UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS CARRERA...

UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

MACHALA2017

RAMOS MORALES NAIROBY ELIZABETH RAMOS MORALESMÉDICA VETERINARIA ZOOTECNISTA

DETERMINACIÓN DE PREVALENCIA DE TUBERCULOSIS BOVINA ANIVEL DE HATOS GANADEROS EN LA PARTE BAJA DE LA

PROVINCIA DEL ORO



MACHALA2017


DETERMINACIÓN DE PREVALENCIA DE TUBERCULOSISBOVINA A NIVEL DE HATOS GANADEROS EN LA PARTE BAJA

DE LA PROVINCIA DEL ORO



MACHALA2017


DETERMINACIÓN DE PREVALENCIA DE TUBERCULOSIS BOVINA A NIVEL DEHATOS GANADEROS EN LA PARTE BAJA DE LA PROVINCIA DEL ORO

MACHALA, 11 DE SEPTIEMBRE DE 2017

AGUILAR GALVEZ FERNANDO LENIN

TRABAJO TITULACIÓNTRABAJO EXPERIMENTAL

Urkund Analysis Result Analysed Document: Nayrobi Ramo (Titulación 2017).doc (D30232133)Submitted: 2017-08-24 14:20:00 Submitted By: [email protected] Significance: 5 %

Sources included in the report:

TESIS ESPINOZA.pdf (D15869564) Tesis Prevalencia Tuberculosis Bovina. au..Pedro Paillacho.docx (D15340301) articulo Pruebas de potencia.pdf (D29354551) http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=445748364020 https://www.visavet.es/data/tesis/tuberculosis-bovina-epidemiologia-molecular-implicacion-sanidad-animal-salud-publica.pdf http://ppct.caicyt.gov.ar/index.php/rapa/article/view/2640/2504 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4774856/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5411979/ http://dx.doi.org/10.1186/s12866-016-0816-2 http://www.cfsph.iastate.edu/Factsheets/es/bovine_tuberculosis-es.pdf https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2725547/ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5021836/ http://bictel.ulg.ac.be/ETD-db/collection/available/ULgetd-09152011-224004/unrestricted/ThesisFreddyProano.pdf http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=445748364023 http://revistabionatura.com/files/tuberculosis.pdf http://dspace.udla.edu.ec/bitstream/33000/2808/1/UDLA-EC-TMVZ-2011-12(S).pdf

Instances where selected sources appear:

27

U R K N DU

i

UTMACH



DETERMINACIÓN DE LA PREVALENCIA DE TUBERCULOSIS

BOVINA A NIVEL DE HATOS GANADEROS EN LA PARTE BAJA

DE LA PROVINCIA EL ORO

RAMOS MORALES NAIROBY ELIZABETH

MACHALA

2017

ii

UTMACH



TRABAJO DE TITULACIÓN SOMETIDO A CONSIDERACIÓN DEL HONORABLE

CONSEJO DIRECTIVO DE LA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

COMO REQUISITO PREVIO PARA OPTAR EL GRADO DE

MÉDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

DETERMINACIÓN DE LA PREVALENCIA DE TUBERCULOSIS BOVINA A

NIVEL DE HATOS GANADEROS EN LA PARTE BAJA DE LA PROVINCIA EL

ORO

RAMOS MORALES NAIROBY ELIZABETH

AGUILAR GALVEZ FERNANDO LENIN

MACHALA

2017

v

DEDICATORIA

A Dios, por acompañarme en cada paso de mi vida, por brindarme salud y sabiduría para

lograr cumplir mis objetivos.

A mis padres Marcial Ramos y Nancy Morales, por sus consejos, valores, fuerza, apoyo

absoluto para seguir adelante, y sobre todo por su infinito amor, porque me han enseñado el

camino del bien y ser una mujer con expectativas y a no decaer en la lucha para seguir

cumpliendo mis metas y anhelos,

A mis hermanos: Wilmer, Geovanny y Nixon por su cariño y por ser parte fundamental de

la culminación de esta parte de mi vida.

A mis sobrinos adorados: Arely, Alisson y Neymar por ser mi inspiración en todo

momento.

A mi esposo Rolando Lapo, por estar siempre conmigo apoyándome, ser mi soporte, mi

ejemplo de perseverancia y constancia, por ayudarme a llegar tan lejos, por su amor

desmedido y comprensión que me brinda siempre.

vi

AGRADECIMIENTO

A la UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA, en especial a la UNIDAD

ACADÉMICA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, CARRERA DE MEDICINA

VETERINARIA, por darme la oportunidad de instruirme y haber sobresalido en mis

estudios superiores de una manera satisfactoria.

A mi tutor Dr. Lenin Aguilar, Dr. Oliverio Vargas, Dr. Armando Álvarez, un

agradecimiento sincero por su apoyo incondicional en la realización de la presente

investigación.

A mis padres, y hermanos por ser mi guía, apoyo e importante ayuda en todo momento de

mi vida.

A mi esposo por no perder la confianza en mí, y estar en los momentos difíciles e

impulsarme en cada evento de la vida.

A todas las personas y amigos que me colaboraron para culminar mi trabajo

vii

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA



DETERMINACIÓN DE LA PREVALENCIA DE TUBERCULOSIS

BOVINA A NIVEL DE HATOS GANADEROS EN LA PARTE BAJA

DE LA PROVINCIA EL ORO

Autora: Nairoby Ramos

Tutor: Dr. Lenin Aguilar

RESUMEN

La tuberculosis bovina, es una zoonosis bacteriana, cuyo agente etiológico es el

Mycobacterium bovis que forma parte del complejo Mycobacterium tuberculosis. Afecta al

ganado bovino como principal hospedador, aunque también se lo ha encontrado como

reservorio en animales domésticos, salvajes e incluso en el hombre. Constituye un grave

problema en la salud pública y veterinaria. Por ser una enfermedad de evolución crónica es

difícil diagnosticar clínicamente, siendo necesario utilizar herramientas diagnósticas

complementarias. La presente investigación tuvo como objetivo estimar la presencia de

tuberculosis bovina en la parte baja de la provincia El Oro, utilizando como método de

diagnóstico la prueba tuberculina PPD-bovis, cepa “AN5”. El muestreo se realizó entre el

mes de junio y agosto del 2017, con una población de muestra de 269 bovinos mayores de

2 años provenientes de 9 ganaderías. La investigación es un estudio trasversal, de tipo

observacional y descriptivo. En primer lugar se identificó la zona de estudio, dividiendo a

la provincia en parte baja y parte alta, se tomó en consideración para el muestreo la parte

baja de la provincia constituida por los cantones El Guabo, Machala, Santa Rosa, Arenillas

y Las Lajas, las variables analizadas en la investigación fueron la presencia de la

enfermedad, el sexo, la edad, la procedencia y la raza de los animales. Se utilizó la prueba

viii

de hipersensibilidad retardada, con el método de tuberculinización en el pliegue ano-

caudal; la interpretación de los resultados se basaron en la observación y medición del

grosor del pliegue, realizando dos medidas, la primera medida el día de aplicación y la

segunda medida 72 horas después (día de lectura); se consideraron positivos a los animales

que presentaron tumefacción >5mm, medidos con calibrador o pie rey; a los animales

cuyas medidas de tumefacción estaban entre 3 a 5 mm se consideraron sospechosos; y

negativos animales con medición <3 mm. Los resultados obtenidos en esta investigación,

revelaron que de 269 bovinos muestreados, se obtuvo 0% de animales positivos a

Tuberculosis bovina, es decir que el 100% del total de la población muestreada son

negativos a la enfermedad, estos no presentaron ninguna reacción a la tuberculina durante

el periodo de lectura que demanda la técnica, ni signos clínicos aparentes de enfermedad

durante la examinación. De los 269 bovinos estudiados el 64.3% corresponden a las razas

de cruce Mestizo, Brown Swiss con 19.7%, Holstein con 8.9%, y Brahman con el 7,1%,

representando la raza Mestiza de mayor población muestreada. Así mismo del total de

animales muestreados el 60.6% correspondieron a animales con edades de 2 a 5 años,

seguido de animales con edades 6 a 9 años con el 28,3% y animales de 10 años

representaron el 11,2%. Este estudio demostró que la prevalencia de Tuberculosis Bovina a

nivel de hatos ganaderos en la parte baja de la Provincia de el Oro es del 0%, en vista que

es la primera investigación de este tipo realizada en la Provincia de El Oro no se contó con

incidencias comparativas de la enfermedad, sin embargo investigaciones cercanas a la

Provincia realizadas en los últimos años han demostrado prevalencias relativamente bajas

de la enfermedad. En consideración a la importancia de la Tuberculosis Bovina se

recomienda seguir realizando nuevas investigaciones en el diagnóstico de la enfermedad en

la parte alta de la Provincia de El Oro y la determinación de factores de riesgo para estimar

la presencia real de la enfermedad a nivel de la Provincia y la región.

