Practica de Laboratorio No 1 Carbohidratos
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PRACTICA DE LABORATORIO No 1
RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
RAFAEL ARLEY VIEDA
20131181034
MARIA DEL PILAR SANTACRUZ GIL
20131181017
BIOQUIMICA
DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA
UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO !SE DE CALDAS
FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES
INGENIERIA SANITARIA
BOGOT" D#C
2014
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RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS
RESUMENLos carbohidratos son biomoléculas, que contienen es sus estructuras grupos funcionalescomo aldehídos o cetonas polihidroxilados. Los carbohidratos al contener grupos carboniloe hidroxilo presentan propiedades y comportamiento químico típico de estos dos grupos
funcionales, los carbohidratos se clasifican generalmente en monosacáridos y polisacáridos(simples y complejos), los monosacáridos son carbohidratos que no se pueden descomponer a compuestos más simples por medio de hidrolisis, estos a su e! se subdiiden por eln"mero de átomos de carbono y grupo que contengan en# aldosas (aldehído) y cetosas(cetona). $n polisacárido es un carbohidrato que al hidroli!arse da dos o más unidades demonosacáridos .Los monosacáridos presentan reacciones características de %xido&reducci%ncomo las reacciones con los reactios de 'ollens y ehling, la formaci%n de osa!onas y laformaci%n de furfurales.
OBETIVOS
O$%&'()o *&+&,-.dentificar mediante reacciones características el comportamiento químico de loscarbohidratos, caracteri!ándolos en monosacáridos (aldosas o cetosas), en disacáridos o polisacáridos.
O$%&'()o/ &/&(o/*iferenciar mediante reacciones cualitatias los monosacáridos de los disacáridos y polisacáridos.+econocer y anali!ar las reacciones que se llean en cada una de las pruebas de olish,-!"cares reductores, arfoed, ial, /eli0anoff, 1rueba del ácido m"sico, ormaci%n deosa!onas y 1rueba de 2olh3 en los carbohidratos.+econocer la capacidad oxido&reductora de los monosacáridos.
dentificar los carbohidratos en una muestra problema.
MARCO TEORICOLos -,$o(5,-'o/ son polihidroxialdehídos, polihidrixicetonas o compuestos que por hidrolisis se conierten en aquéllos, un carbohidrato que no es hidroli!able a compuestosmás simples, se denomina monosacárido. $n carbohidrato que por hidr%lisis da dosmoléculas de monosacárido se llama disacárido, mientras que el que da muchas moléculasde monosacárido por hidr%lisis es un polisacárido.$n monosacárido se puede clasificar más precisamente# si contiene un grupo aldehído se leconoce como aldosa4 si contiene una funci%n cetona es una cetosa. /eg"n el n"mero deátomos de carbono que contenga, se conoce el monosacárido como triosa, tetrosa, pentosa,
hexosa, y así sucesiamente.Los carbohidratos que reducen los reactios de ehling (o enedict) y 'ollens, se conocencomo a!"cares reductores. 'odos los monosacáridos, sean aldosas o cetosas, son a!"caresreductores, como lo son también la mayoría de los disacáridos, siendo una excepci%nimportante la sacarosa (a!"car de mesa com"n), la que no es reductora.
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MATERIALES Y REACTIVOS
• $na gradilla para tubos de ensayo• 'ubos de ensayo (56 lanco& 7lucosa& y 86 1atr%n&ructosa)• -lfa 9aftol 5:;. Fo,6.-# <5:=>?•
@cido sulf"rico concentrado. Fo,6.- # =8/?A
• /oluci%n de almid%n. Fo,6.-# <B=5:?C
• @cido clorhídrico. Fo,6.-# =<l• +eactio de lugol. Fo,6.-# 8 (5;) en equilibrio con D (8;) en agua destilada.• 7alactosa 5;. Fo,6.-# <B=58?B
• +eactio de enedict. Fo,6.-# <u/?A.C=8?E <9a8?FE <D9/• /acarosa. Fo,6.- # <58=88?55
• ructosa. Fo,6.- <B=58?B
• Lactosa. Fo,6.-# <58=88?55
• +eactio de ehling.
