Streptococcus pyogenes およびA群多糖体抗原を有...

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平成18年11月20日

A 群レンサ球菌迅速診断キットの基礎的検討

― Streptococcus pyogenesおよびA群多糖体抗原を有する

その他の Streptococcus spp.を対象として―1）大阪市立総合医療センター中央臨床検査部，2）大阪府立公衆衛生研究所微生物課

光野典子１）播智宏１）玉川信吉１）糸井壽一１）

池田英治１）濱崎和子１）勝川千尋２）奥山道子１）

（平成 18 年 2 月 1 日受付）（平成 18 年 7 月 18 日受理）

Key words : Streptococcus pyogenes , Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis , rapid diagnosis

要旨現在国内で入手可能な 8社のA群レンサ球菌迅速診断キットについて，同一条件下で基礎的検討を行っ

た．検討を行ったキットはイムノクロマトグラフィーを原理とする，QuickVue Dipstick Strep A（住友製薬バイオメディカル），TESTPACK Plus STREP A（ABOTT JAPAN CO.），CLEAVIEW STREP A（日本シェーリング），QuickVue STREP A（和光純薬工業），ImmunoCard STAT! STREP A（TFB），DIPSTICK‘Eiken’STREP A（栄研化学），Rapid Testa Strep A（第一化学薬品），StatCheck Strep A（カイノス）である．検出感度試験では，最も高感度であり，供試した S. pyogenes 5 株すべてにおいて 1.0×105CFU�mL（1.0×104CFU�test）まで検出可能であったのはQuickVue Dipstick Strep A，TESTPACK Plus STREP A，Rapid Testa Strep A，StatCheck Strep Aの 4キットであった．また比較試験として，S. pyogenes以外でA群多糖体抗原を有するAnginosus group と S. dysgalactiae subsp. equisimilisについても，S. pyogenesと同程度の検出感度を認めた．その中でも S. dysgalactiae subsp. equisimilisは，血液寒天培地上で S. pyogenesとよく似たコロニーを形成し，バシトラシン試験も陽性であることから，同定には PYR試験など生化学的性状の確認が必要であると考えられる．中でもA群を持つ S. dysgalactiae subsp. equisimilisについては近年G群レンサ球菌による劇症型レンサ球菌感染症が増加していることもあり，これらの確認が重要である．

〔感染症誌 80：665～673，2006〕

序文Streptococcus pyogenes（A群溶血性レンサ球菌：以

下，S. pyogenes）はヒトに咽頭炎，扁桃炎，蜂窩織炎，膿痂疹などの化膿性疾患を引き起こす原因菌として知られ，特に小児の咽頭炎の原因菌として今尚重要である．また，本菌による感染症で特徴的なことは，適切に診断，抗菌薬治療を行わないと，続発症として急性糸球体腎炎，リウマチ熱などを引き起こすことがあるということである．そのため，A群溶血性レンサ球菌 S. pyogenesによる感染症を迅速かつ正確に診断することが重要である．

A群レンサ球菌迅速診断キット（以下，A群迅速診断キット）は免疫学的手法を用いた検査法で，操作が簡便で数分間で結果を判定できるため，開業医を中心とした外来患者の検査として普及している．わが国では 1984 年に導入されて以降，次々と新しいキットが開発され，様々な比較検討，評価が報告されている１）～６）．しかし多くが 2キット間の検討であるため，複数のキットを直接比較することは困難であった．そこで今回われわれは，現在国内で入手可能な 8社

