i

TESIS

PERBANYAKAN SOMAKLONAL

TANAMAN ANGGREK Vanda tricolor Lindl.

var. suavis

DHIMAS NURPRATAMA

NIM 1190861004

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI PERTANIAN

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2015

ii

PERBANYAKAN SOMAKLONAL

TANAMAN ANGGREK Vanda tricolor Lindl.

var. suavis

Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister

pada Program Magister, Program Studi Bioteknologi Pertanian,

Program Pascasarjana Universitas Udayana

DHIMAS NURPRATAMA

NIM 1190861004

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI PERTANIAN

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2015

iii

iv

PENETAPAN PANITIA PENGUJI TESIS

Tesis Ini Telah Diuji pada

Tanggal : 10 November 2015

Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK Rektor

Universitas Udayana, No. : 2032 / UN14.4 / HK / 2015, Tanggal 30 Juni 2015

Ketua : Prof. Dr. Ir. I Gede Rai Maya Temaja, M.P.

Anggota :

1. Dr. Ir. Rindang Dwiyani, M.Sc.

2. Prof. Dr. Ir. I Made Sudana, M.S.

3. Dr. Ir. Dewa Nyoman Nyana, M.Si.

4. I Putu Sudiarta, S.P., M.Si., Ph.D.

v

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT

Saya yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama : Dhimas Nurpratama

NIM : 1190861004

Program Studi : Bioteknologi Pertanian

Judul Tesis : Perbanyakan Somaklonal Tanaman Anggrek Vanda tricolor

Lindl. var. suavis.

Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah tesis ini bebas plagiat. Apabila

dikemudian hari terbukti plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia

menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 Tahun 2010 dan

Peraturan Perundang-undangan yang berlaku.

Denpasar, 10 November 2015

Yang membuat pernyataan,

(Dhimas Nurpratama)

vi

UCAPAN TERIMA KASIH

Pertama-tama perkenankanlah penulis memanjatkan puji syukur kehadirat

ALLAH SWT, karena atas rahmat dan anugrahNYA tesis yang berjudul

“Perbanyakan Somaklonal Tanaman Anggrek Vanda tricolor Lindl. var. suavis”

dapat diselesaikan.

Dalam penyusunan tesis ini tidak lepas dari bimbingan dan bantuan dari

semua pihak, untuk itu penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya

kepada Prof. Dr. Ir. I Gede Rai Maya Temaja, M.P. sebagai Pembimbing I

sekaligus Ketua Program Studi Bioteknologi Pertanian, Program Pascasarjana

Universitas Udayana yang dengan penuh perhatian dan kesabaran telah

memberikan bimbingan, semangat, dan saran kepada penulis; Dr. Ir. Rindang

Dwiyani, M.Sc selaku Pembimbing II, yang dengan sangat sabar dan penuh

perhatian memberikan dorongan, semangat, bimbingan, saran dan arahan kepada

penulis selama proses penelitian dan penyusunan tesis ini.

Ucapan terima kasih penulis tujukan kepada Rektor Universitas Udayana

Prof. Dr. dr. Ketut Suastika, Sp. PD., KEMD, Ibu Direktur Pascasarjana

Universitas Udayana Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp. S(K) dan Prof. Dr. Ir.

I Gede Rai Maya Temaja, M.P., selaku Ketua Program Studi Bioteknologi

Pertanian Program Pascasarjana Universitas Udayana atas kesempatan yang

diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program Magister pada

Program Pascasarjana Universitas Udayana serta seluruh staf administrasi yang

telah banyak membantu penulis selama menempuh pendidikan.

vii

Ucapan terima kasih penulis sampaikan pula kepada para Penguji tesis,

yaitu Prof. Dr. Ir. I Made Sudana, M.S; Dr. Ir. Dewa Nyoman Nyana, M.Si;

I Putu Sudiarta, S.P., M.Si., Ph.D yang telah banyak memberikan banyak

masukan, saran, dan arahan dalam penyelesaian tesis ini sehingga tesis ini dapat

terwujud menjadi lebih baik.

