LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA BAHAN ALAM

PERCOBAAN 3 DAN 4

Isolasi Glikosida Flavonid dari Manihot utilissima Folium dan Identifikasi Falovonoid

dengan Kromatografi Lapis Tipis

Disusun oleh :

1. Nisadiyah Faridatus Shahih (G1F012064) 2. Rizky Ariyanti (G1F012070) 3. Wahyu Nunggal P. (G1F012072) 4. Lala Febria (G1F012074) 5. Rafdy Falih Albani (G1F012076)

Golongan/kelompok : IV B/Tanin

Hari/tanggal : Kamis, 12 Juni 2014

Asisten : Glorya - Zaky

LABORATORIUM BIOLOGI FARMASI

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

PURWOKERTO

2014

PERCOBAAN III

ISOLASI GLIKOSIDA FLAVONOID DARI Manihot utilissima FOLIUM

A. Tujuan Praktikum

Memahami dan melakukan isolasi flavonoid dari daun ketela (Manihot

utilissima).

B. Pendahuluan

Senyawa flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol yang terbesar yang

ditemukan di alam. Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu dan

biru serta sebagai zat warna kuning yang ditemukan dalam tumbuh-tumbuhan

(Lenny, 2006). Infusa adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperatur 90C

selama 15 menit. Infusa adalah proses penyarian yang umumnya digunakan untuk

menyari zat kandungan aktif yang larut dalam air dari bahanbahan nabati.

Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah

tercemar oleh kuman dan kapang. Oleh sebab itu sari yang diperoleh dengan cara

ini tidak boleh disimpan lebih dari 24 jam. Cara ini sangat sederhana dan sering

digunakan oleh perusahaan obat tradisional. Dengan beberapa modifikasi cara ini

sering digunakan unuk membuat ekstrak. Dekokta adalah ekstraksi dengan pelarut

air pada temperatur 90C selama 30 menit. Penguapan ekstrak larutan dilakukan

dengan penguap pengurangan tekanan, yaitu rotary evaporator sehingga diperoleh

ekstrak yang kental (Harborne, 1987).

C. Bahan dan Alat

Bahan yang digunakan dalam praktikum adalah aquadest, eter, asam klorida

(HCl 2 N), dan natrium sulfat anhidrat. Sedangkan alat yang digunakan dalam

praktikum adalah panci infusa, corong besar, erlenmeyer (50 ml dan 250 ml),

tabung reaksi, corong pisah (250 ml), cawan porselen, flakon (3 buah).

D. Cara Kerja

50 gram serbuk bahan

Dimasukkan ke dalam panci infusa 1 (atas),

Ditambahkan dengan 500 ml aquadest,

Diletakkan diatas panci infusa 2 (bawah) yang telah berisi air biasa, tunggu sampai mendidih dan suhu di

panci atas mencapai 90oC, dibiarkan selama 15 menit

(untuk mendapatkan infusa),

Disaring melalui corong buchner sehingga diperoleh filtrat yang jernih,

Dipindahkan ke dalam erlenmeyer 250 ml,

Disimpan dalam almari es hingga terbentuk kristal amorf putih kekuningan ( 1 minggu),

Filtrat + kristal amorf

Dituang sebagian besar filtrat pada erlenmeyer ke tempat lain dengan hati-hati supaya kristal tidak ikut

tertuang,

Disaring dengan kertas saring yang telah ditara hingga memperoleh kristal, jika masih ada kristal yang

menempel pada dasar erlenmeyer maka bilang dengan

air es dan saring,

Dikeringkan kertas saring bersama endapan pada suhu 50

oC selama 30 menit,

Ditimbang untuk memperoleh rendemen,

Diambil sedikit padatan dengan ujung spatel kecil,

Dilarutkan dalam 2 ml campuran metanol-air sama banyak dalam flakon (sari I),

Diambil sisa padatannya, masukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan dengan 10 ml HCl 2 N,

Ditaruh corong kecil berisi kapas di atas tabung untuk mengurangi penguapan

Dilakukan refluks pada penangas air mendidih selama 1 jam,

Didinginkan dan dimasukkan ke dalam corong pisah yang berisi eter sebanyak 10 ml,

Dikocok dan tunggu hingga terbentuk dua lapisan,

Dipisahkan bagian air asam dan organik eter,

Dikocok kembali lapisan air asamnya dengan 10 ml dietil eter yang baru dalam corong pisah,

Dipisahkan bagian air asam dan organik eter, dan dicampurkan dengan yang pertama,

Disaring sari eternya dengan kertas saring yang berisi 1 gram natrium sulfat anhidrat ke dalam cawan

porselin,

Diuapkan eternya tanpa pemanasan dan larutkan residu yang diperoleh dengan 2 ml metanol dalam flakon

(Sari II).

