Terjemahan Jurnal Internasional Fitokimia Wulandari 3fa4

Click here to load reader

  • date post

    01-Oct-2015
  • Category

    Documents

  • view

    20
  • download

    6

Embed Size (px)

description

punya wulan

Transcript of Terjemahan Jurnal Internasional Fitokimia Wulandari 3fa4

Hindawi Publishing Perusahaan

Hindawi Publishing Perusahaan

Bukti Berbasis Pelengkap dan Pengobatan Alternatif

Volume 2012, ID Artikel 515901, 11 halaman

doi: 10,1155 / 2012/515901

penelitian Pasal

Flavonoid Terisolasi dari Korea Citrus aurantium L. Menginduksi G2 / M

Tahap Penangkapan dan Apoptosis di Human Lambung Kanker AGS Sel

Do-Hoon Lee, 1 Kwang-Il Park, 1 Hyeon-Soo Park, 1 Sang-Rim Kang, 1

Arulkumar Nagappan, 1 Jin-A Kim, 2 Eun-Hee Kim, 3 Won-Sup Lee, 4

Muda-Sool Hah, 5 Hyon-Jong Chung, 1 Su-Jin An, 1 dan Gon-Sup Kim1

1Research Institut ilmu Hidup dan College of Veterinary Medicine, Gyeongsang National University, Gazwa,

Jinju 660-701, Republik Korea

2Korea Nasional Pusat Penelitian Sumber Daya Hewan dan Korea National Animal Bio-sumber daya Bank, Gyeongsang National University,

Gazwa, Jinju 660-701, Republik Korea

3Department Ilmu Keperawatan, Universitas Internasional Korea, Jinju 660-759, Republik Korea

4Department of Internal Medicine, Institut Ilmu Kesehatan, Gyeongsang National University School of Medicine dan

Gyeongnam Regional Cancer Center, Gyeongsang National University Hospital, Jinju 660-702, Republik Korea

5 Clinical Research Institute, Gyeongsang National University Hospital, Jinju 660-702, Republik Korea

Korespondensi harus ditujukan kepada Gon-Sup Kim, [email protected]

Menerima 5 Agustus 2011; Diterima 14 September 2011

Akademik Editor: Jae Youl Cho

Hak Cipta 2012 Do-Hoon Lee et al. Ini adalah sebuah artikel akses terbuka didistribusikan di bawah lisensi Creative Commons Attribution,

yang memungkinkan penggunaan tak terbatas, distribusi, dan reproduksi dalam media apapun, asalkan karya asli dikutip benar.

Tujuan dari studi. Berbagai spesies jeruk telah banyak digunakan dalam pengobatan tradisional sebagai obat herbal di beberapa negara Asia termasuk Korea.

Flavonioids dikenal memiliki banyak aktivitas farmakologis, seperti anti-oksidan, anti-inflamasi dan anti-kanker, dan sebagainya. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis, efek anti-kanker dari flavonioid yang diisolasi dari Citrus aurantium L. sel kanker yang dianalisis adalah sel kanker lambung (AGS) pada manusia. Bahan dan Metode. Aktivitas anti-proliferasi diuji menggunakan prosedur uji MTT. Analisis siklus sel dilakukan menggunakan sitometri dan deteksi apoptosis dilakukan dengan menggunakan proses pewarnaan ganda dengan zat warna fluoresens (Hoechst) dan Annexin V-propidium iodida. Metode Western blot digunakan untuk mendeteksi hasil ekspresi protein yang terkait dengan siklus sel dan apoptosis. Hasil. Flavonoid yang terisolasi dari Citrus aurantium L. memiliki efek anti proliferasi pada sel AGS dengan nilai IC50 dari 99 ug / mL. Flavonoid juga dapat menghambat siklus sel di G2 / M fase dan menurunkan tingkat ekspresi cyclin B1, CDC 2, CDC 25c. Flavonoid menginduksi proses apoptosis dengan mekanisme pengaktifan caspase dan penonaktifkan PARP. Kesimpulan. Flavonoid yang diisolasi dari Citrus aurantium L. Akan menginduksi reseptor G2 / M melalui modulasi siklus sel protein terkait dan apoptosis melalui aktivasi caspase. Dapat disimpulkan bahwa flavonoid yang diisolasi dari Citrus aurantium L. adalah salah satu senyawa yang berguna untuk pengobatan dan kemoprevensi kanker lambung.