Ucapan terima kasih yang tulus penulis sampaikan kepada kedua orang tua

yang selalu mendoakan, menjadi motivasi, pengingat dan penyemangat untuk

terus maju. Drs. H. Sarjono HS. selaku kakek sekaligus Ayah yang telah

memberikan suri tauladannya dan dukungan materi, moril serta menjadi

penyemangat hidup dalam perantauan di Pulau Seribu Pura hingga akhir

perjuangan meraih gelar Master. Terima kasih untuk sahabat - sahabat terbaik

Wahyu Budiyanto, Tania, Diana Rosinta, dan Taufik. Terlalu banyak kenangan

terukir indah selama di Bali.

Ungkapan terima kasih penulis sampaikan dengan tulus dan ikhlas hanya

ALLAH SWT yang mampu membalas semua kebaikan yang telah diberikan.

Semoga ALLAH SWT selalu melimpahkan rahmatNYA kepada semua pihak

yang telah membantu pelaksanaan dan penyelesaian tesis ini. Semoga tesis ini

dapat memberikan sumbangan bagi pengembangan ilmu pengetahuan dan

bermanfaat bagi semua.

Denpasar, 10 November 2015

Penulis

viii

ABSTRAK

Perbanyakan Somaklonal Tanaman Anggrek Vanda tricolor Lindl.

var. suavis

Indonesia merupakan salah satu negara yang memiliki banyak keragaman

tanaman anggrek, terutama anggrek alam yang tersebar hampir di seluruh

nusantara. Salah satu spesies anggrek alam tersebut adalah anggrek Vanda tricolor

Lindl. var. suavis. Spesies anggrek ini merupakan induk persilangan dari beberapa

anggrek V. tricolor yang memiliki nilai ekonomi tinggi di pasaran. Spesies

V. tricolor di habitat asalnya dilaporkan mulai langka disebabkan oleh kerusakan

hutan akibat overgathering dan bencana alam. Dengan alasan tersebut, maka perlu

dilakukannya usaha konservasi untuk menyelamatkan tanaman anggrek V. tricolor

dari kepunahan. Salah satu alternatif untuk melestarikan keanekaragaman anggrek

ini adalah dengan cara melakukan perbanyakan melalui mikropropagasi. Melalui

mikropropagasi akan diperoleh anakan yang seragam dan identik dengan

induknya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh konsentrasi media

MS dan jenis irisan organ dan reaksinya terhadap pertumbuhan serta jumlah

planlet yang dihasilkan.

Penelitian ini menggunakan variasi media ½ MS dan 1 MS terhadap

macam irisan organ yaitu ujung daun, pangkal daun, ujung batang, dan pangkal

batang. Analisis data menggunakan statistik dengan metode Rancangan Acak

Lengkap faktorial yang kemudian di ekspresikan dengan menggunakan Tabel

Anova dan Uji DMRT taraf kesalahan 5%.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa perbanyakan somaklonal anggrek

V. tricolor Lindl. var. suavis dapat tumbuh dengan baik pada perlakuan media

½ MS. Perlakuan D0N1 dan D0N2 menunjukkan hasil terbaik terhadap persentase

eksplan hidup yaitu 100 %, sedangkan pada perlakuan D0N3 menunjukkan

persentase rata-rata eksplan bertunas tertinggi yaitu 40 % dan jumlah tunas per

eksplan yaitu 0,40 buah pada induksi tunas anggrek V. tricolor Lindl. var. suavis. Kata kunci: Vanda tricolor, media MS, macam organ

ix

ABSTRACT

Somaklonal Multipication Orchid of Vanda tricolor Lindl. var. suavis

Indonesia is one of the countries that have a lot of diversity, especially the

Orchids nature that spread throughout the archipelago. One of the orchid natural

species are Vanda tricolor Lindl. var. suavis. This orchid speciesis holding a cross

of several V. tricolor orchid which has high economic value in the market.

V. tricolor species in originally habitat reposted a rare start caused by the

destruction of forests due to overgathering and natural disasters. With the reasons

he had to do a conservation efforts to save the V. tricolor orchid from extinction.

One of alternative to preserve the diversity of orchid is by mikropropagasi. By

mikropropagasi will be acquired a uniform and saplings is identical to its parent.

