RRcije (p < 0,05). Nakon terapije sa ABZ aktivnost AST i · je kliničko-patološki entitet, kome...

41

ORIGINALNI RAD / ORIGINAL PAPER

* Rad primljen za štampu 08. 10. 2014. godine**Drsc.vet.med.BlagojeDimitrijević,docent,drsc.vet.med.SlavoljubJović,docent,drsc.vet.med.MilankaJezdimirović,redovniprofesor,drsc.vet.med.DraganBacić,docent,drsc.vet.med.MilaSavić,redovniprofesor,Fakultetveterinarskemedicine,UniverzitetuBeo-gradu,Srbija;NemanjaJezdimirović,drvet,Naučniinstitutzaveterinarstvo,Beograd,Srbija;drsc.vet.med.MensurVegara,LifescienceUniversity,Norway

DOI10.2298/VETGL1502041D UDC636.32/.38.09:616.995.132-074636.32/.38.09:615.284

INFEKCIJA OVACA SA Strongyloides papillosus – UTICAJ INTENZITETA PARAZITSKE INFEKCIJE I TERAPIJE ALBENDAZOLOM NA ODREĐENE

BIOHEMIJSKE PARAMETRE U KRVI OVACA* INFECTION OF SHEEP WITH Strongyloides papillosus – THE EFFECT OF INTENSITY OF PARASITIC INFECTION AS WELL AS THERAPY WITH ALBENDAZOLE ON CERTAIN

BIOCHEMICAL PARAMETERS IN THE BLOOD OF SHEEP

Dimitrijević B., Jović S., Jezdimirović Milanka, Bacić D., Savić Mila, Jezdimirović N., Vegara M.**

Cilj ovog rada je da se ispitaju određeni biohemijski parametri u krvi ovaca u uslovima različitog intenziteta parazitske infekcije sa Strongyloides papillosus, kao i nakon terapije albendazolom. Istraživanje je izvedeno na ovcama virtemberg rase (n = 30) kod kojih je utvrđen niski, srednji i visoki intenzitet parazitske infekcije sa S. papillosus. Kontrolnu grupu (n = 10) činile su ovce negativne na prisustvo parazitske infekcije. Stepen i vrsta promene praćeni su određivanjem koncentracije glukoze, ukupnih proteina, albumina, Albumin/Globulin odnosa, AST, uree, ukupnog bilirubina, kalcijuma, fosfora, ukupne a ktivnosti laktat dehidrogenaze (LDH) i izoenzimske distribucije LDH15.

Na osnovu dobijenih rezultata utvrdili smo, preko izoenzimske distribucije laktat dehidrogenaze, da u toku parazitske infekcije sa S. papillosus dolazi do oštećenja ćelija jetre, srčanog mišića i pluća, dok je nakon terapje albendazolom jetra najoštećeniji organ. Koncentracija glukoze, ukupnih proteina i albumina linearno je opadala sa rastom intenziteta parazitske infekcije (p < 0,05), a nakon terapije albendazolom pad koncentracije ovih parametara bio je na statistički znatno većem nivou (p < 0,01). Aktivnost AST, koncentracija uree i ukupnog bilirubina takođe su linearno rasle sa intenzitetom parazitske infekcije (p < 0,05). Nakon terapije sa ABZ aktivnost AST i koncentracij a RETRACTED

42

Vet.glasnik69(1-2)41-61(2015)DimitrijevićB.isar.:InfekcijaovacasaStrongyloides papillosus–uticajintenzitetaparazitskeinfekcijeiterapijealbendazolomnaodređene...

ukupnog bilirubina bile su na statistički značajno većem nivou (p < 0,001), dok je koncentracija uree zadržala iste nivoe kao u slučaju parazitske infekcije. Vrednosti koncentracija kalcijuma (p > 0,05) i fosfora (p < 0,05) takođe linearno opadaju sa rastom intenziteta parazitske infekcije. Trend pada koncentracije ovih makroelemenata, nastavlja se i nakon terapije albendazolom (p < 0,001). Imajući u vidu naša prethodna istraživanja na polju oksidativnog stresa, fenomena koji se nalazi u osnovi promena utvrđenih u ovom radu, strogo preporučujemo da se u antiparazitske protokole, pored antihelmintika koriste i preparati sa antioksidativnim svojstvima.

Ključne reči: Strongyloides papillosus, albendazol, biohemijski parametri, jetra, ovce

Ovcesuvisokoprijemčivenaparazitskeinfekcije,čakiuuslovimaniskein-fekcije pašnjaka. Iz tog razloga, u kliničkoj patologiji ovaca, parazitske infekci-jeimajuvelikiznačaj,jerporedzdravstvenogpredstavljajuiekonomskiproblem(Chauvinisar.,2001).

Uzročnik strongiloidoze ovaca jeStrongyloides papillosus. Strongiloidozaje kliničko-patološki entitet, kome se u kliničkoj praksi obično ne pridaje velikiznačaj. Razlog ovome je što su simptomi izazvani infekcijom saS. papillosus često„zamaskirani“simptomimainfekcijesadrugimparazitskimvrstama,štojeinajčešćislučajuuslovimaprirodneinfekcije.Takođe,priniskomintenzitetuoveparazitskeinfekcijeorganizamdomaćinanereagujekliničkividljivimsimptomima.Ekonomskeštetekojenastajupriovojinfekcijisuposledicaprogresivnogmrša-vljenjaživotinja,smanjenjaplodnosti,proizvodnjemlekaimesa.Procenjujesedaje15%proizvodnjemlekaimesauSrbijiizgubljenousledinfekcijeovacasaS. papillosus(Dimitrijevićisar.,2012).

Strongyloides spp.pripadajugeohelmintima,štoznačidautokurazvojamo-gudaporedparazitskogoblika imaju i slobodnoživeće formekojedeo razvo-jnogciklusaprovodeuzemljištu.OvojerazlogzbogčegainfekcijesaStrongyloides spp.imajujakenzootskikarakter.ParazitskiobliciS. papillosus predstavlja-jupartenogenetskeženkekojeparazitirajuutankomcrevuovaca(Kassai,1999;Eberhardtisar.,2008).Infekcijamoženastatiperoralnimunošenjem(prekokon-taminiranehrane i vode) infektivnih larvica (stadijumL3) iliperkutanimprobija-njemkožemeđupapčaneregije.Uovomdrugomnačinuinfekcije(perkutanom),otvarajuse„ulaznavrata“zauzročnikedrugeetiologije.Pritome,posebnuopas-nostpredstavljajuanaerobniuzročnicizaraznešepavostiovaca(AbbottiLewis,2005).

Albendazol(ABZ)jeantihelmintikširokogspektradejstvailekizborautera-pijistrongiloidozeidrugihparazitskihinfekcija(Kassai,1999).GlavnimehanizamkojimABZostvarujesvojefekatjerezultatnjegoveinterakcijesaeukariotskimci-

Uvod / Introduction

RETRACTED

43


toskeletnimproteinom, tubulinom, inhibirajući njegovupolimerizacijuumikrotu-bule.Takođe,ABZdelujeinabiohemijskeienzimskeproceseuparazitimainhi-birajućitransportglukozeuparazitimaienzimfumaratreduktazu(Rufenerisar.,2005).Natajnačindolazidoosiromašenjaenergetskihrezerviiuginućaparazita.

