Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A

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  • 7/24/2019 Practica Del Laboratoria en EQUIPO Grupo BB12A

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    UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANAUnidad Xochimilco

    Divisin de Ciencias iol!icas " de la Sal#d

    T$onco Com%n Divisional

    Md#lo& P$ocesos Cel#la$es '#ndamen(ales

    Anlisis de las muestras recolectas de Rectora

    Po$&Alicia Ma$i)el C#$iel Ro*oDel+ina ,a$c-a e(an.oL#ce$o Edi(h ,on./le. C$#.,$isel Loe.a Coa(.o.onMelina T$e*o La$a

    Docen(e&D$0 1o$!e An(onio Am2.3#i(a Lande$os

    ,$#4o& 56A

    Recoleccin de la m#es($a

    El 4$o4si(o de es(a inves(i!acin es evidencia$ la 4$esencia de En(e$o)ac(e$ias enel a!#a de los )e)ede$os de las dis(in(as #nidades de la UAM 7Unive$sidad

    A#(noma Me($o4oli(ana8

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    Ca)e $esal(a$ 3#e en la Rec(o$-a de la UAM no ha" )e)ede$os como en la UAM 9X sin em)a$!o c#en(an con dosi+icado$es de a!#a: de los c#ales +#e$onseleccionados ; al a.a$ 4a$a la (oma de m#es($a0

    En cada #no de los dosi+icado$es seleccionados se a4lic la (2cnica de medio

    cho$$o 4a$a la (oma de m#es($a en #n +$asco es(2$il ma$cado 4a$a iden(i+ica$ eldosi+icado$ seleccionado " dicho +$asco se man(#vo en #n medio $e+$i!e$an(ehas(a el momen(o 3#e se #s en el la)o$a(o$io: la4so 3#e no +#e ma"o$ a 5 ho$a0

    Dis4ensado$es seleccionados&

    58 Dosi+icado$ de Coo$dinacin !ene$al de adminis($acin " $elacionesla)o$ales 76do 4iso8

    68 Dosi+icado$ de Teso$e$-a ad*#n(a de con($ol 4a($imonial 7

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    =8 Dosi+icado$ de Di$eccin de Tecnolo!-as de la in+o$macin 75e$ 4iso8

    ;8 Dosi+icado$ de la case(a de vi!ilancia en la en($ada 4$inci4al 74lan(a )a*a8

    T$a)a*o en la)o$a(o$io

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    PRIMERA SESIN& Sem)$ado en A!a$ MacCon>e"

    An(es de comen.a$ a ($a)a*a$ +#e im4o$(an(e $eali.a$ la es(e$ili.acin de /$ea de

    ($a)a*o 4a$a evi(a$ c#al3#ie$ (i4o de con(aminacin0

    Pa$a el c#l(ivo de la m#es($a es(as +#e$on ($a(adas de dos mane$as&

    58 Dil#cin de la m#es($a 5&5?: 3#e consis(e en (oma$ 5ml de la m#es($a "dil#i$la en @ml de Sol#cin Salina Iso(nica es(2$il 7SSI8

    68 M#es($a di$ec(a: sin nin!%n (i4o de dil#cin

    En am)os casos el c#l(ivo se $eali. de la misma mane$a&

    Con a"#da de #n el asa )ac(e$iol!ica es(2$il se (om #na 4e3#eBa

    can(idad de la m#es($a de a!#a " se 4$ocede a es($ia$ el inoc#o en la ca*ade Pe($i so)$e el a!a$ si!#iendo #n 4a($n de c#a($o c#ad$an(es " #na es($-aa)ie$(a0

    Cada a!a$ se sell con #n 4eda.o de mas>in! " se e(i3#e( con los da(ossolici(ados es4eci+icando el n%me$o de m#es($a " si e$a dil#ida o 4#$a0

    Las ca*as de a!a$ MacCon>e" se lleva$on a la es(#+a 4a$a de*a$las inc#)a$a

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    Des4#2s de 3#e las m#es($a inc#)a$on d#$an(e 6= ho$as se 4$ocedi a laseleccin de colonias desa$$olladas de a!a$ MacCon>e"0 En el caso de lasm#es($as de Rec(o$-a de los 5? c#l(ivos (o(ales solo 6 4$esen(a$on desa$$ollo decolonias )ac(e$ianas: am)as co$$es4ondie$on a la m#es($a n%me$o ; 7Dosi+icado$

    de la case(a de vi!ilancia en la en($ada 4$inci4al8 o)se$vando ma"o$ desa$$ollo enel c#l(ivo 4#$o a com4a$acin con el c#l(ivo dil#ido0

    Las colonias o)se$vadas 4$esen(a$on las si!#ien(es ca$ac(e$-s(icas&

    COLONIA 5M#es($a P#$a

    COLONIA 6M#es($a 5&5?

