UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

FACULTAD DE INGENIERÍA

INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

TALLER INTEGRADOR III

Alumno: Leidy Elizabeth García Torres

Asesor: M. C. José Régulo Chávez Vázquez

Coasesor: Dra. Yolanda Jasso Pineda

Eficacia de tres tratamientos para desinfección de suelo contaminado con

Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis

Problemas fitosanitarios en la agricultura

Ocasionados por patógenos(enfermedades)

Prevenir enfermedades

Pérdidas económicas al

agricultor

Productos de calidad

http://www.cofenac.org

2

Solanum lycospersicum

http://www.incuexport.com.mx

El creciente uso de pesticidas y fumigantesagroquímicos se ha hecho indispensable parala producción de tomate (Ortiz y Guel, 2014).

Phytophthora parasitica (Mildiu terrestre),Pseudomonas syringae pv. tomatoXanthomonas campestris pv. VesicatoriaErwinia carotovora subsp. carotovoraClavibacter michiganensis subsp. michiganensis.

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Cáncer bacteriano

University of Kentucky Research and Education Center, Bugwood.org

Dominio Bacteria

Phylum Proteobacteria

Clase Actinobacteria

Orden Actinomycetales

Familia Microbacteriaceae

Género Clavibacter

Especie C. michiganensis. subsp. michiganensis

Clasificación taxonómica de C. michiganensissubsp. michiganensis (SAGARPA-SENASICA, 2011)

http://www.amseed.org4

¿Existe forma de terminar con ésta

enfermedad?Alternativas para el control de C. michiganensis subsp. michiganensis(SAGARPA-SENASICA, 2011)

Químico

Biológico

Físico

No existe un tratamiento curativo satisfactorio o efectivo, de ahí quetodas las medidas o estrategias de control son de carácter preventivo(Besoain, 1994).

Aplicaciones preventivas de productos cúpricos reducen lavelocidad de diseminación.

Reducción de actividades del patógeno por organismos antagonistas (Romero, 2011).

Higiene dentro del cultivo, la desinfección de manos, herramientas y útiles de trabajo (FAO, 2004).

5

Utilización de plásticos para la eliminación de microorganismos del suelo

- Efectos negativos del calor sobre los microorganismos del

suelo dio lugar a utilizar un producto común como es el

polietileno.

- Propiedades de transmisión de calor, permeabilidad y larga

duración (Jiménez y Salazar, s. f.).

- Conservación de la radiación de onda larga

infrarroja

- Resistencia a los rayos UV

- Retención de los gases

6

Solarización Biofumigación Biosolarización

¿En que

consiste?

Suelo

humedecido

previamente,

cubriéndolo con

un plástico

transparente.

Incorporación de

materia orgánica

fresca en el suelo

húmedo, cubierto

con una película

plástica.

Combinación de

técnicas: solarización

y biofumigación.

Mecanismo

de acción

Tiempo de

exposición y

aumento de

temperatura.

Acción fumigante

de las sustancias

volátiles resultantes

de la fermentación.

Incrementar la

temperatura del

suelo y mantener la

acumulación de

gases.

Tabla . Comparación de tres técnicas de desinfección de suelo

7

Brasicáceas en biofumigación

8

Estos compuestos son en general biocidasaltamente tóxicos y han resultado eficacescontra patógenos e insectos. (Guerrero yFernández, 2013).

Entre las especies importantes de brasicáceas están:Brassica napus (nabo),Brassica oleracea (repollo),Brassica oleracea var. italica (brócoli),Brassica oleracea var. botrytis subvar. cauliflora (coliflor)(Guerrero y Fernández, 2013).

JUSTIFICACIÓN Alternativas amigables con el medio ambiente.

Técnicas que son de fácil aplicación y cuyo costo

generado es menor.

Propuesta a la prevención de C. michiganensissubsp. michiganensis (problema de importancia

mundial).

