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Efecto antioxidante y citoprotector del tocosh de Solanum tuberosum papa en la mucosa gstrica de animales de experimentacin

Antioxidant and cytoprotector effects of Solanum tuberosum papa tocosh in gastric mucose in experimental animals

Miguel Hernn Sandoval Vegas1, Janeth Tenorio Mucha2, Aldo Tinco Jayo2, Rudi A. Loli Ponce1, Segundo Caldern Pinillos3

1 Centro de Investigacin de Bioqumica y Nutricin. Facultad de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Per.2 Escuela de Formacin Profesional, Farmacia y Bioqumica, Facultad de Ciencias Biolgicas, Uinversidad Nacional San Cristbal de

Humanga, Ayacucho, Per.3 Departamento Acadmico de Nutricin, Facultad de Medicina. UNMSM.

ResumenEl tocosh es un producto alimenticio obtenido por una tcnica de conservacin andina y que tiene propiedades nutritivas y teraputicas. Objetivo: Demostrar la capacidad antioxidante y el efecto citoprotector del tocosh de Solanum tuberosum papa en la mucosa gstrica de animales de experimentacin. Diseo: Experimental. Institucin: Centro de Investigacin de Bioqumica y Nutricin, Facultad de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Per. Material biolgico: Tocosh seco y molido administrado a ratas albinas. Intervenciones: A 6 grupos de ratas albinas machos (200 50 g) se les dividi en: (GI) solucin NaCl 0,9%, 10 mL/kg; (GII) etanol al 70% a 10 mL/kg; (GIII, IV y V) Tocosh equivalente a 900 mg/kg, 1 800 mg/kg y 2 700 mg/kg, respectivamente, y (GVI) sucralfato 30 mg/kg. En todos los casos, una hora despus se indujo injuria con etanol 70 a 10 mL/kg y por laparotoma abdominal se obtuvo el tejido gstrico. Principales medidas de resultados: Porcentaje de citoproteccin gstrica en imagen digitalizada por image analysis software for plant disease quantification y capacidad antioxidante por lipoperoxidacin mtodo espectrofotomtrico de la reaccin de especies reactivas al cido tiobarbitrico (TBARS). Resultados: La marcha fitoqumica identific compuestos fenlicos, alcaloides, triterpenoides y esteroides, azcares reductores y aminocidos libres como metabolitos secundarios. Las dosis de 2 700 mg/kg y 900 mg/kg resultaron en 0,72 y 1,81 nmol/g tejido de lipoperoxidacin, respectivamente. La dosis de 1 800 mg/kg protegi un 97% del rea de la mucosa gstrica, 2 700 mg/kg un 95% y la de 900 mg/kg, 88% (p

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INTRODUCCIN

El Per posee cerca de 72% de las zo-nas de vida en el mundo, hecho que da como resultado una variedad intensa de especies en flora y fauna, que des-de tiempos antiguos estuvieron a dis-posicin de los pobladores, influyendo notablemente en el desarrollo de sus hbitos alimenticios y costumbres (1). Si-tuaciones provocadas por factores am-bientales o sociopolticos forzaron a los pobladores a observar, descubrir y apli-car tcnicas particulares a los alimentos con el fin de obtener mejores cosechas, conservarlos y prolongar su vida til. El tocosh es una tcnica tradicional an-dina de conservacin in situ (2). La pa-labra tocosh deriva del vocablo togosh, palabra quechua que significa arrugado y fermentado (3), y es el resultado de la fermentacin bacteriana de productos andinos como la papa, el maz, olluco o la aracacha, almacenada en pozos cons-truidos en la tierra, envueltos en paja o ichu y presionados mecnicamente con piedras bajo una corriente de agua proveniente de un manantial (4,5). Este tratamiento confiere a los productos propiedades nutritivas y teraputicas aprovechadas solo por quienes las co-nocen y las consumen y que podra ser una alternativa natural para paliar, pre-venir o curar algunas enfermedades (6).

Desde pocas incaicas, los poblado-res de las regiones de Ancash, Hunuco y Junn utilizan tocosh como medica-mento, siendo la mazamorra de tocosh o tocosh api la forma de consumo ms conocida. Se caracteriza por su olor des-agradable, que es lo primero en percibir-se, peculiaridad que no limita su consu-mo o comercializacin, afirmndose por conocimiento emprico que contiene penicilina natural y que entre sus innu-merables beneficios es capaz de proteger la mucosa gstrica de dao o inflama-cin (3,4), debindose verificar de mane-ra cientfica esta propiedad atribuida.

De acuerdo a costumbres populares, este producto es usado en el posparto, resfro, neumona, en la curacin de heridas, como antibacteriano, cicatri-zante de hemorroides y de lcera gs-

trica, para evitar las infecciones gas-trointestinales y mal agudo de altura o soroche. Adems, podra ser un anti-bitico, energizante, probitico eficaz y de muy bajo costo (7).

