Jurnal Penelitian Sains Volume 14 Nomer 1(D) 14112

Skrining Bakteri Kitinolitik Antagonis Terhadap PertumbuhanJamur Akar Putih (Rigidoporus lignosus) dari RizosfirTanaman Karet

Muharni dan Hary Widjajanti

Jurusan Biologi FMIPA, Universitas Sriwijaya, Sumatera Selatan, Indonesia

Intisari: Skrining bakteri kitinolitik dari rizosfir tanaman karet dilakukan dengan tujuan untuk memperoleh isolat

bakteri kitinolitik yang antagonis terhadap pertumbuhan jamur akar putih (Rigidoporus lignosus). Bakteri diisolasi

dari Perkebunan Karet Sembawa Kab. Banyuasin, dan skrining dilakukan dengan menggunakan media agar kitin dan

uji antagonis terhadap jamur patogen dilakukan dengan menggunakan metode Chernin et al., (1995). Hasil penelitian

didapatkan dua isolat bakteri kitinolitik yang antagonis terhadap pertumbuhan jamur akar putih (Rigidoporus lignosus).

Identifikasi kedua isolat antagonis jamur akar putih ini tergolong kedalam genus Bacillus yaitu Bacillus sp. dan Bacillus

apiarius

Kata kunci: bakteri kitinolitik, antagonis, Rigidoporus lignosus

Abstract: The screening of chitinolytic bacteria from rhizosphere in rubber plant was done to get isolate chitinolytic

bacteria that antagonist to white root fungus (Rigidoporus lignosus). Bacteria were isolated from rubber plantation

Sembawa Banyuasin Regency and screening was done by chitin solid media and antagonist test to pathogen fungus was

done by using Chernin et al., (1995) method. The results of this research were found two isolates chitinolytic bacteri

that antagonist to growing white root fungus (Rigidoporus lignosus). Identification both isolate antagonist to white root

fungus is a member of genus Bacillus (Bacillus sp. and Bacillus apiarius)

Keywords: bhitinolytic bacteria, antagonist, Rigidoporus lignosus

Januari 2011

1 PENDAHULUAN

K aret alam merupakan komoditas ekspor yangsangat penting sebagai sumber devisa Negara,

dan merupakan sumber penghidupan sebagian pen-duduk Indonesia. Secara ekologi tanaman karet men-dukung pelestarian lingkungan hidup, sumber dayaalam dan keanekaragaman hayati. Di Sumatera Se-latan karet merupakan komoditas ekspor utama, luasperkebunan karet mencapai 900.000 hektar, luas inimerupakan lahan karet terluas di Indonesia [1].

Pengelolaan perkebunan karet sering mengalamikendala, terutama masalah penyakit. Penyakit tana-man karet telah menyebabkan kerugian ekonomi,tidak hanya disebabkan kehilangan produksi akibatkerusakan tanaman tetapi juga mahalnya biaya yangdiperlukan dalam pengendaliannya. Diperkirakan ke-hilangan produksi setiap tahunnya akibat kerusakanoleh penyakit karet mencapai 5-15 %. Penyakit tana-man karet yang umum ditemukan pada perkebunandiantaranya adalah jamur akar putih. Penyakit jamurakar putih disebabkan oleh jamur Rigidoporus ligno-sus. Serangan jamur akar putih telah menyebabkan

kerusakan pada akar tanaman. Berdasarkan laporansemester pertama pada tahun 2006 serangan jamurakar putih di Sumatera Selatan telah mencapai 20.000hektar dengan perkiraan kerugian hasil sebesar Rp.7,82 milyar [2]

Serangan jamur akar putih akan memperlihatkangejala pada daun terlihat pucat kuning dan tepi atauujung daun terlipat kedalam, serta kadang-kadangbunga dan buah muncul lebih awal. Pada per-akaran tanaman sakit tampak benang-benang jamurberwarna putih dan agak tebal (rizomorf). Jamurkadang-kadang membentuk badan buah mirip topiberwarna jingga kekuning-kuningan pada pangkal akartanaman [3]. Serangan jamur akar putih pada tanamankaret menyebabkan penurunan produksi dan kualitaskaret, getah yang dihasilkan lebih encer sehingga hargajualnya menjadi turun.

