PENGARUH PROPORSI DRUG LOAD TERHADAP DISOLUSI …repository.usd.ac.id/17493/2/078114036_Full.pdf ·...
118
PENGARUH PROPORSI DRUG LOAD TERHADAP DISOLUSI DISPERSI PADAT SPRAY DRIED ISOLAT EKSTRAK RIMPANG KUNYIT (Curcuma domestica C 95) - HPMC E-5 SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi Oleh: Reka Sudi NIM : 078114036 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2011
Transcript of PENGARUH PROPORSI DRUG LOAD TERHADAP DISOLUSI …repository.usd.ac.id/17493/2/078114036_Full.pdf ·...
PENGARUH PROPORSI DRUG LOAD TERHADAP DISOLUSI DISPERSI
PADAT SPRAY DRIED ISOLAT EKSTRAK RIMPANG KUNYIT
(Curcuma domestica C 95) - HPMC E-5
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Reka Sudi
NIM : 078114036
FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA2011
ii
PENGARUH PROPORSI DRUG LOAD TERHADAP DISOLUSI DISPERSIPADAT SPRAY DRIED ISOLAT EKSTRAK RIMPANG KUNYIT
(Curcuma domestica C 95) - HPMC E-5
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu SyaratMemperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Reka Sudi
NIM : 078114036
FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA2011
iii
iv
v
HALAMAN PERSEMBAHAN
“Keberhasilan adalah guru yang terburuk, sebab akanmenggoda orang pintar untuk berpikir bahwa ia tidak akanpernah mengalami kegagalan.”
(Bill Gates)
“Rata-rata panjang pensil tujuh inci, sedangkan karet penghapusnyacuma setengah inci. Renungkan itu disaat Anda tidak lagi berpikiroptimis”
(Robert Brault)
Karya ini kupersembahkan untuk:
Tuhan Yang Maha Penolong
Papa dan Mama tersayang,
Adik-adikku tersayang, Hera dan Desion Sudi,
Teman-teman dan almamaterku
Tanpa mereka aku bukan siapa-siapa
vi
vii
viii
PRAKATA
Puji dan syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas berkat, kasih dan
pertolongan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Pengaruh Proporsi Drug load Terhadap Disolusi Dispersi Padat Spray Dried
Isolat Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica C 95) - HPMC E-5”. Skripsi
ini disusun guna memenuhi salah satu syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana
Strata Satu Program Studi Ilmu Farmasi (S.Farm.).
Selama masa perkuliahan hingga penelitian dan penyusunan skripsi,
penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai pihak baik berupa bimbingan,
doa, dorongan, nasehat maupun sarana dan prasarana. Pada kesempatan ini
penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:
1. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Sanata Dharma Yogyakarta.
2. Dewi Setyaningsih, M.Sc., Apt., selaku Dosen Pembimbing yang telah
memberikan bimbingan, saran, nasehat, dan menanggung seluruh biaya
penelitian.
3. Lucia Wiwid Wijayanti, M.Si., selaku Dosen Pembimbing Pendamping
atas segala arahan, saran dan bimbingannya.
ix
4. Dr. C.J. Soegihardjo, Apt., selaku Dosen Penguji yang telah bersedia
menguji dan memberikan kritik, saran serta arahan kepada penulis.
5. Rini Dwiastuti, M.Sc., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah bersedia
menguji dan memberikan kritik, saran serta arahan kepada penulis.
6. Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt., atas pemberian eksklusif kurkumin
baku.
7. Colorcon Asia Pacific Pvt. Ltd atas pemberian HPMC E-5.
8. Pak Musrifin, Pak Wagiran, Pak Iswandi, Pak Agung, Pak Yuwono, Mas
Bimo, Mas Ottok, Pak Parlan, Mas Kunto, Mas Sigit, Pak Pardjiman, Pak
Heru, Pak Timbul dan segenap satpam atas bantuan dan kelancaran yang
telah diberikan dalam pelaksanaan penelitian ini.
9. Pak Bambang, Mas Sigit, dan Mas Jink selaku laboran Laboratorium
Teknologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, atas
bantuan, kerjasama dan pengetahuan baru yang telah diberikan selama
penulis melakukan penelitian khususnya dalam pengoperasian spray dryer.
10. Eka Permatasari, Evina dan Oki Christina selaku teman seperjuangan
dalam penelitian atas bantuan, dukungan, dan persahabatannya selama ini.
11. Lia Natalia Setiomulyo dan I Gusti Ngurah Agung Windra Wartana Putra
atas bantuan dan diskusinya tentang statistik.
x
12. Rekan-rekan seperjuangan di laboratorium, Benny, Katrin, Pace, Siwi,
Ayu, Manda, Yoga, Cyntia, Septi, Fanny, Yemima atas semangat dan
bantuan yang telah diberikan.
13. Bapak Djoko, Ibu Veronika Mardjanti, Elan, Trisiana Sarwastuti, Astri,
atas bantuannya selama ini.
14. Teman-teman FST ’07 dan seluruh teman-teman Farmasi atas
kebersamaan, kecerian, dan persahabatannya selama ini.
15. Rahayu selaku sahabat baik ku atas doa, semangat, bantuan, dan
persahabatannya selama ini.
16. Semua pihak dan teman-teman yang tidak dapat penulis sebutkan satu per
satu, yang telah membantu terselesaikannya skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna, oleh
karena itu penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang bersifat
membangun dari para pembaca demi kesempurnaan skripsi ini.
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi
perkembangan ilmu farmasi khusunya dan kemajuan ilmu pengetahuan pada
umumnya.
Penulis
xi
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL.....................................................................................
HALAMAN JUDUL........................................................................................
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING...............................................
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
HALAMAN PERSEMBAHAN.......................................................................
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI.............................................
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA...........................................................
PRAKATA.......................................................................................................
DAFTAR ISI....................................................................................................
DAFTAR TABEL............................................................................................
DAFTAR GAMBAR........................................................................................
DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................
INTISARI.........................................................................................................
ABSTRACT.....................................................................................................
BAB I PENGANTAR.......................................................................................
A. Latar Belakang...........................................................................................
1. Perumusan masalah...............................................................................
2. Keaslian penelitian................................................................................
3. Manfaat penelitian................................................................................
B. Tujuan Penelitian.......................................................................................
BAB II PENELAAHAN PUSTAKA...............................................................
A. Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica Rhizhome).......................
B. Kurkumin...................................................................................................
C. HPMC E-5.................................................................................................
D. Dispersi Padat............................................................................................
E. Spray Drying..............................................................................................
F. Uji Disolusi................................................................................................
i
ii
iii
iv
v
vi
vii
viii
xi
xiv
xv
xvi
xvii
xviii
1
1
5
5
6
6
7
7
7
10
11
14
14
xii
1. Pengertian disolusi................................................................................
2. Uji disolusi............................................................................................
3. Faktor-faktor yang mempengaruhi kecepatan disolusi.........................
4. Cara untuk mengungkapkan hasil uji disolusi......................................
G. Spektrofotometri Visibel...........................................................................
H. Validasi Metode Penelitian........................................................................
I. Landasan Teori..........................................................................................
J. Hipotesis ...................................................................................................
BAB III METODE PENELITIAN...................................................................
A. Jenis dan Rancangan Penelitian.................................................................
B. Variabel Penelitian....................................................................................
C. Definisi Operasional..................................................................................
D. Alat Penelitian...........................................................................................
E. Bahan Penelitian........................................................................................
F. Tata Cara Penelitian...................................................................................
1. Pembuatan dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-
5.............................................................................................................
2. Pembuatan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit -
HPMC E-5............................................................................................
3. Pembuatan larutan baku kurkumin.......................................................
a. Pembuatan larutan stok kurkumin.................................................
b. Pembuatan larutan intermediate kurkumin....................................
