BAB I

PENDAHULUAN

I.1.Latar Belakang

Air merupakan komponen esensial bagi kehidupan jasad hidup. Akan tetapi dapat juga merupakan suatu substansi yang membawa malapetaka, karena air dapat membawa mikroorganisme patogen dan zat-zat kimia yang bersifat racun . Dalam air baik yang kita anggap jernih, sampai terhadap air yang keadaannya sudah kotor atau tercemar. Kebutuhan akan air bersih semakin lama semakin meningkat sesuai dengan kenaikan jumlah penduduk dan keperluan penduduk itu sendiri. Selama ini kebutuhan akan air dipenuhi dari berbagai sumber diantaranya air sungai, danau, laut ,dan sumur.

Dalam menentukan kualitas air telah ditetapkan standar baku mut air di Indonesia, baik standar baku mutu air minum, air industri, dan sebagainya. Secara umum, kualitas air dapat ditinjau dari segi biologis, fisis, dan kimia yang merupakan syarat-syarat yang harus dipenuhi. Secara biologis, air untuk dikonsumsi harus bebas dari kandungan mikroorganisme yang dapat menimbulkan kerugian bagi manusia. Oleh karena itu, percobaan ini penting dilakukan untuk melakukan pemeriksaan terhadap suatu sampel air.

I.2.Tujuan Percobaan

1. Mampu menghitung jumlah koloni dalam air.

2. Mampu membandingkan radius perkembangan mikroba dengan desinfektan berbeda.

I.3.Manfaat Percobaan

1. Mahasiswa mampu mengetahui jumlah koloni dalam air.

2. Mahasiswa mampu membandingkan radius perkembangan mikroba dengan

desinfektan berbeda.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Mikroorganisme Air

Air merupakan komponen esensial bagi kehidupan jasad hidup. Akan tetapi dapat juga merupakan suatu substansi yang membawa malapetaka, karena air dapat membawa mikroorganisme patogen dan zat-zat kimia yang bersifat racun. Dalam air baik yang kita anggap jernih, sampai terhadap air yang keadaannya sudah kotor atau tercemar, di dalamnya akan terkandung sejumlah kehidupan, yaitu misalnya yang berasal dari sumur biasa, sumur pompa, sumber mata air dan sebagainya, di dalamnya terdiri dari bakteri, yaitu :

1. Kelompok bakteri besi (misalnya Crenothrix dan Sphaerotilus) yang mampu mengoksidasi senyawa ferro menjadi ferri. Akibat kehadirannya, air sering berubah warna kalau disimpan lama yaitu warna kehitam-hitaman, kecoklat-coklatan, dan sebagainya.

2. Kelompok bakteri belerang (antara lain Chromatium dan Thiobacillus) yang mampu mereduksi senyawa sulfat menjadi H2S. Akibatnya kalau air disimpan lama akan tercium bau busuk seperti bau telur busuk.

3. Kelompok mikroalge (misalnya yang termasuk mikroalga hijau, biru dan kersik), sehingga kalau air disimpan lama di dalamnya akan nampak jasad-jasad yang berwarna hijau, biru atau pun kekuning-kuningan, tergantung kepada dominasi jasad-jasad tersebut serta lingkungan yang mempengaruhinya.

Mikroorganisme di perairan berdasarkan sifat tropiknya meliputi :

1. Mikroba autotrof adalah organisme yang mampu menyediakan/mensintesis makanan sendiri yang berupa bahan organik dari bahan anorganik dengan bantuan energi seperti matahari dan kimia. Contohnya : Thiobacillus, Nitrosomonas, Nitrobacter.

2. Mikroba heterotrof adalah organisme yang memanfaatkan bahan-bahan organik sebagai makanannya dan bahan tersebut disediakan oleh organisme lain. Contohnya antara lain : Saprolegnia sp., Candida albicans, Trichopnyton rubrum.

