn eine
8
dokumentierte Recherche mit Quellenangabe, Versuchsplanung, Durchführung, Fehleranalyse
etc. als Protokoll vorliegt.
Sollte Interesse daran bestehen, den Aspekt der Arzneistoffanalytik bezüglich des
PharMSchool-Themas zu vertiefen, bietet sich hierzu auch während der Zeit des
Wahlpflichtfachs Gelegenheit.
4444 Theoretische AufgabenTheoretische AufgabenTheoretische AufgabenTheoretische Aufgaben ---- ArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossier
In Kleingruppen werden Informationen über einen Arzneistoff gesammelt, ausgewertet und in
Form eines Protokolls abgegeben. Für das Protokoll liegt auf der Internetseite des 5.Semesters
eine Datei bereit. Die gesammelten Informationen sind mittels Word in das bereitliegende
Formular einzutragen und als Ausdruck abzugeben.
Nutzen Sie als Literaturquellen möglichst verschiedene Medien und belegen Sie Quellen mit
Zitaten, Ausdrucken und Kopien.
Eine Liste der zu bearbeitenden Stoffe wird am Schwarzen Brett ausgehängt. Die
Auswertungsbögen und das Quellenmaterial müssen bis zum Tag, an dem der Vortrag
gehalten wird, abgegeben werden. Die Protokolle werden korrigiert und müssen
gegebenenfalls berichtigt werden. Erst dann wird diese Aufgabe testiert.
Die für das Arzneistoffdossier gesammelten Informationen werden in Form eines
15 – 20 minütigen Vortrags dem Semester vorgestellt. Neben der Synthese, der Pharmakologie
und der Verwendung des Stoffes soll auch auf die Analytik des Arzneistoffs eingegangen
werden. Es ist für den Vortrag eine Präsentation zu erstellen, die möglichst frühzeitig mit dem
betreuenden Assistenten besprochen wird. Die angefertigten Folien werden den Assistenten
zum Vortrag ausgedruckt sowie in elektronischer Form abgegeben.
9
4.14.14.14.1 Vorschläge für das Vorgehen bei der LiteratursucheVorschläge für das Vorgehen bei der LiteratursucheVorschläge für das Vorgehen bei der LiteratursucheVorschläge für das Vorgehen bei der Literatursuche
4.1.14.1.14.1.14.1.1 Daten der Präparate:Daten der Präparate:Daten der Präparate:Daten der Präparate:
a) Hersteller und Handelsnamen: aus Roter Liste oder über eine Internet-Suchmaschine (z.B.
www.google.com – beim Eingeben der Substanznamen daran denken, dass man oft nicht
wissen kann, ob im Englischen mit oder ohne "e" am Ende, daher trunkieren, Bsp.
Linezolid → linezoli*).
b) Patentangaben: über Merck Index (der Fa. Merck & Co., USA – nicht verwechseln mit
Katalog der Fa. Merck, Darmstadt) oder über Kleemann/Engel, 'Pharmaceutical
Substances' oder über Chem. Abstr. (über Summenformel) oder Patentdatenbanken
(de.espacenet.com; uspto.gov)
4.1.24.1.24.1.24.1.2 PharmakologPharmakologPharmakologPharmakologie und Toxikologie:ie und Toxikologie:ie und Toxikologie:ie und Toxikologie:
a) Therapeutische Klassifizierung:
Der Stoff soll in die Gruppe einsortiert werden, in der er in der Roten Liste erschienen ist
oder erscheinen wird.
Bsp.: Celecoxib – Antiphlogistika.
b) Pharmakologische Charakterisierung:
Hier soll der Wirkungsmechanismus angegeben werden.
Bsp.: Celecoxib – Cyclooxygenase-2-Inhibitor.
4.1.34.1.34.1.34.1.3 Chemische Daten:Chemische Daten:Chemische Daten:Chemische Daten:
a) IUPAC-Name, Strukturformel etc.:
Es gibt viele Möglichkeiten, diese zu finden – bitte Quelle angeben!
b) CAS-Nummer = Chemical Abstracts Service Registry Nummer:
Eine Nummer, die Chem. Abstr. jeder Substanz gibt und die für die Suche in
elektronischen Datenbanken nützlich ist, da viele Datenbanken diese Nummer
übernehmen.
c) ATC-Code = Anatomic Therapeutic Chemical:
Eingruppierung und Vergabe einer Nummer (Code) für Wirkstoffe; Erläuterung des Systems
siehe im Vorspann des Kleemann/Engel, 'Pharmaceutical Substances'.
4.1.44.1.44.1.44.1.4 Nachweis/Analysenmethoden:Nachweis/Analysenmethoden:Nachweis/Analysenmethoden:Nachweis/Analysenmethoden:
aus Arzneibüchern (Ph.Eur., DAB, USP, JP, BP) oder dem Florey, 'Analytical Profiles of Drug
Substances' oder über Chem. Abstr. oder Medline (www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed oder über
ULB Münster) – Eingabe des Substanznamens AND determin* oder HPLC oder chromatogr*
o.ä.
10
4.1.54.1.54.1.54.1.5 LiteraturLiteraturLiteraturLiteratur----Anhang:Anhang:Anhang:Anhang:
Die verwendete Literatur soll ausgedruckt bzw. kopiert und angehängt werden!
a) Monographien: Wurde der Arzneistoff (schon) in die Ph.Eur., USP, BP, JP bzw.
Arzneistoffprofilen (ASP; siehe Bibliothek – orange Ringordner), Florey, Hager, Merck
Index aufgenommen?
b) Es sollen in die Liste aufgenommen werden:
1. ein Review (oder Originalartikel), der sich mit der Synthese oder mit der
Analytik der Substanz beschäftigt;
2. einer zu ihrer Pharmakologie oder 1-3 wichtige Artikel über die in vitro
oder im Tierversuch bestimmte Wirkungsweise/Wirkungsstärke;
3. einer zu ihrer Anwendung (Klinik).
c) Wie zitiert man Literatur richtig? Es gibt mehrere Möglichkeiten. Für die Dossiers bitte wie
folgt (Beispiele):
Merck Index (13.), Nr. 1234 [13. = 13. Auflage; Nr. der Monographie, nicht Seitenzahl]
Hager (5.) 5, 123-128 [5. Aufl., Band 5, Seiten 123-128]
Zeitschriftenartikel:
S. M. Grant, R. C. Heel, Vigabatrin. Drugs 41, 889-926 (1991).
"Drugs" = Name der Zeitschrift, "41" = Band/Jahrgang, "889-926" = Seiten von-bis,
"(1991)" = Erscheinungsjahr. ("Drugs" ist übrigens eine Zeitschrift mit sehr guten Reviews
zur Pharmakologie und Verwendung von Arzneistoffen und in der Institutsbibliothek
pharm. Chemie Münster vorhanden.)