4. Penetapan panjang gelombang serapan maksimum (λmaks)................
5. Pembuatan kurva baku..........................................................................
6. Pembuatan medium disolusi (cairan lambung buatan tanpa pepsin)....
7. Uji disolusi............................................................................................
8. Penetapan kadar kurkumin dengan spektrofotometri visibel................
9. Validasi metode analisis.......................................................................
G. Analisis Hasil.............................................................................................
14
15
15
16
17
18
22
24
25
25
25
26
27
28
28
28
29
29
29
29
30
30
30
31
31
31
32
xiii
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN..........................................................
A. Isolat Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica C 95).....................
B. Pembuatan Dispersi padat Isolat Ekstrak Rimpang Kunyit – HPMC E-
5.................................................................................................................
C. Pembuatan Serbuk Campuran Fisik Isolat Ekstrak Rimpang Kunyit –
HPMC E-5.................................................................................................
D. Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum (λmaks)..................
E. Pembuatan Kurva Baku.............................................................................
F. Validasi Metode Analisis...........................................................................
1. Akurasi..................................................................................................
2. Presisi....................................................................................................
3. Linieritas...............................................................................................
4. Limit of Detection (LOD)......................................................................
G. Uji Disolusi................................................................................................
H. Hubungan Proporsi Drug load Terhadap Disolusi Kurkumin...................
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN...........................................................
A. Kesimpulan................................................................................................
B. Saran .........................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA.......................................................................................
LAMPIRAN.....................................................................................................
BIOGRAFI PENULIS......................................................................................
34
34
34
36
37
39
42
42
43
44
44
45
47
59
59
59
60
65
100
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel I.Tabel II.
Tabel III.
Tabel IV.
Tabel V.
Tabel VI.
Tabel VII.
Tabel VIII.Tabel IX.Tabel X.
Tabel XI.
Kriteria rentang recovery yang dapat diterima........................Rentang koefisien variasi (KV) yang masih dapatditerima....................................................................................Kriteria keberterimaan yang disarankan untuk mengevaluasilinieritas metode.......................................................................Parameter-parameter analisis yang diperlukan dalam validasimetode......................................................................................Komposisi formula pembuatan dispersi padat ekstrakrimpang kunyit-HPMC E-5......................................................Data pengukuran absorbansi seri larutan baku kurkumin danpersamaan kurva baku..............................................................Kriteria keberterimaan yang disarankan untuk mengevaluasilinieritas metode.......................................................................Data % recovery.......................................................................Hasil koefisien variasi metode.................................................Hasil perhitungan persentase kurkumin terdisolusi dalamdispersi padat dan serbuk campuran fisik ekstrak rimpangkunyit – HPMC E-5.................................................................Data disolusi kurkumin dari dispersi padat isolat ekstrakrimpang kunyit-HPMC E-5 dengan berbagai proporsi drugload..........................................................................................
19
20
21
22
29
40
414343
46
49
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.Gambar 2.Gambar 3.Gambar 4.
Gambar 5.
Gambar 6.
Gambar 7.
Struktur kimia kurkumin..........................................................Proses degradasi kurkumin......................................................Struktur kimia Hidroksipropil Metilselulosa...........................Kurva baku kurkumin kadar kurkumin vsserapan......................................................................................Hubungan waktu terhadap persentase kurkumin terdisolusipada dispersi padat dan serbuk campuran fisik ekstrakrimpang kunyit-HPMC E-5 dengan drug load (a) 2%, (b) 1%dan (c) 0,66%...........................................................................Hubungan persentase kurkumin terdisolusi vs waktu padadispersi padat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5................................................................................................Profil persentase kurkumin terdisolusi.....................................
8911
41
47
5457
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
Lampiran 2
Lampiran 3Lampiran 4Lampiran 5Lampiran 6
Lampiran 7
Lampiran 8
Lampiran 9
Lampiran 10
Lampiran 11
Lampiran 12
Lampiran 13
Lampiran 14
Lampiran 15Lampiran 16
Lampiran 17Lampiran 18
Tabel hasil penimbangan baku kurkumin dan contoh perhitungankadar larutan baku kurkumin..........................................................Tabel Data pengukuran rerapan seri larutan baku kurkumin danpersamaan kurva baku kurkumin....................................................Gambar kurva baku........................................................................Data validasi metode analisis.........................................................Contoh Perhitungan Drug load......................................................Data Penimbangan Serbuk Kunyit dan HPMC E-5 UntukPembuatan Dispersi Padat..............................................................Data Contoh Perhitungan Serbuk Kunyit dan HPMC E-5 yangHarus Ditimbang Untuk Pembuatan Serbuk CampuranFisik................................................................................................Tabel persen kurkumin terdisolusi dan cara perhitungannya padaserbuk dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5......................................................................................................Tabel persen kurkumin terdisolusi pada serbuk campuran fisikisolat ekstrak rimpang kunyit–HPMC E-5.....................................Uji normalitas data disolusi kurkumin dengan drug load0,66%,1% dan 2%........................................................................Data nilai signifikansi disolusi kurkumin pada dispersi padatdan serbuk campuran fisik............................................................Hasil uji normalitas proporsi drug load dan persentase kurkuminterdisolusi dalam waktu 60 menit...................................................Uji korelasi Spearman proporsi drug load dan persentasekurkumin terdisolusi dalam waktu 60 menit..................................Hasil uji regresi linear antara proporsi drug load dengan disolusikurkumin.......................................................................................Gambar spray dryer dan alat uji disolusi.......................................Pernyataan jaminan keaslian bahan kurkumin standar hasilsintesis............................................................................................Certificate of Analysis serbuk kunyit.............................................Hasil scaning panjang gelombang maksimum...............................
65
67687073
74
76
80
84
87
88
89
90
9192
939495
xvii
INTISARI
Rimpang tanaman kunyit mengandung senyawa aktif farmakologis yaitukurkumin yang memiliki keterbatasan dalam hal kelarutannya dalam air.Permasalahan kelarutan kurkumin ini dapat diatasi dengan pembuatan dispersipadat.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental yang bertujuan untukmengetahui pengaruh proporsi drug load terhadap disolusi dispersi padat spraydried isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5. Proporsi drug load yangdigunakan adalah 0,66%, 1% dan 2%.
Uji disolusi yang dilakukan menggunakan alat disolusi tipe paddle padamedium cairan lambung buatan tanpa pepsin pH 1,2. Kadar kurkumin dinyatakansebagai persentase kurkumin yang terdisolusi. Hasil yang didapat diuji statistikmenggunakan uji korelasi Spearman dan analisis regresi linear untuk mengetahuikorelasi dan hubungan antara drug load terhadap disolusi dispersi padat isolatekstrak rimpang kunyit.
Dari hasil uji disolusi diketahui bahwa dispersi padat menghasilkandisolusi yang lebih baik dibandingkan dengan serbuk campuran fisik. Dispersipadat dengan proporsi drug load 0,66% memberikan profil disolusi yang lebihtinggi dibandingkan dengan proporsi drug load 1% dan 2%. Secara statistikterdapat korelasi yang bermakna antara peningkatan proporsi drug load terhadapdisolusi kurkumin, yaitu dengan nilai signifikansi < 0,05.
Kata kunci : kurkumin, isolat ekstrak rimpang kunyit, dispersi padat, spray dried,HPMC E-5, drug load
xviii
ABSTRACT
Curcumin was active constituent derived from turmeric rhizomes whichhas limited solubility in water. The limited of curcumin solubility can be solvedby made it into solid dispersion.
This research was experimental research. The aim of this research is toknow the effect of drug load proportion to dissolution of spray dried soliddispersion of isolate turmeric rhizome extract – HPMC E-5. In this research, soliddispersion and physical mixture were made with proportion 2%, 1% and 0,66%.
Dissolution apparatus type II (paddle) and simulated gastric fluid withoutpepsin as medium used in dissolution test. Concentration of curcumin expressedas percentation of curcumin dissolved. The result were analyzed by usingSpearman correlation and linear regresion analysis to know the correlation andeffect of drug load proportion of solid dispersion isolate turmeric rhizome extractto curcumin dissolution.
