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Universidad de ColimaFACULTAD DE CIENCIAS MARINAS
“Caracterización de los cuadros ambientales durante lareproducción inducida y obtención de postlarvas
de P. vannamei, bajo diferentes criteriosallimenticios”.
T E S I S
Para obtener el Titulo de:
MAESTRO EN CIENCIAS
Con especialidad en ACUACULTURA
Presenta:
MARCO AGUSTIN LIÑAN CABELLO
Manzanillo, Col., Diciembre de 1995.
UNIVERSIDAD DE COLIMA
FACULTAD DE CIENCIAS MARINAS
“Caracterización de los cuadros ambientalesdurante la reproducción inducida y obtenciónde postlarvas de P. vannamei, bajo diferentes
criterios alimenticios”.
T E S I S
Para obtener el Titulo de :
MAESTRO EN CIENCIAS
Con especialidad en ACUACULTURA
Presenta:
Marco Agustín Liñán Cabello
Manzanillo, Col., Diciembre de 1995.
Facultad de Cienciw Marinas
Manzanillo, Col. a 03 de dic. de 1995
C . Ocean Adrian Tintos Gómez Director de la Facultad de Ciencias MarinasPresente
Los que suscriben, Sinodales de la Comisiónnombrada para examinar el manuscrito de Tésis titulad:
CARACTERIZACION DE LOS CUADROS AMBIENTALES DURANTE LAREPRODUCCION INDUCIDA DE LOS CUADROS AMBIENTALES DE LA COMISIÓN
Penaeus vannaemei BAJO DIFERENTES CRITERIOS ALIMENTICIOS¨,
que presenta el Candidato al Grado Académico de Maestríaen Acultura, Señor:
MARCO AGUSTIN LIÑAN CABELLO
manifiestan SU aceptación a dicho trabajo, envirtud de que satisface los requisitos señalados porLas disposiciones reglamentarias y que se han hecho lascorrecciones que cada uno en particular considerópertinentes para su presentación.
.
Kilómetro 20. carretera Manzanillo /| Barra de Navidad, AP 9-21
AtentamenteDirector de Tésis
Dr. Alejandro Otto Meyer Willerer
Sinodal Propietario Sinodal Propietario
M. ewn C. Carlos Lezama C. M. en C. Rene Macias Z.
Sinodal Suplente
Biol. José Luis Zavala A.
Caracterización de los cuadros ambientales durante la reproduccióninducida y obtención de postlarvas de P. vannamei bajo diferentes
criterios alimenticios.
Resumen
El cultivo de camarón ha tenido en muchas partes del mundo avances degran signifiancia a partlr de las últimas décadas. Uno de los principalesproblemas de la producción controlada de camarón radia en las fases dereproducción, cultivo lavarlo, su relación con los factores ambientales ynutricionales.
Durante la reproducción controlada fueron probadas 4 dietas Inductoras a lamaduración por diez semanas en cuatro tanques circulares de 4.5 m dediámetro, a densidades de 2.3 y 4.6 org/m2, obteniendose reglstros de pH,temperatura, oxígeno disuento. Asimismo se practicó un monitoreo continuode algunos de estos parámetros durante la fase obscura del fotoperlodo.
.El larvicultivo se realizo en 6 tanques de 3000 y por cuadruplldado deacuarios de 100 I, estos ultimos bajo condiciones mínimas de variación detemperatura, monitoreando en ambos casos los parámetros anteriormentereferidos, los estadíos comprendidos fueron NVI a PL2.
En relación al cultivo de postlarvas, fueron practicados dos experimentos, enuno se consideraron cuatro niveles de recamblo por día (482, 130, 96, y 46porclento) en acuarlos por triplicado. En el segundo, se evaluaron los nivelesde amonio fosfato y pH para cuatro dietas experimentales durante la etapade PLI a PL5.
En maduración se reconoce a las dietas ricas en componentes frescoscontribuyen en mayor medida al aporte de amonio y fosfato, sin embargofueron la mas productivas en cuanto al numero de naupllos producldos, sereconoce al amonlo como el principal lndkador del proceso dedesemposición de dietas congeladas. La etapa más crltka en el cultivolarvarlo, la producción d e tóxicos se relacionó a la falta de recamblo queprecidio el periodo entre los estadios Z3 a M1, el tóxko asoclado a lamortalidad fue el nltrlto. Se detectaron dlferencias slgnlfkatlvas en cuanto alfosfato en el experimento a distintos niveles de recamblo, como unaconsecuencia de la mayor solubilidad de estos componentes asociada adecrementos de pH. Las dietas ricas en Ingredientes congelados modificannegativamente la calidad de agua El análisis de este último experimentomuestra una relación Inversa entre el fosforo y la sobrevivencia.
111
AGRADECIMIEMTOS
A mi asesor interno Dr. Alejandro Otto Meyer Willerer Investigador delCentro Universitario de Investigaciones Oceanológicas por su valiosa ayuda en ladirección do esta tesis.
Al Ing. Marcelo C. Costero Garbarino Ex-jcfc del Laboratorio de CienciasMarinas de la Universidad de Guadalajara, por las facilidades otorgadas para larealizacion de la fase experimental del presente trabajo.
Al M. en C. Rene Macias Zamora. Investigador del Centro Regional deInvestigaciones Pesqueras por sus sugerencias y aportaciones al presente trabajo.
Al M. en C. Carlos Lezama Cervantes. Coordinador de la Facultad de CienciasMarinas por su apoyo y valiosas criticas en la revisión del presente trabajo.
Al Biol. José Luis Zavala Aguirre Director actual del Laboratorio dc CienciasMarinas de la Facultad de Ciencias Naturales y Agropecuarias de la UniversidadAutonóma de Guadalajara por sus acertados comentarios y sugerencias enrelación a esta tesis.
A la Dra. Gloria Alicia Jiménez Ramón Investigadora del Centro Universitariode Investigaciónes Oceanológicas por sus acertadas criticas en favor de estetrabajo.
IV
CONTENIDO
Portada
Carta de Liberación
Resumen
Agradecimientos
Contenido
Llsta de Tablas
Lista de Graficas
1. Introducción
ll. Antecedente3
2.1. Aspectos Tecnológicos 5
2.2. Cultivo larvarlo 6
2.3. Nutrición 7
2.4. Calldad de agua 8
2.5 Antecedentes de proyecto 10
III. Objetivos
3.1. Objetivo general3.2. Objetivos particulares
IV. Metodología
4.í. Tecnología de cultivo4.2. Descripción de Instalaclones4.3. Tratamiento de agua4.4. Recepción de reproductores4.5. Acondicionamiento de reproductores4.6. Inducción reproductiva4.7. Calldad de agua4.8. Desove4.9. Cultivo larvarlo4.10. Cultivo de postlarvas
I
ll
III
IV
V
VI
VII
1
5
13
1313
13
141 41515161718192022
V. RESULTADOS
5.1. Inducción reproductiva 245.2. Cultivo lavarlo 365.3. Cultivo de postlarvas 42
VI. D I S C U S I O N
6.1. Maduración6.2. Rendimiento reproductivo6.3. Cultivo larvario6.4. Cultivo de postlarvas
VII. CONCUSIONES 62
7.1. Maduración 627.2. Larvicultivo 637.3. Cultivo de postiarvas 64
VII. RECOMENDACIONES 65
I X . BIBLIOGRAFIA 66
24
49
49525459
LISTA DE TABLAS
TABLA PAGINA
I
II
III
IV
V
VI
VII
VIII
I X
X
XI
XII
XIII
Condiciones de almacenamiento y dietas especificas durantela inducción a la maduración de P. vannamel,
Secuencia en la alimentación y niveles de recambio duran-te el cultivo larvarto de P. vannanel.
Criterios para la alimentación durante el crecimiento depostlarvas de P. vannamel.
Registro de resultados ANDEVA (bifactorial) para amonio,durante el ciclo de 12 horas en los cuatro tanques de madu-ración y la relación entre las interacciones (ANDEVA un solofactor), de dos tratamientos específicos.
Registro de resultados ANDEVA para fosfato, durante el ciclode 12 horas en los cuatro tanques de maduración y la rela-ción entre las interacciones de dos tratamientos especi-
ticos.
Resultados de interacciones entre los diferentes tanques demaduración con relación a las concentraciones amonio yfosfato de acuerdo a la prueba de Scheffé.
Datos reglstrados en relaclón al rendimiento reproductivopor tanques de rnaduractión durante el periodo de muestreo(01- jul-13 jul).
Datos promedio de parámetros fískoqulmkos durante lainducción reproductiva durante el periodo de muestreo enlos diferentes tratamientos alimentisios.
Datos promedio de parámetros fisico-químico y sobreviven-cia durante el cultivo larvario.
Análisis de varianza (ANDEVA bifactorial) durante el cultivolarvado para, acuarios, en relación al amonio, fosfato,
nitritos y nitrato.
Análisis de correlaciones entre la sobrevivencia por acuario,con respecto a la unklad de toxicidad y demás agentestóxicos durante cinco de los muestreos.
Análisis de resultados ANDEVA para amonio, durante elcrecimiento larvario en bioensayo a diferentes porcenta-jes de recambio.
Análisis resultados ANDEVA bifactorial para fosfatosdurante los bioensayos de crecimiento larvario a cuatro
V I
1 7
21
23
28
28
29
2 9
30
37
37
38
4 3
diferentes porcenteje de recambio de agua, y la lnteracciónespecifica para dos tratamientos (ANDEVA un solo factor). 44
XIV Prueba de varianza ANDEVA bifactorial para amonio enrelación a los cuatro tratamientos alimenticios en elcultivo de postlarvas. 45
xv Datos de cultivo durante la fase PL1 hasta PL5, en acuariosbajo diferentes tratamientos alinenticios. 45
XVI Valores promedio observados y valores criticos referidospara amonio, fosfato, nitrito y nitrato durante la repro-ducción y cultivo larvarlo de P. vannamel 52
XVII Cuadro comparativo del rendimiento reproductivo en P.vannmei, en relacíón a datos bibliográficos. 53
XVIII Correlación entre los valores promedio de sobreviven&y nitrito durante el cultivo larvario. 58
XIX Registro de lnteraccloncs por día de muestreo en elcultivo larvario en acuarios y su significación para dife-
rentes parámetros. 59
GRAFICA PAGINA
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1 0
l l
12
1 3
1 4
15
1 6
LISTA DE GRAFICAS
Fluctuaciones de amonio durante la madura- cíón.
Concentraciones de fosfatos durante lamaduración.
Fluctuaciones de nitrito durante la inducciónreproductiva.
Fluctuaciones de nitrato durante la inducciónreproductiva.
Fluctuaclones de amonlo y fosfato tanque Aen 12 h.
Fluctuaciones de amonio y fosfato durante elciclo de 12 h, tanque B
Fluctuaciones de amonio y fosfato durante elciclo de 12 h, tanque C.
Fluctuaciones de amonio y fosfato durante elciclo de 12 h, tanque D.
Niveles de amonio en los cuatro tanques du-rante el ciclo (12)
Niveles de fosfato en los cuatro tanques du-rante el ciclo (12)
Fluctuaciones de amonio durante el cultivolarvario en acuarios.
Fluctuaciones de fosfato durante el cultivolarvario en acuarios
Fluctuaciones de nitrito durante el larviculti-VO en acuarios.
Fluctuaciones de nitrato durante el larvicultivoen acuarios.
Sobrevivencia larvaria en acuarios.
Concentraciones de amonio y fosfato al 182%de recambio al día.
V I I
3 1
31
32
32
33
33
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35
35
39
39
4 0
40
41
46
1 7
18
1 9
20
21
Concentraciones de amonio y fosfato al 130%de recambio al día
Concentraciópnes de amonio y fosfato al 99%de recambio al día.
Concentraciones de amonio y fosfato al 46%recambio al día
Concentraciones promedio en los diferentesniveles de recambio amonio y fosfato
Sobreviven& de postlarvas, bajo distintasdietas.