    MOR'OLO,IA COLONIAL

    'o$ma Ci$c#la$ Ci$c#la$

    Colo$ Ama$illo F Do$ado Ama$illo F do$ado

    Elevacin Um)ilicada con $#!osidad Um)ilicada con $#!osidad

    o$de Inde+inido Inde+inido

    Consis(encia Viscosa Viscosa

    TamaBo ,$ande " 4#n(i+o$me ,$ande " 4#n(i+o$me

    O4acidad A#sen(e A#sen(e

    S#4e$+icie I$$e!#la$ I$$e!#la$

    De las dos m#es($as seBaladas se 4$ocedi a $eali.a$ la $esiem)$a de las coloniasdesa$$olladas en a!a$ MacCon>e" 4a$a o)(ene$ c#l(ivo 4#$o de )ac(e$ias0

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    O)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos seleccionados 4o$ Tincin de ,$am0

    Si!#iendo la me(odolo!-a de la 4$/c(ica se 4$e4a$ el +$o(is " la (incin 4a$a lao)se$vacin mic$osc4ica de las colonias c#l(ivadas " as- de(e$mina$ si lasen(e$o)ac(e$ias 4$esen(es e$an de ca$/c(e$ ,$amGo ,$am

    Al o)se$va$ las (inciones al mic$osco4io se de(e$min 3#e las en(e$o)ac(e$ias4$esen(es en dicha m#es($a e$an de ca$/c(e$ ,$amGde)ido a 3#e 4$esen(a)an#na colo$acin a.#l viole(a0

    Tam)i2n se o)se$v la 4$esencia de #n hon!o en se!#ndo 4lano

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    TERCERA SESIN& P$#e)as )io3#-micas 4a$a En(e$o)ac(e$ias0

    Pruebas de identificacin bioqumica de los cultivos puros seleccionados

    P$#e)a Ca(alasa&

    En.ima 3#e descom4one el 4e$Hido de hid$o!eno en oH-!eno " a!#a oHi!enada0Las )ac(e$ias 3#e con Ca(alasa 4osi(iva li)e$an oHi!eno 3#e se mani+ies(a con lali)e$acin de 4e3#eBas )#$)#*as0

    P$#e)a OHidasa&

    Todas las en(e$o)ac(e$ias dan #na $eaccin ne!a(iva0 Pseudomona" Neisseria

    son 4osi(ivas0Las )ac(e$ias oHidasa 4osi(ivas 4$od#cen #n colo$ ne!$o o a.#l in(enso en 5?se!0La $eaccin se conside$a ne!a(iva si oc#$$e en($e los 5? " ? se!#ndos4os(e$io$es0 Si el desa$$ollo de colo$ se da des4#es de ? se!#ndos la 4$#e)a seconside$a Ne!a(iva0

    Res#l(ados o)(enidos en las m#es($as de $ec(o$-a&

    COLONIA 5M#es($a P#$a

    COLONIA 6M#es($a 5&5?

    PRUEAS IOJUIMICAS

    CATALASA G G

    OXIDASA

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    -

    P$#e)a Ca(alasa en

    m#es($a 4#$a

    P$#e)a Ca(alasa enm#es($a dil#ida 5&5?

    P$#e)a OHidasa en

    m#es($a 4#$a

    P$#e)a OHidasa enm#es($a dil#ida 5&5?

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    Siembra en medios para pruebas bioqumicas:

    58 P$#e)a Vo!es 9 P$os>a#e$ F Ro*o de me(iloCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o de)ac(e$ias " s#s4ende$lo en #n (#)o con caldo VPRM

    68 Ci($a(o de SimmonsCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o "si2m)$alo en +o$ma de #na es($-a a)ie$(a so)$e el /$ea inclinada del medio0

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    In(e$4$e(acin de las 4$#e)as de iden(i+icacin )io3#-mica

    58 Vo!esP$os>a#e$ F Ro*o de me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio 74$esenciad e ace(o-na8

    P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo co)$i.o en el medioEl (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

    68 Ro*o de Me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio P$#e)a $e(a$dada& Colo$ ana$an*ado P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo en el medio

    El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

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    P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $osa +#e$(e en el caldo #$ea P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo o sin cam)io en el caldo #$ea

    El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

    8 A!a$ Kie$$o T$i4le A.%ca$ 7TSI8 Pico de +la#(a $o*oFP$o+#ndidad ama$illo& Medio AlcalinoFcido 7AlcFA80

    ,l#cosa +e$men(ada lac(osa o saca$osa no +e$men(ada0 Pico de +la#(a ama$illoFP$o+#ndidad ama$illo& Medio cidoFcido 7AFA80

    ,l#cosa: lac(osa "Fo saca$osa +e$men(ada0 Pico de +la#(a $o*oFP$o+#ndidad $o*o& Medio AlcalinoFAlcalino 7AlcFAlc80

    Reaccin ne!a(iva: no ha" +e$men(acin de nin!#no de los ca$)ohid$a(os0

    COLONIA 5M#es($a P#$a

    COLONIA 6M#es($a 5&5?

