Tema 2. Naturaleza de La Infección2

8/17/2019 Tema 2. Naturaleza de La Infección2

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MARACAIBO, SEPTIEMBRE DE 2013.

Lcda. Liliana Gómez Gamboa (Mg.Sc.)

REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELAUNIVERSIDAD DEL ZULIAFACULTAD DE MEDICINAESCUELA DE MEDICINA

UNIDAD CURRICULAR: BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA

Profesor Asistente de la Cátedra Bacteriología y Virología.

Escuela de Medicina. LUZ.


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1. Los microorganismos y las enfermedades

infecciosas.

2. El crecimiento microbiano y su control

3. Control de las infecciones intrahospitalarias

4. Principios del Diagnóstico de las

enfermedades infecciosas por el laboratorio

5. Emergencia y contagio global de las

infecciones


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La ciencia de la microbiología médica data de los estudiospioneros de Pasteur y Koch, quienes aislaron agentes específicos ycomprobaron a través del método experimental que podían causar

enfermedades.

Dichos esfuerzos, combinados con el trabajo comenzado por

Semmelweis y Lister, quienes mostraron los modos depropagación de la enfermedad, condujeron a los grandes avancesen salud pública que dieron inicio al descenso en la enfermedad ymuerte.


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Infección

OportunistaEfecto deexclusión

Preparacióndel sistemainmunitario

Muchas especies de floranormal pueden ocasionar

infecciones cuando llegan en

cantidad suficiente a áreasestériles del organismo. Ejm:

E. coli e infección urinaria,perforación de colon, caries

Existe la tendencia de la floranormal a producir condicionesque compiten con patógenos

externos y que reducen sucapacidad para establecer un

nicho en el huésped. Ejm: floraen colon

Flora normal y competencia inmunitaria. Losanimales estériles tienen poca inmunidad hacia

la infección microbiana.


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En el caso de cualquier patógeno, los aspectos

básicos de cómo interactúa con el huésped paraproducir enfermedad pueden expresarse enfunción de su:

Es el “quién, qué, cuándo y dónde” de las enfermedadesinfecciosas.

EPIDEMIOLOGÍA

PATOGÉNESIS

INMUNIDAD


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La importancia de la epidemiología como ciencia lo demostróinicialmente Semmelweis, quien a través del análisis cuidadoso de losdatos, determinó cómo se transmite la fiebre puerperal causada por Streptococcus; incluso estableció un medio para prevenir latransmisión (es decir, el lavado de las manos) décadas antes de que sedescubriera el organismo en sí.

La desnutrición, las condiciones socioeconómicaspobres, los desastres naturales y las situacionesdonde existe higiene inadecuada facilitan lapropagación de epidemias y enfermedades.BIOTERRORISMO

Disciplina que estudia la distribución de losdeterminantes de enfermedad y daño en lapoblación humana e incluye enfermedadestanto infecciosas como no infecciosas.


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SINOPSIS DE LA INFECCIÓN: se muestran las fuentes y sitios potenciales de infección. Lainfección puede ser endógena, debida a la flora interna normal o exógena, proveniente defuentes del exterior.

Tomado de: Ryan Kenneth y Ray George. Sherris Microbiología Médica. Quinta Edición. 2011.


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Una vez que el patógeno potencial alcanza a suhuésped, las características del organismodeterminan si ocurrirá o no una enfermedad.

LA PATOGENICIDAD ES MULTIFACTORIAL.

VISTA CELULAR DE LA INFECCIÓN: Un virus se enlaza con la superficie celular, pero sólo puede reproducirse en el interior de la célula. Una célula bacteriana se une a la superficie, invade y se propaga al torrente sanguíneo a través de la célula.Una célula bacteriana se une a la célula e inyecta proteínas dentro de ella. La célula se altera mientras que el organismopermanece en la superficie.



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Uno de los atributos más importantes de lavirulencia que puede tener cualquier patógeno

es su capacidad para evadir la respuestainmunitaria.

MANIFESTACIONES

DIAGNÓSTICO

TRATAMIENTO

PREVENCIÓN


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La fiebre, el dolor y la inflamación son signos universales de

infección. Los órganos específicos implicados y la velocidad del proceso

dominan los signos y síntomas de la enfermedad. Las decisionesclínicas dependen del sistema o sistemas corporales implicados.

Los médicos deben estar familiarizados con la diversidad decomportamientos de los principales patógenos, pero los signos ysíntomas se superponen en forma considerable.

Los médicos utilizan su conocimiento para empezar un procesodeductivo que conduzca a la lista de patógenos sospechosos y a

una estrategia que les permita realizar un diagnóstico específico yatender al paciente.

A través de la evaluación de probabilidades, la comprensión decómo funcionan las enfermedades constituye una notable ventaja

para tomar las decisiones correctas.


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El producto del estudio científico de cualquier enfermedad es su prevención.

En el caso de las enfermedadesInfecciosas, esto incluye:

Medidas desalud pública

Inmunización(organismos

vivos odesactivados)

Las medidas de salud públicarequieren del conocimiento delos mecanismos detransmisión y de cómointerferir con ellos.


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La eliminación de los microbios antes de que lleguen a los pacientesha sido una de las principales estrategias para prevenir la infección.

Ignaz Semmelweis aplicó con éxito los principios de la desinfeccióndecenios antes de que se aislara la primera bacteria.

Muerte y destrucción significanla pérdida de la capacidad paramultiplicarse en cualquier

conjunto conocido decondiciones.

La ausencia de crecimiento deorganismos no necesariamente

indica esterilidad.


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Esterilización, desinfección y asepsia

La esterilización consiste en la destrucción o eliminación completa de todoslos microorganismos vivos en un sitio o materia particular, incluidas lasformas resistentes como esporas bacterianas, virus sin envoltura y hongos.

Es el uso del calor a una temperatura suficiente para desactivar los

organismos patógenos importantes en líquidos como agua o leche, pero auna temperatura inferior a la que se necesita para garantizar laesterilización (55-75ºC).• Elimina bacterias pero no esporas.• Se utiliza para alimentos y equipo médico frágil.