E. K. Rowinsky, L. B. Grochow, C. B. Hendriks, Phase I and pharmacological study of
topotecan: a novel topoisomerase I inhibitor. J. Clin. Oncol. 10, 647-656 (1992).
Wichtig:Wichtig:Wichtig:Wichtig: Einfach nur "Chem. Abstr." oder "Medline" (oder gar "Internet") sind keine
Literaturangaben; wesentliche Literaturstellen – meist Zeitschriftenartikel – auswählen.
11
5555 Analysen und Analysen und Analysen und Analysen und BewertungsschemaBewertungsschemaBewertungsschemaBewertungsschema
Allgemeine HinweiseAllgemeine HinweiseAllgemeine HinweiseAllgemeine Hinweise
Die Praktikumsversuche sind theoretisch vorzubereiten. Die Kenntnis über die Versuche, die
durchgeführt werden, wird überprüft („Platzkolloq“). Nicht vorbereitete Versuche dürfen nicht
durchgeführt werden und sind ggf. an den Nachkochtagen zu wiederholen. Beachten Sie auch
die Sicherheits- und Entsorgungsvorschriften.
Aus der Stoffliste des 5. Semesters werden einige Arzneistoffe praktisch bearbeitet (siehe
Analysenplan). Wenn in diesem Skript (Abschnitt 7) keine besonderen Angaben zu finden
sind, gilt das Europäische Arzneibuch in der aktuellen Ausgabe, welches im Assistentenraum
und in der Bibliothek einzusehen ist.
AnalysenanforderungAnalysenanforderungAnalysenanforderungAnalysenanforderung
• Fordern Sie ausschließlich die Analyse(n) an, für die Sie am folgenden Praktikumstag
eingeteilt sind! Länger im Voraus angeforderte Analysen werden nicht ausgegeben.
• Wiederholungsanalysen können (und sollten) zusätzlich zu den eingeteilten Analysen
angefordert und bearbeitet werden.
• Achten Sie auf die ordnungsgemäße Beschriftung (selbstklebende Etiketten) und die
richtige Auswahl der Analysengefäße (s.u.).
Merke: Abweichend beschriftete Anforderungen werden von der Analysenausgabe nicht
ausgegeben. Es steht dann also für den Praktikumstag keine Analyse zur Verfügung!
• Es wird keine Nachsubstanz mit identischem Gehalt ausgegeben, teilen Sie sich die
Analysensubstanz gut ein!
• Propyphenazon, Tolbutamid und Phenytoin werden ausschließlich als
Nachkochanalysen zum Erreichen der Mindestpunktzahl angefordert.
KorrekturKorrekturKorrekturKorrektur
Die Analysenhefte werden in den dafür vorgesehenen Fächern im Praktikumssaal abgegeben.
Es wird von 14:30 bis 15:30 Uhr und von 17:00 bis 18:00 Uhr korrigiert. Dazwischen wird nicht
korrigiert. Nach 18:00 Uhr abgegebene Hefte werden am folgenden Praktikumstag ab 14:30
Uhr nachgesehen. Pro Abgabetermin kann jeweils nur einmal abgegeben werden, d.h. Abgabe
maximal zweimal pro Tag.
12
Beachten Sie bitte folgende Tabelle, insbesondere die mittlere Spalte.
AnalysenplanAnalysenplanAnalysenplanAnalysenplan
Analyse Gefäß Beschriftung der Gefäße Angabe in Schlüssel
Validierung Ibuprofen B Name Student 1 Name Student 2
Ibuprofen-Validierung
% (acid. Best.) + Protokoll2
X3 r/f
Isoniazid B
Name, Vorname
Analysensubstanz
% X
Glycerol WE % XX
Iodzahl WE IZ XXX3
Promethazin B % XX
Benzocain B % X3
Coffein B % X3
Chloramphenicol B % X
Halbmikrobestimmung von Wasser
B Name, Vorname Karl-Fischer
% XX3
IR WG Name, Vorname
IR Protokoll4 r/f3
DC der Analgetika WG Name, Vorname DC der Analgetika
gefundene Analgetika
r/f3
Identitätsreaktionen fkt. Gruppen
WG Name, Vorname
Identität 1, 2 bzw. 3 fkt. Grp. r/f3
Monographien: Identität
WG Name, Vorname
Monographiesubstanz Monographie – Identität
Formblatt nach ApBetrO
r/f3
Monographien: Reinheit
WG Name, Vorname
Monographiesubstanz Monographie – Reinheit
Formblatt nach ApBetrO
r/f3
Monographien: Gehalt
B Name, Vorname
Monographiesubstanz Monographie – Gehalt
% X - XXX (s.u.)3
Propyphenazon B Name, Vorname Analysensubstanz Nachkochanalyse
% X3
Tolbutamid B % X
Phenytoin B % X3
WG: Wägegefäß, B: Becherglas, WE: Weithalserlenmeyerkolben
2 Es ist ein vollständiges, handschriftliches Protokoll gemeint, wobei die Durchführung stichpunktartig erfolgen kann. Zusätzlich ist der Datenbogen (s.u.) auszufüllen. Abgabe bis spätestens zum Tag des Kolloquiums.
3 Bitte beachten Sie die Hinweise zur Durchführung und Auswertung der Analysen in Abschnitt 7! 4 Zuordnung der Banden funktioneller Gruppen auf dem Ausdruck mit Angabe des gefundenen AS
13
BewertungBewertungBewertungBewertung
Die Korrektur der Analysenwerte erfolgt anhand einer Bewertungstabelle (s.u.). Bei
Falschansage einer quantitativen Analyse muss eine neue Analyse bearbeitet werden. Die
quantitativen Analysen müssen gegebenenfalls so oft wiederholt werden, bis der gefundene
Analysenwert innerhalb der äußersten Fehlergrenze (mind. 1 Punkt) liegt und die
Mindestpunktzahl erreicht ist. Deshalb sollten immer Standards bestimmt werden, die im
Praktikum vorhanden sind. Sollte keine Standardsubstanz mehr vorhanden sein, stellen Sie
das Gefäß in die Analysenkisten, damit die Analysenausgabe die Substanz nachliefern kann.