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RESULTADOS
T-$.- 1 +econocimiento de <arbohidratos 1rueba de olish
PRUEBA DE MOLISH 9C10H7O/
H2SO4 :Co6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o/acarosaC12H22O11
/e obser% la aparici%n de dos capas, la primera de color ioleta y un precipitado de
color rojo1ositio
ructosa<B=58?B
/e obser% la aparici%n de dos capas, la primera de color ioleta, el precipitado decolor rojo pero en mayor cantidad que la
presentada por la sacarosa1ositio
T-$.- 2 +econocimiento de <arbohidratos 1rueba de ehling
PRUEBA DE FEHLINGCompuesto C-,-'&,/'(- R&/.'-5o
ructosa<B=58?B
1recipitado rojo 1ositio
/acarosa<58=88?55
1recipitado rojo 9egatio
T-$.- 3 +econocimiento de carbohidratos prueba de lugol o yodo
PRUEBA DE LUGOL : I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en aguadestilada
Co6&/'o C-,-'&,/'(- R&/.'-5o
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-lmid%n <B=5:?C
<oloraci%n café&roji!aoscura
1ositio
T-$.- 4 +econocimiento de carbohidratos reactio de 'ollensPRUEBA CON EL REACTIVO DE TOLLENS
Co6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5oructosa<B=58?B
<oloraci%n roji!a1ositio
/acarosaC12H22O11 se mantiene la coloraci%n
a!ul 9egatio
'abla C +econocimiento de carbohidratos G reactio de enedict
PRUEBA CON EL REACTIVO DE BENEDICTCo6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o
/acarosa<58=88?55
9o se produjo ning"ncambio de coloraci%n
9egatio
7alactosa<B=58?B
/e produjo un cambio decoloraci%n del a!ul claro a
rosado eidenciando el proceso de reducci%n
1ositio
'abla B +econocimiento de carbohidratos& prueba de arfoed
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PRUEBA DE BARFOEDCo6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o
/acarosa<58=88?55
<oloraci%n a!ul 9egatio
ructosa<B=58?B <oloraci%n a!ul 9egatio
'abla > +econocimiento de carbohidratos& prueba de /eli0anoff
PRUEBA DE SELI;ANOFFCo6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o
/acarosa<58=88?55
<oloraci%n rosada clara 1ositio
ructosa<B=58?B
<oloraci%n rosada intensa 1ositio
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'abla H +econocimiento de carbohidratos& prueba de ial
PRUEBA DE BIALCo6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o/
/acarosa
<58=88?55
<oloraci%n anaranjado claro 9egatio
ructosa<B=58?B
<oloraci%n anaranjadooscuro
9egatio
'abla I +econocimiento de carbohidratos& prueba del @cido "sico
PRUEBA DEL "CIDO M<SICOCo6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o7alactosa<B=58?B
/e forman los cristales 1ositio
/acarosa<58=88?55
9o se forman cristales 9egatio
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'abla 5: +econocimiento de carbohidratos& formaci%n de osa!onas
FORMACION DE OSAZONASCo6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o7alactosa
<B=58?B
<oloraci%n amarilla ycristales del mismo color
1ositio
FructosaC6H12O6
<oloraci%n amarilla pero noaparecen cristales
9egatio
'abla 55 +econocimiento de carbohidratos& 1rueba para disacáridos
PRUEBA PARA DISCARIDOS = SACAROSAT$o o+ C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o
=<l
<oloraci%n amarilla 1ositio
9a?=
<oloraci%n ligera rosada 9egatio
H2O
'raslucido 9egatio