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Esterilización, desinfección y asepsia

Describe los procesos diseñados para prevenir que los microorganismosalcancen un ambiente protegido. Se aplica en muchos de los

procedimientos que se utilizan en el quirófano, en la preparación deagentes terapéuticos y para las manipulaciones técnicas en laboratorios demicrobiología.COMPONENTE ESENCIAL DE LAS TÉCNICAS DE ASEPSIA esterilización detodo el material y equipo utilizados.

Es la destrucción de microorganismos patógenos medianteprocesos que no alcanzan los criterios de la esterilización.


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CALOR

GAS

LUZ UV YRADIACIÓNIONIZANTE

Calor directoCalor húmedo

Óxido de etilenoFormaldehído


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Filtración

Pasteurización

Microondas

MÉTODOSFÍSICOS

Alcohol

Halógenos (yodo, cloro)

Peróxido de hidrógeno

Compuestos con actividadsuperficial (amonio

cuaternario)Fenoles (fenol,

Exaclorofeno, Clorhexidina)Glutaraldehído y

formaldehído

MÉTODOSQUÍMICOS


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Esterilización, desinfección y antisepsia

La esterilización consiste en la destrucción oeliminación completa de todos losmicroorganismos vivos en un sitio o materiaparticular, incluidas las formas resistentes comoesporas bacterianas, virus sin envoltura y hongos.

FÍSICA

GASEOSA

QUÍMICA

Esterilización Física

El método más simple de esterilización consiste en

exponer directamente al fuego la superficie a esterilizar,como se hace con el asa de alambre que se emplea en loslaboratorios de microbiología. Es posible utilizar estemétodo de manera igualmente eficaz para laesterilización urgente de una aguja (incineración).


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Calor húmedo y calor seco:métodos de esterilizaciónutilizados más a menudo en los

hospitales y están indicadospara la mayoría de losmateriales, con excepción delos termosensibles o los que

poseen componentes químicostóxicos o volátiles.


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Esterilización FísicaFiltración: método útil para eliminar lasbacterias y los hongos de las soluciones o elaire (filtros de partículas de alta eficiencia

[HEPA]). No obstante, estos filtros noconsiguen eliminar los virus ni algunasbacterias de pequeño tamaño.Rayos ultravioleta o radiación ionizante (p. ej.,microondas o rayos gamma). Limitación derayos U.V. radica en la necesidad de una

exposición directa del material a esterilizar.


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Tomado de: Microbiology an Introduction. Tortora y col, 2010


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Óxido de etileno (inflamable, explosiva y cancerígena) Formaldehído gaseoso (carcinógeno).

Peróxido de hidrógeno (esterilización deinstrumentos)

GRADO ALTO

GRADOINTERMEDIO

GRADO BAJO

La desinfección de alto grado posee unaeficacia semejante a la de laesterilización, mientras que las esporaspueden sobrevivir tras una desinfecciónde grado intermedio; asimismo,numerosos microorganismos puedenseguir siendo viables después de una

desinfección de bajo grado.

Alcohol Halógenos (yodo, cloro) Peróxido de hidrógeno Compuestos con actividad superficial(surfactantes, amonio cuaternario)

Fenoles (hexaclorofeno, clorhexidina) Glutaraldehido y formaldehído


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Los DESINFECTANTES DE ALTO GRADO se utilizan para objetos empleados enprocedimientos invasivos que no pueden soportar los métodos de esterilización(ej. ciertos tipos de endoscopios, instrumentos quirúrgicos de plástico). Ladesinfección de estos y otros objetos tiene una eficacia máxima cuando el

tratamiento se precede de una limpieza de su superficie con el objeto deeliminar la materia orgánica. Calor húmedo Glutaraldehído Peróxido de hidrógeno

Ácido paraacético y compuestos clorados.

Los DESINFECTANTES DE GRADO MEDIO (p. ej., alcoholes,compuestos yodados, compuestos fenólicos) limpieza desuperficies o instrumentos en los que es poco probable lacontaminación por esporas bacterianas o microorganismoscon un alto grado de resistencia («instrumentos y dispositivossemicríticos» como endoscopios fibroópticos flexibles, loslaringoscopios, los espéculos vaginales y los circuitosrespiratorios usados en anestesia).


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Los DESINFECTANTES DE GRADO BAJO (ej., compuestos de amoniocuaternario) se utilizan para tratar instrumentos y dispositivos que norevisten una gran importancia, como los manguitos de los aparatos

empleados para tomar la tensión arterial, los electrodos delelectrocardiograma y los estetoscopios (entran en contacto con los pacientespero no atraviesan mucosas ni tejidos estériles).


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ALCOHOLES

COMPUESTOSYODADOS

CLORHEXIDINA

PARACLOROMETA

XILENOLTRICLOSAN

Los antisépticos se utilizan para reducirel número de microorganismospresentes en la superficie cutánea.Estos compuestos se seleccionan enfunción de su seguridad y su eficacia.


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• En todos los ambientes de atención a la salud existe ciertoriesgo de infección.

• Los pacientes hospitalizados son particularmentevulnerables y los entornos hospitalarios son complejos.

• Intrahospitalario es un término médico que se aplica a

todo aquello que se asocia con los hospitales.

• Las infecciones intrahospitalarias son las complicacionesque surgen durante las hospitalizaciones.

• El propósito del control de la infección en los hospitales esla prevención de infecciones intrahospitalarias por mediode la aplicación de los conceptos y métodos de laepidemiología.


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• Ejemplo supremo de la importancia fundamental de laepidemiología para la detección y control de las infeccionesintrahospitalarias trabajo de Ignaz Semmelweis (1844Viena, Austria).

• La Endometritis puerperal (fiebre puerperal),principalmente causada por S. pyogenes ocasionadabaentre 600-800 muertes maternas por año.

• Entre 1846 y 1849, Semmelweis mostró que la tasa demortalidad en una de las dos divisiones del hospital era 10veces mayor que en la otra. La división I, que tenía mayortasa de mortalidad, era la unidad de enseñanza en la que

todos los partos eran atendidos por obstetras y alumnos.


