SOLUZIONI CONSUMABILI PER BIOANALISI

Soluzioni per la preparazione dei campioni

e di cromatografia liquida per

BIOANALISI quANt ItAt IvA

Waters comprende le complesse sfide che la comunità bioanalitica deve affrontare, ad

esempio la necessità di ottimizzare la sensibilità, incrementare la produttività e sviluppare

metodi nuovi e stabili che possano essere trasferiti a laboratori di tutto il mondo. Al fine di

affrontare queste sfide, Waters produce soluzioni per la preparazione dei campioni e di

cromatografia liquida dedicate alla bioanalisi quantitativa in grado di offrire campioni

puliti, separazioni selettive ed un flusso lavorativo con massima produttività.

Per quanto concerne il massimo in termini di qualità dei dati bioanalitici, produttività di

laboratorio e conformità, le innovative fasi stazionarie sono integrate nella Waters

Regulated Bioanalysis System Solution, che comprende ACQUITY UPLC® I-Class

a dispersione ridotta (interfaccia per la Spettrometria di Massa migliore della

categoria) e Xevo® TQ-S ad alta sensibilità, con un nuovo controllo software

che si avvale del sistema di informazione scientifica UNIFI™

completamente conforme alle normative.

2

SOLUZIONI CONSUMABILI PER BIOANALISI

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■ L’esclusivo design consente di eliminare alcune procedure dispendiose in termini di tempo per una maggiore produttività

■ Filtrati senza precipitati per la massimizzazione dei tempi di attività del sistema rispetto ai metodi classici

■ Ideali a livello di purezza, compatibilità MS e recupero degli analiti

Principali Vantaggi:

SOLUZIONI PER LA PREPARAZIONE DEI CAMPIONI

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CONFRONTO DEI TEMPI DI ELABORAZIONE

Con le piastre Sirocco, l’elaborazione dei campioni può richiedere tempi notevolmente ridotti rispetto alle precipitazioni proteiche (PPT) classiche, aumentando la produttività del laboratorio.

RECUPERO

La piastra Sirocco è stata sottoposta a test per il recupero degli analiti utilizzando sette analiti iniettati nel plasma di ratto avvalendosi di uno standard interno. Dai risultati emergono eccellenti recuperi in tutti gli analiti elencati.

SEMPLICEMENTE PURI

La piastra per la precipitazione di proteine (PPT) Sirocco™ elimina alcune procedure di gestione dei campioni aggiuntive dispendiose in termini di tempo eseguite di norma tramite precipitazione proteica (PPT) classica. L’esclusiva tecnologia con valvole a depressione consente all’analista di effettuare precipitazioni proteiche all’interno dei pozzetti con procedura finale di filtrazione. Tale metodo consente di effettuare un’efficace elaborazione del campione, dal quale si ottengono filtrati puliti da volumi di campione ridotti. Sirocco può essere automatizzato per elaborare un numero elevato di campioni in modo efficace.

Precipitazioni Proteiche (PPT) Classiche

Precipitazioni Proteiche (PPT) Sirocco

Carico del Campione

Vuoto

45 minuti 15 minuti

Carico del Campione

MiscelareMiscelare

Centrifugare

Trasferire ilsupernatante

Iniezione Diretta

80

100

60

40

20

0

Recu

pero

PPT

(%)

Atenolo

lo

Nado

lolo

Metopro

lolo

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PIASTRA PER LA PRECIPITAZIONE DELLE PROTEINE SIROCCO

5

0

50000

100000

150000

200000

250000

300000

350000

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Dei 5

Fosf

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Ostro LLE SSLE

RIMOZIONE DEI FOSFOLIPIDI

Il livello di cinque fosfolipidi residui successivamente alla preparazione del campione utilizzando il metodo Ostro è inferiore sia rispetto all’estrazione liquido/liquido sia rispetto all’estrazione liquido supportata su solido.

RIPRODUCIBILITÀ

Rimozione percentuale comparativa dei fosfolipidi totali da sei diversi lotti di plasma utilizzando Ostro (RSD 0,19%), piastra di rimozione dei fosfolipidi dal campione della concorrenza A (RSD 24,5%) e piastra di rimozione dei fosfolipidi dal campione della concorrenza B (RSD 40,9%).

Purificazione Più raPida dei camPioni

I prodotti per la preparazione dei campioni Ostro™ offrono una soluzione innovativa per la purificazione dei fosfolipidi in campioni di plasma e siero. Grazie ad uno sviluppo metodi minimo o nullo e all’utilizzo di un protocollo semplice, tale tecnologia può essere implementata rapidamente al fine di ottimizzare il flusso di lavoro del vostro laboratorio. Grazie all’offerta di estratti più puri e maggiormente riproducibili rispetto ai dispositivi o alle tecniche di rimozione dei fosfolipidi offerti dalla concorrenza, la piastra Ostro a 96 pozzetti consente di effettuare analisi più sensibili, di ottenere una maggiore produttività e minori tempi di inattività degli strumenti.