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'abla 58 +econocimiento de carbohidratos& 1rueba para disacáridos
PRUEBA DE ;OLH> Co6&/'o C-,-'&,/'(-/ R&/.'-5o
Lactosa<58=88?55
Ligera capa superior roji!a 1ositia
ructosa<B=58?B
'raslucido 9egatio
ANALISIS DE RESULTADOS
E+/-?oP,&$- 5&Mo.(/
La reacción de la ructosa con el H2!O" concentrado# or$aun urural o un deriado del urural# que se reconoce con elala natol &or or$ación de un color &ur&ura ioleta# elH2!O" concentrado desco$&one el carbo'idrato&resentndose una 'idrolisis en los enlaces glucosidicos*ste ti&o de reacción es de adicción nucleo+lica , de ti&o!-1# en el cual el H2!O" concentrado &resenta una 'idrolisisde los enlaces glucosidicos , con el ala natol se &reci&itan&ara dar una coloración ioleta que es el &ositio &ara los'idratos de carbono
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Ilustración 1 .eacción del /onó$ero con el H 2SO
4
concentrado
Ilustración 2 .eacción del deriado urural con el 0la natol
R&-'()o 5&B&+&5('
Jn este ensayo se identifican los a!ucares reductores, todos los mon%meroscontienen en sus extremos funciones químicas (-ldehídos y <etonas) que pueden reducir otras sustancias. Jn la reacci%n con el reactio de enedict, la galactosa al ser una aldosareduce el complejo c"prico, desapareciendo el color a!ul intenso, por un
color rojo ladrillo que el cual es positio para este ensayo.La sacarosa es la uni%n por los dos extremos reductores de la glucosa y lafructosa, por lo consiguiente no podrá efectuar esta reducci%n del ionc"prico.
lustraci%n F +eacci%n de la glucosa con el +eactio de enedictR&-'()o 5&F&.(+*
*n &resencia de agentes oidantes# iones $etlicos co$o el
Cu+2
# los $onosacridos &resentan arias reacciones de
oidación resentndose un ca$bio de coloración a ro3oladrillo indicando la &resencia de un a45car reductor# ara elensa,o con la sacarosa al ser esta la unión de los etre$osnucleo+licos de la glucosa , la ructosa no &osee iones libres&ara or$ar la reacción de reducción
Ilustración " .eacción de los Carbo'idratos con el .eactio
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de Fe'ling
R&-'()o 5&To..&+/
*l ensa,o con el reactio de ollens es una reacción deoidación# en la cual se identi+ca a las aldosas# ,a que lascetosas no reaccionan *n la reacción el reactio de ollensse oida total$ente# , genera el es&e3o de &lata# ,a que el
ion de &lata se reduce a &lata ele$ental !in e$bargo laructosa si reduce el reactio de ollens# esto se debe a quela ructosa se iso$eri4a cil$ente en una $e4cla de aldosas(glucosa , $anosa) en una disolución bsica &or una seriede des&la4a$iento tauto$ericos ceto7enol1
Ilustración 8 .eacción de los Carbo'idratos con el .eactiode ollens
P,&$- 5&B-,o&5
Jl reactio de arfoed es una prueba para distinguir entre monosacáridos ydisacáridos, en nuestro ensayo el resultado no fue representatio ya que lasacarosa que trabajamos no era la indicada, para esta prueba.
'e%ricamente la elocidad de reacci%n al reducir el ion Cu+2
, por parte
del mon%mero debe ser más rápida que la del disacárido, Jsta reacci%n estálimitada al tamaKo de la molécula, siendo la reacci%n de los mon%merosmucho más rápida que los disacáridos
lustraci%n B +eacci%n de los <arbohidratos con el +eactio de arfoed
P,&$- 5&.*o.