The result showed that solid dispersion has better dissolution than physicalmixture. Solid dispersion with drug load 0,66% showed the highest dissolutionprofile of curcumin between the other proportion. Statistically, there wassignificant correlation between drug load increase and curcumin dissolution, withsignificant value < 0,05.
Key words: curcumin, isolate turmeric rhizome extract, solid dispersion, spraydried, HPMC E-5, drug load
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Kunyit (Curcuma domestica Val.) merupakan salah satu tanaman yang
banyak digunakan sebagai obat tradisional di Indonesia. Pada umumnya bagian
tanaman kunyit yang banyak digunakan adalah bagian rimpang. Rimpang kunyit
banyak dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai obat sakit perut, antidiare, obat
peluruh empedu (kolagoga) dan penenang (sedativa) (Rukmana, 1999).
Rimpang tanaman kunyit mengandung senyawa berkhasiat yang
bertanggung jawab terhadap respon biologis yaitu, kurkumin [1,7-bis-(4’-
hidroksi-3’-metoksifenil)-1,6-heptadiena-3,5-dion] (Sharma, Gescher dan
Steward, 2005). Kurkumin banyak digunakan sebagai pewarna alami pada
makanan, obat-obatan, kosmetik dan tekstil (Tonnesen dan Karlsen, 1985).
Kurkumin merupakan komponen terbesar dari kurkuminoid, yaitu sebesar 50–60
% (Kris, 2006) dan kurkumin murni sangat sulit diperoleh langsung dari rimpang
kunyit karena sering kali tercampur dengan dua turunannya, yaitu
desmetoksikurkumin dan bisdesmetoksikurkumin (Donatus, 1994), sehingga
sering kadar total kurkuminoid dihitung sebagai persen kurkumin. Maka dari itu,
beberapa penelitian baik fitokimia maupun farmakologi lebih ditekankan pada
kurkumin (Kris, 2006).
2
Kurkumin telah diketahui banyak memiliki aktivitas farmakologis seperti
antioksidan (Sharma, 1976), antiinflamasi (Srimal dan Dhawan, 1973) dan
antikarsinogenik (Kuttan, Bhanumathy, Nirmala dan George, 1985). Namun
kurkumin memiliki keterbatasan, yaitu tidak stabil dalam larutan (Tonnesen dan
Karlsen, 1985). Stabilitas kurkumin dalam larutan sangat dipengaruhi oleh pH,
pada pH asam kurkumin sangat stabil, sedangkan dalam suasana basa kurkumin
mudah terhidrolisis dan terdegradasi (pada pH 7-10) menjadi asam ferulat dan
feruloilmetana, dimana feruloilmetana akan membentuk produk kondensasinya
berupa aseton dan vanilin, yang ditunjukkan dengan warna larutan yang berwarna
kuning kecoklatan (Tonnesen dan Karlsen, 1985). Stabilitas kurkumin dalam
larutan juga telah diteliti pada pH fisiologis, yaitu pH 7,2 yang menunjukkan
adanya hidrolisis kurkumin menjadi trans-6-(4’-hidroksi-3-metoksifenil)-2,3-
diokso-5-heksenal (Wang, dkk., 1997).
Selain itu, kurkumin memiliki permasalahan dalam hal kelarutannya
yang sangat rendah dalam air (Leung dan Kee, 2009). Kurkumin praktis tidak
larut dalam air baik pada pH asam maupun netral, hal ini membuat
bioavailabilitas kurkumin setelah pemberian oral sangat rendah. Banyak strategi
yang telah dilakukan untuk meningkatkan bioavailabilitas oral kurkumin, yaitu
dengan meningkatkan kelarutan dan laju disolusi kurkumin dalam formulasinya.
Adapun cara peningkatan kelarutan kurkumin yang dapat dilakukan adalah
dengan pembentukan kompleks kurkumin-fosfolipid (Maiti, Mukherjee, Gantait,
Saha, dan Mukherjee, 2007), kompleksasi kurkumin dengan siklodekstrin
3
(Tonnesen, Masson dan Loftsson, 2002), pembentukan nanokristal (Onoue, dkk.,
2010) dan dispersi padat (Paradkar, Ambike, Jadhav, dan Mahadik, 2004). Dalam
penelitian ini akan dilakukan peningkatan kelarutan kurkumin melalui
pembentukan dispersi padat.
Dispersi padat adalah dispersi satu atau lebih bahan aktif dalam matriks
pembawa hidrofilik yang inert pada tingkat molekular sehingga dapat
meningkatkan kelarutan. Dengan pembuatan dispersi padat, partikel obat akan
berada dalam bentuk amorf atau terdistribusi secara halus (fines) sehingga lebih
mudah larut dibandingkan dengan bentuk kristalnya. Pembuatan dispersi padat
dapat dilakukan dengan beberapa metode, antara lain: metode peleburan, metode
penguapan pelarut dan metode peleburan-pelarutan (Chiou dan Riegelman, 1971).
Pembuatan dispersi padat dalam penelitian ini dilakukan dengan menggunakan
metode penguapan pelarut dimana dalam proses ini digunakan spray dryer
sebagai alat untuk memperoleh serbuk kering dan untuk menghasilkan partikel
obat dalam keadaan amorphous. Proses pengeringan ini dilakukan dengan cara
menyemprotkan massa cair (dapat berupa larutan, emulsi atau suspensi) dengan
atau tanpa bahan tambahan pada medium kering yang panas (udara) (Sriningsih,
Kadarsih, dan Sumaryono, 2009).
Hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) merupakan polimer hidrofil,
turunan selulosa yang dapat meningkatkan hidrofilisitas kristal obat dan
mempunyai kemampuan tinggi membentuk dispersi padat dengan beberapa
macam obat yang kelarutannya rendah dalam air (Sonali, Tejal, Vaishali, dan
4
Tejal, 2010). Beberapa penelitian telah melaporkan bahwa HPMC dapat
digunakan sebagai pembawa dalam pembuatan dispersi padat, seperti yang
dilaporkan oleh Dabbagh dan Taghipour (2007) bahwa HPMC dapat digunakan
sebagai bahan pembawa untuk meningkatkan karakteristik fisikokimia ibuprofen
sedangkan Koester, Mayorga, dan Bassani (2003) menggunakan HPMC untuk
meningkatkan laju disolusi carbamazine.
Pada penelitian ini digunakan HPMC E-5 yang memiliki viskositas 5 cps
sebagai bahan pembawa untuk pembuatan dispersi padat isolat ekstrak rimpang
kunyit. HPMC dengan viskositas rendah memiliki kelarutan yang lebih tinggi
dibandingkan dengan HPMC yang memiliki viskositas yang tinggi (Bee dan
Rahman, 2010). Sifat hidrofilik HPMC inilah yang dimanfaatkan untuk
meningkatkan kelarutan kurkumin yang rendah dalam air.
Dalam penelitian ini, akan diteliti seberapa besar pengaruh proporsi drug
load terhadap disolusi kurkumin pada dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit
- HPMC E-5 yang dibandingkan dengan serbuk campuran fisik isolat ekstrak
rimpang kunyit – HPMC E-5. Waard, Hinrichs, Visser, Bologna, dan Frijlink
(2008) melaporkan bahwa adanya peningkatan drug load maka akan menurunkan
laju disolusi, sedangkan dengan adanya penurunan drug load maka akan
meningkatkan laju disolusi. Pengaruh proporsi drug load terhadap disolusi
kurkumin pada dispersi padat dan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang
kunyit – HPMC E-5 diuji melalui statistik dengan uji korelasi dan analisis regresi
linear.
5
1. Perumusan masalah
Berdasarkan latar belakang di atas maka dapat dirumuskan permasalahan
yaitu bagaimana pengaruh proporsi drug load terhadap disolusi dispersi padat
ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5?