Palabras Claves: Prueba tuberculina, Zoonosis, Salud; Mycobacterium bovis, Bovino

ix

DETERMINATION OF PREVALENCE OF BOVINE TUBERCULOSIS

AT THE LEVEL OF CATTLE LIVESTOCK IN THE LOWER PART

OF THE PROVINCE EL ORO

ABSTRACT

Bovine tuberculosis is a bacterial zoonosis, the etiological agent of which is

Mycobacterium bovis, which is part of the Mycobacterium tuberculosis complex. It affects

cattle as the main host, although it has also been found as a reservoir in domestic animals,

wild animals and even in man. It is a serious problem in public and veterinary health.

Because it is a chronic disease, it is difficult to diagnose clinically, and it is necessary to

use complementary diagnostic tools. The present study aims to estimate the presence of

bovine tuberculosis in the lower part of El Oro province, using the PPD-bovis tuberculin

test, strain "AN5". Sampling was carried out between June and August 2017, with a sample

population of 269 cattle over 2 years of age from 9 farms. The research is a cross-sectional,

observational and descriptive study. In the first place the study area was identified, dividing

the province in low and high part, the lower part of the Province constituted by the Guabo,

Machala, Santa Rosa, Arenillas and Las Lajas, the variables analyzed in the research were

the presence of disease, sex, age, source and type of production of the animals. The delayed

hypersensitivity test was used with the tuberculinization method in the anus-caudal fold;

The interpretation of the results were based on the observation and measurement of the

thickness of the fold, making two measurements, the first measurement on the day of

application and the second measurement 72 hours later (reading day); Animals with a

swelling of> 5 mm, measured with a caliper or king's foot, were considered positive; To

animals whose swelling measures were between 3 and 5 mm were considered suspects;

And negative animals with measurement <3 mm. The results obtained in this investigation

revealed that of 269 bovines sampled, 0% of the animals were obtained to bovine

Tuberculosis, that is to say that 100% of the total population sampled were negative to the

disease, they did not present any reaction to the Tuberculin during the reading period

required by the technique, or apparent clinical signs of disease during examination. Of the

269 cattle studied, 64.3% corresponded to the cross breeds Mestizo, Brown Swiss with

x

19.7%, Holstein with 8.9%, and Brahman with 7.1%, representing the Mestiza breed with

the largest population sampled. Of the total number of animals sampled, 60.6% were

animals aged 2 to 5 years, followed by animals aged 6 to 9 years with 28.3% and animals

of 10 years represented 11.2%. This study showed that the prevalence of Bovine

Tuberculosis at the level of cattle herds in the lower part of the Province of El Oro is 0%,

since it is the first investigation of this type carried out in the Province of El Oro.

Comparative incidences of the disease for the discussion, however investigations close to

the Province carried out in the last years have shown a relatively low prevalence of the

disease. Considering the importance of Bovine Tuberculosis, it is recommended to continue

carrying out new research in the diagnosis of the disease in the upper part of the Province

of El Oro and the determination of risk factors to estimate the actual presence of the disease

at the level of the disease. Province and region.

Key Words: Tuberculin test, bovine, Zoonoses, Health; Mycobacterium bovis

xi

ÍNDICE DE CONTENIDO

DEDICATORIA iii

AGRADECIMIENTO vi

ÍNDICE DE CUADROS xiii

ÍNDICE DE FIGURAS xiv

I. INTRODUCCIÓN 15

II. REVISIÓN LITERARIA 18

2.1. GENERALIDADES DE LA TUBERCULOSIS 18

2.1.1. DEFINICIÓN 18

2.1.2. ETIOLOGÍA 19

2.1.3. PATOGENIA 19

2.1.4. TRANSMISIÓN 20

2.1.5. SIGNOS CLÍNICOS 22

2.1.5.1. Salud Pública 23

2.1.6. LESIONES POST-MORTEM 23

2.1.7. DIAGNÓSTICO 24

2.1.7.1. Clínico 24

2.1.7.2. Post-Mortem 25

2.1.8. DIAGNÓSTICO INDIRECTO 25

2.1.9. TRATAMIENTO 28

2.1.10. CONTROL Y ERRADICACIÓN 28

2.2. SITUACIÓN DE TUBERCULOSIS BOVINA EN ECUADOR 30

2.2.1. TUBERCULOSIS BOVINA EN SERES HUMANOS 30

xii

2.2.2. TUBERCULOSIS BOVINA EN GANADO BOVINO 30

III. MATERIALES Y MÉTODOS 33

3.1. MATERIALES 33

3.1.1. LOCALIZACIÓN DE ZONA DE ESTUDIO 33

3.1.2. UNIDADES EXPERIMENTALES 34

3.1.3. MATERIALES, EQUIPOS E INSUMOS 34

3.2. METODOLOGÍA 35

3.2.1. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN 35

3.2.2. POBLACIÓN Y MUESTRA 35

3.2.3. MEDICIÓN DE VARIABLES 36

3.2.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO 36

3.2.5.1. Procedimiento de Campo 37

IV. RESULTADO Y DISCUSIÓN 38

4.1. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE TUBERCULOSIS BOVINA EN

ANIMALES MUESTREADOS. 38

4.2. DETERMINACIÓN DE ACUERDO AL LUGAR DE PROCEDENCIA DE LOS

BOVINOS MUESTREADOS 39

4.3. DETERMINACIÓN DE ACUERDO A LA EDAD DE LOS BOVINOS

MUESTREADOS 41

4.4. DETERMINACIÓN DE ACUERDO AL SEXO DE LOS BOVINOS

MUESTREADOS 43

4.5. DETERMINACIÓN DE ACUERDO A LA RAZA DE LOS ANIMALES

MUESTREADOS 44

V. CONCLUSIONES 47

VI. RECOMENDACIONES 48

VII. BIBLIOGRAFÍA 49

ANEXOS 59

xiii

ÍNDICE DE CUADROS

Cuadro 1. Resultados de la presencia de tuberculosis bovina en animales muestreados 38

Cuadro 32. Resultados de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo al lugar de

procedencia 40

Cuadro 3. Resultados de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo al rango de edad 42

Cuadro 4. Resultado de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo al sexo 43

Cuadro 5. Resultado de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo a la raza del animal

45

xiv

ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1.Vías de Transmisión de Tuberculosis bovina 22

Figura 2. Mapa Político de la Parte baja de la Provincia El Oro y población animal 33

Figura 3. Resultados obtenidos de la presencia de tuberculosis bovina en la parte baja de la

provincia El Oro 38

Figura 4. Representación de animales muestreados de acuerdo al lugar de procedencia 40

Figura 5 .Representación de animales muestreados de acuerdo al rango de edad 42

Figura 6. Representación de animales muestreados de acuerdo al sexo 44

Figura 7. Representación de animales muestreados de acuerdo a las principales razas

bovinas 45

15

I. INTRODUCCIÓN

La tuberculosis bovina, es una enfermedad infecciosa, causada por Mycobacterium bovis,

cuyo huésped definitivo es el ganado bovino; también se ha encontrado en otros mamíferos

como reservorios. Por ser una enfermedad de carácter zoonosica, genera grandes retos para

las autoridades públicas, profesionales de la salud humana, médicos veterinarios, y para el

comercio de animales de interés pecuario, causando pérdidas significativas en la producción,

reproducción, y el bienestar animal (1)

Se caracteriza por la presencia de lesiones granulomatosas conocidas como tubérculos,

diseminados en los diferentes órganos y ganglios locales dependiendo de la ruta de entrada,

la virulencia del agente, y la respuesta inmune del huésped (2)

M. bovis, es zoonótico y se transmite al hombre por el consumo de leche cruda o queso

elaborado artesanalmente, en especial en áreas rurales el riesgo es más alto que en la ciudad;

de igual manera por la exposición a las bacterias contenidas en las secreciones y

excreciones de los animales tuberculosos (3)

Existen evidencias de Tuberculosis bovina en el Ecuador, basándose en pruebas

diagnósticas in vivo principalmente la prueba tuberculínica simple o comparada, realizadas

por estudiantes de las diferentes universidades, llegando a ser preocupante en la salud

pública (4)

La producción bovina en el país tiene mucha importancia en las actividades económicas,

más en las poblaciones rurales, ofreciendo productos como carne, leche y sus derivados, en

sustento a la alimentación humana. La presencia de enfermedades infecto-contagiosas en

los rebaños, como Tuberculosis bovina, Brucelosis y entre otras; provoca pérdidas

significativas en la productividad de la finca. Por el conocimiento de los ganaderos de las

medidas de contingencia en el plan nacional, evitan notificar a las autoridades respectivas

por miedo a las pérdidas y limitaciones de la finca en la producción.

16

En el país, esta enfermedad no es considerada de carácter obligatoria, más bien es

participativa por parte de los ganaderos que desean mantener su hato libre de enfermedades

y con certificación para comercializar sus productos; por lo tanto debido a la falta de

vigilancia se desconoce la situación real de prevalencia. La elaboración artesanal de

productos derivados de la leche en algunos casos lo realiza bajo ninguna norma de calidad.

