pruebas cruzadas

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INTEGRANTES: Laura Hernndez Lpez Jonatn Eleazar franco Camacho Marisol Burelo Olan

DEFINICION Es una prueba inmunohematologica cuyo principio es la hemaglutinacin y su objetivo es intentar detectar reacciones Ag-Ac potenciales antes de que la sangre sea transfundida. Su objetivo es evitar la destruccin intravascular de los hemates en un receptor. Cada unidad de sangre extrada debe ser examinada y clasificada de forma individual para descartar incompatibilidades entre el donante y el receptor, a fin de que la transfusin se realice con las mximas garantas. SINONIMOS - Pruebas de compatibilidad sangunea - Pruebas cruzadas - Pruebas pretransfuncionales - Cross match

La segunda mitad del siglo XIX fue muy fructfera en descubrimientos, pero fueron los avances inmunolgicos los que permitiran al medico austriaco KARL LANDSTEINER en 1901 realizar el trascendental descubrimientos de tres tipos distintos de hemates, los grupos A,B, y O. LUDWIG HEKTOEN en 1907 descubri las pruebas cruzadas. JANSKY en 1907, y MOSS en 1910 aadiran el tipo AB. As se completo el conjunto que hoy conocemos como sistema de grupos ABO, OTTEMBERG descubri en la compatibilidad ABO para la prueba cruzada salina. ROBERT COOMBS descubri en 1945 la prueba de antiglobulina (Coombs).

Pruebas transfuncionales: las pruebas transfuncionales son los procedimientos por los servicios de transfuncion a los banco de sangre, con el fin de asegurar la seleccin adecuada de la unidad de salub a los componentes a transfundirse. El objetivo de las pruebas pretransfuncionales es tranfundir al paciente hemocomponentes de excelente calidad, para evitar el contagio de enfermedades infecciosas y reacciones postransfuncionales asi como seleccionar hemocomponentes que no afecten al receptor y tenga una sobre vida postrasfuncional aceptable. Si se realiza en forma correcta confirma la compativilidad ABO entre el componente y el receptor, detecta la mayoria de los anticuerpos imprevistos significativos. El empleo de las pruebas pretransfuncionales de compatibilidad a logrado que la observacion de reacciones hemoliticas por anticuerpos distintos a los A,B, sean muy pocos frecuentes incluso algunos anticuerpos de esta indole , puede dar lugar a reaccion hemolitica tan leve que pase inadvertida.

Las pruebas pretransfuncionales que actualmente se emplean en los servicios hospitalarios son : *identificacin de grupo sanguneo ABO y RH (D) de la sangre del paciente. *pruebas cruzadas son las tcnicas procedentes segn los antecedentes de tranfunciones o embarazos del paciente. *retificacion del tipo RH (D) negativo de la sangre, rotulada asi, que se va a transfundir a un paciente con RH (D) negativo. Cuando los pacientes tienen antecedentes de transfusiones o embarazos, frecuentemente activan los anticuerpos contra los leucositos (mas del 20%); estos se ha reducido importantemente mediante el empleo de globulos rojos y concentrados plaquetarios leucorreducidos.

QUE ES? Es la bsqueda de anticuerpos preformados contra los linfocitos de un posible donante en el suero de un paciente.

Pueden estar especficamente dirigidos contra los antgenos HLA (antgenos leucocitarios humanos) o contra cualquier otro antgeno del donante que ste no comparta con el receptor. El receptor potencial de un trasplante alognico puede estar "sensibilizado" contra su donante potencial, es decir, puede tener en su suero anticuerpos contra las clulas de ste. Estos Ac suelen ser consecuencia de la respuesta del receptor a TRANSFUNCIONES EMBARAZO TRANSPLANTE PREVIO

QUIENES SE DEBEN REALIZAR? Aquellos pacientes incluidos en la lista de espera del incucai Para este estudio, las muestras que deben enviarse son las siguientes: Potenciales receptores: suero Donante cadavrico: bazo, sangre o ganglio