Somma dei cinque fosfolipidi contenenti livelli elevati di fosfatidilcolina con m/z 496, 524, 704, 758 e 806.

Ostro Campione dellaConcorrenza A

Campione dellaConcorrenza B

1 2 3 4 5 60

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

% R

imoz

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Fosf

olip

idi

SOLUZIONI PER LA PREPARAZIONE DEI CAMPIONI

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■ Rimozione di un quantitativo notevolmente superiore di fosfolipidi rispetto alle tecniche della concorrenza, che consente di ottenere estratti più puri

■ Migliore riproducibilità per metodi più uniformi e affidabili

■ Maggiore produttività grazie a un protocollo di facile implementazione

Principali Vantaggi:

PRODOTTI PER LA PREPARAZIONE DEI CAMPIONI OSTRO

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■ Massima sensibilità per composti farmaceutici tradizionali e peptidi terapeutici

■ Minimi effetti matrice per analisi LC/MS/MS

■ Qualità del prodotto, prestazioni e riproducibilità ineguagliabili

Principali Vantaggi:

SOLUZIONI PER LA PREPARAZIONE DEI CAMPIONI

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SENSIBILITÀ

QUALITÀ

Come risultato di un attento processo di design e delle più stringenti regole di controllo qualità, è stato raggiunto un nuovo standard di riproducibilità da batch a batch e da lotto a lotto per gli adsorbenti SPE. Ciò consente ai ricercatori di sviluppare metodi bioanalitici efficaci, accurati e precisi.

EFFETTO MATRICE

Successivamente all’estrazione eseguita con un adsorbente in modalità mista Oasis, sono stati valutati gli effetti di matrice per una serie di cinque farmaci antidepressivi in lotti multipli di urina. Le deviazioni standard relative (RSD) della matrice sono state quantificate in un valore compreso tra il 5,5 e l’8,4%, ampiamente entro il limite del 15% richiesto dalle agenzie di regolamentazione.

SenSibilità nella forma più pura

La sensibilità è uno dei requisiti principali per ottenere saggi bioanalitici efficaci. Per ottenere la sensibilità ottimale è necessario isolare i composti di interesse da interferenze presenti nei campioni biologici. I prodotti brevettati Oasis® per estrazione in fase solida (SPE) sono disponibili in un’ampia gamma di formati e adsorbenti, consentendo ai ricercatori di sviluppare metodologie selettive per i composti d’interesse. I prodotti Oasis consentono ai ricercatori di creare metodi SPE altamente accurati e riproducibili dotati di sensibilità e selettività ineguagliabili.

Gli adsorbenti a modalità mista Oasis, tutti basati sull’esclusivo copolimero ad alta permeabilità Oasis HLB, offrono due modalità di ritenzione, consentendo una maggiore selettività e sensibilità di purificazione per composti acidi e/o composti basici, anche nei casi di essiccamento dell’adsorbente nei pozzetti. Ottenete una sensibilità senza pari con la piastra Oasis µElution, in grado di concentrare un campione fino a 15 volte senza necessità di evaporazione o ricostituzione.

Deviazioni standard relative (RSD) per recuperi di: Procainamide: 1.90% Ranitidina: 1.68% Acetaminofene: 1.65%

105

95

850 5 10 15 anni

Recu

pero

%

Nessuna Limitazione di batch necessaria: Recuperi costantemente elevati in oltre 15 anni di produzione.

Analita RSD% dei Fattori di Matrix

Amitriptilina 6.03

Nortriptilina 5.53

Imipramina 8.36

Desipramina 7.15

Doxepina 5.96

PRODOTTI OASIS PER L’ESTRAZIONE DEI CAMPIONI

9

1.19

1.01

0.88

1.18

1.061.50

1.28 1.382.031.73

1.82 1.92

A. Campione Addizionato

B. Matrice Bianca

A. Campione Addizionato

B. Matrice Bianca

0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0 min

%

0

100

0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0

%

0

100

%

0

100

%

0

100

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78

1.54 1.58 1.62 1.66 1.70 1.74 1.78 min

1.61

1.521.55

1.66

1.73

Limite di quantificazione (LOQ) di benzodiapina alprazolam 1 pg/mL da 375 µL di plasma

Limite di quantificazione (LOQ) di fluticasone propionato 5 pg/mL da 375 µL di plasma

Tecnologia per colonne

Grazie alla maggiore sensibilità, migliore produttività ed eccezionale affidabilità dei saggi offerta dalla Tecnologia UPLC®, il sistema ACQUITY UPLC® è stato definito come la soluzione LC ideale per i saggi bioanalitici. Grazie a cinque substrati particellari e venti fasi stazionarie a livello di sub-2 µm disponibili in commercio sia per applicazioni che impiegano molecole di piccole dimensioni che per quelle biofarmaceutiche, Waters offre una colonna UPLC per ogni esigenza.