2. Keaslian penelitian
Sejauh penelusuran dan pengetahuan penulis, penelitian mengenai
Pengaruh Proporsi Drug load Terhadap Disolusi Dispersi Padat Spray dried
Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica C 95)– HPMC E-5 belum pernah
dilakukan di lingkungan penelitian Universitas Sanata Dharma maupun di luar
lingkungan penelitian Universitas Sanata Dharma. Adapun penelitian tentang
pengaruh drug load terhadap disolusi dispersi padat kurkumin yang pernah
dilakukan antara lain:
a. Karakterisasi Dispersi Padat Kurkumin - PVP yang Diperoleh Melalui Spray
drying (Paradkar, dkk., 2004).
b. Efek Interaksi Antara Obat - Pembawa Terhadap Disolusi Tablet Dispersi
Padat (Srinarong, Kouwen, Visser, Hinrichs, dan Frijlink, 2009).
Namun dari penelitian-penelitian yang sudah dilakukan, belum pernah yang
menggunakan bahan pembawa HPMC E-5 untuk pembuatan dispersi padat isolat
ekstrak rimpang kunyit (Curcuma domestica C 95).
6
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat menambah
informasi mengenai hubungan antara proporsi drug load dengan disolusi
kurkumin.
b. Manfaat metodologis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat
menambah informasi mengenai metode peningkatan kelarutan obat-obatan yang
lipofilik melalui pembentukan dispersi padat dengan metode spray drying.
c. Manfaat praktis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan
alternatif formulasi bagi obat-obat yang bersifat lipofil.
B. Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh proporsi drug
load terhadap disolusi dispersi padat spray dried ekstrak rimpang kunyit – HPMC
E-5.
7
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica Rhizhome)
Ekstrak adalah sediaan sari pekat tumbuh-tumbuhan atau hewan yang
diperoleh dengan cara melepaskan zat aktif dari masing-masing bahan obat,
menggunakan pelarut yang cocok, diuapkan semua atau hampir semua dari
pelarutnya dan sisa endapan atau serbuk diatur untuk ditetapkan standarnya
(Ansel, 1985).
Rimpang kunyit mengandung zat warna kurkuminoid, yaitu suatu
senyawa diarylheptanoid 3 - 4 % yang terdiri dari kurkumin, dihidrokurkumin,
desmetoksikurkumin dan bidesmetoksikurkumin. Minyak atsiri 2 – 5 % terdiri
dari seskuiterpen dan turunan fenilpropana yang meliputi turmeron, ar-turmeron,
α- dan β-turmeron, curlon, curcumol, atlanton, turmerol, β-bisabolen, β-
sesquiphellandren, zingiberen, arcurcumene, dan humulen. Selain mengandung
minyak atsiri, rimpang kunyit juga mengandung arabinosa, fruktosa, glukosa, pati,
tanin dan damar serta mineral, yaitu Mg, Mn, Fe, Cu, Ca, Na, K, PB, Co, Al, dan
Bi (Sudarsono, 1996).
B. Kurkumin
Kurkumin [1,7-bis-(4-hidroksi-3-metoksifenil)-1,6-heptadiena-3,5-dione]
merupakan senyawa polifenol hidrofobik alami yang terkandung dalam rimpang
8
tanaman kunyit (Curcuma longa L.) (Onoue, dkk., 2010). Kurkumin telah
diketahui memiliki berbagai macam aktivitas farmakologi seperti antiinflamasi
(Srimal dan Dhawan, 1973), antikarsinogenik (Kuttan, dkk., 1985) dan
antioksidan (Sharma, 1976).
Gambar 1. Struktur kimia kurkumin
Tanaman kunyit memiliki senyawa berkhasiat obat yang disebut
kurkuminoid. Kurkuminoid terdiri atas 50-60 % kurkumin, desmetoksikurkumin,
dan bisdesmetoksikurkumin (Kris, 2006). Kurkumin merupakan komponen
terbesar dari kurkuminoid dan kurkumin murni sangat sulit diperoleh langsung
dari rimpang kunyit karena sering kali tercampur dengan dua turunannya, yaitu
desmetoksikurkumin dan bisdesmetoksikurkumin (Donatus, 1994), sehingga
sering kadar total kurkuminoid dihitung sebagai % kurkumin. Karena alasan
tersebut beberapa penelitian baik fitokimia maupun farmakologi lebih ditekankan
pada kurkumin (Kris, 2006).
Kurkumin berupa kristal berwarna kuning jingga terang dengan berat
molekul 368,37 g/mol. Kurkumin memiliki rumus molekul C21H20O6 dan titik
lebur 183°C (Aggarwal, dkk., 2006). Larutan kurkumin memiliki warna yang
tidak konstan hal ini tergantung degradasi atau pelarutnya. Pada larutan dengan
pH asam larutan kurkumin berwarna kuning, tetapi akan berubah warna menjadi
merah kecoklatan atau merah tua dalam larutan basa (Tonnesen dan Karlsen,
9
1985). Kurkumin praktis tidak larut dalam air baik pada pH asam maupun netral
dan eter, akan tetapi larut dalam pelarut organik seperti etanol, dimetilsulfoksida
dan aseton (Sharma dkk, 2005). Kurkumin stabil pada temperatur tinggi
(Stankovic, 2004) dan dalam larutan dengan pH asam, tetapi tidak stabil dalam
kondisi basa dan kondisi terang (adanya cahaya) (Tonnesen dan Karlsen, 1985).
Stabilitas larutan kurkumin sangat dipengaruhi oleh pH. Pada suasana
asam kurkumin relatif stabil, tetapi akan secara cepat terdegradasi pada suasana
basa. Menurut Tonnesen dan Karlsen (1985), kurkumin mengalami degradasi
pada pH 7-10 menjadi asam ferulat dan feruloilmetana. Feruloilmetana secara
cepat membentuk produk kondensasinya yang ditunjukkan dengan warna larutan
yang berwarna kuning sampai kuning kecoklatan. Hidrolisis feruloilmetana
menghasilkan senyawa aseton dan vanilin yang jumlahnya meningkat terus
seiring dengan lamanya waktu inkubasi.
Gambar 2. Proses degradasi kurkumin (Tonnesen dan Karlsen, 1985)
10
Studi lain mengenai instabilitas kurkumin juga pernah dilakukan oleh
Wang dkk. (1997), yang menguji kestabilan kurkumin pada pH fisiologis (pH
7,2). Hasil studi ini menunjukkan bahwa 90% kurkumin terdekomposisi dalam
waktu 30 menit. Trans-6-(4-hidroksi-3-metoksifenil)-2,4-dioxo-5-heksenal
diprediksi sebagai produk degradasi terbanyak dan vanilin, asam ferulat,
feruloilmetan diidentifikasi sebagai produk degradasi minor.
Kurkumin memiliki absorbsi maksimum (λmaks) dalam metanol pada
430 nm dengan range hukum Lambert Beer’s berkisar antara 0,5 hingga 5 µg/mL
bila diukur dengan menggunakan spektrofotometer (Prasad, 1997). Dalam aseton,
kurkumin mengabsorpsi pada panjang gelombang 415 hingga 420 nm (Agarwal,
dkk., 2006).
C. HPMC E-5
Hidroksipropil metilselulosa (HPMC) merupakan selulosa eter nonionik
yang berupa serbuk berwarna putih atau putih kekuningan. Nama lain dari HPMC
adalah hypromellose, methocel, methylcellulose propylene glycol ether. HPMC
biasa digunakan sebagai bahan pelapis (coating agent), agen pendispersi, agen
pengelmulsi, penstabil emulsi, foaming-agent, modified-release agent, thickening
agent, bahan pengikat pada pembuatan tablet, peningkat laju disolusi (dissolution
enhancer) (Bee dan Rahman, 2010), sehingga dalam penelitian ini digunakan
HPMC sebagai pembawa untuk meningkatkan kelarutan.