Pengendalian penyakit jamur akar putih selama inidilakukan dengan pencegahan dan pengobatan baiksecara mekanis maupun kimia. Pengendalian jamurRigidoporus lignosus banyak menggunakan fungisidasintetik, karena dianggap lebih praktis dan cepat ter-lihat hasilnya. Namun demikian penggunaan bahan

c© 2011 FMIPA Universitas Sriwijaya 14112-51

Muharni dkk./Skrining Bakteri Kitin. . . . Jurnal Penelitian Sains 14 1(D) 14112

kimia sering menimbulkan residu pada lingkungan danmembunuh organisme yang bukan sasaran [4]. Olehkarena itu, upaya pengendalian yang efektif dan ramahlingkungan perlu dilakukan, salah satunya adalah de-ngan menggunakan bakteri kitinolitik (pendegradasikitin) yang melibatkan enzim kitinase.

Bakteri kitinolitik adalah bakteri penghasil enzimkitinase yang berperan dalam mendegradasi kitinmenjadi N-asetilglokosamin. Organisme pendegradasikitin umumnya berasal dari kelompok mikroorganismediantaranya adalah dari kelompok bakteri. Bakteriyang dilaporkan memiliki aktivitas kitinase seperti,Vibrio furnissi , Serratia marcescens [5], Bacillus cir-culans [6], Bacillus thuringensis subsp. pakistani [7]

dan Pseudomonas aeruginosa [8].Aktivitas kitinase dari bakteri kitinolitik sangat

potensial digunakan sebagai agen pengendalian ha-yati terhadap jamur patogen maupun serangga hama,karena kedua organisme ini mempunyai komponenkitin pada dinding selnya. Beberapa laporan menya-takan bahwa aktivitas kitinase dari Aeromonas caviaeefektif digunakan untuk mengontrol serangan jamurpatogen Rizoctonia solani dan Fusarium oxysporumpada kapas, dan Sclerotium rolfsii pada buncis [9]. Disamping itu aktivitas kitinase dari Bacillus circulansjuga dapat menghambat pertumbuhan jamur patogenRizoctonia solani dengan zona hambat sebesar 0,65 cm[10].

Mikroorganisme yang dapat hidup pada daerah ri-zosfir sangat sesuai digunakan sebagai agen pengen-dalian hayati, mengingat bahwa rizosfir adalah daerahyang utama dimana akar tumbuhan terbuka terhadappatogen. Jika terdapat mikroorganisme antagonispada daerah ini, patogen akan berhadapan selamamenyebar dan menginfeksi akar [11]

Bakteri penghasil kitinase merupakan salah satukelompok mikroorganisme yang relatif mudah dikem-bangkan sehingga akan lebih cepat melimpah jikadikembangkan dari biosfirnya. Oleh karena itu skri-ning bakteri kitinolitik dari daerah perakaran (rizosfir)dan perbanyakannya yang diikuti dengan pelepasankembali ke daerah perakaran pertanaman merupakanusaha konservasi lingkungan rizosfir yang akan mem-berikan prospek cerah dalam usaha pengendalianpenyakit jamur akar putih tanaman secara hayati.Isolat bakteri kitinolitik rizosfir tanaman karet yangdiperoleh dapat dimanfaatkan sebagai agen pengen-dalian hayati penyakit jamur akar putih (Rigidoporuslignosus) pada tanaman karet dilapangan.

2 METODE PENELITIAN

2.1 Waktu dan Tempat

Penelitian dilaksanakan mulai pada bulan Mei 2009sampai dengan Desember 2009. Pengambilan sampel

sumber isolat bakteri kitinolitik dilakukan di perke-bunan karet di Kabupaten Banyuasin. Proses skri-ning bakteri kitinolitik dan uji potensi antagonismeterhadap jamur akar putih dilakukan di LaboratoriumMikrobiologi Jurusan Biologi Fakultas MIPA Univer-sitas Sriwijaya

2.2 Bahan yang digunakan

Bahan yang diperlukan antara lain berupa sampeltanah rizosfir dari perkebunan karet sebagai sumberisolat bakteri kitinolitik. Isolat jamur akar putih (Rigi-doporus lignosus) diperoleh dari Balai Pusat Peneli-tian Karet Sembawa Sumatera Selatan. Media agarkitin sebagai media isolasi, media NA sebagai me-dia perbanyakan bakteri, media PDA sebagai mediatumbuh jamur, media untuk uji fisiologis (mediumtriple sugar iron agar (TSIA), medium simon citrat,medium indol, medium semi solid, medium MR-VPbroth, Test medium, medium urea broth), reagen pe-warnaan Gram (Pewarna Gram A, Gram B, GramC, dan Gram D) dan pewarna endospora (MalachiteGreen dan Safranin).