9

OBJETIVO

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Evaluar la eficiencia de tres tratamientos ecológicos (solarización,biofumigación y biosolarización) para desinfección de suelocontaminado con C. michiganensis subsp. michiganensis.

Objetivos específicos - Comparar la cuenta de microorganismos viables de C.

michiganensis subsp. michiganensis. entre los tres tratamientos y un testigo.

- Determinar el efecto de la temperatura en cuanto a la eficacia para la desinfección del suelo contaminado con C. michiganensis subsp. michiganensis.

METODOLOGÍARecolección

Tamizado

Análisis

Desinfección

Establecer

concentraciones

Inoculación

Aplicación de

los tratamientos

Extracción de

suelo (muestra)

¿Hay crecimiento

microbiológico?

Saturación

11

HIPÓTESIS

12

El tratamiento de biosolarización será el más eficiente paradesinfectar el suelo de C. michiganensis subsp. michiganensis, yaque proporcionará los efectos combinados de generación de gasestóxicos y temperaturas letales.

Recolección de suelo

- Suelo agrícola productivo

- Capa arable 30 cm de profundidad

- Tamizado 13

Análisis suelo

pH Densidad Textura

7.2 1.2 gr/cm3 Franca

Determinación de:

pH, por potenciómetro

Densidad aparente, por método de la parafina (NOM-021-

SEMARNAT-2000).

Textura del suelo, por método de la pipeta.

Tabla . Resultados de análisis realizados en suelo

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Cepa de C. michiganensis subsp. michiganensis

- Junta Local de Sanidad Vegetal,

Villa de Arista

- AN, 28 °C, 24 a 96 horas

15

Preparación del inoculo

Del aislamiento de Cmm crecido en Caldo nutritivo durante 4 días a

28 °C. Se preparó una suspensión bacteriana en PBS con una

absorbancia de 0.08 a 600 nm (6x103 UFC/mL).

16

http://www.directindustry.com

Tabla. Descripción de los tratamientos

Factor No. Tratamiento

Película de polietileno transparente: de 140 µm

de grosor, lisoT1

SolarizaciónSuelo + agua + cubierta de plásticotransparente.

Película de polietileno bicolor: de 10 µm de

grosor, liso.T2

BiofumigaciónSuelo + trozos de Brassica oleracea + agua +cubierta de plástico bicolor.

Película de polietileno transparente: de 140 µm

de grosor, lisoT3

BiosolarizaciónSuelo + trozos de Brassica oleracea + agua +cubierta de plástico transparente.

Testigo Tt Suelo + agua

Tratamientos

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Inoculación del suelo

Sutilizó en suelo previamente desinfectado por el método de agua

caliente, contenido en macetas de plástico. Cada maceta se inoculó con

250 mL de suspensión bacterial preparada previamente.

TT T1 T2 T3

Cubierta plástica

Maceta

Inoculo

18

19

Detección y cuantificación de Cmm

Pesar 30 g de suelo

Homogenizar

Diluir 3.3 g de suelo en 30 mL de

PBS

Homogenizar en vórtex

Preparar diluciones 10-1 10-2 y 10-3

Sembrar 100 µL de 10-2 y 10-3 en agar

selectivo BCT

Incubar a temperatura

ambiente por 48 hrs.

Evaluar la población de Cmm

RESULTADOS

20

Tratamiento TT T1 T2 T3

Distancia a la superficie,

cm7.5 7.5 7.5 7.5

Millones UFC/g de

suelo0.10 0 0.50 1.21

Tabla. Resultados sobre el crecimiento de Cmm, en dilución 10-3

𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 × 1000 × 100.909

RESULTADOS

21

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

3 6 9 12

Tem

pe

ratu

ra, °

C

días, promedio

Profundidad, 7.5 cm

TT

T1

T2

T3

0

5

10

15

20

25

30

35

40

3 6 9 12

Tem

pe

ratu

ra, °

C

días, promedio

Profundidad, 15 cm

TT

T1

T2

T3

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

22

La técnica de solarización ha probado ser efectiva para el control de unsin número de patógenos que viven en el suelo (Jiménez & Salazar, s. f.).