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• En la división II, la atención de todos los partos estaba enmanos de parteras.

• Semmelweis postuló que la diferencia esencial entre las

divisiones I y II era la participación de médicos yestudiantes en las autopsias. A diario se realizaba ladisección de uno o más cadáveres, algunos provenientes delos casos de fiebre puerperal y de otras infecciones.

• El lavado de las manos era superficial. Como contramedida,en 1847 se demandó el lavado de manos con una soluciónde cloro hasta que las manos se sintieran resbalosas yhubiese desaparecido el olor a cadáver.


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• El efecto completo del lavado con cloro se observó alcomparar las tasas de mortalidad en las dos divisiones en

1846 y 1848. La tasa de mortalidad en la división I seredujo al mismo nivel que en la división II y ambas fueronmenores al 2%.


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3. CONTROL DE LAS

INFECCIONESINTRAHOSPITALARIAS


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• Las infecciones que ocurren durante cualquier hospitalización y se adquieren ya sea en lacomunidad o dentro del nosocomio.

•

INFECCIONES ADQUIRIDAS EN LA COMUNIDAD:son aquellas presentes o que se están incubando almomento del ingreso. Ocurren antes del ingreso.Todas las demás se consideran intrahospitalarias.

• Los peligros infecciosos son inherentes alambiente de los hospitales; es allí donde se albergaa los pacientes con infecciones más graves y queson más susceptibles, y donde con frecuencia les

atiende el mismo personal.


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• Los agentes infecciosos responsables de lasinfecciones intrahospitalarias provienen dediversas fuentes, incluyendo la propia flora normalde los pacientes (infecciones endógenas).

• Es posible que la hospitalización conlleve riesgosadicionales por tratamientos que atraviesan lasbarreras defensivas normales.

• La Cirugía, uso de catéteres urinarios ointravenosos y los procedimientos diagnósticosinvasivos pueden hacer que la flora normaltenga acceso a sitios que en general son estériles.


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• Las infecciones en las que la fuente de losmicroorganismos es el hospital más que elpaciente incluyen aquellas derivadas del personal,el ambiente y equipo médico.

Personal delhospital

Ambiente

Instrumentalmédico


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• Los médicos, enfermeras, estudiantes, terapeutas ycualquier otra persona que entre en contacto con elpaciente puede transmitir una infección.

•

La transmisión de un paciente a otro se denominainfección cruzada.

• VEHÍCULO DE TRANSMISIÓN MÁS FRECUENTE falta del lavado de las manos. Otra fuente es el

personal infectado.

• TRANSMISIÓN contacto directo, aunque tambiénpuede ocurrir transmisión aérea.


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•

El aire, las paredes, pisos, ropa blanca y cosas similaresen los hospitales no son estériles, y en consecuencia,pueden ser fuente de organismos que provocaninfecciones intrahospitalarias, pero en general se haexagerado la importancia de esta vía.

Personalinfectado uotra personaque entre encontacto con elpaciente

Paciente-Paciente

Personalportador sano

(S. aureus, S. pyogenes)


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• Con excepción de la cercanía inmediata de unindividuo infectado o de un portador, latransmisión por aire o fomites es mucho menos

importante que la causada por el personal o elequipo.

• Excepciones: ambientes contaminados con M.t u b e r c u l o s i s o suministro de agua conL e g i o n e l la p n e u m o p h i l a.


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Catéteres urinarios Catéteres

vasculares

Respiradores Sangre y productosde la sangre

CONTROL DE INFECCIONES

ASEPSIAPROCEDIMIENTOSDE AISLAMIENTO

ORGANIZACIÓN YPREVENCIÓN

• Quirófano• Pabellones

hospitalarios• Clínica para pacientes

ambulatorios

• Medidas universales• Medidas basadas en la

transmisión

Comité de control deinfecciones (Programas decontrol de infecciones)

Servicio de epidemiología Actividades educativas Vigilancia e investigación de

brotes



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MEDIDAS PARA LA PREVENCIÓN DE INFECCIONES INTRAHOSPITALARIASMEDIDA

HABITACIÓN LAVADO DE

MANOSa

GUANTES BATAS MASCARILLA b ENFERMEDADES

TÍPICASUniversal Luego deretirar losguantes, entrepacientes

Sangre, contactocon líquidos, luegode tocar la piel

Sangre, contactocon líquidos,duranteprocedimientos

Duranteprocedimientos

Todas

Basada en la transmisiónAérea Privada,

presiónnegativa c

Luego de retirar

los guantes, entrepacientes

Ingreso a la

habitación

Ingreso a la

habitación

Ingreso a la

habitación orespirador d

Sarampión, varicela,

tuberculosis d

Por gotas Privada e Luego de retirarlos guantes, entrepacientes

Sangre, contactocon líquidos

Sangre, contactocon líquidos

A 1 metro dedistancia delpaciente

Meningitis, tosferina,peste, influenza

Por

contacto

Privada e Luego de retirar

los guantes, entrepacientes

Ingreso a la

habitación

Contacto con

paciente

____ Diarrea infecciosa f ,

heridas infectadaspor S. aureusa Uso de jabón desinfectante.b Mascarilla quirúrgica estándar, gafas protectoras.c La presión de la habitación debe ser negativa en relación con el área circundante y la circulación debe extraerse a la parte externa deledificio.d Para pacientes con diagnóstico o sospecha de tuberculosis, debe portarse un respirador/mascarilla con filtro especial.e Es posible dejar abierta la puerta, y los pacientes con el mismo organismo pueden compartir habitación.f En particular Clostridium diffcile, Escherichia coli O:157, Shigella, pacientes con incontinencia que elimina rotavirus o hepatitis A por lasheces.


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4. Principios del diagnóstico de las

enfermedades infecciosas por el

laboratorio


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Boleta de petición

Obtención de la muestra

Recogida de la misma y transporte

Toda boleta de petición u orden de laboratorio deberá poseer las cinco áreassiguientes:1. Filiación y datos administrativos, donde se deben especificar el

nombres y apellidos, sexo y edad del paciente, el médico solicitante y elcentro, servicio, o consulta al que pertenezca, así como cualquier otro datode identificación, como el número de cama, de historia clínica, etc.