UnašemprethodnomraduustanovilismodainfekcijasaS. papillosus dovo-diorganizamdomaćinaustanjepojačanogoksidativnogstresa(Dimitrijevićisar.,2012).Pritomjeutvrđenodajenivooksidativnogstresapozitivnokoreliraosain-tenzitetomoveparazitskeinfekcije.Interesantnojeidaterapijaalbendazolom,ta-kođeuvodiorganizamustanjenarušeneredoksravnoteže,intenzivnijeuodnosunaposmatranuparazitskuinfekcijuiudužemvremenskomperiodu(neobjavljenirezultatiautora).

Imajućiuvidunašaprethodnaistraživanjauoblastioksidativnogstresakodparazitskih infekcija,ciljovog istraživanja jedasebliže ispitajupromenevred-nosti pojedinih biohemijskih parametara (glukoze, ukupnih proteina, albumina,A/Godnos,aspartat-aminotransaminaze(AST),uree,ukupnogbilirubina,kalciju-ma,fosfora,aktivnostienzimalaktatdehidrogenaze(LDH),kaoinjegovihizoen-zimskihoblikaLDH1-5)ukrviovaca,izazvanihrazličitimintenzitetomparazitskein-fekcijesaS. papillosus,kaoinakontretmanasaABZ.

IstraživanjejeizvedenouokolinigradaVranja(seloKupinince,geografskekoordinate:42◦29’46.98’’N,21◦53’50.10’’E),naovcama(n=40)rasevirtemberg,starosti2‒3godine,kodkojihjeparazitološkimispitivanjemdokazanainfekcijasaS. papillosus.Uzavisnostiodintenzitetainfekciježivotinjesupodeljeneutrigrupe(A1‒nizak;A2‒srednjiiA3‒visokintenzitetinfekcijesaS. papillosus).Ovcesuzatimtretiranejednokratno,peroralnomaplikacijomABZ,udoziod5mg/kgtele-sne mase i prikazane u rezultatima kao B1,B2 i B3grupa.KontrolnugrupuC1činilesuovce(n=10),negativnenaprisustvoovogparazita,inakontretmanasaABZ,prikazaneurezultatimakaoC2 grupa.

SvipostupcisaživotinjamaizvedenisuuskladusaprincimaEvropskekon-vencijezazaštituživotinjakičmenjakakorišćenihueksperimentalneidrugesvrhe(EuropeanConventionfortheProtectionofVertebrateAnimalsUsedforExperi-mentalandOther;OfficialDailyN.L358/1–358/6,18,December1986).

Uzorkovanje fecesa i krvi / Sampling of faeces and bloodUzorkovanje fecesa za parazitološki pregled / Sampling of faeces for parasitological examination

Uzorci fecesauzimani supojedinačnoodsvakeovce,direktno izampulerektuma, jednomdnevnou toku tri dana, pakovani u zasebne, obeleženepla-stičnekeseitransportovaniuručnomfrižiderudoparazitološkelaboratorije.

Materijal i metode / Material and methods

RETRACTED

44

Uotkrivanjuideterminacijiparazitainjihovihrazvojnihoblikaprimenjenisustandardniključevizaidentifikacijuparazitainjihovihrazvojnihoblikakojiseba-zirajunamorfološkimimorfometrijskimkarakteristikamajaja,larvicai/iliadultnihoblika.

Koprološkadijagnostikajevršenametodamasedimentacijeiflotacije(Kas-sai,1999).Pregledpreparatavršenjepriuvećanju7x10i7x40namikroskopuReichert,Nemačka. Intenzitet infekcijeodređen jebrojanjem jajahelminatapogramu fecesa metodom po Mc Masteru (Euzeby, 1982; Reinecke i Fonesca,1992).

Uzorkovanje krvi / Sampling of blood

Uzorcikrviovacazapredviđenaispitivanjauzetisupunkcijomv. jugularis(uzfiksiranježivotinja),predehelmintizacije i21.danaoddehelmintizacijesaABZ.Deokrviuzorkovanjebezantikoagulansauciljuodvajanjakrvnogseruma,adeosaheparinomkaoantikoagulansomuciljuodvajanjakrvneplazme.Serumisuodvajaniposlespontanekoagulacijekrvicentrifugiranjemutrajanjuod10minu-tana3000rpm,akrvnaplazmacentrifugiranjempunekrvi.Ovakodobijeniuzorcikrvneplazmeikrvnogserumasučuvanina-200C,doanalize.

Biohemijske analize / Biochemical analyses

Koncentracija glukoze u krvi određena je korišćenjemPrecision-Xtra plustest traka. Aktivnost enzima AST određena je kinetičkim metodom u reakcijitransaminacijeaminogrupekojukatalizujeovajenzim.Koncentracijaureejeta-kođeodređenaenzimskimkinetičkimmetodomsaureazom.Koncentracijauku-pnihproteinaodređena jebiuretskommetodom,dok jekoncentracijaalbuminaodređenareakcijomsabromkrezolzelenim.Koncentracijaukupnogbilirubina(su-makonjugovanoginekonjugovanogbilirubina)jeodređenaureakcijisadiazoni-jumjonomsulfanilnekiseline.Koncentracijakalcijumaodređenajeureakcijisasao-krezolftaleinom,dokjekoncentracijafosforaodređenaureakcijisaamoni-jummolibdatom.Sviparametriodređenisukorišćenjemkomercijalnihtestpaketa,premauputstvuproizvođača(Bayer Diagnostics, Germany).Spektrofotometrijskamerenja izvedena su na aparatu Cecil CE 2021 UV/VIS.

UkupnaaktivnostLDHiizoenzimskioblicilaktatdehidrogenaze(LDH1,LDH2,LDH3,LDH4iLDH5)određenisuvertikalnomelektroforezomna7.5%PAGE(HO-EFFERMINIVE,Amersham,LKB,2117,Bromma,Uppsala,Sweden),uzprime-nuTRIS-glicinskogpuferaiNa-laktatakaosupstratauprisustvutetrazolijumskogplavogpometodiYoshidaiTakakuwa(1997).Intenzitettrakaodređenjedenzito-metrijski,korišćenjemkompjuterskogprogramskogpaketaScionImageBeta4.02(ScionCorp.,2007).Relativnaaktivnostpojedinihizoenzimaizraženajeprocen-tualnouodnosunaukupnuaktivnostLDH.


RETRACTED

45

Statistička analiza / Statistical analyses

Statistička obrada rezultata izvršena je korišćenjem kompjuterskog pro-gramskogpaketaGraphPadPrism5.00(SanDiego,CA,USA).Statističkazna-čajnostrazlikasvihispitivanihparametaraodređenajepomoćuANOVAtesta,ko-rišćenjemTukey-ovogtesta.Rezultatisuizraženikaosrednjavrednost±standar-dnagreška(SE).Kaostatističkiznačajneuzetesurazlikenanivoup≤0,05.

Rezultatiparazitološkogpregledafecesaovaca/Theresultsofparasitolo-gicalexaminationoffaecesofsheep

RezultatiispitivanjaintenzitetaparazitskeinfekcijesaS. papillosus pre i na-kondehelmintizacijesaABZprikazanisuutabeli1.