    PRUEAS IOJUIMICAS

    Vo!es P$os>ae#$ Ne!a(iva Ne!a(iva

    Ro*o de Me(ilo Ne!a(iva Ne!a(iva

    Ci($a(o de Simmons

    Posi(ivaP$esen(a c$ecimien(o conli!e$o cam)io de

    colo$acin hacia #n (onoa.#l ve$doso

    Posi(ivaP$esen(a li!e$oc$ecimien(o con cam)io

    de colo$acin hacia #n(ono a.#l in(ensoIndol Ne!a(iva Ne!a(iva

    cido S#l+h-d$ico 7K6S8 Ne!a(iva Ne!a(iva

    Movilidad Posi(iva Posi(iva

    U$easa Posi(iva Posi(iva

    TSI 7hie$$o ($i4le a.%ca$8

    Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "P$o+#ndidad ama$illo0

    Medio AlcalinoFcido7AlcFA80

    Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "P$o+#ndidad ama$illo0

    Medio AlcalinoFcido7AlcFA80

    TSI ,AS

    K6S RM VP IND CIT URE MOV

    TRIBUTO I:Escherichiae

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    GNERO :Escherichia

    E.coli

    GNERO: ShigellaGrupos: !"!# AlcFA - - - -F G

    S.Sonnei AlcFA - - - -TRIBU II:Ed$arsiellae

    GNERO:Ed$arsiella

    E.%arda AlcFA - GTRIBU III:Salmonelleae

    GENERO:Salmonelleae

    AlcFA - - G G

    TRIBU IVitrobactereae

    GENERO:#itrobacter

    #.freundii

    #.&oseri AlcFA - - G G F- GTRIBU V:'lebsielleae

    GENERO:'lebsiella'.pneumoniae

    &.a()toca

    GENERO:EnterobacterE.aerogenes

    E.cloacae

    GENERO:*afnia*. lves AlcFA - -F G - GGENERO:PantoeaP.agglomerans AlcFA -F G - -F G -F G G F- GGENERO:SerratiaS. marcescens AlcFA - -F G - G GTRIBU VI:Proteeae

    GENERO:ProteusP. vulgaris AlcFA - GG GP.mirabilis AlcFA - G F- GG GGENERO:+organella

    +.morganii AlcFA - - GG GGENERO:

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    Providencia

    P.rettgeri AlcFA - - - G GG GP.stuartii AlcFA - - - G G F-P.alcalifaciens AlcFA - - G GTRIBU VII:

    ,ersinieaeGENERO:,ersinieae

    ,. enterocolitica AlcFA - - - G F-

    Las /$eas som)$eadas indican las Reacciones clave G F- del ;? al @? de las ce4as ositivas -F G del ;? al @? de las ce4as Ne!ativas

    Anlisis de resultados

    Clasi+icacin deEn(e$o)ac(e$ias

    N#me$o deReaccionesPosi(ivas

    Reacciones Posi(ivas

    TRIBUTO I:GNERO: ShigellaGrupos: !"!# ; TSI AlcFA

    " GA# K6S VP

    IND

    S.Sonnei ; TSI AlcFA" GA#

    K6S VP

    IND

    TRIBU II:Ed$arsiellaeGNERO:Ed$arsiellaE.%arda < TSI AlcFA VP MOVTRIBU III:SalmonelleaeGENERO:Salmonelleae

    ; TSI AlcFA VP

    IND CIT

    URE MOV

    TRIBU IV& #itrobactereaeGENERO:#itrobacter#.&oseri TSI AlcFA

    K6S VP CIT

    URE MOV

    TRIBU V:'lebsielleae

    GENERO:*afnia*. lves ; TSI AlcFA

    K6S RM IND

    MOV

    GENERO:PantoeaP.agglomerans TSI AlcFA

    ,AS K6S

    RM IND CIT

    MOV

    GENERO:Serratia

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    S. marcescens TSI AlcFA K6S

    RM IND

    CIT MOV

    TRIBU VI:ProteeaeGENERO:ProteusP. vulgaris = TSI AlcFA

    VP

    " URE MOV

    P.mirabilis ; TSI AlcFA IND

    CIT" URE

    MOV

    GENERO:+organella+.morganii ; TSI AlcFA

    K6S VP" URE

    MOV

    GENERO: ProvidenciaP.rettgeri TSI AlcFA

    ,AS K6S

    VP CIT" URE

    MOV

    P.stuartii TSI AlcFA ,AS

    K6S VP

    CIT MOV

    P.alcalifaciens ; TSI AlcFA K6S

    VP CIT

    MOV

    TRIBU VII: ,ersinieaeGENERO: ,ersinieae,. enterocolitica ; TSI AlcFA

    ,AS K6S VP

    URE

    TSI AlcFA& A!a$ hie$$o ($i4le a.%ca$: AlcalinoFcido K6S& S#l+#$o de Kid$o!eno RM& Ro*o de Me(ilo VP& Vo!es 9 P$os>a#e$ IND& Indol CIT& Ci($a(o de Simmons URE& U$easa 7Caldo #$ea8 MOV& Movilidad N7ne!$i(as " s#)$a"ado8& Reacciones Clave

    Des4#2s de $eali.a$ las 4$#e)as necesa$ias se 4#do de(e$mina$ la 4$esencia deEn(e$o)ac(e$ias en las m#es($as del a!#a $ecolec(adas en #no de losdis4ensado$es de la Rec(o$-a de la UAM 3#e es(/ locali.ado en la case(a devi!ilancia de la en($ada 4$inci4al " en )ase a la iden(i+icacin )io3#-mica las4osi)les )ac(e$ias 4$esen(es en dicha m#es($a 4od$-an se$&