Es ist nicht möglich während der Praktikumszeit Standardsubstanzen zu besorgen, da die
Analysenausgabe nachmittags geschlossen ist. Daneben sollte ein Blindversuch durchgeführt
werden.
Wird mit Abschluss des regulären Praktikumspensums die
erforderliche Mindestpunktzahl von erforderliche Mindestpunktzahl von erforderliche Mindestpunktzahl von erforderliche Mindestpunktzahl von 17171717 PunktenPunktenPunktenPunkten
nicht erreicht, müssen weitere quantitative Analysen durchgeführt werden (sog.
Nachkochanalysen), bis 17 Punkte erreicht sind. Hier gilt ebenfalls, dass pro Analyse nur eine
Ansage möglich ist. Die Analysenanforderung ist zusätzlich mit „Nachkochanalyse“ zu
beschriften.
BewertungstabelleBewertungstabelleBewertungstabelleBewertungstabelle der quantitativen Analysender quantitativen Analysender quantitativen Analysender quantitativen Analysen
X XX XXX I II III
Fehler bis 1 % 2 % 3 % 4 2 1
Fehler bis 2 % 3 % 5 % 3 2 1
Fehler bis 3 % 5 % 7 % 2 1 1
Fehler bis 5 % 7 % 10 % 1 1 1
I: erste Analyse, zweite (Nachkoch-) Analyse;
II: dritte (Nachkoch-) Analyse; III: weitere (Nachkoch-) Analysen
14
r/fr/fr/fr/f----AnalysenAnalysenAnalysenAnalysen
Einige Bestimmungen (gekennzeichnet mit r/f im Analysenplan) werden mit „richtig“ oder
„falsch“ bewertet. In diesen Fällen ist eine Analyse erst dann abgeschlossen, wenn sie mit
„richtig“ bewertet wird.
• Bei der Aufgabe „DC der Analgetika“„DC der Analgetika“„DC der Analgetika“„DC der Analgetika“ darf pro Analyse zweimal angesagt werden.
• Bei den IdentitätsreaktionenIdentitätsreaktionenIdentitätsreaktionenIdentitätsreaktionen auf funktionelle Gruppen darf nur einmal angesagt
werden.
• Die Bewertung der einzelnen Prüfungen auf IdentitätIdentitätIdentitätIdentität und ReinheitReinheitReinheitReinheit bei den
MonographienMonographienMonographienMonographien erfolgt mit ,,richtig“ oder ,,falsch“. Ist eine Prüfung mit „falsch“
bewertet, werden alle Identitäts- bzw. Reinheitsprüfungen mit neuer Analysensubstanz
wiederholt.
Wiederholung derselben Analyse?Wiederholung derselben Analyse?Wiederholung derselben Analyse?Wiederholung derselben Analyse?
Wenn eine Analyse mit falsch oder 0 Punkten bewertet wurde, muss eine neue Analyse
angefordert werden. Die Analysenanforderung ist zusätzlich mit „Wiederholungsanalyse“ zu
beschriften.
Es ist nicht möglich, dieselbe Analyse zweimal anzusagen. Ausnahme ist die DC der
Analgetika, hierbei sind zwei Ansagen pro Analyse möglich.
Wiederholungsanalysen können parallel zu Ihren normalen Analysen angefordert und
bearbeitet werden. Teilen Sie Ihre Aufgaben im Praktikum so ein, dass Sie Ihre
Wiederholungsanalysen möglichst zeitnah bearbeiten können. Warten Sie damit nicht bis zu
den Nachkochtagen!
15
6666 Praktikumsstoff und ArzneistofflistePraktikumsstoff und ArzneistofflistePraktikumsstoff und ArzneistofflistePraktikumsstoff und Arzneistoffliste
PraktikumsstoffPraktikumsstoffPraktikumsstoffPraktikumsstoff
• Generell werden grundlegende theoretische Hintergründe zu bereits bekannten
analytischen und chemischen Inhalten vorausgesetzt (Grundstudium).
• Inhalt der Seminare und Vorlesungen
ArzneistofflisteArzneistofflisteArzneistofflisteArzneistoffliste
Mit * gekennzeichnete AS werden im Praktikum bearbeitet.
6.16.16.16.1 IdentitätIdentitätIdentitätIdentität
*Analgetika per DCAnalgetika per DCAnalgetika per DCAnalgetika per DC: Acetylsalicylsäure, Coffein, Diclofenac-Natrium, Metamizol,
Paracetamol, Phenazon, Phenylbutazon, Propyphenazon (s. Abschnitt 7.5)
*Ausgewählte funktionelle GruppenAusgewählte funktionelle GruppenAusgewählte funktionelle GruppenAusgewählte funktionelle Gruppen:
Alkaloide, prim. arom. Amine, Barbiturate, Benzoat, Citrat, Ester, Salicylat, Tartrat,
Xanthine, reduz. Substanzen (s. Abschnitt 7.6)
Ungesättigte KohlenwasserstoffeUngesättigte KohlenwasserstoffeUngesättigte KohlenwasserstoffeUngesättigte Kohlenwasserstoffe
Ethinylestradiol
Sorbinsäure
Undecylensäure
Halogenierte Halogenierte Halogenierte Halogenierte KohlenwasserstoffeKohlenwasserstoffeKohlenwasserstoffeKohlenwasserstoffe
Beclomethasondipropionat
Cyclophosphamid
Haloperidol
Hydroxylierte KohlenwasserstoffeHydroxylierte KohlenwasserstoffeHydroxylierte KohlenwasserstoffeHydroxylierte Kohlenwasserstoffe
Codein
Ephedrin
Ethanol
Methanol
Morphin
Phenol
Pyridoxinhydrochlorid
Serin
Tyrosin
Thiole Thiole Thiole Thiole
Acetylcystein
16
AmineAmineAmineAmine
Alanin
Amantadinhydrochlorid
Amfetaminsulfat
Benzocain
Ethylendiamin
Lidocain
Nitrazepam
Nortriptylinhydrochlorid
Piperazin-Hexahydrat
Sulfanilamid