4 6
47
47
4 8
4 8
I INTRODUCCION
La creciente demanda de alimentos originada por factores como la explosión
demográfica sobre todo en países en desarrollo, hace mas imperativo producir
alimentos de buena calidad a bajo precio y en menor tiempo, que aquel ‘alimento
obtenido directamente del medio natural. Para este fin la acuacultura se presenta
como una de las posibles alternativas para la producción de alimentos destinados
para el consumo humano.
En nuestro país el camarón constituye uno de los recursos pesqueros más
importantes en cuanto a su volumen de captura, situándolo en la actualidad
entre los diez primeros lugares a nivel mundial. Sin embargo se ha alcanzado un
nivel máximo de rendimiento sostenible, esto es, que a pesar de haberse sumado
embarcaciones a la flota de captura, la producción permanece estable entre las 70
a 80 mil toneladas métricas por año (CICTUS 1983 ). Incrementar esta
producción implica el desarrollo de la investigación en lo relativo al cultivo de la
especie, su reproducción en ambiente? controlados, el aprovechamiento de
terrenos adyacentes a sistemas lagunas y estuarios, proporcionando a los
grupos interesados los apoyos legales, técnicos y financieros; de no hacerlo se
podría correr el riesgo de perder presencia y participación en el mercado mundial.
En comparación con el cultivo de otras especies, el camarón ha tenido en
muchas partes del mundo avances de gran significancia a partir de las ultimas
décadas (Cook 1969; Hudinaga y Kittaka, 1967; Ryther y Bardach, 1968;
Shigueno, 1972).
Aún así, el desarrollo de la camaronicultura en México no ha registrado el
avance observado en otros países, que desde el punto de vista climático, ofrecen
condiciones ambientales similares al nuestro. Dentro de las causas principales,
además de las de origen político, como seria la inexistencia de un marco legal
que facultara la inversión privada en años pasados, se considera la presencia
de factores de carácter biológico, de las cuales se puede establecer, que la
abundancia de postlarvas silvestres a lo largo de las zonas costeras con potencial
de cultivo, podria no ser suficiente para garantizar la calidad de la semilla y el
abasto sostenible a los polos de producción. Lo anterior es un problema que se
agudiza, si se considera la tendencia que prevalece entre los camaronicultores de
algunos países como Ecuador, en cuanto a preferir organismos capturados en
el medio natural (Aiken, 1990). De igual manera, se presenta la tendencia entre
los productores de postlarva de producir ésta última, a partir de hembras grávidas
capturadas en el medio, sobre aquéllas maduradas en cautiverio (Aiken, 1990; Bray
y Lawrence, 1991).
La producción de postlarvas vía laboratorio tiene su origen en Asia,
particularmente en Japón (Fujinaga, 1967). En el caso de América, se inicia en
Estados Unidos (Tabb, 1972, Wheeler, 1968 y Cook, 1969). Particularmente en
México inicia el grupo de acuacultura del C. I. C. T. U. S. en Puerto Peñasco,
Sonora a partir de 1973 (citados por CICTUS, 1983). Esta es una estrategia de
producción más objetiva, ya que además de no representar efectos adversos a
los ecosistemas marinos, puede conducir a un crecimiento sostenible en la
producción de este crustáceo
La producción controlada de postlarvas a partir de reproductores en
ambientes controlados según Sandifer (1983), ha sido el avance rnás importante
en el cultivo del crustáceo, reconoce la existencia de ciertos factores a considerar, a
fin de garantizar el mayor éxito reproductivo. Dentro de éstos se pueden mencionar:
la aplicación de la tecnología de cultivo adecuada, el control de la alimentación. la
prevención de enfermedades y el control de la calidad de agua.
Sin embargo, uno de los principales problemas de la producción controlada
radica en la fase de reproducción, dentro de la cual, según Aquacop (1982) y
Laubier-Bonichon (1978) en lo que se refiere. a algunas condiciones fisico-
químicas: temperatura, salinidad, intensidad lurninosa. fotoperiodo y recambio de
agua, los requerimientos están bien definidas. No existiendo la misma opinión para
el caso de otros factores de carácter fisico-químico como los compuestos
nitrogenados y fosforados, sobre todo en lo relativo a las necesidades nutricionales
de los reproductores.
Uno de los objetivos en la producción controlada de peneidos, se centra en la
inducción a la maduración y desove de reproductores, mediante diferentes técnicas.
La ablación unilateral del pedúnculo ocular, el control del fotoperiodo, y el uso de
dietas especificas se emplean de manera conjugada en los centros de reproducción
(Landau, 1992).
La nutrición es considerada como uno de los factores más importantes en la
maduración, sin embargo aun existen diversas dudas en torno a los alimentos que
pueden ser utilizados como inductores y sus distintos niveles de utilización (Alvarez
del Castillo y Cahu, 1989; González y Gutíerrez, 1990)
El agua en un cultivo constituye el medio ambiente, en el cual los organismos
se desarrollarán y por lo tanto requiere de una especial atención (Wheaton. 1982).
Los requerimientos en cuanto a la calidad de agua dependen de los organismos a
cultivar, ya que por cada especie existen rangos de tolerancia a los indicadores
fisico-químicos (Fast, 1986). Un caso específico considera al nitrógeno, como el
principal producto de excreción en crustáceo, que propicia la acumulación de la
materia orgánica en los sistemas de cultivo (Claybraok. 1983). El amonio s e
presenta en su forma no ionizado como amoniaco (NH3). y en su forma ionizada
como ion amonio (NH,4) El equilibrio entre estas dos formas está en función
principalmente del pH, pero también interfiere la temperatura, la sañinidad y Ia
presión (Whitfield, 1974). A pH menor de 7 existe rnuy poco NH3 /| y s u riesgo de
toxicidad es limitado. A valores mayores de pH, la toxicidad de NH, es un problema
mayor.
En México pocos son los estudios relacionados con este tema, por lo que l a
importancia de este trabajo de investigación radica en su posibilidad de contribuir a
implementar y mejorar los sistemas de reproducción y producción de postlar vas del
recurso camaronero en nuestra región, mediante la caracterización de los factores
ambientales durante las diferentes fases que se tiene lugar en un laboratorio de
producción de peneidos, lo cual se considera además como una rnedida de
iniciativa para favorecer las expectativas acuaculturales aun inexistentes en nuestro
Estado relativas a la producción de camarón de cultivo, para la obtención de
cosechas programadas y lograr mejores beneficios económicos al sector social
organizado y la iniciativa privada.
II. ANTECEDENTES
En relación a los trabajos sobre producción de postlarvas, a partir de
reproductores bajo condiciones controladas, existe una gran cantidad de trabajos
relacionados con los diferentes ámbitos tecnológicos, que a continuación se
describen:
2.1. Aspectos Tecnológicos y Reproducción.
En la actualidad existen dos principales rnétodos para obtener crías de
peneidos; el tradicional descrito por Fujimura y Kittaka, (1967) para P. japonicus.
que consiste en la captura de hembras que han alcanzado la rnadurez sexual en
forma natural, las cuales son sometidas a un “shock” térmico. Los rendimientos
medios obtenidos establecen que de cada dos hembras, una llega a desovar y In
tasa media de eclosión es de 50%. El segundo método consiste en confinar
reproductores cuyas hembras son inducidas a la maduración del ovario, mediante
la ablación unilateral del pedúnculo ocular (Alikunhi, et al., 1975. Arsetin y Beard
1975; Santiago, 1977; Primavera, 1978; Lawrence, et al., 1980); González y
Gutíerrez, 1990). Esta técnica consiste en la extirpación de la fuente de la hormona
inhibidora de la gónada (GIH) secretada por las terminaciones ganglióticas organo-
X, y almacenadas en la cavidad glandular. Al practicar la ablación del pedúnculo
ocular se rernueve esta fuente de inhibición, presentándose así un proceso, de
aceleración en la vitelogénesis (Landau 1992).
Actualmente esta técnica es aplicada en machos de P.vannamei, en los
cuales se ha observado una mayor cantidad de esperma, sin disminuir la calidad del
mismo (Landau, 1992). Este autor menciona, que los embriones producidos por
ablación de hembras es un tanto inferior, que la calidad de los mismos obtenidos
mediante la maduración natural
La mayoría de los trabajos sobre maduración. a fin de optimizar la
reproducción consideran el control sobre la temperatura y regulación de l
fotoperiodo (Aquacop, 1977), la variación en la composición de la dieta (Landau,
1992; Meyer Willerer, 1990, Chamberlain y Lawrence. 1981), el control de las
condiciones ambientales y la densidad de población (CICTUS. 1983)
El empleo conjugado de la intensidad de luz, control del fotoperiodo. y la
temperatura, ha sido reportados en la maduración y desove de Peneaus monodo
determinando altos indices en la fecundidad, eclosión y numero de nauplios
(Aquacop, 1979; Hillier, 1984), de P. indicus (Emmerson, 1980; Emmerson et al..
1983), de P. setiferus (Brown et al., 1979), de P. stylirostris (Brown et al.. 1980;
Chamberlain y Lawence, 1981 a, b), y de P. vannamei (Chamberlain y Lawrence,
1981 a,b).
2.2. Cultivo larvario.
Durante el larvicultivo de camarones peneidos han sido utilizadas como
alimento diversas especies de fitoplancton (Simon, 1978). El empleo de
Chaetoceros gracilis como alimento exdusivo durante los estadíos de zoea -
mysis en P. stylirostris y P. v a n n a m e i , ha sido efectivo para obtener un 84 8 %
de sobrevivencia (Simon, 1978). Acuacop, (1979), reporta para el empleo
combinado de Isochrysis sp., Chaetoceros gracilis y Artemia sp., u n a
sobrevivencia promedio durante este periodo de 65-80 % para P. mergu iens is , I'.
indicus P. vannamei y P. stykirostris e n e l c a s o d e P. monodon l a
sobrevivencia fluctúa sobre 45 %. debido a la susceptibilidad en relación a las
infecciones bacterianas.
Otros géneros de fitoplancton han sido utilizados como Cylindrotheca
(Acuacop. 1977), Phaeodactylum (Heinen, 1976) y Nitzschia (Hirata et al ,
1975); sin embargo, se reportan relaciones inversamente proporcionales en lo que
se refiere al crecimiento y sobrevivencia (Tobias-Quinitio y Villegas, 1982).
La variabilidad de las tallas y la sobrevivencia durante el larvicultivo han sido
reconocidos como los principales indicadores de la calidad en la postlarva
producida en laboratorio, de éstas la primera ha sido causa principal que ha limitado
la factibilidad comercial del cultivo de camarón en Texas (Chamberlain y Pettibone,
1990). Otros indicadores han sido descritos, como es la duración de los estadios
larvales, longitud y peso de PL-21 (Castille et al., 1992). Estas variables pueden
ser consecuencia de un inadecuado sistema de producción, o en su caso tienen su
origen a partir de condiciones de calidad de agua poco propicias, lo cual en muchos
casos igualmente conduce a un estado de susceptibilidad para la propagación de
enfermedades (Boyd, 1988).
2.3. Nutrición.
En lo relativo a la reproducción, se considera la nutrición como un elemento
que favorece en gran medida la inducción a la maduración. Han sido probadas
diversas combinaciones de pellets con mejillón congelado y calamar congelado:
concluyendo que la combinación de mejillón congelado y pellets fue la principal
dieta para la maduración de P. monodon (Primavera, et al, 1979). Otras
investigaciones se han realizado en torno a las combinaciones de dietas preparadas
con alimento natural (Acuacop, 1975; 1979; Emmerson. 1980; Lawrence et al..
7
1980; Chamberlain y Lawrence, 1981 b; Acuacop, 1982; Alvarez del Castillo y Cahu.