Rezultati biohemijskih ispitivanja krvi / The results of biochemical blood tests

Upoređujućivrednostikoncentracijeglukozeukrvipredehelmintizacijeutvr-đenesustatističkiznačajnoniževrednostiitokodgrupesaniskimintenzitetominfekcije2,85±0,10mM/L(p<0,05),kodgrupesasrednjimintenzitetom2,60±0,14mM/Likodgrupesavisokimintenzitetominfekcije2,53±0,14mM/L(p<0,001),uodnosunakontrolnuC1grupu.NakontretmanasaABZ,koncentracijaglukozekodsvihispitivanihgrupajebilabezstatističkeznačajnostiuodnosunaC1grupu(p>0,05).Međutim,međusobnimpoređenjemgrupa(pre iposlede-helmintizacije) utvrđeno je da su koncentracije glukoze bile više nakon dehel-mintizacije,itokodgrupasablagimivisokimintenzitetomparazitskeinfekcijenanivoustatističkeznačajnostip<0,05,akodgrupesasrednjimintenzitetominfek-cijenanivoup<0,01,uodnosunagrupesaispitivanomparazitskominfekcijom.InteresantnojedasukoncentracijeglukozekodkontrolneC2grupebilestatističkiznačajnoniže(p<0,01)uodnosunakontrolnuC1grupu(grafikon1).

Rezultati / Results

Tabela1.Intenzitet parazitske infekcije sa S. papillosus (srednja vrednost ± standardna greška) pre i nakon dehelmintizacije sa ABZ

Table 1. Intensity of parasitic infection with S. papillosus (average value ± standard error) before and after dehelmintization with ABZ

Intenzitet infekcije sa S. papillosus (br. jaja/g fecesa) / Intensity of infection with S. papillosus (number of eggs/g of faeces)

Pre dehelmintizacije sa ABZ / Before dehelmintization with ABZ

PosledehelmintizacijesaABZ/ After dehelmintization with ABZ

Grupe ovaca / Groups of sheep

A1(n=10) A2(n=10) A3(n=10) B1(n=10) B2(n=10) B3(n=10)

832±34,7 1320±56,1 2918±146,5 0 0 0


RETRACTED

46

Rezultatianalizeukupnihproteinaprikazanisunagrafikonu2.Poređenjem srednjih vrednosti koncentracije ukupnih proteina svih ispi-

tivanihgrupa(preiposledehelmintizacije)sakoncentracijomproteinakontrolnegrupe dokazano je smanjenje koncentracije proteina u grupi sa visokim inten-zitetominfekcijeisvihgrupatretiranihalbendazolom(p<0,05).Analizomdobi-jenihrezultataunutargrupapredehelmintizacijedokazanajeznačajnastatističkarazlikaukoncentracijiukupnihproteinaovacasaniskimisrednjimintenzitetominfekcijeuodnosunaovcesavisokimstepenomparazitskeinfekcije(p<0,01).

Nakondehelmintizacije,međusobnimpoređenjemunutargrupanijeutvrđe-nastatističkiznačajnarazlikausadržajuukupnihproteina(p>0,05).Međutim,ustanovljenajerazlikaukoncentracijiukupnihproteinakodgrupeovacasaniskimisrednjimintenzitetominfekcijepre(80,18±1,50i82,07±2,07g/L)iposlede-helmintizacijealbendazolom(72,77±1,40i74,95±1,31g/L)nanivoustatističkeznačajnostip<0,01.

Grafikon 1. Koncentracija glukoze u krvi ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +p < 0,05; ++p < 0,01 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 1. Concentration of glucose in the blood of sheep before (A) and after (B) dehelmintization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 in regard to control group C1; +p < 0,05; ++p < 0,01 compa-rison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

47

Koncentracijadominantneproteinskefrakcije,albumina,kaoialbuminsko/globulinskiodnos(A/G)prikazanisunagrafikonima3i4.

Grafikon 2. Koncentracija ukupnih proteina u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05 u odnosu na kontrolnu grupu C1; ++p < 0,01 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 2. Concentration of total protein in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmint-ization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05 in regard to control group C1; ++p < 0,01 comparison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

48

Primena antihelmintika snižava koncentraciju albumina u grupi ovaca sablagimza25,40%,srednjimza25,00%ivisokimintenzitetominfekcijeza17,04%.

Grafikon 3.Koncentracija albumina u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +p < 0,05; +++p < 0,001 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 3. Concentration of albumin in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelminti-zation: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01 in regard to control group C1; +p < 0,05; +++p < 0,001 comparison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Grafikon 4. A/G odnos u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +p < 0,05; +++p < 0,001 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 4. A/G ratio in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmintization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with me-dium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high in-tensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep neg-ative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; ***p < 0,001 in regard to control group C1; +p < 0,05; +++p < 0,001 comparison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

49

UočavasedaA/Gkoličnikimatendecijupadakakougrupipretakoiugrupiovacaposledehelmintizacijealbendazolomidostižeminimalnuvrednostugru-piovacasasrednjimintenzitetominfekcijeod0,82±0,06uodnosunakontrolnugrupu(1,44±0,10).

RezultatiodređivanjaenzimskeaktivnostASTprikazanisunagrafikonu5.

Poređenjem vrednosti aktivnosti AST svih grupa sa kontrolnom grupomdokazanjestatističkiznačajanrastaktivnostiASTugrupamapredehelmintizaci-je(p<0,05).NakondehelmintizacijeugrupisablagimintenzitetominfekcijeASTdostižemaksimalnuvrednost i iznosi149,9±4,88U/L,uodnosunaaktivnostovogenzimakontrolnegrupe(66,50±6,50U/L).

Rezulatianalizekoncentracijeureeuserumuovaca,preiposledehelminti-zacije,prikazanisunagrafikonu6.

Grafikon 5. Aktivnost AST u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +p < 0,05; +++p < 0,001 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 5. AST activity in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmintization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with me-dium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high in-tensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep neg-ative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 in regard to control group C1; +p < 0,05; +++p < 0,001 com-parison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

50

Uočava se porast koncentracije uree u zavisnosti od intenziteta infekcije,kodgrupesablagimintenzitetominfekcijepovećanjeiznosi36%,sasrednjimin-tenzitetominfekcijeza57%dokugrupisavisokimstepenomparazitskeinfekcijeovopovećanjeiznosi68%.Posledehelmintizacije,koncentracijaureezadržavapovećanuvrednostiiznosi57 ‒61%odvrednostikontrolnegrupe.

Analizomkoncentracijeukupnogbilirubina(grafikon7)predehelmintizacije,utvrđenjeporastuzavisnostiod intenziteta infekcije,alibezstatističkeznačaj-nostiuodnosunakontrolnuC1grupu(3,23±0,27µM/L;p>0,05).Nakondehel-mintizacije,utvrđenjeporastkoncentracijeukupnogbilirubinakodgrupekojajeimalablagiintenzitetinfekcijenanivoustatističkeznačajnostip<0,05(5,51±0,43µM/L),kodgrupesasrednjimintenzitetominfekcijenanivoup<0,001(6,95±0,71µM/L), ikodgrupekojaje imalavisoki intenzitetparazitskeinfekcijenanivoup< 0,01 (6,13±0,25 µM/L), u poređenju sa kontrolnomC1 grupom. Interesantno jeprimetitida jekodkontrolneC2grupeutvrđenporastkoncentracijeukupnog

Grafikon 6.Koncentracija uree u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; ++p < 0,01 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 6. Concentration of urea in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmintization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05; ***p < 0,001 in regard to control group C1; ++p < 0,01 comparison between groups be-fore and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

51

bilirubina(5,42±0,48µM/L)nanivoustatističkeznačajnostp<0,01,uodnosunaC1 grupu.