のキットに関して，同一条件下で検出感度試験と特異性試験を実施し，基礎的検討を行った．また S. pyo-

genesの外に 1997 年 Bert ら７）が初めて報告し，わが国でも報告がある８）９）A群多糖体抗原を有する S. dysga-

lactiae subsp. equisimilisや，従来から S. pyogenes以外でA群多糖体抗原を有する菌株の存在も知られてい

原著

別刷請求先：（〒534―0021）大阪市都島区都島本通 2丁目 13番 22 号大阪市立総合医療センター中央臨床検査部

光野典子

光野典子他666

感染症学雑誌第80巻第 6号

Table 1 Strains evaluated

sourceT typeHemolysisLancefield’ s groupStrains

throatT-1 βAStreptococcus pyogenes（0304-1265）throatT-2 βAStreptococcus pyogenes（0309-610）throatT-28βAStreptococcus pyogenes（0312-22）throatT-4 βAStreptococcus pyogenes（0406-611）throatT-12βAStreptococcus pyogenes（0406-1254）bloodβBStreptococcus agalactiae（0402-2658）throatβCStreptococcus anginosus（2003X-3）throatβFStreptococcus constellatus（SM2004-2）throatβCStreptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（2003C-V1）throatβGStreptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（2003G-1）throatαAStreptococcus anginosus（SM2003-1）throatβAStreptococcus constellatus（SM2004-1）necrosisβAStreptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（2003X-1）bloodβAStreptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（0402-2366）

るAnginosus group（Streptococcus milleri group）との反応性の比較も併せて検討した．

対象と方法1．供試菌株検出感度試験については，2003 年 4 月～2004 年 6

月に当院小児科より提出された咽頭拭い液より検出された菌株のうち，この間の主要流行菌型であった，T1，T2，T4，T12，T28 型の S. pyogenes 5 株を供試した．特異性試験にはA群溶血性レンサ球菌以外の溶血性レンサ球菌である臨床由来の S. agalactiae（Group Bstreptococcus），S. anginosus（Group C streptococ-cus），S. constellatus（Group F streptococcus）それぞれ 1株，S. dysgalactiae subsp. equisimilis 2 株（GroupC streptococcus 1 株および Group G streptococcus 1株）の合計 5株を用いた．さらに S. pyogenes以外でA群多糖体抗原を有する臨床由来の S. anginosus 1株，S. constellatus 1 株，S. dysgalactiae subsp. equisimilis

2 株の合計 4株について比較試験を実施した．供試菌株の概要をTable 1に示した．2．A群迅速診断キットイムノクロマトグラフィーを原理とするクイック

ビューディップスティックストレップA（QuickVueDipstick Strep A，販売元：住友製薬バイオメディカル），ストレップAテストパック・プラス（TEST-PACK Plus STREP A，販売元：ABOTT JAPANCO.），クリアビューストレップA（CLEAVIEWSTREP A，販売元：日本シェーリング），クイックビューストレップA（QuickVue STREP A，販売元：和光純薬工業），イムノカード STストレップA（Im-munoCard STAT! STREP A，販売元：TFB），ディップスティック‘栄研’ストレプトA（DIPSTICK‘Eiken’STREP A，販売元：栄研化学），ラピッドテスタストレップA（Rapid Testa Strep A，販売元：

第一化学薬品），スタットチェックストレップA（StatCheck Strep A，販売元：カイノス）の計 8社のキットを使用し，取扱い説明書に従い検査を実施した．結果判定はコントロールに対し，同程度以上の発色を呈した場合に強陽性（＋＋），薄いが発色が認められる場合に弱陽性（＋），痕跡程度の場合は判定不能（＋－）とした．各キットの概要についてはTable2に示した．3．方法1）検出感度試験：S. pyogenes 5 株をヒツジ血液寒

天培地で 37℃，20 時間，5％炭酸ガス培養後，滅菌生理食塩液にて 1.0×106，3.0×105，1.0×105，3.0×104，1.0×104，3.0×103，1.0×103CFU�mLの希釈系列を作成し，その 100µL（それぞれ 1.0×105，3.0×104，1.0×104，3.0×103，1.0×103，3.0×102，1.0×102CFU�test）をサンプルとした．2）特異性試験：上記と同様に培養したA群溶血性

レンサ球菌以外の溶血性レンサ球菌 5株について，滅菌生理食塩液にて 1.0×106CFU�mLに調整し，その100µL（1.0×105CFU�test）をサンプルとした．3） S. pyogenes以外でA群多糖体抗原を有する菌