Nitroverbindungen Nitroverbindungen Nitroverbindungen Nitroverbindungen
Chloramphenicol Nifedipin
GuanidinGuanidinGuanidinGuanidin----DerivateDerivateDerivateDerivate
Sulfaguanidin
Aldehyde und KetoneAldehyde und KetoneAldehyde und KetoneAldehyde und Ketone
Aceton
Formaldehyd
Haloperidol
Hydrochlorothiazid
Carbonsäuren und DerivateCarbonsäuren und DerivateCarbonsäuren und DerivateCarbonsäuren und Derivate
Atropin
Benzocain
Essigsäure
Ibuprofen
Indometacin
Levodopa
Nicotinamid
Paracetamol
Undecylensäure
PyridinPyridinPyridinPyridin----DerivateDerivateDerivateDerivate
Nicotinamid
IndolIndolIndolIndol----DerivateDerivateDerivateDerivate
Indometacin Tryptophan
BarbitursäureBarbitursäureBarbitursäureBarbitursäure----DerivateDerivateDerivateDerivate
Phenobarbital Thiopental-Natrium
XanthinXanthinXanthinXanthin----DerivateDerivateDerivateDerivate
Coffein
Harnsäure
Theobromin
Theophyllin
17
MorphinMorphinMorphinMorphin----DerivateDerivateDerivateDerivate
Morphin
6.26.26.26.2 ReinheitReinheitReinheitReinheit
Freier Formaldehyd
Gesamtprotein
Lösungsmittelrückstände
Phenol in Sera und Impfstoffen
*Promethazinhydrochlorid per DC
*Schwermetalle
*Wasserbestimmung nach Karl-Fischer
6.36.36.36.3 FettFettFettFett---- und Wachskennzahlenund Wachskennzahlenund Wachskennzahlenund Wachskennzahlen
Säurezahl (SZ)
Esterzahl (EZ)
Hydroxylzahl (OHZ)
*Iodzahl (IZ)
Peroxidzahl (POZ)
Verseifungszahl (VZ)
Unverseifbare Anteile (Unv)
6.46.46.46.4 GehaltGehaltGehaltGehalt
6.4.16.4.16.4.16.4.1 SäureSäureSäureSäure----BaseBaseBaseBase----TitrationenTitrationenTitrationenTitrationen
Acidimetrie mit wässrigen TitrationslösungenAcidimetrie mit wässrigen TitrationslösungenAcidimetrie mit wässrigen TitrationslösungenAcidimetrie mit wässrigen Titrationslösungen
Acetylsalicylsäure
Amantadinhydrochlorid
Amitriptylinhydrochlorid
Busulfan
Ciclopirox
Ethinylestradiol
Furosemid
Glibenclamid
Hydromorphonhydrochlorid
*Ibuprofen
Indometacin
Levocabastinhydrochlorid
Levonorgestrel
Morphinhydrochlorid
Phenylbutazon
*Promethazinhydrochlorid
Theophyllin
*Tolbutamid (Nachkochanalyse)
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Acidimetrie im wasserfreien MilieuAcidimetrie im wasserfreien MilieuAcidimetrie im wasserfreien MilieuAcidimetrie im wasserfreien Milieu
Albendazol
Chininsulfat
Chloroquinphosphat
Clotrimazol
*Coffein
Fluorouracil
Hydrochlorothiazid
Metronidazol
Morphinhydrochlorid
Nitrazepam
Phenobarbital
*Phenytoin (Nachkochanalyse)
*Propyphenazon (Nachkochanalyse)
Salbutamolsulfat
Thiaminnitrat
6.4.26.4.26.4.26.4.2 RedoxtitrationenRedoxtitrationenRedoxtitrationenRedoxtitrationen
Beachten Sie die Hinweise zur Stärkelösung im Abschnitt 7 (Fettkennzahlen)
CerimetrieCerimetrieCerimetrieCerimetrie
Menadion
Nifedipin
Paracetamol
IodometrieIodometrieIodometrieIodometrie
Acetylcystein
Ascorbinsäure
Benzoylperoxid, wasserhaltiges
Captopril
Metamizol-Natrium
IodatometrieIodatometrieIodatometrieIodatometrie
Cetrimid
PeriodatometriePeriodatometriePeriodatometriePeriodatometrie
*Glycerol
BromometrieBromometrieBromometrieBromometrie
*Isoniazid Phenol
NitritometrieNitritometrieNitritometrieNitritometrie
*Benzocain (s. Sondervorschrift)
Sulfadiazin
Sulfamethoxazol
6.4.36.4.36.4.36.4.3 FällungstitrationenFällungstitrationenFällungstitrationenFällungstitrationen
Cyclophosphamid
19
6.4.46.4.46.4.46.4.4 UVUVUVUV----VisVisVisVis----SpektroskopieSpektroskopieSpektroskopieSpektroskopie
*Chloramphenicol
Paracetamol (USP)
Riboflavin
6.4.56.4.56.4.56.4.5 Chromatographische MethodenChromatographische MethodenChromatographische MethodenChromatographische Methoden
GaschromatographieGaschromatographieGaschromatographieGaschromatographie
Lincomycinhydrochlorid α-Tocopherol
HPLCHPLCHPLCHPLC
Allopurinol
Colecalciferol
Folsäure
*Ibuprofen (USP)
Methotrexat
6.56.56.56.5 GesamtmonographieGesamtmonographieGesamtmonographieGesamtmonographie
zwei bzw. vier Monographien pro Student
(zu bearbeitende Aufgaben siehe Abschnitt 7.7.1)
*Acetylsalicylsäure
*Ascorbinsäure
*Citronensäure-Monohydrat
*Coffein
*Ibuprofen
*Isoniazid
*Lidocainhydrochlorid
*Metamizol-Natrium
*Paracetamol
*Promethazinhydrochlorid
*Sulfadiazin
*Thiaminnitrat
*Tryptophan
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7777 Sondervorschriften und Sondervorschriften und Sondervorschriften und Sondervorschriften und TerminanalysenTerminanalysenTerminanalysenTerminanalysen
7.17.17.17.1 ValidierungValidierungValidierungValidierung
Es wird im Praktikum ein Methodenvergleich für die Gehaltsbestimmung von Ibuprofen nach
USP (HPLC) und EuAB (Acidimetrie) durchgeführt. Der Versuch wird in Zweiergruppen
durchgeführt.
