PERUBAHAN SIFAT-SIFAT KINETIK PADA ENZIM

DASAR SIFAT KINETIK ENZIM

*Prinsip-prinsip dasar dari sifat

kinetik enzim, reaksi:

E kompleks E

+ E +

S S P

Diagram 1. Pengaruh konsentrasi

substrat terhadap

angka reaksi katalisasi enzim.

=

Kecepatan

R

E

A

K

S

I

Konsentrasi

substrat

V maksimum

Kompleks

ES

Diagram 2. Perkembangan waktu ketika pembentukan produk dan kompleks enzim-substrat dalam suatu reaksi katalisis enzim

1. Ketepatan uji pada periode reaksi enzimatik dikenal sebagai tahap konstan.

2. Terjadi secara singkat setelah pencampuran enzim dan substrat serta hubungan interval waktu dengan angka reaksi membentuk garis fungsi linear terhadap waktu.

3. Substrat berada pada konsentrasi molar yang lebih tinggi daripada enzim.

4. Konsentrasi substrat bebas hampir sama dengan total substrat yang ditambahkan pada campuran reaksi.

P ALANIN 222

E

N

Y

I SISTEIN 222

S

A

A

N

A

K

T

I

V

I METIONIN 222

T

A

S

(%) WAKTU

Resistensi oksidasi oleh mutan subtilisin di mana metionin residu 222 digantikan oleh alanin atau sistein (aktivitas sisa setelah berada pada 0,1 mol/l hidrogen peroksida)

P ALANIN 222

E

N

Y

I SISTEIN 222

S

A

A

N

A

K

T

I

V

I METIONIN 222

T

A

S

(%) WAKTU

Resistensi oksidasi oleh mutan subtilisin di mana metionin residu 222 digantikan oleh alanin atau sistein (aktivitas sisa setelah berada pada 1,0 mol/l hidrogen peroksida)

Jika tekanan oksidatif selama penggunaan mendekati 1 mol/l hidrogen peroksida, maka varian kandungan alanin akan sagat berguna.

2. Jika tekanan oksidatif selama penggunaan mendekati 0,1 mol/l hidrogen peroksida, maka kemungkinan varian kandungan sistein yang akan lebih mendekati.

MAKRO-MODIFIKASI UNTUK MEMBENTUK PROTEIN

Sebuah penggabungan protein tripartit dapat digunakan untuk memfasilitasi pemurnian protein.

PENGGUNAAN EKOR POLIARGININ UNTUK MEMFASILITASI PEMURNIAN PROTEIN

a. Representatif

skematik pada pro-

tein hipotetik

sebelum dan sesu-

dah perpindahan

enzim pada residu

C-terminal arginin.

Pemisahan ekor poliarginin urogastron dari protein besar pada ekstrak sel E. coli :

Tingkah laku kromatografik dari ekor dan bukan bagian ekor urogastron:

SEKIAN
&
TERIMA KASIH