2. Datos clínicos, como fecha del comienzo de la enfermedad, diagnóstico clínico

de presunción, estado inmunitario del paciente, etc. Todos estos datos son de graninterés para orientar las técnicas que hay que seguir.3. Datos de la muestra, como fecha de la obtención y, en algunos casos, la hora,naturaleza del producto y exacta localización de la toma, así como elprocedimiento de extracción, o si se ha seguido alguna técnica especial (punción

transtraqueal, vesical, etc.)


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Boleta de petición

Obtención de la muestra

Recogida de la misma y transporte

4. Terapéutica seguida: antibióticos, que se han administrado y tiempo desde laúltima toma o inyección. El ideal es que todas las muestras se recolecten antesde empezar un tratamiento antibiótico.5. Área para la solicitud, indicando claramente el tipo o tipos de determinacionesque se desean, y en caso de que se desee la búsqueda de un microorganismo

determinado, se reseñará éste (M. tuberculosis, Mycoplasma,etc.). Muchoslaboratorios añaden una sexta área, en la que se hace constar la fecha y hora deentrada de la muestra en el laboratorio, hecho que ha de tenerse en cuentaespecialmente en las peticiones de urgencia, que en muchos centros poseen unaboleta de distinto color (p.ej. rojo) al de los normales.


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Recogida de la muestra.

Cada tipo de muestra requiere un material estéril para la recogida e

incluso transporte de la misma.

Transporte.Todas las muestras deberán ser enviadas lo más

rápidamente posible al laboratorio.La mayoría de las bacterias resisten bien lastemperaturas bajas, por lo que los productos puedenmantenerse en la nevera unas horas, pero el LCR (elmeningococo es muy sensible al frío), exudados, heces

y muestras de anaerobios no deben ser refrigerados(2º-8ºC). En todos los casos, el envío de la muestradebe evitar la salida (y posible contaminación) delcontenido, por lo que el recipiente debe de cerrarse conseguridad.


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Cuando la viabilidad de las bacterias es muy escasa o la posibilidad dedesecación de la muestra es grande (favoreciéndose la destrucción bacteriana) yla toma no puede realizarse en el mismo laboratorio, se usarán medios detransporte (Cary & Blair, Stuart o Amies), que no son nutritivos, sino quepreservan las bacterias existentes, sobre todo si son escasas, a la vez que

impiden el crecimiento exagerado de otra flora bacteriana no deseada.

Mención especial requiere cualquier tipo de muestras obtenidas a partir deenfermos con presumible o demostrada hepatitis vírica o SIDA, por ser infectivosno sólo el suero, sino todas las secreciones. Las muestras serán debidamente

señalizadas para prevenir la posibilidad de contagio del personal, para ello, enmuchos laboratorios se utilizan etiquetas de color amarillo o rojo, con el fin dehacer más visible su procedencia.


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Tomado de: Microbiology an Introduction. Tortora y col, 2010


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MATERIAL NECESARIO.· Frascos de hemocultivo.

· Compresas de goma.· Jeringas y agujas de punción IV.· Gasas estériles.· Guantes de goma estériles.· Alcohol etílico o isopropílico al 70%.

· Solución Yodada.

OBTENCION DE LA MUESTRA.• Retirar los tapones externos de los frascos.• Desinfectar los tapones de goma con alcohol iodado o con iodóforo, dejándolo secar al menos un minuto.• Localizar por palpación la vena que se va a puncionar. Debe utilizarse una venadistinta para cada extracción. Desinfectar con alcohol una zona de piel de unos 10 cmde diámetro. Se comenzará por el centro y se irán haciendo círculos concéntricos haciael exterior.


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OBTENCION DE LA MUESTRA.

• Repetir el paso anterior pero con el alcoholiodado, dejándolo secar durante un minuto.• Extraer la sangre sin tocar en ningún momentoel campo desinfectado. Si fuera necesario palpar nuevamente la vena se utilizarán guantes de

goma estériles o se desinfectarán los dedos dela misma manera que la piel del paciente.

VOLUMEN DE LA MUESTRA.La cantidad de sangre a introducir en cada frasco viene determinada por el modelo

utilizado en cada hospital, entre 15-20 ml por toma en adultos y 1-3 ml en niños. Comonorma general es adecuado que la sangre mantenga una proporción 1:10 con el mediode cultivo. Es decir, para un frasco de 100 ml, introducir 10 ml. de sangre. En caso deneonatos y niños pequeños en que no se pueden obtener volúmenes grandes desangre es suficiente una cantidad de 1-5 ml, que se introduce en un solo frasco.


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NÚMERO DE MUESTRAS.

Tres hemocultivos por paciente, previos al tratamiento antimicrobiano. El intervaloentre las extracciones debe ser superior a una hora cuando sea posible, pero cuandoexista una gran urgencia en iniciar el tratamiento, este intervalo puede acortarse hasta15 minutos. En caso de sepsis y endocarditis subaguda las extracciones se reparten en24 horas y en caso de que sean los hemocultivos negativos, obtener tres muestrasmás al día siguiente.

TRANSPORTE.

Deben enviarse al laboratorio. Hasta su envíomantener a 35-37ºC; cuando esto no sea posible,mantener a temperatura ambiente. Nunca deberefrigerarse ni congelarse.


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OBTENCION DEL PRODUCTO.La muestra idónea es la primera micción de la mañana, ya que permite la multiplicaciónde bacterias durante la noche.Técnicas para mujeres. La paciente debe quitarse la ropa interior.

Se lavará las manos cuidadosamente con agua y jabón, las enjuagará con agua y lassecará con una toalla limpia. Se separarán los labios mayores y menores, y los mantendrá separados en todomomento hasta que se haya recogido la orina. Con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasándola de delante hacia atrás, serepetirá el proceso un total de 4 veces. Enjuagar cuidadosamente con agua hervida paraeliminar los restos de jabón. Se indicará a la paciente que orine desechando los 20-25 primeros mililitros, tras locual y sin interrumpir la micción, se recogerá el resto de la orina en el recipiente. El frasco debe sujetarse para que no tome contacto con pierna, vulva o ropa delpaciente. Los dedos no deben tocar el borde del frasco o su superficie interior.