2.3 Cara Kerja

Pengambilan sampel tanah rizosfir tanamankaret

Sampel berupa tanah rizosfir dari sekitar akar tana-man karet diambil dari lokasi perkebunan karet diKab. Banyuasin. Pengambilan sampel dilakukan pada3 titik sampling yang mewakili dan dari setiap sam-pling tersebut diambil sampel tanah secara aseptik se-banyak ± 100 g tanah. Masing-masing sampel dima-sukkan ke dalam botol sampel yang disterilkan terlebihdahulu.

Isolasi dan Seleksi Bakteri Kitinolitik

Sampel tanah sebanyak 5 g disuspensikan dalam 45 mllarutan fisiologis steril sampai homogen dan dilakukanpengenceran sampai 10−6, tiga pengenceran terakhirdicawankan pada media agar kitin dan diinkubasi se-lama 48 jam pada suhu ruang. Koloni yang tumbuhdan membentuk zona bening disekitar koloni meru-pakan isolat bakteri kitinolitik.

Isolat-isolat yang diperoleh ditumbuhkan secaraserentak dengan cara ditotolkan pada media agarkitin. Setelah diinkubasi selama 48 jam pada suhuruang, ditentukan indek kitinolitiknya yang meru-pakan perbandingan antara diameter zona bening de-ngan diameter koloni. Uji antagonisme dilakukan de-ngan mengunakan metode Chernin dkk. [12] pada me-dia PDA di dalam cawan petri. Koloni jamur diinoku-lasikan ditengah-tengah media, dan inokulum bak-teri kitinolitik digoreskan disekitarnya dengan jarak

14112-52

Muharni dkk./Skrining Bakteri Kitin. . . . Jurnal Penelitian Sains 14 1(D) 14112

2 cm. Biakan diinkubasi pada suhu kamar, kemudiandiamati pertumbuhan jamur patogen dengan meng-ukur diameter zona hambat disekitar koloni. Isolat-isolat bakteri kitinolitik yang mempunyai kemampuanmenghambat pertumbuhan jamur akar putih selanjut-nya akan diidentifikasi untuk mengetahui nama isolat-nya..

Karakterisasi Bakteri Kitinolitik AntagonisJAP

Karakterisasi isolat bakteri termofilik penghasil kiti-nase meliputi, makroskopis koloni, mikroskopis sel,motilitas dan uji biokimia.

• Makroskopis koloni seperti, bentuk , elevasi dantepian koloni.

• Mikroskopis sel seperti, bentuk sel, sifat Gramdan ada tidaknya endospora.

• Motilitas

• Uji Biokimia seperti, Hidrolisis pati, hidrolisiskasein, fermentasi glukosa, fermentasi sukrosa,fermantasi laktosa, produksi H2S, produksi in-dol, produksi urease, produksi katalase, uji metilmerah, uji Voges-Prokauer, uji TSIA, uji Sim-mon’s sitrat.

Identifikasi

Hasil karakterisasi dari masing-masing isolat diidenti-fikasi dengan menggunakan buku Bergey’s Manual ofDeterminative Bakteriology (Buchanan, R.E. & N.E.Gibbons (CoE), 1974)

3 HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Isolasi dan Seleksi Bakteri KitinolitikRizosfir Tanaman Karet

Hasil isolasi dan seleksi bakteri kitinolitik dari rizos-fir tanaman karet diperoleh 11 isolat bakteri kitinoli-tik seperti yang terdapat pada tabel 3.1 di bawah ini.Pada tabel 3.1 dapat dilihat bahwa sebanyak 11 isolatbakteri rizosfir tanaman karet yang didapatkan hanya4 isolat yang menunjukkan adanya aktivitas kitinase,dengan indeks kitinolitik tertinggi pada isolat BRK5sebesar 0,52 dan yang terendah adalah isolat BRK11

sebesar 0,21. Adanya aktivitas kitinase ditandai de-ngan terbentuknya zona bening disekitar koloni bak-teri pada mdium agar kitin (Gambar 3.1).