Bakteri yang hidup di perairan umumnya uniseluler, tidak memiliki klorofil, berkembang biak dengan pembelahan sel secara transversal atau biner, sebagian besar ( 80%) berbentuk batang, gram negatif, bergerak secara aktif. Secara umum hidupnya saprofitik pada sisa buangan hewan atau tanaman yang sudah mati, ada juga yang bersifat parasitik pada hewan, manusia dan tanaman yang dapat menyebabkan penyakit. Contoh bakteri yang banyak dijumpai di laut : Pseudomonas, Vibrio, Flavobacterium, Achromobacter dan Bacterium.

(Singleton,1992)

II.2 Persayaratan Standar Kualitas Air

Persyaratan standardisasi kualitas air minum menurut peraturan menteri Kesehatan Republik Indonesia nomor : 492/menkes/Per/IV/2010 yang mencakup 4 kualitas, yaitu:

1. Kualitas Fisik

Air layak minum tidak boleh terlihat kasat mata yang menyebabkan air menjadi keruh. Batas maksimum kekeruhan air adalah 5 NTU (Nepherumerik Turbidity Units)

Air tidak boleh mengandung bahan kimia (klorin, kalsium karbonat, dan lain-lain) dan mikroorganisme (plankton maupun bakteri) yang menyebabkan warna berubah. Batas maksimum yang diperbolehkan adalah 15 TCU (True Color Units)

Air tidak berbau dan berasa karena air murni tidak berbau jika dicium dan tidak memiiki rasa. Jika air berbau dan berasa maka air tersebut mengandung mikroorganisme, bahan mineral, gas terlarut seperti CO2, H2S, NH3 dan bahan organiklainnya seperti limbah rumah tangga (minyak, lemak, sisa makanan)

Temperatur air tidak boleh mempunyai deviasi suhu lebih dari 3oC dari suhu udara.

2. Kualitas Kimia

Air tidak boleh memiliki pH diluar batas 6,8 8,5

Tingkat kesadahan yang diperbolehkan dibawah 500 ppm

Tak mengandung desinfektan dan hasil sampingnya, seperti dichlorometane, kadar yang diperbolehkan 2 mg/lt

3. Kualitas Biologi

Bakteri E. Colli dan Fecal colli tidak boleh ada dalam air minum, kadar maksimumnya adalah 0 dalam 100 ml air mnum,

4. Radioaktivitas

kadar maksimum gross alpha activitynya adalah 0,1 Ba/lt

kadar maksimum gross beta activitynya adalah 0,1 Ba/lt

II.3 Sifat Koloni

Koloni merupakan sekumpulan dari bakteri-bakteri yang sejenis yang mengelompok menjadi satu dan membentuk suatu koloni-koloni. Sifat-sifat koloni terbagi menjadi 2, yakni sifat secara umum dan khusus. Masing-masing sifat umum dan khusus koloni diantaranya :

1. Sifat Umum Koloni

Sifat-sifat umum pada koloni ialah :

a. Bentuk: ada koloni yang bulat, ada yang memanjang, ada yang tepinya rata, ada yang tepinya tidak rata.

b. Besar-kecilnya koloni: ada koloni yang melebar sampai menutup permukaan medium.Ada pula koloni yang hanya serupa suatu titik.

c. Kenaikan permukaan: ada koloni yang rata saja dengan permukaan medium, ada pula yang timbul, yaitu menjulang tebal di atas permukaan medium.

d. Warna: kebanyakan koloni bakteri itu berwarna keputihan atau kekuning-kuningan, akan tetapi ada juga koloni yang kemerah-merahan, coklat, jingga, biru, hijau, ungu.

e. Kepekatan: ada koloni yang lunak seperti lendir, ada yang lunak seperti mentega, ada yang keras dan kering.

2. Sifat Khusus Koloni

Sifat-sifat umum pada koloni ialah :

a. Dalam medium padat

Sifat koloni pada agar-agar lempengan bentuknya titik bulat, terbentang tidak teratur seperti akar, kumparan. Permukaan koloni dapat datar, timbul teratur, cembung melengkung, membukit kebawah, yang utuh dan berombak juga ada.

b. Dalam medium cair

Medium cair diperoleh dengan tidak mencampurkan agar-agar gelatin kepadanya. Dalam medium cair, bakteri akan berbeda-beda. Permukaan medium dapat memperlihatkan adanya serabut selaput.