1989; Meyer Willerer, 1990). Del mismo modo existen reportes en los que se
refieren resultados igualmente favorables, sobre la utilización de componentes
naturales en combinación, entre los que se incluyen gusanos poliquetos.
crustáceos, pescados, moluscos y cefalópodos (Arnstein y Beard. 1975. Beard et
al., 1977; Santiago, 1977; Brown et al., 1979; Kelemec y Smith, 1980. Beard y
Wickins, 1980).
Otros autores reportan resultados favorables durante la maduración
utilizando un solo organismo como alimento, tales como mejillón (Laubier- Bonichon
y Laubier, 1976; Primavera, 1978; Lumare, 1979), larvas de camarón (Alikunhi et al. I
1975; Nurgana y Yang, 1976). y peces (Lichatowich et al 1978)
Noriega, (1990), al trabajar sobre la estabilidad de dietas artificiales concluye,
que la mayor parte de éstas se alteran en un curso de pocas horas al permanecer
hidratadas, provocando con ello cambios significativos, tanto en el tamaño de la
partícula alimenticia, como en la calidad del medio ambiente del cultivo.
2.4. Calidad de agua.
En relación al manejo de los factores fisico-químicos que intervienen en la
producción controlada, han sido descritos numerosos trabajos sobre todo para P.
japonicus, P. aztecus, P. indicus y P. monodon (Spotte, 1970; Lange y Mostad
1972; Wickins, 1973; Allen, 1974; Hirayama, 1974; Whitfield. 1974; Moller y Jones.
1975; Griessinger, 1975; Shigueno, 1975; Villegas y Kanazawa. 1979; Allan et al .
1990) La gran mayoría de estos trabajos se refieren al efecto en la variación de
algún parámetro ambiental, sobre el crecimiento o sobrevivencia de peneidos.
siendo pocos los que se centran sobre el efecto de los indicadores ambientales
8
sobre la reproducción inducida. Entre ellos se puede mencionar el trabajo de
Kelemec y Smith (1984), los cuales al estudiar el efecto de las bajas temperaturas
sobre el índice de fertilidad y eclosión de huevecillos de P. plebejusebejus encontraron,
que siendo las tasas de mortalidad altas, la reabsorción de ovarios es baja San
Feliu (1987), reporta la influencia de los factores ambientales en la reproducción de
P. keratus, haciendo énfasis en la temperatura, fotoperíodo, alimentación en
organismos inducidos por ablación unilateral. Aquacop (1977), afirma que la
maduración y desove de peneidos, es afectada por la nutrición, temperatura,
salinidad, pH, luz y densidad de población. Analogamente Caillovet (1972)
determina que éstas mismas variables consideradas de importancia secundaria,
pueden ser encubiertas por niveles no óptimos de otras variables de importancia
primaria.
En relación a lo anterior, Br-ay et al., (1994) determinaron una interacción
significativa entre la salinidad con respecto a la propagación del virus IHHNV al
trabajar con juveniles de P . vannamei. (Hudson 1992), encontró marcadas
correlaciones entre algunos indicadores de la calidad de agua con respecto a
propagación de ectocomensales durante el cultivo de P. japonicus.
Los indicadores de la calidad de agua no son sólo parámetros fisico-
químicos. Palmer (1969), Edmondson (1972) y Miller et al , (1978) refieren
algunas especies fitoplanctónicas, entre ellas Oscillatoria corno indicadores
biológicos de mala calidad de agua en ecosistemas costeros Al respecto Sánchez
y Lara (1986); Quijano et al., (1987), reportán a Oscilatoria como especie
característica de aguas de mala calidad en la Laguna Cuyutlán , Colima, México
Según Claybrook (1983), el amonio es el principal producto nitrogenado
excretado por crustáceos, representando del 40 % al 90 % de los deshechos
orgánicos (Pan-y, 1960; Hartenstein, 1970; Kinne. 1976). siendo el principal
producto de acumulación en sistemas de cultivo (Stanier et al , 1976). Bajos niveles
de oxígeno disuelto incrementan la toxicidad del amonio en peces (Alabaster et al .
1979; Thurston et al., 1981; y Lloyd, 1961; citados por Allan et al , 1990)
La toxicidad del nitrito en estadios larvarios para P. indicus y P.
monodon ha sido reporta por Jayasankar y Muthu, (1983) y por Chen y Chin,
(1988). El caso particular de la toxicidad del nitrato para protozoea ha sido
reconocido por Muir y et al., (1991). La acción conjunta de amonio y nitrito
mediante la aplicación de la razón de toxicidad y unidad de toxicidad sobre la
sobrevivencia en postlarvas de P. monodon , ha sido descrito por Chen y Chin
(1987).
2.5. Antecedentes del Proyecto.
En relación a trabajos sobre los aspectos citados, en México son escasos los
que se han llegado a publicar, observándose que existe muy poca información a
pesar de que el recurso camaronero se explota de manera cada vez más
significativa, dando lugar por lo tanto, a ciertas incógnitas que pueden ser resueltas
mediante la investigación aplicada.
Con fundamento en lo anterior surge la necesidad de contribuir a través del
presente trabajo de investigación, el cual tuvo lugar dentro del proyecto titulado
“Determinación del índice de viabilidad de postlarvas obtenidas a partir de
reproductores de Penaeus rwnnumei alimentados con dietas especificas para
inducir a la maduración”, realizado en el Centro Universitario de Investigaciones
Oceanológicas, de la Universidad de Colima, siendo financiado por CONACyT. Ref.
10430-N9108.
Preliminarmente se contempló la realización de un ensayo en un sister a
semitecnificado para el manejo de P. vannamei a fin de determinar el posible
éxito en el crecimiento y la reproducción de esta especie bajo condiciones mínimas
de recambio en aguas de influencia eutrófica. Sin embargo. debido a problemas en
cuanto a calidad de agua, posiblemente originados por componentes de origen
químico como metales pesados, y aunado a la influencia de otrós factores, tales
como la dimensión reducida de los tanques de maduración, pudo ser posible lograr
el crecimiento de juveniles a adultos, estando limitada la obtención de desoves
bajo estas condiciones, presentándose estos únicamente a medida que se
intensificó el recambio diario de agua hasta un nivel de 180%. suministrando dietas
frescas con 42% de proteína en una proporción del 3 % (peso seco)
Paralelamente a este experimento se efectuaron muestreo9 mensuales, con
el fin de caracterizar las especies fitoplantónicas en los diferentes tanques operados
(maduración, desove, reservorio y como referencia de la Playa Miramar).
observándose cierta relación en cuanto a los desoves con respecto a la abundancia
de Nitzschia compressa var. conpressa, y ésta a su vez con respecto a
algunos indicadores fisico-químicos. Del mismo modo se identificó cierto patrón de
abundancia de Amphora coffeaeform is con respecto a las condiciones de baja
renovación de agua características de ambientes eutróficos (Meyer Willerer et al ,
1993).
En base a los problemas presentados para la continuidad del proyecto, los
experimentos del presente trabajo tuvieron verificativo en las instalaciones del
Laboratorio de Ciencias Marinas, de la Facultad de Ciencias Naturales y
Agropecuarias Universidad Autónoma de Guadalajara, Barra de Navidad, Jal.
Dentro del cual se verificaba un proyecto experimental relativo a la reproducción de
camarón P. vannamei, en base a lo cual se replantearon en gran parte los objetivos
de este trabajo de investigación
En el siguiente apartado se señalan los objetivos que se persiguieron en la
realización de este trabajo.
III. OBJETIVOS
3.1. Objetivo general.
Caracterizar los factores ambientales durante la inducción a la maduración, desove
y obtención de postlarvas de Penaeus vannamei bajo diferentes criterios
alimenticios.
3.2. Objetivos particulares.
l Determinar posibles correlaciones entre los indicadores de calidad de agua
(amonio, nitritos, nitratos, fosfatos), con respecto al rendimiento reprodúctivo
l Reconocer el efecto en la dosificación de diferentes componentes dietéticos. en
lo relativo al aporte de nutrientes durante la inducción a la maduración y
producción de postlarvas de P. vannamei
IV. METODOLOGÍA
4.1. Tecnología de Cultivo.
La metodolologia propuesta para la reproducción y obtención de postlarvas
considera las técnicas comúnmente empleadas en laboratorio para el caso de P.
vannamei y es fundamentada en los trabajos descritos por Acuacop, (1977);
Chamberlain y Lavvrence, (1981 b); Browdy y Somocha, (1985); Wyban et al .
(1988).
4.2. Descripción de Instalaciones.
El experimento tuvo lugar en las instalaciones del Laboratorio de Ciencias
Marinas de la Universidad Autónoma de Guadalajara en Barra de Navidad. Jalisco.
México. Este lugar está conformado por salas destinadas para la maduración.
desove, cultivo larvario y cultivos de apoyo.
El área de maduración esta conformada por 4 tanques circulares de fibra de
vidrio (ll .O m2 ), con paredes y fondo puliaas y color obscuro. El sistema de
iluminación consistente en un foco incandescente de 60 Watts por tanque,
colocado a una altura de 1.5 m sobre el nivel de agua Para los desoves se
utilizaron seis tanques de 200 obscuros con fondo cónico, los cuales fueron
tapados para mantener. condiciones de obscuridad total.
Para el cultivo larvario se utilizaron seis tanques de fibra de vidrio de 1.5 m
de diámetro (3 000 1), de superficies internas pulidas y fondos cónicos. Estos
tanques están sostenidos por estructuras metálicas especialmente adaptadas.
4.3. Tratamiento de Agua.
El agua fue introducida desde la Laguna de Barra de Navidad, por medio de
una bomba de 3 HP, a través de una red hidráulica (PVC) de 3 pulgadas de
diámetro, se almacenó en dos tanques reservorio de 12 m3 cada uno. Fue pasada
por un sistema de filtros de arena, posteriormente a través de filtros de cartucho de
10 y de 1.0 micrómetros de luz. El agua empleada fue previamente tratada con Na2-
EDTA (ll ppm), a fín de disminuir el grado de toxicidad de metales pesados de
acuerdo a Castille y Lawrence, (1981). La aereación fue realizada por un soplador
tipo turbina, que adicionalmente al aporte de oxígeno, proporcionó una ligera
circulación en cada tanque.
4.4. Recepción de Reproductores.
Los reproductores de camarón blanco P. vannamei que se utilizaron, fueron
transportados de un centro de acopio de reproductores localizado en el Puerto de
San Blas, Nayarit. Estuvieron confinados en un sitio localizado fuera de las
instalaciones del laboratorio, en el interior de la Albufera de Barra de Navidad y
consistentes en 4 tanques de fibra de vidrio de 3.6 m de diámetro, en una área bajo
techo. A fin de lograr la adaptación en la alimentación y condiciones de cautiverio
durante los 2 a 3 primeros días, se proporcionó alimento fresco (calamar y pescado
molido), a razón del 4% de la biomasa. Esta cantidad fue dividida en seis raciones
diarias. Gradualmente se fue sustituyendo parte de la dieta fresca por alimento
granular, observándose su respuesta. Se utilizó una dieta comercial para camarón
en forma granular (30% de proteína), suministrada durante los primeros 10 días fue
adicionada con 500 miligramos de terramicina por cada kilogramo (500 ppm)
Una vez transcurrido este periodo (20 a 30 días), se realizó un censo total de
la población, pesando, midiendo, sexando y seleccionando los reproductores que
presentáron mejor condición. La Figura 1 ‘(página 22) representa en forma
esquemática las diferentes fases del experimento desde maduración, cultivo larvario
y cultivo de postlarvas
4.5. Acondicionamiento de reproductores.
Los reproductores fueron marcados con el propósito de llevar un control
sobre el estado de maduración y fecha/hora del desove Se utilizó para este
propósito un anillo elástico que normalmente es empleado .para marcar aves
migratorias, alrededor del pedúnculo ocular izquierdo. Especialmente en el caso de
las hembras, se marcaron con una etiqueta pegada sobre el cefalotórax, lo que
permitió llevar un mejor control en torno a la muda y la frecuencia reproductora
Todas las hembras fueron ablacionadas previa identificación del estadio de
intermuda “C” (Sandinfer 1983).
