1. Общие ультраструктурные признаки представителей царства эукариот и прокариот.Более сложный тип организации клеток характерен для эукариотов.У эукариотов широко развита сеть внутриклеточных мембран, образующих ЭПР и служащих

для обособления клеточных органелл от цитоплазмы. Клетки прокариотов имеют только одну внутреннюю полость, ограниченную цитоплазматической мембраной. Один из основных признаков, по которому можно дифференцировать два типа клеток (заключён в самом их названии), – это строение ядра. Ядерная структура прокариотов, названная нуклеоидом, не имеет ядерной мембраны, состоит из макромолекулы ДНК, связанной с белками, среди которых отсутствуют гистоны, и прикреплённой в одной точке к ЦПМ. Ядро содержит гаплоидный набор генов. Клетки эукариотов имеют ядро (или несколько), имеющее мембрану, кариолимфу, хроматин (хромосомы) и ядрышки, за небольшим исключением, диплоидны. В клетках прокариотов (в отличие от эукариотов) отсутствуют митохондрии, хлоропласты, комплекс Гольджи. Ферменты окислительного фосфорилирования у них связаны с цитоплазматической мембраной и её производными образованиями – мезосомами. Для прокариотов характерно наличие рибосом с константой седиментации 70S, они расположены только в цитоплазме (у эукариотов 80S, кроме рибосом митохондрий – также 70S). Прокариоты имеют специфический компонент клеточной стенки – муреин. Также они отличаются наличием плазмид – автономно реплицирующихся кольцевидных молекул ДНК.

2. Грибы. Особенности морфологии, виды спорообразования. Принципы классификации. Способы микроскопического изучения.

Одноклеточные и многоклеточные грибы являются эукариотами с различным числом хромосом в ядре. Они снабжены ядерной мембраной, митохондриями и ЭПР.

Клеточная стенка грибов представлена микрофибриллярным матриксом углеводной природы. Он состоит преимущественно из гексоз и гексозаминов. В состав клеточной стенки также входит хитин (синтезируется в хитосомах). Больше хитина в клеточных стенках нитчатых форм, чем у дрожжевых микроорганизмов. Последние содержат нерастворимый глюкан с растворимым маннаном, который определяет антигенную специфичность дрожжей.

Грибы могут быть одноклеточными (дрожжи) и нитчатыми (плесени). Многие виды проявляют диморфизм: в инфицированных тканях растут в виде дрожжей, а при культивировании in vitro – в форме плесени.

Грибы обычно размножаются спорами. В благоприятных условиях спора, прорастая, образует ростковую трубочку, которая удлиняется за счёт дистального конца и превращается в нить – гифу. Впоследствии в гифе могут возникнуть поперечные перегородки – септы, располагающиеся позади верхушки растущей нити. В таком случае образуется септированная гифа (у высших грибов, а у низших – несептированная). Продолжая расти и ветвиться, гифы переплетаются и образуют мицелий (может быть рыхлым – у плесеней; компактным – у плодовых тел шляпных грибов). Часть мицелия, врастающая в субстрат, – вегетативный, субстратный мицелий; часть, направленная вверх и ответственная за спорообразование, – репродуктивный, воздушный мицелий. Последний и образуемые им споры неодинаковы у разных представителей грибов, что используется для их идентификации и систематики. Спорообразующие структуры называются спорофорами. Различают следующие виды спор:

1. эндоспоры – терминальный конец спорофоры увеличивается и превращается в закрытое вместилище спор

спорангий со спорангиоспорами зооспорангий с зооспорами (если споры имеют жгутики)

2. экзоспоры, или конидии, – свободные спорыСпорофора называется соответственно спорангиеносцем либо конидиеносцем.Дрожжевые грибы не образуют мицелия и размножаются различными путями: почкованием,

делением, половым путём и эндоспорами, которые располагаются в сумках (аскоспоры). При размножении клетки дрожжеподобных грибов располагаются цепочками и вытягиваются в длинные нити – псевдомицелий.

Грибы подразделяются на четыре класса: Oomycetes – водные грибы, также род Mucor или головчатая плесень

(несептированный мицелий, спорангиоспоры) Ascomycetes – сумчатые грибы, также роды Aspergillus, Penicillium, Candida, дрожжи,

спорынья (сумки с аскоспорами) Basidiomycetes – базидальные грибы, шляпные (половые базидиоспоры на базидиях) Deuteromycetes – несовершенные грибы, имеют септированные гифы, размножаются

бесполым путём с помощью конидий, многие патогенны для человека

3. Простейшие. Особенности морфологии и жизненного цикла. Принципы классификации. Способы микроскопического изучения.

Простейшие (Protozoa) – одноклеточные эукариотные животные организмы микроскопических размеров.

Характерная черта морфологии всех простейших – наличие ядра (или нескольких), имеющего мембрану, кариолимфу, хроматин (хромосомы) и ядрышки. Большинство простейших обладает относительно постоянной формой тела, что обусловлено наличием плотной эластичной мембраны (пелликула), образуемой периферическим слоем цитоплазмы. Некоторые простейшие имеют опорные фибриллы и минеральный скелет. Цитоплазма простейших содержит ЭПР, рибосомы, митохондрии, аппарат Гольджи, лизосомы, различные типы вакуолей и др.

Многие простейшие способны активно перемещаться. Движение может осуществляться посредством псевдоподий (временные выросты цитоплазмы, амебоидное движение), жгутиков или ресничек (постоянные органеллы).

Дыхание осуществляется всей поверхностью тела. Большинство обладает гетеротрофным типом обмена веществ. У простых форм захват пищи осуществляется посредством фагоцитоза, у более сложно организованных имеются специальные структуры.

Многие простейшие являются паразитами человека.Амёбы, лямблии и балантидии могут образовывать цисты.Систематика простейших основана на способах движения, размножения и циклах развития.

Тип Protozoa подразделяется на 4 класса:1. Жгутиковые – передвигаются с помощью жгутиков, размножение продольным делением

реже половым путём (лейшмании, трихомонады, трипаносомы, лямблии)2. Саркодовые – передвигаются благодаря наличию псевдоподий, размножаются простым

делением (амёбы)3. Споровики – спец. органов движения не имеют, размножаются половым и бесполым

путём (плазмодии, токсоплазмы)4. Ресничные – передвигаются с помощью ресничек (балантидии)

Морфологию простейших изучают в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, а также методом электронной микроскопии.

4. Актиномицеты. Особенности морфологии и ультраструктуры. Сходство с грибами и отличия от грибов. Способы микроскопического изучения.

Актиномицеты (actis – луч, mykes – гриб) – лучистые грибы, включены в порядок Actinomycetales, объединяющий микроорганизмы, способные к образованию ветвящихся мицелиальных клеток.

Клетки актиномицетов имеют клеточную стенку, ЦПМ; в цитоплазме содержатся нуклеоид, рибосомы, мезосомы, включения. Некоторые актиномицеты образуют микрокапсулу.

