R ESULTADOS DE TRANSFORMACIÓN, R ESTRICCIÓN DE PLÁSMIDO E INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE...
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RESULTADOS DE TRANSFORMACIÓN, RESTRICCIÓN DE PLÁSMIDO E INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE
Realizado por:Godínez Villanueva Diana Pamela
Rodríguez Espinosa Sofía Kesara
TRANSFORMACIÓNObjetivos Realizar la técnica de transformación bacteriana. Aprender a identificar células transformantes
mediante su fenotipo.
Desarrollo experimental
El equipo 6 repitió el experimento y después de 4 días de incubación se obtuvo:
Aprox. 130 colonias
RESTRICCIÓN
FACTORES CRÍTICOS AL TRABAJAR CON ENZIMAS:Pureza del DNATemperatura y pH DNAsasContaminantes con carga (-)DNA contaminado con otro DNA Grados de metilación Tipo de molécula de DNA Buffer adecuado
GEL MODELO1. Std de peso
molecular2. Sin restringir3. Sin muestra4. Restringido
con 2 enzimas5. Restringido
con 2 enzimas e incubado toda la noche
6. Restringido 1 enzima
1 2 3 4 5 6
TVR
Inserto
P
T= topoisómeros; P= plásmido vacío; VR= vector+inserto
RNA
Std usado
NUESTRO GEL No se logró ver
mejorStd P E1 E2 P E1 E2 P
Std P E1 E2 E1 E2 E1 E2
RESULTADOS DEL SEMESTRE PASADO1 Std2 Plásmido sin restringir (todo el
vol)2 Plásmido sin restringir (5uL)3 Restricción 2 enzimas (todo el
vol)4 Restricción 2 enzimas (todo el
volumen toda la noche)5 Restricción 1 enzima (todo el
volumen, toda la noche)
INDUCCIÓN DE PROTEÍNA RECOMBINANTE Objetivos -Realizar la inducción de una
proteína recombinante (β- lactamasa).
Desarrollo experimental
¿QUÉ ESPERAMOS?
Tiempo de inducción 0 0.5 1.0 1.5 Std
Proteína recombinante
RESULTADOS INDUCCIÓNEquipo 1 Equipo 2 Equipo 3
Equipo 4 Equipo 5Equipo 6