Es importante mencionar que la gas-tritis es una enfermedad inflamatoria aguda o crnica de la mucosa gstrica producida por factores exgenos y en-dgenos. Entidad de elevada morbilidad a nivel mundial, en el Per es una de las causas que con ms frecuencia motivan la consulta gastroenterolgica (8). En la actualidad, esta enfermedad ha aumen-tado debido al estrs, la bacteria Heli-cobacter pylori y el elevado consumo de caf y alcohol. La alteracin histolgica ms evidente en la mucosa gstrica, originada por la gastritis, es la respuesta inflamatoria. En los procesos inflama-torios participan diferentes tipos de clulas que, al ser atradas al sitio de la lesin, liberan gran variedad de me-diadores qumicos, como citoquinas, ei-cosanoides y radicales libres, los cuales amplifican la respuesta inflamatoria y aumentan la proliferacin celular, con la posibilidad, segn la intensidad y persistencia, de inducir a errores de re-plicacin celular y facilitar el desarrollo del cncer gstrico (9,10).

El presente trabajo de investigacin pretende evaluar la capacidad antioxi-dante y el efecto citoprotector del to-cosh de Solanum tuberosum papa en la mucosa gstrica, en un modelo experi-mental en ratas albinas.

MTODOS

El estudio tuvo diseo bsico-experi-mental. Se utiliz tocosh de Solanum tuberosum papa seca, adquirido en el mercado Raez Patio del Distrito de Huancayo, Provincia de Huancayo, re-gin Junn. Fue triturado hasta obtener un polvo fino, se retiraron las impure-zas, se pes segn las dosis y luego fue reconstituido en agua caliente (90C) y sometido a decoccin, hasta obtener un gel. Finalmente, se dej enfriar a tem-peratura ambiente. Para la identifica-cin cualitativa de los componentes del

tocosh, se realiz la marcha fitoqumica a la decoccin, siguiendo la metodolo-ga propuesta por Lock de Ugaz (11).

El experimento se realiz en 60 ratas sprague dawley machos adultos adqui-ridos del bioterio de la Universidad Na-cional Agraria La Molina (UNALM), de 200 25 g de peso, criados y ali-mentados en las mismas condiciones. Los animales fueron divididos alea-toriamente en 6 grupos: (G1) control negativo: solucin de cloruro de sodio 0,9% a 10 mL/kg de peso; (G2) control positivo: etanol al 70% a 10 mL/kg de peso; (G3) tocosh de Solanum tubero-sum, a 900 mg/kg de peso del animal + etanol al 70% a 10 mL/kg de peso; (G4) tocosh a 1 800 mg/kg de peso + etanol al 70% a 10 mL/kg de peso; (G5) tocosh a 2 700 mg/kg de peso + etanol al 70% a 10 mL/kg del animal; y (G6) sucralfato a 30 mg/Kg + etanol al 70% a 10 mL/kg. En todos los casos la va de administracin fue por canulacin oro-gstrica, en estado de ayuno slido de 24 horas; los animales fueron manteni-dos con solucin de glucosa al 5% hasta 4 horas antes de la canulacin. La ad-ministracin del etanol al 70% se reali-z una hora despus de cada tratamien-to con tocosh o sucralfato, para inducir gastritis y lceras gstricas. Despus de 60 minutos, los animales fueron anes-tesiados con ter vaporizado y se les practic laparotoma y gastrectoma. El estmago de cada animal fue extendido y fijado en superficie adherente, para luego ser fotografiados, digitilizados y trasferidos a una computadora, para su anlisis con el software ASSESS Ima-ge Analysis Software for Plant Disease Quantification, en el cual se identific y cuantific las reas: rea total, ulcerada y no ulcerada de la mucosa del estma-go en cm2.

Se expres los resultados como dao de la mucosa gstrica en porcentaje de rea ulcerada (cm2), de acuerdo al cl-culo siguiente:

rea ulcerada (cm2 )= rea total de la mucosa gstrica (cm2 ) - rea no ulcerada (cm2)

Dao=% rea ulcerada=(rea ulcerada)/(rea total de la mucosa gstrica) 100

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Para observar la capacidad antioxi-dante se midi el grado de estrs oxi-dativo producido por el etanol 70%, para lo cual se pes aproximadamente 0,5 g de tejido gstrico para realizar la lipoperoxidacin mediante la prueba de TBARS (determinacin de las especies reactivas al cido tiobarbitrico). Se midi en espectrofotmetro a una lon-gitud de onda de 535 nm.

Se expres los resultados de acuerdo al siguiente clculo:

Lipoperoxidacin = Abs/(xI) x 1/10-9 x (5L) / 1000 x 1/(w tejido (g) )

Donde: Abs es la absorbancia, I la longitud de la celda de 1 cm, = coeficiente de extincin molar = 1,56 x 105 (mol/L)-1 cm-1 y w peso del tejido.