Analizomkoncentracijekalcijumaunutargrupapredehelmintizacije(upri-sustvu infekcije saS. papillosus), utvrđeno jedadolazi dopadakoncentracijekalcijumaukrvnomserumuispitivanihovacasaporastomintenzitetaparazitskeinfekcije,alibezstatističkeznačajnostiuodnosunakontrolnuC1grupu(p>0,05).NakondehelmintizacijesaABZutvrđenojedadolazidopadakoncentracijekalci-jumaukrvnomserumuispitivanihovaca,kakomeđusobnimpoređenjemgrupapreiposledehelmintizacije(1,87±0,04vs2,46±0,03;1,59±0,09vs2,26±0,06;1,62±0,06vs2,26±0,06mM/L),takoiuodnosunakontrolnuC1grupu(2,54±0,05mM/L),nanivoustatističkeznačajnostip<0,001.Takođe,ikodkontrolneC2 grupeutvrđenjepadkoncentracijekalcijumauodnosunaC1grupu(p<0,001)(grafikon8).

Grafikon 7. Koncentracija ukupnog bilirubina u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +p < 0,05; ++p < 0,01 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 7. Concentration of total biblirubin in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmint-ization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 in regard to control group C1; +p < 0,05; ++p < 0,01 compar-ison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

52

Koncentracijafosforakodgrupesablagimintenzitetomparazitskeinfekcijesa S. papillosus(2,87±0,08mM/L)nijesestatističkirazlikovalaodC1grupe(2,66±0,07mM/L;p>0,05).Međutim,možesevideti(grafikon9)dasaporastomin-tenzitetaparazitskeinfekcije(kodsrednjeg2,17±0.14mM/L;p<0,05ivisokogintenziteta1,99±0,08mM/L;p<0,01)dolazidopadakoncentracijefosfora,uodnosunakontrolnuC1 grupu.

NakonterapijesaABZdolazidopadakoncentracijefosforausvimgrupa-ma(niski ‒1,87±0,04;srednji ‒1,59±0,09;visoki ‒1,62±0,05mM/L),nanivoustatističkeznačajnostip<0,001,uodnosunakontrolnuC1grupu.Međusobnimpoređenjemgrupapreiposledehelmintizacije,možesevideti(grafikon9)dajepadkoncentracijefosforakodgrupesablagimisrednjimintenzitetomparazitskeinfekcijebionavisokomnivoustatističkeznačajnosti,p<0,001.Takođe,utvrđenojedasuvrednostikoncentracijefosforaukrvnomserumuC2grupebilestatističkiznačajnonižeuodnosunaC1grupu(p<0,001).

Grafikon 8. Koncentracija kalcijuma u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1pre i B1nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2pre i B2nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3pre i B3nakon dehelmintizacije); C1kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +++p < 0,001 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 8. Concentration of calcium in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmintization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; ***p < 0,001 in regard to control group C1; +++p < 0,001 comparison between groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

53

AnalizirajućienzimskuaktivnostukupneLDHutvrđeno jepovećanjenjeneaktivnostisaporastomintenzitetaparazitskeinfekcije;kodgrupesablagiminten-zitetominfekcijenanivoustatističkeznačajnostip<0,01(1447±41,04U/L),akodgrupasasrednjimivisokimintenzitetomparazitskeinfekcijenanivouznačaj-nostip<0,001 (1882±72,90 i2086±150,50U/L)uodnosunakontrolnuC1 grupu (849,00±28,87U/L).Nakondehelmintizacijeutvrđena jenižaaktivnostovogenzimakodgrupesasrednjim(1354±139,40U/L;p<0,05)ivisokiminten-zitetom(1531±102,80U/L;p<0,001)parazitskeinfekcije,uodnosunakontrol-nuC1grupu.Međusobnimpoređenjemgrupa,pre iposledehelmintizacijeutvr-đenesustatističkiznačajnoniževrednostiLDHnakontretmanasaABZ,nanivoustatističkeznačajnostip<0,01.Poređenjemukupneaktivnostiovogenzimakodkontrolnihgrupa(C1 iC2),utvrđenojedatretmansaABZdovodidopovećanjanjegoveaktivnostikodkontrolneC2grupe(1164±78,36U/L)nanivoustatističkeznačajnostip<0,01(tabela2).

Grafikon 9. Koncentracija fosfora u krvnom serumu ovaca pre (A) i posle (B) dehelmintizacije: grupa sa niskim intenzitetom infekcije (A1 ‒ pre i B1 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa srednjim intenzitetom infekcije (A2 ‒ pre i B2 ‒ nakon dehelmintizacije), grupa sa visokim intenzitetom infekcije (A3 ‒ pre i B3 ‒ nakon dehelmintizacije); C1 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita; C2 ‒ kontrolna grupa ovaca negativna na prisustvo parazita i tretirana sa ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 u odnosu na kontrolnu grupu C1; +++p < 0,001 poređenje između grupa pre i nakon dehelmintizacije (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).

Graph 9. Concentration of phosphorus in the blood serum of sheep before (A) and after (B) dehelmint-ization: the group with low intensity of infection (A1-before and B1-after dehelmintization), the group with medium intensity of infection (A2-before and B2-after dehelmintization), the group with high intensity of infection (A3-before and B3-after dehelmintization); C1-control group of sheep negative for parasites; C2-control group of sheep negative for parasites and treated with ABZ; *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 in regard to control group C1; +++p < 0,001 comparison be-tween groups before and after dehelmintization (A1 vs. B1, A2 vs. B2, A3 vs. B3).


RETRACTED

54

Tabela2.A

ktiv

nost

LD

H i

rela

tivna

izoe

nzim

ska

dist

ribuc

ija L

DH

u k

rvno

j pla

zmi o

vaca

pre

i po

sle

dehe

lmin

tizac

ijeTa

ble

2. A

ctivi

ty o

f LDH

and

rela

tive

isoen

zym

e dis

tribu

tion

of L

DH in

bloo

d pl

asm

a of

she

ep b

efor

e an

d af

ter d

ehelm

intiza

tion

C1

A1

A2

A3

B1

B2

B3

C2

X ±

SE

LDH(U

/L)

849,0±28,8

1447±41,1**

1882±72,9***

2086±150,5***

901±50,1

++1354±139,4*+

+1531±102,8***+

+1164±78,4**

LDH

1(%)

60,9±1,47

43,91±0,72***42,77±1,43***45,67±1,83***53,33±0,82*

58,85±1,36

58,86±1,16

56,12±0,83

LDH

2(%)

5,81±0,39

15,52±0,34***

11,82±0,29***

12,73±0,66***

5,42±0,39+

++5,56±0,49+

++5,44±0,46+

++3,81±0,21+

LDH

3(%)

