Amilasa Sérica y Urinaria

• Díaz Fernández, Paola Roxana.• LLatas Calderón, Margarita.• Cáceres Quispe Andrés

tipos de enzimas

Oxido – reductasasSi una molécula se reduce, tiene que haber otra que se oxide

Transferansas Grupos aldehídos, grupos acilos, grupos glucósidos, grupos fosfatos(quinasa)

Hidrolasas (reacciones de hidrolisis)

Transforman polímeros en monómeros. Actúan sobre enlace éster, glucósidico, peptídico, CN

Liasas(adición a los dobles en

enlaces)

Entre C y CEntre C y OEntre C y N

Isomerasas Glucosa galactosa

La amilasa es un enzima

hidrolasa que tiene la función de digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce principalmente en las glándulas salivares y en el páncreas.

Que es la amilasa?

Amilasa

Enzima mas pequeña

Es una enzima hidrolasa, cataliza la

descomposicion del almidon y el

glucogeno

Ataca los enlaces glucosidicos α 1-

4

Importante para digestion de almidones

Requiere iones de Ca y Cl para su activacion

Clasificación

La amilasa se clasifican en las siguientes:

o α-Amilasa

o β-Amilasa

o γ-Amilasa

α-Amilasa

• Son enzimas dependientes de cloruro, completamente afuncionales en ausencia de iones de cloruro.

• Actúan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos, descomponiéndolos en maltotriosa y maltosa desde la amilosa o maltosa, glucosa y dextrina desde la amilopectina .

Dado que puede actuar en cualquier punto de la cadena es más rápida que la β-amilasa.

En los animales es una enzima digestiva mayor y su pH óptimo está entre 6.7 y 7.0

¿Qué es la B-amilasa?

Enzima que rompe enlaces 1,4-a-glucosídicos en los polisacáridos eliminando repetidas unidades de maltosa en las terminaciones no reductoras de los mismos.

El organismo humano carece de b -amilasa, que en los herbívoros facilita la digestión de la celulosa. Por esta razón el ser humano es incapaz de aprovechar la celulosa.

Acción

ATACA A LA MOLECULA DE AMILOSA EN SU EXTREMIDAD NO REDUCTORA, SEPARANDO MOLÉCULAS DE MALTOSA EN LAS POSICIONES 1:4 Y CONTINUANDO DE ESTA FORMA HASTA QUE LLEGA AL PUNTO DE RAMIFICACIÓN DEL ENLACE 1:6, EN DONDE SU ACTIVIDAD SE DETIENE

DEGRADACIÓN DEL ALMIDÓN Lugar

γ-Amilasa

Además de romper el último enlace α(1-4) glicosídico en el extremo no reductor de la cadena de amilosa y amilopectina, liberando glucosa, la γ-amilasa puede romper los enlaces glicosídicos α(1-6).

A diferencia de las otras amilasas esta forma es más eficaz en medios ácidos y su pH óptimo es de 3.

También colabora en el momento de la excitación.

PANCREAS (porción exocrina del páncreas)Isoenzima P AMILASA PANCREATICA

GLÁNDULAS SALIVALES (parótidas, submaxilares y sublinguales) Isoenzima S o SALIVAR

UBICACION

HIDROLISIS DEL ALMIDON

La amilasa (sacarasa o ptialina) Cataliza por hidrólisis de los enlaces 1-4

GLUCOGENO - ALMIDON

FORMAR AZÚCARES SIMPLES

La Ptialina o Amilasa salival

Comienza la degradación del almidón

(Amilosa y amilopectina) monómero la glucosa

PRIMERA TRANSFORMACION

Intestino delgado (Ampolla de Váter)

Jugo pancreático (Amilasa pancreática)

DEXTRINA

SEGUNDA TRANSFORMACION

Glándulas intestinales (Amilasa intestinal - enzimas Sacarasa, Maltasa, Lactasa)

Desdoblar al almidón en Monómeros simples de Alfa-

Glucosa

Absorbidos por las vellosidades y micro

vellosidades intestinales

Transportados por la sangre a todas las células del cuerpo

TERCERA TRANSFORMACION

Enzimas Origen Substra

to

Función Catalítica

o Productos

Amilasa Salival

Glándulas

salivales

Almidón

Hidroliza LOS enlaces

1,4, produciendo

dextrinas limitantes,

matotriosa y maltosa.

Amilasa Pancreát

ica

Páncreas

exocrino

Almidón Igual que la amilasa salival

La determinación de los niveles de amilasa sérica se utiliza fundamentalmente para hacer el diagnostico de PANCREATITIS AGUDALos aumentos de amilasa en el suero dependen de básicamente:

Inflamación del páncreas

Glándula parótida.

Ruptura de la trompa de Falopio en caso de embarazo ectópico.

AMILASA SERICA

Los valores normales de amilasa sanguínea deben ser inferiores a 120 UA/dl

Hiperamilasemia aparecía en suero entre la cuarta y sexta hora después del comienzo de la crisis de pancreatitis aguda, alcanzando el máximo en 24 a 30 horas. Sin embargo a partir de las 48 horas es posible encontrar valores plasmáticos dentro de los parámetros normales.

Los aumentos seguidos de las caídas bruscas de los valores hasta los niveles muy bajos se dan en la destrucción masiva del páncreas (PANCREATITIS NECROTIZANTE)

AMILASA SÉRICA

LA PAROTIDITIS BACTERIANA Y

PAPERAS se asocian también con elevaciones de amilasa sérica.