*l ,odo se introduce en las es&iras de la $ol9cula delal$idona# &or lo cual este to$a una coloración oscura *lal$idón es coloreado de a4ul en &resencia de Lugol# debidoa una adsorción o +3ación del I7sobre las unidades deglucosa de la a$ilosa
Prueba
deSeliwanof
anto las aldosas co$o las cetosas en &resencia de cidos
$inerales , en un $edio caliente suren &rocesos dedes'idratación# lo cual da co$o &roducto un anillo&entagonal de urural o 'idroi$etilurural# seg5n sea el$onosacrido &entosa o 'eosa# los ururales secondensas dando una coloración ro3a Las cetosas sedes'idratan $s r&ido que las aldosas# lo cual &er$itedierenciarlos *n la &rueba de !eli;ano< la ructosa al seruna ceto'eosa da un resultado &ositio# en cuanto a la
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sacarosa esta al contener ructosa da ta$bi9n &ositio si sede3a correr el tie$&o adecuado &ara que se eectu9 la'idrolisis acida en donde la sacarosa libera ructosa
Ilustración = .eacción de las ceto'eosas con el reactio
de !eli;ano<
Pruebade Bial
*sta &rueba se basa en la or$ación de urural# al 'acerreaccionar &entosas con HCl , &osterior$ente con orcinol*l urural es un alde'>do electro+lico# en &resencia decido# adiciona enoles (con &9rdida de agua) &roduciendosustancias alta$ente coloreadas# las &entosas originan unacoloración a4ul7erde *n la &rueba de ?ial no se contó conla ribosa# &rocedi$os a reali4ar la &rueba con ructosa ,sacarosa anto la ructosa co$o la sacarosa al no ser
&entosas no dan una coloración &ositia# sin e$bargo las'eosas al reaccionar con el reactio de ?ial originan unacoloración erde# ca9 o ca97ro3i4a# ra4ón &or lo cual en laructosa se obseró una coloración ca9 @ro3i4a oscura , enla sacarosa una coloración si$ilar &ero clara ara la&entosas la reacción es:
Ilustración A .eacción de las &entosas con reactio de ?ialPrueba La &rueba de cido $5sico &er$ite identi+car la galactosa
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del ácidomsico
*l H-O oida tanto al gru&o alde'>do co$o al alco'ólico&ri$ario &ara or$ar cidos dicarboilico# el cido $5sicoinsoluble se or$a gracias a la oidación de la galactosa#este cido dicarboilico al ser insoluble &reci&ita en or$ade cristales
Ilustración B .eacción de la galactosa con H-O
!ormaci"n deosa#onas
Las aldosas , las cetosas al &oseer un gru&o alde'>do ,cetona res&ectia$ente &ueden reaccionar con laenil'idra4ina &ara or$ar enil'idra4onas# si se utili4a uneceso de enildidra4ina se or$a una osa4ona quecontiene dos residuos de enil'idra4ina &or $ol9cula#$ientras que una tercera $ol9cula del reactio seconierte en anilina , a$oniaco1 La osa4ona or$ada &orla galactosa (aldosa) es insoluble , se &resenta en or$a decristales a$arillos
Ilustración B For$ación de osa4onasPruebaparadisacáridosSacarosa
La sacarosa es un disacrido que carece de &oderreductor# esto se debe a que no &osee en la $ol9cula ungru&o alde'>do o cetona en or$a de 'e$iacetlitica# el HCl'idroli4a la sacarosa dando lugar a la glucosa , la ructosa#sus $onosacridos integrantes 0l a&licar la &rueba de?enedict , la de !eli;ano< estas dan &ositio La 'idrolisis
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Pruebade $ol%&
acida de su enlace glicosidico &er$ite que sus $onosacridos glucosa , ructosa (a4ucares reductores)reaccionen con el reactio de ?enedict# &or otro lado laglucosa , la ructosa en la &rueba de !eli;ano< ta$bi9narro3a un resultado &ositio# a causa de las ra4ones
anterior$ente e&uestas (er &rueba de !eli;ano<)La prueba de 2olh3 permite identificar la lactosa. Lactosa es un a!"car reductor, forma una osa!ona y existe en formas alfa y beta que mutarrotan.,
se toma como resultado positio la aparici%n de una coloraci%n roji!a4 ennuestra muestra de lactosa se obser% una ligera capa superior roji!amientras que en nuestro blanco no hubo ning"n cambio.