    - Shi!ella: ,$#4os A: : C

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    - Shi!ella: S0 Sonnei- Eda$siella: E0 Ta$da- Salmonelleae- Ci($o)ac(e$: C0 Qose$i- Ka+nia: K0 Alves

    - Pan(oea: P0 A!!lome$ans- Se$$a(ia: S0 Ma$cescens- P$o(e#s: P0 V#l!a$is- P$o(e#s: P0 Mi$ia)ilis- Mo$!anello: M0 Mo$!anii- P$ovidencia: P0 Re((!e$i- P$ovidencia: P0 S(#a$(ii- P$ovidencia: P0 Alcali+aciens

    Es im4o$(an(e $esal(a$ 3#e le o)*e(ivo de es(a inves(i!acin es solo evidencia$ la4$esencia de las En(e$o)ac(e$ias: "a 3#e si se desea es4eci+ica$ c#/l es el

    o$!anismo 4$esen(e en dichas m#es($as se (end$-a 3#e 4$ocede$ a $eali.a$ las4$#e)as es4ec-+icas co$$es4ondien(es0

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    UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA

    Unidad Xochimilco

    Divisin de Ciencias iol!icas " de la Sal#d

    T$onco Com%n Divisional

    Md#lo& P$ocesos Cel#la$es '#ndamen(ales

    RA$TI$A %E &ABORATORIO'

    ELAORADO POR&

    lva$e. Rom/n Thania Sa$ahi

    A$/o. V/s3#e. Al)e$(o

    Co$$ales And$ade Tania ,a)$iela

    Nava$$e(e ,on./le. Diana Ale*and$a

    Vale$io O$d#Ba So+-a Li.e(h

    Docen(e&

    D$0 1o$!e An(onio Am2.3#i(a Lande$os

    ,$#4o& 56A

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    Resultados

    Pa$a es(as sesiones se ($a)a* %nicamen(e con las m#es($as de a!#a de los

    )e)ede$os de la UAMXochimilco: "a 3#e los )e)ede$os de la UAMI.(a4ala4a seencon($a)an sin se$vicio0

    rimera #esi(n

    P$e4a$acin de las m#es($as " c#l(ivo en #n medio selec(ivo

    I0 P$e4a$acin de la .ona es(2$il 4a$a ($a)a*o mic$o)iol!icoII0 C#l(ivo de la m#es($a de a!#a en el medio MacCon>e"III0 Mane*o de ma(e$ial con(aminado

    En la 4$ime$a sesin se $eali. los c#l(ivos de las m#es($as de a!#a de los

    )e)ede$os de la UAMX: " se $eali. la dil#cin 5&5? en a!#a en los (#)os de

    ensa"o0

    Se hi.o la siem)$a " dil#ciones en medio MacCon>e" 4o$ es($-a c$#.ada: las

    m#es($as se sem)$a$on 4o$ d#4licado " se de* inc#)a$ a e"II0 Resiem)$a de las colonias desa$$olladas de a!a$ en MacCon>e" 4a$a

    o)(ene$ c#l(ivo 4#$o de )ac(e$iasIII0 O)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos seleccionados

    En es(a sesin no h#)o desa$$ollo de colonias en 6= ho$as: de los medio de c#l(ivo

    MacCon>e" de las m#es($as de a!#a de los )e)ede$os de la UAMX0

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    Reali.amos la iden(i+icacin de colonias en medios de c#l(ivo del a!#a de los

    )e)ede$os de Rec(o$-a0

    Se $eali. la o)se$vacin mac$osc4ica de la mo$+olo!-a de las colonias

    seleccionadas del a!a$ MacCon>e"

    Se

    $eali. de i!#al modo la $esiem)$a de las colonias seleccionadas desa$$ollado$as

    del a!a$ MacCon>e" "

    se hi.o la o)se$vacin

    mic$osc4ica con la Tincin

    de ,$am0

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    En es(e c#ad$o se m#es($a 3#e es($#c(#$a (iBe cada #no de los colo$an(es

    #(ili.ados0

    Colo$an(e Es($#c(#$a 3#e (iBeL#!ol Almidn: !lic!eno: cilios: +la!elos0Ve$de $/4ido Ci(o4lasma: n%cleo0,iemsa ,$/n#los ci(o4lasm/(icos: n%cleo0

    Ace(oca$m-n C$omosomas en c2l#las mi((icasA.#l alciano TeBido de es($#c(#$as con 4$o4o$cin

    de ca$)ohid$a(os0Ama$illo de Me(anilo Micelios " levad#$as0

    Ta)la *' Resultados

    Ca$ac(e$-s(icas de las )ac(e$ias o)se$vadas

    COLONIA 5

    Rec(o$-a

    COLONIA 6

    Rec(o$-a dil#ido+or,olo!a $olonial

    'ORMA I$$e!#la$ I$$e!#la$ COLOR Ma$$n Ro*a

    ELEVACIN Plana PlanaORDE E$osionado Con(in#oCONSISTENCIA M#cosa M#cosaTAMAO Mediana MedianaOPACIDAD O4aco O4acoSUPER'ICIE Lisa Lisa