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Técnica para hombres.o Lavado de las manos con agua y jabón.

o Retraer completamente el prepucio, que se mantendrá así en todo momento, hastaque se haya recogido la orina.o Limpiar el glande con jabón neutro.o Eliminar los restos de jabón enjuagándolo con agua hervida.o Se pedirá al paciente que orine desechando los primeros 20-25 mililitros para, sin

interrumpir la micción, recogerse el resto de la orina en el recipiente estéril.Técnica para niños.o En niños y niñas mayores la orina se recoge de forma similar a los adultos.o En niños y niñas más pequeños, la orina se recogerá en colectores o bolsas estérilesespecialmente diseñadas para ellos de la siguiente forma:• Lavado cuidadoso de los genitales y área perineal igual que en los adultos.• Colocar la bolsa de plástico o el colector.• Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el niño haya orinado, debenretirarse y enviarse al laboratorio para su procesamiento.• Si la micción no se ha realizado en una hora, se repite la operación colocando unanueva bolsa


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VOLUMEN MINIMO DE LA MUESTRA.Es suficiente un volumen de orina de 5-10 ml.

TRANSPORTE.La orina debe llegar al laboratorio en el plazo de una hora. Cuando estono sea posible debe refrigerarse a 4ºC durante un tiempo máximo de 24horas. El laboratorio debe controlar el transporte, garantizándo que lasmuestras hayan sido refrigeradas desde el momento de su toma,

siendo admisible, si no puede garantizarse el transporte correcto, lautilización de algún conservante (ácido bórico al 2% o el sistemacomercial con bórico-formiato).


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OBTENCIÓN DE LA MUESTRA.- Si son formadas o pastosas se toma una porción delrecipiente donde hayan sido emitidas y se transfieren alsistema elegido para el envío al laboratorio. Seseleccionan zonas donde haya sangre, moco o pus. Noson válidas las muestras contaminadas con orina. Nodebe utilizarse para la recogida papel higiénico, porquesuelen tener sales de bario que inhiben algunas bacteriasenteropatógenas.

VOLUMEN MÍNIMO.Heces formadas o pastosas: al menos 1 ó 2 gr. para virología, añadir de2 a 4 gr. más. Muestras del tamaño de una nuez son muy adecuadaspues permiten realizar la mayoría de las investigaciones posibles.Heces líquidas: entre 5 y 10 ml.


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TRANSPORTE. Para el estudio bacteriológico es suficiente enviar la muestra en un recipiente estéril sise va a procesar en el plazo de 1 ó 2 horas después de su emisión. En caso contrario seremite en un sistema de transporte para bacterias. En ambos casos se mantiene enrefrigeración hasta el procesamiento, para evitar el sobrecrecimiento de la flora normal quepuede enmascarar o destruir a los enteropatógenos. El frío puede afectar la viabilidad deShigella spp.

Para el estudio de toxinas de C. difficile, la muestra se puede mantener hasta 48 horasen refrigeración, congelada a -20ºC se puede mantener indefinidamente. Este tipo de

muestra, preferiblemente sin medio de transporte, es indispensable para el examen enfresco, el ensayo de las toxinas de C. difficile, detección por concentración de huevos oparásitos y estudios virológicos (cultivos, inmunoelectromicroscopía, ELISA,o látex pararotavirus).


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TRANSPORTE.

Es preferible enviar las muestras para estudio virológico sin medio de cultivo, pues este

diluye las partículas virales disminuyendo la sensibilidad. Si su envío se retrasa mucho es

necesario utilizar un medio de transporte. Se enviarán en recipientes colocados en hielo.

Para el estudio de parásitos es útil además, enviar una muestra pequeña en un medio

fijador. Una parte en dos de fijador de alcohol polivinílico.


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OBSERVACIONES.

Las muestras para coprocultivo, deberán tomarse antes de la administración deantimicrobianos o agentes antidiarreicos. Es conveniente también evitar, sobre todo paraestudios parasitológicos la utilización previa de antiácidos y laxantes oleoso, así como de loscompuestos habitualmente utilizados para estudios radiológicos digestivos (bario, bismuto).Indicar siempre el juicio diagnóstico de presunción y si el paciente es menor de un año.

Solicitar las investigaciones especiales explícitamente (C. difficile, C. perfringens, S.aureus, etc.). Si con la primera muestra no se detecta la presencia de enteropatógenos, es necesarioenviar en los días siguientes, dos tomas adicionales. En general, para los estudiosparasitológicos, se deben enviar tres muestras tomadas en diferentes días.

MUESTRAS INADECUADAS. Heces emitidas anteriores a dos horas y queno hayan sido refrigeradas. Las tres tomas realizadas el mismo día.


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FARINGO-AMIGDALINO.

TÉCNICA.Bajo visión directa, con la ayuda de undepresor lingual, se tocará con la torunda entodas las partes con exudado, membranas oinflamación. Se deben frotar las criptas

tonsilares y la faringe posterior. No tocar nuncala mucosa oral, lengua o úvula.

OBSERVACIONES.

Se investigará rutinariamente la presencia de Streptococcusbeta-hemolítico del grupo A (S. pyogenes).En las sospechas de difteria deberán mandarse porciones demembrana, una torunda faríngea y una torunda nasofaríngeapor vía pernasal.


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NASOFARINGE.

Es la muestra indicada para la investigación de Bordetella pertussis.A. MATERIAL NECESARIO.- Torundas flexibles de alginato cálcico.- Para aspirados: Tubo aspirador de Teflón o jeringa y catéter.


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B. TÉCNICA.Frotis: pasar la torunda a través de la narizsuavemente, hasta llegar a la nasofaringe. Hay que

mantener la torunda cerca del septum y suelo de lafosa. Rotar la torunda y extraerla.Aspirado: Aspirar el moco, pasando el tubo deteflón o un catéter conectado a una jeringa por víapernasal, de igual forma que la torunda.