En dos tanques se almacenaron reproductores a una densidad de 2 3
organismos/m2, mientras que en los otros dos se reclutaron a densidad de 4 6
organismos/m2, con un total de 25 a 50 organismos respectivamente, manteniendo
una relación .hembra - macho de 1:1. La duración del experimento fue de 10
semanas.
4.6. Inducción Reproductiva.
En relación a la alimentación fueron probadas cuatro diferentes dietas,
suministradas al 15 % de la biomasa en base a materia húmeda, en cuatro raciones
diarias. Para cada uno de los cuatro tanques de maduración, se utilizó una dieta
particular de acuerdo a las especificaciones de la Tabla .
Tabla I.- Condiciones de almacenamiento y dietas especificas durante la induccióna la maduración de P. uannamei.
Hembra : machoTanque Dieta Densidad (org/m2) Org.
A Rangen* 50 % + 2.3 25Calamar 50 %
B Rangen + residuo 2 .3 25Mejillón
C Calamar 50% + 4 6 50Mejillón 50 %.
D 25 % mejillón + 5025 % calamar+ 50% 4 . 6
Artemia Research**
* Rangen, alimento seco preparado para madurnción por Rangen Inc.Quality Aquaculture, Trade Mark, U.S.A. (35 % proteína).
1:l
1: 1
1 : 1
1: 1
** A1imento elaborado por Artemia Referente Center, State University Ghent, Bclgium.
El nivel de recambio de agua al día fue del 200%, siendo solamente
interrumpida durante las tres primeras horas de la fase nocturna del fotoperiodo.
El fotoperiodo se realizó en forma invertida (14 h luz, 1 0 h obscuridad) La
fase diurna comprendió de 18: 30 - 08.30, y la nocturna de 08.30 - 18:30
Todas las hembras fueron ablacionadas, de acuerdo al método propuesto por
Primavera (1978), conduciéndose, inicialmente hacia una estrangulación sobre la
base del pedúnculo ocular, se practicó la oculotomía unilateral y posteriormente la
cauterización Durante esta intervención el organismo fue sumergido bajo el agua,
a fin de reducir el “estres” por motivo de ésta intervención
4.7. Calidad de agua.
Se obtuvieron registros diarios (08:OO AM), del oxígeno disuelto con un
Oxímetro (marca “YSI” modelo 51 B), el pH con un potenciómetro digital (marca
Corning), la salinidad con refractómetro (mca marca Acuafauna con compensación
de temperatura), así como la temperatura ambiental y del agua.
En un periodo de 10 semanas, en el mismo horario y con una frecuencia de 3
muestreos por semana, se determinaron los siguientes parámetros: amonio.
nitratos, nitritos, fosfatos; todos según técnicas descritas por Standard Methods.
(APHA, 1989)‘ con respecto a los diferentes tratamientos alimenticios durante la
inducción a la maduración, las concentraciones obtenidas fueron llevadas a una
serie de tiempo mediante el método de medias movibles Fueron analizados los
niveles de concentracion de cada parámetro analizándose su relación con los
indicadores obtenidos del rendimiento reproductivo.
Se efectuó un ciclo de monitoreo continuo durante la quinta semana de
inducción, sobre la calidad del agua a lo largo de 12 horas en los cuatro tanques de
maduración, midiéndose cada hora los niveles de amonio y fosfatos. Lo anterior
fue comprendiendo la fase nocturna del fotoperiodo invertido (8:30 AM - 8.30 PM),
ya que este periodo corresponde al de mayor actividad en los organismos.
4.8. Desove.
Diariamente se verificaron los estados de maduración, toda vez que la
hembra logre su madurez sexual, y tan pronto el macho depositó el espermatóforo
en la zona ventral de la hembra, ésta fue sacada y depositada de manera individual
en recipientes de 200 1, con el fin de que desovara y poder así llevar a cabo el
control en cuanto a la sanidad de la hembra, cantidad y calidad de huevos
desovados.
Los huevos obtenidos se concentraron mediante mallas especialmente
adaptadas, fueron enjuagados y se depositaron en matraces aforándolos a 200 ml
El conteo se realizó a través de una alícuota de 2.0 ml bajo el microscopio
esteroscópico: Esta operación se efectuó por triplicado. Los siguientes parámetros
fueron considerados a fin de evaluar el rendimiento reproductivo:
l Numero de huevos. Determinado por conteo al microscopio esteroscópico de
muestras que representaron 11100 parte del desove.
• Tasa de eclosión. Determinado sobre 10 000 huevos puestos a incubar durante
15 h. contando los nauplios que eclosionaron y que se encuentraron bien
formados.
l Tasa de fecundidad. Determinada de acuerdo a los criterios de Primavera y
l Posadas (1981)
A fin de determinar las diferencias significativas entre la calidad de agua de
los distintos tratamientos alimenticios, se practicaron análisis de varianza ANDEVA
bifactoriales, para el caso de comparaciones específicas entre los tratamientos se
empleo el método descrito por Scheffé, (1957)
4.9. Cultivo Larvado.
La segunda fase del experimento consideró la obtención de postlarvas a
partir de nauplios N5 producto de los desoves (aproximadamente 48 horas después
de la eclosión), a una densidad de 100 larvas/l, y en 6 tanques circulares de fondo
cónico con capacidad de 3 000 litros. Para la alimentación y control se aplicó el
criterio propuesto por Aquacop, (1979), únicamente sustituyendo el empleo de
Isochrysis por Chaetoceros gracilis para los prirneros estadíos larvarios (N2 a
Z3), y Chaetoceros gracilis por Tetraselmis spp. de Z1 a PI1. (Tabla ll).
Para el monitoreo de los párametros fisico-químicos, se siguió la misma
técnica descrita anteriormente, y en el caso de amonio, fosfato, nitrito y nitrato se
realizaron 8 muestreos durante el periodo de larvicultivo. Estos valores fueron
posteriormente comparados con otros criterios comunmente referidos para
determinar el grado de toxicidad de compuestos como son el CL 50 o concentración
de tóxico letal para el 50% de la población(Chen y Chin, 1988; Muir et al., 1991.
Wickins, 1976; Jayasankar y Muthu, 1983a, 1983b) y UT (unidad de toxicidad
amonio / nitrito) referidos por Chen y Chin, (1987).
Tabla II.- Secuencia de alimentación y niveles de recambio durante el cultivolarvario de P. vannameí
H a NNN1-Z1Z 1Zl-Z2
Z 2Z3
Z3-M1 M 1M2M3M3-P11PllP12
50 00080 00080 00050 00050 000
Paralelamente al tratamiento en tanques, se realizó el cultivo larvario por
cuadriplicado en acuarios de 0.78 m X 0.32 m X 0.40 m (100 litros), bajo las
mismas condiciones de densidad, alimentación y recambios establecidas para el
primer caso, a fin de llevar un control más especifico en lo relativo a la
temperatura, se dispuso de una sala de bioensayos en la cual se registraron
variaciones minimas de dicho parámetro (29 + / - 1°C). Se obtuvo así una
caracterización respecto a la variación de amonio, nitritos, nitratos y fosfatos Los
valores determinados fueron posteriormente comparados con los referidos por otros
autores, tomando en cuenta los criterios comunmente referidos para determinar el
Día Estadío Chaetoceros g.Cl/ml
Tetraselimis sp.Cl/ml
ArtemiaNaup/ml
Nivel de Recambio
0123456789
10111213
--
20 00020 00050 00050 00080 00050 00050 00030 00030 000
--------
0.20.20.51.01.02.0
TOTAL1/22/32/32/32/32/3
grado de toxicidad de compuestos como son. el CL50. UT. EC50 (concentración que
reduce el crecimiento al 50%) y MATAC (máxima concentración tóxica aceptable)
A fin de identificar el parámetro que mayor fluctuación presento durante esta
etapa experimental se realizó una prueba de análisis de varianza de un factor
siendo este las concentraciones de cada parámetro en cada intervalo de muestreo.
posterior a ello se aplicó la prueba de comparación especifica propuesta por
Scheffé, (citada por Ostle, 1979).
4.10. Cultivo de Postlarvas.
La tercera fase consistió en evaluar las concentraciones de amonio y fosfato
bajo diferentes condiciones de renovación de agua para el cultivo de postlarvas.
sembradas en acuarios a una densidad de 6 PL/I. La alimentación consistió en
Artemia en concentraciones de 1 y 2 nauplios/ml respectivamente para los estadios
PI1 y PI2. Los niveles a experimentar fueron próximos al recambio del 66% sugerido
por Aquacop (1977) para esta fase de cultivo, se ernpleo un 182, 130. 96. y 46
porciento de renovación por día. Cada prueba fue realizada por triplicado Se
practicaron monitoreos cada hora en relación al amonio y fosfato durante un periodo
del experimento (6 horas).
Con el propósito de caracterizar la influencia de diferentes dietas en la
calidad de agua y en la sobrevivencia de postlarvas, se experimentó en cuatro
acuarios respectivamente sembrados a 6 PI/I las 4 dietas referidas en la Tabla III.
Asimismo se practicaron tres muestreos durante los 5 días del experimento. sobre
el amonio, fosfato y pH, manteniendo un nivel de recambio en todos los casos del
30% sobre el volumen al día.
Tabla III.- Criterios para la alimentación durante el crecimiento de postlarvasde P. wannamei en acuarios.
En ambos experimentos, se llevó un control de la salinidad de 32 + /- 1, % 0
temperatura de 29 +. 1 ° C y el oxígeno en niveles de saturación
A fin de analizar el comportamiento de las variables obtenidas. se aplicaron
pruebas de correlación simple, análisis de varianza de una y dos vías de las
variables con respecto al crecimiento y sobrevivencia. utilizando las siguientes
hipotesis:
H0 (hipotesis nula); µ1 = µ2 =.... .. µn (µ = media del parámetro que se indique)
Lo cúal indicaria al menos una no diferencia significativa entre las medias de los
parámetros medios y:
Ha (hipotesis alternativa), µ1 ≠ µ2 ≠ µn Con lo que consiramos que si existe
diferencias significativa al menos con una media.
Alimento Dosis
Artemia 1,2,3,4 y 5 nauplios/ml (Pl1 hasta Pl5 respectivaente).
* Facinar 10% de biomasa repartido en cuatro raciones al día.
** Maximum 10% de biomasa repartdoen caro reaccioes al día.
Calamar (50%) Finmene pcao 10% biomasa cuatro raciones/día.
+ Mejillón (50%)
* Alimento fresco congelado al 42% de proteína..** Alimento comercial para engorda de camarón 35% protína. (marca Rangen).
CULTIVO LARVARIO
CULTIVO DE POSTLARVAS
Figura 1.- Representach esquematka de los diferentes experimentosdurante la inducción a la maduración, larvicultivo y cultivo depostlarvas en condkiones de laboratorio.
V. RESULTADOS
5.1. Inducción Reproductiva.
Las concentraciones promedio de amonio durante el periodo de inducción a
la maduración fue de 0.19 mg/l, registrando a su vez los valores máximos y
mínimos en los tanques C y A siendo de 0.25 y 0.147 mg/l respectivamente
(Gráfica 1). En el caso de fosfato, se presento mayor concentracion en
promedio de 1.35 µg-at-P-P04/L para el tanque C. En general para este
parámetro los niveles presentaron una tendencia homogenea fluctuando
alrededor de 1.O µg-at-P-P04,/L, exhibiendo un pico máximo en todos los casos
durante la octava semana del experimento (Gráfica 2), el promedio para este
indicador en todos los tratamientos correspondio a 1.14 µg -at-P-P04,/L.