Zona bening yang terbentuk disekitar koloni dise-babkan karena isolat bakteri tersebut menghasilkanenzim kitinase. Aktivitas kitinase dapat menguraikankitin yang terdapat pada media agar, sehingga me-dia yang berada disekitar koloni berwarna bening.

Tabel 1: Hasil seleksi bakteri kitinolitik

Kode Isolat Aktivitas Indekskitinase kitinolitik

BRK1 − −BRK2 − −BRK3 − −BRK4 − −BRK5 + 0, 52

BRK6 + 0, 32

BRK7 + 0, 23

BRK8 − −BRK9 − −BRK10 − −BRK11 + 0, 21

Gambar 1: Aktivitas kitinase dari bakteri kitinolitik ri-zosfir tanaman karet

Menurut Susi [13] kitinase merupakan metabolit yangtidak berwarna, untuk mengetahui produksi kitinasedari bakteri dapat dilihat dari warna medium menjaditransparan.

Indeks kitilitik dari masing-masing isolat bakterikitinolitik berbeda-beda, yang paling tinggi didapat-kan pada isolat BRK5 yaitu 0,52, sedangkan yang pal-ing rendah pada isolat BRK11 yaitu 0,21. Terjadinyaperbedaan indeks kitinolitik ini disebabkan perbedaanaktivitas enzim kitinase dari masing-masing isolatbakteri. Menurut Susi (2002), besarnya zona beningyang dihasilkan tergantung pada jumlah monomer N-asetilglukosamin yang dihasilkan dari proses hidroli-sis kitin dengan memutus ikatan -1,4 homopolimer N-Asetilglukosamin. Semakin besar jumlah monomer N-asetilglukosamin yang dihasilkan maka akan semakinbesar zona bening yang terbentuk di sekitar koloni.

14112-53

Muharni dkk./Skrining Bakteri Kitin. . . . Jurnal Penelitian Sains 14 1(D) 14112

3.2 Uji Antagonis Isolat Bakteri Kitinolitik

Pengujian antagonis dari isolat bakteri kitinolitik ri-zosfir tanaman karet terhadap pertumbuhan jamurakar putih dilakukan pada media PDA. Hasil daripengujian tersebut dapat dilihat pada tabel 3.2 dibawah ini.

Tabel 2: Hasil uji antagonis isolat bakteri kitinolitik ter-hadap JAP

Kode Isolat Aktivitas Zonaantagonis Hambat (mm)

BRK5 + 5, 57

BRK6 − −BRK7 + 6, 12

BRK11 − −

Dari 4 isolat yang diuji aktivitas antagonisnya ter-hadap pertumbuhan jamur akar putih (JAP) hanya2 isolat yang menunjukkan adanya aktivitas antago-nis terhadap JAP yaitu isolat BRK5 dan BRK7. Ke-mampuan antagonis dari bakteri kitinolitik terhadappertumbuhan jamur akar putih ditandai dengan ter-hambatnya pertumbuhan jamur akar putih di sekitarkoloni bakteri kitinolitik. Kemampuan masing-masingbakteri kitinolitik dalam menghambat pertumbuhanjamur akar putih dapat dilihat pada gambar 3.2 dibawah ini .

Gambar 2: Pengujian antagonis isolat bakteri kitinolitikterhadap pertumbuhan jamur akar putih

Keterangan : 1.BRK5, 2.BRK6, 3.BRK7, 4.BRK11

Kemampuan isolat bakteri kitinolitik dalam meng-hambat pertumbuhan jamur akar putih disebabkanaktivitas enzim kitinase yang dihasilkan oleh isolattersebut. Aktivitas kitinase dapat mendegradasi din-ding sel jamur, karena jamur memiliki kitin pada din-ding selnya. Gooday [14] menyatakan, aktivitas kiti-nase dapat digunakan sebagai agen biokontrol jamurpatogen karena dapat mendegradasi dinding sel jamuryang terdiri dari kitin

