UNIVERSIDAD DE IXTLAHUACA C.U.I.

INCORPORADO A LA UAEM.

LICENCIATURA EN QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO

REPORTE

PRACTICA 5.4

“EFECTO DE CARBACOL Y ATROPINA SOBRE ILEON AISLADO DE

COBAYO: CONSTRUCCION DE CURVA DOSIS-RESPUESTA EMPLEANDO

SIMULADORES”

LABORATORIO INTEGRAL DE FARMACOLOGIA

CATEDRÁTICO: M. en SHO. Juan Jaime Guerrero Díaz del Castillo

ALUMNO: REYES RIOS GENARO

GRUPO: 702

FECHA DE REALIZACION DE LA PRACTICA: 13-SEPTIEMBRE-2013

FECHA DE ENTREGA DEL REPORTE: 20-SEPTIEMBRE-2013

OBJETIVO:

Conocer el funcionamiento del simulador de Órgano Aislado de Ileon de Cobayo y

demostrar los efectos de agonistas y antagonistas sobre este órgano,

construyendo las curvas dosis-respuesta correspondientes en ausencia y en

presencia de un antagonista.

MARCO TEÓRICO

El carbacol, también llamado carbamilcolina es un agonista colinérgico del tipo

éster de colina que actúa uniéndose y activando receptores de acetilcolina del

sistema nervioso parasimpático. Es usado principalmente en oftalmología para el

tratamiento de la glaucoma o para uso durante operaciones quirúrgicas.

El carbacol es un éster de colina y un compuesto cuaternario de amonio cargado

positivamente. No se absorbe bien en el tracto gastrointestinal ni puede cruzar la

barrera hematoencefálica. Por lo general se administra por vía tópica ocular o por

medio de una inyección intraocular. El carbacol no es metabolizado por la enzima

colinesterasa, sus efectos en el organismo duran entre 4 y 6 horas, administrado

tópicamente y unas 24 horas si se administra por vía intraocular. Debido a que el

carbacol se absorbe mal por vía tópica, por lo general se mezcla con cloruro de

benzalconio (benzal) para promover su absorción. En la mayoría de los países, el

carbacol se obtiene solo con receta médica.

El carbacol es un parasimpaticomimético que estimula tanto a los receptores

muscarínicos como a los nicotínicos. En la administración ocular tópica e

intraocular, sus principales efectos son la miosis y un aumento en el flujo del

humor acuoso.

La atropina es una droga anticolinérgica extraída de la belladona (Atropa

belladonna) y otras plantas de la familia Solanaceae. Es un metabolito secundario

en estas plantas y se ocupa como droga con una amplia variedad de efectos. Es

un antagonista competitivo del receptor muscarínico de acetilcolina. Se emplea en

medicina para disminuir los efectos muscarínicos de los inhibidores de la

acetilcolinesterasa, para pre medicación pre anestésica y para el tratamiento de la

bradicardia y la asistolia. También se utiliza para disminuir la motilidad

gastrointestinal y como midriático. Es también amplio su uso como antídoto en

caso de intoxicaciones por organofosforados, ya que relaja la musculatura lisa y

así evita la muerte por asfixia que producen estas sustancias, que poseen

precisamente la sustancia antagónica de la atropina: excesivas dosis de

acetilcolina.

MATERIAL

PC con software organ bath simulation

METODO

Explicar el funcionamiento del

software Organ Bath

Simulation.

Elaborar curvas dosis-respuesta

a diferentes concentraciones de

carbacol con y sin lavados.

Elaborar curvas dosis-

respuesta a diferentes

concentraciones de carbacol a

diferentes concentraciones,

así como también administrar

atropina a bajas y altas

concentraciones.

Elaborar gráficas con el log de

la concentración del carbacol

vs % de efecto.

Elaborar conclusiones de los

resultados obtenidos.

RESULTADOS

Tabla No. 1 Registro de respuestas de contracción del íleon de cobayo a

diferentes concentraciones de carbacol realizando lavados después de cada

administración.

Volumen (ml)

[Carbacol] en el íleon

Contracción (gramos)

% Efecto Log[Carbacol] Ecuación Probit

0.5 5.0E-9 0.0488 0.31 -8.3010 5.57

0.5 5.0E-8 0.1172 0.75 -7.3010 5.77

0.5 5.0E-7 0.127 0.81 -6.3010 5.97

0.5 5.0E-6 2.785 17.82 -5.3010 6.17

0.5 5.0E-5 14.48 92.70 -4.3010 6.37

0.5 5.0E-4 14.53 93.02 -3.3010 6.57

0.5 5.0E-3 15.62 100 -2.3010

Gráfica No. 1.Curva sigmoidea de la administración de carbacol realizando

lavados. Relación log [carbacol] vs % Efecto

Y= mx + b X= ED50

Y= 20.5535 X + 152.5844 ED50= 1.02 X 10-5

r = 0.9114

-20

0

20

40

60

80

100

120

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

% R

es

pu

es

ta

Log Concentración

Administración de Carbacol realizando lavados. Relación log [carbacol] vs % Efecto

Y= 20.5535 X + 152.5844 r = 0.9114

Gráfica No. 2.Recta con la relación log [carbacol] vs Probits. Administración

de Carbacol realizando lavados.