El abono verde de brasicas tiene un buen efecto biocida por laproducción de glucosinolatos (Brown y Morra, 1997), aunque no siempreresultan eficaces; Coelho et al. (1999), citado por Romero (2011), donde noobtuvieron un aumento de la eficacia de la solarización con la aplicaciónde col en el control de dos especies de Phytophthora.

CONCLUSIONES

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- A los quince días los tratamientos se han comportado de la siguientemanera:

Resultó más eficaz el tratamiento T1 (solarización).La biofumigación y la biosolarización no han tenido un efecto letalsobre Cmm.Debido a que no presentó cubierta plástica el tratamiento testigo se vioafectado por las precipitaciones, mostrando los número de UFC/g desuelo más bajos.

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Besoain, X. 1994. Factores de desarrollo y control de cáncerbacteriano del tomate. Avancia Agrícola.

Guerrero Ruiz J. C. y Fernández Herrera E. La Biofumigación conBrasicáceas. Departamento de Parasitología de la Universidad de Sonora,México. [en línea] 2 de octubre, 2013 [Recuperado el: 15 de octubre de 2015]de: <https://www.facebook.com/magcartago/posts/10202400147981726>

Jiménez Díaz F. y Salazar Sosa Enrique. (s. f.). Utilización deplásticos para la eliminación de microorganismos del suelo. Capítulo V (pp76-86). Agricultura Orgánica / edit...Enrique Salazar Sosa...(et al). GómezPalacio, México, Facultad de Agricultura y Zootecnia de la UJED, SociedadMexicana de la Ciencia del Suelo, COCyTED 2003. 271 p :24 cm

Ortiz Morales V. A. y Guel Grimaldo G. G. (2014). Respuesta delcultivo de tomate en suelo biofumigado con brócoli (Brassica oleracea L. varitalica Plenk), estiércol y acolchado plástico. Tesis presentada como requisitoparcial para obtener el título de Ingeniero Agrónomo Fitotecnista.Universidad Autónoma de San Luis Potosí. Facultad de Agronomía. SanLuis Potosí, México.

Radwan M. Ftayeh, et al.(2011). A New Selective Medium for Isolationof Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis from Tomato Plants and Seed.

Referencias

25

Romero García A. L. (2011). Control biológico de Clavibactermichiganensis subsp. michiganensis. Tesis presentada como requisitoparcial para obtener el título de Maestro en Ciencias Agropecuarias.Universidad Autónoma de San Luis potosí. Facultad de Agronomía. SanLuis Potosí, México.

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Imágenes

Imagen 1. Manejo integrado de problemas fitosanitarios. Control biológico de roya. [en línea]. Fecha de consulta: 18/septiembre de 2016, en: http://www.cofenac.org/refinca/lagente/display_large.php?image=5%20Control%20biologico%20de%20roya.jpg&gallery=9%20Manejo%20integrado%20de%20los%20problemas%20fitosanitariosImagen 2. Nutrición. Beneficios del tomate [en línea]. Fecha de consulta: 18 de septiembre de 2016, en:<http://entrenaenbarcelona.com/beneficios-del-tomate/>Imagen 3. Publicidad de productos amigables. [en línea]. Fecha de consulta: 2 de octubre de 2015, en:<http://bu.com.co/es/noticiasypublicaciones/boletin-legal-18-4>Imagen 4. University of Kentucky Research and Education Center, Bugwood.orgImagen 5. Cáncer bacteriano del tomate. Asta. [en línea]. Fecha de consulta: 2 de octubre de 2015, en:<http://www.amseed.org/pdfs/issues/phytosanitary/el-cancer-bacteriano-del-tomate.pdf>

Gracias por su atención

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