Pendahuluan

Buah jeruk merupakan sumber makanan yang sangat populer karena kandungan gizi, rasa, dan atribut intrinsik yang dimilikinya, serta telah sejak lama sering digunakan dalam obat tradisional pada beberapa negara Asia. Kulit buah jeruk yang belum matang dapat menghasilkan senyawa yang dapat digunakan untuk mengobati gangguan pencernaan dan telah menunjukkan potensi sebagai senyawa yang dapat dimanfaatkan dalam kemoterapi. Salah satu nutrisi yang terkandung dalam buah jeruk, flavonoid baru-baru ini telah diakui memiliki berbagai manfaat untuk pengobatan, seperti antioksidan, antimikroba, anti-inflamasi, dan antikanker. Buah jeruk memiliki banyak kandungan flavonoid aktif seperti naringin, naringenin, narirutin, nobiletin, quercetin, kaempferol, hesperidin, neohesperidin, didymin, dan poncirin, secara khusus, naringin, nobiletin, dan hesperidin menampilkan efek antikanker melalui mekanisme penangkapan siklus sel dan apoptosis. Kanker lambung adalah kanker paling umum di Korea. Menurut data statistik Departemen Kesehatan dan Kesejahteraan, ada 28.078 kasus kanker lambung di Korea pada tahun 2008, yang mewakili 15,7% dari semua kasus kanker di negara ini. Secara global, Kanker lambung adalah kanker utama yang menjadi penyebab kematian terkait kanker, setelah kanker paru-paru. Pengobatan kanker lambung umumnya terdiri dari operasi, kemoterapi, dan / atau radiotherapy. While perawatan

bisa efektif, sekitar setengah dari pasien kanker lambung yang tidak dapat diobati [11]. Kebutuhan formore pengobatan yang efektif adalah menekan.

Diprogram mekanisme kematian sel yang apoptosis adalah regulator utama proliferasi sel dan merupakan fokus penelitian kanker sebagai cara yang efektif untuk menghilangkan prakanker dan / atau sel-sel kanker [1]. Caspases memainkan penting

peran dalam apoptosis; berlebih dan belahan dada mereka adalah prekursor apoptosis pada sel mamalia. Sampai saat ini, 14 caspases telah diidentifikasi berdasarkan fungsinya. Mereka merupakan tiga kelompok fungsional: caspases inflamasi (caspase-1, -4, dan -5), caspases inisiator apoptosis (caspase-2, -8, -9, dan -10), dan caspases efektor apoptosis (caspase-3, -6, dan -7) [12]. Caspases memiliki zymogens aktif yang terdiri dari P20 (besar) dan p10 (kecil) subunit. Menanggapi sinyal apoptosis, yang zymogens aktif yang dibelah, menghasilkan bentuk aktif dari protein yang berkaitan dengan induksi apoptosis [13]. Juga, Bcl-2 keluarga protein, yang aktivitasnya diarahkan untuk bertindak di mitokondria membran luar, adalah regulator utama apoptosis. The Bcl-2 keluarga terdiri dari proapoptotik dan antiapoptotik anggota [14]. Apoptosis Bcl-2 protein seperti Bax dan Bak menciptakan pori-pori di outermembrane themitochondrial, melalui yang sitokrom c dilepaskan ke sitosol. Pengikatan sitokrom c untuk Apaf-1 menciptakan sebuah kompleks apoptosome yang mengaktifkan caspase-9, yang pada gilirannya mengaktifkan caspase-3. antiapoptotik Bcl-2 protein seperti Bcl-2 dan Bcl-xL mempertahankan struktur membran mitokondria melalui interaksi dengan apoptosis Bcl-2 protein [15].