20,71±0,76

34,94±0,65***

27,32±1,52***

28,58±1,20***

32,01±0,66***

18,21±0,54

++18,56±0,75

++23,58±0,11

+

LDH

4(%)

4,40±0,47

2,04±0,39

2,25±0,83

2,07±0,48

3,61±0,32

4,74±0,26*

5,98±0,58***

3,95±0,09

LDH

5(%)

8,10±0,45

4,17±0,54***

14,64±2,07***12,71±1,92***5,43±0,53***

14,39±1,16***

10,57±1,47***

13,05±1,18***

Grupe:g

rupasaniskimintenzitetominfekcije(A

1-pre

i B

1-nakondehelmintizacije),grupasasrednjim

intenzitetominfekcije(A 2

-pre

i B

2-nakondehelmintizacije),grupasavisokimintenzitetominfekcije(A

3-pre

i B3-n

akondehelmintizacije);C

1-kon

troln

a gr

upa

ovac

a negativna naprisustvoparazita; C

2-kontrolnagrupaovacanegativnanaprisustvoparazitaitretiranasaABZ;*p<0,05;**p<0,01;

***p < 0,001 u odnosuna kontrolnugrupuC

1;+p<0,05;++p<0,01;+++

p<0,001poređenjeizmeđugrupapreinakondehelminti-

zacije(A

1 vs.

B1,A

2 vs.

B2,A3 v

s. B

3).G

roup

s: gr

oup

with

lo

w

inte

nsity

of

in

fect

ion

(A1-

befo

re

and

B1-a

fter

dehe

lmin

tizat

ion)

, gr

oup

with

m

ediu

m

inte

nsi-

ty

of

infe

ctio

n (A

2-be

fore

an

d B2

-afte

r de

helm

intiz

atio

n),

grou

p w

ith

high

in

tens

ity

of

infe

ctio

n (A

3-be

fore

an

d B3

-afte

r de

helm

int-

izat

ion)

; C1

-con

trol

grou

p of

sh

eep

nega

tive

for

para

sites

; C2

-con

trol

grou

p of

sh

eep

nega

tive

for

para

sites

an

d tre

ated

w

ith

ABZ

; *p

< 0

,05;

**p

< 0,

01; *

**p

< 0,

001

in re

gard

to co

ntro

l gro

up C

1; +

p <

0,05

; ++p

< 0

,01;

+++

p <

0,00

1 co

mpa

riso

n be

twee

n gr

oups

bef

ore a

nd a

fter d

e-he

lmin

tizat

ion

(A1

vs. B

1, A

2 vs

. B2,

A3

vs. B

3).


RETRACTED

55

IzoenzimskiobliciLDH(LDH1-LDH5)pružajuinformacijuovrstitkivaiorga-nakoji suoštećeni tokomparazitske infekcije,kao inakon terapije lekom.Re-zultati izoenzimskedistribucijeLDH(LDH1-LDH5)prikazanisuu tabeli2.Anali-zom izoenzimskedistribucijeLDH1utvrđeno jedauprisustvuparazitske infek-cijedolazidosmanjenjaovog izoenzomskogoblikaupoređenjusakontrolnomC1grupom,nanivoustatističkeznačajnostip<0,001.NakonprimeneABZ,ta-kođesuuočeneniževrednostiLDH1,kojesusestatističkirazlikovalesamokodgrupesablagimintenzitetominfekcijeuodnosunakontrolnuC1grupu(p<0,05).IzmeđukontrolneC1iC2grupenijeutvrđenastatističkiznačajnarazlika(p>0,05)uizoenzimskojdistribucijiLDH1.ZarazlikuodLDH1,kodsvihgrupautvrđenojepovećanjeaktivnostiLDH2,uodnosunakontrolnuC1grupu,nanivoustatističkeznačajnostip<0,001.NakonprimeneABZkodsvihispitivanihgrupasuutvrđeneniževrednostiLDH2 kojesenisustatistički razlikovaleodC1 grupe (p>0,05).Međutim,međusobnimpoređenjemgrupapre iposledehelmintizacijeutvrđenesustatističkiznačajnoniževrednostinakondehelmintizacije(p<0,001).Takođe,ikodkontrolneC2grupedolazidosmanjenjaovogoblikaLDH2uodnosunaC1,nanivoup<0,05.AnalizomizoenzimskedistribucijeLDH3utvrđenojedauprisus-tvuparazitskeinfekcijedolazidopovećanjaovogoblikakodsvihgrupananivoup<0,001,uodnosunakontrolnugrupuC1.NakonterapijeABZ,statističkiznačaj-nopovećanjeutvrđenojesamokodgrupesablagimintenzitetominfekcije(p<0,001),uodnosunaC1grupu,dokjekodgrupasasrednjimivisokimintenzitetominfekcijeutvrđenosmanjenjeLDH3,nanivoup<0,01.KodkontrolneC2 grupe utvrđenajestatističkivećavrednostLDH3,upoređenjusaC1grupom(p<0,05).Interesantno jedaaktivnostLDH4nižakodgrupa inficiranihsaS. papillosus,uodnosunakontrolnuC1grupu,alibezstatističkeznačajnosti(p>0,05).NakondehelmintizacijeutvrđenojepovećanjeaktivnostiovogizoenzimaLDHkodgru-pasasrednjim(p<0,05)ivisokim(p<0,001)intenzitetominfekcije.Nijeutvrđe-nastatističkiznačajnarazlikaizmeđuC1iC2grupe(p>0,05).AktivnostLDH5 je bilasmanjenakodgrupesablagim,apovećanakodgrupasasrednjimivisokimintenzitetomparazitske infekcijeuodnosunakontrolnuC1grupu,nanivoup<0,001.Nakondehelmintizacijeutvrđen jegotovo identičanodnoskaoupretho-dnomslučaju(niževrednostikodgrupesablagimipovećanekodgrupesasred-njimivisokimintenzitetomparazitskeinfekcije;nanivoup<0,001).InteresantnojedajeprimenaABZdoveladopovećanjaaktivnosti izoenzimaLDH5 kod kon-trolneC2grupe,nanivoup<0,001,uodnosunaC1grupu(tabela2).

Laktatdehidrogenaza je tetramernienzimkoji katalizujeposlednju reakci-juanaerobneglikolize, interkonverzijupiruvataulaktat.Normalno,uorganizmukičmenjakapostojipetizoenzimskihoblikaLDH(LDH1-5),sastavljenihodkombi-nacijeMiHsubjedinica(Jaffeisar.,1996).

Diskusija / Discussion


RETRACTED

56

Analiza ukupne LDH ima ograničeni dijagnostički značaj i ukazuje naoštećenje ćelijskemembraneusled čegadolazi doposledičnog „curenja” i po-većanjaaktivnostiovogenzimaukrvnomserumu/plazmi.UnašemistraživanjuutvrdilismodasaporastomintenzitetaparazitskeinfekcijerasteiaktivnostLDHukrvnojplazmi(tabela2),štojepotvrdaoštećenjaćelijskemembrane.Nakontera-pijesaABZ,aktivnostovogenzimajestatističkiznačajnonižauodnosunastanjeuprisustvuparazitskeinfekcije,madaisamABZ(C2grupa)dovodidooštećenjaćelijskemembrane.Naime,ovinalazisuuskladusanašimprethodnimistraživa-njemiosnovnimehanizamkojidovodidooštećenjaćelijskemembranejeoksida-tivno/nitrozativnostreskojiserazvijauprisustvuksenobiotika(Dimitrijevićisar.,2012).Takođe,kaoštojenavedeno,ovajenzimimapetizoenzimskihoblika(uzavisnostiodvrsteiodnosasubjedinica)sarazličitomdistribucijomutkivimaior-ganima,paseodređivanjenivoaizoenzimskihoblikakoristiuciljuprocenestepe-naoštećenja,kaoivrstetkivakojejeoštećeno(Jaffeisar.,1996;YoshidaiTaka-kuwa,1997).