    +or,olo!a +icrosc(icaTinci(n de Gram Ne!a(ivas Ne!a(ivas

    rue)as Bio.umicasCATALASA Posi(ivo Posi(ivaOXIDASA Posi(ivo Ne!a(iva

    UREA Ne!a(iva Ne!a(iva,LUCOSA Ne!a(iva Ne!a(ivaLACTOSA Ne!a(iva Ne!a(ivaSACAROSA Ne!a(iva Ne!a(ivaMOVILIDAD Ne!a(iva Ne!a(iva

    Ac0 SUL'KIDRICO Ne!a(iva Ne!a(ivaINDOL Ne!a(iva Ne!a(ivaRO1O DE METILO Ne!a(iva Ne!a(iva

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    VO,ES PROSQAUER Ne!a(iva Ne!a(ivaCITRATO DE SIMMONS Posi(iva Ne!a(iva

    Tercera #esi(n

    P$#e)as )io3#-micas 4a$a en(e$o)ac(e$ias0

    I0 P$#e)as de iden(i+icacin )io3#-mica de los c#l(ivos 4#$os

    seleccionados0II0 O)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos 4#$os seleccionados0

    En la (e$ce$a sesin se $eali.a$on las 4$#e)as 4a$a la iden(i+icacin de las

    en(e$o)ac(e$ias de los c#l(ivos en los (#)os de ensa"o0

    Reali.amos di+e$en(es 4$#e)as con dis(in(as (2cnicas 4a$a 4ode$ o)se$va$

    4os(e$io$men(e los $es#l(ados: las c#ales +#e$on&

    a8 P$#e)a de ca(alasa&

    Colocamos so)$e el 4o$(ao)*e(o con el asa )ac(e$iol!ica #na 4e3#eBa4o$cin del c#l(ivo 4#$o de las )ac(e$ias del medio Mac Con>e" " des4#2s

    a!$e!amos #na !o(i(a de a!#a oHi!enada so)$e la m#es($a: las m#es($as

    $es#l(a$on 4osi(ivas: li)e$a$on oH-!eno0

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    )8 P$#e)a de oHidasa&Con el asa )ac(e$iol!ica colocamos

    #na 4o$cin del c#l(ivo 4#$o " lo

    eH(endimos so)$e el 4a4el +il($o0 Le

    a!$e!amos 6 !o(as de $eac(ivo0 Las )ac(e$ias $es#l(a$on 4osi(ivas 4a$a la

    m#es($a de $ec(o$-a " se hi.o lo mismo con las m#es($as de $ec(o$-a dil#ida

    75&5?8 " s#s $es#l(ados +#e$on ne!a(ivos0

    c8 P$#e)a Vo!es P$os>a#e$ F Ro*o de

    me(ilo&Con el asa )ac(e$iol!ica (omamos

    #n inoc#lo denso del c#l(ivo " los#s4endimos en el (#)o de caldo0 Las dos

    m#es($as $es#l(a$on ne!a(ivas0

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    d8 Ci($a(o de Simmons&Con el asa )ac(e$iol!ica (omamos #n

    inoc#lo li!e$o del c#l(ivo " lo sem)$amos en

    +o$ma de es($-a a)ie$(a0 Se sem)$a$on dos

    m#es($as #na de $ec(o$-a dil#ida 75&5?8 " la o($a +#e de $ec(o$-a no dil#ida0La m#es($a de $ec(o$-a dil#ida $es#l(o ne!a(iva " La m#es($a de $ec(o$-a no

    dil#ida $es#l(o 4osi(iva0

    e8 IndolCon el asa )ac(e$iol!ica

    colec(amos #n inoc#lo denso del

    c#l(ivo " lo sem)$amos 4o$

    4icad#$as en el medio SIM a < mm del+ondo del (#)o0 Las dos m#es($as $es#l(a$os ne!a(ivas0

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    +8 Caldo #$eaCon el asa )ac(e$iol!ica colocamos

    #n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo " los

    sem)$amos den el caldo #$ea0 Las dosm#es($as $es#l(a$on ne!a(ivas0

    !8 A!a$ hie$$o ($i4le a.%ca$ Con el asa )ac(e$iol!ica colec(amos

    #n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo " lo

    sem)$amos 4o$ 4icad#$a en el +ondo " en

    +o$ma de es($-a 4o$ la s#4e$+icie0 Las dos

    m#es($as $es#l(a$on ne!a(ivas0

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    UNIVER#I%A% AUT/NO+A +ETROO&ITANAUnidad 0oc1imilco

    Divisin de Ciencias iol!icas " de la Sal#d

    T$onco Com%n Divisional

    Md#lo& P$ocesos Cel#la$es '#ndamen(ales

    REORTE %E &ABORATORIO

    Po$&

    C$#. Ke$n/nde. $enda

    Dimas ,#.m/n C$is(ian

    Ke$n/nde. Acos(a 1#an Ca$los

    1e$nimo Ke$n/nde. Ed#a$do

    Ven(#$a Ma3#eda Diana

    Docen(e&D$0 1o$!e An(onio Am2.3#i(a Lande$os

    ,$#4o& 56A

    INTRO%U$$I/N

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    La mic$o)iolo!-a se oc#4a !ene$almen(e de o$!anismos (an 4e3#eBos 3#e no4#eden se$ vis(os a sim4le vis(a 4o$ el o*o h#mano0 De)ido a la na(#$ale.a de es(adisci4lina: el mic$osco4io (iene #na im4o$(ancia c$#cial la ma"o$ 4a$(e de losconocimien(os so)$e los mic$oo$!anismos se han desc#)ie$(o con mic$osco4io050