(Dwidjoseputro, 2012)

II.4 Faktor yang Mempengaruhi Mikroorganisme

Mikroorganisme tidak dapat beradaptasi di berbagai tempat, mikroorganisme hanya dapat berkembang pada keadaan tertentu, diantaranya :

1. Temperatur

Temperatur optimum merupakan temperatur terbaik pada pertumbuhan mikroorganisme. Pada temperatur yang sangat tinggi akan terjadi denaturasi protein sedangkan pada temperatur yang sangat rendah aktivitas enzim akan berhenti. Temperatur optimum pada mikroorganisme biasanya 26- 27 oC.

2. Medium

Medium yang digunakan harus memiliki zat yang dibutuhkan, yaitu protein, lemak, karbohidrat, vitamin, dll. Media yang cocok untuk bakteri adalah yang isotonik terhadap isi sel bakteri. Jika larutan hipertonik maka akan mengalami plasmolisis. Medium yang cocok untuk bakteri salah satunya adalah mediaAgar Kentang Dektrosa (PDA). PDA merupakan media tumbuh mikrobiologi yang terbuat dari potato infusion dan dextrosa dan paling banyak digunakan untuk tumbuh jamur dan bakteri yang mana menyerang atau membusukkan tanaman hidup.

3. Pengaruh Sinar

Kebanyakan bakteri tidak akan berfotosintesis tapi sinar dengan panjang gelombang lebih pendek seperti sinar UV dan sinar X sangat berbahaya dan dapat membunuh bakteri.

4. Pengaruh mekanik

Untuk mematikan bakteri dibutuhkan tekanan 6000 atm dan untuk menghentikan bakteri dibutuhkan 600 atm.

5. Faktor kimia

Penggunaan desinfektan bakterisida dapat membunuh bakteri. Biasanya kerusakan akibat proses oksidasi, koagulasi, dispersi dan tegangan muka.

6. pH

Umumnya bakteri tidak suka hidup di pH yang terlalu basa dan mereka cenderung untuk hidup di pH netral (pH= 7) atau sedikit basa (pH = 7,4)

(Fadhli, 2013)

II.5 Metode Perhitungan Jumlah koloni

Jumlah koloni dapat diketahui dengan menggunakan perhitungan jumlah koloni, hal ini bertujuan untuk mengetahui seberapa banyak jumlah koloni dalam satu aliran air. Metode perhitungan koloni terdapat 2 metode, diantaranya:

1. Perhitungan dengan SPC

Standart Plate Count (SPC) digunakan untuk menentukan kepadatan bakteri heterotrof fakultatif aerob. Dalam percobaanini pengukuran secara empiris karena bakteri dapat membentuk koloni rantai kelompok. Dasar SPC adalah membuat suatu seri pengenceran bahan dengan kelipatan 10. Setelah inkubasi, dilihat jumlah koloni tiap periode dapat digunakan coloni encounter yang dilengkapi dengan register. Perhitungan dan pencatatan koloni pada plate sesegera mungkin setelah periode ini sampai selesai. Bila perhitungan ditunda, plate harus disimpan pada suhu 5-10oC dan tak boleh lebih dari 21 jam.

2. Perhitungan Manual

Perhitungan koloni secara manual dilakukan dengan menghitung jumlah koloni terbanyak dan tersedikit. Sampel diencerkan hingga 2x pengenceran, setelah waktu inkubasi, jumlah koloni dihitung secara manual (biasanya dihitung) jumlah koloni terbanyak dan tersedikit, kemudian dicari rata-ratanya.

Jumlah koloni dalam petridish = rata-rata jumlah koloni x luas petridish x fp

Keterangan : luas petridish = 63,585 cm2

fp = 10 2

Dengan rumus diatas dapat diketahui jumlah koloni dalam petridish.

