TRANSFERENCIA EMBRIONARIA

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TEMA: “Transferencia Embrionaria en bovinos y bufalinos”

Corrientes, abril de 2011

TUTOR: Dr. Maldonado Vargas, PabloINTEGRANTES: Auvieux Arias, Gabriel I.Pujol, Franco S.Serrano, Walter O.

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INTRODUCCION

El presente trabajo se refiere, al uso de la biotecnología en la ganadería (bovina y bubalina), área que presenta un gran potencial para el avance de la producción agropecuaria. Estos avances, relacionados a la reproducción animal han beneficiado a la productividad potencial del rodeo. La transferencia embrionaria es la técnica más utilizada para reproducir los animales de alto valor genético.

El objetivo principal de los tratamientos de superovulación es producir un gran número de ovulaciones y obtener el máximo de embriones transferibles que resulten en una alta probabilidad de preñes. Sin embargo la respuesta a estos tratamientos es muy variable y difícil de predecir, especialmente cuando se analiza su implementación en la especia bubalina.

La respuesta superovulatoria y la producción de embriones viables es el resultado de un gran número de factores entre los que se encuentran: factores relacionados al tratamiento superovulatorios, individuales y relacionados con el ambiente.

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ANATOMIA REPRODUCTIVA

Ovarios

Cuerpo Lúteo

Folículos

Trompas Cuernos U.

Cuerpo U.

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OVARIOS

JAFARABADI (J)MURRAH (M)BOVINO (B)

DERECHO IZQUIEDO Largo (cm) ancho (cm) alto(cm) peso(g) largo ancho alto peso(g)

J 3,12 1,49 1,19 4,01 3,13 1,44 1,15 3,87 M 2,91 1,39 1,17 3,81 2,87 1,37 1,13 3,66B 4,5 2,5 2,0 20 3,5 2,0 2,0 15

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(Tonizza de Carvalho, N. 2010)

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Ciclo EstralCiclo Estral

FAO 1991

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Gestación y Vida ÚtilGestación y Vida Útil

La gestación en la vaca es de 285 ± 5 días y en la búfala va de 300 (Murrah) a

330 (Jafarabadi).La vida útil de una vaca es de

aproximadamente de 10 años y la de las búfalas de 18 - 20 años.

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Técnica

Embriones son colectados hembra donante

Transferidos hembra receptora madre sustituta

• Gonadotrofinas • Inducir superovulación en la donante • Sincronizar las futuras receptoras para que estén en celo y ovulen al mismo tiempo que las donantes

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Selección de DonantesSelección de Donantes

IDENTIFICACION

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• Mérito genético • Rendimiento reproductivo.• Buena condición corporal • Libre de enfermedades• Evaluar el período postparto • Ciclando con regularidad.

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Selección de DonantesSelección de Donantes

(Tonizza de Carvalho, N. 2010)

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Selección de DonantesSelección de Donantes Evaluación por examen rectal: del cuello uterino, el

útero y los ovarios para determinar adherencias u otras lesiones palpables.

(Tonizza de Carvalho, N. 2010)

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SUPEROVULACIONSUPEROVULACION Producción de un número mayor de lo habitual de ovocitos,

generalmente resultante de la administración de gonadotrofinas exógenas para procedimientos de fecundación asistida

Ovario superovulado con presencia de CL. (Tonizza de Carvalho, N. 2010).

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Tipos de gonadotrofinas utilizadasTipos de gonadotrofinas utilizadas

EXTRACTO DE PITUITARIA (Foltropin-V). GONADOTROFINA CORIONICA DE YEGUA

PREÑADA. (eCG). GONADOTROFINA MENOPAUSICA HUMANA

(hMG)

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DíaNovormon25ml x 5000 UI

Folltropin-V20 ml x 400mg

Pergovet5 ml x 75 UI

Dia1

Dia 2

Dia 3

AmPm

AmPm

Am

12,5ml im(2500UI)

Inyectar

2,5ml2,5ml

2,5ml2,5ml

2,5ml

Una

4,0ml4,0ml

3,0ml3,0ml

2,0ml

Dosis

3amp.3 amp.

2 amp.2 amp.

1 amp.

De PGF

Dia 4

Dia 5

Dia 6

Pm

Am pm

AmPm

Am

CeloIA+2500 UIAnti -eCGIA

2,5ml

2,5ml2,5ml

CeloIAIA

2,0ml

1,0ml1,0ml

CeloIAIA

1 amp.

1 amp.1 amp.

CeloIAIA

Tratamiento superovulatorios con distintas presentaciones comerciales (IRAC. 2003)

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Tratamiento tradicional de Tratamiento tradicional de superovulación en bovinossuperovulación en bovinos

Día 0 Detección de celo de la donante Día 9 am Comienzo de la superovulación Día 10 medio día Inyección de PGF – Receptoras Día 11 am Inyección de PGF – Donantes Día 13 am Celo de Donante y receptora Día 13 pm Primera Inseminación Artificial Día 14 am Segunda Inseminación Artificial Día 20 Colección y transferencia o

congelado de embriones

(IRAC. 2003)

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Respuesta: Folículos 8 mm - Ovulación 60% - Recuperación embrionaria 20 – 30 %Folículos Antrales: (-) 20 % Vacas

Falla en la captura E2

SUPEROVULACION EN BUFALASSUPEROVULACION EN BUFALAS

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P4 Dispositivo

FSH

IATF 16 hs. post GnRH

D0 D4 D5 D6 D7 D8

PGF2

(AM / PM)