Prvugrupučinetzv.„brziizoenzimi“LDH1(sastavljenod4Hsubjedinice)iLDH2 sastavljenod3HiMsubjedinice)kojisunajvišezastupljeniusrcu,bubrezi-maieritrocitima.Drugugrupučinetzv„spori izoenzimi“,LDH4(sastavljenodHi3Msubjedinice)iLDH5(sastavljenod4Msubjedinica)karakterističnizajetruiskeletnemišiće.Trećugrupučinitzv.„srednjiizoenzim“LDH3(sastavljenod2Hi2Msubjedinice)sakarakterističnomdistribucijomućelijamapluća,tiroidejeinad-bubrega(GamieldieniMaritz,2008).NaširezultatiukazujudaprisustvoparazitaS. papillosus značajnopovećavarelativnuaktivnostiLDH2,LDH3iLDH5.SobziromdalarveniobliciS. papillosusutokumigracijekrvotokomdotankihcrevaprolazekrozjetru,miokard,pluća(Kassai,1999),našinalazisuusaglasnostisamigra-cionimputemioštećenjempomenutihorgana.NaširezultatiukazujudasenakondehelmintizacijesaABZaktivnostLDH5povećavaugrupisasrednjimivisokimintenzitetomparazitske infekcije ikontrolnojC2grupi,štoukazujenaoštećenjehepatocita.Uprilogtvrdnjioštećenjajetreukazujuipromeneuproteinskimfrak-cijamakrvnogserumainficiranihialbendazolomtretiranihživotinja.Kvantitativnonajzastupljenijaproteinskafrakcijakrvi,albumin,poredbrojnihfiziološkihfunkci-ja (transportendogenih iegzogenihmaterija,modulacijakapilarnepropustljivo-sti,adhezijaiaktivacijaneutrofila,idr.)jeivrloznačajanextra-celularniantioksi-dans,zahvaljujućiprisustvuslobodnihtiolnihgrupa(HalliwelliGutteridge,1999;Oettlisar.,2008).Sobziromnatodajejetrajedinomestouorganizmugdesesintetišealbumin,nivoalbuminapredstavljavrlovažanbiomarkerfunkcionalnogstanjajetre.VrlojeverovatnodajepadkoncentracijealbuminaipromenjenA/Godnosposledicamehaničkogoštećenjaiposledičneinflamacijeizazvanemigraci-jomparazita(grafikoni2,3i4).Trendpadakoncentracijealbumina,kojisemoževidetikodgrupaovacanakonterapijesaABZ,ukazujenahepatotoksičnipotenci-jal ovog leka.

Uprilogtvrdnjidajenastalooštećenjehepatocita(kodinficiranihitretiranihovaca)ideinalazpovećaneaktivnostiAST,pričemujenajvećiporastdetektovan


RETRACTED

57

ugrupisanajvećimintenzitetomparazitskeinfekcije(grafikon5),štojeusagla-snostisanalazimaKozatiDenizhan(2010).Takođe,opetističemodaialbenda-zolimacitotoksičnodejstvonajetru(AbdEl-Rahmanisar.,1999),štosemoževidetinaosnovuaktivnostiASTkodC2 grupe.

Povećanjekoncentracijeureeunašemistraživanju,kojejeuskorolinearnojkorelacijisaintenzitetomparazitskeinfekcije(grafikon6),možeseobjasnitipo-većanomprodukcijomazotnihmaterijaporeklomodsekretorno/ekskretornihpro-dukataparazitasjednestrane,aliimogućimnarušavanjemmorfološko-funkcio-nalnogintegritetabubrega.

Saleh(2008)navodidauslučajuhroničnefasciolozeovacamarkerioksida-tivnogstresadetektovaniukrviukazujudalokalizacijaoštećenjaizazvanareak-tivnimkiseoničnimiazotovimvrstamanijeograničenasamonajetru,mestopara-zitiranja F. hepatica,većimasistemskikarakter,jernastalislobodniradikalimogucirkulacijomdospetiidodrugihorganskihsistema.Marquesisar.(2004)navodedaporedjetremogubitioštećenaidrugatkiva,npr.bubrezi,što je ipotvrđenokodinfekcijevodenogbivolasaFasciola hepatica.Takođe,Gangaisar.(2007)navodeuticajfasciolozeritskogbivolanaadrenalneitiroidnužlezdu,ističućitimesistemskiuticajovogparazita.Uovomistraživanjupovećanjekoncentracijeureetakođeukazujedanarušenaoksidans/antioksidansravnoteža,tj.oksidativnistresizazvan prisustvom S. papillosus i/ili njegovim sekretorno/ekskretornim produkti-ma,ukazujenamogućaoštećenjabubrega(grafikon6).

NakonterapijesaABZ,koncentracijaureejeidaljebilapovećana,upoređe-njusaC2grupom,štoopetnavodinazaključakdaprimenjeniantihelmintikprekoindukcijepovećanogstvaranja reaktivnihkiseoničnih iazotovihvrstadovodidooksidativnog stresa.

Jetrasintetiše,koncentrujeiizlučuježučnekiselineibilirubin.InteresantnojedasukoncentarcijeukupnogbilirubinabilevećenakonterapijesaABZ(grafikon7),štoukazujenahepatotoksičnostovogleka.Lekovimaizazvanaoštećenjahe-patocita i žučnih puteva mogu dovesti do holestaze, sa posledičnom intrahe-patičnomakumulacijomžučnihkiselinaidrugihekskrecionihprodukatajetre,štodaljepotenciraoštećenjehepatocita.Jetraimaogromanregenerativnikapacitet,iupravoregeneracijahepatocitaizgubljenihapoptozomilinekrozommožemaski-ratidetekcijuoštećenjaizazvanulekovima(Jaeschkeisar.,2002).

Uovomeksperimentalnommodelu,takođe,utvrdilismodasaporastomin-tenzitetaparazitskeinfekcijesaS. papillosusdolazidopadaglikemije.Naširezu-ltatisuusuprotnostisanalazimadrugihautora,kojitvrdedaovavrstaparazitskeinfekcijenematakavefekatnaorganizamdomaćina(ŠibalićiCvetković,1996).Međutim, naši prethodni rezultati potvrđuju da je jetra pretrpela izvestan step-enoštećenjaizazvanogparazitskominfekcijomsaS. papillosus,kakousledme-haničkogoštećenjautokumigracijeovogparazita,takoiusledposledičnograz-vojaoksidativnog/nitrozativnogstresa,štoneminovnodovodidoporemećajaglu-koneogenezeujetri.NakonterapijesaABZ,(kontrolnaC2grupa)utvrđenesuniže


RETRACTED

58

vrednostiglikemije,štoukazujedahepatocitiutokubiotransformacijeABZtakođetrpeizvestanstepenopterećenja(grafikon1).