Основным морфологическим признаком является ветвящаяся форма клеток, имеющих вид коротких палочек или длинных нитевидных образований, напоминающих мицелий грибов и называемых поэтому гифами.

Актиномицеты отличаются друг от друга строением пептидогликанового слоя клеточной стенки.

Актиномицеты сем. Actinomycetaceae могут образовывать ветвящиеся клетки, не образуют воздушного мицелия и спор; возбудители актиномикоза; бифидобактерии.

Актиномицеты сем. Nocardiaceae образуют длинные нитевидные клетки, дают субстратный и воздушный мицелий, гифы фрагментируются на кокковидные и палочковидные клетки; вызывают нокардиоз.

Актиномицеты сем. Streptomycetaceae образуют субстратный (не фрагментируется) и воздушный мицелий, размножение путём спорообразования; вызывают мицетомы кожи, являются продуцентами антибиотиков.

Морфологию актиномицетов изучают в окрашенных мазках и при помощи фазово-контрастной микроскопии, а также методом электронной микроскопии.

В порядок Actinomycetales входят также бактерии сем. Mycobacteriaceae (вызывают туберкулёз и лепру).

5. Спирохеты. Особенности морфологии и ультраструктуры. Принципы классификации. Способы микроскопического изучения.

Спирохеты (speira – виток, изгиб, chaite – волосы) представляют собой спирально извитые подвижные микроорганизмы, объединённые в порядок Spirochaetales.

Среди спирохет имеются свободноживущие формы, комменсалы – представители нормальной микрофлоры человека и паразитические формы. Патогенностью обладают спирохеты из родов Treponema (сифилис), Borellia (эпидемический и клещевой возвратный тиф), Leptospira (лептоспироз).

Спирохеты имеют форму длинных тонких спирально извитых клеток. Форма и количество завитков характерны для каждого рода спирохет. В неблагоприятных условиях некоторые спирохеты могут переходить в форму цисты. Обладают способностью к активному движению – в клеточной стенке содержатся упорядоченно расположенные микрофибриллы (прикреплены к блефаропластам – базальным тельцам).

Клетка спирохеты в структурном отношении представляет собой цитоплазматический цилиндр, ограниченный ЦПМ и покрытый клеточной стенкой. В цитоплазме содержатся нуклеоид, рибосомы, мезосомы, включения. Клеточная стенка тонкая, состоит из наружной мембраны и пептидогликанового слоя, тесно прилежащего к ЦПМ. У ряда спирохет (трепонема) имеется наружный слизистый слой, имеющий вид чехла, окружающего клетку.

Морфологию спирохет изучают в световом микроскопе в окрашенных препаратах, в живом состоянии в фазово-контрастном или темнопольном микроскопе. Спирохеты различаются по способности окрашиваться: одни хорошо окрашиваются обычными анилиновыми красителями (боррелии – грамотрицательные), другие требуют специальных методов окраски (чаще всего по Романовскому-Гимзе).

6. Прокариоты – внутриклеточные паразиты. Морфологические особенности риккетсий. Морфологические особенности хламидий. Морфо-ультраструктурные особенности микоплазм.

Риккетсии, хламидии и микоплазмы относятся к облигатным внутриклеточным паразитам, причём хламидии и риккетсии являются энергетическими паразитами, не растут на питательных средах и не имеют непатогенных видов (в отличие от микоплазм).

Риккетсии (Rickettsiales) – грамотрицательные прокариоты кокковидной или палочковидной формы, расположенные одиночно, по двое или в виде коротких цепочек. Не имеют жгутиков, не образуют спор и капсул (риккетсии Провацека имеют наружный слизеподобный слой). Клетки содержат клеточную стенку, ЦПМ, цитоплазму с нуклеоидом и рибосомами. Клеточная стенка рыхлая и проницаема для различных веществ. Вызывают риккетсиозы (эпидемический сыпной тиф и др.).

Хламидии (Chlamidiales) – грамотрицательные кокковидные прокариоты. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Инфекционной формой хламидий являются небольшие спороподобные сферические клетки, называемые элементарными тельцами (при

попадании в чувствительную клетку превращаются в ретикулярные тельца, способные к делению). Они имеют ригидную клеточную стенку и ЦПМ. В цитоплазме – нуклеоид и рибосомы. Вызывают трахому, орнитоз, специфический конъюнктивит, венерический лимфогранулематоз.

Микоплазмы (Mycoplasmatales) – грамотрицательные микроорганизмы, лишённые клеточной стенки. Морфологически неоднородны. Имеют вид очень мелких сферических или овоидных клеток, более крупных шаровидных клеток и нитевидных, способных к ветвлению клеток. Клетки микоплазм не способны синтезировать компоненты клеточной стенки (причина паразитизма), окружены ЦПМ. Снаружи ЦПМ обнаруживается капсулоподобный слой. В цитоплазме – нуклеоид, рибосомы, кольцевые внутриклеточные мембранные структуры (производные ЦПМ). Вызывают микоплазма-пневмонию, воспалительные заболевания МПС.

7. Структура клеточной стенки как принцип классификации прокариот. Формы бактерий и принципы деления на роды.

Клеточная стенка – один из основных структурных элементов бактериальной клетки. Она представляет собой биогетерополимер, являющийся плотной структурой, окружающей протопласт клетки и придающей ей постоянную форму. Химический состав клеточной стенки и её строение характерны для определенных групп прокариотов и служат их отличительными признаками. Однако основой клеточной стенки всегда является пептидогликан муреин (гетерополимерное образование, состоящее из гликановых цепей и перекрёстно связанных пептидов), от которого зависят её прочность и ригидность. По отношению к окраске по методу Грама бактерии разделяются на грамположительные и грамотрицательные. У первых пептидогликан многослоен, поэтому образовавшийся в процессе окраски комплекс генцианового фиолетового с йодом не вымывается спиртом, в то время как грамотрицательные бактерии, имея тонкий пептидогликан, обесцвечиваются им. При последующей окраске фуксином грамотрицательные бактерии окрашиваются в красный цвет, грамположительные сохраняют фиолетовый цвет. Поверх пептидогликана грамотрицательных бактерий расположена наружная мембрана, имеющая мозаичное строение и состоящая из фосфолипидов, липопротеидов и липополисахарида, а также белков-поринов (каналы).

В связи с различиями в строении клеточной стенки все бактерии делятся на 4 отдела: грациликуты – бактерии с тонкой клеточной стенкой, грамотрицательные (разл.

бактерии + риккетсии и хламидии) фирмикуты – бактерии с толстой клеточной стенкой, грамположительные (разл.