の比較試験：上記と同様に培養した 4株について，滅菌生理食塩液にて検出感度試験と同様の希釈系列を作成し，その 100µL をサンプルとした．4．菌の同定検出感度試験に用いた S. pyogenes 5 株および S.

pyogenes以外でA群多糖体抗原を有する菌 4株，C群およびG群 S. dysgalactiae subsp. equisimilisそれぞれ 1株について，ラピッド IDストレップアピ（日本ビオメリュー）にて同定を実施した．またバシトラシン感受性はバシトラシンディスク‘栄研’（栄研化学）を用い，群別試験はストレプト LA「生研」（デンカ生研）を，T型別試験はT型別用免疫血清「生研」（デ

A群レンサ球菌迅速診断キットの基礎的検討 667


Table 2 Comparison of 8 rapid diagnostic kits for detecting group A streptococcus with immunochromatographical method

StatCheck

Strep A

（KAINOS Laboratories,

Inc.）

Rapid Testa

Strep A

（Daiichi Pure Chemical

Co., Ltd.）

DIPSTICK

Eiken’

STREP A

（Eiken Chemical

Co., Ltd.）

ImmunoCard

STAT!

STREP A

（TFB, INC.）

Quick Vue

STREP A

（Wako Pure Chemical

Industries, Ltd）　

CLEAVIEW

STREP A

（Nihon Schering

K. K.）

TESTPACK

Plus

STREP A

（ABBOTT JAPAN

Co., Ltd）

Quick Vue

Dipstick

Strep A

（Sumitomo Seiyaku

Biomedical Co., Ltd.）

6 7

6 6

5 7

6 6

total required time（min）

1 2

1 1

― 2

1 1

extraction time（min）

5 5

5 5

5 5

5 5

reaction time（min）

2 2

2 2

2 3

3 2

number of reagents

（mix in the ample）

（mix in the ample）

2525

2030

1010

2025

packing unit（test）

strip type

strip type

strip type

strip type

plate type

card type

plate type

strip type

shape

2412

1818

1424

（8）

12expiraction（month）

2～30

15～30

2～30

2～30

room temperature

2～30

2～30

1～30

storage（℃）

ンカ生研）を用いた．成績

1．検出感度試験5株中 3株以上で陽性を示した最小濃度を各キット

の検出感度として判断した場合，3.0×104CFU�mL（3.0×103CFU�test）まで陽性を示し，最も高感度であったのはクイックビューディップスティックストレップA（4�5 株），ラピッドテスタストレップA（4�5 株），ストレップAテストパック・プラス（3�5 株），スタットチェックストレップA（3�5 株）であった．次いで 1.0×105CFU�mL（1.0×104CFU�test）まで陽性を示したのはクイックビューストレップA（4�5株），イムノカード STストレップA（4�5 株），クリアビューストレップA（3�5 株）であった．最も低感度であったのはディップスティック‘栄研’ストレプトAで，3.0×105CFU�mL（4�5 株）まで陽性であった（Table 3）．以上の検出感度試験については再現性を確認した．2．特異性試験A群以外の溶血性レンサ球菌 5株では，8種のキッ

トはいずれも 1.0×106CFU�mL（1.0×105CFU�test）において陰性であった（Table 4）．3． S. pyogenes以外でA群多糖体抗原を有する溶

血性レンサ球菌の比較試験菌株間に若干の差があったものの 3.0×104CFU�mL

（3.0×103CFU�test）ないし 1.0×105CFU�mL（1.0×104

CFU�test）以上で陽性であり，キット間の感度の違いは検出感度試験と同様の傾向でみられた（Table5）．以上の検出感度試験については再現性を確認した．4．供試菌株の性状の比較検出感度試験に用いたA群多糖体抗原を有する菌