Las concentraciones de nitrito durante esta etapa reproductiva presentó en
los cuatro tratamientos fluctuaciones entre 0.98 y 0.55 mg/l (Gráfica 3),
concentraciones promedio máximas de 0.80 Nitrito mg/I se presentaron en el
tanque C {Tabla VIII). En el caso de nitrato las concentraciones entre los
tanques fueron muy similares entre las primeras seis semanas , exhibiendo
valores de 0.124 mg Nitrato-N/I En todos los casos se presentan valores mínimos
y máximos de 0.0’79 y 1.159 para la octava y novena semana respectivamante
(Gráfica 4), el valor promedio correspondio a 0.12 mg Nitrato-N/I (Tabla VIII).
Durante el ciclo continuo de monitoreo en los cuatro tratamientos de
inducción reproductiva, las concentraciones de amonio fueron máximas en los
tanques C, A, y D, con valores de 0.42, 0.27 y 0.27 mg NH4/L , para los
muestreos de las 17:00, 1 0:OO y 14:OO hrs, respectivamente. Los valores
máximos se detectaron en los tanques B y A siendo de 0.06, 0.075 mg NH4/L, a
las 8:00 y entre 12:00 y las 15:00 hrs, respectivamente (Gráficas 5, 6 , 7 , y 8).
La Gráfica 9 presenta una comparación entre las concentracions registradas en
cada tratamiento durante el intervalo de muestreo, se observan concentraciones
máximas y máximas de 0.47 y 0.06 mg NH4/L en los tanques B y C en forma
respectiva.
En el caso de los fosfatos durante este ciclo, se presentaron valores
máximos alrededor de las 12 hr, donde los tratamientos A, C y D registran sus
mayores concentraciones de 1.65, 3.3 y 1.9 µg-at-P-PO4/L respectivamente. Los
valores más bajos se obtuvieron en el tanque B, el cual en todo momento
presento concentraciones por debajo del resto de los tratamientos, siendo su
rango de 0.2 y 0.45 µg-at-P-P04/L (Gráficas 5, 6, 7, 8).
La Gráfica 10, exhibe el comportamiento entre los cuatro tratamientos en
relación al fosfato, observándose mayores fluctuaciones entre los tratamientos
entre el intervalo de tiempo de 08:00 - 14:00, para posteriormente fluctuar
alrrededor de los 0.7 µg-at-P-P04/L en los cuatro tanques de’ tratamiento.
En la Tabla IV, se presentan los resultados del tratamiento estadístico
(ANDEVA bifactorial), aplicado para determinar diferencias de amonio entre los
cuatro tratamientos durante el ciclo de 12 h, se observa que en este parámetro
no se presentaron diferencias significativas entre las concentraciones registradas
en cada intervalo de muestreo para cada uno de los tratamientos. Sin embargo,
las comparaciones especificas entre los tratamientos exhiben niveles de
significancia (P<O.05). En relación a las interacciones específicas (ANDEVA un
solo factor) entre dos de los tratamientos, se observan diferencias destacables
(P<O.O5), entre los tratamientos: A-C, B-C y B-D, en lo relativo a sus
concentraciones de amonio durante el período de muestreo (Tabla VI).
De acuerdo al análisis estadístico de los cuatro tratamientos en relación a
los fosfatos (Tabla V), se observan diferencias significativas entre las
concentraciones registradas en cada hora, así como en las concentraciones
concentraciones registradas en cada hora, así como en las concentraciones
presentadas durante el ciclo, para cada uno de los tratamientos (P < 0.05). La
Tabla VI presenta los resultados de las comparaciones entre los diferentes
tanques, destacandose diferencias entre los tratamientos A - C, B - C y B - D..
La Tabla VII exhibe los diferentes datos determinados en cuanto a los
indicadores de rendimiento reproductivo para cada uno de los tanques de
maduración, observandose que en base a los diversos indicadores como son el
total de nauplios producidos, nauplios por desove, huevos producidos por
desove, los mejores resultados correspondieron a las dietas de los tanques C y
D (d ie tas Ca lamar - Mejillón 50/50 por-ciento y Mejillón - Calamar -
Artemia/Research 25-25-50 porciento, respectivamente). La dieta del tanque B
presentó sólamente 2 desoves durante el periodo muestreado, exhibiendo altos
valores relativos a los porcentajes de fecundidad y eclosión (80% y 65%
respectivamente). El mayor número de huevos producidos por desove (191,800),
y el máximo porcentaje de fecundidad correspondió a la dieta del tanque A
(Rangen 50% + Calamar 50%), sin embargo sólo se registraron 6 desoves.
La Tabla VIII presenta los diferentes datos promedio obtenidos en cuanto a
los parámetros físico-químicos. En general para el caso del amonio, fosfato,
nitrito, oxígeno disuelto y pH, se encuentran ciertas diferencias en cuanto a las
concentraciones de los tratamientos A y B con respecto a las dietas de los
tanques C y D.
Tabla IV. Registro de resultados ANDEVA (bifactorial) para amonio, durante el ciclode 12 horas de muestreo en los cuatro tanques de maduración y la relación entre lasinteracciones (ANDEVA un solo factor), de dos tratamientos específicos.
Fuente de variación. g.I. SC CM F P
Comparación A - B - C -D
Intervalos de muestreo l l 26975.3 24552.3 0.5745Diferencias tanques.por 3 226669.5 75556.5 17.7033 co.05Error 34 145109.5 4267.9
Total 4 8 398754.3
g.1 = grados de libertadS.C. = suma de cuadradosC.M = cuadrado medioF = factor de cuadrados medios.P = decisión estadistica.
Tabla V. Registro de resultados ANDEVA para fosfato, durante el ciclode 1 2 horas en los cuatro tanques de maduración y la relación entre lasinteracciones de dos tratamientos específicos.
Fuente devariación.
Intervalos demuestreo.Diferenciaspor tanques.Error.
Total
g.I.
11
334
48
S C C M F P
Comparación A - B - C - D.
10.536 0.9578 3.6581 < 0.05
11 .791 3.9303 15.0106 < 0.058.9025 0.2618
31.2299 0.26184
Tabla Vi. Resultados de interacciones entre los diferentes tanques demaduración con relación a las concentraciones amonio y fosfato de acuerdo ala prueba de Scheffé.
.
INTERACCION
PARAMETRO A - 0 A - C A-D 8-C B-D C-D
Amonio N S * NS * * *
Fosfato NS * N S * * N S
NS diferencia no significativa al umbral 0.05* Diferencia significativa al umbral 0.05
Tabla VII. Datos registrados en relación al rendimiento reproductivo portanque de maduración durante el periodo de muestreo (0-1 jul-73 jul).
TANQUE
Parámetro A B C D
Densidad org/m2 2.0 2.0 4.0 4.0
Total de desoves. 3 2 36 3 5
Huevos producidospor desove. 191 800 131 000 136 511 167 966
Fecundidad (%) 91.0 80.0 56.8 51.0
Eclosión (%) 3 0 . 8 65.0 49.0 44.5
Total de Nauplios. 277 000 87 000 2 765 000 2 475 000
Naupliosldesove 46 160 43 000 60 138 63 763 ,
.
Tabla VIII. Datos promedio de parámetros fisico-químicos durante la inducciónreproductiva durante el periodo de muestreo en los diferentes tratamientos.
Parámetro ATANQUE
B c D Promedio
Amonió (mg/l) 0.17 0. 78 0.20 0.19 0.19Fosfato (µg- -at-P-POM) 0.77 0.30 1.69 1.01 1.14Nitrito 0.76 0.81 0.86 0.78 0.80Nitrato 0.12 0 . 1 2 0.12 0.12 0.12Temperatura (°C ) 28.3 2 8 . 3 28.4 2 8 . 3 28.3pH 8.09 8.05 7.96 7.98 8.02Oxígeno disuelto (mg/l) 5.4 5.4 4.7 5.0 5.1Salinidad (% o) 3 2 . 0 3 2 . 0 3 2 . 0 3 2 . 0 3 2 . 0
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..*........................................................................ . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..*.......................................................................
............................... ...............................................
5 1111 16 2121 2 72 7 3 23 2 3 03 0 13 1 01 0 54 66 70 D E DÍA D E MUESTREO
¤ TANQUE A ¤ TANQUE B c¤ TANQUE C Y. TANQUE D
Am
onio
(mg.
/1)
0.00
0.75
0.70
0.65
16 21 27 32 38 43 40 54 59 66 78DIA DE MUESTREO
s-IrWiQUE A ¤ TANQUE B¤ TANQUE C * TANQUE TANQUE D
0.16
0.15
0.14
8.13
0.12
8.11
0.10
0.09
0.08
0.07
0.06
Grafica 4.- Fluctuaclones de nitratodurante la Inducclon reproductiva.
................. ..............................................................................................................................................
............................................................................................................................................................
....................................................................................................................................
.................................
........................................................................................................
....................................................................................................................................................
..........................................................................................................................................................
.............................................................................................................................................................................
5 16 21 27 32 33 43 48 5 4 59 6 6 7 0D Í A DE MUESTREO
¤ TANQUE A ¤ TANQUE B¤ TANQUE ¤ TANQUE D
Nitr
ito (
mg/
1)
5 . Fluctuaclones de amonio yfosfato durante tanque a en 12 H .
0.30
0.20
0.10
0:00 9 : 0 0 10:00 11: 0 0 12:00 13:00 14:00 15:00 16:00 17:00 18:00 19 :00H O R A
* AMO N I O 4 FOSFATO
0 .12 ...........................................................................................................................................................................
0.10
......* .............* ...............................................................
0.08
0.06
r 8.84
0.02 .
. . . .
0.15
0.10. ....................................................................................................................................................................................................... . . . ...... .............................
0.05
0.00 , 0. 000 9:00 1 0 : 0 0 11:00 12:00 13:00 14:00 15:00 16 :00 17:00 18:00 19:00
HORA* AMONIO 4 FOSFATO
fosfato t a n q u e : B 12 H
GRAFICA
Gráfica 7.- Fluctuaciones d e amonio yfosfato tanque c durante 12 H
0.30
0.25
0.28
0.15
0.10
0.05
Gráfica 0. - Fluctuaciones d e a m o n i o yfosfato tanque D 12 H
0:00 9:00 10:00 11:00 12:00 13:00 14:00 15:00 16:00 17:00 18:00 Hora
* AM O N I O ¤ FOSFATO
19:00
3.8
2.5
2.0
1.5
1.0
8.5
0.00:00
9 : 0 0 10:00 1 1 : 0 0 12:00 13:00 14:00 1 5 : 0 0 16:00 17:00 18:00 19:00H O R A
¤ Tanque a ¤ tanque b¤ tanque c ¤ tanque d
9:00 10:00 ll:00 12:00 13:00 14:00 15:00 16:00 17:00 18:00 19:00
Grafica 10. Niveles de f os fa to en l o scuatro tanques durante el ciclo (12h)
5.2. Cultivo Lar-vario.
Durante esta fase de cultivo larvario en acuarios, se presentaron
máximos niveles de amonio, fosfato, y nitrito dur-ante el séptimo dia de
metamorfosis larvaria, mientras que los valores mínimos fueron registrados en
el inicio y en el caso de amonio y fosfato al término del cultivo (Gráficas ll, 12,
13). Para el caso de los nitratos, las concentraciones aumentaron de manera
progresiva a lo largo del cultivo exhibiendo por lo tanto máximos niveles al
término del mismo (Gráfica 14). La Tabla IX presenta datos promedio de los
parámetros fisico-químicos y sobrevivencia en tanques y acuarios durante
periodo de cultivo
De acuerdo al análisis estadístico (ANDEVA bifactorial) practicado a los
parámetros amonio, nitrito, nitrato y fosfato que se presentan en la Tabla X. se
determina la no significancia entre los valores de los acuarios, pero sí entre las
concentraciones presentadas para cada parámetro en relación a los intervalos
de muestreos (p < 0.01).
La Tabla XI determina los factores de correlación lineal existente entre la
sobrevivencia con respecto a amonio, nitrito, fosfato y la unidad de toxicidad
(amonio / nitrito), este último de acuerdo al método propuesto por Lloyd ( 1961).
y Sprague y Ramsay (1965).