S obzirom da su tanka creva mesto parazitiranja S. papillosus (Kassai,1999),logičnojeočekivatipadkoncentracijekalcijuma,štojeipotvrđenouovomradu. Mada je nivo kalcemije linearno opadao sa rastom intenziteta parazitske infekcije(grafikon8),trebaistaćidajekoncentracijakalcijumabilaufiziološkimvrednostima i bez statističke značajnosti u odnosu naC1 grupu.Međutim, na-konterapijesaABZkoncentracijekalcijumaukrvnomserumubilesustatističkiznačajnoniže(p<0,001),uodnosunastanjepreterapije,kaoikodkontrolneC2grupe.VrlojeverovatnodajenarušenfunkcionalniintegritetjetreiposledičniporemećajuhidroksilacijiistvaranjuaktivneformevitaminaD(Braunisar.,1986),kojijeodgovoranzaresorpcijukalcijumaucrevima,razlogzaovakavnašnalaz.

Koncentracija fosfora je takođe opadala sa rastom intenziteta parazitskeinfekcije,pričemusuutvrđenevrednosti fosforabilestatističkiznačajnonižeuodnosunakontrolnuC1grupu.Nakondehelmintizacije,trendpadakoncentracijefosforasenastavio.KodkontrolneC2grupe,takođesuuočenestatističkiznačaj-nomanjevrednostiuodnosunaC1grupu(p<0,001).Imajućiuvidudajepoduti-cajemABZdošlodopadakoncentracijeikalcijumaifosfora,uzevidentnedokazeonarušenomintegritetu jetre,verovatnirazlogzaovakavnalaz jedeficitupro-teinskimnosačima(kojisesintetišuujetri)odgovornimzaaktivnitransportovihmakroelemenata(Braunisar.,1986).

Naši rezultati pokazujudaparazitska infekcija saS. papillosus dovodi do oštećenjajetre,itonesamomehaničkimputemutokumigracijelarvi,većikaoposledicerazvojaoksidativnog/nitrozativnogstresaposebnoizraženognakonte-rapijeABZ.ParazitskeinfekcijeiterapijasaABZuzrokujemetaboličkeporemeća-je (energije imakroelemenata). Imajući u vidu naša prethodna istraživanja napoljuoksidativnogstresa,fenomenakojisenalaziuosnoviovihpromena,strogopreporučujemodaseuantiparazitskeprotokole,poredantihelmintika, koriste ipreparatisaantioksidativnimosobinama.

ZAHVALNOST / ACKNOWLEDGEMENTS:ZahvaljujemosedrSunčiciBorozanidrSofijiKatić-Radivojevićnabezrezervnojpomoćiuobradima-terijala(određivanjeintenzitetaparazitskeinfekcijeiizoenzimskedistribucijeLDH).Finansijskapodr-škaobezbeđenajeizmaterijalnihsredstavaprojektaMinistarstvaprosvete,naukeitehnološkograz-vojaRepublikeSrbijeTR31085iHERDProjectNo:09/1548,332160UÅSpecial thanks to dr Sunčica Borozan and dr Sofija KatićRadivojević for help in processing of scientific material (determination of intensity of parasitic infection and isoenzyme distribution of LDH). Financial support was provided from the Ministry of Education, Science and Technological Development of Serbia, TR 31085 and HERD Project No: 09/1548, 332160 UÅ.

Zaključak / Conclusion


RETRACTED

59

1. AbbottKA,LewisCJ.Currentapproachestothemanagementofovinefootrot.VetJ2005;169:28-41.

2. AbdEl-RahmanMA,Andel-NabiIM,OmranMAA,MohamedMF.Cytotoxiceffectsofalbendazole,antiparasiticdrug,ontheliveroftherat:subchronicstudy.EgyptJBiol1999;1:16-29.

3. BraunJP,BezilleP,RicoAG.Biochemicalsemiologyoftheliverinruminants.ReprodNutrDev1986;26:227-43.

4. ChauvinA,MoreauE,BoulardC.ResponsesofFasciolahepaticainfectedsheeptovariousinfec-tionlevels.VetRes2001;32:87-92.

5. Dimitrijević B, Borozan S, Katić-Radivojević S, Stojanović,S. Effects of infection intensity withStrongyloidespapillosusandalbendazoletreatmentondevelopmentofoxidative/nitrosa-tivestressinsheep.VetParasitol2012;186:364-375.

6. EberhardtGA,MayerWE,BonfohB,StreitA.TheStrongyloides(Nematoda)ofsheepandthepredominantStrongyloides of cattle at least two different, genetically isolated popula-tions.VetParasitol2008;157:89-99.

7. EuzebyJ.Diagnosticexperimentaldeshelminthosesanimales(animauxdomestiques–animauxdelaboratoire–primates).TravauxPratiquesd’HelminthologieVeterinaire.InformationsTechniquesdesServicesVeterinaires,MinisteredeIˇıAgriculture,1982.

8. GamieldienK,MaritzGS.Influenceofmaternalnicotineexposureduringgestationandlactationonlactatedehydrogenaseisoenzymeprofileandtranscriptlevelsindevelopingneonatalratlung.Pathophysiology2008;15:1-8.

9. GangaG,VarshneyJP,SharmaRL,VarshneyVP,KalicharanA.EffectofFasciolagiganticain-fectiononadrenalandthyroidglandsofriverinebuffaloes.ResVetSci2007;82:61-7.

10. HalliwellB,GutteridgeJMC.FreeRadicals inBiologyandMedicine,3rded.OxfordUniversityPress,1999.

11. JaeschkeH,GoresGJ,CederbaumAI,HinsonJA,PessayreD,LemastersJJ.Mechanismsofhepatotoxicity.ToxicolSci2002;65(2):166-76.

12. JaffeAS,LandtY,ParvinCA,AbendseheinDR,GeltmanEM,LadensonJH.Comparativesensi-tivityofcardiactroponinIandlactatedehydrogenaseisoenzymesfordiagnosingacutemyocardialinfarction.ClinChem1996;42:1770–76.

13.KassaiT. Veterinary Parasitology. Butterworth-Heinemann, LinacreHouse, JordanHill,OxfordOX28DP,ISBN0750635630.1999.

14. KozatS,DenizhanV.Glucose,lipid,andlipoproteinlevelsinsheepnaturallyinfectedwithFasciolahepatica.JParasitol2010;96:657–9.

15.MarquesSMT,ScrofernekerML,EdelweissMIA.Glomerulonephritisinwaterbuffaloes(Bubalusbubalus)naturallyinfectedbyFasciolahepatica.VetParasitol2004;123:83–91.

16.OettlK,StadlbauerV,PetterF,GreilbergerJ,Putz-BankutiC,HallstromS,LacknerC,Staub-erRE.Oxidativedamageofalbumininadvancedliverdiseases.BiochimBiophysActa2008;1782:469–73.

17.ReineckeRK,FonsecaAH.Firststagelarvaeper25ml(LI15-1)calffaecesforthediagnosisofnematodeparasitesantemortem.Pesquis.Aeropecu.BrasSerVet1992;12:43-4.