GnRH (20g)(PM)

D14

Lavado

EB (2mg)Retirar D7 (PM; 36h)

Protocolo de Superovulación en Búfalas

(Tonizza de Carvalho, N. 2010)

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P4 Dispositivo

FSH

IATF 12 y 24 hs.

post GnRH

D0 D4 D5 D6 D7 D8

PGF2

(AM / PM)

GnRH (20g)(PM)

D14

Lavado

EB (2mg)Retirar D7 (PM; 36h)

Protocolo de Superovulación: Variante con eCG

eCG (400IU)(AM/PM)

(Tonizza de Carvalho, N. 2010)

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DETECCION DE CELO E INSEMINACION ARTIFICIALDETECCION DE CELO E INSEMINACION ARTIFICIAL

• Desafío

•Ultrasonografia•Concentración de Porgesterona

•Doble Inseminación (rangos de hs)

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• Día 4 descienden al útero• Dias 6-7 salen de Zona P.

Recuperación días 5-6

Vaca 7

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Equipo para la recolección de los embriones no Equipo para la recolección de los embriones no quirúrgicoquirúrgico

http://www.mevesur.com

http://www.fao.org/DOCREP/004/T0120E/T01

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Lavado y medio de mantenimientoLavado y medio de mantenimiento Rec. Por GravedadcccTécnica no quirúrgica

Rec. Por Aspiración I.

S. Fosfato (PBS) Medios de R.E.

Bicarbonato tamponado

Ph 6,9-7,7 270-300 mosm

10 ml S.F.B. ATB penicilina

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Ubicación del globo del catéter de recuperación en la base del cuerno uterino

http://www.fao.org/DOCREP/004/T0120E/T0120E05.htm

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Manipulación de los embriones Manipulación de los embriones

Identificación de embrionesIdentificación de embriones

Manejo de los Manejo de los embrionesembriones

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Clasificación Clasificación

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*Esquemas de los embriones de buena calidad * Esquemas de los embriones de calidad justa (FAO. 1991) (FAO. 1991)

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Selección de las receptoras y Selección de las receptoras y sincronización sincronización Sanidad Sanidad

Obtención de receptorasObtención de receptoras

Sincronización de donantes y Sincronización de donantes y receptorasreceptoras

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TRANSFERENCIATRANSFERENCIA

Técnicas Técnicas Ubicación de la punta de la pistola de transferencia en el cuerno uterino ipsilateral en el momento de la deposición de embriones (FAO. 1991)

http://www.vet-uy.com/articulos/producciones_alternativas/050/002/images/bufalos.JPG

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Atención de las Atención de las donantes después del donantes después del tratamientotratamiento Prostaglandinas

Las Búfalas probablemente pueden ser superovuladas a intervalos de dos meses, para tres tratamientos sin

ninguna disminución apreciable en la respuesta

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Ventajas de la T.E.Ventajas de la T.E. Acelerar el progreso genético obteniendo el mayor

número de crías de hembras genéticamente superiores.

Acortar el intervalo generacional. Obtener progenie de hembras con patologías

adquiridas de alto valor genético Obtener progenies de hembras seniles y alto valor

genético. Formación rápida de núcleos o rodeos

determinados. Permite un mejor control de las enfermedades en la

comercialización. Facilita la exportación y la importación de animales. Sirve de base para otras biotecnologías

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DesventajasDesventajas

Costos elevados. Necesidad de técnicos altamente

especializados. Variabilidad en la respuesta individual al

tratamiento superovulatorio. Relativa baja producción de embriones por

colecta.

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Conclusiones y SugerenciasConclusiones y Sugerencias Problemas que se observan en búfalas

Técnicas similares

Ultrasonografía

Biotipos

Sugerencias»: política socio-económica

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BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA Carvalho, N.A.T.2010. Biotecnología de la reproducción en la búfala comparada con la

vaca. Curso Internacional de Postgrado. Pre-congreso. 9º Congreso Mundial. Buenos Aires, Argentina. 23 – 24 de Abril del 2010. 11Pag.

E.S.E Hafes – B. Hafes, 2007. Reproducción e inseminación artificial en animales – séptima edición – Mc.Graw-Hill interamericana Editores, S.A. de C.V.

FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION OF THE UNITED NATIONSRome, © FAO 1991: Trainingmanual for embryo transfer in water-buffaloes http://www.fao.org/docrep/004/t0120e/T0120E00.htm(Consultadodía 12/02/2011).

Cátedra de Teriogenologia, Facultad de Ciencias Veterinarias – UNNE. Año 1998 - Fisiología Reproductiva Del Búfalo – Guía Nº 15 – 10 Pág..

INSTITUTO DE REPRODUCCION ANIMAL CORDOBA (IRAC), 2003. Reproducción bovina. Sincronización de celo e inseminación artificial. Universidad Nacional de Córdoba, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Escuela para ganadería. 183 Pág.

Pellerano, Gabriela S. - Maldonado Vargas, Pablo - Rodríguez, Sebastián N. Arzeno, Máximo T. - Crudeli, Gustavo A. 2003. Evaluación de diferentes Protocolos de Superovulación en Búfalos en el NEA Argentino. 4 Pág. http://www1.unne.edu.ar/cyt/2003/comunicaciones/04-Veterinarias/V-042.pdf (consultado día 16/02/20011).

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MUCHAS GRACIASMUCHAS GRACIAS