Diuapkan lapisan air asam hasil hidrolisis dengan cawan porselin di atas penangas air dengan hembusan

angin sehingga cairan tinggal kira-kira 1ml dan

tuangkan ke dalam flakon (Sari III)

Sari I, Sari II, Sari III

E. Hasil dan Pembahasan

E.1. Hasil Pengamatan

No. Perlakuan Hasil Pengamatan

1. 50 gram serbuk bahan dimasukkan ke

dalam panci infusa 1 (atas),

2. Kemudian ditambahkan dengan 500

ml aquadest,

3. Kemudian diletakkan diatas panci

infusa 2 (bawah) yang telah berisi air

biasa, tunggu sampai mendidih dan

suhu di panci atas mencapai 90oC,

dibiarkan selama 15 menit (untuk

mendapatkan infusa),

4. Kemudian disaring melalui corong

buchner sehingga diperoleh filtrat

yang jernih,

Diperoleh filtrat jernih berwarna

coklat

5. Kemudian dipindahkan ke dalam

erlenmeyer 250 ml,

6. Kemudian disimpan dalam almari es

hingga terbentuk kristal amorf putih

kekuningan ( 1 minggu),

Terbentuk kristal amorf putih

kekuningan pada dasar erlenmeyer

7. Kemudian dituang sebagian besar

filtrat pada erlenmeyer ke tempat lain

dengan hati-hati supaya kristal tidak

ikut tertuang,

Kristal tetap pada dasar erlenmeyer

8. Kemudian disaring dengan kertas

saring yang telah ditara hingga

memperoleh kristal, jika masih ada

kristal yang menempel pada dasar

erlenmeyer maka bilang dengan air es

dan saring,

Kertas saring = 0,526 gram

9. Dikeringkan kertas saring bersama

endapan pada suhu 50oC selama 30

menit,

10. Ditimbang untuk memperoleh

rendemen,

n m n

o o n i

o o n 1

Kertas saring + bahan = 0,6522

gram

Bahan = 0,1262 gram

Rendemen =(0,1262/50)x100%

=0,2524%

11. Diambil sedikit padatan dengan ujung

spatel kecil,

12. Dilarutkan dalam 2 ml campuran Diperoleh sari I

metanol-air sama banyak dalam

flakon (sari I),

13. Diambil sisa padatannya, masukkan

ke dalam tabung reaksi dan

ditambahkan dengan 10 ml HCl 2 N,

14. Ditaruh corong kecil berisi kapas di

atas tabung untuk mengurangi

penguapan

15. Dilakukan refluks pada penangas air

mendidih selama 1 jam,

16. Didinginkan dan dimasukkan ke

dalam corong pisah yang berisi eter

sebanyak 10 ml,

17. Dikocok dan tunggu hingga terbentuk

dua lapisan,

18. Dipisahkan bagian air asam dan

organik eter,

Warna bagian air = jernih

Warna bagian organik eter =

kuning jernih

19. Dikocok kembali lapisan air asamnya

dengan 10 ml dietil eter yang baru

dalam corong pisah,

20. Dipisahkan bagian air asam dan

organik eter, dan dicampurkan dengan

yang pertama,

Warna bagian air = jernih

Warna bagian organik eter =

kuning jernih

21. Disaring sari eternya dengan kertas

saring yang berisi 1 gram natrium

sulfat anhidrat ke dalam cawan

porselin,

22. Diuapkan eternya tanpa pemanasan

dan larutkan residu yang diperoleh

dengan 2 ml metanol dalam flakon

(Sari II).

Diperoleh sari II

23. Diuapkan lapisan air asam hasil

hidrolisis dengan cawan porselin di

atas penangas air dengan hembusan

angin sehingga cairan tinggal kira-kira

1ml dan tuangkan ke dalam flakon

(Sari III)

Diperoleh sari III

OO

1

2

3

45

6

7

8

9

10

1'

2'

3'

4'

5'

6'A

(8a)

(4a)

C

B

E. 2. Pembahasan

Pada praktikum ini bertujuan untuk dapat memahami dan melakukan isolasi

flavonoid dari daun ketela (Manihot utilissima). Senyawa flavonoid adalah suatu

kelompok senyawa fenol yang terbesar yang ditemukan di alam. Senyawa-

senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu dan biru serta sebagai zat warna

kuning yang ditemukan dalam tumbuh-tumbuhan. Flavonoid mempunyai

kerangka dasar karbon yang terdiri dari 15 atom karbon, dimana dua cincin

benzene (C6) terikat pada suatu rantai propane (C3) sehingga bentuk susunan C6-

C3-C6 (Lenny, 2006).

Gambar 1. Struktur Senyawa Flavonoid (Lenny, 2006).

Sebagian besar senyawa flavonoida alam ditemukan dalam bentuk glikosida,

dimana unit flavonoid terikat pada suatu gula. Glikosida adalah kombinasi antara

suatu gula dan suatu alcohol yang saling berikatan melalui ikatan glikosida. Pada

prinsipnya, ikatan glikosida terbentuk apabila gugus hidroksil dari alcohol

beradisi kepada gugus karbonil dari gula sama seperti adisi alcohol kepada

aldehida yang dikatalisa oleh asam menghasilkan suatu asetal. Pada hidrolisa oleh

asam, suatu glikosida terurai kembali atas komponen-komponennya menghasilkan

gula dan alcohol yang sebanding dan alcohol yang dihasilkan disebut dengan

aglikon. Residu gula dari glikosida flavonoida alam adalah glukosa, ramnosa,

galaktosa dan gentibiosida. Flavonoida dapat ditemukan sebagai mono- , di- atau

triglikosida dimana satu, dua atau tiga gugus hidroksil dalam mole