9株，またC，G群 S. dysgalactiae subsp. equisimilis

それぞれ 1株の生化学的性状は多くの項目で同じであったが，PYR試験は S. pyogenesのみ陽性であり，Voges-Proskauer（VP）試験は S. anginosus，S. constel-

latusのみが陽性であった．バシトラシン試験は，すべての S. pyogenesと今回供試したA群およびG群 S.

dysgalactiae subsp. equisimilisで陽性（sensitive）であった．

S. dysgalactiae subsp. equisimilis については，多糖体抗原の違いによる生化学的性状の差異はバシトラシン試験以外には認められなかった．

考察S. pyogenesは健康小児の咽頭からも 5～20％程度

検出され１０），かならずしも検出感度が高いキットが臨床上有用な検出キットであるとは判断できない可能性がある．また患者の免疫状態，菌の病原性など，感染，

光野典子他668


Table 3 Comparison of sensitivity（CFU/mL）of 8 rapid diagnostic kits for detecting group A streptococcus to Streptococcus pyo-

genes isolated from clinical source

Streptococcus pyogenes（0304-1265）T-1

1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－＋－＋＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）

－－－＋－＋＋＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）

－－－－＋－＋－＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）

－－－－＋－＋＋＋QuickVue STREP A（Wako Pure Chemical Industries, Ltd）

－－－－＋－＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）

－－－－－＋－＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）

－－－＋－＋＋＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）

－－－＋－＋＋＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）


1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－－＋＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）

－－－－＋－＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）

－－－－－＋－＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）

－－－－－＋－＋＋QuickVue STREP A（Wako Pure Chemical Industries, Ltd）

－－－－－＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）



－－－－＋－＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）


1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit


－－－－＋－＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）

－－－－－＋－＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）


－－－－＋－＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）

－－－－－－＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）

－－－－＋＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）

－－－－＋－＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）


1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－＋＋＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）


－－－－＋－＋＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）


－－－－＋＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）


－－－＋＋＋＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）



1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit



－－－－＋－＋＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）


－－－＋－＋＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）

－－－－＋－＋＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）



unit：CFU（colony forming unit） /ml

＋＋：Strong-positive

＋：Positive

＋－：The trace at the test band position were observed

－：Negative



Table 4 Reaction of the evalution of β-hemolytic streptococcal strains other than Group A streptococcus（1×106 CFU/mL）with 8 rapid diagnostic kits for detecting group A streptococcus

StatCheck

Strep A

（KAINOS

Laboratories,

Inc.）

Rapid Testa

Strep A

（Daiichi Pure

Chemical

Co., Ltd.）

DIPSTICK

Eiken’

STREP A

（Eiken Chemi-

cal Co., Ltd.）

ImmunoCard

STAT!

STREP A

（TFB, INC.）

Quick Vue

STREP A

（Wako Pure

Chemical

Industries, Ltd）

CLEAVIEW

STREP A

（Nihon Schering

K. K.）

TESTPACK

Plus

STREP A

（ABBOTT JA-

PAN Co., Ltd）

Quick Vue

Dipstick

Strep A

（Sumitomo Seiyaku

Biomedical Co.,

Ltd.）

Species（Strain No）

－－

－－

－－

－－

Streptococcus agalactiae（Group B streptococci）（0402-2658）

－－

－－

－－

－－

Streptococcus anginosus（Group C streptococci）（2003X-3）

－－

－－

－－

－－

Streptococcus constellatus（Group F streptococci）（SM2004-2）

－－

－－

－－

－－

Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（Group C streptococci）（2003C-V1）

－－

－－

－－

－－

Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（Group G streptococci）（2003G-1）