Tabla No. 2 Registro de respuestas de contracción del íleon de

cobayo a diferentes concentraciones de carbacol sin realizar lavados.

Volumen (ml)

[Carbacol] en el íleon

Contracción (gramos)

% Efecto Log[Carbacol] Ecuación Probit

0.5 5.0E-9M 2.12 22.028 -8.3010 5.23

0.5 5.50E-8M 7.269 75.52 -7.2596 5.43

0.5 5.55E-7M 8.979 93.29 -6.2557 5.63

0.5 5.55E-6M 9.35 97.15 -5.2557 5.83

0.5 5.56E-5M 9.37 97.36 -4.2549 6.03

0.5 5.56E-4M 9.428 97.963 -3.2549 6.23

0.5 5.56E-3M 9.624 100 -2.2549

5.4

5.6

5.8

6

6.2

6.4

6.6

6.8

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Pro

bit

s

Log Concentración

Administración de Carbacol realizando lavados. Relación log [carbacol] vs probits

Y= 20.5535 X + 152.5844 r = 0.9114

Gráfica No. 3.Curva sigmoidea de la administración de carbacol sin realizar

lavados. Relación log [carbacol] vs % Efecto

Y= mx + b X= ED50

Y= 10.0964 X + 136.4613 ED50= 2.73 X 10-9

r = 0.7753

Gráfica No. 4. Recta con la relación log [carbacol] vs Probits. Administración

de Carbacol sin realizar lavados.

0

20

40

60

80

100

120

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

% R

es

pu

es

ta

Log Concentración

Administración de Carbacol sin lavados Y= 10.0964 X + 136.4613

r = 0.7753

5

5.2

5.4

5.6

5.8

6

6.2

6.4

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Pro

bit

s

Log Concentración

Administración de Carbacol sin realizar lavados. Relación log [carbacol] vs probits

Y= 10.0964 X + 136.4613 r = 0.7753

Tabla No. 3 Registro de respuestas de contracción del íleon de cobayo

mediante la administración de 0.5 ml de atropina a una concentración baja

(10-6M) y la administración de diferentes concentraciones de carbacol.

Volumen (ml)

[Carbacol] en el íleon

Contracción (gramos)

% Efecto Log[Carbacol] Ecuación Probit

0.5 5.0E-9M 0.02931 0.13 -8.3010 5.34

0.5 5.50E-8M 0.03908 0.26 -7.2596 5.54

0.5 5.55E-7M 0.05862 0.33 -6.2557 5.74

0.5 5.55E-6M 0.08793 0.53 -5.2557 6.94

0.5 5.56E-5M 4.426 29.62 -4.2549 6.14

0.5 5.56E-4M 14.7 98.39 -3.2549 6.34

0.5 5.56E-3M 14.94 100 -2.2549

Gráfica No. 5. Curva sigmoidea de la administración de 0.5 ml de atropina a

una concentración baja (10-6M) y la administración de diferentes

concentraciones de carbacol. Relación log [carbacol] vs % Efecto.

Y= mx + b X= ED50

Y= 18.6180 X + 130.7269 ED50= 4.61 X 10-5

r = 0.8669

-20

0

20

40

60

80

100

120

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

% R

es

pu

es

ta

Log Concentración

Administración de atropina a dosis baja (10-6 M) más carbacol a diferentes concentraciones.

Y= 18.6180 X + 130.7269 r = 0.8669

Gráfica No. 6. Recta con la relación log [carbacol] vs Probits. Administración

de atropina a dosis baja (10-6 M) más carbacol a diferentes concentraciones.

Tabla No. 4 Registro de respuestas de contracción del íleon de cobayo

mediante la administración de 0.5 ml de atropina a una concentración alta

(10-2M) y la administración de diferentes concentraciones de carbacol.