Penangkapan siklus sel juga merupakan regulator utama proliferasi sel. Pada sel eukariotik, siklus sel terdiri dari G1,S, G2, dan M fase. Pemeriksaan untuk siklus hadir di G1 dan G2 fase. Dalam perkembangan siklus sel, siklin dan kinase tergantung cyclin (cdks) memainkan peran sentral sebagai regulator. Pada fase pertengahan G1, progresi siklus sel dikendalikan oleh cyclin D-Cdk4 / cdk6 kompleks. Pada akhir-G1, perkembangan dikendalikan oleh cyclin E-Cdk2 kompleks. Di fase G2, progresi siklus sel dikendalikan oleh cyclin A / B-kompleks Cdc2 [16-18]. Kerusakan DNA dapat menghambat proliferasi sel oleh inaktivasi siklin dan cdks dan

penangkapan siklus sel berikutnya.

Seperti disebutkan sebelumnya, flavonoid diisolasi dari Citrus aurantiumL. memiliki antikanker effect.However, themechanisms aktivitas antikanker dari Korea Citrus aurantium L. masih tetap tidak diketahui. Dalam penelitian ini, kami menunjukkan bahwa flavonoid diisolasi fromKorea Citrus aurantiumL. Penyebab penangkapan siklus sel dan apoptosis pada kanker lambung AGS manusia sel. Tingkat ekspresi beberapa protein penting adalah terbukti sangat terkait dengan siklus sel dan apoptosis. Akhirnya, terjadinya penangkapan siklus sel dan apoptosis adalah bertekad untuk memastikan mekanisme antikanker dari flavonoid yang terisolasi.

2.Materials andMethods

2.1. Antibodi dan Reagen. Cyclin B1, CDC 2, CDC 25c, dan -aktin dibeli fromMillipore (Billerica, MA, USA). Antibodi untuk Bcl-xL, Bax, dibelah poli (ADP-ribosa) polimerase (PARP), dan caspases-3, -6, -8, dan -9 dibeli dari Sel Signaling Teknologi (Danvers, Mass, USA). Lobak peroxidase- (HRP-) ditambah kambing anti-tikus IgG dan anti-kelinci IgG yang dibeli dari Santa Cruz Bioteknologi (Santa Cruz, CA, USA). RPMI-1640 adalah dibeli dari HyClone (Logan, UT, USA). janin sapi serum (FBS) dan antibiotik (streptomycin / penisilin) yang dibeli dari Gibco (BRL Life Technologies, Grand Island, NY, USA). 3- (4,5-Dimethylthiazol-2-il) -2,5-dephenyltetrazolium bromide (MTT), dimetilsulfoksida (DMSO), dan RNase A diperoleh dari Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Isothiocyanate fluorescein (FITC) annexin-V Deteksi apoptosis kit 1 dibeli dari BD PharMingen (San Diego, CA, USA). peningkatan chemiluminescence

(ECL) kit dibeli dari Amersham Life Science (Buckinghamshire, Inggris). Bahan dan bahan kimia yang digunakan untuk elektroforesis diperoleh dari Bio-Rad Laboratories (Hercules. CA, USA).

2.2. Isolasi Flavonoid. Analisis isolasi flavonoid dilakukan di Departemen Kimia, Gyeongsang National University oleh Profesor Sung Chul Shin. Kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) dilakukan sebagai descried. Secara singkat, analisis HPLC adalah dilakukan dengan menggunakan sistem LC 1100 seri diinstal dengan G1322A degasser, pompa G1312A, autosampler G1313A, dan oven G1316A (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA). Pemisahan kromatografi dilakukan pada kolom Zorbax StableBond Analytical SB-C18 (4,6 250mm, 5 m; Agilent Technologies). Pelarut biner Sistem ini terdiri dari 0,1% asam format berair (A) dan metanol / asetonitril (1: 1) (B). Elusi dilakukan menggunakan gradien linier (0% -25% B) lebih 10 menit dan 40% -70% B selama 10 menit, diikuti oleh 30 menit dari elusi isokratik,

menurun dari 40% -25% B lebih 5 menit dan diikuti dengan10 menit dari elusi isokratik. Laju aliran adalah 0,5 mL / menit suhu kolom 35C dan volume infus dari 10 uL dalam se