бактерии + актиномицеты, коринебактерии и микобактерии) тенерикуты – бактерии без ригидной клеточной стенки (микоплазмы) мендозикуты – архебактерии, отличающиеся дефектной клеточной стенкой

Существуют следующие формы бактерий: Палочковидная. Палочки. Большинство имеет форму прямого цилиндра, некоторые

могут иметь слегка изогнутую форму (вибрионы, напр., холерный). Длина от 1 до 8 мкм, средний размер в поперечнике 0,5 – 2 мкм. Концы могут быть закруглёнными, ровными, как бы обрубленными (сибирская язва), заострёнными, утолщёнными (дифтерия). Могут располагаться хаотично, попарно – диплобактерии (клебсиеллы), цепочкой – стрептобактерии (мягкий шанкр) и стрептобациллы (сибирская язва).

Шаровидная. Кокки. Имеют правильную сферическую или шаровидную форму, почковидную (гонококки), ланцетовидную (пневмококки). Средний диаметр 0,5 – 1,5 мкм. Диплококки располагаются попарно (пневмококки, менингококки, гонококки), стафилококки – в виде грозди винограда. Также возможно расположение цепочкой – стрептококки. Могут быть сарцины (пакетами – род Sarcina) и тетракокки (Aerococcus viridans).

Спиралевидная. Спириллы. Спирохеты. Имеют изгибы, равные одному или нескольким оборотам спирали.

Непатогенные бактерии также могут быть иной формы.

8. Морфология и классификация бактерий. Назначение окрасок по Граму, Бурри-Гинсу, Циль-Нильсену, Нейссеру. Способы изучения и назначение препаратов «раздавленная» или «висячая» капля.

Бактерии – одноклеточные микроорганизмы. Имеют палочковидную, шаровидную или спиралевидную форму. Размеры от 0,1 до 10 мкм. Имеют капсулу, клеточную стенку, ЦПМ, цитоплазму с нуклеоидом, рибосомами, мезосомами и включениями. Некоторые снабжены жгутиками (монотрихи, лофотрихи, амфитрихи и перитрихи) и ворсинками (общего типа и пили), могут образовывать споры при неблагоприятных условиях (1 клетка – 1 спора).

Окраска по Граму определяет толщину пептидогликана клеточной стенки. У грамположительных бактерий пептидогликан многослоен, они окрашиваются в фиолетовый цвет (стафилококки, стрептококки, коринебактерии дифтерии, микобактерии туберкулёза). Грамотрицательные бактерии имеют тонкий пептидогликан – окрашиваются в красный цвет (гонококки, менингококки, кишечная палочка).

Метод Бурри-Гинса используют для обнаружения капсул. При этом бактерии окрашиваются в красный цвет, а неокрашенные капсулы контрастно выделяются на чёрно-розовом фоне.

По Циль-Нильсену окрашивают кислотоустойчивые бактерии в красный цвет, а некислотоустойчивые окрашиваются в голубой цвет.

По методу Нейссера окрашивают зёрна волютина (включения). Они окрашиваются в тёмно-синий цвет, а цитоплазма клетки – в жёлтый.

Метод «висячей» капли. Препарат готовят на покровном стекле, в центр которого наносят одну каплю бактериальной культуры. Затем предметное стекло с лункой, края которой предварительно смазывают вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением переворачивают препарат покровным стеклом вверх. Капля должна свободно висеть над лункой, не касаясь её дна или края.

Метод «раздавленной» капли. На поверхность обезжиренного предметного стекла наносят каплю исследуемого материала и покрывают её покровным стеклом. Капля должна быть небольшой, не выходящей за край покровного стекла.

Данные методы используют для изучения микроорганизмов в живом состоянии.

9. Вирусы. Ультраструктура и химический состав. Принципы классификации. Функции отдельных ультраструктур вириона.

Вирусы (Vira) – микроорганизмы, имеющие ультрамикроскопические размеры (нм), не имеющие клеточного строения и состоящие из нуклеиновой кислоты, упакованной в белковую оболочку – капсид (некоторые могут иметь внешнюю оболочку – суперкапсид).

Вирусы не имеют собственных метаболических систем. Неспособны к росту и бинарному делению. Абсолютные внутриклеточные паразиты.

По типу нуклеиновой кислоты вирусы подразделяются на РНКовые (ортомиксовирусы, парамиксовирусы, рабдовирусы, пикорнавирусы, ретровирусы) и ДНКовые (поксвирусы, герпесвирусы, аденовирусы, паповавирусы).

Внеклеточная форма существования называется вирионом. Могут иметь палочковидную, цилиндрическую, нитевидную, сферическую, кубовидную и др. формы.

Нуклеиновая кислота вируса может быть двунитчатой и однонитчатой, непрерывной и фрагментированной, линейной и кольцевой.

Капсид состоит из структурных белковых субъединиц, уложенных в виде спирали вокруг осей симметрии (палочко- и нитевидые) либо по осям симметрии икосаэдра (сферические). Структурные вирусные белки (капсид) обеспечивают защиту нуклеиновой кислоты, а также адсорбцию вируса на поверхности клетки хозяина.

Во внешней оболочке сложных вирионов обнаружены липиды и углеводы. Липиды идентичны липидам оболочки клеток хозяина, а углеводы входят в состав вирусных гемагглютининов (антигены).

10. Бактериофаги. Природа и особенности взаимодействия с бактериальной клеткой. Наличие лизогении.

Бактериофаги – «пожиратели бактерий», вирусы бактерий. Большинство имеет сперматозоидную форму. Состоят из головки, содержащей нуклеиновую кислоту, и отростка. Большинство фагов являются ДНКовыми.

Процесс взаимодействия фага с клеткой протекает по типу продуктивной инфекции и обычно заканчивается лизисом бактериальной культуры. Но возможна и абортивная инфекция, при которой фаговое потомство не образуется, а бактериальные клетки сохраняют свою жизнедеятельность. Наконец, нередко наблюдается лизогенизация бактериальных клеток фагом, в результате чего возникает состояние лизогении, характеризующееся интеграцией генома фага в геном бактериальной клетки.

Стадии взаимодействия вирулентного фага с бактериальной клеткой:1. Адсорбция. Происходит на рецепторах клеточной стенки. Некоторые – на половых

ворсинках. На процесс влияют условия среды: pH, t˚, наличие кофакторов адсорбции.2. Проникновение. Проникновение НК в клетку, белки остаются снаружи.3. Биосинтез фаговой НК и белков капсида.4. Морфогенез фага. Сборка зрелых вирионов.5. Выход фаговых частиц из клетки. Также происходит лизис бактерий.

Умеренные фаги при взаимодействие с бактериальной клеткой переходят в неинфекционную форму – профаг – геном вируса, ассоциированный с бактериальной хромососой. Профаг воспроизводится как часть бактериальной ДНК и вместе с ней реплицируется. Это явление называется лизогенией.

11. Особенности катаболизма у разных групп микробов. Виды энергетического обмена. Классификация микробов в зависимости от особенностей энергообмена.