7.1.17.1.17.1.17.1.1 IbuprofenIbuprofenIbuprofenIbuprofen----HPLC (modifiziert nach USP)HPLC (modifiziert nach USP)HPLC (modifiziert nach USP)HPLC (modifiziert nach USP)
MobileMobileMobileMobile Phase:Phase:Phase:Phase:
Acetonitril/Aqua bidest 60 / 40 (V/V) + 0,1 % Ameisensäure
HPLCHPLCHPLCHPLC----System:System:System:System:
Flussrate: 1,0 ml/min, Detektion: UV (233 nm)
Kalibrierung: Kalibrierung: Kalibrierung: Kalibrierung:
An jedem Praktikumstag, an dem die HPLC-Analyse durchgeführt wird, führt eine Gruppe die
Kalibration durch und erstellt eine Kalibriergerade, die von den anderen Gruppen für die
Auswertung benutzt wird.
Etwa 300 mg der Ibuprofen-Standardsubstanz (genau gewogen) werden in einen 25 mL
Messkolben gegeben und in Methanol (p.A.) gelöst. Es wird dann mit Methanol (p.A.) auf 25
mL aufgefüllt (12 g/L). Von dieser Stammlösung werden jeweils 100, 250, 500, 750, 1000 und
1250 µL in einen 20-mL-Messkolben pipettiert. (Bitte benutzen dafür Sie die bereitliegende
Eppendorf-Pipette.) Dazu werden jeweils 1000 µL (Eppendorf-Pipette) der Lösung des internen
Standards (Valerophenon 2 g/L in Methanol) gegeben und mit Fließmittel auf 20 mL aufgefüllt.
Von dieser ersten Verdünnung wird jeweils 1,0 mL in einen 10-mL-Messkolben einpipettiert
und es wird wieder mit Fließmittel auf 10 mL aufgefüllt.
Die sechs Kalibrierlösungen werden je sechsmal ins HPLC-System injiziert. Es erfolgt dann eine
Auswertung mit der Auftragung der Flächenquotienten Ibuprofen/interner Standard gegen die
Konzentration (in µg/mL, dabei die tatsächliche Einwaage berücksichtigen). Dazu verwendet
man am besten eine Tabellenkalkulationsvorlage.
HPLCHPLCHPLCHPLC----Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)
450 mg der Ibuprofen-Analyse werden abgewogen und in einem 50-mL-Messkolben in
Methanol (p.A.) gelöst. Heben Sie den Rest der Analyse für die acidimetrische Bestimmung
auf! Es wird dann mit Methanol auf 50 mL aufgefüllt. Von dieser Lösung werden 1000 µL
(Eppendorf-Pipette) in einen 20-mL-Meßkolben pipettiert, dazu werden 1000 µL (Eppendorf-
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Pipette) der Lösung des internen Standards gegeben (Valerophenon 2 g/L), und es wird mit
Fließmittel auf 20 mL aufgefüllt. Von der 1. Verdünnung wird 1,0 mL in einen 10-mL-
Meßkolben pipettiert, und es wird wieder mit Fließmittel auf 10 mL aufgefüllt. Diese Lösung
wird sechsmal chromatographiert. Die Auswertung erfolgt über eine Kalibriergerade (Quotient
Peakfläche Ibuprofen / Peakfläche interner Standard vs. Konzentration Ibuprofen).
7.1.27.1.27.1.27.1.2 Acidimetrie Acidimetrie Acidimetrie Acidimetrie –––– Ibuprofen (EuAB)Ibuprofen (EuAB)Ibuprofen (EuAB)Ibuprofen (EuAB)
Zur acidimetrischen Bestimmung nach EuAB werden pro Zweiergruppe jeweils sechs
Einwaagen entnommen (aus dem Gefäß, aus dem auch die Probe für die HPLC-Bestimmung
stammte). Der acidimetrisch ermittelte Gehalt wird ins Analysenheft eingetragen und mit
Punkten bewertet. Mit dem Ergebnis erhalten Sie den wahren Wert der Analyse, den Sie für die
statistische Auswertung benötigen.
7.1.37.1.37.1.37.1.3 ProtokollProtokollProtokollProtokoll
Füllen Sie das Formblatt (letzte Seite im Skript) vollständig aus. In einem abschließenden
Protokoll sollen die beiden Methoden miteinander verglichen werden. Legen Sie die in das
Formblatt eingetragenen statistischen Größen zu Grunde und vergleichen und bewerten Sie
die beiden Methoden hinsichtlich ihrer Präzision und Richtigkeit. Definieren Sie eingangs die
entscheidenden statistischen Größen und Testverfahren und erklären Sie deren Bedeutung in
Bezug auf die durchgeführten Versuche sowie ihre Aussagekraft. Beurteilen Sie abschließend,
welche Methode geeigneter ist. Nennen Sie mögliche Fehlerquellen bei der Durchführung der
beiden Methoden.
Beachten Sie bei der Erstellung des Protokolls auch die Unterlagen zum Seminar
„Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung“.
Geben Sie das Protokoll spätestens am Tag des Kolloquiums ab!
7.1.47.1.47.1.47.1.4 Statistische AuswertungStatistische AuswertungStatistische AuswertungStatistische Auswertung
FFFF----TestTestTestTest
Führen Sie den F-Test zum Vergleich der Varianzen der beiden Gehaltsbestimmungsmethoden
durch.
2
2
2
1
s
sF = ,
21ss >
Fber sollte kleiner sein als FTabelle (siehe Tabelle z.B. Rücker, Neugebauer, Willems;
Instrumentelle Pharmazeutische Analytik, 4. Auflage 2008, S.24).
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tttt----Test (Test (Test (Test (systematischer Fehler bzw.systematischer Fehler bzw.systematischer Fehler bzw.systematischer Fehler bzw. Vergleich der Mittelwerte)Vergleich der Mittelwerte)Vergleich der Mittelwerte)Vergleich der Mittelwerte)
Führen Sie je nach Ergebnis des F-Tests den geeigneten t-Test durch und berücksichtigen Sie
dafür die Formeln und Tabellen in Rücker, Neugebauer, Willems; Instrumentelle
Pharmazeutische Analytik, 4. Auflage 2008, S.25-28.
7.27.27.27.2 FettkennzahlenFettkennzahlenFettkennzahlenFettkennzahlen
Iodzahl Iodzahl Iodzahl Iodzahl –––– Sondervorschrift Sondervorschrift Sondervorschrift Sondervorschrift
Einwaage: 0,25 g für Iodzahl. Die Bestimmung wird nach EuAB durchgeführt, aber es wird bei
der Bestimmung der Iodzahl das vorgeschriebene Chloroform durch Toluol ersetzt.