II.6 Desinfektan

Desinfektan dapat diartikan sebagai bahan kimia atau pengaruh fisika yang digunakan untuk mencegah terjadinya infeksi atau pencemaran jasad renik seperti bakteri dan virus, juga untuk membunuh atau menurunkan jumlah mikroorganisme atau kuman penyakit lainnya. Bahan desinfektan dapat digunakan untuk proses desinfeksi tangan, lantai, ruangan, peralatan dan pakaian. Beberapa contoh desinfektan yakni :

1. Daun Siri

Sirih (Familia Piperaceae) merupakan salah satu tanaman yang diketahui berkhasiat sebagai antiseptik dan desinfektan.Bagian yang dipakai pada sirih adalah daunnya. Daun sirih (Familia Piperaceae) memiliki aroma yang khas yaitu rasa pedas, sengak, dan tajam. Rasa dan aroma yang khas tersebut diakibatkan oleh kavikol dan bethelphenol yang terkandung dalam minyak atsiri. Faktor lain yang menentukan aroma dan rasa sirih (Familia Piperaceae) adalah jenis sirih itu sendiri, umur sirih, jumlah sinar matahari yang sampai ke bagian daun, dan kondisi dedaunan bagian atas tumbuhan (Ernawati,2012).

2. Jeruk Nipis

Jeruk nipis adalah air buahnya sangat masam rasanya, tetapi harum. Jeruk nipis mengandung minyak atsiri . Minyak atsiri adalah sejenis minyak yang mudah sekali menguap pada suhu kamar dan baunya sesuai dengan tanaman penghasilnya. Minyak atsiri digunakan sebagai campuran pewangi, pencegah timbulnya jamur dan bakteri, desinfektan, dan antibiotik.

Disamping itu jeruk nipis juga mengandung asam sitrat. Asam sitrat digunakan sebagai pencegah timbulnya jamur dan bakteri, sebagai pengawet, dan desinfektan. Kebanyakan bakteri inaktif dan terbunuh pada pH 2-3, meskipun hanya sebentar , dan jeruk nipis mampu memberikan keadaan sehingga mencapai pH tersebut. Mikroorganisme yang terdapat pada bahan dengan pH asam dapat dibunuh dengan suhu yang lebih rendah dan dalam waktu yang lebih singkat (Pelczar, 2005).

3. Chitosan

Chitosan digunakan sebagai desinfektan/antibakteri dikarenakan beberapa sifat yang dimiliki yaitu kemampuannya dalam menghambat pertumbuhan mikroorganisme perusak dan kemampuannya dalam memberikan pelapisan terhadap produk sehingga meminimalkan interaksi antara produk dan lingkungannya. Berbagai hipotesa yang sampai saat ini masih berkembang mengenai mekanisme kerja chitosan sebagai pengawet adalah afinitas yang dimiliki oleh chitosan yang sangat kuat dengan DNA mikroba sehingga dapat berikatan dengan DNA yang kemudian mengganggu mRNA dan sintesa protein (Hadwiger dan Loschke 1978 diacu dalam Hardjito 2006).

BAB III

METODOLOGI PERCOBAAN

III.1 Bahan dan Alat yang Digunakan

III.1.1 Bahan

Sampel Air

Aquadest

PDA

Desinfektan

III.1.2 Alat

Beaker glass

Petri dish

Erlenmeyer

Tabung reaksi

Pipet

Pengaduk

Kompor listrik

III.2Gambar Alat

Beaker glassPetridishErlenmeyerTabung Reaksi

Pipet TetesPengadukKompor Listrik

III.3Variabel Operasi

1. Uji Koloni

Air Sungai Tembalang, dengan lokasi pengambilan:

Daerah Universitas Pandanaran

Depan Universitas Diponegoro

Waduk Universitas Diponegoro

2. Uji Desinfektan ( basis 75%V 10mL)

Jeruk Nipis

Jeruk Lemon

Jeruk Manis

III.4Cara Kerja

Langkah-langkah pendahuluan:

1. Menyiapkan petridish yang sudah disterilisasi.

2. Mengencerkan contoh (2x faktor pengenceran): mengambil 10 ml contoh kemudian diencerkan 100 ml. Dan dari 100 ml itu diambil 10 ml lalu diencerkan lagi menjadi 100 ml.