Для синтеза структурных компонентов микробной клетки и поддержания процессов жизнедеятельности наряду с питательными веществами требуется достаточное количество энергии. Эта потребность удовлетворяется за счёт биологического окисления, в результате которого происходит синтез макроэргических соединений – молекул АТФ, представляющих собой универсальный источник энергии.

Классификация микробов:1. Аэробы – для получения энергии нуждаются в свободном доступе кислорода

строгие – не могут жить и размножаться в отсутствие молекулярного кислорода2. Анаэробы – получают энергию без доступа кислорода путём расщепления

питательных веществ облигатные (строгие) – не переносят присутствия даже следов кислорода,

который для них является ядом (напр., патогенные клостридии) факультативные – могут расти и размножаться как в присутствии кислорода

воздуха, так и без негоМолекулы АТФ образуются двумя метаболическими путями:

1. Субстратное фосфорилирование Гликолитический путь – присущ облигатным и факультативным анаэробам,

бродильный метаболизм Молочнокислое брожение (роды Lactobacillus, Streptococcus,

Bifidobacterium) Муравьинокислое брожение (сем. Enterobacteriaceae) Маслянокислое брожение (род Clostridium)

Гексозомонофосфатный путь – характерен для большинства микроорганизмов Кетодезоксифосфоглюконатный путь – в основном у аэробов (род

Pseudomonas), окислительный метаболизм2. Окислительное фосфорилирование – аэробы и факультативные анаэробы

12. Типы дыхания у микробов. Способы культивирования микробов с различным типом дыхания.

Классификация микробов по типу дыхания:3. Аэробы – для получения энергии нуждаются в свободном доступе кислорода

строгие – не могут жить и размножаться в отсутствие молекулярного кислорода4. Анаэробы – получают энергию без доступа кислорода путём расщепления

питательных веществ облигатные (строгие) – не переносят присутствия даже следов кислорода,

который для них является ядом (напр., патогенные клостридии) факультативные – могут расти и размножаться как в присутствии кислорода

воздуха, так и без негоПосевы на анаэробную микрофлору производят в строго анаэробных условиях. Посев на

специальные среды – железосульфитный агар (среда Вильсона-Блера), среда Китта-Тароцци. Посев уколом в плотную среду. Культивирование в анаэростатах или в вакуум-эксикаторах.

13. Особенности анаболизма у разных групп микробов. Способы поступления питательных веществ в клетку, классификация микробов по этому принципу.

Поступление питательных веществ в микробную клетку может происходить за счёт: осмоса и диффузии по градиенту концентрации без затрат энергии или с помощью

ферментов-пермеаз (облегчённая диффузия) пассивного транспорта, который также осуществляется по градиенту концентрации с

помощью белков-переносчиков и без затрат энергии активного транспорта, который идёт против градиента концентрации с затратой энергии

и осуществляется также белками-переносчиками По источникам углерода бактерии делятся на следующие группы: автотрофы – используют в качестве единственного источника углерода CO2

гетеротрофы – используют в качестве источника углерода разнообразные органические углеродосодержащие соединения как биологического, так и небиологического происхождения

В зависимости от источника получения энергии микроорганизмы делятся на: фототрофы – способны использовать солнечную энергию хемотрофы – получают энергию за счёт ОВР

В зависимости от природы доноров электронов: литотрофы – используют неорганические соединения органотрофы – используют только органические соединения

По источникам азота: азотфиксирующие – способны усваивать молекулярный азот атмосферы аммонифицирующие – ассимилирующие неорганический азот солей аммония нитратредуцирующие – ассимилирующие неорганический азот нитратов нитритредуцирующие – ассимилирующие неорганический азот нитритов

14. Физиологическое значение экзоферментов микробов. Функциональное значение продуктов биосинтеза в микробных клетках: белков, липидов, полисахаридов, нуклеиновых кислот.15. Особенности метаболизма у прокариот – внутриклеточных паразитов. Особенности энергетического обмена у хламидий. Особенности конструктивного обмена у риккетсий и микоплазм.

17. Типы и фазы взаимодействия вируса с клеткой-хозяином.

Фазы:1. Адсорбция. Взаимодействие рецепторов вириона и клетки. У клеток это липо- и

мукопротеиды оболочек.2. Проникновение вириона в клетку хозяина. Путём пиноцитоза либо прямым путём

через оболочку клетки (пикорна- и герпесвирусы).3. Дезинтеграция, или «раздевание», вириона. Освобождение НК от внешней оболочки и

капсида с помощью протеолитических ферментов хозяина во время проникновения в клетку либо в её цитоплазме.

4. Синтез вирусных белков и репликация нуклеиновых кислот. ДНК реплицируется с помощью ДНК-полимеразы при участии ДНК-зависимой РНК-полимеразы хозяина либо непосредственно ДНК-полимеразой хозяина (адено-, паповавирусы). РНК реплицируется с помощью РНК-полимеразы, РНК-зависимой РНК-полимеразы (пикорнавирусы) либо через образование ДНК (осуществляетс РНК-зависимой ДНК-полимеразой) с помощью ДНК-зависимой РНК-полимеразы.

5. Сборка, или морфогенез, вириона. Самосборка белковых молекул вокруг НК. Может происходить в ядре (папова-, адено- и герпесвирусы) или цитоплазме (пикорна- и поксвирусы) клетки.

6. Выход вирионов из клетки хозяина. Сложные вирусы, «просачиваясь» через оболочку клетки, приобретают суперкапсид (миксовирусы). Простые (пикорнавирусы) выходят из клетки через отверстия в её оболочке. Клетка-козяин погибает.

Типы:1. Продуктивная инфекция – образование новых вирионов.2. Абортивная инфекция – внезапно прерывается в 4 или 5 стадии.3. Вирогения – встраивание вирусной НК в ДНК клетки, которая обеспечивает

синхронность репликации вирусной и клеточной ДНК.

18. Культивирование микробов на искусственных питательных средах. Зависимость состава искусственных питательных сред от метаболизма культивируемых микроорганизмов. Классификация искусственных питательных сред по назначению.

Питательной средой называют среды, содержащие различные соединения сложного или простого состава, которые применяются для размножения микроорганизмов в лабораторных или промышленных условиях.

Любая питательная среда должна отвечать следующим требованиям: содержать все необходимые для размножения определённых микробов вещества в легкоусвояемой форме (источники углерода, азота, кислорода, водорода, неорганические соединения, факторы роста), иметь оптимальные влажность, вязкость, pH, быть изотоничной и по возможности прозрачной.

По назначению выделяют искусственные питательные среды: Элективные (селективные) – на которых лучше растёт какой-то определённый

микроорганизм (напр., висмут-сульфитный агар для рода Salmonella) Среды обогащения – стимулируют рост какого-то определённого микроорганизма,

ингибируя рост других (напр., среда, содержащая селенит натрия, таурохолевокислый натрий и бриллиантовый зелёный, стимулирует рост рода Salmonella и ингибирует рост E. Coli)

Дифференциально-диагностические - для изучения и идентификации отдельных групп, видов бактерий, биоваров (напр., среды Левина, Плоскирёва – для диагностики дизентерии, род Shigella, от других представителей кишечной группы)

Консервирующие – для сохранения патогенных микроорганизмов живыми в клиническом материале при их пересылке.