TIPOS DE CROSS MATCH CROSS MATCH FRENTE A PANEL CROSS MATCH DADOR RECEPTOR TECNICAS :CITOMETRIA, ELISA, CITOTOXICIDAD

CROSS MATCH FRENTE A PANEL El Cross-Match frente a panel se realiza en pacientes para los cuales no existen donantes vivos relacionados. Se llama "Cross-match frente a panel" porque se enfrenta el suero del paciente con un panel de clulas provenientes de individuos no relacionados. De esta forma, al no existir donantes vivos relacionados para estos pacientes, el nmero de personas contra quienes reacciona el suero indica el grado de sensibilizacin y la probabilidad que tiene de encontrarse un individuo al azar que pueda ser donante para l. CROSS MATCH DADOR RECEPTOR El principio de este mtodo se basa en la lisis celular mediada por anticuerpos especficos en presencia de complemento.

La prueba cruzada mayor es un procedimiento que consiste en enfrentar el suero del paciente (receptor) contra los GR del donante, se realiza un escrutinio de anticuerpos irregulares en el receptor. Y tiene como finalidad: < Asegurar la compatibilidad Donante-Receptor. < Detectar anticuerpos irregulares clnicamente significativos en el receptor contra antgenos presentes en los GR del donante. Los hemates y el suero han de ser incubados el tiempo suficiente para que puedan reaccionar incluso los Ac muy poco potentes; por lo que es necesario aadir suero anti globulina despus de la incubacin para detectar los Ac que recubren a los hemates pero que no llegan a aglutinarse. La prueba debe comprobarse mediante controles. Para preparar la suspensin de hemates del donante se utiliza la sangre contenida en los segmentos de la bolsa.

Para realizar la prueba se rotulan dos tubos, en cada uno se coloca 1 gota de suspensin al 5% de hemates del donante en S.S, y 2 gotas de suero del receptor. - En el tubo "1": * Aadir 2 gotas de albmina al 22-30%. Mezclar. * Incubar a 37C /30-45 min. * Centrifugar y leer. * Lavar los hemates 3-4 veces con solucin salina. * Aadir dos gotas de anti globulina. Agitar. * Centrifugar y examinar los resultados. * Adicionar hemates de control de Coombs. - En el tubo "2": * Dejar en reposo a T ambiente de 3-5 min. * Centrifugar y observar. * Dejar de nuevo a T ambiente 15 min. * Centrifugar de nuevo y observar la presencia de aglutinacin.

INTERPRETACIN. PRUEBA POSITIVA: La aglutinacin indica incompatibilidad ya que significa que algn Ac del suero del receptor se ha unido a los hemates del donante. La valoracin se puede hacer con cruces, o bien se puede hacer una prueba cruzada titulada empleando diluciones dobles progresivas. Para diferenciar aloAc de los autoAc se debe disponer de un autocontrol, y cuando ste es negativo se sospecha la existencia de aloAc en una prueba cruzada incompatible. Los Ac se deben identificar antes de que el paciente reciba la transfusin. Si el autocontrol es positivo se sospecha la presencia de autoAc. Los aloAc producen reacciones transfusionales ms graves que los autoAc. PRUEBA NEGATIVA: La prueba cruzada es compatible si no hay aglutinacin, ya que indica que no existen aloAc eritrocitarios en el suero del receptor. No obstante hay que tener en cuenta que todas las pruebas de la antiglobulina negativas deben ser comprobadas para asegurar que la tcnica se ha realizado correctamente. Para ello, se aaden hemates sensibilizados y lavados (GR control) a todos los tubos que contienen resultado negativo. Si los resultados son correctos los hemates control deben ser aglutinados. En cambio si no se observa aglutinacin, la prueba no es vlida y debe repetirse.

En ella el suero del donante se enfrenta con hemates del paciente. (Se llama menor porque el plasma del donante sufre una dilucin rpida al entrar en el torrente sanguneo del receptor, lo que hace que los problemas debidos a los Ac transfundidos sean menores en el peor de los casos). Actualmente se utiliza poco, debido al uso generalizado de los concentrados de hemates y a la deteccin habitual de los Ac en la sangre del donante. Sin embargo cuando se utilice un gran volumen de plasma si est aconsejada su realizacin. Esta prueba puede, tambin, poner de manifiesto la presencia de Ac del donante contra Ag de baja frecuencia.