    La ma"o$-a de mic$oo$!anismos 4a(!enos 4$esen(an ca$ac(e$-s(icas +-sico

    3#-micas: es(as ca$ac(e$-s(icas son im4o$(an(es 4a$a la de(eccin de es(osmic$oo$!anismos0 Los m2(odos em4leados en el la)o$a(o$io son los si!#ien(es 504$e4a$acin de las m#es($as " c#l(ivo en #n medio selec(ivo: 60 Aislamien(o "o)se$vacin de las ca$ac(e$-s(icas mac$osc4icas " mic$osc4icas de lasen(e$o)ac(e$ias:

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    A#n3#e los mic$oo$!anismos vivos se 4#eden eHamina$ di$ec(amen(e con #nmic$osco4io 4(ico: a men#do ha" 3#e +i*a$los " (eBi$los 4a$a a#men(a$ la$esol#cin " acen(#a$ las ca$ac(e$-s(icas mo$+ol!icas 4a$a s# es(#dio en el +#(#$o0

    iacin

    Las c2l#las (eBidas 3#e se o)se$van en el mic$osco4io de)en 4a$ece$se lo m/s4osi)le a las c2l#las vivas0 La +i*acin es #n 4$oceso 4o$ el c#al se conse$van "+i*an en s# 4osicin las es($#c(#$as in(e$nas " eH(e$nas de las c2l#las de losmic$oo$!anismos0

    #olorantes ) tincin simple:

    Los n#me$osos (i4os de colo$an(es em4leados 4a$a (eBi$ mic$oo$!anismos 4oseendos ca$ac(e$-s(icas en com%n& 50 Todos 4oseen !$#4os c$om+o)os 7!$#4os condo)les enlaces con*#!ados 3#e dan el colo$ al colo$an(e8: 60 P#eden #ni$se a lasc2l#las median(e enlaces inicos: covalen(es o hid$+o)os0 Po$ e*em4lo: #ncolo$an(e ca$!ado 4osi(ivamen(e se #ne a es($#c(#$as ca$!adas ne!a(ivamen(e de

    la c2l#la0 Los colo$an(es ioni.a)les se 4#eden dividi$ en dos clases !ene$ales(omando como )ase la na(#$ale.a de s# !$#4o ca$!ado0

    Colo$an(e )/sico& A.#l de me(ileno: +#csina )/sica: c$is(al viole(a: sa+$anina: ve$demala3#i(a0

    Colo$an(e /cido& Eosina: $osa de )en!ala " +#csina /cida0

    %incin diferencial.

    Los m2(odos de (incin di+e$encial clasi+ican a las )ac(e$ias en !$#4os di+e$en(esse!%n s#s 4$o4iedades de (incin0 La (incin de ,$am: desa$$ollada 4o$ el m2dicoDan2s Ch$is(ian ,$am: en 5=: es el m2(odo de (incin m/s am4liamen(e

    #(ili.ado en )ac(e$iolo!-a0 Se ($a(a de #n m2(odo de (incin di+e$encial 4o$3#edivide a las )ac(e$ias en dos clases0

    ,$am ne!a(ivas ,$am 4osi(ivas

    gar +ac#on&e)

    EHis(en n#me$osos medios de c#l(ivo con c#alidades " #sos dis(in(os: en es(a4$/c(ica: 4o$ las $a.ones eH4#es(as a con(in#acin: se #sa$/ el A!a$ MacCon>e":el c#al es #n medio de c#l(ivo selec(ivo 4a$a el aislamien(o: $ec#4e$acin "

    di+e$enciacin de En(e$o)ac(e$iaceae0 Po$ s# con(enido de sales )ilia$es " c$is(alviole(a $es#l(a inhi)i(o$ia de )ac(e$ias ,$am4osi(ivo " de al!#nas )ac(e$ias ,$amne!a(ivas eHi!en(es 4#es (ales sales son sec$e(adas al in(es(ino 4a$a la di!es(inde l-4idos: siendo as- #n medio 4$o4icio 4a$a en(e$o)ac(e$ias0 Con(iene: adem/s:lac(osa como %nica +#en(e de ca$)ono +e$men(ado$es +#e$(es de lac(osa: comoEsche$ichia: Qlei)siella " En(e$o)ac(e$: 4$od#cen colonias $o*as +e$men(ado$eslen(os: como Ci($o)ac(e$: P$ovidencia: Se$$a(ia " Ka+nia: 4#eden a4a$ece$ sin colo$

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    des4#2s de 6=h o $osa 4/lido en 6==h P$o(e#s: Eda$siella: Salmonela "Shi!ella: 4$od#cen colonias ($ans4a$en(es: al no +e$men(a$ lac(osa0e" 4a$a o)(ene$ c#l(ivo