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CUESTIONARIO
1# @Q 5(&,&+(- &(/'& &+',& --,&/ ,&5'o,&/ ? +o ,&5'o,&/Los a!ucares reductores poseen un grupo carbonilo libre, lo cual les permite reducirse,en cambio en los a!ucares no reductores el grupo carbonilo se encuentra combinado enuni%n glicosidica, haciendo que estos care!can de capacidad reductora#
2# @C6o &5& %/'((-, &. &o 5& & .- *.o/- -. (*-. & .- ,'o/- 5& ,&$-o/('()- -,- --,&/ ,&5'o,&/'anto la glucosa como la fructosa son considerados a!ucares reductores, es decir seoxidan fácilmente con oxidantes suaes, los dos poseen carbonos libres en forma dehemiacetales otorgándoles la capacidad de reducir.
3# Co+/.'& .-/ &/',',-/ &+ o,6- -$(&,'- o &,,-5- 5& .o/ /(*(&+'&/ --,&/ ? o+/.'&5& 5o+5& /& &',-&+ o &+ 5o+5& -$+5-+ ? -,- & /& &6.&-+ -5- +- 5& &..-/
-: M-+o/-
Fo,6- -$(&,'- Fo,6- &,,-5- La manosa se encuentra en las gomas egetales y es constituyente de muchas proteínas.
$: G-.-'o/-
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La galactosa es sinteti!ada por las glándulas mamarias para producir lactosa, que es undisacárido formado por la uni%n de glucosa y galactosa, por tanto el mayor aporte degalactosa en la nutrici%n proiene de la ingesta de lactosa de la leche. Js un
monosacárido que se obtiene en el intestino, por medio de la acci%n de la en!imalactasa. /e conierte en glucosa en el hígado como aporte energético, forma parte de losglucolípidos y glucoproteínas de las membranas celulares de las células sobre todo delas neuronas
: L-'o/-
Jstá presente en todas las leches de los mamíferos. La lactosa representa una fuenteenergética de fácil utili!aci%n y faorece la absorci%n de calcio y magnesio.
5: F,'o/-
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/e encuentra en los egetales, las frutas, la miel, la hidrolisis del a!"car de caKa y de lainulina. Jl hígado la almacena en forma de gluc%geno también es conertida en glucosay utili!ada por el organismo.
&: A.6(5+
Es un homopolisacárido de reserva energética predominante en las plantas, constituido por la
unión de grandes cantidades de monómeros de glucosa.El almidón se encuentra en los
amiloplastos de las células vegetales, sobre todo en las semillas, las raíces los tallos,incluidos los tubérculos.
: S--,o/-
-bundante en la frutas y egetales, es usado por la abejas para hacer miel, es usadacomo edulcorante, fuente de energía y conserante.
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*: 6-.'o/-
/e encuentra en la cere!a, en los granos de cebada, se puede obtener por hidrolisis dealmid%n y gluc%geno. /e usa como edulcorante y en jarabes.
: R($o/-
La fuente principal de la ribosa son los ácidos nucleicos, es ital para los elementosestructurales de los ácidos nucleicos y de las coen!imas como -'?, 9-*, 9-*1,flaoproteinas, intermediario en la ía de las pentosas.
CONCLUSIONES
Los carbohidratos al poseer en su estructura aldehídos o cetonas, presentan uncomportamiento químico ligado a los grupos funcionales de estos, como por ejemplo lacapacidad de oxidarse con agentes oxidantes suaes como el reactio de fehling o de
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'ollens o la capacidad de formar osa!onas, además esta clase de reacciones permitendiferenciar monosacáridos de disacáridos como la sacarosa.
Los monosacáridos se diferencia de los disacáridos (sacarosa) por su poder reductor, poder que es otorgado por el carbono libre que posee, los monosacáridos a su e! sesubdiiden en aldosas y cetosas, y en pentosas o hexosas, estos fueron identificados ydiferenciados mediante la prueba de 'ollens, de /eli0anoff y de ial, en las que seeidencio la elocidad de deshidrataci%n de las aldosas y cetosas, y la formaci%n defurfural o hidroximetil furfural, seg"n proenga una pentosa o hexosa.
La sacarosa al hidroli!arse libera a sus monosacáridos constituyentes# la glucosa y lafructosa, debido a esto la sacarosa presento resultados positios en la prueba para
disacáridos y en la prueba de /eli0anoff.
BIBLIOGRAFIA
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