11
Gambar 3. Struktur kimia Hidroksipropil Metilselulosa
HPMC berupa serbuk yang tidak berbau dan tidak berasa. HPMC larut
dalam air dingin, asam asetat glasial, etanol, metanol dan propilen glikol, kurang
larut dalam aseton dan praktis tidak larut dalam air panas, etilen glikol dan toluen
(Anonim, 2010).
Larutan HPMC berwarna transparan, namun ketika dipanaskan pada
temperatur tertentu larutan HPMC akan menjadi keruh dan membentuk larutan
yang viskos seperti gel. Namun akan kembali menjadi larutan yang jernih kembali
setelah didinginkan. Kelarutan HPMC bervariasi bergantung pada viskositasnya.
HPMC dengan viskositas kecil maka memiliki kelarutan yang lebih tinggi (Bee
dan Rahman, 2010).
D. Dispersi Padat
Dispersi padat adalah campuran yang homogen dari satu atau lebih bahan
aktif dalam matriks hidrofilik dengan tujuan untuk meningkatkan bioavailabilitas
oral dari bahan obat yang sukar larut (Serajudin, 1999). Definisi lain menurut
12
Chiou dan Riegelman (1971) bahwa dispersi padat adalah dispersi satu atau lebih
bahan aktif dalam pembawa yang inert atau matriks pada keadaan padat.
Sistem dispersi padat dapat dibuat dengan cara:
1. Metode peleburan (fusion method)
Metode peleburan kadang dikenal sebagai metode pelelehan (melt
method) (Lewis, 2009). Keuntungan utama dari metode ini adalah sederhana dan
ekonomis. Dispersi padat dibuat dengan cara memanaskan antara campuran fisik
obat dan pembawa yang larut air secara langsung hingga keduanya meleleh dan
bercampur jadi satu. Campuran yang meleleh tersebut didinginkan di dalam ice
bath dan akan segera membeku. Padatan yang telah terbentuk tersebut
dihancurkan, diserbuk dan diayak (Sharma, 2009).
2. Metode pelarutan (solvent method)
Pada metode pelarutan (solvent method), dispersi padat dibuat dengan
cara melarutkan campuran fisik dua komponen zat padat dalam pelarut yang biasa
digunakan umumnya pelarut organik, lalu diikuti penguapan pelarut (Sharma,
2009). Pencampuran pada tingkat molekuler lebih disukai, karena akan
menghasilkan sifat-sifat disolusi yang optimal (Lewis, 2009).
Dengan menggunakan metode pelarutan, formulator menghadapi dua
tantangan. Tantangan pertama, yaitu kesulitan dalam hal pencampuran antara obat
dan matriks dalam satu larutan, dimana kedua bahan yang dicampur tersebut
memiliki polaritas yang berbeda secara signifikan. Untuk memperkecil ukuran
partikel obat dalam dispersi padat, obat dan pembawa harus terdispersi dalam
13
pelarut sebagai partikel yang sehalus mungkin (Lewis, 2009), sedangkan
tantangan kedua adalah mencegah pemisahan fase misalnya kristalisasi yang
terjadi pada obat atau matriks, selama penguapan pelarut(Lewis, 2009).
Untuk mengeringkan larutan, dapat digunakan spray drying. Larutan
didispersikan menjadi partikel yang sangat halus dengan bantuan udara panas.
Karena ukuran partikel yang terbentuk sangat halus maka akan mempercepat
penguapan pelarut dan dispersi padat dapat terbentuk dalam beberapa detik. Spray
drying biasanya menghasilkan obat dalam keadaan amorphous, bagaimanapun
juga kadang-kadang dalam prosesnya sistem ini dapat menghasilkan obat dalam
bentuk kristal (Lewis, 2009).
Keuntungan metode pelarutan ini adalah dekomposisi obat atau bahan
pembawa oleh adanya panas dapat dicegah karena pada metode ini hanya
dibutuhkan temperatur rendah untuk menguapkan pelarut organik, sedangkan
kerugian dari metode pelarutan adalah persiapannya membutuhkan biaya yang
tinggi, kesulitan dalam menghilangkan pelarut cair dengan sempurna, pemilihan
pelarut yang mudah menguap yang lazim digunakan dan kesulitan dalam
menghasilkan bentuk kristal (Sharma, 2009).
3. Metode gabungan pelelehan dan pelarutan (solvent-fusion method)
Cara pembuatan sistem dispersi padat dengan metode gabungan ini
adalah dengan melarutkan bahan obat terlebih dahulu dalam pelarut yang cocok,
kemudian dicampur dengan hasil pelelehan pembawa, tanpa menguapkan
pelarutnya.
14
E. Spray drying
Spray drying merupakan aplikasi dari metode penguapan pelarut (solvent
evaporation method) dalam pembuatan dispersi padat. Spray drying merupakan
teknik umum yang digunakan dibidang farmasi untuk menghasilkan serbuk kering
yang diperoleh dari fase cair (Guterres, dkk, 2009). Proses pengeringan ini
dilakukan dengan cara menyemprotkan massa cair (dapat berupa larutan, emulsi
atau suspensi) dengan atau tanpa bahan tambahan pada medium kering yang
panas (udara). Melalui kontak panas dari aliran udara kering panas, cairan yang
telah diatomisasi dengan menggunakan roda berputar atau nozzle akan menguap
dengan cepat dan menghasilkan massa berupa padatan atau serbuk. Walaupun
proses penguapan memerlukan suhu yang tinggi, kualitas produk yang dihasilkan
tidak terpengaruh karena proses penguapan berlangsung sangat cepat (Sriningsih,
Kadarsih dan Sumaryono, 2004).
Teknik pengeringan dengan spray dryer banyak digunakan untuk
menggranulasi serta digunakan untuk mengubah sifat-sifat biofarmasetik, seperti
laju disolusi obat-obatan yang kelarutannya rendah dalam air (Shaw, 1997).
F. Uji Disolusi
1. Pengertian disolusi
Disolusi didefinisikan sebagai proses melarutnya suatu zat kimia atau
senyawa obat dari sediaan padat ke dalam suatu medium tertentu (Martin, 1990).
Laju disolusi suatu obat adalah kecepatan perubahan dari bentuk padat menjadi
15
terlarut dalam medianya setiap waktu tertentu. Jadi disolusi menggambarkan
kecepatan obat larut dalam media disolusi (Banakar, 1992).
2. Uji disolusi
Uji ini dimaksudkan untuk menentukan kesesuaian dengan persyaratan
disolusi yang tertera pada masing-masing monografi untuk sediaan tablet dan
kapsul, kecuali pada etiket dinyatakan bahwa tablet harus dikunyah. Persyaratan
disolusi tidak berlaku untuk kapsul gelatin lunak kecuali dinyatakan dalam
masing-masing monografi. Jenis alat uji disolusi yang dipakai ada dua tipe, yaitu
tipe dayung dan keranjang (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan
RI, 1995).
Uji disolusi bertujuan untuk memperkirakan waktu yang dibutuhkan oleh
sejumlah obat dalam tablet yang larut dalam suatu medium di bawah kondisi
tertentu sebagai uji in vitro. Uji disolusi ini dimaksudkan sebagai langkah awal
untuk mengevaluasi ketersediaan hayati bahan obat (Abdou, Hanna, dan
Muhammad, 2000).