    4#$o de )ac(e$ias0

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    4; 1oras desu

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    Prueba Oxidasa:rocedimiento'

    *' Pone$ #n ($o.o de 4a4el de +il($o so)$e #n 4o$(ao)*e(os060 De4osi(a$ #na 4o$cin del c#l(ivo " eH(ende$lo so)$e el 4a4el +il($o

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    ORDE INDE'INIDO LANCO DEL,ADO

    CONSISTENCIA VISCOSA VISCOSA

    TAMAO ,RANDE ,RANDE

    OPACIDAD OPACO SUPER'ICIE IRRE,ULAR IRRE,ULAR

    MOR'OLO,A MICROSCPICA

    TINCIN ,RAM NE,ATIVA NE,ATIVA

    PRUEAS IOJUIMICAS

    CATALASA Posi(iva Posi(iva

    OXIDASA Posi(iva Ne!a(iva

    UREA Posi(iva Posi(iva

    TSI 7hie$$o ($i4le a.%ca$8

    Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "

    P$o+#ndidad ama$illo0Medio AlcalinoFcido

    7AlcFA80

    Posi(ivaPico de +la#(a $o*o "

    P$o+#ndidad ama$illo0Medio AlcalinoFcido

    7AlcFA80MOVILIDAD Posi(iva Posi(iva

    Ac0 SUL'KIDRICO Ne!a(iva Ne!a(iva

    INDOL Posi(iva Posi(iva

    RO1O DE METILO Ne!a(iva Ne!a(iva

    VO,ES PROSQAEUR Ne!a(iva Ne!a(iva

    CITRATO DE SIMMONS Posi(ivaP$esen(a c$ecimien(o con

    li!e$o cam)io decolo$acin hacia #n (ono

    a.#l ve$doso

    Posi(ivaP$esen(a li!e$o

    c$ecimien(o con cam)iode colo$acin hacia #n

    (ono a.#l in(enso

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    COLONIA endo(Hico es #na mani+es(acin4o(encialmen(e le(al de la in+eccin 4a$ en(e$o)ac(e$ia0

    Me(odolo!-a " Res#l(ados0

    La me(odolo!-a desc$i(a cons(a de c#a($o sesiones&

    50 P$e4a$acin de las m#es($as " c#l(ivo en #n medio selec(ivo60 Aislamien(o " o)se$vacin de las ca$ac(e$-s(icas mac$osc4icas "

    mic$osc4icas de las en(e$o)ac(e$ias

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    An(es de comen.a$ a ($a)a*a$ +#e im4o$(an(e $eali.a$ la es(e$ili.acin de /$ea de

    ($a)a*o 4a$a evi(a$ c#al3#ie$ (i4o de con(aminacin0Pa$a el c#l(ivo de la m#es($a es(as +#e$on ($a(adas de dos mane$as&

    50 Dil#cin de la m#es($a 5&5?: 3#e consis(e en (oma$ 5ml de la m#es($a "

    dil#i$la en @ml de Sol#cin Salina Iso(nica es(2$il 7SSI860 M#es($a di$ec(a: sin nin!%n (i4o de dil#cin

    En am)os casos el c#l(ivo se $eali. de la misma mane$a& Con a"#da de #n el asa

    )ac(e$iol!ica es(2$il se (om #na 4e3#eBa can(idad de la m#es($a de a!#a " se

    4$ocede a es($ia$ el inoc#lo en la ca*a de Pe($i so)$e el a!a$ si!#iendo #n 4a($n

    de c#a($o c#ad$an(es " #na es($-a a)ie$(a0

    Cada a!a$ se sell con #n 4eda.o de mas>in! " se e(i3#e( con los da(os

    $e3#e$idos es4eci+icando el n%me$o de m#es($a " si e$a dil#ida o no dil#ida0 Lasca*as de a!a$ MacCon>e" se lleva$on a inc#)a$ d#$an(e 6= ho$as0

    SE,UNDA SESION&

    Des4#2s de 3#e las m#es($a inc#)a$on d#$an(e 6= ho$as se 4$ocedi a la

    seleccin de colonias desa$$olladas de a!a$ MacCon>e"0 En el caso de las

    m#es($as o)(enidas de& cha$co de a!#a s#cia: c#)e(a con a!#a de ll#via: a!#a de

    la llave " a!#a es(ancada del $io Le$ma se encon($ #n c$ecimien(o o desa$$ollo de

    #na colonia )ac(e$iana o)se$vando ma"o$ desa$$ollo en el c#l(ivo no dil#ido acom4a$acin con el c#l(ivo dil#ido0 Se 4$ocedi a $eali.a$ la $esiem)$a de las

    colonias desa$$olladas en a!a$ MacCon>e" 4a$a o)(ene$ c#l(ivo 4#$o de )ac(e$ias0

    Pos(e$io$men(e se $eali. la o)se$vacin mic$osc4ica de los c#l(ivos

    seleccionados 4o$ Tincin de ,$am0 Si!#iendo la me(odolo!-a de la 4$/c(ica se

    4$e4a$ el +$o(is " la (incin 4a$a la o)se$vacin mic$osc4ica de las colonias

    c#l(ivadas " as- de(e$mina$ si las en(e$o)ac(e$ias 4$esen(es e$an de ca$/c(e$

    ,$amGo ,$am

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    Al o)se$va$ las (inciones al mic$osco4io se de(e$min 3#e las en(e$o)ac(e$ias