DETERMINACIÓN AMILASA SÉRICA Obtener una

muestra de sangre

Paciente tiene que encontrarse en ayunas, (no haber ingerido alimentos en más de 8 a 12 horas)

Inmediato llevarlo a laboratorio para su análisis

Inicialmente, la amilasa se determinaba cuantitativamente según el método iodométrico de Wohlgemuth.

Posteriormente, Somogyi estandarizó las cantidades de almidón y iodo, siendo estas modificaciones las bases de los métodos amiloclásticos y iodométricos introducidos posteriormente por Caraway.

MÉTODO AMILOCLÁSTICO IODOMÉTRICO PARA LA DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE LA ACTIVIDAD DE AMILASAS EN LÍQUIDOS BIOLÓGICOS

El sustrato, almidón tamponado, se incuba con la muestra produciéndose la hidrólisis enzimática.

Esta se detiene por el agregado de REACTIVO DE YODO, que al mismo tiempo produce color con el remanente del almidón no hidrolizado.

La disminución de color respecto de un sustrato color (sin muestra) es la medida de la actividad enzimática

Expresa en Unidades

Amilolíticas/decilitro (UA/dl) comparables con las Unidades sacarogénicas (somogyi)/decilitro.

Valores de la Amilasa Sérica

Condición clínicaSuero

(UA/dl)

Normal

Pancreatitis

aguda

Pancreatitis

crónica

Parotiditis

Procesos

abdominales

agudos (sin

pancreatitis)

<120

300 a 12,000

Hasta 200

200 a 350

normal

Amilsa Urinaria

Condición clínica Orina

(UA/hora)

Normal

Pancreatitis

aguda

Pancreatitis

crónica

Parotiditis

Procesos abdominales agudos(sin pancreatitis)

<260

Mas de 900

Mas de 300

Mas de 750

normal

El paciente debe miccionar, descartando esta micción, dos horas después vuelve a orinar y recoge toda la orina. Esta muestra que corresponde a dos horas de diuresis, se diluye a 200ml. Con agua.

La determinación se efectúa con 20 ul. De esta dilución, obteniéndose el resultado directamente en Unidades Amilolíticas por hora.

Debido a las grandes variaciones de la diuresis en los cuadros agudos compatibles con diagnóstico de Pancreatitis, la determinación de amilasuria sobre muestras simples de orina carece de valor, por lo que debe determinarse la excreción horaria.

Material requerido

•Espectrofotómetro

• Micro pipetas • Tubos de ensayo • Baños de agua a

37°C

• Tiempo de reacción: 7´ y 30´

• Volumen de muestra: 20ul

• Volumen final de la reacción: 10 ml

Unidades: una Unidad Amilolítica(UA) es la cantidad contenida en 100 ml. De muestra, que puede hidrolizar 10 mg de almidón en 30 minutos, en las condiciones de la reacción, en esta técnica se incuban 20 ul de muestra con 0,5 mg. de almidón contenidos en 1ml de sustrato.

PROCEDIMIENTO

En dos tubos de fotocolorímetro marcados C

(control) y D (desconocido)colocar:

C

D

Sustrato 1 1ml.

1ml.

Dejar unos minutos en baño de agua a 370C y

agregar :

Muestra

20ul

Incubar a 370C a los 7 minutos y medio exactos,

agregar:

Reactivo de lodo 2 1ml

1ml

Mezclar por agitación suave. Retirar los tubos del

baño y agregar:

Agua destilada 8ml

8ml

Mezclar por inversión. Leer en fotocolorímetro con filtro

rojo en espectrofotómetro alrededor de 640nm,

llevando a cero el aparato con agua destilada.

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

El color de la reacción es estable durante una hora por lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. Si la temperatura ambiente es superior a 250C, lectura deberá efectuarse dentro de los 20 minutos.

CALCULO DE LOS RESULTADOS

Abs. Control - Abs.muestra

Amilasa UA/dl=------------------------------------x100

Abs. Control

Valoración de resultados

anormales Los niveles aumentados de

Amilasa en la sangre pueden indicar:

•Cáncer de páncreas, ovarios, pulmón.

•Colecistitis. •Cólico de vesícula biliar. •Embarazo ectópico con

rotura de trompas. •Obstrucción intestinal. •Pancreatitis aguda. •Problemas de obstrucción

de conductos biliares o pancreáticos.

•Ulcera de estómago perforada.

Amilasa en pancreatitis

aguda

Su elevación mayor de tres veces el valor superior normal hace sospechar pancreatitis. La amilasa se eleva en las 6 a 12 horas posteriores al inicio, tiene una vida media de 10 horas, y persiste elevada por 3 a 5 días.

Es importante saber que la amilasa pancreática representa 35 a 50%, y a la salival el resto

Los niveles disminuidos de Amilasa en la sangre pueden indicar:

•Cáncer de páncreas.

•Lesión pancreática. •Enfermedades

renales. •Toxemia en el

embarazo.

PANCREATITIS CRÓNICA

Definición: Es un estado inflamatorio crónico que determina un daño irreversible de la estructura y función pancreática. Ésta es causada por la lesión obstructiva, es la forma más común de pancreatitis, la que se caracteriza por cambios crónicos irreversibles.

Causas: Pancreatitis Alcohólica - Pancreatitis

Idiopática - Pancreatitis Crónica Tropical - Pancreatitis Hereditaria - Pancreatitis por Hipoparatiroidismo Pancreatitis por Lesiones Traumáticas del Conducto Ductal

MUCHAS GRACIAS

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