The objectives of the research was to find out the effect of MS and type of explant

and their reaction to growth and amount of the resulting planlet. The completely

randomized design with two factorials. The first factor was combination of ½ MS and

1 MS. The second factor was explant type: N1 (leaf tip), N2 (leaf base), N3 (shoot

tip) and N4 (shoot base). Data analysis using the statistics with factorial by

completely randomized design (CRD) which later was expressed by using the

Anova Table and DMRT test with error level of 5%. The result of duplication somaklonal of Orchid of V. tricolor Lindl. var. suavis

can growt well on the treatment of the ½ MS. D0N1 and D0N2 significantly on

percentage of explant growing 100 %, while on D0N3 effected significantly on

percentage of shoot growing 40 % and shoot number 0,40 per explants at induction of

V.tricolor Lindl. var. suavis.

Key words: Vanda tricolor, MS media, explant types

x

RINGKASAN

Indonesia merupakan salah satu negara yang memiliki banyak keragaman

tanaman anggrek, terutama anggrek alam yang tersebar hampir di seluruh

nusantara. Salah satu spesies anggrek alam tersebut adalah anggrek Vanda tricolor

Lindl. var. suavis. Spesies anggrek ini merupakan induk persilangan dari beberapa

anggrek V. tricolor yang memiliki nilai ekonomi tinggi di pasaran. Spesies

V. tricolor di habitat asalnya dilaporkan mulai langka disebabkan oleh kerusakan

hutan akibat overgathering dan bencana alam. Dengan alasan tersebut, maka perlu

dilakukannya usaha konservasi untuk menyelamatkan tanaman anggrek V. tricolor

dari kepunahan. Salah satu alternatif untuk melestarikan keanekaragaman anggrek

ini adalah dengan cara melakukan perbanyakan melalui mikropropagasi. Melalui

mikropropagasi akan diperoleh anakan yang seragam dan identik dengan

induknya. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh

konsentrasi media MS dan jenis irisan organ dan interaksinya terhadap

pertumbuhan serta jumlah planlet yang dihasilkan.

Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan rancangan acak lengkap

(RAL) yang disusun secara faktorial yang terdiri dari dua faktor. Faktor pertama

adalah media yang terdiri dari dua aras yaitu : D0 (½ MS) dan D1 (1 MS). Faktor

kedua adalah jenis irisan organ yang terdiri dari 4 aras, yaitu : N1 (ujung daun),

N2 (pangkal daun), N3 (ujung batang), dan N4 (pangkal batang). Dari perlakuan

faktorial ini diperoleh 8 kombinasi perlakuan, yaitu D0N1, D0N2, D0N3, D0N4,

D1N1, D1N2, D1N3, D1N4. Setiap perlakuan diulang sebanyak 5 kali sehingga

terdapat 40 unit percobaan dan setiap unit ditanami 10 eksplan.

Berdasarkan hasil analisis sidik ragam menunjukkan bahwa secara interaksi

antara media MS terhadap macam irisan organ berpengaruh nyata terhadap semua

parameter pengamatan, yaitu persentase rata-rata eksplan hidup, persentase

eksplan browning pada umur 4 minggu setelah tanam (MST), persentase rata-rata

eksplan tumbuh tunas dan jumlah tunas pada umur 5 (MST).

Persentase eksplan hidup tertinggi terdapat pada perlakuan D0N1 yaitu

sebesar 100 %, dan persentase eksplan hidup terendah terdapat pada perlakuan

D1N4 yaitu sebesar 6 %. Sedangkan pada pengamatan persentase eksplan

browning dengan pemberian media 1 MS menunjukkan persentase browning

tertinggi yaitu sebesar 94 % pada perlakuan D1N4 dan pada perlakuan media

½ MS rata-rata browning tertinggi yaitu sebesar 52 % pada perlakuan D0N3.

Persentase tumbuh tunas tertinggi terdapat pada perlakuan D0N3 yaitu sebesar

40 %, dan pada perlakuan media 1 MS persentase rata-rata eksplan bertunas yaitu

sebesar 0 %. Sedangkan pada pengamatan jumlah tunas tertinggi diperoleh pada

perlakuan D0N3 yaitu sebesar 0,40 buah.