En la actualidad Agrocalidad, tiene un proyecto de control para enfermedades bovinas

como Brucelosis y Tuberculosis; y con el apoyo del sector privado se exponen y elaboran

regímenes, programas y planes para prevenir, controlar o erradicar enfermedades de interés

para la salud pública o la economía del país (5)

Para obtener el Certificado de predios libres de Tuberculosis bovina, el ganadero debe

realizar dos pruebas diagnósticas de tuberculina consecutivas con resultado negativo,

eliminar animales positivos, e implementar medidas de bioseguridad. Las pruebas que

acredita este proyecto son las pruebas de tuberculina PPD bovina cepa “AN5” como prueba

de rutina y la prueba de tuberculina PPD aviar, cepa “AD4” como método confirmatorio en

casos de animales sospechosos. Pruebas distribuidas en el país por el Laboratorio de

Diagnóstico LIVEXLAB (6)

El diagnóstico de tuberculosis bovina, se realiza mediante un examen clínico, aunque en

animales asintomáticos resulta difícil hacerlo, en los camales la inspección post-mortem

depende mucho del médico veterinario, existen otras pruebas confirmatorias; Debido que

en la provincia se desconoce la situación real de la enfermedad, resulta factible diagnosticar

con pruebas tuberculínicas PPD bovina, en especial en el pliegue ano-caudal, como prueba

de rutina, los resultados se obtienen en 72 horas, y la interpretación se basa en la observación

que debe realizarla el mismo operador.

17

OBJETIVO GENERAL

Determinar la Prevalencia de Tuberculosis Bovina, a nivel de hatos ganaderos en la

parte baja de la Provincia El Oro.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Diagnosticar Tuberculosis bovina en los cantones de la parte baja de la provincia El

Oro, mediante el empleo de la prueba tuberculina PPD, en la región ano-caudal.

Valorar la prevalencia de Tuberculosis bovina mediante la correlación de las

variables, sexo, edad, raza y lugar de procedencia.

18

II. REVISIÓN LITERARIA

2.1. GENERALIDADES DE LA TUBERCULOSIS

2.1.1. DEFINICIÓN

La tuberculosis bovina, es una enfermedad infecciosa, de carácter zoonosica, causada por el

agente Mycobacterium bovis (M. bovis), tiene como hospedero principal al ganado vacuno;

aunque también se lo ha encontrado en animales domésticos, salvajes y el hombre. Provoca

deterioro progresivo en la de salud del animal, con problemas respiratorios, digestivos y a

la agonía la muerte (7), logra gran impacto en la salud pública, y pérdidas significativas en

los productores agrarios (8).

Es una enfermedad granulomatosa, cuyos signos patológicos aparecen en el tracto

respiratorio alto, considerando que el contagio se produce especialmente por la vía de la

aerógena, inhalando partículas contenidas con M. bovis, mecanismo beneficiado por los

entornos de manejo como: hacinamiento, uso de comederos, abrevederos y la sala de

ordeña. La segunda vía de contagio es la oral por consumo de pastos y alimentos

contaminados con secreciones que contienes bacilos tuberculosos (9)

Las pérdidas económicas para la industria ganadera, se debe a la baja eficiencia productiva,

y reproductiva de los animales, obteniendo animales con bajo peso, disminución en la

producción láctea hasta un 20% e inclusive mal aspecto de la leche, pérdidas por el

decomiso de las canales sin remuneración; depreciación del valor de la carne debido a los

códigos sanitarios y restricción para el comercio y desprestigio de la finca (10).

Las repercusiones de la tuberculosis bovina, en la salud humana y en los animales, en la

economía y la restricción comercial de productos pecuarios, es una razón principal para que

esta enfermedad sea de notificación obligatoria a la Organización Mundial de Sanidad

Animal (OIE) (11)

19

2.1.2. ETIOLOGÍA

Mycobacterium bovis, agente causal de la tuberculosis bovina, pertenece a la familia

Mycobacteriaceae, género Mycobacterium, que también incluye a M. tuberculosis, M.

microti, M. africanum, M. cannetti, M. pinnipedi y M. caprae (12)

Las micobacterias tuberculosas, son bacilos Gram- positivos, intracelulares, no forman

esporas, resisten a los ácidos, álcalis y muchos desinfectantes químicos; sobreviven en

condiciones aeróbicas, y son de crecimiento lento, perduran varios meses en el suelo o

estiércol bovino, en ambientes húmedos, bajo sombra, protegidos de la luz solar y rayos

ultravioleta (13).

Especies susceptibles

La amenaza de la enfermedad en las diferentes especies de animales susceptibles a M.

bovis, depende de la ruta de exposición, el grado de patogénesis del agente, la dosis y

tiempo de exposición (14)

M. bovis, puede infectar al ganado bovino y otras especies de interés productivo como

porcino, equino, ovino y caprino; especies domésticas, animales de fauna silvestre, especies

en cautiverio, y al ser humano. Esta variedad de géneros actúan como reservorios de M.

bovis, logrando alcanzar una importante zoonosis que provoca riesgos en la salud pública,

siendo relevante en la epidemiología de la tuberculosis bovina (15)

2.1.3. PATOGENIA

La tuberculosis bovina es una enfermedad crónica, con un desarrollo progresivo que tarda

meses e incluso años en manifestarse; las lesiones aparecen en la interacción de los

macrófagos, linfocitos T y la bacteria, donde se forman tubérculos en el foco infeccioso

buscando detener la diseminación de M. bovis en el organismo, si la infección no es

controlada, las lesiones sufren un proceso de necrosis, caseificación y fibrosis (13). Los

nódulos se encuentran en órganos ricos en tejido retículo-endotelial, principalmente en los

pulmones, ganglios linfáticos asociados, en el bazo, y el hígado (16)

20

Al ingresar M. bovis en el organismo, se propaga en dos etapas: el complejo primario y el

complejo secundario. El complejo primario comprende la lesión en el órgano que actúa

como puerta de entrada, y el ganglio linfático local. La diseminación secundaria parte

después del complejo primario, diseminándose en todo el organismo, formando granulomas

hábilmente en cualquier órgano y tejido, creando diversos cuadros patológicos como la

tuberculosis cavitaria, miliar y perlada (17).

El complejo secundario se produce cuando el animal se encuentra inmunosuprimido,

(relación del binomio agente infeccioso- huésped); las lesiones en condición de latencia,

progresan y se diseminan por vía sanguínea, linfática o contacto seroso. A los ocho días

del ingreso de las bacterias, brota el punto primario visible y unas dos semanas después

empieza la calcificación de la lesión (18). Los granulomas, muestran procesos necróticos y

presencia purulenta debido a la lisis de células inflamatorias en el foco; luego la lesión se

encapsula con tejido fibroso que después se calcifica; encapsulando las bacterias para

controlar su propagación (19)

Normalmente el complejo primario se lo halla en los pulmones y ganglio linfático

bronquial, siendo la vía respiratoria la principal ruta de entrada en los bovinos, perros y en

el hombre; en las terneras que ingieren leche con bacilos tuberculosos, es común encontrar

el foco primario en los ganglios faríngeos o mesentéricos y las lesiones secundarias sobre

todo en el hígado (20)

2.1.4. TRANSMISIÓN

La transmisión de M. bovis, depende de varios factores, como la fase de excreción, la ruta

infecciosa, la dosis de infección, el tiempo de transmisión, y la resistencia del huésped

(21). Se trasmite sin depender de la edad, el sexo y por ser de evolución lenta y progresiva,

la presencia de signos clínicos se observa más en animales viejos, convirtiéndose en

portadores asintomáticos y fuente de infección (22)

Las micobacterias son expulsadas del organismo por secreciones respiratorias, calostro,

leche, heces, orines y, en ocasiones por el semen. Las principales rutas de contagio son por

21

inhalación, vía oral o a través de heridas en la piel. Se conoce que Mycobacterium sp. se lo

puede encontrar en el yogurt y queso artesanal elaborado de leche cruda por hasta 14 días,

y es probable verlo hasta por 100 días en la mantequilla (22); el tratamiento térmico o

pasteurización de la leche, logra eliminar la micobacteria y evitar su propagación (23)

En el bovino, la eliminación del bacilo por la vía respiratoria y la inhalación de partículas

infectadas contenidas en la tos es la principal ruta de transmisión de tuberculosis

bovina; considerando como factor de riesgo al hacinamiento de animales, el manejo en la

sala de ordeño y alimentación (24), la vía oral es la segunda ruta de contagio de M. bovis;

se da por el consumo de forraje, pienso y agua contaminada con orines, heces o cualquier

exudado que contengan bacilos tuberculosos. La resistencia del microorganismo, en el

medio ambiente está limitada por los factores climáticos, llegando a sobrevivir por un

tiempo de hasta 6 meses en ambientes óptimos (25).

Investigaciones recientes revelan la presencia de M. bovis en la leche y calostro bovino,

apareciendo como nuevo vehículo transmisor principalmente en los terneros, la infección

de la glándula mamaria no es visible tempranamente, y las bacterias pueden alterar la

apariencia de la leche (26).

En los seres humanos, la principal vía de contagio se da por el consumo de productos

lácteos sin pasteurizar, y se considera un riesgo hipotético el consumo de carne de un animal

enfermo, aunque el peligro se relaciona con el término de cocción de la carne, resultando

en una infección extra- pulmonar como linfadenitis. La elaboración de quesos artesanales,

y yogurt con leche no pasteurizada se considera un riesgo para la salud pública (27). El

contacto directo con animales tuberculosos en la finca o en los camales, es otro factor

importante para la transmisión de M. bovis; originada por la inhalación de las secreciones

respiratorias de animales potencialmente infectados y rara vez ocurren a través de

heridas cutáneas (28).