MATERIAL NECESARIO.- Torundas de alginato cálcico flexibles.


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Introducir la torunda unos 2 cm en la nariz, girar suavemente contra la mucosa de la superficie nasal yextraer.

NÚMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN.Las muestras deben procesarse antes de 2 horas.OBSERVACIONES.Los microorganismos encontrados en fosa nasal no tienenpor que ser los mismos que se aíslan en el seno en caso de

sinusitis, por lo que los cultivos de exudados nasales nosirven para el diagnóstico etiológicos de la sinusitis y nopueden sustituir nunca a la punción del seno.


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SENOS PARANASALES.

Se realiza la punción-aspiración de los mismos, lo que suele requerir unespecialista en O.R.L. o personal especializado en dicha técnica.

CAVIDAD ORAL.

Esta muestra se emplea habitualmente para el diagnóstico de candidiasis o de la Anginade Vincent (gingivitis ulcerativa).A. MATERIAL NECESARIO.

- Torundas de algodón sin medio de transporte.- Porta objetos limpios.TÉCNICA.- Se pedirá al paciente que se enjuague la boca con agua.- Tras enjuagar la boca, frotar o raspar las lesiones con una espátula o con una torunda yhacer una extensión sobre un porta.

- Se repetirá la toma con una segunda torunda para cultivo (sólo para la investigación deCandida albicans).

NÚMERO DE MUESTRAS Y/O VOLUMEN.1 extensión en porta + 1 torunda.TRANSPORTE Y CONSERVACION.

No requiere medidas especiales para su transporte y conservación.


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TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR.

1.Esputo, esputo inducido.2.Jugo gástrico.3.Aspirado traqueobronquial simple.4.Punción transtraqueal (P.T.T.).5.Muestras obtenidas a través de fibrobroncoscopia.6. Muestras obtenidas por abordaje percutáneo.7. Muestras extrapulmonares: Líquido pleural, Biopsia pleural,

sangre venosa.

En las condiciones habituales de la clínica diaria, no es una muestrarepresentativa de la situación existente en el tracto respiratorio inferior por su

mezcla con secreciones procedentes de todo el arbol traqueobronquial y con laflora saprófita de la orofaringe. No obstante es un método fácil y rápido cuyautilidad o relación entre resultado obtenido y verdadera etiología depende engran medida de su correcta obtención, control de calidad antes de iniciar suprocesamiento, tipo de agente que se pretenda detectar y valoración adecuada

del resultado.


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TÉCNICA O METODOLOGÍA DE LA OBTENCIÓN DELPRODUCTO.

Enjuagar la boca con agua destilada estéril o solución salina.

Obtener el esputo tras una expectoración profunda,preferentemente matinal.

De no producirse expectoración espontánea, puede inducirse elesputo con nebulizaciones de suero fisiológico estéril (15 ml durante

10 minutos), siendo útil además realizar un drenaje postural ofisioterapia respiratoria.


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MUESTRAS DEL TRACTO GENITALFEMENINO.

1. Exudados vaginales.2. Exudados cervicales.3. Exudados uretrales.4. Exudados rectales.5. Endometrios.

6. Culdocentesis.7. Trompas y ovarios.8. Vulva.9. Lesiones cutáneomucosas para campooscuro (chancros).

10. Ganglios linfáticos inguinales.11. Líquido amniótico.12. Productos de la concepción.

MUESTRAS DEL TRACTO GENITALMASCULINO.1. Exudados uretrales.2. Exudados rectales.3. Ganglios linfáticos inguinales.4. Lesiones de campo oscuro (chancros).5. Muestras para el estudio de la prostatitis


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Tinción de tipo diferencial que debe su nombre al bacteriólogodanés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884.

Coloración de Gram

Coloración de Gram


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Los colorantes básicos consisten de cationes teñidos con un aniónincoloro (ej. Cloruro – de azul de metileno+); ocurre lo contrario con loscolorantes ácidos (ej. Eosinato- de sodio+). Las células bacterianas sonricas en ácidos nucleicos y portan cargas negativas en los grupos fosfato.Ésta se combina con las cargas positivas de los colorantes básicos.

Los colorantes ácidos no tiñen a lascélulas bacterianas y por tanto puedenutilizarse para teñir el material de fondo afin de proporcionar un contraste de color.

La coloración inicia con la aplicación de uncolorante básico, violeta de genciana.

Coloración de Gram


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A continuación se aplica una solución de yodo; todas las bacterias se tiñen decolor azul en este punto del procedimiento. Luego la célula se trata con alcohol.

Las células grampositivas que conservan el complejo de violeta de genciana-yodoadquieren un color morado y las células gramnegativas se decoloran por completocon la adición de alcohol. Como último paso se aplica otro colorante (como rojo desafranina) de forma que las células gramnegativas decoloradas adquieran un color contraste; las células grampositivas adquieren un color violáceo.


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Medios de cultivo

• El componente nutritivo de un medio estádiseñado para satisfacer los requisitos decrecimiento del organismo a fin de permitir su aislamiento y propagación.

MEDIOSNUTRITIVOS

• Se utilizan cuando se buscan organismospatogénicos específicos en sitios con unaflora normal extensa.

MEDIOSSELECTIVOS

•

Contienen sustancias diseñadas paramostrar las características bioquímicas oúnicas de otro tipo de patógenos o gruposde organismos (carbohidratos + indicador de pH )

MEDIOSINDICADORES

Medios de cultivo


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Medios de cultivo


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Los complejos antígeno-anticuerpo se pueden detectar directamente por técnicas

de precipitación o marcando el anticuerpo con una sonda radiactiva, fluorescente o

enzimática, o indirectamente por la medición de una reacción frente al anticuerpo,como la fijación del complemento. La mayoría de los procedimientos de detección e

identificación de antígenos también se pueden utilizar para evaluar

concentraciones de anticuerpos desde el punto de vista serológico.