3. Faktor-faktor yang mempengaruhi kecepatan disolusi
a. Ukuran partikel obat. Luas permukaan obat dapat ditingkatkan
dengan cara mengurangi ukuran partikel. Disolusi terjadi pada permukaan solut
(obat), sehingga semakin besar luas permukaan maka laju disolusi obat akan
semakin cepat (Shargel, Wu-Pong dan Yu, 2005).
b. Bentuk kristal dan amorf. Obat yang susunan molekulnya
berbentuk amorf biasanya lebih mudah larut dari pada bentuk kristalnya sehingga
16
lebih cepat diabsorpsi. Hal ini karena bentuk amorf terdiri dari molekul-molekul
yang tersusun secara tidak beraturan sehingga ikatan antar molekulnya mudah
diputus dengan adanya desakan dari molekul lain, misalnya molekul air,
sedangkan obat dalam bentuk kristal lebih stabil karena molekul-molekulnya
tersusun beraturan. Obat dengan bentuk amorf karena susunannya tidak beraturan
maka menyebabkan sifatnya menjadi metastabil sehingga mudah berinteraksi
untuk mencapai kondisi stabilnya. Maka dari itu selama penyimpanan, obat lebih
baik disimpan dalam bentuk kristal, lalu saat diformulasi menjadi bentuk sediaan
baru diubah menjadi bentuk amorf supaya kelarutannya tinggi sehingga akan
cepat terabsorpsi dan bioavailabilitas meningkat (Aulton, 2002).
c. Faktor uji disolusi in vitro. Suhu medium dalam percobaan
dikendalikan pada keadaan konstan, umumnya dilakukan pada suhu 37°C, sesuai
dengan suhu tubuh manusia. Kenaikan suhu akan menaikkan energi kinetik
molekul, sehingga akan meningkatkan kecepatan disolusi (Shargel, Wu-Pong dan
Yu, 2005). Kecepatan pengadukan akan mempengaruhi kecepatan pelarutan obat,
semakin cepat pengadukan maka gerakan medium akan semakin cepat sehingga
dapat meningkatkan kecepatan disolusi.
4. Cara untuk mengungkapkan hasil uji disolusi
a. Metode klasik. Metode ini menunjukkan jumlah zat aktif yang
terlarut pada waktu t, yang kemudian dikenal dengan T20, T50, T90 dan
sebagainya. Metode ini hanya menyebutkan satu titik saja, sehingga proses yang
17
terjadi di luar (sebelum dan sesudah) titik tersebut tidak diketahui. Titik tersebut
menyatakan jumlah zat aktif yang terlarut pada waktu tertentu (Khan, 1975).
b. Metode Khan. Metode ini dikenal dengan konsep dissolution
efficiency (DE). DE merupakan parameter untuk menggambarkan kemampuan
pelepasan obat dari suatu medium pada rentang waktu tertentu yang diasumsikan
sebagai berikut:
DE = x 100
(Banakkar, 1992).
c. Jumlah zat aktif yang melarut dalam media pada waktu tertentu.
Misalnya t30%, artinya dalam waktu 30 menit, zat aktif yang terlarut dalam media
adalah x % atau x mg/ml (Shargel, Wu-Pong, Yu, 2005).
G. Spektrofotometri Visibel
Spektrofotometri visibel merupakan analisis spektroskopik yang
menggunakan sumber radiasi elektromagnetik sinar tampak (380-780 nm) dengan
menggunakan instrumen spektrofotometer. Radiasi elektromagnetik pada rentang
panjang gelombang 380-780 nm merupakan radiasi yang dapat dilihat indera
penglihatan manusia sehingga disebut cahaya tampak (visible) (Mulja dan
Suharman, 1995).
Prinsip kerja spektrofotometri adalah berdasarkan atas interaksi antara
radiasi elektromagnetik dengan materi. Materi dapat berupa atom, ion atau
molekul, sedangkan radiasi elektromagnetik merupakan salah satu jenis energi
18
yang ditransmisikan dalam ruang dengan kecepatan tinggi. Interaksi antara
molekul yang mempunyai gugus kromofor dan radiasi elektromagnetik pada
daerah ultraviolet dan sinar tampak (200-800 nm) akan menghasilkan spektra
serapan elektronik. Spektra serapan ini dapat digunakan untuk analisis kuantitatif
karena jumlah radiasi elektromagnetik yang diserap ada hubungannya dengan
jumlah molekul penyerap (Skoog, West dan Holler, 1994).
Pada analisis kuantitatif, pengukuran serapan dilakukan pada panjang
gelombang maksimum. Panjang gelombang maksimum merupakan panjang
gelombag dimana suatu senyawa memberikan absorbansi maksimum. Pada
panjang gelombang maksimum, perubahan absorbansi untuk tiap satuan
konsentrasi paling besar sehingga akan didapat kepekaan analisis yang maksimal
(Mulja dan Suharman, 1995).
Sebagai pelarut spektrofotometri dapat digunakan semua cairan yang
sesuai dapat diperoleh dalam bentuk murni yang tidak atau hanya sedikit
menunjukkan absorbsi sendiri serta dapat melarutkan dengan mudah senyawa
yang hendak dianalisis. Yang terutama digunakan adalah air, etanol, metanol,
asetonitril, sikloheksana dan heksana (Roth dan Baschke,1994).
H. Validasi Metode Analisis
Validasi metode analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap
parameter tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk membuktikan
bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya (Harmita,
19
2004). Metode analisis instrumen merupakan metode yang terpilih dan memadai
untuk mengantisipasi persoalan analisis yaitu sangat kecilnya kadar senyawa yang
akan dianalisis dan kompleksnya matriks sampel yang akan dianalisis (Mulja dan
Suharman, 1995). Maka dari itu diperlukan parameter-parameter sebagai pedoman
kesahihan metode analisis, antara lain:
1. Kecermatan (Accuracy)
Akurasi atau kecermatan metode analisis adalah ukuran yang
menunjukkan derajat kedekatan hasil analisis dengan kadar analit yang
sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery)
analit yang ditambahkan. Kriteria kecermatan sangat tergantung kepada
konsentrasi analit dalam matriks sampel dan pada keseksamaan metode (RSD)
(Harmita, 2004).
Tabel I.Kriteria rentang recovery yang dapat diterima (Anonim, 2004)% kandungan zat aktif Rata-rata recovery yang dapat diterima
≥ 10≥ 1
0,1 – 1< 0,1
98 – 102%90 – 110%80 – 120%75 – 125%
Akurasi untuk kadar obat yang besar adalah 95-105%, sedangkan untuk
bioanalisis rentang recovery yang masih dapat diterima, yaitu 80-120% (Mulja
dan Hanwar, 2003).
2. Keseksamaan (Precision)
Keseksamaan atau presisi adalah ukuran yang menunjukkan derajat
kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual
dari rata-rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel-sampel yang
20
diambil dari campuran homogen. Presisi biasanya dinyatakan dalam koefisien
variasi (KV). Suatu metode dapat dinyatakan memiliki presisi yang baik apabila
memiliki KV < 2 % tetapi kriteria ini fleksibel tergantung dari kondisi analit yang
diperiksa, jumlah sampel dan kondisi laboratorium (Harmita, 2004).
Tabel II. Rentang koefisien variasi (KV) yang masih dapat diterima(Anonim, 2004)
Analit pada matrik sampel KV (%)≥ 10% ≤ 2
1,0 – 10% ≤ 50,1 – 1,0% ≤ 10
< 0,1% ≤ 20
3. Selektivitas (Spesifisitas)
Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang
hanya mengukur zat tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya
komponen lain yang mungkin ada dalam matriks sampel.
Selektivitas metode ditentukan dengan cara membandingkan hasil
analisis sampel yang mengandung cemaran, hasil urai, senyawa sejenis, senyawa
asing lainnya atau pembawa plasebo dengan hasil analisis sampel tanpa
penambahan bahan-bahan tadi. Penyimpangan hasil jika ada merupakan selisih
dari hasil uji keduanya (Harmita, 2004).
4. Linearitas dan rentang
Linearitas merupakan kemampuan suatu metode (pada rentang tertentu)
untuk mendapatkan hasil uji yang secara langsung proporsional dengan
konsentrasi (jumlah) analit di dalam sampel sehingga memberikan nilai koefisien
korelasi yang lebih besar daripada nilai koefisien korelasi pada tabel statistik.
21
Rentang adalah jarak antara level terbawah dan teratas dari metode analisis yang
telah dipakai untuk mendapatkan presisi, linearitas dan akurasi yang bisa diterima
(Mulja dan Hanwar, 2003).