La sobrevivencia promedio durante el cultivo larvario en los tratamientos.
fue de 31 % considerándose desde nauplio estadio N I V, hasta postlarva PI2
(Gráfica 15), la sobrevivencia en tanques de 3000 I. por su par-te fluctua
alrededor del 60 +/- 5.0 %.
Tabla IX. Datos promedio de parámetros fisico-químicos y sobrevivencia
durante el cultivo larvario.
Parámetro Tanques de cultivo Acuarios
Temperatura (“C) 28.1 2 9 0p 8 . 0 9 8.06Oxígeno disuelto (mg/l) 5.5 4 8Salinidad ( % o) 32.0 32 0Amonio (mg/l) 0.87 1 1Fosfato (µg-at-P-PO4/I) 4.4 4 9Nitrito (mg/l) 0 . 1 6 0 11Nitrato (mg nitrato-N/I) 1.9 19Sobrevivencia (%o) 6 0 . 0 31 0
Tabla X. Análisis de varianza ( ANDEVA bifactorial ) durante el cultivo larvariopara acuarios, en relación al amonio, fosfato, nitrito y nitrato
Interacción Parámetro Fuente de variación
Amonio
Fosfato
Nitrato
Nitrito
A - B - C - D AcuariosMuestreo
AcuariosMuestreo
AcuariosMuestreo
AcuariosMuestreo
Tabla XI. Análisis de correlaciones entre la sobrevivencia por acuario, conrespecto a la unidad de toxicidad y demás agentes tóxicos durante cinco de losmuestreos.
Réplica Parámetro Promedio (mg/L) Sobrevivencia (%) r t- -
Acuario 1 anionio 0.69 2 5 6 -0.04nitrito 1.33 -0 93 . 0.05* fosfato 2.98 -0 19U.T’ -0.45
Acuario 2 a m o n i o 0.83 40.25 -0.14 nitrito 1.38 -0.94 0 05fosfato 4 16 -0. 32UT. -0.55
Acuario 3 amonio 0.40 28 -0 JI
nitrito 0.X’) -0 6 1fosfato 3.68 -0.57
U.T. -0.X') < 0 0 5
Acuario 4 amonio 0.6 1 27.5 -0 1 1nitrito 0.00 -0 .99 <0.05fosfato 3.84 -0.40
U.T. -0.36
* µg-al-P-PO-4/l.U. T. = Unidadcs dc toxicidad (amonio/nitrito)
Grafica ll. Fluctuaclones de amoniod u r a n t e el c u l t i v o larvario e n acuario
2.0
1 . 08
0.00 33 5 77 8 9 11 1 71 7
DE MUESTREO DIA ¤ ACUA 1 ¤ ACUA 2
¤ ACUA 3 ¤ ACUA 1
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0I0
Grafica 12.- fluctulaciones de fosfatod u r a n t e e l c u l t l w larvario en acuario
3 5 7 8 9 l l 1 2DIA D E CULTIVO
¤ ACUA 1 ¤ ACUA 2¤ ACUA 3 ¤ ncun 4
A
mon
io (
mg/
1)
0.18
0.16
8.14
0.12
0.10
e.ee0.06
0.04
0.02
0.00
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
Grafica 13 Fluctuaciones d e nitritodurante al larvicultivo en acuario
3 5
DI A DE MUESTREO¤ ACUA 1 ¤ acua 2¤ acua 3 ¤ acua 4
Nit
rito
m
g/l
Mic
rogr
amo
M-M
03/L
‘ l a 4 6 l l 12DIAS DE CULTIUO
ACUA 1 e ACUA 2IIIIncrm3 Elflcrm4
5.3. Cultivo de Postlarvas.
Las Gráficas 16, 17, 18 y 19 muestran las concentraciones de amonio y
fosfato obtenidas durante el cultivo de postlarvas en acuario, bajo diferentes
porcentajes de recambio (182, 130, 96, 46 porciento de recambio por día.
respectivamente); los valores máximos se determinaron en promedio para ambos
parámetros respectivamente de 1.14 mg/l y 1.57 µg-at-P-PO4/l para el
experimento al 46 % de recambio, mientras que valores mínimos correspondieron
al 182% de recambio siendo de 0.09 mg/l y 0.42 µg-at-P-PO4/I en promedio para
amonio y fosfato (Gráfica 19 ),
La Gráfica 20 presenta las concentraciones promedio de amonio y fosfato
entre las réplicas para cada porcentaje de recambio, obteniéndose u n aumento
gradual en cada una de ellas, a medida que disminuye el nivel de recambio
De acuerdo al análisis de varianza de dos factores con un nivel de
significancia de 0.05, aplicado en relación al amonio, durante el cultivo lar-vario
bajo diferentes niveles de recambio (Tabla XII), no se obtienen diferencias
significativas al analizar las pruebas en conjunto. En el caso de los fosfatos
(Tabla XIII), sí se presenta significancia en el tratamiento de los cuatro acuarios
(P < 0.05 ), así como en la interacción 182% - 46% para las concentraciones
durante el tratamiento ( P < 0.05 ).. . . .
Durante el cultivo de postlarvas bajo cuatro tratamientos alimenticios se
presentaron marcadas diferencias en las concentraciones, en lo relativo al
amonio entre cada una de los tratamientos (Tabla XIV), siendo mayores las
concentraciones para la dieta D (calamar + mejillón).
La Tabla XV presenta datos sobre la sobrevivencia, niveles de amonio y
fosfato para diferentes tratamientos alimenticios, se detectan máximas y mínimas
concentraciones de amonio para las dietas C (Maximum) y A (Artemia)
respectivamente, en el caso de fosfatos el máximo valor se observa en la dieta D
(Calmar + mejillón), y el mínimo para la dieta de A (Artemia).
La Gráfica 21 exhibe datos acerca de sobrevivencia de postlarvas bajo los
tres tratamientos alimenticios, se distingue mayor- sobrevivencia en orden
descendiente de los tratamientos A, C, B y D, con porcentajes de 90. 8 3 3 2 5 y
12.6 respectivamente.
Tabla XII.- Análisis de resultados ANDEVA para amonio, durante el cultivo depostlarvas en acuarios a diferentes porcentajes de recambio
Fuente devariación. g.l. S C C M F P
Nivel de recambio 182% - 130 % - 96% - 46 %
INTERVALOS 2 123049 28 61524 64 3515 -
RECAMBIOS 3 135803.15 45267.7 1 2.586 -
ERROR 6 105011.02 17501 83
TOTAL 11 363863.46
Tabla XIII.- Análisis de resultados ANDEVA bifactorial para fosfatos durante losbioensayos de crecimiento larvario a cuatro diferentes porcentajes de recambiode agua, y la comparación especifica entre dos tratamientos ( ANDEVA un solofactor )
Fuente devariación. g. l. SC CM F P
Nivel de recambio 82 % -- 130 % - 96 % - 46 %
INTERVALOS 2 0.5904 0.295232 2.52696RECAMBIOS 3 1.8871 0.629034 5.384032 < 0 05ERROR 6 0.7005 0.116835TOTAL l l 3.1785
Comparación 182 % - 130 %
Intergrupos 1 0 7231 0.7231 6.3066intragrupos 4 0.4586
Total 5 1.1817
Comparación 182 % - 96 %
lntergrupos 1 0.19224 0.19224 6 9606lntragrupos 4 0.1104 0.02761
Total 5 0.3026
Comparación 182 % 46 %
Intergrupos 1 0.16968 0.16968 ll 2904 / 0 05Intragrupos 4 0.06011 0.01509
Total 5 0.22979
Comparación 130 % - 96 %
Intergrupos 1 0.16968 0.16968 1 2 5 2 5Intragrupos 4 0.54186 0.135466
Total 5 0.71154
Comparación 130 % - 46 %
fntergrupos 1 0.192246 0 192246 1 56455Intragrupos 4 0.491504 0 122876
Total 5 0.68375
Comparación 96 % - 46 %
lntergrupos 1 0.000704 0 0004 0.01965Intragrupos 4 0.143324 0 0358
Total 5 0.144028
- - .
Tabla XIV.- Prueba de varianza ANDEVA bifactorial para amonio y en relación alos cuatro tratamientos alimenticios en el cultivo de postlarvas
FUENTE DEVARIACION
suma de cuadrado F P
g.l. cuadrados medio- - - _ _ _ _ - - . - - - -
INTERVALOS 3 3868.137 1289.37 1 OO885DIETA 2 72064 72 36032 36 28 19288 < 005
ERROR 3 7668394 127806
TOTAL 8 83601.255
- -
Tabla XV.- Datos de cultivo durante la fase PI, hasta PI5. en acuarios bajodiferentes tratamientos alimenticios.
Calamar +Artemia FACIMAR Maximum mejillón
(A) (B) (C) (D)
Densidad inicial (Pl/acuario) 300 300 300 300
Densidad final (Pl/acuario) 260 75 250 38
Sobrevivencia (%) 90 25 8 3 3 1 2 6
Recambio (% por día ) 30 30 30 30
Temperatura promedio (°C) 30 0 29 8 29 5 29. i
Amonio (mg/l) 0 l l 0 IX 0 30 0 25
Fosfato (µg-al-P-PO/I) 2 9 3 25 3 27 3 6
Oxígeno (mg/l) 5.4 5.7 4 7 4 0
Gráfica 1 7 . Concentraciones de amonioy fosfato a l 130 % de recambio al día
Gráfica 1 0 Concentraciones de amonio y fosfato al 96 % de racambio al día.
0 . 8
0 . 7
0 . 6
0 . 5
0.4
0 . 3
0 . 2
0 . 1
0 . 0
..............................
..............................
..............................
............... ..............................
...............
acua 2REPLICAS
m AMONIO m FOSFATO
Gráflca 19. Concentraciones de amonioy fosfnto al 16 % de recambio al d í a
I
1 .
l “.
! *
. . .
I . .
. .
niveles de recambio amonio y fosfato
130% 96% 46%PORCENTAJES DE RECAMBIOIZ amonio m f o s f a t o
Artemia
Gráfica 21.- Sobrevivencia de post-larvas, bajo dlstlntns dietas
R.6
0.4
0.02
O.u
30%
20%._........
10%
0%Fac lmar max ima0 PI 1 ca PI 2 In P1 5
VI. DISCUSION.
6.1 Maduración.
En esta fase de inducción a la reproducción. los niveles promedio
registrados para amonio en los diferentes tratamientos de maduración (0 144.
0 09. 0.323 y 0.234 mg/L respectivamente para los tanques A, 6. C y D). lo cual
se considera dentro del rango acaptable y reportado por Nascimento et al.
(1991), Ellos al trabajaron con diferentes tipos de dietas a base de productos
frescos y peletizados para P. schmíttí, refieren resultados aceptables con valores
dentro de un rango de 0.00 a 0.39 mg/L (promedio de NH4-N de 0 13 mg/L) Estos
autores establecen igualmente concentraciones promedio de nitritos de 0 6 0
mg/L durante este periodo, al respecto, las concentraclones referidas en este
trabajo fueron ligeramente mayores (promedio 0.80 mg/L)
La relación entre los valores promedio y su comparación con respecto a los
valores criticos reportados se presentan en la Tabla XVI. sobre la cual se destaca
que en ningún caso fueron revasados las concentraciones de amonio, fosfato.
nitrito y nitrato reportadas por otros autores.
En relación a las tendencias de los niveles de arnonio y fosfato (Gráficas
1, 2) durante las diez semanas de muestreo en los tanques de experimentación.
se reconoce una posible influencia de las concentraciones iniciales de la fuente
de suministro de agua, como una consecuencia de su comunicación directa con la
Albufera de Bara de Navidad
De acuerdo al análisis estadístico, se reconocen diferencias
significativas (P < 0.05) entre los tratamientos de amonio para los tanques A C.