    4$esen(es en dicha m#es($a e$an de ca$/c(e$ ,$amGde)ido a 3#e 4$esen(a)an

    #na colo$acin a.#l viole(a0

    TERCERA SESION&

    P$#e)a Ca(alasa&

    En.ima 3#e descom4one el 4e$Hido de hid$o!eno en oH-!eno " a!#a oHi!enada0

    Las )ac(e$ias 3#e con Ca(alasa 4osi(iva li)e$an oHi!eno 3#e se mani+ies(a con la

    li)e$acin de 4e3#eBas )#$)#*as0

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    P$#e)a OHidasa&

    Todas las en(e$o)ac(e$ias dan #na $eaccin ne!a(iva0 Pseudomona " Neisseria

    son 4osi(ivas0

    Las )ac(e$ias oHidasa 4osi(ivas 4$od#cen #n colo$ ne!$o o a.#l in(enso en 5?se!0

    La $eaccin se conside$a 4osi(iva si oc#$$e en($e los 5? " ? se!#ndos 4os(e$io$es0

    Si el desa$$ollo de colo$ se da des4#2s de ? se!#ndos la 4$#e)a se conside$a

    Ne!a(iva0

    P$#e)a M#es($a 5 M#es($a 6 M#es($a < M#es($a =

    Ca(alasa G G G GOHidasa G G G G

    Siem)$a en medios 4a$a 4$#e)as )io3#-micas&

    50 P$#e)a Vo!es 9 P$os>a#e$ F Ro*o de me(iloCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o de )ac(e$ias "

    s#s4ende$lo en #n (#)o con caldo VPRM

    60 Ci($a(o de SimmonsCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo li!e$o del c#l(ivo 4#$o " si2m)$alo en

    +o$ma de #na es($-a a)ie$(a so)$e el /$ea inclinada del medio0

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    =0 Caldo U$eaCon el asa )ac(e$iol!ica (oma$ #n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo 4#$o de

    )ac(e$ias " si2m)$alo en el caldo #$ea0

    ;0 A!a$ Kie$$o T$i4le A.%ca$ 7TSI8Con el asa )ac(e$iol!ica se (oma #n inoc#lo 4oco denso del c#l(ivo 4#$o de

    )ac(e$ias " si2m)$alo 4o$ 4icad#$a en el +ondo " en +o$ma de #na es($-a en la

    s#4e$+icie

    Se $eali.a$on los mismos 4asos en c#a($o ocasiones: #na con cada m#es($a

    di+e$en(e0 Todos los (#)os se de*a$on inc#)a$ d#$an(e 6= ho$as

    CUARTA SESIN&

    In(e$4$e(acin de las 4$#e)as de iden(i+icacin )io3#-mica

    @8 Vo!esP$os>a#e$ F Ro*o de me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio 74$esenciad e ace(o-na8 P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo co)$i.o en el medio

    El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

    5?8Ro*o de Me(ilo P$#e)a 4osi(iva& Colo$ $o*o en el medio P$#e)a $e(a$dada& Colo$ ana$an*ado P$#e)a ne!a(iva& Colo$ ama$illo en el medio

    El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

    558 Ci($a(o de Simmons

    P$#e)a 4osi(iva& C$ecimien(o con colo$ a.#l in(enso en la .ona inclinada del4ico de +la#(a

    P$#e)a ne!a(iva& No se o)se$va c$ecimien(o ni cam)io de colo$

    El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

    568Indol P$#e)a 4osi(iva& Colo$ ne!$o en la 4icad#$a o en (odo el (#)o

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    P$#e)a ne!a(iva& A#sencia de colo$ ne!$o en (odo el (#)o

    El (#)o con($ol de)e da$ #na $eaccin ne!a(iva

    5

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    ve$doso (ono a.#lin(enso

    (ono a.#lin(enso

    (ono a.#lin(enso

    Indol Ne!a(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Posi(iva

    cido S#l+h-d$ico7K6S8

    Posi(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Posi(iva

    Movilidad Posi(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Ne!a(ivaU$easa Posi(iva Ne!a(iva Ne!a(iva Posi(iva

    TSI 7hie$$o ($i4lea.%ca$8

    Ne!a(ivaPico de

    +la#(a $o*o "P$o+#ndidad

    ama$illo0Medio

    AlcalinoFcido 7AlcFA80

    Posi(ivaPico de

    +la#(a $o*o "P$o+#ndidad

    ama$illo0Medio

    AlcalinoFcido 7AlcFA80

    Ne!a(ivaPico de

    +la#(a $o*o "P$o+#ndidad

    ama$illo0Medio

    AlcalinoFcido 7AlcFA80

    Posi(ivaPico de

    +la#(a $o*o "P$o+#ndidad

    ama$illo0Medio

    AlcalinoFcido 7AlcFA80