3. Menyiapkan media: mengambil 3,9 gr PDA kemudian masukkan ke dalam 90 ml aquadest kemudian dipanaskan hingga mendidih.

4. Membagi media ke dalam petridish reaksi secara merata.

Langkah-langkah percobaan PA:

1. Uji Koloni

Biarkan media dalam petridish sampai setengah padat kemudian taburi dengan contoh yang sudah diencerkan secara merata ke permukaan media menggunakan pipet tetes yang sudah disterilisasi.

Simpan dalam ruang inkubasi dengan cara dibalik peletakannya selama waktu inkubasi yang ditentukan. (biasanya 2 hari)

Menghitung jumlah koloni terbanyak dan tersedikit (dihitung biasa), kemudian dicari:

Keterangan: luas petridish = 63,585 cm2

fp = 102

2. Uji Desinfektan

Biarkan media dalam petridish memadat kemudian buat lubang kecil pada tengah-tengah media tersebut. Kemudian teteskan contoh desinfektan ke dalam lubang tersebut menggunakan pipet tetes.

Simpan dalam ruang inkubasi selama waktu yang ditentukan (biasanya 2 hari).

Mencatat radius pertumbuhan diukur dari lubang yang dibuat (radius terjauh, terdekat, dan rata-rata).

DAFTAR PUSTAKA

Dwidjoseputro, D.1978. Dasar-Dasar Bioteknologi .Djambatan : Jakarta

Ernawati.2012.Efektivitas Jeruk Nipis (Citrus atirantifolia) dalam Meminimalisasi Bakteri Patogen di Lantai Rumah Sakit Sufina Aziz Medan. USU

Fadhli. 2013. Faktor Yang Mempengaruhi Pertumbuhan Mikroorganisme.IPB

Hardjito L. 2006. Aplikasi kitosan sebagai bahan tambahan makanan dan pengawet. [Prosiding Seminar Nasional]. Bogor : Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.

Singleton, P. 1992. Introduction to Bacteria for Student of Biology Biotecnology and Medicine. New york: Academyc Press. Inc.

BAB I

PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang

Mikroba merupakan organisme yang berukuran sangat kecil sehingga untuk mengamatinya diperlukan alat bantuan seperti mikroskop. Saat ini beberapa materi telah memanfaatkan perkembangbiakan mikroba maka dari itu keberadaannya sangat dibutuhkan sebagai biokatalis. Tetapi disisi lain bakteri ada yang bersifat pathogen. Supaya mikroba tersebut tidak menggangu dalam proses industri maka perlu disterilkan. Mikroba yang menguntungkan dalam industri kimia pada saat ini sudah mulai dikembangkan dalam media piaraan, sehingga kebutuhan bakteri yang berkatalisator dapat terpenuhi.

I.2Tujuan Percobaan

1. Dapat menguasai teknik pemindahan bakteri dari suatu wadah ke wadah lain.

2. Memahami berbagai macam proses sterilisasi.

3. Dapat membandingkan media yang terbaik dan pH optimum pada perpindahan bakteri.

I.3Manfaat Percobaan

1. Mahasiswa mampu menguasai teknik pemindahan bakteri.

2. Mahasiswa mampu memahami berbagai macam proses sterilisasi.

3. Mahasiswa mampu membandingkan media terbaik dan pH optimum

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Sterilisasi

Sterilisasi adalah proses bebas kuman, virus, spora, dan jamur. Keadaan steril dapat dicapai dengan cara alami maupun kimia. Secara alami dapat dilakukan dengan cara memanaskan dengan air mendidih pada suhu 1100C selama 15 menit untuk meamtikan kuman, virus, spora, dan jamur

Metode sterilisasi bermacam- macam, diantaranya :

1. Sterilisasi panas dengan tekanan atau sterilisasi uap (autoclave).

Pada saat melakukan sterilisasi uap, kita sebenarnya memapakan uap jenuh pada tekanan tertentu selama waktu dan suhu tertentu pada suatu objek, sehingga terjadi pelepasan energi laten uap yang mengakibatkan denaturasi atau koagulasi protein sel.