Tabel III. Kriteria keberterimaan yang disarankan untuk mengevaluasilinearitas metode (Rohman, 2009)
Uji Level* Kisaran** Kriteria keberterimaanPengujian 5 50% - 150% r ≥ 0,999; intersep –y ≤ 2,0%Disolusi 5-8 10% – 150% r ≥ 0,99; intersep –y ≤ 5,0%Pengotor 5 LOQ – 2% r ≥ 0,98
* level disini menunjukkan level konsentrasi yang berbeda, kalau 5 level berartimerujuk pada 5 konsentrasi yang berbeda
** kisaran terhadap target konsentrasi
5. LOD (Limit of Detection) dan LOQ (Limit of Quantitation)
LOD adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi
yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan dengan blangko. LOQ
adalah kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria
akurasi dan presisi. LOD dan LOQ dapat dihitung secara statistik melalui garis
regresi linier dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai b
pada persamaan garis regresi linier y = a + bx, sedangkan simpangan baku
blangko sama dengan simpangan residual (Sy / x). LOD dapat dihitung
menggunakan rumus LOD = sedangkan LOQ = (Harmita, 2004).
Parameter analitik yang diperlukan untuk validasi dapat bervariasi
bergantung pada tipe prosedur analitik. The United States Pharmacopeia 30 The
National Formulary 25 (2007) membedakan metode analisis menjadi empat
kategori dan masing-masing kategori memiliki persyaratan parameter validasi
yang berbeda-beda, yaitu:
22
a. Kategori I, merupakan prosedur analisis kuantitatif untuk menentukan
kadar komponen utama bahan obat atau zat aktif (termasuk bahan
pengawet) dalam sediaan farmasi.
b. Kategori II, merupakan prosedur analisis untuk menganalisis senyawa
pengotor atau produk hasil degradasi yang ada dalam sediaan farmasi.
c. Kategori III, merupakan prosedur analisis untuk menentukan karakteristik
penampilan suatu sediaan farmasi seperti kecepatan disolusi dan kecepatan
pelepasan obat.
d. Kategori IV, mencakup tes identifikasi.
Tabel IV. Parameter-parameter analisis yang diperlukan dalam validasimetode (Anonim, 2007)
Kategori IIParameteranalisis
Kategori IKuantitatif Batas tes
KategoriIII
KategoriIV
Akurasi Ya Ya * * TidakPresisi Ya Ya Tidak Ya TidakSpesifitas Ya Ya Ya * YaLOD Tidak Tidak Ya * TidakLOQ Tidak Ya Tidak * TidakLinieritas Ya Ya Tidak * TidakRange Ya Ya * * Tidak
*= mungkin diperlukan, tergantung pada sifat spesifik tes
I. Landasan Teori
Kunyit merupakan tanaman obat tradisonal Indonesia yang kaya akan
manfaat. Bagian tanaman kunyit yang banyak dimanfaatkan dalam pengobatan
adalah rimpangnya. Rimpang kunyit mengandung senyawa berkhasiat aktif yaitu
kurkuminoid.
23
Kurkuminoid mengandung tiga turunannya, yaitu kurkumin,
desmetoksikurkumin dan bidesmetoksikurkumin. Kurkumin merupakan
komponen terbesar dari kurkuminoid sehingga kadar total kurkuminoid sering
dihitung sebagai % kurkumin.
Kurkumin memiliki permasalahan dalam hal kelarutannya. Kurkumin
tidak larut dalam air baik pada pH asam maupun netral serta kestabilannya sangat
dipengaruhi oleh pH lingkungan dan paparan cahaya. Hal ini dapat membuat
efektivitas terapetik kurkumin menjadi berkurang apabila diformulasikan dalam
sediaan cair.
Banyak strategi yang telah dilakukan untuk meningkatkan kelarutan
kurkumin diantaranya adalah derivatisasi struktur kimia kurkumin, kompleksasi
atau interaksi dengan makromolekul seperti gelatin, polisakarida, protein dan
siklodekstrin. Peningkatan kelarutan kurkumin juga dapat dilakukan melalui
pembentukan dispersi padat sehingga partikel kurkumin terdispersi dalam ukuran
molekular yang pada akhirnya akan meningkatkan kelarutan dan laju disolusinya.
Dispersi padat dapat dibuat dengan menggunakan metode spray drying untuk
menghilangkan pelarut yang ada secara cepat dan membentuk partikel dalam
keadaan amorf sehingga kelarutannya lebih tinggi.
HPMC E-5 merupakan polimer turunan selulosa yang memiliki sifat
mudah larut dalam air, sehingga dapat meningkatkan hidrofilisitas obat-obat yang
kelarutannya rendah dalam air. Dalam penelitian ini dilakukan peningkatan
24
hidrofilisitas senyawa lipofil, yaitu kurkumin dengan pembuatan dispersi padat
isolat ekstrak rimpang kunyit dengan bahan pembawa HPMC E-5.
Drug load merupakan jumlah kurkumin yang terkandung dalam
keseluruhan total kurkumin dan pembawa. Semakin tinggi nilai drug load
menunjukkan bahwa semakin banyak obat yang terkandung dalam dispersi padat
sedangkan jumlah pembawa yang ada semakin sedikit sehingga disolusi obat
menjadi lebih rendah.
Untuk melihat pengaruh proporsi drug load terhadap laju disolusi dispersi
padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5 dianalisis melalui uji korelasi
dan analisis regresi linear.
J. Hipotesis
Proporsi drug load mempengaruhi disolusi kurkumin, dimana semakin
besar proporsi drug load diperkirakan semakin lambat disolusi kurkumin.
25
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis penelitian yang dilakukan termasuk dalam jenis penelitian
eksperimental karena dalam penelitian ini subyek uji diberi perlakuan, yaitu
dengan pembentukan dispersi padat ekstrak rimpang kunyit.
B. Variabel Penelitian
1. Variabel bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah proporsi drug load pada
dispersi padat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5, yaitu 2%, 1% dan 0,66%.
2. Variabel tergantung
Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah persentase kurkumin
yang terdisolusi.
3. Variabel pengacau terkendali
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini, yaitu:
a. Paparan cahaya dikendalikan dengan menggunakan wadah terlindung cahaya
(ditutup alumunium foil).
b. Kelembaban saat penyimpanan dikendalikan dengan penyimpanan di
desikator yang diberi silika gel sebagai penyerap lembab.
4. Variabel pengacau tidak terkendali
26
Variabel pengacau tidak terkendali dalam penelitian ini adalah
kelembaban ruangan.
C. Definisi Operasional
1. Kurkumin adalah senyawa polifenol hidrofobik alami yang terkandung dalam
rimpang tanaman kunyit (Curcuma domestica) dengan kandungan kurkumin
sebesar 60% dari total kurkuminoid 97,20%.
2. Isolat ekstrak rimpang kunyit adalah serbuk yang diperoleh dari hasil
ekstraksi kering rimpang tanaman kunyit (Curcuma domestica Rhizome)
dengan kandungan kurkuminoid sebesar 97,20%.
3. Dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5 adalah dispersi
isolat ekstrak rimpang kunyit dalam HPMC E-5 1%, 2% dan 4% yang dibuat
dengan metode spray drying.
4. Spray drying adalah proses penghilangan pelarut dengan cara
menyemprotkan campuran isolat ekstrak rimpang kunyit - larutan HPMC E-5
dengan konsentrasi drug load 0,66%, 1%, dan 2% pada medium kering yang
panas (udara) sehingga massa cair berubah menjadi partikel padat yang
ukuran dan bentuknya sama.
5. HPMC E-5 adalah bahan pembawa yang berupa serbuk putih, tidak berbau,
larut dalam etanol 70%.
27
6. Drug load adalah kurkumin yang terkandung dalam keseluruhan total antara
pembawa dan kurkumin. Drug load yang digunakan dalam penelitian ini
adalah 2%, 1% dan 0,66%.
