SIEMBRA MICROBIANA

RESPONSABLE: PERCY WILLIAMS AGUILAR BURGOSGRUPO: 1GDOCENTE: DR. GINO POZZI R.FECHA: 15-ABR-2014

¿QUÉ ES LA SIEMBRA MICROBIANA?

¿QUÉ REGLAS NESECITO?

EFECTÚAR ASÉPTICAMENTE

LOS MEDIOS DE CULTIVO Y EL INSTRUMENTAL A UTILIZAR ESTÉN ESTERILIZADOS

MANIPULEO ADECUADO QUE SE TRABAJE FUERA

DE TODA CORRIENTE DE AIRE. DE SER POSIBLE UTILIZANDO UN MECHERO O BIEN FLUJO LAMINAR.

MATERIAL NESESARIOPIPETAS DE 1 ML Y 10 MLERLENMEYER DE 250 MLESPÁTULAAGAR PLATE COUNT AGAR VRBLAGAR BAIRD-PARKERCALDO MC CONKEYESPÁTULAS DE DRIGALSKYCAJAS DE PETRIESTUFA DE CULTIVOBAÑO TERMOSTÁTICORECIPIENTES PARA BAÑO MARÍAANSA DE PLATINOAGUA DESTILADAMUESTRA A ANALIZARTUBOS DE ENSAYO DE 10 Y 20 MLCAMPANAS DE DURHAMALGODÓN Y GASA

TECNICAS DE SIEMBRA MEDIOS LIQUIDOS

CALDOS NUTRITIVOS MEDIOS SOLIDOS (agar, gelatina o sílica gel.)

INMERSION O VERTIDO => anaeróbicosEN DOBLE CAPA=> anaeróbicos y aerofilosSUPERFICIE O EXTENSION => aeróbicos ESTRIAS => colonias aisladas

PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO

1. SE SIGUEN LAS INSTRUCCIONES DEL MEDIO DE ACUERDO A LA CANTIDAD A PREPARAR.

2. SE TRANSFIERE A UN ERLENMEYER 3. SE AGREGA LA CANTIDAD DE AGUA DESTILADA

ESTABLECIDA. 4. SE DISUELVEN LOS GRUMOS QUE PUEDAN

FORMARSE5. SE LLEVA LA SUSPENSIÓN A BAÑO MARÍA HASTA QUE

SE TORNE TRANSPARENTE, 6. SE CUBRE EL ERLENMEYER CON UN TAPÓN DE

ALGODÓN (TORUNDA) ENVUELTO EN GASA. 7. SE CUBRE LA TORUNDA CON MATERIAL

IMPERMEABLE 8. SE ESTERILIZA EN AUTOCLAVE A 121ºC DURANTE 15

MINUTOS.9. SI SE UTILIZA DE INMEDIATO, DEJAR ENFRIAR A

TEMPERATURA ALREDEDOR DE 45ºC.10. EN CASO DE QUE EL MEDIO SOLIDIFIQUE, FUNDIRLO

NUEVAMENTE A BAÑO MARÍA ANTES DE SU USO.

EN CALDO1. SE SIGUEN LAS INSTRUCCIONES DEL

ROTULO2. SE DISTRIBUYE EL CALDO COLOCANDO 10

ML EN TUBOS DE ENSAYO DE 20 Y 10 ML EN TUBOS DE ENSAYO DE 50.

3. SE COLOCA PREVIAMENTE EN LOS TUBOS UNA CAMPANA DE DURHAM INVERTIDA.

4. SE TAPAN LOS TUBOS Y SE ESTERILIZAN EN AUTOCLAVE DURANTE 15 MINUTOS A 121ºC.

ESTRIAS

TECNICA 2: POR CUADRANTES

POR EXTENSION

INMERSION O VERTIDO

Dilución Tipo de microorganismo

10-1 a 10-3 Hongos

10-4 a 10-6 Levaduras

10-7 a 10-10 Bacterias

PARA EL AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS SE PUEDE APLICAR LA TÉCNICA DE AISLAMIENTO POR ESTRÍA O POR EXTENSIÓN EN SUPERFICIE (SE TRASFIERE DE 0.1 A 0.5 ML.)

SIEMBRA DE MUESTRA1. TOMAR UNA COLONIA DE LA PLACA UNA VEZ INCUBADA 2. SEMBRAR UNA SEGUNDA EN LA QUE TODAS LAS COLONIAS

QUE CREZCAN DEBEN SER IDÉNTICAS.3. A PARTIR DE LA SEGUNDA PLACA SE PUEDE RESUSPENDER

UNA DE LAS COLONIAS EN MEDIO LÍQUIDO, CONSIGUIÉNDO UN CULTIVO PURO.

4. PARA LA CONSERVACIÓN EXISTEN DIVERSOS MÉTODOS, EL MÁS SIMPLE ES LA RESIEMBRA EN TUBOS INCLINADOS SE MANTIENEN REFRIGERADOS DURANTE 3-6 MESES.

5. LA INOCULACIÓN PRIMARIA PUEDE HACERSE CON UN ASA SOBRE LA SUPERFICIE DEL MEDIO EN LA PLACA DE PETRI O SOBRE CALDOS DE CULTIVOS

FACTORES QUE AFECTAN TEMPERATURA => 25ºC – 37ºC OXIGENACION PH AGUA CONSERVANTES

MUCHAS GRACIAS…..