－：Negative

発症には多くの要因が関与するため，どれほどの検出感度が適切であるか断定することはかなり困難である．しかし一般的に咽頭炎を発症する菌量は 1.0×105

CFU�mLと考えられているため，少なくともこの濃度で陽性となることは臨床上必要と考えられる．これを基準とすると，今回の検出感度試験において，すべての菌株で 1.0×105CFU�mL（1.0×104CFU�test）まで検出されたのは，クイックビューディップスティックストレップA，テストパック・プラスストレップA，ラピッドテスタストレップA，スタットチェックストレップAの 4キットであった．これら検出感度は，すでに報告されている成績と同様の結果であった１）～６）．S. pyogenesについてはT型別の違いにより感度に若干の差を認めたが，これはA群多糖体抗原の量に関わるものと思われる．しかしながらT型別とA群多糖体抗原量との関連についてはほとんど検討されていないので，詳細は不明である．ただ，これら 4キットの場合，いずれの株に対しても 1.0×104

CFU�mL（1.0×103CFU�test）以下で陽性を示したものはなく再現性も認められるので，感度的に健常者レベルで偽陽性となる可能性は低いと考えられる．A群迅速診断キットは，以前はラテックス凝集法

が主流であったが，現在は検出感度や操作性，反応時間など様々な面で優れているイムノクロマトグラフィー法が採用されている．今回検討を行った 8種のキットも，すべてイムノクロマトグラフィー法であり，いずれのキットも抽出時間と反応時間を合わせても 5分から 7分で判定でき，検査開始から 10 分以内という短時間で診断が可能である．また 12 カ月以上室温での保存が可能であり，包装単位も 10～30 検体と少なく，コンパクトである．しかしながら，形状がプレート型のストレップAテストパック・プラスおよびクイックビューストレップA，カード型のクリアビューストレップAは，他のストリップ型に比べ廃棄物の量がやや多い．これらのことも考慮し，各施設に適したキットを選択する必要があると考えられる．Lancefield はレンサ球菌を菌体細胞壁に由来するC

多糖体の抗原性の相違に基づく血清学的分類法により20 群に分類したが１１），この分類の多くは 1つの群に分類されるのが 1菌種というわけではなく，複数の菌種がその群に分類されることが知られている．臨床由来のA群多糖体抗原を有する溶血性レンサ球菌はヒトへの病原性，分離頻度などから S. pyogenesが大部分を占め，A群溶血性レンサ球菌といえば S. pyogenes

と考えられてきた．しかし実際は S. pyogenes以外にもAnginosus group の一部がA群多糖体抗原を保有し，更に従来C群もしくはG群を保有するとされていた S. dysgalactiae subsp. equisimilisの中にもA群を

光野典子他670


Table 5 Comparison of sensitivity of 8 rapid diagnostic kits for detecting group A streptococcus to Group A streptococcusother than Streptococcus pyogenes isolated from clinical source

Streptococcus anginosus（SM2003-1）

1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－－＋－＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）－－－－＋－＋＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）－－－－－＋＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）－－－－＋－＋＋＋＋QuickVue STREP A（Wako Pure Chemical Industries, Ltd）－－－－＋－＋＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）－－－－－＋＋＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）－－－－＋－＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）－－－－＋－＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）

Streptococcus constellatus（SM2004-1）

1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－－＋＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）－－－－＋＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）－－－－－＋＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）－－－－＋－＋＋＋QuickVue STREP A（Wako Pure Chemical Industries, Ltd）－－－－＋＋＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）－－－－－＋＋＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）－－－－＋＋＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）－－－－＋＋＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）

Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（2003X-1）

1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－＋－＋＋＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）－－＋－＋＋＋＋＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）－－－＋－＋＋＋＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）－－－＋－＋＋＋＋QuickVue STREP A（Wako Pure Chemical Industries, Ltd）－－－＋－＋＋＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）－－－－＋－＋＋＋＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）－－－＋－＋＋＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）－－＋－＋＋＋＋＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）

Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis（0402-2366）

1×1033×1031×1043×1041×1053×1051×106Name of kit

－－－＋－＋＋＋＋＋QuickVue Dipstick Strep A（Sumitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.）－－－＋＋＋＋＋＋TESTPACK Plus STREP A（ABBOTT JAPAN Co., Ltd）－－－＋－＋＋＋＋＋CLEAVIEW STREP A（Nihon Schering K. K.）－－－＋－＋＋＋＋＋QuickVue STREP A（Wako Pure Chemical Industries, Ltd）－－－＋－＋＋＋＋＋ImmunoCard STAT! STREP A（TFB, INC.）－－－＋－＋－＋＋DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A（Eiken Chemical Co., Ltd.）－－＋－＋－＋＋＋＋＋Rapid Testa Strep A（Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.）－－－＋－＋＋＋＋＋StatCheck Strep A（KAINOS Laboratories, Inc.）

unit：CFU/ml＋＋：Strong-positive＋：Positive＋－：The trace at the test band position were observed－：Negative

保有する菌株が存在することが，共同研究者の勝川らを始め７）近年次々と明らかにされてきている８）９）１２）．A群迅速診断キットはその名の示すとおり，A群

多糖体抗原をターゲットとした免疫学的検査法であり，S. pyogenes以外のA群多糖体抗原を有する菌も

陽性反応を呈すると考えられる．今回の比較試験においても，A群多糖体抗原を有するAnginosus groupおよび S. dysgalactiae subsp. equisimilisのすべての菌株において，S. pyogenesと同程度の検出感度を認めた．このことは本キットの偽陽性に繋がると考えられ



る．実際，今回比較実験に用いたAnginosus group 2株は，A群迅速診断キットにて陽性であり，培養では S. pyogenesが認められなかった咽頭拭い液から分離されている．またレンサ球菌以外でも，あるNeisse-ria 属でA群多糖体抗原を有することが報告されている１）．小児の細菌性咽頭炎の原因菌は S. pyogenesが多く

を占めるため，咽頭拭い液を 5％炭酸ガス培養し，ヒツジ血液寒天培地上で β溶血を示すバシトラシン試験陽性の比較的大きなコロニーのレンサ球菌を見つけ，A群多糖体抗原を有していることを確認すれば，S. pyogenesと同定しても問題はなかった．しかしA群多糖体抗原を有する S. dysgalactiae subsp. equisimilis

の存在が明らかとなり，誤った同定をしてしまう可能性がでてきた．今回供試したA群 S. dysgalactiae

subsp. equisimilisは，ヒツジ血液寒天培地上で S. pyo-

genesとよく似たコロニーを形成し，βGUR，RIB，PYRを除き，生化学的性状もほぼ同じであった．さらに S.

pyogenesのスクリーニングに使用されるバシトラシン試験も陽性であった．バシトラシン試験については，G群の 15～55％が陽性と言われていることから１）１３），A群 S. dysgalactiae subsp. equisimilisもG群 S. dysgalac-

tiae subsp. equisimilisと同程度の陽性率であると考えられる．共同研究者の勝川ら８）は，A群 S. dysgalactiae subsp.

equisimilisは emm型別 stg 485 であり，これはG群が保有するとされているため，G群の細胞壁多糖体を作る遺伝子の変異により発生したと推測している．またKalia ら１４）は S. pyogenesのある大きなDNA断片がG群菌の染色体DNAに移動し，その結果G群菌のゲノムがA群菌のDNAと本来G群菌が持っていたDNAとのモザイク状に変化したものと推定している．従って，このモザイク状化した S. dysgalactiae subsp. equisi-

milisの中にA群抗原を持つものが出現したという推定も可能である．微生物検査技師などからは迅速診断キットでA群陽性であったのに，同時に採取された咽頭拭い液の培養で S. pyogenesが検出されないという声をよく耳にするが，同定に際しては以上の点を念頭に置き，少なくとも PYRなどの生化学的性状により菌種を確認することが必要である．C，G群溶血性レンサ球菌については，以前よりス

トレプトリジンO（SLO）を産生する菌が存在することが知られており，著者らも以前報告した１５）．又稀ではあるが猩紅熱を惹き起こす例があることも報告されている１６）．更に近年G群レンサ球菌による劇症型レンサ球菌感染症が増加している１７）．則本ら１８）は G群レンサ球菌による劇症型レンサ球菌感染症で先行して咽頭拭い液からレンサ球菌を検出したと報告しているが，

