Practica de-lípidos

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PRACTICA DE LÍPIDOS.

30/05/2016

Integrantes:Alfaro Valencia Aline MelinaAlmanza López Liliana MargaritaGonzález Laguna VíctorHernández Yépez RenataPérez Gabriela

Laboratorio clínico 6° “E”

Fundamento:

Los lípidos son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por carbono e hidrógeno y generalmente también oxígeno; pero en porcentajes mucho más bajos.Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos.En los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos grasos y glicerina.

SOLUBILIDAD

MATERIAL REACTIVOS

5 tubos de ensayo Alcohol etílico 5 pipetas de 1ml Cloroformo1 baño maría Tetracloruro de Carbono Benceno Distintas grasas y aceites

TÉCNICA

Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite ó grasa. Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada

tubo) Evítese inflamación de los solventes. Hágase en frío y caliente.

RESULTADOS

Tipo de grasa

Alcohol etílico Cloroformo

Aceite de olivo

Frio CalienteInsoluble insoluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Aceite de soya

Frio CalienteInsoluble Soluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Aceite de Almendras

Frio CalienteInsoluble Insoluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Ácido Oleico

Frio CalienteSoluble Soluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Mantequilla Frio CalienteInsoluble Insoluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Tipo de grasa

Tetracloruro de carbono Benceno

Aceite de olivo

Frio CalienteSoluble Soluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Aceite de soya

Frio CalienteSoluble Soluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Aceite de Almendras

Frio CalienteInsoluble Soluble

Frio CalienteSoluble Soluble

Acido Oleico

Frio CalienteSoluble Soluble

Frio CalienteInsoluble Soluble

Mantequilla Frio CalienteSoluble Soluble

Frio CalienteInsoluble Soluble

OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO

La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de otras por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol en forma de cristales en una de las fracciones.

MATERIALREACTIVOS

2 vasos de precipitadoAlcohol metílico

1 matraz con tapónÉter

1 embudoÉter - etanol (3:1)

1 papel filtro

TÉCNICA

Tipo de grasa

Imagen

Aceite de olivo

Aceite de soya

Aceite de Almendras

Acido Oleico

Mantequilla

Separar con mucho cuidado la yema de la clara. Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitadoAñadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter.Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto.Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.

ACIDEZ

El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es:

I.A= n x 28 P

Donde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación P = peso de la muestra

MATERIAL REACTIVOS 2 matraz erlenmeyer 250 ml KOH 0.5 N1 soporte universal Fenolftaleína1 bureta 1 pinzas para bureta

TÉCNICA1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz erlenmeyer y agregar 3 gotas de fenolftaleína (si es necesario disuelva la muestra en un poco de etanol).2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización2.- Calcular el índice de acidez.

RESULTADOS:

Matraz Sustitución Resultado1 I.A.= 0.1 X 28

5 0.56

2 I.A.= 0.2 X 28 5

1.12

3 I.A.= 0.4 X 28 5

2.24

RANCIDEZ

MATERIAL REACTIVOS 2 tubos de ensayo HCl 5N1 baño maría Potasa alcohólica 1 bureta Fenolftaleína 2 matraz erlenmeyer 250 ml 1 soporte universal1 pinzas para bureta

TÉCNICAColocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro 5ml de aceite rancio.A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar.Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH.

Los valores normales son:Aceite rancio: pH = 6.7 Aceite de Olivo (Oleico): pH = 6.1

SAPONIFICACIÓN

MATERIAL REACTIVOS 3 matraces HCl 5N1 baño maría Potasa alcoholica 1 bureta Fenolftaleína

TÉCNICAEn dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite Añadir 25ml de solución de potasa alcohólica Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actué como refrigeranteCalentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que halla sido totalmente saponificada (apariencia de clara uniforme)También utilizar un blanco el aceite problema, usar 25ml de potasa alcohólica y calentar no usar aceite.

Enfriar los matraces y titular usando una solución estándar (HCl 5N). Usar 3 gotas de fenolftaleína hasta cambio de color y después agregar dos más.

RESULTADOS:

COLORACIÓN

TÉCNICALos lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.

MATERIALREACTIVOS

1 Gradilla Colorante Sudán III en solución alcohólica10 tubos de ensayo Tinta roja5 pipetas

TECNICA

1. Disponer en una gradilla con tubos de ensayo colocando en ambos 2ml de diferentes aceites

2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán III.3. A los otros tubos añadir 4-5 gotas de tinta roja.4. Agitar ambos tubos y dejar reposar5. Observar los resultados: en el tubo con Sudan III todo el aceite tiene que aparecer

teñido, mientras que en el tubo con tinta, esta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.

Resultados:

Sudán III Tinta rojaTubo 1 (aceite soya) Si NoTubo 2 (Aceite almendras) Si SiTubo 3 (Aceite oliva) Si NoTubo 4 (Canola) Si NoNota:Si: se juntó la pintura y se pintó el aceiteNO: La pintura y el aceite se separaron

CUESTIONARIO

1. ¿Qué son los jabones?Los jabones son sales de ácidos grasos, producidos mediante una reacción química conocida como saponificación. En esta reacción la grasa reacciona con la sosa para producir jabón y glicerina.

2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones?A partir de la mezcla de una sal alcalina, aceite y grasa, es la sal alcalina la que saponifica la piel (es decir que es una base)

3. Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?Porque en la saponificación, se utilizan grasas y éstas están compuestas por ácidos grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de sodio de los ácidos grasos (el jabón), por lo tanto, en la

fase acuosa quedará el alcohol (glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua, por lo que no hay razón para que no esté presente en esta forma.

¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrolisis de las grasas? Las lipasas

Boca:lipasa bucal estómago: lipasa gástrica Intestino delgado: lipasa pancreática-colipasa, esterasa del colesterol, lipasa pancreática dependiente de sales biliares.

4. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica a que se debe la diferencia entre ambos resultados.Cuando se mezcla el aceite con el Sudán III, todo el aceite se tiñe de rojo puesto que es un colorante lipofilo (soluble en grasas) y debido a esa afinidad se utiliza para revelar la presencia de grasas. Pero la tinta roja no es soluble en grasas, por esa razón, el aceite no se tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no se mezclan, y la tinta se deposita en el fondo.

5. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? ¿Y con la de bencenos y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?Al pasar unos minutos de reposo, esa emulsión desaparece por la reagrupación de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sitúa sobre el agua, de mayor densidad. Aparece una disolución homogénea, puesto que el aceite se disuelve en el benceno, sustancia orgánica y apolar al igual que el aceite. Simplemente por la solubilidad de las grasas: insolubles en agua y por tanto no se mezcla con ella, y solubles en disolventes apolares como él, por eso si se mezclan.

6. Escribe las fórmulas de los lípidos utilizados en la práctica