La tercera vía de contagio es vertical, ocurre de manera congénita de madre-feto en el

útero, a través del cordón umbilical; puede ocurrir hasta en el 1% de las vacas afectadas, no

es común la transmisión por vía genital (7). No obstante, factores como la edad,

22

comportamiento animal, hábitat, y sistema de manejo de los fincas son de importancia en la

cadena de transmisión (29).

Figura 1.Vías de Transmisión de Tuberculosis bovina (Babaahmady, E; 2017)

2.1.5. SIGNOS CLÍNICOS

La presencia de signos clínicos en el huésped dependen de factores relacionados con la

dosis infecciosa, el grado de patogénesis del agente, y la inmunosupresión del animal; por

lo tanto la sintomatología es inespecífica dependiendo de la fase de la enfermedad en la que

se encuentre susceptible (30).

La mayoría de los animales no llegan a presentar signos clínicos en etapas tempranas de la

enfermedad; desarrollan una etapa subclínica con riesgo de reactivación tiempo después, es

frecuente observar cansancio gradual, falta de apetito, debilidad, dificultad al respirar,

ganglios linfáticos agrandados, tos seca y fuerte. Patológicamente la tuberculosis se

caracteriza con la formación de tubérculos de apariencia amarillenta, y fibroso, distribuidos

23

en diferentes órganos y de varios tamaños dependiendo de la evolución de la enfermedad

(31).

En estadios avanzados, la enfermedad afecta mayormente los pulmones, dificultando la

respiración de forma progresiva con secreciones nasales, la tos es continua y dolorosa, que

puede empeorar en la mañana, en el ejercicio o en épocas de frío; se observa el animal

caquéxico, con trastornos en la rumia, presentando diarreas persistentes o constipación,

finalmente el animal llega a un decaimiento grave con agonía prolongada y muere (20).

2.1.5.1. Salud Pública

La infección casada por M. bovis en el hombre, es clínicamente similar a la infección

causada por Mycobacterium tuberculosis, agente causal de la tuberculosis en humanos. En

el hombre, cuando la enfermedad se encuentra en una etapa avanzada y el sistema inmune

deprimido, llega a presentar síntomas febriles, sudoración nocturna, linfadenopatía, fatiga,

tos, inapetencia, ronchas en las extremidades o eritemas (32).

La enfermedad puede afectar los ganglios linfáticos, piel, huesos, articulaciones, sistema

urinario, y dependiendo de la localización se puede presentar una forma de tuberculosis

cutánea, conocida como Lupus Vulgaris. La tuberculosis bovina puede tratarse con terapia

de antibióticos, pero si no hay tratamiento puede resultar grave (33).

2.1.6. LESIONES POST-MORTEM

Los tubérculos se presentan de múltiples tamaños, que pueden no ser perceptibles al ojo

humano, siendo necesario realizar diferentes análisis; se encuentran nódulos en los ganglios

linfáticos, en particular de la cabeza y tórax; también se halla en pulmones, el bazo, hígado,

y superficies de cavidades corporales. Con una inspección minuciosa de la carne se puede

lograr observar lesiones en animales supuestamente sanos, y evitamos el consumo de ganado

enfermo (34).

24

Se observan granulomas con apariencia purulenta, envueltos de capas fibrosas y a veces se

evidencia calcificación en el foco de la lesión; se observa también tubérculos generalizados

en toda la carcasa. Con el examen de seis pares de ganglios linfáticos como retrofaríngeos,

mediastínicos, bronquial, cervical caudal e inguinal superficial, parotídeos; así como

pulmones, y ganglios linfáticos mediastínicos se puede lograr hallar hasta un 95% de

animales infectados (35)

Según Román & Rómulo, (2014) en Ecuador, las investigaciones realizadas por

veterinarios a nivel de camales; reportan que las lesiones causadas por M. bovis se

localizan mayormente en ganglios linfáticos retrofaríngeos, mediastínicos, traqueo-

bronquiales, y hepáticos.

2.1.7. DIAGNÓSTICO

El diagnóstico de tuberculosis bovina, se realiza mediante la sintomatología clínica,

inspección post-mortem, pruebas intradérmicas de tuberculina, y también aislamiento en

cultivos etc. Existen otras pruebas para avalar la confiabilidad del diagnóstico como el

ensayo interferón gamma (IFN- g), prueba serológica de inmuno-absorción enzimática

ELISA, pruebas bacteriológicas y moleculares como PCR (36)

2.1.7.1. Clínico

El diagnóstico clínico de la tuberculosis en campo no es seguro, se debe tomar en cuenta la

historia clínica del animal, la sintomatología y vigilancia sanitaria. Los animales enfermos,

tardan meses en presentar signos específicos de la enfermad; y las lesiones latentes en el

organismo se pueden reavivar en periodos de estrés excesivo, o en la vejez; resultando

difícil establecer un diagnostico presuntivo. A menudo se realiza pruebas rutinarias e

inspección en los mataderos, para un diagnóstico certero (37)

25

2.1.7.2. Post-Mortem

La mejor manera de optimizar la sensibilidad para detectar animales tuberculosos en los

camales, es mediante la capacitación y entrenamiento continuo de los inspectores

veterinarios en los camales (38).

La inspección post-mortem, se realiza para fortalecer el diagnóstico de la tuberculina,

observando la presencia de lesiones frecuentes con Tuberculosis Bovina, principalmente

nódulos linfáticos del tracto respiratorio. Es ideal también realizar diagnóstico presuntivo

con muestras de tejidos; con la histopatología, identificando lesiones no perceptibles al ojo

humano; identificación de los bacilos resistentes a los ácidos, álcalis; mediante tinción

colorante de Ziehl/Neelsen. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ofrece las

ventajas potenciales de sensibilidad, flexibilidad y rapidez (39)

2.1.8. DIAGNÓSTICO INDIRECTO

2.1.8.1. Pruebas Intradérmicas de PPD

El diagnóstico en animales vivos está principalmente basado en la detección de células

específicas que evalúan la respuesta inmune (CMI), del hospedador durante la patogénesis

de la enfermedad logrando revelar infecciones primarias con tres a ocho semanas después

del contacto con M. bovis (40)

Las 3 pruebas de tuberculina que se administran a Bovinos se encuentran; la Prueba Ano-

Caudal de rutina (PAC), con PPD bovina (derivado proteico purificado), elaborada con

Mycobacterium bovis (cepa AN5) de 1mg/ml de concentración; la Prueba Cervical Simple

de saneamiento (PCS), con PPD bovina y la Prueba Cervical Comparada (PCC), con PPD

bovina y el derivado proteico purificado (PPD) aviar elaborada con una cepa de

Mycobacterium avium (cepa D4) de 0,5 mg/ml de concentración (41)

26

Los resultados de investigaciones conocidas indican que la Prueba Ano-Caudal tiene una

sensibilidad de 68-96,8% y una especificidad de 96-98.8%, la Prueba Cervical Simple una

sensibilidad de 80-91% y especificidad de 75,5-96,8% y la Prueba Cervical Comparada

tiene una sensibilidad de 55,1-93,5% y una especificidad de 88,8-100% (42).

En la prueba Cervical Simple, la sensibilidad es superior a la del pliegue ano-caudal, y se

aplica en fincas donde hubo bovinos infectados a M. bovis, y para asegurar la eliminación

de animales sospechosos, se realiza la prueba 60 días después a los mismos animales que

manifestaron en forma dudosa la prueba (43)

La Prueba Cervical Comparada, se utiliza cuando en el hato se manifestó con la prueba

ano- caudal, animales sospechosos en un área libre de tuberculosis”. Se utiliza cuando

existen animales sensibilizados por exposición a otras micobacterias no patógenas y a M.

paratuberculosis ssp. avium (44)

Las ventajas que ofrecen las pruebas tuberculínicas, son su bajo costo, disponibilidad alta y

su larga trayectoria de uso; no obstante presentan limitaciones como la técnica de

aplicación, interpretación de resultados que debe ser por el mismo operador, la necesidad

de realizar una segunda visita para realizar la lectura, y bajo grado de exactitud (45)

a) Prueba Tuberculina Ano-caudal

La tuberculina intradérmica moderna; es un derivado proteínico purificado bovino (PPD-B)

obtenido por tratamiento térmico de crecimiento y lisis de M. bovis, constituye una prueba

de reacción antigénica retardada en un animal expuesto con anterioridad a bacterias de

especies idénticas (46)

A nivel mundial, la cepa de M. bovis AN5 es utilizada para la elaboración de tuberculina

bovina; derivada de la proteína purificada bovina (PPD-B) 20.000UI/ml. La prueba se basa

en la respuesta inmune del huésped a la inyección de 0.1ml de antígeno PPD-B en la dermis

del pliegue caudal de la cola, a 6cm de la base de cola (47). Una ligera hinchazón similar a

una lenteja en el sitio se debe palpar para confirmar la correcta inyección intradérmica, de

27

lo contrario se inyecta en el lado opuesto (48)

La respuesta inflamatoria del huésped al antígeno, demora varias horas en presentarse; por

lo tanto en el bovino la lectura se realiza 72 horas post-inoculación, la resistencia del

huésped se muestra por un aumento en el grosor del pliegue inyectado, la cual es dura al

tacto y aumentada de volumen; el espesor del pliegue cutáneo se mide usando un calibrador

o pie de rey. No obstante la lectura se puede realizar en un periodo de 6 horas antes o 6 horas

después, en relación al tiempo de inyección días atrás (49)

El derivado proteínico purificado bovino no siempre permite la distinción entre bovinos

infectados con M. bovis infecciosos y bovinos no infectados, capaces de responder a

micobacterias ambientales y Mycobacterium avium subsp. Avium o M. avium subsp.