Isolat bakteri kitinolitik BRK6 dan BRK11 tidakmenunjukkan adanya sifat antagonis terhadap JAP,karena tidak dapat menghambat pertumbuhan jamurakar putih (Rigidoporus lignosus). Hal ini mungkindisebabkan perbedaan jenis kitinase yang dihasilkanoleh masing-masing isolat tersebut. Toharisman [15]

menyatakan, berbagai organisme menghasilkan anekajenis kitinase dengan spesifitas terhadap substrat yangbervariasi, juga karakteristik yang berlainan. Bak-teri menghasilkan kitinase sebagai sarana memperolehnutrisi dan agen parasitisme, sementara fungi, proto-zoa dan invertebrata menghasilkan enzim tersebut un-tuk proses morfogenesis. Tanaman menghasilkan kiti-nase untuk mempertahankan diri dari serangan pato-gen. Baculovirus yang biasa dimanfaatkan untuk kon-trol hama serangga juga menghasilkan kitinase bagipatogenisitas. Disamping itu kitinase dilaporkan jugadihasilkan oleh darah manusia, dan diduga terlibatdalam pertahanan diri terhadap fungi patogen.

3.3 Karakteristik Isolat Bakteri KitinolitikAntagonis Jamur Akar Putih

Karakterisasi isolat bakteri kitinolitik rizosfir tana-man karet yang antagonis terhadap pertumbuhanjamur akar putih (Rigidoporus lignosus) dilakukanberdasarkan morfologi koloni (makroskopis koloni),mikroskopis sel, motilitas dan uji biokimia, hasilkarakterisasi dari isolat tersebut dapat dilihat padatabel 3.3 dibawah ini.

Kedua isolat bakteri kitinolitik yang antagonis ter-hadap JAP tergolong kedalam genus Bacillus, hal iniditandai dengan sel berbentuk batang, Gram posi-tif dan menghasilkan endospora. Menurut Buchanan& Gibbon [16], Bacillus memiliki bentuk batang atauhampir lurus 0, 3− 2, 2µm× 1, 2− 7µm, Gram positifdan mampu membentuk endospora.

Kedua jenis bakteri ini sangat berpotensi digu-nakan sebagai agen pengendalian penyakit tanamanyang disebabkan oleh jamur, karena genus Bacillusbanyak yang berperan sebagai biofungisida. Tombedkk. [17] menyatakan, Bacillus banyak digunakan se-bagai biodekomposer limbah organik dan biofungisidauntuk pengendalian patogen tanaman seperti Bacillussubtilis dan Bacillus pantotkenticus .

4 SIMPULAN

Penelitian yang telah dilakukan tentang skrining bak-teri kitinolitik rizosfir tanaman karet yang antagonisterhadap pertumbuhan jamur akar putih dapat disim-pulkan bahwa :

1. Isolasi bakteri kitinolitik dari rizosfir tanamankaret diperoleh sebanyak 4 isolat, namun hanya 2isolat yang antagonis terhadap pertumbuhan ja-mur akar putih (Rigidoporus lignosus)

14112-54

Muharni dkk./Skrining Bakteri Kitin. . . . Jurnal Penelitian Sains 14 1(D) 14112

Tabel 3: Hasil karakterisasi isolat bakteri kitinolitik rizosfir tanaman karet yang antagonis terhadap pertumbuhan JAP

Karakter Isolat Isolat BRK5 Isolat BRK7

Makroskopis koloni Irregular, entire Circular, Serrate,raised, opaque raised, opaque

Mikroskopis Sel Sel berbentuk batang,Gram Sel berbentuk batang,Grampositif, menghasilkan endospora positif, menghasilkan endospora

Motilitas Nonmotil Motil

Uji Biokimia

- Hidrolisis pati Positif Positif

- Hidrolisis lemak Negatif Positif

- Hidrolisis kasein Positif Positif

- Hidrolisis gelatin Positif Positif

- Fermentasi glukosa Positif Positif

- Fermentasi sukrosa Positif Negatif

- Fermentasi laktosa Negatif Negatif

- Produksi H2S Negatif Negatif

- Produksi Indol Negatif Negatif

- Produksi Urease Positif Negatif

- Produksi Katalase Positif Positif

- Uji metil merah Positif Positif

- Uji Voges-Proskauer Negatif Positif

- Uji TSI Positif Positif

- Uji Simmon’s sitrat Negatif Negatif

- Redusi nitrat Positif Positif

Nama Bacillus sp. Bacillus apiarius

2. Hasil karakterisasi diketahui kedua isolat antago-nis jamur akar putih ini tergolong kedalam genusBacillus yaitu Bacillus sp dan Bacillus apiarius