Volumen (ml)

[Carbacol] en el íleon

Contracción (gramos)

% Efecto Log[Carbacol] Ecuación Probit

0.5 5.0E-9M 0.06839 0.43 -8.3010 5.42

0.5 5.50E-8M 0.07816 0.50 -7.2596 5.62

0.5 5.55E-7M 0.1075 0.64 -6.2557 5.82

0.5 5.55E-6M 0.1172 0.70 -5.2557 6.02

0.5 5.56E-5M 3.556 22.80 -4.2549 6.22

0.5 5.56E-4M 15 96.33 -3.2549 6.42

0.5 5.56E-3M 15.57 100 -2.2549

5.2

5.4

5.6

5.8

6

6.2

6.4

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Pro

bit

s

Log Concentración

Administración de atropina a dosis baja (10-6 M) más carbacol a

diferentes concentraciones. Relación log [carbacol] vs probits

Y= 18.6180 X + 130.7269 r = 0.8669

Gráfica No. 7 Curva sigmoidea de la administración de 0.5 ml de atropina a

una concentración alta (10-2M) y la administración de diferentes

concentraciones de carbacol. Relación log [carbacol] vs % Efecto.

Y= mx + b X= ED50

Y= 18.1691 X + 127.2415 ED50= 5.60 X 10-5

r = 0.8543

Gráfica No. 8. Recta con la relación log [carbacol] vs Probits. Administración

de atropina a dosis alta (10-2 M) más carbacol a diferentes concentraciones.

-20

0

20

40

60

80

100

120

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

% R

es

pu

es

ta

Log Concentración

Administración de atropina a dosis alta (10-2 M) más carbacol a diferentes concentraciones

Y= 18.1691 X + 127.2415 r = 0.8543

5.2

5.4

5.6

5.8

6

6.2

6.4

6.6

-9 -8 -7 -6 -5 -4 -3 -2 -1 0

Pro

bit

s

Log Concentración

Administración de atropina a dosis alta (10-2M) más carbacol a

diferentes concentraciones. Relación log [carbacol] vs probits

Y= 18.1691 X + 127.2415 r = 0.8543

DISCUSION DE RESULTADOS

Al realizar la comparación de las curvas dosis-respuesta en la administración de

carbacol a diferentes concentraciones realizando lavados con la de carbacol a

diferentes concentraciones sin lavados, se observó una gran diferencia en cuanto

al efecto máximo alcanzado, ya que los valores de contracción máxima

alcanzados en la administración de carbacol a diferentes concentraciones

realizando lavados fueron menores que los obtenidos en la administración de

carbacol a diferentes concentraciones sin realizar lavados.

De igual forma, al comparar la dosis efectiva 50 (DE-50), se muestra que las

concentraciones del fármaco en ambas curvas, capaces de producir el 50 % del

efecto son muy diferentes.

Por otro lado, al observar las diferencias y similitudes de las curvas dosis-

respuesta en presencia de atropina, se identificó diferencia en los valores

máximos de contracción, debido a que para la administración de atropina a dosis

baja (10-6 M) se obtuvo una contracción menor, mientras que en la administración

de atropina a dosis alta (10-2 M) se obtuvo una contracción mayor.

CONCLUSIONES

El sitio del cobayo donde se llevó a cabo la experimentación fue en su capa

muscular del íleon, esto debido a que en la musculatura lisa del íleon las células

se contraen como respuesta a diversos estímulos.

Los neurotransmisores con capacidad de producir contracción muscular en el íleon

son acetilcolina, histamina y noradrenalina.

En la simulación se empleó carbacol, que es un agonista colinérgico, que

interactúa con receptores muscarínicos, específicamente M3 y nicotínicos.

Después de la estimulación se desencadenan una serie de procesos que implican

el incremento de iones calcio a nivel intracelular, provocando la contracción del

músculo liso, considerando que el receptor M3 está asociado a la proteína G.

Se cumplió con el objetivo establecido en la práctica ya que se conoció el

funcionamiento del simulador de órgano aislado de cobayo demostrando los

efectos de agonistas y antagonistas sobre este órgano ,además se construyeron

las curvas dosis-respuesta correspondientes en ausencia y en presencia de un

antagonista.

Por otra parte, debido a que no se obtuvieron los resultados esperados, se sugiere

practicar con el simulador de órgano aislado de íleon de cobayo para obtener

mejores resultados.

BIBLIOGRAFIA

Villarejo-Díaz, M., Murillo-Zaragoza, J.R., Alvarado-Hernández, H.,

Farmacología de los agonistas y antagonistas de los receptores opioides,

educación e investigación clínica, vol. 1; Agosto, 2000, págs. 106-137.

Flórez, J., González, A. M., Fármacos antagonistas, CNS Drugs, 2005; 95,

233-235.

González G. (1985). Métodos estadísticos y principios de diseño

experimental. 2da ed. Quito-Ecuador, Universidad Central del Ecuador.

pp.181-198