一般的に侵入門戸の一つとして咽頭も挙げられている．わが国では今のところG群レンサ球菌による劇症型レンサ球菌感染症の殆どが S. dysgalactiae subsp.equisimilisと考えられる１９）が，このように本菌は従来考えられていた以上に重篤な感染症の起炎菌と見られる．A群 S. dysgalactiae subsp. equisimilisの浸淫度はかなり広い範囲に広がっているものと見られ８），本菌の咽頭からの検出も意義があるものと考える．Anginosus group は β溶血するものもあり，膿瘍形

成性疾患の原因菌として，また市中肺炎など呼吸器感染症の起炎菌としても注目されている２０）．また少数ではあるが上気道炎の原因菌としても報告されている２１）．以上のことから，A群迅速診断キットの使用に際

しては，S. pyogenes以外にもA群多糖体抗原を有する菌が存在することを念頭において検査を行う必要があると思われる．また最後にメーカーの添付文書についても内容の変

更を求めたい．今回検討した 8社のメーカーの添付文書は 2001 年 1 月から 2005 年 7 月の間に改訂されたものであるが，S. pyogenes以外にもA群多糖体抗原を有する菌が存在し，本キットに陽性を示すことについては言及していない．A群多糖体抗原を持つ β溶血性レンサ球菌が数菌種存在することはこれらの添付文書の改訂時期より以前に判明している訳であるから，当然この点について文面で言及するべきである．前述したとおり，こうした添付文書の不備などが微

生物検査技師やその報告を受ける医師の間に時として混乱を招いている状況があり，添付文書の改善並びに改訂のため必要な追加検査などの早急な実施を望みたい．

文献1）保科清，都もと子，小野正恵，鈴木敦子：クリアビューストレップAによるA群溶連菌抗原迅速診断の有用性に関する検討．小児科臨床1995；48：2275―8.

2）保科清：A群溶連菌抗原検出法．臨床と微生物 1995；22：683―6.

3）藤川敏，武谷広子：新しいA群レンサ球菌迅速診断キットCREARVIEW STREP Aの臨床的検討．小児内科 1995；27：1691―4.

4）甲田雅一，宇田川郁子，福原敦子，竹内美香，田村恵子，松崎廣子： Streptococcus pyogenes（A群レンサ球菌）迅速診断キットとしてのクリアビュー・ストレップAの評価．臨床と微生物1997；24：365―9.

5）藤田之彦，岡田知雄，荒川千賀子，高橋秀夫，武隈孝治，河島尚志，他：Immunochromatographicassay（スタットチェックストレップ A）によるA群 βレンサ球菌抗原迅速検出法の検討．医学と薬学 2003；50：347―51.

光野典子他672


6）川上小夜子，斧康雄，柳川幸重，宮澤幸久：免疫クロマグラフィー法による新規A群溶血性レンサ球菌抗原迅速検出キットの基礎的，臨床的性能評価．JARMAM 2003；14：9―16.

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9）下島優香子，遠藤美代子，奥野ルミ，向川純，村田以和夫，諸角聖：Lancefield 血清型A群抗原を持つ Streptococcus dysgalactiae subsp.equisimilis．日細菌誌 2002；57：221.

10）奥山道子，下山洋子，中島邦夫：大阪市内 1小学校の健康学童の咽頭分離溶血性レンサ球菌（A，B，C，G群）の長期的観察（1980～1992 年）．感染症誌 1994；68：656―64.

11）Lancefield R.C．：A serological differentiation ofhuman and other groups of hemolytic strepto-cocci. J Exp Med 1933；57：571―95.

12）Claudia M.B, Gerhard H, Norbert S, Reinhard Z,Rudolf L：Characterization of blood culture iso-lates of Streptococcus dysgalactiae subsp. equisi-milis possessing Lancefield’s group A antigen.Journal of Clinical Microbiology 1999；37：4194―7.