INMUNOFLUORESCENCIA

ENZIMOINMUNOANÁLISIS(EIA)


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En la inmunofluorescencia directa una

molécula fluorescente se une de formacovalente al anticuerpo. En lainmunofluorescencia indirecta se utilizaun segundo anticuerpo fluorescenteespecífico para el anticuerpo primario con

el fin de detectar el anticuerpo antivíricoprimario y localizar el antígeno. En el EIA,una enzima como la peroxidasa de rábanopicante o la fosfatasa alcalina se conjugancon el anticuerpo y convierten un sustratoen un cromóforo para marcar el antígeno.

ELISA


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ELISA

WESTERN

El ELISA utiliza un antígeno inmovilizado en una superficie, una bolita oun filtro de plástico con el objeto de capturar y separar un anticuerpoespecífico de otros anticuerpos presentes en el suero de un paciente.

El anticuerpo del paciente así fijado se detecta posteriormente pormedio de un anticuerpo antihumano unido por un enlace covalente auna enzima (p. ej., peroxidasa de rábano picante, fosfatasa alcalina, ß-galactosidasa). Se cuantifica por espectrofotometría en función de la intensidad del

color producido como respuesta a la conversión de un sustratoadecuado por la enzima. Se puede determinar la concentración real del anticuerpo específicopor comparación con la reactividad de soluciones estándar deanticuerpos humanos.

El ANÁLISIS DE TRANSFERENCIA DE WESTERN es


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una variante del análisis ELISA. Esta técnicatransfiere proteínas víricas separadas porelectroforesis según su peso molecular o su carga aun papel de filtro (p. ej., nitrocelulosa, nailon).Cuando se exponen al suero del paciente, lasproteínas inmovilizadas capturan los anticuerposantivíricos específicos y se visualizan medianteanticuerpos antihumanos conjugados con enzimas.Esta técnica muestra las proteínas reconocidas por

el suero del paciente. El análisis de transferencia deWestern se usa para confirmar los resultados delanálisis ELISA en sujetos con sospecha de infecciónpor el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).


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PRODUCTOS GENÉTICOS PRINCIPALES DE LOS HIV-1 Y HIV-2

Gen Descripción de los

productos genéticos

Productosgenéticos de

HIV-1 HIV-2

Core (gag)Precursor of Gag proteinCapsid proteinMatrix protein

P55P24P17

P53-55P26P16

Polymerase(pol)

RT componentRT componentEndonuclease component

P66P51P32

P68

P33

Envelope (env)

Precursor of Env glycoprotein

Outer Env glycoproteinTransmembrane Env glycoprotein

gp160

gp120gp41

gp125

gp105gp36

Tomado de: Versalovic J, Carroll K, JorgensenJ, Funke G, Landry ML and Warnock D.Manual of clinical microbiology. ASM Press.10 th edition. 2011.


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La respuesta inmunitaria humoral de un paciente proporciona unhistorial de sus infecciones. La serología se emplea con el fin de: Identificar el agente responsable de la infección, Evaluar la evolución de una infección o Determinar la naturaleza de la infección: infección primaria frente areinfección, aguda frente a crónica.

Los datos serológicos de unainfección se obtienen a partirdel tipo y el título de losanticuerpos y la identidad delas dianas antigénicas. Estas

pruebas se usan paraidentificar virus y otrosagentes difíciles de aislar ycultivar en el laboratorio oque causan enfermedades deevolución más lenta.


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Movimientos poblacionales y la intrusión de los seres humanos yanimales domésticos en nuevos hábitat, en particular las selvas

tropicales. Deforestación, con desarrollo de nuevas tierras de cultivo y exposición

de los agricultores y animales domésticos a nuevos artrópodos ypatógenos primarios.

Irrigación, en especial sistemas primitivos, que no controlan losartrópodos y organismos entéricos.

Urbanización descontrolada, con poblaciones de vectores que sereproducen en agua estancada.


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Aumento en los viajes aéreos a grandes distancias, concontacto o transporte de vectores artrópodos y patógenosprimarios.

Agitación social, guerras civiles y desastres naturalesimportantes, que conducen a hambrunas y alteración delos sistemas sanitarios, programas de inmunización, etc.

Cambio climático mundial.

Evolución microbiana, que conduce a selección natural deagentes multiresistentes. En algunos casos estos cambiospueden acelerarse en forma considerable por el usoindiscriminado de agentes antimicrobianos.

Ejemplos de enfermedades infecciosas en


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je p os de e e edades ecc osas esurgimiento o resurgimiento



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Las enfermedades infecciosas en seres humanos pueden ser producto depatógenos exclusivos de los humanos (Shigella), por organismosambientales(Legionella pneumophila) o por organismos que tienen sureservorio primario en los animales (Salmonella).

INFECCIONES NO COMUNICABLES:No se transmiten de una persona a otra.1. Infecciones derivadas de la flora normal

del paciente.2. Causadas por ingestión de toxinas

preformadas (Botulismo)

3. Por ciertos organismos que seencuentran en el ambiente (Gangrenagaseosa por Clostridium).

4. Algunas infecciones zoonóticas (Rabia yBrucelosis) no se transmiten entrehumanos.

INFECCIONES COMUNICABLES:

Requieren que un organismo seacapaz de dejar el cuerpo en unaforma que sea directamenteinfecciosa o que pueda volverse

infecciosa en un ambiente adecuado.Ejm: Influenza,Endémica: presencia constanteEpidémica: brotes localizadosPandémica: epidemia regional oglobal generalizada.

CC Ó


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INFECCIÓN

Implica la multiplicación del organismo dentro osobre el hospedador y que quizá no sea

evidente; por ejemplo, durante el período latenteo de incubación cuando ocurre poca o ninguna

replicación. Ejm: Virus del Herpes.

Representa una respuesta o daño clínicamentemanifiesto en el hospedador como resultado de lainfección.

ENFERMEDAD

• La infección puede producir poca o ninguna enfermedad.• Los portadores pueden ser asintomáticos, pero infecciosos para otros.


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El período de incubación es eltiempo entre la exposición alorganismo y la aparición de losprimeros síntomas de la

enfermedad.

• Los períodos de incubación

van de unos cuantos díashasta varios meses.

La comunicabilidad de unaenfermedad en la que el organismose arroja en las secreciones puede

ocurrir principalmente durante elperíodo de incubación.