DAFTAR PUSTAKA

[1] Anonimus, 2006, Strategi Pengelolaan Penyakit TanamanKaret Untuk Mempertahankan Potensi ProduksiMendukung Industri Perkaretan Indonesia Tahun 2020,Pusat Penelitian Karet, Balai Penelitian Sembawa,Palembang

[2] Anonimus, 2007, Pengendalian Penyakit Jamur AkarPutih (Rigidoporus lignosus) Pada Tanaman Karet Disentra Pengembangan Karet (Propinsi Sumatera Selatandan Kalimantan Barat), Ditjen Perkebunan

[3] Anwar, C., 2006, Majemen dan Teknologi Budidaya Karet,Makalah Pelatihan, Pusat Penelitian Karet, Medan

[4] Untung, K., 1996, Pengantar Pengelolaan Hama Terpadu,Gajah Mada University Press, Yogyakarta

[5] Suzuki, K., N. Taiyoji, N. Sugawara, B. Nikaidou,Henrissat and T. Watanabe, 1999, The Third Chitinasegene (chi C) of Serratia marcescens 2170 and theRelationship of its Product to Other Bacterial Chitinases,Biochem. J., 343: 587 - 596

[6] Watanabe, A., V.H. Nong, D. Zhang, M. Arahira, N.A.Yeboah, K. Udaka, and C. Fukazawa, 1999, MoleculerCloning and Ethylene Inducible Expression of Chi b1Chitinase from Soybean (Glycine max L.), Biosci BiotechBiochem, 63 : 251- 256

[7] Thamthiankul, S., S. Suan-Ngay, and S. Tantimavanich,2001, Chitinase from Bacillus thuringiensis subsp.Pakistani, Journal of Appl Microbiol Biotechnol, 56 : 395 -401

[8] Folders, J., J. Algra, M.C. Roelofs, C.L. Leendert, J.Tommassen, and W. Bitter, 2001, Characterization ofPseudomonas aeruginosa Chitinase a Gradually SecretedProtein, J. Bacteriology, 183 : 7044-7052

[9] Panda, F.T., 1999, Regulation and Cloning of MicrobialChitinase Genes, Appl. Microbiol Biotechnol, 51 : 141 -151

[10] Muharni dan E. Nurnawati, 2007, Pengujian AktivitasKitinase Bacillus circulans Untuk Dikembangkan SebagaiAgen Biokontrol Pada Penyakit Tanaman, JurnalPenelitian Sains, 1 : 144 - 150

[11] Hasanuddin, 2003, Peningkatan Peranan MikroorganismeDalam Sistem Pengendalian Penyakit Tumbuhan SecaraTerpadu, Makalah, Jurusan HPT Pertanian USU

[12] Chernin, L.Z., Ismailov, S. Haran, and I. Chet, 1995,Chitinolytic Enterobacter agglomerans antagonistic toFungal Plant Patogens, Appl Environ Microbiol, 61 : 1720- 1726

[13] Susi, 2002, Isolasi Kitinase dari Scleroderma columnae danTrichoderma harzianum, Jurnal Ilmu Dasar, 3(1) : 30 - 35

[14] Holetz, F.B., G. L. Pessini, N.R. Sanchez, D. Aparicio, G.Cortez, C.V. Nakamura, & B.P.D. Filho, 2002, Screeningof Some Plants Used in The Brazillian Folk Medicine forThe Treatment of Infectious I, Journal of BiolineInternational, http://www.bioline-org.br/request?02229

14112-55

Muharni dkk./Skrining Bakteri Kitin. . . . Jurnal Penelitian Sains 14 1(D) 14112

[15] Toharisman, A., 2007, Peluang Pemanfaatan EnzimKitinase Di Industri Gula, Makalah, P3GI

[16] Buchanan, R.E. & N.E. Gibbons (CoE), 1974, Bergey’sManual of Determinative Bacteriology, 8th Ed., S.T.Cowan, J.G. Holt, J. Liston, R.G.E. Murray, C.F. Niven,A.W. Ravin & R.Y. Stanier (Eds.), Baltimore

[17] Tombe M., G. Purnayasa, D. Wahyuno, Sugeng danZulhisnain, 2002, Uji Pengendalian Busuk Akar JambuMete dengan Kompos, Pestisida Nabati dan Agen Hayati,Laporan Hasil Penelitian Proyek HPT, Badan LitbangPertanian

14112-56