B-C, B-D y C-D. En el caso de los fosfatos se detectó un efecto similar (‘Tabla VI)
entre las comparaciones A-C, B-D y B-C. Lo anterior pudo ser influido por l a
naturaleza de la dieta, pero principalmente por el incremento de la densidad e n
los tratamientos C y D, lo cual condujo a un mayor aporte de cornpcrestos
metabólicos en relación a los tanques A y B. Al respecto Forster. (1972) citado por
Wickins (1976). reporta para reproductores de P. monodon niveles de
excreción para amonio de 0.10 mg NH4N/g/día a una temperatura de 28°C y 30
% o de salinidad. Sin ernbargo, Wickins (1976). refiere que estos niveles de
excreción son ambiguos debido a otros factores, como la actividad microbiana. y
por lo tanto deben ser tomados sólo como una referencia en cuanto a las
diferencias de aporte de tóxicos para diversas tallas de peneidos.
En relación a la comparación C-D para el caso de amonio, se presentan
diferencias significativas (P< 0.05) en este caso. posiblemente no debidas a la
densidad, sino mas bien a la naturaleza del alimento empleado. La dieta C está
constituida por 50 / 50 porciento de calamar y mejillón congelados, con lo cual
podría representar un mayor aporte de componentes nitrogenados que la dieta LI.
constituida por 50 % de alimento fresco congelado (50/50 mejillón y calamar
congelados) + 50 % de alimento seco suplementado con Artemia spp., si se
considera que el alimento al no ser consumido, activa el proceso de degradación
natural en la que participa activamente la flora microbiana Este efecto, a juzgar-
por la inexistencia de significancia entre las interacciones C-D para fosfato
parece no tener una consecuencia similar al amonio En relación a lo anterior
Noriega (1990) al estudiar la estabilidad de dietas artificiales en peneidos
determina que el proceso de lixiviación promueve la descomposición de las
partículas y por ende la proliferación de bacterias y el incremento e n los niveles
de amonio y nitritos. Alvarez del Castillo (1988) reportà que al ernplear mejillón
fresco congelado, éste se vio sujeto a un efecto de lavado dentro de los tanques
de maduración, debido al volumen y a su temperatura de descongelación, lo cual
actúa mas rápidamente sobre los compuestos esenciales (proteínas, lípidos.
vitamina C) lixiviándolos. Por otro lado, los mejillones congelados son menos
apetitosos (Ablett et al , 1986). y por lo tanto tenderán a permanecer más tiempo
en el agua sin ser ingeridos. contribuyendo ésto al deterioro en la calidad de
agua.
En base a lo anterior y considerando la existencia de diferencias
significativas para amonio al menos en la comparación entre los componentes
alimenticios de los tanques C-D (calamar 50% + mejillón 50% y mejillón 25% 1
calamar 25% + Artemia Resesarch 50% respectivamente) se defiere de los
resultados encontrados por Nascimento et al., (1991) los cuales no reportan
cambios determinantes en los niveles de nitrógeno (amonio. nitrito, nitrato). al
emplear tres diferentes dietas durante la inducción reproductiva de P. schmitti
siendo: 100 % alimento fresco (ostión, gusano poliqueto. camarón entero
calamar), 50/50 % fresco congelado/alimento seco y 100 % alimento seco Sin
embargo se coinside con esta no significancia para las dietas conformadas entre
la comparación A-B (Ranger 50% + Calamar 50% y Ranger + residuo de mejillón
respectivamente).
Tabla XVI.Valores promedio observados y valores críticos referidos para amonio.
fosfato, nitrito y nitrato durante la reproducción y cultivo larvario de P. vannamei
Parámetro
Maduración Larvicultivo
valor promedio valor promediocritico observado critico observado
Amonio (mg/¡) >0.39 0.19 0.95 - 3.83 0 78
Nitrito (mg/l) 0.4 - 2.32 0.80 104.04 0 1 2
Nitrato (mg/l) >37.01 0.12 1.05 1 1 4
1 Nascimento et al (1991).2 Wickins (1976)3 Colt y Armstrong (1981).4 Chen y Chin (1988).5 Muir et al.. (1991).
6.2 Rendimiento Reproductivo.
El número de nauplios producidos por cada tanque de maduración fue en
gran medida superior para las dietas de los tanques C Y D (Tabla VII). en
relación al número de nauplios producidos por desove, estos tanques
presentaron un valor medio superior de 53,933 reportado por Wyban et al
(1988) para P. vannamei (Tabla XVII). Otros indicadores como el porcentaje de
eclosión, huevos/desove son similares a los reportados por este autor, y supera
los obtenidos para esta misma especie por Cham’berlain y Lawrence. (1981a). al
estudiar el efecto de la intensidad de luz y el efecto de la ablación Aquacop.
(1979) determina para reproductores de 30 - 40 g de P. vannamei un rango e n
cuanto al número de huevos de 60,000 - 200,000.
Tabla XVII. Cuadro comparativo del rendimiento reproductivo de P. vannamei. en
relación a datos bibliográficos.
P e s o Densidad Porcentaje deprom. (g) (org/m2) eclosión (%)
P r o m e d i o Naup/des Fuente
huevos/desove
43.8 6.9 15.51 8 . 4 5 . 6 37.94 3 . 1 4.0 49.742.9 4.0 44.5
1 Chamherlain y Lawrence, (1981)2 Wyban et al., (1988)NR = No reportado
6.3 Cultivo Larvario.
El sistema de cultivo utilizado en esta parte, se establece el recambio de
agua a partir del séptimo día de cultivo. Esto conduce a determinar un estado
crítico en la calidad del agua, que se pronuncia más alrededor de este periodo
de tiempo, sobre todo en lo relativo a las concentraciones de amonio y fosfato.
Lo anterior fue un hecho común en todas las réplicas (Gráficas 11 y 12) así
como en los tanques de 3,000 L, aunque en este caso, las concentraciones de
fosfato fueron muy similares con respecto a los días anteriores, los niveles de
amonio fueron inferiores a los acuarios y presentan sus mayores
concentraciones para la etapa M3 (noveno a décimo día de cultivo) como
consecuencia de la falta de recambio. Esto condujo a un desfasamiento de
cerca de dos días, debido a la varianza en cuanto a los estadios presentes. Sin
embargo, para el caso del amonio, la máxima concentración encontrada para
este estadio lar-vario identificado en tanques (0.58 mg/L), fue inferior al nivel
considerado como máximo permisible durante el cultivo larvario de 25 µg-at-N-
NHJI obtenido por Treece, (1985) y a los reportados por Colt y Armstrong
(1981), los cuales refieren índices de 700 - 2800 µg-at-N-NHJL, con efectos
subletales en crustáceos. Chen y Kou (1992), determinaron para P. japonicus
el EC50 con respecto al peso y a la longitud a niveles de 19.88 y 23.86
mg/Lrespectivamente a los 60 dias de cultivo. Además establece la máxima
concentración tóxica aceptable (MATC) para 30 y 50 días con valores de 5 y
menos 5 mg/L respectivamente, en condiciones de 34 %o de salinidad, pH de
8.21, y 25.5 ° C Allan et al., (1990) refiere el nivel de amonio máximo aceptable,
como la concentración capaz de reducir el crecimiento en un 5%, y determinan
un valor para P. monodon de 4.1 mg/L total de N-amonio/L.
Estos datos sin embargo, deben ser solo como una referencia
preliminar, dada la mayor susceptibilidad en los estadios larvales a los cambios
en la calidad de agua (Tait, 1970). Al respecto Jayasankar y Muthu, (1983) y
Chen y Chin (1988), al trabajar bajo condiciones de cultivo intensivo con P.
indicus y P. japonicus respectivamente, reportan mayor sensibilidad a los
nitritos con respecto a los estadíos mas tempranos de metamorfosis.
Los máximos niveles de fosfato (8.5 µg-al-P04-P/I) presentando
igualmente en el séptimo día de cultivo (M3), correspondieron dentro del rango
propuesto por Boyd, (1979), para el cultivo de crustáceos, siendo éste de 5 - 20
µg-at-P-POdL.
Dentro de los estudios relacionados con la influencia del amonio y nitrito
durante el cultivo larvarío, estos parámetros han sido estudiados de manera
independiente por Wickins (1976), Jayasankar y Muthu (1983a) y (1983b), Chen
y Chin (1987), Chin y Chen (1987). Estos dos últimos trabajos mencionan la
concentración letal al 50 % (CL50) para 96-h en P. monodon a niveles de 13.55
mg/L de NO2-N y 1 í.51 mg/L de NH4-N. Dichos valores referidos son muy
superiores a los máximos registros durante el cultivo (2.67 µg N-NO2/I y 1.8 mg/L
amonio, respectivamente).
Los nitritos presentaron valores mínimos al inicio del cultivo, y máximos al
término del mismo en todas las réplicas, registrándose un valor de 2.67 µg-at-
N-NO2/I en los acuarios uno y dos, hacia el doceavo día de cultivo larvario
(Gráfica 13). En general los valores estuvieron sobre niveles muy aceptables,
ya que durante el período de cultivo, los máximos registros fluctuaron sobre 2
µg-at- N-NO2/L correspondiendo a los últimos estadíos. Según Sandifer et al.,
(1989), el valor apropiado en general para larvas de peneídos no debe exceder
0.5 mg/L. Jayasankar y Muthu, (1983), identifican la CL50 para 24 h en P.
indicus para nauplios, zoea, y mysis con valores de 10.23, 20.43, y 33.87 mg/L
N-nitrito respectivamente, y la CL50 en 48 h en zoea con valor de 15.37 mg/L
nitrito-N con salinidades d e 3 3 a 34 %o , p H de 8.12 a 8.17, y temperatura del
agua de 27 a 28 °C
Respecto a los nitratos, las concentraciones máximas registradas fueron
de 0.176 mg/L, lo cual se considera un nivel aceptable si se torna en cuenta el
trabajo reportado por Muir et al., (1991), en el cual se reconoce un efecto tóxico
subletal en un periodo de 40 h a una concentración de 1 mg N03/L en protozoea
de P. monodon, produciendo con ello cambios a nivel ganglionar y muscular.
Chen y Chin (1987), determinaron para postlarvas (PL6), el efecto
combinado de amonio y nitrito, identificando unidades de toxicidad para 48-h,
72-h y 96-h, de 2.20, 1.43 y 0.84, respectivamente, encontrando que ciertos
niveles de ambos parámetros exhiben mayor toxicidad, que las concentraciones
únicas de amonio o nitrito. En el caso de las réplicas tratadas, los índices de
toxicidad máximos fluctuaron sobre 0.15 para el séptimo día de cultivo y
correspondieron a los acuarios 1, 2 y 4.
De acuerdo a los datos de la Tabla XI, se determinaron los factores de
correlación lineal existentes entre la sobrevivencia y la unidad de toxicidad,
destácandose m a y o r correspondencia inversamente proporcional de este
último parámetro sólamente en el acuario 3 (t<0.05), siendo menor en el resto
de las républicas Por otro lado se observan altos valores de correlación inversa
(t<0.05), entre sobrevivencia respecto al nivel de nitritos en todas las réplicas
(r1 = - 0 . 9 3 , r 2 = - 0 . 9 4 , r 4 = -0.99), lo cual conduce a suponer que este
tóxico fue la principal causa que influyó en la mortalidad, aún sin haber exhibido
niveles considerados como subletales o letales, sobre todo en los últimos
estadios larvarios.
La Tabla XVIII presenta la correlación entre las sobrevivencia y niveles
de nitrito promedio en todos los tratamientos durante el periodo de cultivo,
encontrándose cierta relacion inversa sin llegar a ser representativa (t>0.05)
entre ambos parámetros. Asimismo se observa la mayor mortalidad durante los
cuatro primeros días de cultivo (Gráfica 15).