Paratuberculosis (50)

Interpretación de la Lectura

La interpretación se fundamenta en la observación y el aumento del grosor del pliegue; se

considera una reacción positiva, si desarrolló una inflamación de 5 mm o más en el lado

de la inyección en 72 horas, y con presencia de signos clínicos. Una reacción es

sospechosa, si el aumento del grosor del pliegue cutáneo está entre 3 y 4 mm. Y la

reacción es negativa, si el incremento es inferior a 3 mm sin signos clínicos. (51)

Los animales con resultados sospechosos a la prueba intradérmica deberán someterse a otra

prueba tras un intervalo de 42 días (52); mientras que Augusto, Telles, et al (2016), (53)

indica que los animales con resultados no concluyente se examinan 60 días después de la

primera prueba y si el segundo resultado fue inconcluso o positivo, el animal es

considerado positivo.

Esta pausa minúscula para una nueva prueba se realiza para evadir la aparición de

resultados falsos negativos, debido a que la prueba intradérmica consigue disminuir la

veracidad de responder a otras pruebas con resultados fallidos (54)

28

2.1.8.2. Respuesta Inmunológica del huésped a la prueba tuberculina

Los animales en etapas avanzadas de la enfermedad, disminuyen la respuesta inmune

celular e incluso es ausente, indicando resultados falsos negativos a la prueba cutánea; los

factores como desnutrición, debilidad, estrés excesivo, vejez, vacas recién paridas, o en su

último periodo de gestación, no responden a los antígenos inoculados resultando en un

estado de anergia (32); Estas manifestaciones falso negativas, pueden corresponder a que

los animales se infectaron recientemente es decir 18 a 50 días post-infección (55)

El animal puede no responder a los antígenos del PPD si no se respeta el periodo entre la

tuberculinización(56). Debido a que los animales están frecuentemente expuestos a

diversos microorganismos no tuberculosos, pueden producirse reacciones cruzadas con

PPD-B ya que muchos antígenos contenidos se comparten entre micobacterias no

tuberculosas y tuberculosas, consiguiéndose efectos falsos positivos de la prueba (57). La

prueba intradérmica comparativa de la tuberculina se utiliza para distinguir ganado enfermo

con M. bovis y aquellos sensibilizados a la tuberculina bovina por exposición a otras

micobacterias; logrando hacer el diagnóstico más extenso y costoso (58)

2.1.9. TRATAMIENTO

Los animales que presentan la enfermedad muy pocas veces se los tratan, por el tratamiento

es largo y costoso y corre el peligro de contagio, la manera eficaz para evitar o reducir la

transmisión en animales susceptibles del hato es mediante el sacrificio y eliminación de

animales reactores a pruebas diagnósticas y lograr el control y eliminación de tuberculosis

bovina. La pasteurización de la leche de animales infectados es suficiente para matar a las

bacterias e impide que la enfermedad se propague al hombre. La tuberculosis en el ser

humano se trata con antimicrobianos. (59)

2.1.10. CONTROL Y ERRADICACIÓN

Los programas de control y eliminación de tuberculosis bovina en algunos países se basan

en sistemas de vigilancia, utilizando pruebas intradérmicas de tuberculina y posterior un

29

examen post-mortem de las canales afectadas buscando lesiones en los órganos, para un

diagnóstico seguro realizan el aislamiento de M. bovis mediante recolección de muestras de

tejido; con el fin de evitar la propagación de la enfermedad (60)

Para lograr un estricto control de la enfermedad en el país, los profesionales de la salud

animal y humana deben colaborar mutuamente, para conocer la situación real de

tuberculosis; y fortalecer la salud pública, mejorar la economía del país y brindar beneficio

directo a los pequeños productores pecuarios. Las prácticas de cuarentena, los procesos de

desinfección a las instalaciones y equipos también ayudan a mantener el saneamiento de las

fincas (61)

Se logra disminuir la incidencia de tuberculosis bovina en animales y seres humanos con

controles estrictos de bioseguridad, manejo estricto de programas de eliminación de

animales positivos a pruebas diagnósticas; procesos de pasteurización láctea, quesos y

mantequillas elaborados bajo normas de calidad con productos libre de contaminación (62)

Establecer medidas preventivas con programas de saneamiento en las explotaciones

ganaderas con el fin de recudir la infección, es importante además instruir al personal

ganadero y propietarios sobre los riesgos que provocan las enfermedades zoonoticas y las

medidas protectoras que pueden tomar para evitar o reducir la propagación de la

enfermedad en la población humanas y lograr alcanzar el bienestar en los animales

productivos (63)

Existe en el mercado, una vacuna elaborada a partir de la cepa viva atenuada de M. bovis

Bacillus de Calmette-Guérin (BCG); no es común su uso en programas de control en

algunos países endémicos; y es considera incluso ilegal. Esta vacuna se limita por ser de

baja eficacia y porque puede interferir con la reacción cutánea a la prueba tuberculina en el

campo, la ausencia de respuesta inmune a los antígeno de PPD bovina. Se ha demostrado que

la vacuna ejerce una reducción de la carga bacteriana, del número y tamaño de lesiones, evitando

diseminación de la enfermedad. Demostrada su uso en animales salvajes (64)

En Ecuador, no se ha establecido un programa nacional de control estricto de tuberculosis

bovina; para conocer la estimación real de esta enfermedad; se debe implementar de forma

30

obligatoria y no participativa a realizar pruebas diagnósticas y eliminación de animales

reactores. Se puede otorgar incentivos a los pequeños productores por presentar un producto

de calidad, provenientes de animales de ganaderías que estén bajo controles sanitarios

produciendo alimentos inocuos.

2.2. SITUACIÓN DE TUBERCULOSIS BOVINA EN ECUADOR

2.2.1. TUBERCULOSIS BOVINA EN SERES HUMANOS

Según Proaño, Benítez, Portaels et al (2011), (4) en Ecuador, los casos humanos de

tuberculosis detectados en hospitales públicos y privados se informan al Ministerio de Salud

Pública, que es responsable del programa de control de TB humano y proporciona

tratamiento gratuito. En 2009, el Ministerio de Salud Pública reportó 3 317 nuevos casos

de TB pulmonar con microscopia positiva, 584 casos de TB extra-pulmonar y 613 muertes

causadas por la enfermedad en todo el país. Según la Organización Mundial de la Salud

(OMS), Ecuador reportó 4 703 casos de tuberculosis en 2009.

Según Proaño, (2011) (51) en la población humana solamente se registra un estudio en

trabajadores de finca y de camal, encontrándose un 29% de reactores a la prueba del skin

test (tuberculinización), a pesar que esta prueba no es específica para la detección del

complejo M. tuberculosis, se encontró una asociación altamente significativa entre la

positividad al skin test y el consumo de leche cruda. Lastimosamente, en el país no existe un

programa que permita estimar la prevalencia nacional de la Tuberculosis bovina.

2.2.2. TUBERCULOSIS BOVINA EN GANADO BOVINO

En Ecuador, la estimación nacional de tuberculosis bovina es dudosa, debido a la

insuficiente información obtenida sobre investigaciones realizadas en el país mediante el

uso de la prueba intradérmica única y comparativa; manifestado una prevalencia versátil de

tuberculosis bovina en algunas zonas. Al no ser declara como enfermedad de comunicación

31

obligatoria en el país, es difícil obtener datos estadísticos de estimación, y plantear un

programa de vigilancia. (59)

Según Proaño, Benítez, Portaels et al (2011), (4) en un estudio realizado en los cantones

Otavalo, Espejo, El Ángel y Cayambe se reveló una prevalencia de 3.91%. En el cantón

Mejía, se reportó una prevalencia de 7.95% en fincas grandes (más de 70 bovinos), 3.40%

en fincas medianas (25 a 70 bovinos) y en fincas pequeñas (menos de 25 bovinos),

solamente un 0.3% (Proaño-Pérez et al., 2006); En 2008, estudios más recientes en la

misma zona, evidenciaron una prevalencia real de 7.13% en fincas grandes y una tasa de

incidencia anual de 1.7%, una importante región lechera del norte del Ecuador (Proaño-

Pérez et al., 2009)

En sectores de la provincia de Manabí y Santo Domingo de los Tsáchilas, (2013) se

realizaron trabajos de investigación universitaria, para determinar la presencia de

tuberculosis bovina, empleando la prueba tuberculina en el pliegue ano-caudal, inoculando

160 bovinos correspondientes a las zonas norte, sur, este y oeste; mostraron resultados de

prevalencia del 12,86% (65)

Según Román & Rómulo, (2014), en un estudio realizado en el cantón Loja, a través del

test intradérmico simple y en bovinos faenados en camal frigorífico, mediante

baciloscopia con tinción de Zielh Neelsen, obtuvieron positividad del 6.20% con

engrosamiento del pliegue ano caudal, y el 7.20% animales sospechosos. A nivel de camal

encontraron un porcentaje del 17.31% identificando el bacilo tuberculosos. Estos resultados

dan a conocer que la provincia de Loja se evidencia presencia de tuberculosis bovina.

