Proteínas - UNP · 2019. 2. 13. · Proteínas - estructura Estructura terciaria: •Acomodo...
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Proteínas
• Compuestos químicos formados
principalmente por C, O, H y N.
• Son polímeros de aminoácidos
• Químicamente son poliamidas
• Secuencia codificada en los genes
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Estructura base :Aminoácidos
• Presentan un grupo amino y un grupo
ácido
• Corresponden a la serie a L
• Se diferencian en la naturaleza de R
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Aminoácidos
glicina serina
ácido glutámico
lisina
cisteina
tirosina prolina
En total son 20 alfa aminoácidos.
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Zwitterion
La carga neta del aminoácido depende del pH del
medio
Punto isoeléctrico: valor de pH al cual el aminoácido no
presenta carga neta
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Unión de aminoácidos: Enlace
peptídico
Es una unión amida
Hidrólisis Síntesis
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10 aminoácidos : oligopèptido.
10 a 50 aminoácidos: polipèptido.
Mayor a 50 aminoácidos: Proteína .
Especificidad Proteica: Estructura primaria y
conformación espacial…… FUNCION
Desnaturalización: perdida de todas las
estructuras excepto la primaria.
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Proteínas - estructura
Estructura primaria:
• Determinada genéticamente
• Uniones amidas
• Responsable de la funcionalidad
• No es afectada en la desnaturalización
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Estructura secundaria:
• Plegamiento regular local entre aminoácidos
cercanos
• Son interacciones debiles (Interacciones de van
der Waals y puentes H)
• 2 formas principales:
Lamina b
a hélice
Proteínas - estructura
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Proteínas - estructura
Estructura terciaria:
• Acomodo espacial de la cadena polipeptídica
• Estabilizada principalmente por puentes diS
• Aminoácidos hidrófobos se sitúan hacia el
interior y los hidrofílicos hacia el exterior.
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Estructura cuaternaria:
• Arreglo espacial de la distintas subunidades de
la proteína.
• Proteínas oligoméricas
• Intervienen puentes de
hidrógeno, puentes salinos
y otras interacciones débiles
Proteínas - estructura
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Clasificación
Fibrosas:
Estructurales
Lineales – insolubles en agua
Predomina la estructura secundaria
Globulares
Funciones diversas
Esferoproteínas – solubles en agua
La est. terciaria es la responsable….
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Funciones
Estructurales: queratina
Contráctil: miosina
Transporte: hemoglobina
Reserva: albúmina
Enzimática: sacarasa
Defensa: inmunoglobulinas
Hormonales: Insulina
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Parte Práctica
Objetivos:
• Reconocer distintos agentes desnaturalizantes
• Caracterizar los aminoácidos de la albúmina
• Cuantificar proteínas solubles en distintas
muestras biológicas.
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Desnaturalización
Perdida de las estructuras 2º, 3º y 4º
Perdida de la actividad biológica
Puede ser reversible
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Agentes desnaturalizantes
• Calor
• Ácidos
• Sales de metales pesados
• Solventes orgánicos
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Coagulación
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Albúmina 1 ml Sulfato reposar 10 minutos
de amonio
Prueba de Sulfato de Amonio
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Reacciòn Xanoproteica: reconocimiento de
Aa aromáticos.
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Reconocimiento de Aa azufrados
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Desnaturalizaciòn
Reconocimiento de aa. proteinas por el Mètodo de
Biuret.
Resultado positivo: coloraciòn violeta-purpura.
Reconocimiento de aa. aromàticos. Reacciòn
Xantoproteica,
Resultado positivo: Coloraciòn amarilla.
Reconocimiento de aa. azufrados.
Resultado positivo: precipitado negro.
Coagulaciòn: calor.
Precipitaciòn con Sulfato de amonio.
Muestra : clara de huevo
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Método colorimétrico de Biuret: formación de un complejo
coloreado debido a la unión del sulfato de cobre a
compuestos con varias uniones peptídicas.
Cuantificación de proteínas
Muestra
biológica
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Muestra biològica (higado, pollo, carne).
Homogeneizar
CentrifugarRecuperar sobrenadante.
Agregar reactivo de Biuret.
Incubar a tem. ambiente
Leer en el espectrofotometro a 540 nm.
Calcular la concentacion problema en g% de proteinas solubles.
Calcular el % p/p.
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Cuantificación de proteínas
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Repasar la utilización del
espectrofotómetro .