19. Основные принципы выделения чистых культур микробов, культивируемых на искусственных питательных средах. Этапы выделения чистых культур.

Чистой культурой называется популяция микроорганизмов одного вида, выращенная на питательной среде.

Методы получения чистых культур:1. из колонии (изолированное скопление микроорганизмов одного вида, выросших на

питательной среде в результате размножения одной или нескольких клеток) – механическое разобщение бактериальных клеток посев петлёй, штрихом по Коху посев шпателем, газоном по Дригалю посев осаждением по Коху посев разбрызгиванием посев перемешиванием в расплавленном и остуженном студне

2. путём подавления роста «лишних» микробов на избирательных средах после прогревания после обработки кислотой после антибиотиков использование фагов после проведения через живой организм

Этапы:1. Исследование материала

забор, регистрация ориентировочная микроскопия с окраской мазка по 9езофи посев смеси бактерий на пластинчатый агар

2. Изучение колоний изучение культуральных свойств (величина, форма, консистенция, поверхность,

край, наличие пигмента, цвет, прозрачность) микроскопия с окраской по 9езофи посев колонии на скошенный агар.

3. Изучение чистой культуры микроскопия с окраской по 9езофи – морфологически и тинкториально

однородные клетки идентификация

биохимическая – посев в «пёстрый» ряд фагоидентификация сероидентификация

Микробиологический метод включает в себя выделение чистой культуры и её идентификацию.

20. Основные принципы выделения чистых культур микробов, культивируемых на живых объектах. Этапы выделения чистых культур. Методы индикации вирусов.

Для культивирования облигатных внутриклеточных паразитов (риккетсии, хламидии, вирусы) используют живые объекты – клеточные культуры, куриные эмбрионы и чувствительных лабораторных животных.

Клеточные культуры подразделяют на неперевиваемые (клетки эпителиальной или соединительной ткани в питательной среде), полуперевиваемые (диплоидные клетки человека) и перевиваемые (в основном опухолевые клетки – постоянное существование in vitro).

Куриные эмбрионы используют в возрасте 8 – 12 дней, они устойчивы к различным воздействиям.

При заражении лабораторных животных недостатком является необходимость последующего заражения клеточной культуры для получения чистой линии.

Методы индикации вирусов: гибель или заболевание живой системы

цитопатическое действие реакция гемадсорбции («зонтик» - положительная, «пуговка» - отрицательная) обнаружение вирусных включений цветная проба метод бляшек во флаконе

21. Диагностическое значение экзоферментов прокариот. Диагностическое значение бактериофагов. Методы определения родовой и видовой принадлежности прокариот.

22. Действие физических факторов на микробы. Температурные критерии жизнедеятельности микробов. Механизм устойчивости микробов к высушиванию, излучениям.

Из физических факторов наибольшее практическое значение имеют температура, высушивание, излучения.

В зависимости от температурного режима жизнедеятельности микроорганизмы делятся на три группы:

психрофилы (оптимум 6 – 20˚С) мезофилы (34 – 37˚С) термофилы (выше 37˚С, у некоторых – до 80˚С)

Низкие температуры большинство микроорганизмов, в том числе и вирусы, переносит хорошо. Вегетативные клетки бактерий находятся при этом в анабиотическом состоянии. Также хорошо сохраняются культуры микробов и различного рода биологически активные препараты (например, вакцины). Некоторые бактерии остаются жизнеспособными при –190˚C, а бактериальные споры при –250˚C. Высокая температура, как правило, губительно действует на вегетативные формы бактерий и вирусы в результате денатурации белков.

В естественных условиях высушивание оказывает губительное действие на вегетативные клетки многих бактерий, что связано с обезвоживанием их цитоплазмы и повреждением ЦПМ и рибосом. Высушенные споры бактерий сохраняют способность к прорастанию в течение 10 лет, а споры плесневых грибов – до 20 лет. Лиофильная сушка (высушивание в условиях вакуума из замороженного состояния) применяется для хранения микробных культур и биологических препаратов в течение длительного срока без потери их биологических свойств.

Прямые солнечные лучи обладают бактерицидным свойством, которое обусловлено активностью их коротковолновой части – УФ-лучей с длиной волны 254 – 300 нм. Механизм их действия связан с образованием тиминовых димеров в ДНК бактериальной клетки. Бактерии и вирусы также чувствительны к проникающей радиации. Однако они погибают только при облучении сравнительно большими дозами, порядка 44000 – 280000 Р. Эти свойства применяются для стерилизации.

23. Определение понятий «стерилизация» и «асептика». Основные методы стерилизации, аппаратура, режим. Микробиологический и немикробиологический контроль эффективности стерилизации.

Асептика – система мероприятий, предупреждающих попадание микроорганизмов из окружающей среды в ткани или полости человеческого организма при лечебных и диагностических манипуляциях, а также в материал для исследования, в питательные среды и культуры микроорганизмов при лабораторных исследованиях.

Стерилизация – обеспложивание, т.е. полное уничтожение вегетативных форм микроорганизмов и их спор в различных материалах.

Основные методы:1. Физические

воздействием высокой температуры прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки – стерилизуют

бактериологические петли, препаровальные иглы, пинцеты;

кипячением – не менее 30 мин; стерилизуют мелкий хирургический инструментарий, предметные и покровные стёкла

сухим жаром в сушильном шкафу (печи Пастера) – воздух нагревается до 165 – 180˚С; стерилизуют стеклянную посуду

паром под давлением в автоклаве – температура 100 – 133˚С, давление 0,5 – 2 атм, время 15 – 30 мин

тиндализация – дробная стерилизация при 58 – 56˚С в течение 5 – 6 дней подряд; для стерилизации легко разрушающихся при высокой t˚ веществ (сыворотка крови, витамины и др.)

пастеризация – нагревание при t˚ 70 – 80˚С в течение 5 – 10 мин с последующим быстрым охлаждением; не уничтожает споры; пастеризуют напитки и продукты

путём ультрафиолетового облучения – используется УФ-излучение с длиной волны 260 – 300 мкм; используют бактерицидные лампы разной мощности (БУВ-15, БУВ-30) для стерилизации воздуха в боксах, операционных, детских учреждениях

2. Механическая стерилизация (фильтрование) – через асбестовые и мембранные фильтры с разным диаметром пор; стерилизация жидких материалов, не выдерживающих нагревания (сыворотка крови, антибиотики)

3. Химические – 70% этиловый спирт, 5% спиртовой раствор йода, 2% раствор хлорамина, 0,1% раствор перманганата калия и др.

24. Определение понятий «дезинфекция», «антисептика», «химиотерапия». Основные группы химиотерапевтических веществ, механизмы антимикробного действия. Микробиологический контроль эффективности дезинфекции.

