Studi Kasus Validasi Mikro (Coliform)
-
Upload
purnama-pupung-hadi -
Category
Documents
-
view
89 -
download
25
description
Transcript of Studi Kasus Validasi Mikro (Coliform)
S S SSTUDI KASUS
VERIFIKASI ANALISIS COLIFORM PADA AMDK DENGAN
METODE MPNMETODE MPN
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 1
Kasus Suatu Laboratorium akan menggunakan
metode sesuai dengan SNI 19-2897-1992 butir 2.2 untuk pengujian Coliform
Metode tersebut akan digunakan untuk analisis rutin pada contoh AMDK
Sebelum digunakan maka harus dicek dahulu apakah metode tersebut layak dan dapatapakah metode tersebut layak dan dapat digunakan untuk matriks contoh dan lab tersebut
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 2
tersebut
Metode Pengujian Sesuai dengan SNI 19-2897-1992 butir 2.21 Pipet 10 ml dari masing-masing dalam 5 tabung yang berisi 10 1. Pipet 10 ml dari masing masing dalam 5 tabung yang berisi 10
ml LSTB double streght yang didalamnya terdapat tabung durham terbalik
2. Pipet masing-masing 1 ml dan 0.1 ml contoh kedalam 5 tabung p g g gyang kedua dan ketiga yang berisi 10 ml LSTB single streght yang didalamnya terdapat tabung durham terbalik
3. Inkubasi semua tabung dalam inkubator pada suhu 36 ± 1C s l 24 48 jselama 24-48 jam
4. Setelah 24 jam, catat jumlah tabung yang membentuk gas pada masing-masing pengenceran dan simpan lagi tabung yang tidak membentuk gas dalam inkubator pada suhu 36 ± 1C tidak membentuk gas dalam inkubator pada suhu 36 ± 1 C selama 24 jam
5. Kemudian catat tabung yang membentuk Gas
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 3
Uji Penegasan
Pindahkan sebanyak 1 ose dari tiap tabung yg membentuk gas pada media LSTB ke dalam tabung yang berisi 10 ml BGLB.
Masukkan semua tabung kedalam inkubator pad suhu 36±1°C selama 24-48 jam. Adanya gas pada tabung BGLB memperkuat adanya bakteri coliform dalam contoh
Catat jumlah tabung yang membentuk gas
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 4
Bakteri Coliform (MPN 5 Tabung)
+ 10 mL sampel p+ 10 mL LSTB (DS)
+ 1 mL sampel
Sampel
+ 1 mL sampel + 10 mL LSTB (SS)
Inkubasi 36oC
+ 0,1 mL sampel + 10 mL LSTB(SS)
24-48 jam
Catat jumlahtabung yangmembentuk gas
Uji Penegasan
Tabung yang membentuk gas
1 ose (sengkelit) + 10 mL BGLBB
Inkubasi 36 1oC
Catat jumlah tabung yang
membentuk gas
24-48 jamtabung yang membentuk gas
Hitung jumlah bakteri berdasarkan
t b l MPN i 5
LSTB = Lauryl Sulfate Tryptose BrothBGLBB = Brilliant Green Lactose Bile Broth
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 5
tabel MPN seri 5 tabung
Metode Pengujian
Prosedur dilakukan menurut diatas Metode tidak mengalami perubahan
dalam hal media peralatan maupundalam hal media, peralatan maupun cara kerja
VERIFIKASIM-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 6
Verifikasi Metode
Kriteria: - Sensitifitas- Spesifisitas- Spesifisitas- False positif rate
F l tif t- False negatif rateConfidence limit 95%
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 7
Verifikasi Metode
SampelSa pe- Sampel rutin- Sampel rutin yang dispike- Kultur bakteri (satu strain atau lebih)Kultur bakteri (satu strain atau lebih)
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 8
Verifikasi Metode Prosedur
Persiapkan contoh sesuai prosedur (dalam tingkat- Persiapkan contoh sesuai prosedur (dalam tingkat konsentrasi berbeda)
- dikerjakan oleh analis yang berbeda misal: 1 analisdikerjakan oleh analis yang berbeda misal: 1 analis 15 x pengulangan jadi 2 analis ada 30 x pengulangantotal pengerjaan 450 tabung
- Inokulasikan contoh pada media atau tabung-tabung pertumbuhanHit j l h itif d tif- Hitung jumlah positif dan negatif
- Konfirmasi dgn uji kimia untuk tabung yg positif
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 9
Verifikasi Metode Hasil Analisa
Tabung negatif 50 tabung- Tabung negatif 50 tabung- Tabung positif pada LSTB 400 tbg
Konfirmasi pada BGLB
Positif ?Positif..?
False Negatif…?
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 10
Verifikasi Metode Hasil Analisis
Verifikasi Metode
S CSusu CairKonfirmasi
Dugaan
positif negatif
Positif A.Positif400 tbg
B. False Negatif0 tbg
Negatif C False positif D NegatifNegatif C. False positif0 tbg
D. Negatif50 tbg
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 11
Verifikasi Metode
PERHITUNGAN
Sensitifitas = 400/(400+0) X 100 = 100 %
S ifit 50/(50+0) 100 100 %
Metode Baik
Spesifitas = 50/(50+0) x 100 = 100 %
False positive rate = 0
False negative rate = 0
E = (400+50/450) x 100 = 100 %E = (400+50/450) x 100 = 100 %
Jumlah tabung = 450 tabung
M-BRIO Training Proprietary - dilarang menggandakan dalam bentuk apapun tanpa ijin tertulis dari PT. Embrio Biotekindo 12