Cuschicondor, (2014) determinó una prevalencia aparente de tuberculosis bovina del

1.52% por inspección veterinaria en el camal municipal del cantón Mejía (Pichincha).

Mientras que Echeverría en el (2011), (66) determinó mediante técnica PCR, prevalencia

aparente de 4.33% y una prevalencia real de 2.51%, en los camales de Cayambe y Pelileo

respectivamente; demostrando alta ocurrencia de tuberculosis en el área estudiada y pone

en evidencia el riesgo que tienen los trabajadores en los mataderos y las personas que

tienen contacto cercano con los animales enfermos.

32

Según Andrade, (2016) (65) estudios realizados en las provincias de Cotopaxi, Carchi e

Imbabura, en base a la prueba de tuberculización ano-caudal, se determinó un 8,47% en

Cotopaxi, 3,57% en Carchi y 4,55% en Imbabura. Identificando factores de riesgo al

tamaño de fincas, altitud, tipo de producción, introducción de otros animales rumiantes y

no rumiantes, densidad poblacional, edad, sexo y si los animales fueron previamente

tuberculizados.

Según Vinueza, (2015) (67) en la provincia de Santo Domingo de los Tsáchilas, en el

cantón el Chambo, determinaron el 0.73% de prevalencia de tuberculosis bovina, de un

total de 136 bovinos, con el análisis de la prueba de tuberculina ano-caudal con el derivado

proteico purificado.

33

III. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. MATERIALES

3.1.1. LOCALIZACIÓN DE ZONA DE ESTUDIO

La presente investigación se realizó en la parte baja de la provincia El Oro, en los cantones

El Guabo, Machala, Santa Rosa, Arenillas y las Lajas. La provincia tiene una extensión de

6.188 Km2, con una población de 643316 habitantes. Limita al norte con las provincias del

Guayas y Azuay, al noroeste con el Golfo de Guayaquil, al sur y al este con la provincia de

Loja y al oeste con el Perú. El clima es cálido con una temperatura media de 25°C

aproximadamente. La parte baja de la provincia El Oro, cuenta con una población bovina

de 67870, de acuerdo a base actual emitida por Agrocalidad (2016).

Figura 2. Mapa Político de la Parte baja de la Provincia El Oro y población animal

Fuente: Elaborado por el Autor

34

3.1.2. UNIDADES EXPERIMENTALES

El estudio de tuberculosis bovina se llevó a cabo con una muestra de 269 animales,

mayores de 2 años, pertenecientes a 9 ganaderías, ubicadas en los cantones El Guabo,

Machala, Santa Rosa, Arenillas y las Lajas de la Provincia El Oro.

3.1.3. MATERIALES, EQUIPOS E INSUMOS

Los materiales que fueron utilizados en el desarrollo del presente trabajo se exponen a

continuación:

Materiales de campo

Botas de caucho

Mandil

Sogas

Jeringuillas

Guantes

Gorra

Materiales de oficina

Registros

Esferográfico

Calculadora

Equipos

Calibrador

Cooler

Gel refrigerante

Computadora

Cámara fotográfica

Marcador en barra

35

Insumos

Prueba tuberculina PPD-bovis cepa AN5

Algodón hidrófilo.

Alcohol

3.2. METODOLOGÍA

3.2.1. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN

La presente investigación es un estudio de tipo transversal, en la cual se obtuvieron datos

de prevalencia aparente, no se utilizó un diseño experimental estricto puesto que no hubo

tratamientos, se trató de un estudio de tipo observacional de carácter descriptivo.

Se estimó la presencia de tuberculosis bovina utilizando la técnica de tuberculinización,

mediante la prueba tuberculínica PPD-bovis (proteína purificada bovina) cepa “AN5”,

aplicada en el pliegue ano caudal de los bovinos.

3.2.2. POBLACIÓN Y MUESTRA

El número de muestra fue calculado a partir de la población de 67870 bovinos, de la parte

baja de la provincia, obtenidos de la Matriz C.U.V EL ORO, (Agrocalidad 2017); de donde

se determinó una muestra de 269 animales para estimar la prevalencia, calculados con la

fórmula correspondiente con un intervalo de confianza del 90% y estimación de error del

5%.

Cálculo del tamaño de la muestra:

Se calculó mediante la siguiente fórmula

36

Donde:

n= Tamaño de la muestra

z= Nivel de confianza deseado

p= Proporción de la población con la característica deseada (éxito)

q= Proporción de la población sin la característica deseada (fracaso)

e= Nivel de error dispuesto a cometer

N= Tamaño de la población

3.2.3. MEDICIÓN DE VARIABLES

Se analizaron las siguientes variables:

Animales positivos

Edad

Sexo

Lugar de procedencia

Raza

3.2.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Los datos adquiridos fueron incorporados en una base de datos en el programa Excel. Se

realizó análisis de Frecuencia de las variables analizadas, no se aplicó tabla de contingencia

en vista que los resultados fueron negativos.

3.2.5. PROCEDIMIENTO DE LA INVESTIGACIÓN

En la presente investigación se realizó el estudio de tuberculosis bovina en 9 ganaderías

pertenecientes a los cantones El Guabo, Machala, Santa Rosa, Arenillas y Las Lajas; fueron

muestreados 269 animales mayores de 2 años, hembras y machos sin excepción de raza.

Para el diagnóstico de tuberculosis se utilizó la prueba tuberculina (PPD) bovis cepa

“AN5”, dosificando 0.1 ml en el pliegue ano caudal y realizando la lectura 72 horas post-

aplicación.

37

3.2.5.1. Procedimiento de Campo

Primero se procedió a la contención de los animales objeto de estudio, sea en la manga de

manejo o sujeción animal; luego se procedió a identificar cada animal, sea por arete, tatuaje

en la piel o nombres dispuestos por los vaqueros.

3.2.5.2. Prueba Intradérmica Tuberculina

Se realizó dos medidas del pliegue ano-caudal del bovino; la primera medición se realizó

antes de inyectar la tuberculina y la segunda se realizó el día de la lectura. Antes de

inyectar se examina el pliegue caudal, observando que no presente ninguna alteración o

anormalidad que pueda alterar la lectura.

Se midió con calibrador el grosor del pliegue ano caudal que se va inyectar, luego se

procedió a limpiar la zona indicada con una torunda de algodón con alcohol, se inyectó en

el pliegue externo de forma dérmica 0.1ml de PPD bovis cepa “AN5”; usando jeringa

desechable de insulina. Para saber que se administró correctamente, se observó y palpó una

pápula pequeña en el sitio inyectado.

Se realizó la segunda visita a la ganadería, después de 72 horas (+- 6 horas) para realizar la

respectiva lectura; la interpretación se basó en la observación y la medición obtenida del

mismo pliegue caudal en el que se inyectó, teniendo en cuenta los siguientes parámetros

referenciales:

Resultado Medida (mm) Signos clínicos

Negativo < 3 NO

Dudoso > 3 y < 5 NO

Positivo > 5 SI

Fuente: Elaborado por el Autor

Con los datos obtenidos de las dos lecturas realizadas y mediante la observación del

pliegue caudal del bovino, se realiza el análisis que nos mostraron la situación de esta

enfermedad es estos cantones.

38

IV. RESULTADO Y DISCUSIÓN

La investigación de la Presencia de tuberculosis bovina en los cantones de la parte baja de

la provincia El Oro, determinaron los siguientes resultados:

4.1. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE TUBERCULOSIS BOVINA

EN ANIMALES MUESTREADOS.

Del total de 269 bovinos muestreados, sometidos a la prueba tuberculina PPD bovis, se

obtuvieron resultados 100% Negativos a tuberculosis bovina, sin reacción alguna a la

inyección intradérmica de tuberculina ni presencia de signos clínicos, como se lo muestra

en el cuadro 1 y se representa en la figura 3.