Дезинфекция – обеззараживание объектов окружающей среды: уничтожение патогенных для человека и животных микроорганизмов с помощью химических веществ, обладающих антимикробными свойствами.

Антисептика – комплекс лечебно-профилактических мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов, способных вызвать инфекционный процесс на повреждённых или интактных участках кожи или слизистых оболочек.

Химиотерапия – лечение инфекционных и опухолевах заболеваний химическими препаратами, не являющимися продуктами реакции организма и возбудителя.

Применяют следующие препараты: Производные мышьяка, сурьмы и висмута – при паразитарных инфекциях, сифилисе; в

наст. время практически не используются Препараты акридина (риванол, трипафлавин, акрицид, флавицид и др.) – при

гноеродных заболеваниях, воспалит. процессах зева и носоглотки Сульфаниламиды (стрептоцид, этазол, альбуцид, сульфадиметоксин и др.) – при

гноеродных заболеваниях, ангинах, скарлатине, роже, пневмонии, дизентерии, гонорее, анаэробной инфекции и др.; механизм действия состоит в том, что они представляют собой структурные аналоги парааминобензойной кислоты, т.е. являются микробными антиметаболитами

Диаминопиримидины (триметоприм, пириметамин, тетроксоприм) – также являются антиметаболитами, подменяя пиримидиновые основания; спектр действия шире

Нитрофураны (фуразолидон, фурациллин, фурадонин, фурагинид) – при кишечных инфекциях; блокируют ферментные системы микробной клетки

Хинолоны (неграм, нитроксолин, ципролет и др.) – нарушают различные этапы синтеза ДНК микробной клетки

Азолы (кандид, низорал, флуконазол и др.) – противогрибковые; механизмы действия – ингибирование биосинтеза стеролов клеточной стенки, ингибирование разл. внутриклеточных процессов, приводящее к накоплению перикиси водорода и повреждению клеточных органелл, ингибирование трансформации бластоспор в инвазивный мицелий (род Candida)

Противовирусные (интерферон и интерфероногены, дезоксирибонуклеаза и рибонуклеаза, бензамидазол и гуанидин, ремантадин, ацикловир и др.)

Антибластомные (азотиприты, антиметаболиты, диэпоксиды и др.) Антибиотики

26. Отличительные особенности и классификация антибиотиков по механизмам антимикробного действия.

Антибиотики – высокоактивные метаболические продукты микроорганизмов, избирательно подавляющие рост различных бактерий.

По механизму антимикробного действия антибиотики в значительной мере отличаются друг от друга. «Мишенью» для их ингибирующего действия служит одна или несколько биохимических реакций, необходимых для синтеза и функционирования определённых морфологических компонентов или органоидов микробной клетки.

Классификация: Антибиотики, подавляющие синтез бактериальной клеточной стенки. Пенициллины –

продуцируются грибами рода Penicillium, блокируют последнюю стадию синтеза муреина, антибактериальный спектр бензилпенициллина (фермент бактерий пенициллиназа, или β-лактамаза, гидролизует его β-лактамное кольцо и лишает активности) включает патогенные кокки, спирохеты и некоторые грамположительные бактерии (дифтерия, сибирская язва, анаэробной инфекции), полусинтетические пенициллины (ампициллин) эффективны также против ряда грамотрицательных бактерий (кишечная палочка, сальмонеллы, шигеллы, клебсиеллы). Цефалоспорины – продуцируются грибами рода Cephalosporium, механизм действия тот же, полусинтетический аналог цефалоспорина – цефалоридин = ампициллин.

Антибиотики, нарушающие функции ЦПМ микроорганизмов. Полиеновые антибиотики (нистатин, леворин) – продуцируются актиномицетами, к ним чувствительны патогенные грибы, в том числе рода Candida, микоплазмы и некоторые простейшие, механизм действия связан с их адсорбцией на ЦПМ и взаимодействием с её стерольным компонентом → потеря водорастворимых веществ и гибель клетки. Грамицидин – продуцируется палочкой B. Brevis, угнетает энергетические реакции клетки, наиболее чувствительны к нему стафилококки, стрептококки, клостридии, токсичен (применяется только местно). Полимиксин – продуцируется Bacillus polymyxa, нарушает жизненно важные функции ЦПМ бактерий, эффективен против грамотрицательных бактерий (энтеробактерии, синегнойная палочка и др.).

Антибиотики, ингибирующие синтез белка на рибосомах бактериальных клеток. Продуцентами являются актиномицеты. Аминогликозиды – блокируют синтез белка путём воздействия на 30S субъединицу рибосомы, а также нарушают считывание генетического кода, стрептомицин эффективен против микобактерий туберкулёза и многих грамотрицательных бактерий (энтеробактерии, бруцеллы, бактерии чумы, туляремии, холерный вибрион и др.), канамицин и неомицин эффективны против многих грамположительных бактерий, гентамицин более эффективен в отношении синегнойной и кишечной палочек, протеев и стафилококков. Тетрациклины – нарушают связывание аминоацил-тРНК с рибосомально-матричным, а также подавление окисления глутаминовой кислоты у риккетсий Провацека, антибактериальный спектр включает многие грамположительные и грамотрицательные бактерии, спирохеты, риккетсии, хламидии, микоплазмы. Левомицетин – подавление пептидилтрансферазной реакции с 50S субъединицей рибосомы, то же + пневмококки, гонококки. Макролиды (эритромицин, олеандомицин) – блокируют синтез белка путём воздействия на 50S субъединицу рибосомы, активны в отношении патогенных кокков, некоторых грамположительных бактерий, риккетсий и хламидий; антибиотики «резерва».

Антибиотики, подавляющие синтез белка на уровне транскрипции. Рифамицины – подавляют активность ДНК-зависимой РНК-полимеразы, эффективны в отношении грамположительных бактерий и микобактерий туберкулёза.

Антибиотики, подавляющие репликацию ДНК. Новобиоцин – угнетает ДНК-полимеразу, а также блокирует синтез РНК и клеточной стенки бактерий, антибактериальный спектр включает стафилококки, стрептококки, менингококки, гонококки, палочки инфлюэнцы, дифтерийные бактерии и др.; антибиотик «резерва».

27. Методы определения антимикробного и общебиологического действия химиопрепаратов. Химиотерапевтический индекс. Единицы активности.

Химиотерапевтический индекс (ХИ) равняется частному от деления терапевтической дозы препарата, уничтожающей возбудителя, на максимально переносимую организмом дозу:

ХИ = min терапевтическая доза /max переносимая доза.Если индекс меньше 1, препарат может быть практически использован; если больше, то

введение препарата в организм сопровождается токсическими явлениями. Такой препарат нельзя применять для лечения соответствующих инфекций.