• En otras infecciones, elcurso de la enfermedad es

corto, pero es posible que elhospedador excrete elorganismo durante períodosextensos.


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CONTACTO DIRECTO

TRANSMISIÓN EN AEROSOL

VÍA INDIRECTA OBJETOS O

MATERIALES INANIMADOS)

• TRANSMISIÓNHORIZONTAL= directa oindirecta, de una persona aotra

• TRANSMISIÓN VERTICAL=de la madre al feto

CONTAGIO POR VÍAS

RESPIRATORIAS

• Grado y método depropulsión de lassecreciones de la boca y

naríz.

• Tamaño de las gotas en elaerosol

• Resistencia del agente

infeccioso a la desecación einactivación a causa de laluz uv.

CONTAGIO POR VÍAS


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RESPIRATORIAS

• En el aire en reposo, una partícula de 100 µm de diámetro requiere sólosegundos para caer a una distancia equivalente a la altura de unahabitación.

• Una partícula de 10 µm permanece en el aire durante cerca de 20 minutos y

las partículas más pequeñas se mantienen incluso más tiempo en el aire.• Cuando se inhalan, las partículas con un diámetro de 6 µm o más por lo

general quedan atrapadas en la mucosa de los cornetes nasales, en tantoque las partículas de 0,6 a 5,0 µm se adhieren a sitios de la mucosa endiversos niveles a lo largo de las vías respiratorias superiores e inferiores y

pueden dar inicio a una infección. (Ejm: M. tuberculosis).• Las secreciones respiratorias se transmiten en las manos o en objetos

inanimados (fómites) y pueden llegar de este modo a las vías respiratoriasde otros individuos.

CONTAGIO POR LA


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SALIVA

• Transmisión de manera directa

mediante el contacto con salivainfectada a través del beso.

• Ejm. Herpes simple yMononucleosis.

• Lavarse las manos es de especialimportancia para reducir el riesgode propagación.

CONTAGIO

FECAL-ORAL

• Implica propagación directa ode dedos a boca, el uso deheces humanas comofertilizante o la contaminación

fecal de alimentos o agua.• La reducción del ácido

clorhídrico gástrico puedefacilitar las infeccionesentéricas.

TRANSFERENCIA DE


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PIEL A PIEL

• Ocurre con una variedad de

infecciones en las que la piel es elportal de acceso (Ejm: T. pallidum,S. pyogenes y hongosdermatófitos).

• En la mayoría de los casos es

posible que esté implicada unacortadura inadvertida en el epiteliocomo entrada de la infección.

• La transmisión de piel a pielocurre en general por abrasionesen la epidermis, las cuales quizápasen inadvertidas.

TRANSMISIÓN

SANGUÍNEA

• La transmisión sanguínea de lainfección a través de insectosvectores requiere de un período

de multiplicación o alteracióndentro de un insecto vector antesde que el organismo puedainfectar a otro hospedador humano (Ejm. Paludismo)

•

Transmisión directa de persona apersona a través de la sangre(transfusiones sanguíneas yproductos de la sangre,autoadministración de drogasilícitas) (Ejm: VHB, VHC, HIV).

TRANSMISIÓN


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GENITAL

• El contagio puede ocurrir

entre una pareja sexual o demadre a lactante durante elparto.

• Factores: persistencia,elevadas tasas de portaciónasintomática y frecuenciaen la recurrencia deorganismos como C.trachomatis, CMV, VHS y N.gonorrhoeae.

TRANSMISIÓN

OCULAR

• Las infecciones de laconjuntiva pueden ocurrirde manera epidémica o

endémica (Ejm: Adenovirus,Haemophilus, Chlamydia).

• Transmisión: contactodirecto a través de equipooftalmológico o por

secreciones transmitidas enlas manos o fómites comotoallas.

TRANSMISIÓN


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ZOONÓTICA

• Algunas zoonosis se contraen

en forma directa por lamordedura del animal, otras setransmiten por vectores (enespecial artrópodos).

TRANSMISIÓN

VERTICAL

• Puede ocurrir a través de laplacenta, durante el parto o

por medio de la lechematerna (Ejm: Rubéola, S.agalactiae, C. trachomatis,

N. gonorrhoeae, VHS, CMV ).


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El PRIMER PRINCIPIO DEL CONTROL

ES EL RECONOCIMIENTO DE LAEXISTENCIA DE UNA EPIDEMIA ATRAVÉS DE ACTIVIDADES DEVIGILANCIA CONTÍNUA (Informesrutinarios a las secretarías odepartamentos de salud y registrosde ausentismo escolar y laboral)

• Es obligatorio identificar alagente causal e iniciar losestudios para determinar lavía de transmisión.

Después deben adoptarse medidaspara controlar el contagio y eldesarrollo de infección adicional.

1. Bloquear en lo posible la vía de transmisión.2. Identificar, tratar y en caso necesario, aislar a losindividuos infectados y a los portadores.

3. Elevar el nivel de inmunidad en la población noafectada a través de inmunización.

4. Utilizar en forma selectiva la profilaxis

farmacológica para los sujetos o poblaciones enriesgo específico de infección, como en lasepidemias de infección por meningococo.

5. Corregir las condiciones como el hacinamiento ola contaminación de los acuíferos que hanconducido a la epidemia o que han facilitado latransferencia.


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La inmunización puede ser activa, conestimulación de los mecanismos

inmunitarios del organismo a través dela administración de una vacuna, opasiva, a través de la administración deplasma o globulna que contengaanticuerpos preformados contra unagente específico.

• Las vacunas de organismos vivosproporcionan en generalinmunidad humoral tanto local

como duradera.• Las vacunas con organismos

muertos o con subunidades deéstos, proporcionaninmunogenicidad sin infectividad

(Influenza y toxoide tetánico).

La inmunización activa conorganismos vivos atenuadosproduce en general una enfermedadsubclínica o leve

• La inmunización es elmétodo más eficaz para darprotección a los individuos ycomunidades contra

muchas enfermedadesepidémicas.


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Tema 2. Naturaleza de La Infección2

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