♦ Hinweis: Als Stärkelösung wird statt der vorgeschriebenen Lösung die Stärkelösung,
iodidfreie R des EuAB verwendet (d.h. ohne Zusatz von Quecksilberiodid).
Gleiches gilt für den Abschnitt Redoxtitrationen.
7.37.37.37.3 Instrumentelle Methoden/elektrometrische EndpunktsbestimmungInstrumentelle Methoden/elektrometrische EndpunktsbestimmungInstrumentelle Methoden/elektrometrische EndpunktsbestimmungInstrumentelle Methoden/elektrometrische Endpunktsbestimmung
Zu Praktikumsbeginn melden Sie sich bitte bei den diensthabenden Assistenten!
Die zur Durchführung der Versuche „Promethazinhydrochlorid“, „Benzocain“, „Coffein“,
„Chloramphenicol“, „Halbmikrobestimmung von Wasser“ und „Substanzidentifizierung
mittels IR“ benötigten Geräte stehen Ihnen nur über einen begrenzten Zeitraum zur Verfügung.
Die Termineinteilungen können gesonderten Aushängen entnommen werden. Falls Sie Ihre
Analysen nicht im angegebenen Zeitraum beenden können bzw. Sie Ihre Analyse wiederholen
müssen, wenden Sie sich an die diensthabenden Assistenten und versuchen Sie, die Analyse
möglichst zeitnah nachzuholen.
Es werden von jedem Studierenden nicht alle Analysen praktisch durchgeführt. Machen Sie
sich auch mit dem praktischen Ablauf der jeweils anderen Analysen vertraut.
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Benzocain Benzocain Benzocain Benzocain –––– SondervorschriftSondervorschriftSondervorschriftSondervorschrift
Zu Beginn der Aufgabe erfolgt ein kurzes Gruppenkolloquium.
Für die nitritometrische Bestimmung muss die Natriumnitrit-Maßlösung (0,1 mol/L) nach EuAB
hergestellt und gegen Benzocain-Reinsubstanz (und nicht gegen Sulfanilamid) eingestellt
werden. Dies übernehmen die Studierenden selbst, indem ein Standard mittitriert wird. Dies
ist nötig, damit individuelle Fehler ausgeglichen werden können. Geben Sie Ihre
Titrationskurven und Berechnungen mit dem Analysenheft ab.
Bitte Vorsicht beim Umgang mit der nicht ganz billigen Bürettenapparatur und dem giftigen
NaNO2!
Halbmikrobestimmung von Wasser Halbmikrobestimmung von Wasser Halbmikrobestimmung von Wasser Halbmikrobestimmung von Wasser –––– KarlKarlKarlKarl----FischerFischerFischerFischer----MMMMethodeethodeethodeethode
Zu Beginn der Aufgabe erfolgt ein kurzes Gruppenkolloquium.
Natriummonohydrogenphosphat-Dodecahydrat:
• Vorbereitung der Probe:
Verreiben Sie Ihre Analyse in einem trockenen (!) Mörser.
Einwaage: 20 – 30 mg (durch Rückwägung genau bestimmt)
Lösungsmittel: wasserfreies Methanol / Formamid = 10 / 40
• Auswertung:
Berechnen Sie mithilfe des am Gerät angegebenen Faktors der Maßlösung den Gehalt
an Natriummonohydrogenphosphat-Dodecahydrat in der Analyse. Als Verschnitt wurde
wasserfreies Natriummonohydrogenphosphat verwendet. Geben Sie Ihre Berechnungen
(in übersichtlicher und nachvollziehbarer Form!) zusammen mit Ihrem Analysenheft zur
Korrektur ab.
Bitte beachten Sie den Aushang am Gerät!
IRIRIRIR----AnalyseAnalyseAnalyseAnalyse
Eine Reinsubstanz soll mittels IR identifiziert werden. Es handelt sich dabei um eine der
Substanzen, die auch als Monographieanalyse ausgegeben werden. Es soll ein IR-Spektrum
aufgenommen werden (Gerät im 3. OG). Anhand eines Vergleichsspektrums / des EuAB-
Kommentars (im Praktikum vorhanden) ist die Substanz zu identifizieren, die wesentlichen IR-
Absorptionsbanden sind zu benennen. Das aufgenommene Spektrum wird mit dem
Analysenheft abgegeben.
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7.47.47.47.4 Wasserfreie TitrationenWasserfreie TitrationenWasserfreie TitrationenWasserfreie Titrationen
Alle wasserfreien Titrationen mit Perchlorsäure müssen unter den Abzügen durchgeführt
werden!
Titrieren Sie nur mit geeignetem Spritzschutz!
Für die Entsorgung stehen Spezialtonnen zur Verfügung.
Im Assistentenraum stehen einige Elektroden für die wasserfreie Titration zur Verfügung. Diese
können bei der Gehaltsbestimmung von Coffein bzw. Thiaminnitrat (siehe jeweilige
Arzneibuchvorschrift) alternativ zu den unter 6.7.2 angegebenen Farbindikatoren verwendet
werden.
PropyphenazonPropyphenazonPropyphenazonPropyphenazon –––– SondervorschriftSondervorschriftSondervorschriftSondervorschrift
Etwa 0,500 g Substanz, genau gewogen, werden in einer Mischung von 10 mL wasserfreier
Essigsäure R (EuAB) und 10 mL Acetanhydrid R (EuAB) gelöst. Nach Zusatz von 2 mL Dioxan R
(EuAB) und 0,15 mL Naphtholbenzein-Lösung R (EuAB) wird die Bestimmung mit Perchlorsäure
(0,1 mol/L) durchgeführt. 1 mL Perchlorsäure entspricht 23,03 mg Propyphenazon.