2. Sterilisasi panas kering (Oven)

Proses sterilisasi panas kering terjadi melalui mekanisme konduksi panas. Panas akan diabsorpsi oleh permukaan luar alat yang disterilkan, lalu merambat ke bagian dalampermukaansampaiakhirnyasuhuuntuk sterilisasi tercapai.Sterilisasipanas kering biasanyadigunakanuntukalat-alatataubahandenganuaptidakdapatpenetrasisecaramudah atau untuk peralatan yang terbuat dari kaca.

3. Sterilisasi Tyndallisasi

Metode ini dilakukan dengan cara mendidihkan medium dengan uap beberapa menitsaja. Setelah didiamkan satu hari, spora-spora tumbuh menjadi bakteri vegetatif. Maka medium tersebut dididihkan lagi selama beberapa menit. Akhirnya pada hari ketiga,medium tersebut dididihkan sekali lagi.

4. Sterilisasi dengan penyaringan (Filtrasi)

Medium disaring dengan saringan porselin atau dengan tanah diatom. Dengan jalan ini, maka zat-zat organik tidak akan mengalami penguraian sama sekali.

5. Sterilisasi radiasi ultraviolet

Ultraviolet merupakan gelombang elektromagnetik dengan panjang gelombang 100-400 mm dengan efek optimal pada 254 nm. Sumbernya adalah lampu uap merkuri dengandaya tembus hanya 0,01-0,2 mm. ultraviolet digunakan untuk sterilisasi ruangan padapenggunaan aseptik.

(Dwidjoseputro,1978)

II.2 Aspergillus nigger

Klasifikasi jamur Aspergillus niger adalah sebagai berikut:

Domain : Eukariot

Kingdom : Fungi

Subfilum : Ascomycota

Class : Pezizomycota

Ordo : Eurotides

Family : Trichoco macaeae

Genus : Aspergillus Spesies : Aspergillus niger

Aspergillus niger merupakan jamur muliseluler (mempunyai inti lebih dari satu) yang membentuk benang, benang hifa/ filamen. Secara mikroskopik (pada media SG A+ antibiotik) jamur yang berbentuk mold membentuk koloni yang berserabut/ granuler koloninya tampak kasar (rough) .

Aspergillus niger termasuk ke dalam jamur jenis kapang. Aspergillus niger mempunyai tubuh yang terdiri dari benang yang bercabang-cabang disebut hifa, kumpulannya disebut misselium, tidak mempunyai klorofil dan hidup heterotrof. Aspergillus niger memiliki bulu dasar berwarna putih hitam. Kepala konidia berwarna hitam, bulat, cenderung memisah menjadi bagian-bagian yang lebih longgar dengan bertambahnya umur. Konidiospora memiliki dinding yang halus, hialin juga memiliki warna coklat. Aspergillus niger dan spora-spora dibentuk dalam askus atau kotak spora.

(Jong dan Gantt, 1987)

II.3 Aplikasi Aspergillus nigger

Sejarah penggunaan yang aman untuk A. niger terutama berasal dari penggunaannya dalam industri makanan untuk produksi banyak enzim seperti aamylase, amiloglukosidase, selulase, laktase, invertase, pectinases, dan protease asam. Selain itu, produksi tahunan asam sitrat secara fermentasi sekarang sekitar 350.000 ton, baik menggunakan A. niger atau ragi Candida sebagai organisme memproduksi. Fermentasi asam sitrat dengan menggunakan A. niger dilakukan secara komersial di kedua budaya permukaan dan dalam proses terendam.