Антимикробное (антибактериальное) действие антибиотиков измеряют в единицах действия (ЕД), содержащихся в 1 мл раствора препарата или в 1 мг химически чистого вещества. За единицу активности принимается то минимальное количество антибиотика, которое задерживает рост стандартного штамма определённого вида микроорганизма в строго определённых условиях. В 1 мг большинства антибиотиков содержится 1000 ЕД (но, например, в 1 мг бензилпенициллина содержится 1670 ЕД, нистатина – не менее 4000 ЕД).

28. Механизмы развития лекарственной устойчивости у микробов. Методы определения чувствительности к химиопрепаратам в лабораторно-клинической практике.

Механизмы резистентности бактерий к антибиотикам:1. Первичные – отсутствие «мишени» для воздействия2. Приобретённые путём

переноса генов хромосомы, контролирующих синтез

мутаций в генах, контролирующих синтез

– компонентов клеточной стенки– ЦПМ– рибосомных белков– транспортных белков

переноса генов R-плазмиды, контролирующих синтез ферментов, инактивирующих или модифицирующих антибиотики, нарушающих функции транспортных белков

Методы определения чувствительности к антибиотикам:1. Метод дисков. Исследуемую культуру засевают сплошным газоном на питательный

агар в чашки Петри. Затем на его поверхность помещают на равномерном расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определённые дозы разных антибиотиков. По диаметру зон задержки роста культуры судят о её чувствительности (диаметр до 10 мм – малочувствительная, свыше 10 мм – высокочувствительная).

2. Метод серийных разведений. Готовят раствор, содержащий определённую концентрацию антибиотика. Из него готовят все последующие разведения в бульоне (в объёме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии (106 – 107 бактериальных клеток в 1 мл). В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии (контроль). Результаты отмечают по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Определяется минимальная ингибирующая концентрация антибиотика.

37. Классификация антибиотиков по происхождению. Способы промышленного получения антибиотиков.

По происхождению антибиотики подразделяются на:1. антибиотики, образуемые бактериями (грамицидин, полиимиксин и др.)2. антибиотики, образуемые актиномицетами (аминогликозиды, левомицетин,

тетрациклины, макролиды и др.)3. антибиотики, образуемые грибами (пенициллины, цефалоспорины и др.)

38. Химиотерапевтические препараты бактериостатического и бактерицидного действия. Тактика их клинического применения.

39. Принципы рациональной и комбинированной химиотерапии.Необходимо систематическое изучение типов лекарственной устойчивости патогенных

бактерий, циркулирующих в пределах отдельных регионов, что помогает лечащему врачу в выборе наиболее подходящего препарата без предварительного лабораторного испытания на чувствительность к нему выделенных бактерий. Это позволяет избежать слепого использования большого числа антибиотических средств.

Рекомендуется определение чувствительности выделенных бактерий к антибиотикам, а также введение ограничений в отношении широкого их применения без достаточных показаний. Запрещается использовать антибиотики в качестве консервантов пищевых продуктов и кормовых добавок, а также для профилактики и лечения различных заболеваний у животных (по крайней мере, таких антибиотиков, которые используются в медицинской практике).

Антибактериальное действие некоторых антибиотиков усиливается при их сочетанном применении с другими антибиотиками. В то же время резистентность проявляется значительно медленнее, чем к отдельным компонентам. Это послужило основанием для создания комбинированных препаратов. Например, олететрин – смесь одной часть олеандомицина и двух частей тетрациклина – обладает выраженной активностью в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий. Другие примеры: эрицимин (эритромицин + тетрациклин), амплокса (ампициллин + пасациллин).

40. Классификация антибиотиков по принципу химического строения. Понятие о полусинтетических антибиотиках.

Классификация:1. азотсодержащие гетероциклические соединения, имеющие в своём составе β-

лактамное кольцо (пенициллины, цефалоспорины)2. ароматические соединения, производные диоксиаминофенилпропана (левомицетин)3. тетрациклины, содержащие четыре конденсированных шестичленных цикла

(тетрациклин и его производные)4. аминогликозидные соединения, в составе которых имеются аминосахара

(стрептомицин, мономицин, канамицин, гентамицин и др.)5. макролиды, содержащие макроциклическое лактонное кольцо, связанное с

аминосахарами (эритромицин, олеандомицин и др.)6. ациклические соединения с несколькими сопряжёнными двойными связями

–(СН=СН)– (полиены – нистатин, леворин)К полусинтетическим антибиотикам относятся различные препараты, получаемые

биологическим и химическим способами. Исходным продуктом для их получения является вещество, которое синтезируется непосредственно микроорганизмами. Путём присоединения различных химических групп получают его разнообразные аналоги, отличающиеся биологическими свойствами: устойчивостью, антибактериальным спектром. Например, фермент бактерий пенициллиназа, или β-лактамаза, гидролизует β-лактамное кольцо бензилпенициллина и лишает его активности, а его полусинтетический аналог оксациллин

устойчив к пенициллазе. Другой полусинтетический пенициллин – ампициллин – обладает более широким антибактериальным спектром действия (эффективен также против ряда грамотрицательных бактерий) за счёт введения в его молекулу 6-аминопенициллановой кислоты, повышающей способность препарата проникать через поверхностный липополисахаридный слой клеточной стенки.

41. Микрофлора почвы. Источники и пути попадания паразитических микробов в почву. Санитарно-показательные микробы почвы. Методы санитарно-бактериологической оценки почвы.

Содержание микробов в почве широко колеблется в зависимости от её химического состава, влажности, температуры, pH и других свойств. В бедных влагой и питательными веществами песчаных почвах находится до 105, в обрабатываемых образцах – до 108 – 109 микробов в 1 г. «Живая» масса разных микроорганизмов на 1 га почвы в среднем составляет 1 т. Наибольшее количество отмечается в верхнем слое почвы на глубине 5 – 15 см, затем их число снижается. Почва населена разнообразными микроорганизмами. Среди них имеются свободноживущие азотфиксирующие бактерии рода Azotobacter, некоторые виды родов Nocardia и Clostridium, клубеньковые бактерии рода Rhisobium, нитрифицирующие бактерии родов Nitrobacter, Pseudomonas и грибы, денитрифицирующие бактерии Thiobacillus denitrificans, аммонифицирующие бактерии, а также разнообразные серо- и железобактерии и др. В почве, богатой органическими остатками, большое количество гнилостных анаэробных и аэробных бактерий, актиномицетов, грибов и простейших.

Патогенные и условно-патогенные микроорганизмы могут попадать в почву с отбросами и трупами животных и человека, погибших от инфекционных и других заболеваний, а также с их испражнениями, мочой и прочими выделениями.