PhenytoinPhenytoinPhenytoinPhenytoin
0.500 g Substanz werden in 40 mL Dimethylformamid gelöst. Nach Zusatz von 0.2 mL
Thymolphthalein RN 2 (DAB 9) wird mit NaOH (0,1 mol/L) bis zum Farbumschlag nach hellblau
titriert. 1 mL NaOH entspricht 25,23 mg Phenytoin,
7.57.57.57.5 DünnschichtchromatographieDünnschichtchromatographieDünnschichtchromatographieDünnschichtchromatographie
DC der AnalgetikaDC der AnalgetikaDC der AnalgetikaDC der Analgetika
Arbeitsvorschrift:
Identifizierung von Analgetika, s. Pharmazeutische Zeitung, 137 (1992), 4188
Die Vergleichssubstanzen sind jeweils zu Praktikumsbeginn bei den diensthabenden
Assistenten abzuholen und spätestens am Ende des Praktikumstages wieder abzugeben. In In In In
den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. Die Herstellung der
Fließmittelgemische erfolgt unter dem Abzug. Für eine große DC-Kammer benötigt man 20 –
30 mL Fließmittel, für die kleinen Kammern nicht mehr als 10 mL.
Es sind eine bis drei der folgenden Substanzen enthalten: Acetylsalicylsäure, Coffein,
Diclofenac, Metamizol, Paracetamol, Phenazon, Phenylbutazon, Propyphenazon.
Bitte geben Sie bei der Ansage des Ergebnisses die DC-Platte mit ab!
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7.67.67.67.6 Identitätsreaktionen auf funktionelle GruppenIdentitätsreaktionen auf funktionelle GruppenIdentitätsreaktionen auf funktionelle GruppenIdentitätsreaktionen auf funktionelle Gruppen
Folgende Identitätsreaktionen werden durchgeführt:
Alkaloide, prim. arom. Amine, Barbiturate, Benzoat, Citrat, Salicylat, Tartrat, Xanthine, reduz.
Substanzen (nach Glucose EuAB, Prüfung C)
Die benötigten Lösungen und Reagenzien werden gruppenweise für das ganze Semester
hergestellt (Einteilung hängt im Praktikum aus). Rechnen Sie mit einer Versuchszahl von etwa
viermal der Studentenzahl im Semester für die Ansatzmenge. Benötigte Substanzen stehen im
Reagenzienregal bereit. Die Reagenzien werden ordnungsgemäß (Gefahrensymbole etc.)
beschriftet. Eventuell müssen noch zusätzlich PET-Flaschen / Deckel etc. in der Glasausgabe
gekauft werden. Es ist jeweils eine Substanz in der Analyse enthalten, die aber ggfs. mehrere
positive Nachweise ergeben kann (z. B. p-Aminosalicylsäure-Na, Coffein-Natriumbenzoat,
Coffein-Natriumsalicylat).
• Geben Sie nur die Stoffgruppe(n) / Funktionelle(n) Gruppe(n) im Analysenheft an,
nicht die Substanz, die Sie vermuten.
• Falsch positive Nachweise:
Xanthine und Sulfathiazol können auch einen positiven Alkaloidnachweis ergeben,
die Lösung ist nur etwas schwächer gefärbt.
Reduzierende Zucker ergeben auch einen (schwach) positiven Barbituratnachweis.
Xanthine und Sulfathiazol reagieren ebenfalls positiv auf Barbiturate.
Auch bei den Farbreaktionen sollten Sie immer Vergleiche mit den
Vergleichssubstanzen durchführen!
26
7.77.77.77.7 MonMonMonMonographienographienographienographien
In diesem Arbeitsabschnitt sollen vier Monographien des EuAB aus der folgenden Auswahl
exemplarisch bearbeitet werden. Der jeweilige Arzneistoff bzw. Hilfsstoff wird in drei
getrennten Analysengefäßen angefordert (Beschriftung s. Abschnitt 4).
Es müssen jeweils Identität, Reinheit und Gehalt geprüft werden. Welche der Identitäts- bzw.
Reinheitsprüfungen durchgeführt werden, ist im Folgenden angegeben. Die Herstellung der
benötigten Reagenzien erfolgt gruppenweise während des Abschnitts „Identität funktioneller
Gruppen“ (Einteilung wird ausgehängt). Die Ergebnisse der Prüfungen sind als Protokoll auf
einem Formblatt nach ApBetrO festzuhalten (Kopierexemplare werden ausgegeben). Im
Analysenheft wird lediglich das Gesamturteil der Identitäts- und Reinheitsprüfungen bzw. der
Gehalt angegeben.
Die Bewertung der einzelnen Prüfungen erfolgt mit ,,richtig“ oder ,,falsch“. Ist eine der Prüfung
mit „falsch“ bewertet, werden alle Identitäts- bzw. Reinheitsprüfungen mit neuer
Analysensubstanz wiederholt. Die Gehaltsbestimmungen müssen gegebenenfalls so oft
wiederholt werden, bis der gefundene Analysenwert innerhalb der äußersten Fehlergrenze liegt
(Punkteschema s. Abschnitt 4).
7.7.17.7.17.7.17.7.1 Substanzliste und AufgabenSubstanzliste und AufgabenSubstanzliste und AufgabenSubstanzliste und Aufgaben
Acetylsalicylsäure Identität: A, B, C, D (s. Anmerkungen) Reinheit: Salicylsäure (nach EuAB 1997), Schwermetalle Gehalt: X
Ascorbinsäure Identität: A ( %1
1cmA (243 nm) = 545 – 585), C, D
Rh.: Oxalsäure (Verunreinigung E), Schwermetalle, spezifische Drehung Gehalt: X
Citronensäure-Monohydrat Identität: A, B, C (Abzug!), D Reinheit: Oxalsäure, Sulfat, Wasser Gehalt: X
Coffein Identität: A, C, D, F Reinheit: sauer reagierende Substanzen, verwandte Substanzen (DC nach Ph. Eur. 6.0), Schwermetalle Gehalt: Indikator Kristallviolett, X
27
Ibuprofen Identität: A, B, C, D Reinheit: opt. Drehung, verwandte Substanzen (nach Ph. Eur. 6.0, es wird dieselbe HPLC-Methode wie zur Gehaltsbestimmung verwendet, Verunreinigung: Propyphenazon) Gehalt: X
Isoniazid Identität: A, B, C (Smp. ohne Umkristallisation) Reinheit: pH-Wert, Hydrazin und verwandte Substanzen, Schwermetalle Gehalt: X
Lidocain-Hydrochlorid (Monographie nach Ph. Eur. 5.0) Identität: A, B, D, E, F Reinheit: Aussehen der Lösung, pH-Wert, 2,6-Dimethylanilin (im Messzylinder), Schwermetalle Gehalt: X
Metamizol-Natrium Identität: A, B, C Reinheit: sauer oder alkalisch reagierende Substanzen, fremde Substanzen (per DC nach DAB 9 – Ethylacetat statt Butylacetat verwenden), Sulfat, Schwermetalle Gehalt: XX
Paracetamol Identität: A, B, C, D, E Reinheit: Schwermetalle, Trocknungsverlust, 4-Aminophenol (nach Ph. Eur. 4.0) Gehalt: nach USP 31, XX
Promethazin-Hydrochlorid Identität: A, C, D Reinheit: verwandte Substanzen (nach Ph. Eur. 5.0), pH-Wert, Schwermetalle: Prüfung B Gehalt: XX
Sulfadiazin Identität: A, D Reinheit: sauer reagierende Substanzen, verwandte Substanzen, Schwermetalle Gehalt: X
Thiaminnitrat Identität: A, B, C Reinheit: pH-Wert, Schwermetalle, Trocknungsverlust Gehalt: Indikator: Kristallviolett, X
Tryptophan Identität: B, D Reinheit: spezifische Drehung, DC mit Ninhydrin nachweisbare Substanzen, Schwermetalle, Sulfat Gehalt: XX
28
7.7.27.7.27.7.27.7.2 MonographMonographMonographMonographieieieie----AnalytikAnalytikAnalytikAnalytik
Beachten Sie folgende Hinweise
• Es ist auf dem Formblatt kurz zu beschreiben, welche Prüfungen wie durchgeführt
wurden, was das Ergebnis der einzelnen Prüfungen auf Identität, Reinheit und Gehalt
ist und ob die einzelnen Prüfungen jeweils dem Arzneibuch entsprechen oder nicht. Es
ist mit einem Gesamturteil am Ende zu vermerken, ob die Substanz den Anforderungen
des Arzneibuches entspricht oder nicht.