A. niger memiliki beberapa kegunaan sebagai organisme itu sendiri, selain produk fermentasi. Misalnya, karena kemudahan visualisasi dan resistensi terhadap agen antijamur beberapa, A. niger digunakan untuk menguji kemanjuran pengobatan pengawet (Jong dan Gantt, 1987). Selain itu, A. niger telah terbukti sangat peka terhadap defisiensi mikronutrien mendorong penggunaan strain A. niger untuk pengujian tanah . Ada juga minat menggunakan jamur ini untuk reaksi enzimatik performcertain yang sangat sulit untuk dicapai dengan ketat cara kimia, seperti penambahan khusus untuk steroid dan cincin kompleks lainnya (Jong dan Gantt, 1987).

II.4 Jeruk manis (Citrus aurantium sub spesies sinensis)

Jeruk manis mempunyai nama ilmiah Citrus aurantium sub spesies sinensis. Jeruk manis ini termasuk di dalam klasifikasi berikut ini :

1. Kingdom : Plantae

2. Subkingdom : Tracheobionta

3. Divisi : Magnoliophyta

4. Subdivisi : Angiospermae

5. Kelas : Magnoliopsida

6. Subkelas : Rosidae

7. Ordo : Rutales

8. Famili : Rutaceae

9. Ordo : Rutales

10. Genus : Citrus

11. Spesies : Citrus aurantium sub spesies sinensis

Secara umum uraian makroskopik kulit jeruk manis antara lain:

1. Kepingan berbentuk spiral dan ada pula yang bentuknya panjang.

2. Permukaan luar berwarna coklat agak kekuning-kuningan sampai coklat jingga, tebal 3 mm, keras dan rapuh.

3. Permukaan dalam rata, berwarna coklat jingga.

4. Terdapat sedikit jaringan bunga karang, apabila kulit ini dipatahkan akan tampak dengan jelas rongga-rongga minyaknya yang bergaris tengah sekitar 1 mm.

(Wati,2010)

BAB III

METODOLOGI PERCOBAAN

III.1 Alat dan Bahan

III.1.1 Bahan

1. Aspergillus niger

2. Jeruk busuk

III.1.2 Alat

1. Tabung reaksi

2. Inokulum

3. Beaker glass

4. Pipet tetes

5. Gelas ukur

6. Kompor listrik

7. Cawan petri

8. Mikroskop

III.2 Gambar Alat

Tabung ReaksiBeaker GlassPipet tetes

Gelas ukurKompor listrikCawan periMikroskop

III.3Variabel Operasi

1. Aspergillus nigerpH= 1, 3, dan 8

2. Jeruk busukpH= 1, 3, dan 8

III.4Cara Kerja

Langkah-langkah percobaan PSA:

1. Biarkan media dalam tabung reaksi memadat (untuk media miring, sebelum memadat kedudukan tabung reaksi dibuat miring di bawah 45, kemudian dibiarkan sampai memadat).

2. Menyiapkan kawat osse, bunsen, dan HCl.

3. Mensterilkan kawat osse: panaskan kawat osse menggunakan bunsen kemudian memasukkan ke larutan HCl kemudian panaskan kawat osse lagi.

4. Memindahkan mikroorganisme dari biakan murni yang tersedia menggunakan kawat osse yang sudah disterilisasi ke tabung media.

5. Simpan di dalam ruang inkubasi selama waktu inkubasi yang ditentukan.

6. Mengamati kenampakannya setelah waktu inkubasi.

DAFTAR PUSTAKA

Dwidjoseputro, D.1978. Dasar-Dasar Bioteknologi .Djambatan : Jakarta

Jong, S.C. and M.J. Gantt, (eds.) 1987. Catalogue of fungi and yeasts, 17th edition. American Type Culture Collection, Rockville, MD.

Wati, Fatna Andika.2010. Pengaruh Air Perasan Kulit Jeruk Manis (Citrus Aurantium Sub Spesies Sinensis) Terhadap Tingkat Kematian Larva Aedes Aegypti Instar Iii In Vitro.Uns