El efecto del nitrito pudo estar asociado al efecto sinergístico entre los
otros tóxicos presentes, así como a cambios en el pH, ya que es reconocido,
que sus decrementos producen un efecto notorio en cuanto a la toxicidad de los
nitritos, debido a que incrementan la porción relativa de ácido nitroso no
ionizado en la solución específica (Colt y Tchobanoglous, 1976; Russo et al.,
1981). Este efecto sinergístico ha sido reportado para el efecto combinado de
amonio y fenol, lo cual exhibe mayor toxicidad que en pruebas por separado de
cada tóxico (Herbert, 1962). Efectos similares son reportados por Herbert y
Vandyke, (1969) para la combinación entre amonio y cobre.
La prueba de comparación propuesta por Scheffé sobre el registro de
interacciones a los diferentes intervalos de muestreo refleja que las variaciones
de amonio entre las interaciones no son representativas, y de importancia
significantiva para el fosfato, nitrato y nitrito. En estos dos últimos las
diferencias son mas destacables entre los días 7 a 9 de cultivo (Tabla XIX).
La correlación entre tóxicos respecto a la sobrevivencia ha sido
estudiada para otras especies en sistemas intensivos de cultivo. Asi
Soderberg et al., (1983), reportan para Salmo gairdneri niveles de correlación
entre amonio y sobrevivencia de r = -0.75. Sin embargo refieren que la
principal causa de mortalidad fue debida al estado de labilidad que promovió la
incidencia de parásitos. Chen et al., (1990), determinaron relaciones de
regresión con factores de correlación de -0.96, -0 98 y -0.98 para nitrito,
amoniaco y amonio, respectivamente. en tratamientos individuales para cada
tóxico con respecto a la CL50.
Resultados similares son reportados por Chen et al., (1986). en cuanto a
la determinación de regresiones negativas en relación a las concentraciones de
ni t r i to y la sobrevivencia durante el cul t ivo de naupl io a post larva.
considerándose este parámetro como de gran importancia en s istemas
intensivos de cultivo de camarón.
Tabla XVIII. Correlación entre los valores promedio de sobrevivencia y nitritodurante el cultivo larvario.
Tabla XIX Registro de comparaciones por día de muestreo en el cultivolarvario en acuarios y su significación para diferentes parámetros.
COMPARACION POR DÍA DE MUESTREO
PARAMETRO 0 - 7 0 - 0 o - 12 7 12 7 - 0 12 - 0
Amónio NS NS NS NS NS NS
Fosfato * * NS
Nitrato * * * NS NS N S
Nitrito * * * * NS N S
6.4. Cultivo de Postlarvas.
En base al análisis estadístico (Tablas XIII y XIV). se desearta la posible
diferencia entre cada uno de los niveles de recambio, en cuanto al amonio y se
acepta en relación al fósforo (P<0.05). De acuerdo a la secuencia de cultivo
propuesta por Acuacop (1977b), para el caso de postlarvas (Tabla III). se
propone un recambio diario de 2/3 sobre el volumen (66 %). a fin de mantener la
calidad de agua en buen estado. Con lo cual según el experimento y
considerando las concentraciones promedio entre los tratamientos al 96 y 46
%. se mantendrían niveles estimados entre 0 46 mg/L de amonio y 1 52 µg-at-
P-PO4/L, estos valores están aún dentro de los rangos recomendados par-a el
cultivo de postlarvas anteriormente citados (Colt y Armstrong. 1981, Boyd.
1979). Sin embargo estas referencias sólo consideran el efecto de un sólo
tóxico. que de acuerdo al trabajo descrito por Chen y chin (1987). puede ser
*
una estimación riesgosa, ya que los diversos compuestos pueden interactuan
ente sí causando algún efecto sobre los organismos, sin necesidad de alcanzar
niveles letales o subtetales.
En el caso de fosfatos sí se aprecian diferencias significativas entre los
diferentes tratamientos (p < 0.05), el análisis de las combinaciones entre cada
uno de los cuatro tratamientos, establece la combinación entre los
tratamientos de 182 con respecto a 46 porciento como la única representativa (P
< 0 05). Este aparente incremento proporcional er la concentración podria ser
explicada si se considera que la solubilidad de los compuestos de fosfato
decrecen con el incremento de pH, y de manera análoga, al bajar el pH como
consecuencia de los aportes orgánicos que prevalecen un mayor tiempo en el
agua, los compuestos fosfatados tienden a incrementar sus formas químicas
solubles (Boyd. 1979). Al respecto se ha reconocido, que el enlace entre el
ácido fosfórico y las moléculas orgánicas se cuenta ente las más fácilmente
hidrolizables l-as fosfatasas son ubicuas y actúvan en variadas condiciones
dentro y fuera de los organismos, en el tubo digestivo de los animales, en sus
excrementos y hasta en el medio, de modo que la liberación de fosfato es muy
rápida, comparado con la liberación de fermentos proteolíticos bacterianos o
animales que conducen a la formación de amonio (Margalef. 1989).
El caso particular del experimento con cuatro diferentes dietas durante
los estadios PI, a PI5 se observa, que aquellas con ingredientes congelados
(tratamientos B1 C y D), tienden a exhibir mayores aportes de amonio Al
respecto se ha reconocido el efecto de la inestabilidad en las dietas ricas en
componentes nitrogenados, en cuanto a su susceptibilidad a la lixiviación y
por ende a su contribución en el aporte de metabolitos tóxicos (Noriega. 1990.
Crepey y Hang-Ching, 1979; Alvarez del Castillo, 1988. todos citados por
Alvarez del Castillo y Cahu, 1989).
Es importante destacar que el comportamiento de los fosfatos fue similar
al presentado durante la inducción a la maduración bajo diferentes tipos de
dietas, en los cuales no se observan notables diferencias con respecto a los
tratamientos empleados. Lo anterior podría sugerir, que en cuanto a fosfato se
refiere por parte de las dietas empleadas para postlarvas. éstas no tienen una
influencia aparente, lo cual fue un hecho para el caso de amonio
Por otro lado, al analizar las correlaciones entre sobrevivencia final de los
tratamientos respecto a las concentraciones promedios de amonio y fosfato
(r= - 0.159 y - 0.779, respectivamente), se reconoce cierto nivel de influencia
inversamente proporcional del fósforo, respecto a la mortalidad de organismos,
no siendo el mismo caso para el amonio, posiblernente debido a que su
concentración estuvo influida por la naturaleza de la dieta. Otros posibles
factores podrían estar relacionados con la capacidad selectiva de los
organismos en cuanto al alimento vivo y con respecto a la talla de la partícula
ingerida, ya que el calamar y mejillón se dosificaban en pequeños trozos,
mientras que el tamaño de las partículas en las dietas B y C fueron
establecidas en relación a la ingestión de reproductores y por lo tanto, de un
tamaño grande en relación con lo reportado por De la Cruz. (1989). El autor
reporta un estudio sobre la selectividad de tamaño de la partícula para
diferentes estadios y concluye que la sobrevivencia durante el cultivo larvario
tiene una relación con respecto a un tamaño apropiado de partícula.
estableciendo para el caso de postlarvas (PL,) un tamaño óptimo de 28 6 y u n
rango de 16.6 - 38.1 micrómetros.
De acuerdo a las anteriores consideraciones. en el siguiente apartado se
referirán las respectivas conclusiones
VII. CONCLUSIONES
7.1 Maduración
l Las variaciones de amonio y fosfato en los diferentes tratamientos alimenticios
para maduración, fueron influidos en primer orden por la densidad en el
confinamiento de reproductores de camáron blanco Penaeus vannamei
detectándose mayores aportes de amonio en tanques operados a mayor
densidad de organismos
l En segundo término influyó la naturaleza de la dieta, determinándose los
mayores aportes de tóxicos en el tratamiento rico en productos congelados
como la dieta 50% Calamar + 50% Mejillón, reconociendo al amonio, como
principal indicador en el proceso de descomposición de dietas congeladas D e
acuerdo a las pruebas de análisis de varianza practicadas para el caso de
fosfatos, se observó que este componente no comparte esta propiedad de
indicador como el amonio
l Las dietas con mejor rendimiento reproductivo fueron las constituidas por
Calamar 50 % con Mejillón 50 % y Calamar 25 % mas Mejillón 25 % mas 50%
Artemia Research. ya que los índices reproductivos corno son fecundidad.
porcentaje de eclosión, nauplios/desove y huevos producidos. fueron de un
nivel muy aceptable con respecto a las demás dietas y otros datos reportados
en trabajos sobre P. vannamei. En el caso particular de la dieta A (Rangen 50
% + Calamar 50 % se registró el mayor número de huevos por desove y la más
alta fecundidad, mas sin embargo el número total de nauplios y los demás
indicadores del rendimiento reproductivo fueron bajos
l En relación a la renovación de agua durante la inducción a la madur-ación en
el presente experimento, se reconoce que un recambio del 200 % diario
favorece las condiciones en cuanto al cultivo. Los principales elementos que
influyeron en el aporte de amonio y fosfatos durante este periodo, fueron la
densidad de confinamiento y la naturaleza de la dieta
l Todos los tipos de dieta empleados a excepción de la dieta r ica e n
componentes frescos (Tanque C). podrían permitir la reproducción e n el nivel de
recambio a niveles inferiores del 200%, lo cual se podría traducir en un ahorro
directo en cuanto a los costos operativos.
7.2 Larvicultivo
l La etapa más crítica en el cultivo larvario con respecto a las concentraciones
de amonio y fosfato está comprendida entre los estadios larvarios Z3 a M1.
mientras que los niveles de nitrito fueron máximos al final del larvicultivo
l E l empleo conjunto de Chaetoceros gracilis y Tetraselmis sp. como
elementos nutritivos durante el larvicultivo. dieron mejores resultados de
sobrevivencia en tanques de cultivo con respecto a acuarios
l Se observó una influencia marcada del nitrito y en menor proporción la unidad
de toxicidad (amonio/nitrito) sobre la sobrevivencia En ningún momento las
concentraciones o índices determinados para los diferentes parámetros
alcanzaron niveles referidos como letales o subletales. se estima además que
las fluctuaciones de pH y el efecto de todos los componentes subtóxicos en
niveles tolerables actuaron en forma sinérgica, incidiendo negativamente sobre
la sobrevivencia larvaria.
7.3 Cultivo de postlarvas
l En relación al cultivo de postlarvas bajo diferentes niveles de recambio. se
detectaron diferencias significativas sólamente entre las concentraciones de
fosfato. Lo anterior fue originado por el incremento proporcional en la
solubilidad de componentes fosfatados como consecuencia de los decrementos
en el pH del medio y además, debido a la capacidad de hidrolización del
fosfato y sus ésteres En lo relativo al amonio se detectaron mayores
concentraciones a menor recambio sin llegar a ser representativo
estadísticamente.
l En el caso del cultivo de postlarvas, las dietas ricas en ingredientes
congelados tienden a modificar negativamente la calidad de agua en relación al
nitrógeno presente.
l El análisis conjunto de los resultados de este experimento muestra un
comportamiento inversamente proporcional entre los niveles de fosfato con
respecto a la sobrevivencia
VIII. RECOMENDACIONES
l Se recomienda efectuar un experimento diseñado especialmente para
determinar una disminución en el recambio de agua empleado en la técnica de
maduración aquí descrita, considerando como única variable el porcentaje de
recambio de agua.
l Para evitar los altos niveles de amonio y fosfato en los estadios lar-varios Z3 a
M1 en el larvicultivo, se sugiere incrementar de manera gradual volúmenes
de cultivo con agua baja en estos iones, dada la dificultad de efectuar
recambios.
l Para el caso de cultivo de postlarvas se considera que se pueden obtener
mejores resultados empleando mayor porcentaje de dietas secas comparadas
con dietas congeladas.
l Se considera que la sobrevivencia de las larvas y postlarvas pudiera ser
influida por la capacidad de los organismos en cuanto a la selectividad del
alimento vivo y Ia preferencia hacia cierta tamaño de partículas para su
ingestión, por lo cual se recomienda efectuar estudios que cuantifiquen estas
posibles relaciones.
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