• DC-Platten sowie aufgenommene UV- und IR-Spektren werden mit dem Formblatt
abgegeben, wobei die die spez. IR-Absorptionsbanden gekennzeichnet den
entsprechenden funktionellen Gruppen zugeordnet werden sollen.
• Schwermetalle: Bei Angabe Methode C, D oder E im EuAB muss Methode A verwendet
werden. Achten Sie jedoch darauf, die Konzentration Ihrer Blei-Lösung anzupassen.
Stellen Sie sich selber positive Analysen her, damit sie NS/Färbung sicher beurteilen
können. Der Nachweis erfordert viel Fingerspitzengefühl.
• Acetylsalicylsäure: Bei der Indigo-Reaktion tritt der Farbumschlag nach Blau bei
Ansäuern mit HCl u. U. nicht ein.
• Ascorbinsäure: Prüfung D: Der Niederschlag kann eher beige als grau sein.
• Metamizol-Natrium: Prüfung B: Die Färbung kann auch gelbrot statt rot sein. Prüfung C:
Nehmen Sie evtl. etwas mehr Analysensubstanz.
29
8888 AnhangAnhangAnhangAnhang
8.18.18.18.1 EntsorgungsrichtlinienEntsorgungsrichtlinienEntsorgungsrichtlinienEntsorgungsrichtlinien
• halogenierte und nicht-halogenierte organische Lösungsmittel
� 10-L-Kunststoffkanister, kein Wasser (Scheidetrichter)
• Schwermetalle, v. a. Ce, Pb
� 30-L-Kunststoffkanister
„Wäßrige Waschflüssigkeiten und Mutterlaugen – pH 1“
• Lösemittel/Wassergemische
� 30-L-Kunststoffkanister
„Wäßrige pharmazeutische Abfälle“ z.B. DMF/Wasser Abfälle
• Abfälle der HPLC-Aufgabe
� 30-L-Kunststoffkanister „Acetonitril/Wassergemische 6:4“
• Perchlorsäure
� 30-L-Kunststoffkanister „Perchlorsäurehaltige Abfälle“
• Feststoffe
� Feststofftonne „Organische Feststoffe“
� Feststofftonne „Filterpapiere“ (Feststoffrückstände vorsichtig abklopfen und
geeignet entsorgen (s.o.))
30
8.28.28.28.2 Versuchsauswertung Methodenvergleich IbuprofenVersuchsauswertung Methodenvergleich IbuprofenVersuchsauswertung Methodenvergleich IbuprofenVersuchsauswertung Methodenvergleich Ibuprofen----Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)
Gleichung:Gleichung:Gleichung:Gleichung: Wahrer Wert [%]:Wahrer Wert [%]:Wahrer Wert [%]:Wahrer Wert [%]:
Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg] FlächeFlächeFlächeFläche FlächeFlächeFlächeFläche I.S.I.S.I.S.I.S. Fl./Fl.Fl./Fl.Fl./Fl.Fl./Fl. I.S.I.S.I.S.I.S. Konz. [µg/mLKonz. [µg/mLKonz. [µg/mLKonz. [µg/mL]]]] Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%] MittelwertMittelwertMittelwertMittelwert Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]
VarianzVarianzVarianzVarianz Richtigkeit Richtigkeit Richtigkeit Richtigkeit (WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%]
SDSDSDSDGehaltGehaltGehaltGehalt SSSSrel rel rel rel [%][%][%][%]
Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg] Titrationsvol. Titrationsvol. Titrationsvol. Titrationsvol. [mL[mL[mL[mL]]]]
Gehalt Gehalt Gehalt Gehalt [%][%][%][%]
MittelwertMittelwertMittelwertMittelwert Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]
VarianzVarianzVarianzVarianz RichtigkeitRichtigkeitRichtigkeitRichtigkeit (WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%]
FFFF----TestTestTestTest tttt----TestTestTestTest
SDSDSDSD GehaltGehaltGehaltGehalt SSSSrelrelrelrel [%][%][%][%]
Faktor der Faktor der Faktor der Faktor der MaßlösungMaßlösungMaßlösungMaßlösung
Verbrauch Verbrauch Verbrauch Verbrauch BlindtitrationBlindtitrationBlindtitrationBlindtitration
1. Ermittelte Werte eintragen, Einzelgehalte, Mittelwert, Srel und die übrigen Werte berechnen. Geben Sie ausführliche und nachvollziehbare Rechenwege aller Werte im Protokoll an.
2. Protokoll, Diskussion und ggf. Fehlerdiskussion erfolgen handschriftlich und leserlich auf einem gesonderten Zettel. Der formale Aufbau eines Protokolls ist zu berücksichtigen. Erklären Sie insbesondere die Bedeutung der statistischen Begriffe in Bezug auf die durchgeführten Experimente.
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