Cuadro 1. Resultados de la presencia de tuberculosis bovina en animales muestreados

Resultados obtenidos Número de muestras %

Positivos 0 0

Negativos 269 100

Total 284 100

Fuente: Elaborado por el autor

Figura 3. Resultados obtenidos de la presencia de tuberculosis bovina en la parte baja de la

provincia El Oro

39

Los resultados obtenidos en la investigación demostraron que la prevalencia de

Tuberculosis bovina, en los cantones de la parte baja de la provincia El Oro es del 0%,

mostrando que del total de la población el 100% son Negativos, sin reacción de

hipersensibilidad a la prueba tuberculina en el pliegue ano-caudal; en vista que es la

primera investigación de este tipo realizada en la Provincia, no se contó con incidencias

comparativas de la enfermedad; sin embargo investigaciones realizadas en los camales de

Pasaje, Machala, y Santa Rosa en el año 2003, mediante observaciones de lesiones

macroscópicas, revelaron 0% casos de positividad (Torres 2003; Jaramillo, 2003; Valarezo

Kleber, 2003). Estudios cercanos a la Provincia realizadas en los últimos años han

demostrado prevalencias relativamente bajas de la enfermedad; como lo indican los autores

Román & Rómulo, en (2014) (19) encontrando positividad del 6.16% a la prueba SIIT y

casos sospechosos con el 7.28% en el cantón Loja; en comparación con la publicación de

Lourdes, (2012), (68) en el cantón Riobamba en las comunidades de Molobog y Estación

Tunshi Politécnica, arrojaron 2 casos positivos total, correspondiendo el 3.17% y 7.69%,

utilizando el mismo método de tuberculinización; estimando bajo nivel de prevalencia.

Según Andrade, (2016) en la provincia de Santo Domingo de los Tsáchilas, la prevalencia

de tuberculosis bovina obtenida a través de la prueba de la intradermorreacción fue del 0%,

sin embargo encontraron 15 resultados sospechosos en la parroquia Alluriquín;

descartándolas como positivos mediante la inoculación de la prueba tuberculina bovina y

aviar en la tabla del cuello, después de 60 días de la primera tuberculina. Los autores

Basantes & Maldonado; (2013) (69) manifiestan que la prueba ano-caudal demuestra ser

útil y simple de utilizar para un estudio inicial de tuberculosis bovina, sin embargo la

sensibilidad y especificidad pueden ser alteradas presentando falsos positivos y negativos.

4.2. DETERMINACIÓN DE ACUERDO AL LUGAR DE PROCEDENCIA DE

LOS BOVINOS MUESTREADOS

En el cuadro 2, se presenta el número de animales muestreados de acuerdo al cantón de

procedencia y sus respectivos porcentajes, como lo podemos observar en la figura 4.

40

Cuadro 2. Resultados de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo al lugar de procedencia

LUGAR DE PROCEDENCIA

Cantones Muestra % Resultados

Positivo Negativo

El Guabo 78 29,0 0 % 100%

Machala 49 18,2 0% 100%

Santa Rosa 73 27,1 0% 100%

Arenillas 57 21,2 0% 100%

Las Lajas 12 4,5 0% 100%

Total 269 100,0 0% 100%


Figura 4. Representación de animales muestreados de acuerdo al lugar de procedencia


41

En el estudio de tuberculosis bovina, empleando la prueba de tuberculina PPD-bovis en los

diferentes cantones, demostró un resultado del 0%, total de la muestra de 269 bovinos; en

comparación con la investigación realizada por Coba, (2015) (67) donde obtuvo una

prevalencia de 0.73%, de una población de 136 bovinos muestreados, y el 99.27% es

negativa a la prevalencia de tuberculosis, en la hacienda Pucate, en la provincia

Chimborazo, siendo este resultado superior a la investigación realizada, además manifiesta

que el Mycobacterium tuberculoso en los bovinos es difícil diagnosticar por su

aparecimiento esporádico, en determinados periodos de tiempo. El autor Cuschicondor,

(2014) (70) en su estudio no encontró asociación de la procedencia con la presencia de

Mycobacterium bovis, a pesar de haber una mayor prevalencia en el cantón Mejía por ser

un cantón con enfermedad endémica.

En la actualidad en la parte baja de la provincia, no hay evidencia de tuberculosis bovina,

utilizando el método de tuberculina, puede estar relacionada a que los cantones de la

provincia, no están cerca de algún área endémico, o el clima cálido ayuda a la no

sobrevivencia del M. bovis; algunos estudios indican que en ciertas regiones sería más alto

que en otras; fundamentado en que algunas zonas la explotación animal es más intensiva y

al aumentar la concentración animal se favorece el contagio del bacilo y con ello aumenta

su incidencia y prevalencia; como lo podemos notar en las zonas lecheras de la sierra del

Ecuador, posiblemente porque M. bovis de acuerdo a las condiciones climáticas puede

permanecer en el ambiente por un determinado periodo de tiempo

4.3. DETERMINACIÓN DE ACUERDO A LA EDAD DE LOS BOVINOS

MUESTREADOS

En el cuadro 3; se puede observar que de 269 bovinos muestreados total con la prueba

tuberculina en el pliegue ano-caudal, el 60,6% representa animales de 2 a 5 años con una

población de 163 animales; el 28.3 % representa animales entre 6 a 9 años; y se apreció con

el 11.2% animales de 10 años en adelante así como se representa en la figura 5.

42

Cuadro 3. Resultados de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo al rangos de edades

RANGO DE EDAD

Muestra % Resultado

Positivo Negativo

2 a 5 años 163 60,6 0 % 100 %

6 a 9 años 76 28,3 0 % 100 %

10 años y

mas

30 11,2 0 % 100 %

Total 269 100,0 0 % 100,0 %


Figura 5 .Representación de animales muestreados de acuerdo al rango de edad Fuente: Elaborado por el autor

De los resultados obtenidos, en la población de 269 animales del total muestreados, el

100% dieron negativos; sin constatar que la edad sea un riesgo para contraer tuberculosis

bovina; según Román & Rómulo, (2014) (19) en Loja obtuvieron resultados positivos con

43

la PPD bovis, reaccionando animales con edades entre 2 y 12 años, promedio 6,27 ± 2,14

años; mientras tanto en la investigación no se puede estimar ninguna relación de edades,

pero si observamos mayor población animal de 2 a 9 años. En un estudio demostrado por

Basante & Maldonado en (2013), (69) en 3 provincias de Cotopaxi, Carchi e Imbabura;

indicaron que la edad aumenta el riesgo de la enfermedad en animales adultos debido a que

tienen mayor tiempo de exposición al Mycobacterium en el medio ambiente. La

investigación ejecutada por Herrera, (2011) (71) obtuvo animales que reaccionaron a la

tuberculina en animales menores de 3 años, con una prevalencia del 20%, confirmando que

esta enfermedad está presente en todas las edades. Según Cuschicondor, (70) en la

investigación que realizó en el 2014 en Pichincha, indica que la edad por sí sola no es una

característica que se asocia directamente a la enfermedad, debido a que la edad no influyó

en la probabilidad de tener resultado positivo a inspección post-mortem.

4.4. DETERMINACIÓN DE ACUERDO AL SEXO DE LOS BOVINOS

MUESTREADOS

De los animales evaluados en los diferentes cantones de la parte baja El Oro, en función del

sexo del animal, se estableció que del total de la población de 269 animales muestreados,

245 fueron hembras con el 91.1% y el 8.9% responde a machos. Como se muestra en el

cuadro 4 y Figura 6.

Cuadro 4. Resultado de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo al sexo

SEXO DEL GANADO

Muestra % Resultados

Positivos Negativos

Hembra 245 91,1 0 % 100 %

Macho 24 8,9 0 % 100 %

Total 269 100,0 0 % 100,0 %

44

Figura 6. Representación de animales muestreados de acuerdo al sexo


En el total de los animales muestreados, en la parte baja de la provincia, se obtuvo que de

los 269 bovinos, todos fueron Negativos, representando el 100%; se encontró mayor

población de hembras con el 91% en los hatos lecheros, debido que la disposición de

machos, en un cargo adicional, y algunos solo mantienen al reproductor; en comparación

con la investigación realizada por Cuchicóndor (2013) (70) en el cantón Mejía demostró

que el 75% de una población de 395, fueron hembras, pero no influyó en la presencia de la

enfermedad, aunque manifiesta que las hembras están en mayor riesgo posiblemente por la

práctica de manejo que es diferente, principalmente en vacas lecheras de alta producción.

Según Flores, (2012) los factores de riesgo de transmisión y el desarrollo de la enfermedad

están asociados a las explotaciones lecheras que a los rebaños de carne, debido a la

condiciones intensivas de manejo y a las mayores exigencias productivas sobre los

animales.

4.5. DETERMINACIÓN DE ACUERDO A LA RAZA DE LOS ANIMALES

MUESTREADOS

Del total de 269 bovinos muestreados, se apreció a la raza Mestiza con el 62.3%

representando mayor población en las ganaderías; seguida de la raza Brown Swiss, con el

45

53%, la raza Holstein con el 8.9% y no menos importante la raza Brahaman co el 7.1%;

como se indica en el cuadro 5 y en la respectiva figura 7

Cuadro 5. Resultado de la presencia de tuberculosis bovina de acuerdo a la raza del animal

RAZA DE BOVINOS

Muestra %

Resultados

Positivos Negativos

Mestizas 173 64,3 0% 100 %

Brown Swiss 53 19,7 0% 100%

Holstein-F 24 8,9 0% 100%

Brahman 19 7,1 0% 100%

Total 269 100,0 100,0 % 100.0%


Figura 7. Representación de animales muestreados de acuerdo a las principales razas bovinas


46

En el estudio, se deduce que la raza mestiza es la que mayor población cuentan los

cantones respectivos de la parte baja de El Oro, estimando una prevalencia del 0%, con un

total del 100% de animales negativos. La raza Mestiza y Brown Swiss, ocupan el 64.3% y

19.7% de población debido a que el clima es apto para tener mayor producción láctea en

comparación con las razas Holstein catalogadas como lecheras, ocupan el tercer lugar con

el 8.9%, debido a que esta raza, en climas templados son la raza más productora de leche.