Garantendo livelli di profilo dei picchi, efficienza e stabilità chimica ineguagliabili, la colonna BEH Technology™ (Ethylene Bridged Hybrid) C18 da 1,7 μm è una soluzione di separazione ad elevatissime prestazioni per una serie di analiti distinti. Grazie alla capacità di funzionamento tra valori di pH compresi tra 1 e 12, la colonna BEH C18 sfrutta l’efficacia del pH per influenzare la ritenzione, la selettività e la sensibilità di composti ionizzabili, offrendo un miglioramento della sensibilità per i saggi LC/MS.

O Si

O

O

O SiO

O

O SiO

O

O Si

CHPolar Group

3

CH 3

O SiO

O

O SiO

O

ACQUITY UPLC BEH C18

Concepita specificatamente per migliorare la ritenzione di composti polari e metaboliti, la colonna HSS (High Strength Silica) T3 da 1,8 μm è una colonna C18 a bassa densità di ligandi che presenta una ritenzione eccezionale senza ricorrere a reagenti di accoppiamento ionico, garantendo minori limiti di rivelazione e quantificazione per i metodi LC/MS.

O Si

O

O

O SiO

O

O SiO

O

O Si

CHPolar Group

3

CH 3

O SiO

O

O SiO

O

ACQUITY UPLC HSS T3

Utilizzando una fase mobile ad alta percentuale di acetonitrile per migliorare la ritenzione, l’efficienza di ionizzazione e la risposta degli spettrometri di massa di composti ad elevata polarità, la colonna BEH HILIC (Hydrophilic Interaction Chromatography) da 1,7 μm offre limiti di rivelazione migliori rispetto ai tradizionali metodi in fase inversa. Inoltre, gli estratti ad alto contenuto organico da PPT, LLE o SPE possono essere iniettati direttamente, migliorando notevolmente la produttività, l’efficacia e la sensibilità dei campioni.

ACQUITY UPLC BEH HILIC

Specificamente ideata e sottoposta a controllo di qualità per l’analisi di peptidi veloce e ad alta risoluzione, la colonna 300Å BEH C18 assicura l’efficace separazione di una svariata gamma di peptidi. Ora è possibile utilizzare un’unica colonna per trattenere e separare peptidi caratterizzati da un ampio spettro di idrofobicità, punto isoelettrico e peso molecolare.

O Si

O

O

O SiO

O

O SiO

O

O Si

CHPolar Group

3

CH 3

O SiO

O

O SiO

O

ACQUITY UPLC BEH300 C18

SOLUZIONI DI CROMATOgRAfIA LIqUIDA

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■ Massimizzare la produttività di laboratorio riducendo la durata delle analisi e migliorando al contempo la qualità dei dati

■ Ottenere limiti di rivelazione più bassi consentendo una maggiore risposta MS con picchi cromatografici risolti

■ Migliorare la caratterizzazione dei campioni riducendo la soppressione MS dovuta ai composti presenti nella matrice

Principali Vantaggi:

COLONNE ACqUITY UPLC

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UFFICI vENDITE:

Esportazioni in Austria ed Europa (Europa centrale, meridionale e orien-tale, CIS e Medio Oriente) 43 1 877 18 07

Australia 61 2 9933 1777

Belgio e Lussemburgo 32 2 726 1000

Brasile 55 11 4134 3788

Canada 1 800 252 4752

Cina 86 10 6156 2666

Repubblica Ceca 420 2 617 11384

Danimarca 45 46 59 8080

Finlandia 358 9 5659 6288

Francia 33 1 30 48 72 00

Germania 49 6196 400 600

Hong Kong 852 2964 1800

Ungheria 36 1 350 5086

India 91 80 2837 1900

Irlanda 353 1 448 1500

Italia 39 02 265 0983

Giappone 81 3 3471 7191

Corea 82 2 6300 4800

Messico 52 55 52 00 1860

Paesi Bassi 31 76 508 7200

Norvegia 47 6 384 6050

Polonia 48 22 833 4400

Porto Rico 1 787 747 8445

Russia/Comunità di Stati Indipendenti 7 495 727 4490/ 290 9737

Singapore 65 6593 7100

Spagna 34 93 600 9300

Svezia 46 8 555 115 00

Svizzera 41 56 676 7000

Taiwan 886 2 2501 9928

Regno Unito 44 208 238 6100

Waters Corporation 34 Maple Street Milford, MA 01757 U.S.A. T: 508 478 2000 F: 508 872 1990 www.waters.com

Waters, The Science of What’s Possible, UPLC, ACQUITY UPLC, UNIFI, Xevo, Oasis, Ostro, Sirocco e BEH Technology sono marchi di fabbrica di Waters Corporation.

©2011 Waters Corporation. Stampato negli Stati Uniti Aprile 2011 720003931IT SC-CM

www.waters.com/BA

Il sistema di gestione della qualità degli stabilimenti produttivi Waters di Taunton, nel Massachusetts, e Wexford, in Irlanda, è conforme alla norma internazionale ISO 9001:2008 per la gestione e l’assicurazione della qualità. Il sistema di gestione della qualità Waters viene periodicamente sottoposto a revisione da parte dell’ente di certificazione per garantirne la conformità.