13）福原淳子，甲田雅一，宇田川郁子，小林準一，松崎廣子：A群溶血連鎖球菌スクリーニング法としてのバシトラシン感受性試験の信頼性．臨床検査 1995；39：1099―101.

14）Kalia A, Enright MC, Spratt BG, Bessen DA：Directional gene movement from human-pathogenic to commensal-like Streptococci. In-fect. Immun 2001；69：4858―69.

15）奥山道子，下山洋子，中島邦夫，八田宏之，奥田清：健康学童における咽頭溶血性レンサ球菌の保菌状況と血清抗体値との関係について．感染症誌 1989；63：1231―43.

16）児玉博英，城野晃，田中英子，小島良平，久保田憲太郎，猿倉玲子：G群溶連菌による猩紅熱とその感染経路について．日公衛誌 1972；19：299.

17）第 26 回衛生微生物技術協議会溶血性レンサ球菌レファレンスセンター会議資料．：2005 年 7 月.

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20）藤木玲，川山智隆，力丸徹，大泉耕太郎：3年間における Streptococcus milleri group 呼吸器感染症の臨床検討．感染症誌 2002；76：174―9.

21）山城哲：“ Streptococcus milleri group”の呼吸器感染症における臨床的意義に関する研究．感染症誌 1991；65：1419―28.



Evaluation of Rapid Diagnostic Kits for the Detection of Group A Streptococcus toStreptococcus pyogenes and Streptococcus spp. with Lancefield’s Group A Antigen

Noriko MITSUNO１）, Tomohiro HARI１）, Nobuyoshi TAMAGAWA１）, Juichi ITOI１）,Eiji IKEDA１）, Kazuko HAMASAKI１）, Chihiro KATSUKAWA２）& Michiko OKUYAMA１）

1)Department of Clinical Laboratory, Osaka-City General Hospital,2)Department of Microbiology, Osaka Prefectural Institute of Public Health

We studied the basic performance of eight rapid diagnostic kits for the detection of Group A streptococ-cus by immunochromatography under the same conditions. Kits were the ; QuickVue Dipstick Strep A (Su-mitomo Seiyaku Biomedical Co., Ltd.), TESTPACK Plus STREP A (ABBOTT JAPAN Co., Ltd), CLEAVIEWSTREP A (Nihon Schering K. K.), QuickVue STREP A (Wako Pure Chemical Industries, Ltd), ImmunoCardSTAT! STREP A (TFB, INC.), DIPSTICK ‘Eiken’ STREP A (Eiken Chemical Co., Ltd.), Rapid Testa Strep A(Daiichi Pure Chemical Co., Ltd.), and StatCheck Strep A (KAINOS Laboratories, Inc.).

Four of these kits, i.e. QuickVue Dipstick Strep A, TESTPACK Plus STREP A, Rapid Testa Strep A,and StatCheck Strep A showed sensitivity at 1.0×105CFU�mL (1.0×104CFU�test) with all of S. pyogenes tested,while the Anginosus group and S. dysgalactiae subsp. equisimilis with Lancefield’s group A antigen showed sensitivityvery similar to S. pyogenes.

Of these strains, S. dysgalactiae subsp. equisimilis formed a β-hemolytic colony resembling that of S. pyo-genes on sheep blood agar, and was sensitive to bacitracin. It is thus indispensable to identify the colony us-ing biochemical tests such as the PYR (pyrrolidonylarylamidase production) test.

In using rapid diagnostic kits for the detection of Group A streptococcus, it is important to rule out thepossibility of Group A streptococcus other than S. pyogenes in throats.

Severe invasive group-G streptococcal infections are increasing recently. Concerning S. dysgalactiaesubsp. equisimilis, it is especially important to conduct these identification tests.

Streptococcus pyogenes およびA群多糖体抗原を有...

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