Rómulo & Román en (2014), (19) deduce que el 72.80% de sus animales inoculados

correspondían a la raza Holstein Friesian, con casos positivos.

47

V. CONCLUSIONES

El Índice de Prevalencia de Tuberculosis bovina a nivel de hatos ganaderos en la

parte baja de la provincia El Oro es del 0%.

Los resultados relacionados con las variables edad, raza y sexo, muestran que el

promedio de los animales que participaron en el presente diagnóstico fueron

hembras reproductoras en producción de leche, mestizas y del grupo etario de 2 a 5

años.

48

VI. RECOMENDACIONES

Cumplir con la prueba tuberculina (PPD) bovina cada seis meses, como plan de

lucha y control según el programa nacional de tuberculosis y brucelosis bovina

contemplado por AGROCALIDAD.

Realizar investigaciones de tuberculosis bovina en la parte alta de la provincia El

Oro.

Con el propósito de controlar la tuberculosis se debe mejorar la bioseguridad en las

haciendas, capacitando al personal sobre la importancia zoonótica de la

enfermedad, y aconsejar la pasteurizar de la leche para consumo humano.

49

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69. Basante Qivq, Maldonado Cjd. “Análisis De Factores De Riesgo Y Determinación

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12%28s%29.Pdf

59

ANEXOS

60

Anexo 1. Materiales utilizados en el estudio de tuberculosis bovina

Anexo 2. Tuberculina PPD-bovis cepa AN5 como método de diagnóstico

61

Anexo 3. Primera lectura antes de aplicar tuberculina PPD-bovis

Anexo 4. Inyección Intradérmica de tuberculina PPD-bovis en el pliegue ano-caudal

62

Anexo 5. Observación de la reacción a la tuberculina PPD en el pliegue ano caudal

Anexo 6. Lectura de la reacción a tuberculina PPD en el pliegue ano caudal utilizando un

calibrador

63

Anexo 7. Registro de las lecturas realizadas

Anexo 8. Ganadería del sector de Arenillas

64

Anexo 9. Ganadería del sector de Santa Rosa

Anexo 10. Ganadería del sector de Machala

65

Anexo 11. Ganadería del sector de Las Lajas

Anexo 12. Ganadería del Sector El Guabo

66

Anexo 13. REGISTRO DE CAMPO

Nombre de la Ganadería: Fecha Inicial:

Nombre del Propietario: Fecha Final:

Código Identificación animal Edad

(años)

Raza Sexo 1ra Lectura

(mm)

2da Lectura

(mm)

Diferencia Resultado Observación

H M N S P

67

Anexo 14. TUBERCULINIZACIÓN EN BOVINOS DE LA PARTE BAJA DE LA PROVINCIA EL ORO

TABULACIÓN DE ANIMALES MUESTREADOS

CÓDIGO RESULTADO MEDICIÓN GANADERIAS CANTONES EDAD SEXO RAZA SIGNOS

CLÍNICOS

N 1 día 72 h después

1 * 7.24 7.24 "Santa Inés" Machala 4 H Mestizas NO




5 * 8,80 8,80 "Santa Inés" Machala 4 H Mestizas NO













18 * 7,35 8.70 "Santa Inés" Machala 4 H Mestizas NO


20 * 7.37 7,88 "Santa Inés" Machala 4 H Mestizas NO


22 * 5,33 5,36 Pomarosa Machala 5 H Brown swiss NO

23 * 5,41 5,47 Pomarosa Machala 4 H Brown swiss NO

24 * 7,35 7,65 Pomarosa Machala 4 H Mestizas NO

25 * 5,47 5,47 Pomarosa Machala 6 H Brown Swiss NO

68


27 * 6,26 6,26 Pomarosa Machala 4 H Brown Swiss Delgada



30 * 6,96 7 Pomarosa Machala 3 H Brown Swiss NO











41 * 5,49 5,4 Pomarosa Machala 3 H Holstein NO

42 * 5,7 5,6 Pomarosa Machala 6 H Holstein NO








50 * 7 7,42 "Pagua" Guabo 4 H Mestizas NO

51 * 10,91 10,91 "Pagua" Guabo 5 H Mestizas NO





69
























79 * 6,22 6,36 "Pagua" Guabo 6 H Holstein NO




83 * 8,69 9,9 "Pagua" Guabo 5 H Brown Swiss NO

84 * 10 10 "Pagua" Guabo 6 H Mestizas NO


70



88 * 7.86 7.86 "Pagua" Guabo 6 H Holstein NO

89 * 6.92 6.92 "Pagua" Guabo 3 H Mestizas NO











100 * 7,04 6.78 "Pagua" Guabo 3 H Mestizas NO

101 * 7.50 7,04 "Pagua" Guabo 3 H Mestizas NO















71







122 * 5.95 6.00 "Pagua" Guabo 2 M Brahman NO

123 * 8.79 8.13 "Pagua" Guabo 3 M Holstein NO



126 * 7.29 7.29 "Pagua" Guabo 4 M Brown Swiss NO


128 * 7.40 7.40 Ludeña Santa Rosa 4 H Mestizas NO









137 * 10.66 12 Ludeña Santa Rosa 3 H Mestizas NO






143 * 8.7 9.35 Las Lomas Santa Rosa 9 H Mestizas NO



72







152 * 8.71 8.04 Las Lomas Santa Rosa 4 H Mestizas Delgada

153 * 8.00 5.73 Las Lomas Santa Rosa 5 H Mestizas Delgada
















169 * 7.80 7.80 El Cubano Santa Rosa 10 H Mestizas NO





174 * 8.0 8.0 El Cubano Santa Rosa 2.5 H Mestizas NO


73




179 ± 0.68 7.61 8.29 El Cubano Santa Rosa 6 H Mestizas NO



182 ± 2.63 5.41 8.07 El Cubano Santa Rosa 7 H Mestizas Delgada


184 * 7.70 7.70 El Cubano Santa Rosa 6 H Mestizas Delgada

185 * 7.26 7.26 El Cubano Santa Rosa 5 H Brown Swiss Delgada

186 * 5.53 5.53 El Cubano Santa Rosa 7 H Mestizas Delgada


188 * 7.60 7.60 El Cubano Santa Rosa 7 H Holstein NO

189 * 7.14 7.14 El Cubano Santa Rosa 5 H Holstein NO




193 ± 2.70 7.69 10.84 El Cubano Santa Rosa 8 H Mestizas Delgada



196 * 5.53 6.26 El Cubano Santa Rosa 2 M Brown Swiss NO

197 * 6.8 6.8 El Cubano Santa Rosa 3 M Brahman NO

198 * 8.30 8.41 El Cubano Santa Rosa 2 M Brahman NO



201 * 5.94 5.94 Hernán Soto Las Lajas 5 H Holstein NO



204 * 5.12 5.12 Hernán Soto Las Lajas 4 H Brown Swiss NO


74





210 * 5.20 5.20 Hernán Soto Las Lajas 5 H Brown Swiss NO

211 * 5.40 5.66 Hernán Soto Las Lajas 2 M Brown Swiss NO

212 * 6.08 6.08 Hernán Soto Las Lajas 2 M Brown Swiss NO

213 * 5.38 6,3 Araujo Arenillas 7 H Brahman NO

214 * 4.12 5,1 Araujo Arenillas 9 H Brown Swiss NO

215 * 6.71 7,1 Araujo Arenillas 11 H Mestiza NO

216 * 5,09 6,2 Araujo Arenillas 15 H Brown Swiss NO

217 * 6.37 6,4 Araujo Arenillas 6 H Brahman NO

218 * 8.40 9 Araujo Arenillas 5 H Brown Swiss NO


220 * 5.59 6,2 Araujo Arenillas 7 H Brahman Delgada

221 * 4.16 5,2 Araujo Arenillas 11 H Mestiza Delgada



224 * 6.58 7 Araujo Arenillas 14 H Brahman NO






230 * 4.41 6,2 Araujo Arenillas 8 H Brown Swiss NO


232 * 4.81 4,5 Araujo Arenillas 2 H Holstein NO

233 * 5.24 6,3 Araujo Arenillas 2,5 H Mestiza NO

234 * 4,07 5,3 Araujo Arenillas 2,5 H Mestiza NO

235 * 4.29 4,07 Araujo Arenillas 2,5 H Mestiza Delgada

75





240 * 4.40 4.40 Araujo Arenillas 4 H Mestiza NO


242 * 8.7 9.35 Araujo Arenillas 2 M Brahman NO

243 * 6.27 7.01 Araujo Arenillas 4 M Holstein Caquéxica

244 * 9.15 5.07 Araujo Arenillas 5 M Brown Swiss NO





249 * 3.75 4.25 El Toro Arenillas 7 H Brown Swiss NO





254 * 2.79 3.75 El Toro Arenillas 4 H Brahman NO


256 * 3.98 4.06 El Toro Arenillas 4 H Holstein NO










76

266 * 3.98 3.98 El Toro Arenillas 2 M Brown Swiss NO




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