Kesimpulan dari penelitian ini adalah perbanyakan somaklonal anggrek

Vanda tricolor Lindl. var. suavis dapat tumbuh dengan baik pada perlakuan media

½ MS. Pada perlakuan D0N1 menunjukkan hasil terbaik terhadap persentase

eksplan hidup yaitu 100 %, dan pada perlakuan D0N3 menunjukkan persentase

rata-rata eksplan bertunas tertinggi yaitu 40 % dan jumlah tunas per eksplan yaitu

0,40 buah.

xi

DAFTAR ISI

Halaman

COVER DALAM .................................................................................................. ii

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. iii

PENETAPAN PANITIA PENGUJI ..................................................................... iv

SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT........................................................ v

UCAPAN TERIMA KASIH .................................................................................. vi

ABSTRAK ........................................................................................................... viii

ABSTRACT ........................................................................................................... ix

RINGKASAN ......................................................................................................... x

DAFTAR ISI .......................................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xv

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

1. Latar Belakang ............................................................................................. 1

2. Rumusan Masalah ........................................................................................ 3

3. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3

4. Manfaat Penelitian ....................................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................. 4

2.1 Klasifikasi Tanaman Anggrek Vanda tricolor Lindl. var. suavis ................ 4

2.2 Organogenesis dalam Kultur In Vitro .......................................................... 6

2.3 Media dalam Kultur In Vitro ........................................................................ 8

BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS ......................... 9

3.1 Kerangka Berpikir dan Konsep Penelitian ................................................... 9

3.2 Hipotesis Penelitian .................................................................................... 10

BAB IV METODE PENELITIAN ....................................................................... 11

4.1 Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................... 11

4.2 Alat dan Bahan Penelitian .......................................................................... 11

4.3 Rancangan Penelitian ................................................................................. 12

4.4 Pelaksanaan Penelitian ............................................................................... 12

4.4.1 Sterilisasi Bahan dan Alat ..................................................................... 12

4.4.2 Pembuatan Media MS ............................................................................ 13 4.4.3 Penanaman .............................................................................................. 14

4.5 Variabel Pengamatan ......................................................................................... 15

4.6 Analisis Data ............................................................................................. 16

xii

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................ 17

5.1 Persentase Rata-rata Eksplan Hidup ........................................................... 17

5.2 Persentase Rata-rata Eksplan Browning ..................................................... 19

5.3 Persentase Rata-rata Eksplan Bertunas ...................................................... 24

5.4 Jumlah Tunas .............................................................................................. 26

BAB VI SIMPULAN DAN SARAN .................................................................... 29

6.1 Simpulan .................................................................................................... 29

6.2 Saran ........................................................................................................... 29

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 30

LAMPIRAN .......................................................................................................... 34

xiii

DAFTAR TABEL

Halaman

5.1 Signifikasi pengaruh media (D), jenis eksplan (N) dan interaksinya

(DxN) terhadap persentase eksplan hidup, persentase eksplan browning,

persentase eksplan bertunas dan Jumlah tunas per eksplan ........................ 17

5.2 Pengaruh media (D) dan jenis irisan organ (N) terhadap persentase

eksplan hidup (%) dan persentase eksplan browning (%) umur 4 minggu

setelah tanam (MST)................................................................................... 19

5.3 Pengaruh media (D) dan jenis irisan organ (N) terhadap persentase rata-

rata eksplan bertunas (%) dan jumlah tunas per eksplan umur 5 minggu

setelah tanam (MST)................................................................................... 26

xiv

DAFTAR GAMBAR

Halaman

2.1 Anggrek Vanda tricolor Lindl. var. suavis forma Bali ............................... 5

3.1 Diagram Kerangka Konsep Penelitian ....................................................... 10

4.1 Bahan tanam anggrek Vanda tricolor var. suavis forma Bali ..................... 11

5.1 Persentase browning A. Browning pada eksplan pangkal batang dengan

1 MS, B. Browning pada eksplan pangkal batang dengan ½ MS

C. Browning pada eksplan ujung daun dengan 1 MS, D. Browning pada

eksplan ujung daun dengan media ½ MS ................................................... 23

5.2 Pertumbuhan Tunas Pada Eksplan ½ MS A. Jumlah tunas pada eksplan

ujung batang dengan media ½ MS, B. Jumlah tunas pada eksplan

pangkal batang dengan media 1 MS ........................................................... 28

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1. Komposisi Media MS ................................................................................. 35

2. Layout Penelitian ........................................................................................ 36

3. Perhitungan Media ...................................................................................... 37

4. Tabel Analisis Sidik Ragam ....................................................................... 38