Los datos obtenidos fueron someti-dos al anlisis de varianza (ANOVA), prueba de Tukey para comparar la di-ferencia entre grupos y prueba de Dun-net para la comparacin con respecto a grupos control a un nivel de confianza del 95% (p 0,05).

RESULTADOS

La decoccin de tocosh de papa (ma-zamorra) present como caractersticas alta viscosidad y propiedades mucila-ginosas: Entre sus componentes se en-contraron compuestos fenlicos, alca-loides, triterpenos, esteroides, azcares reductores y aminocidos libres, como se puede apreciar en la tabla 1.

El grado de lipoperoxidacin fue sig-nificativamente menor en el grupo que consumi la ms alta dosis de tocosh (G5), es decir con mayor efecto antioxi-dante, y fue significativamente mayor en el grupo al que se le administr solo etanol (G2) p

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ductores y aminocidos libres (tabla 1). Investigaciones referidas a la misma especie, S. tuberosum, indican que esta contiene: compuestos fenlicos, pre-dominantemente cido clorognico; glicoalcaloides, siendo los principales la chaconina y la solanina; flavonoides; azcares reductores (glucosa y fruc-tosa) y antocianinas. Resaltan que el mayor componente del material seco es el almidn, amilosa y amilopectina del almidn, as como sus dems com-ponentes dependen de la variedad y el cultivo. La presencia de estos le con-fiere la caracterstica mucilaginosa que posee (12).

Para el caso del tocosh, Naupari y col. (4) identificaron esteroides y triter-penos, alcaloides, compuestos fenli-cos, flavonoides, cumarinas y taninos. Por su parte, Gutirrez (13) seala que los componentes qumicos mayoritarios del tocosh son de estructura y natu-raleza polar y detect la presencia de azcares reductores, aminocidos, alca-loides y esteroides. En ese sentido, po-demos inferir que el material crudo de tocosh S. tuberosum (el polvo seco) no difiere en su composicin fitoqumica con el tocosh preparado por decoccin (a modo de mazamorra). Se ha encon-trado diferencias en la composicin qumico-bromatolgico entre la papa y el tocosh (4), como consecuencia de los fenmenos de germinacin y fermen-tacin que pueden asegurar cambios en sus componentes, mejorar su valor nutritivo (5) e incluso remover glicoal-caloides txicos (12).

La evaluacin de la actividad an-tioxidante se realiz por la determina-cin de las especies reactivas al cido

tiobarbitrico (TBARS), midiendo la actividad inhibidora de la formacin de radicales libres por la produccin de malondialdehdo como indicador de lipoperoxidacin; y para causar estrs oxidativo se us el etanol, ya que se relaciona positivamente con los niveles de TBARS (14); los valores de la prueba TBARS son un reflejo de la lipoperoxi-dacin por agresin del alcohol (15,16) (MDA-TBA).

Como se ha observado en los resul-tados (figura 1), en todos los casos el tocosh mostr actividad antioxidante y con mayor diferencia estadstica en la dosis de 2 700 mg/kg de peso (p

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sulfhidrilos en la mucosa, evidenciando menor lipoperoxidacin con respecto al alcohol 96% (24). Podramos afirmar que para el tocosh de papa se cumple el mismo principio para la citoproteccin de la mucosa gstrica. Sin embargo, el rol de los radicales libres inducidos por la lipoperoxidacin en la generacin de injuria crnica en la mucosa gstrica es desconocido (16).

La actividad citoprotectora se evi-dencia tras la injuria por etanol 70% a la mucosa gstrica en todos los grupos. El anlisis de varianza (ANOVA) de-termin que existen diferencias signifi-cativas (p

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Con respecto a las dosis administra-das, Gutirrez y col. (13) realizaron un es-tudio toxicolgico usando el modelo de toxicidad aguda a dosis lmite de 2 000 mg/kg que, al corte anatomopatolgico de hgado, pulmn, rin y estmago, no present daos en tejidos y estruc-turas. Sobre la base de este estudio, podramos afirmar que los tratamientos son inocuos, a pesar de haberse admi-nistrado dosis altas. Adems, el tocosh en decoccin (mazamorra) es consumi-do por la poblacin andina de manera ancestral, por lo que descartamos una toxicidad potencial.

Finalmente, bajo nuestro modelo experimental y en las condiciones del estudio podemos concluir que el tocosh de papa Solanum tuberosum posee ca-pacidad antioxidante y es citoprotector en la mucosa gstrica de animales de experimentacin; con lo cual se estara confirmando el conocimiento ances-tral de la medicina tradicional, que el consumo de tocosh protege la mucosa gstrica en los seres humamos.

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Conflictos de inters: los autores declaran no tener conflictos de inters.

Correspondencia: miguel Hernn Sandoval Vegas. Celular: 998731434Telfono UNMSM: 6197000 4684.Correo electrnico: mhsave@gmail.com; msandovalv@unmsm.edu.pe