18. RufenerL,KaminskyR,MaserP.InvitroselectionofHaemonchuscontortusforresistancere-vealsamutationataminoacid198ofβ-tubulin.MolBiochemParasitol2009;168:120-2.

19. SalehMA.CirculatingoxidativestressstatusindesertsheepnaturallyinfectedwithFasciolahe-patica.VetParasitol2008;154:262-9.

20. ScionCorp.,2007.Availablefrom:http://www.scioncorp.com21. ŠibalićS,CvetkovićLj.Parazitskebolestidomaćihživotinja,Fakultetveterinarskemedicine,Beo-

grad,1996.

Literatura / References


RETRACTED

60

22. YoshidaM,TakakuwaY.Methodforthesimultaneousassayof initialvelocitiesof lactatedehy-drogenaseisoenzymesfollowinggelelectrophoresis.JBiochemBiophysMet1997;34:167-75

INFECTION OF SHEEP WITH Strongyloides papillosus – THE EFFECT OF INTENSITY OF PARASITIC INFECTION AS WELL AS THERAPY

WITH ALBENDAZOLE ON CERTAIN BIOCHEMICAL PARAMETERS IN THE BLOOD OF SHEEP

Dimitrijević B., Jović S., Jezdimirović Milanka, Bacić D., Savić Mila, Jezdimirović N., Vegara M.

TheobjectiveofthisworkwastoinvestigatecertainbiochemicalparametersinthebloodofsheepinconditionsofdifferentintensityofparasiticinfectionwithStrongyloidespapillosus,andalsoafterthetherapywithalbendazole.TheresearchwascarriedoutonthesheepofWurtembergbreed(n=30)inwhichtherewasdeterminedlow,mediumandhighintensityofparasiticinfectionwithS.papillosus.Thecontrolgroup(n=10)consistedofthesheepthatwerenegativetothepresenceoftheparasiticinfection.Thedegreeandtypeofchangesweremonitoredbydeterminingtheconcentrationofglucose,totalprotein,albumin,Albumin/Globulinratio,AST,urea,totalbilirubin,calcium,phosphorus,lactatede-hydrogenase(LDH)totalactivityandisoenzymedistributionLDH1-5.Onthebasisoftheobtained results itwasconcluded, through isoenzymedistributionof lactatedehydroge-nase,thatparasiticinfectionwithS.papillosuscancausedamagetotheliver,heartmuscleandlungs,whileafterthetherapywithalbendazole,themostaffectedorganistheliver.Theconcentrationofglucose, totalproteinandalbumin linearlydecreasedwith the increaseofintensityoftheparasiticinfection(p<0,05),andafterthetherapywithalbendazole,adrop inconcentrationof theseparameterswasatastatisticallysignificantlyhigher level(p<0,01).ASTactivityaswellastheconcentrationofureaandtotalbilirubingrewlinearlyalongwiththeintensityoftheparasiticinfection(p<0,05).AfterthetherapywithABZ,ASTactivityandconcentrationoftotalbilirubinwereatastatisticallysignificantlyhigherlevel(p<0,001),whileureaconcentrationkeptthesamelevelasinthecaseoftheparasiticinfec-tion.Thevaluesofcalciumconcentration(p>0,05)aswellasphosphorus(p<0,05)lin-earlydecreasedwiththeparasiticinfectionintensitygrowth.Trendtowardsthedeclineoftheconcentrationofthesemacroelementscontinuesevenafterthetherapywithalbenda-zole(p<0,001).Consideringourpreviousresearchinthefieldofoxidativestress,aphe-nomenonthatisfundamentallyrelatedtothechangesdeterminedinthiswork,westronglyrecommendthatbesidesantihelmintics,preparationswithantioxidativepropertiesshouldbeusedinantiparasiticprotocolsaswell.

Key words: Strongyloides papillosus, albendazole, bochemical parameters, liver,sheep

ENGLISH


RETRACTED

61

ЗАРАЖЕНИЕ ОВЕЦ Strongyloides papillosus – ВЛИЯНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ ПАРАЗИТАРНОГО ЗАРАЖЕНИЯ И ТЕРАПИИ АЛЬБЕНДАЗОЛОМ НА ОПРЕДЕЛЕННЫЕ БИОХИМИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ КРОВИ ОВЕЦ

Б. Димитриевич, С. Йович, Миланка Йездимирович, Д. Бацич, Мила Савич, Н. Йездимирович, М. Вегарa

Целью данной работы является изучение определенных биохимическихпараметровкровиовецвусловияхразличнойинтенсивностизараженияStrongyloi-despapillosus, а такжепосле терапииальбендазолом.Исследованиепроводилосьнаовцахвюртембергскойпороды(n=30),укоторыхбылаотмеченанизкая,средняяи высокая интенсивность паразитарного заражения S. papillosus. Контрольнуюгруппу(n=10)составлялиовцы,укоторыхотсутствовалопаразитарноезаражение.Степеньивидизменений,связанныхспоказателямиконцентрацииглюкозы,общегобелка,альбумина,альбумино-глобулиновогосоотношения,АСТ,мочевины,общегобилирубина, кальция, фосфора, общей активности лактатдегидрогеназы (LDH) иизоэнзимногораспределенияLDH1-5.

На основе полученных результатов через изоэнзимное распределениелактатдегидрогеназымыустановили, чтоприразвитиипаразитарнойинфекцииS.papillosusпроисходитпоражениеклетокпечени,сердечноймышцыилегких,апослетерапии альбендазолом чаще всего отмечаются поражения печени. Концентрацияглюкозы, общего белка и альбумина линейно сокращается по мере ростаинтенсивностипаразитарнойинфекции(p<0,05),апослетерапииальбендазоломснижение концентрациипо этимпараметрамбылона статистически значительноболеевысокомуровне(p<0,01).АктивностьАСТ,концентрациямочевиныиобщегобилирубина также линейно увеличивались с ростом интенсивности паразитарнойинфекции (p < 0,05). После терапииABZ активность АСТ и концентрация общегобилирубинабылинастатистическиболеевысокомуровне,(p<0,001),аконцентрациямочевиныоставалосьнатомжеуровне,чтоивслучаепаразитарногозаражения.Значения концентрации кальция (p > 0,05) и фосфора (p < 0,05) также линейноснижалисьсростоминтенсивностипаразитарногозаражения.Тенденциясниженияконцентрацииэтихмикроэлементовпродолжаетсяипослетерапииальбендазолом(p < 0,001). Учитывая, что наши предыдущие исследования проводились натему окислительного стресса, феномена, который лежит в основе изменений,установленных в рамках данного исследования, мы настоятельно рекомендуем,чтобы в рамках противопаразитарного лечения кроме глистогонных средствприменялисьипрепаратысантиоксидантнымисвойствами.

Ключевые слова: Strongyloides papillosus, альбендазол, биохимическиепараметры,печень,овцы

РУССКИЙ


RETRACTED

RRcije (p < 0,05). Nakon terapije sa ABZ aktivnost AST i · je kliničko-patološki entitet, kome...

Documents

Transcript of RRcije (p < 0,05). Nakon terapije sa ABZ aktivnost AST i · je kliničko-patološki entitet, kome...