Санитарно-гигиеническое состояние почвы оценивается на основании показателей, указывающих на количественное содержание термофильных бактерий (спорообразующие грамположительные бактерии и актиномицеты) и степень её фекального загрязнения. В качестве показателей фекального загрязнения используют санитарно-показательные бактерии (представители нормальной микрофлоры кишечника). Разные сроки выживаемости этих бактерий в окружающей среде позволяют определить давность её загрязнения фекалиями. Наличие в почве E. coli и Str. faecalis свидетельствует о свежем фекальном загрязнении, обнаружение бактерий родов Citrobacter и Enterobacter расценивается как несвежее фекальное загрязнение, а Clostridium perfringens – как давнее загрязнение. Резкое увеличение количества термофильных бактерий может свидетельствовать о загрязнении почвы разлагающихся отбросах.

Для санитарно-бактериологической оценки почвы определяют микробное число (общее количество микроорганизмов, содержащихся в 1 г почвы), коли-титр (титр – минимальная масса или объём, в котором обнаруживаются данные бактерии), перфингенс-титр и титр термофильных бактерий почвы.

42. Микрофлора воды. Источники и пути попадания паразитических микробов в воду. Санитарно-показательные микробы воды. Методы санитарно-бактериологической оценки воды.

Численность и состав микроорганизмов в воде обусловлены физико-химическим состоянием, содержанием питательных веществ, флорой и фауной, глубиной водоёма, выпуском сточных и промышленных вод без очистных сооружений и др. В сравнительно чистых водоёмах встречаются разнообразные сапрофиты, поступающие из почвы. К ним относятся Azotobacter, Nitrobacter, Achromobacter, Flavobacterium, Micrococcus, Proteus, Pseudomonas, Spirillum и др. При поступлении в воду большого количества органических веществ в ней обнаруживаются клостридии и другие анаэробы, аэробные бактерии, вибрионы, спирохеты.

Загрязнение водоёмов патогенными, условно-патогенными микроорганизмами происходит в результате поступления в них сточных вод из прибрежных населённых пунктов, а также промышленных вод, богатых органическими соединениями. Микрофлора почвы, вымываемой грунтовыми и поверхностными водами, загрязняет водоёмы, реки, озёра и прибрежные воды морей. Кроме того, выпуск сточных вод с судов, стирка белья, купание лошадей, попадание в воду трупов животных, погибших от инфекций, также способствует загрязнению водоёмов патогенными микробами.

При загрязнении водоёмов сточными водами в них обнаруживаются E. coli, Enterobacter, Str. faecalis, Cl. perfringens и др.

Несмотря на процессы самоочищения водоёмов от условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, последние могут стать причиной возникновения водных эпидемий, острых кишечных инфекций: сальмонеллёзов, дизентерии, холеры. Они возникают при авариях канализационной системы и поступлении сточных вод в открытые водоёмы, особенно в водопроводную сеть.

Санитарно-гигиеническая оценка воды производится не только по наличию в ней E. coli, но и по степени обсеменённости воды этим микробом. Для этого определяют бродильный титр (наименьший объём воды, при засеве которого на питательную среду с глюкозой обнаруживается газообразование), коли-титр (титр – минимальная масса или объём, в котором обнаруживаются данные бактерии) и коли-индекс (количество данных бактерий в 1 л воды) воды, титр фекального стрептококка и микробное число (общее количество микроорганизмов, содержащихся в 1 мл воды).

43. Микрофлора воздуха. Источники и пути попадания паразитических микробов в воздух. Санитарно-показательные микробы воздуха. Методы санитарно-бактериологической оценки воздуха.

Состав микрофлоры воздуха зависит от микрофлоры почвы и воды, а также от времени года и метеорологических условий. Видовой состав микробов довольно разнообразен. Чаще всего это спороносные микробы, а также сарцины, дрожжи, пигментообразующие бактерии, актиномицеты и плесневые грибы.

Распространение патогенных и условно-патогенных бактерий воздушным путём связано с их устойчивостью к высушиванию. Различают воздушно-капельный, капельно-ядерный и пылевой способы передачи инфекционных агентов воздушным путём.

Санитарно-гигиеническое состояние атмосферного воздуха оценивают по микробному числу (общее количество микроорганизмов, содержащихся в 1 м3 воздуха), а закрытых помещений – по микробному числу и наличию в нём санитарно-показательных бактерий – это α- и β- гемолитические стрептококки и гемолитические стафилококки. Обнаружение первых указывает на возможное загрязнение воздуха микроорганизмами, содержащимися в зеве, носоглотке, верхних отделах респираторного тракта человека и являющимися возбудителями воздушно-капельных инфекций. Присутствие в воздухе Staph. aureus является показателем орально-капельного загрязнения. Одновременное обнаружение золотистого стафилококка и гемолитических стрептококков свидетельствует о высокой степени загрязнения воздуха.

Микробное число воздуха определяют различными методами, основанными на принципах седиментации (посев осаждением), аспирации (посев с помощью прибора Кротова) или фильтрации.

44. Микрофлора пищевых продуктов. Источники и пути попадания паразитических микробов в пищевые продукты. Методы санитарно-бактериологической оценки пищевых продуктов.

Многие пищевые продукты являются благоприятной средой для размножения микроорганизмов. Среди пищевых продуктов имеются и такие, которые содержат собственную специфическую микрофлору. Это молочнокислые продукты, напитки, получаемые путём брожения и пр. Через пищевые продукты могут передаваться возбудители ряда инфекционных

заболеваний (кишечные, кокковые инфекции и др.). Употребление в пищу продуктов, обильно обсеменённых патогенными и условно-патогенными бактериями (сальмонеллы, кишечная палочка, протей и др.), может вызвать пищевые токсикоинфекции, а наличие в продуктах экзотоксина – пищевую интоксикацию.

При забое больных, ослабленных или утомлённых животных может происходить прижизненное инфицирование мяса путём проникновения микробов из кишечного тракта по кровеносной системе. При нарушении правил забоя и хранения мяса оно может загрязниться посмертно. Обычно в мясе обнаруживают Cl. perfringens, энтеробактерии, фекальные стрептококки, протей и др. То же касается мяса рыбы. Наиболее опасны клостридии ботулизма, которые в консервах выделяют экзотоксин. Молоко может инфицироваться животными (зоонозная инфекция – сальмонеллы, бруцеллы, стрептококки и стафилококки), от больных и бактерионосителей (антропонозная инфекция – шигеллы, сальмонеллы, стрептококки и стафилококки, коринебактерии дифтерии, холерный вибрион и др.). В молоке микробы не только длительно сохраняются, но и активно размножаются. Овощи и фрукты обсеменяются шигеллами, сальмонеллами, холерными вибрионами и др.

Санитарно-бактериологические исследования пищевых продуктов проводятся с целью определения степени их обсеменённости (микробное число – общее количество микроорганизмов, содержащихся в 1 мл, 1 г), коли-титра (титр – минимальная масса или объём, в котором обнаруживаются данные бактерии), а по эпидемическим показаниям – на наличие в пищевом продукте патогенных и условно-патогенных бактерий. Санитарно-бактериологические показатели для некоторых продуктов нормированы Государственным отраслевым стандартом (ГОСТ).