7. Uji disolusi adalah uji yang dilakukan menggunakan alat disolusi tipe paddle
dengan medium cairan lambung buatan tanpa pepsin (pH 1,2) sebanyak 900
ml, pada suhu 37 ± 0,5°C, kecepatan putaran paddle 50 ± 1 rpm, untuk
mengetahui jumlah kurkumin terlarut pada medium dalam rentang waktu
tertentu.
8. Waktu pengambilan cuplikan pada menit ke 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120,
150 dan 180 dengan jumlah cuplikan yang diambil sebanyak 5 mL.
9. Kadar kurkumin dinyatakan sebagai persentase kurkumin yang terdisolusi.
D. Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Spray dryer
(LabPlant – London), spektrofotometer UV-VIS (Perkin-Elmer Lambda 20),
dissolution tester (Sotax), neraca analitik (OHAUS PAJ1003 - USA, Sartorius BP
221S - Germany), micropipete (Socorex, Propette), magnetic strirer ( Labinco
BV–Netherlands) , pH indikator universal (Merck), alat-alat gelas (Pyrex-
Germany), desikator, mortir, dan stamper.
28
E. Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah serbuk baku
kurkumin hasil sintesis (pemberian ekslusif dari Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S.,
Apt.), serbuk isolat ekstrak rimpang kunyit (Curcumae domestica C 95) yang
mengandung kadar kurkuminoid di atas 95% (PT. Phytochemindo Reksa -
Jakarta), metanol p.a (Merck-Germany), Methocel E5 Premium LV
Hydroxylpropyl Methylcelulose (Colorcon Asia Pacific Pvt. Ltd - Singapore),
akuades (PT. Brataco - Yogyakarta), etanol teknis 70% (PT. Brataco - Bekasi),
kapsul cangkang keras gelatin No.00 (PT. Brataco Chemika).
F. Tata Cara Penelitian
1. Pembuatan dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5
Dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5 dibuat dengan
menimbang serbuk isolat ekstrak rimpang kunyit yang setara dengan 40 mg
kurkumin kemudian dilarutkan dalam 250 mL etanol 70%. Campuran ini
kemudian ditambahkan ke dalam HPMC E-5 konsentrasi 2%, 4% dan 6% dalam
pelarut etanol dan diaduk dengan menggunakan magnetic stirer hingga homogen.
Larutan kurkumin - HPMC E-5 dihilangkan pelarutnya dengan menggunakan
spray dryer dengan kondisi pengoperasian: suhu “inlet”, 110°C; suhu “outlet”, 70
± 2°C; pump speed, 4 ml/menit, tekanan pompa, 2,5 mbar; ukuran “nozzle”, 1
mm. Serbuk dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5 yang
diperoleh ditimbang sebanyak 190 mg kemudian dimasukkan dalam cangkang
29
kapsul keras ukuran 00. Proses ini diusahakan dilakukan dalam ruangan dengan
RH 50 dan terlindung dari cahaya.
Tabel V. Komposisi formula pembuatan dispersi padat isolat ekstrakrimpang kunyit-HPMC E-5
HPMC E-5 (gram) Kurkumin dalam etanol 125 mL(mg)
Drug load (%)
2 40 24 40 16 40 0,66
2. Pembuatan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit -
HPMC E-5
Serbuk campuran fisik dibuat dengan cara menimbang serbuk isolat
ekstrak rimpang kunyit dan HPMC E-5 yang sebelumnya telah di ayak dengan
ayakan No. mesh 60. Jumlah serbuk isolat ekstrak rimpang kunyit dan HPMC E-5
yang dicampurkan ditimbang sesuai dengan jumlah dispersi padat yang diperoleh.
Serbuk isolat ekstrak rimpang kunyit dengan HPMC E-5 dicampur hingga
homogen dalam mortir. Serbuk campuran fisik kemudian dimasukkan ke dalam
kapsul cangkang keras No.00.
3. Pembuatan larutan baku kurkumin
a. Pembuatan larutan stok kurkumin. Sebanyak 10,0 mg serbuk
kurkumin ditimbang lebih kurang seksama, dimasukkan ke dalam labu ukur 25,0
ml dan diencerkan dengan metanol p.a hingga tanda dan simpan dalam wadah
terlindung cahaya.
b. Pembuatan larutan intermediate kurkumin. Sebanyak 1,0 ml
larutan stok kurkumin diambil, dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 ml dan
30
diencerkan dengan metanol p.a hingga tanda dan simpan dalam wadah terlindung
cahaya.
4. Penentuan panjang gelombang serapan maksimum (λmaks)
Larutan intermediate kurkumin diambil sebanyak 0,4 ml, 0,8 ml, 1,2 ml
dan masing-masing diencerkan dengan metanol p.a hingga volume tepat 10,0 ml.
Larutan ini diukur absorbansinya pada panjang gelombang antara 400 – 600 nm,
kemudian lakukan proses scanning pada spektrofotometer. Panjang gelombang
dicari yang memberikan serapan maksimum.
5. Pembuatan kurva baku
Larutan intermediate kurkumin diambil sebanyak 0,4 ml; 0,6 ml; 0,8 ml;
1,0 ml; 1,2 ml dan masing-masing diencerkan dengan metanol p.a sampai volume
10,0 ml. Seri kadar larutan ini diukur serapannya pada panjang gelombang
maksimum. Replikasi dilakukan sebanyak tiga kali. Data yang diperoleh dihitung
menggunakan program regresi linear sehingga diperoleh persamaan kurva baku
yang dapat digunakan untuk menentukan kadar kurkumin hasil disolusi. Dari tiga
kali replikasi, dipilih kurva baku yang memiliki nilai r ≥ 0,99 (Rohman, 2009).
6. Pembuatan medium disolusi (cairan lambung buatan tanpa pepsin)
Larutkan natrium klorida P sebanyak 2,0 g ke dalam 7,0 ml asam klorida
p.a. dan encerkan dengan aquadest hingga 1000 ml. Larutan dibuat hingga pH ±
1,2.
31
7. Uji disolusi
Uji disolusi dilakukan terhadap dispersi padat isolat ekstrak rimpang
kunyit - HPMC E-5 dan serbuk campuran fisik ekstrak rimpang kunyit - HPMC
E-5 dalam kapsul cangkang keras menggunakan alat disolusi tipe dayung (padlle)
dengan kecepatan putar 50 ± 1 rpm. Medium disolusi terdiri dari 900 ml cairan
lambung buatan tanpa pepsin dengan pH 1,2. Temperatur selama pengujian 37 ±
0,5°C. Sebanyak 5 ml cuplikan diambil pada interval waktu tertentu, yaitu setelah
5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 150, dan 180 menit. Setiap kali pengambilan
cuplikan, medium yang hilang diganti dengan yang baru dengan jumlah yang
sama.
8. Penetapan kadar kurkumin dengan spektrofotometri visibel
Cuplikan yang telah diambil 5 mL kemudian diukur dengan
menggunakan spektrofotometer visibel pada panjang gelombang serapan
maksimum. Kadar kurkumin yang terlepas dalam uji disolusi dihitung dengan
menggunakan persamaan kurva baku. Kadar kurkumin yang tersolusi dinyatakan
sebagai persentase kurkumin terdisolusi.
9. Validasi metode analisis
Sebanyak 0,4; 0,8; dan 1,2 mL larutan intermediet dipipet, masing-
masing dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 mL dan diencerkan dengan metanol
p.a hingga tanda. Serapan diukur pada panjang gelombang serapan maksimum
kemudian dihitung kadarnya menggunakan persamaan kurva baku. Replikasi
dilakukan sebanyak tiga kali menggunakan tiga seri konsentrasi.
32
a. Penetapan parameter akurasi. Recovery dihitung dari kadar terukur
dibandingkan dengan kadar teoritis dikalikan dengan 100%.
Perolehan kembali (P) = % recovery =tungkadarterhi
urkadarterukx 100%
b. Penetapan parameter presisi. Presisi metode analisis dinyatakan
dengan nilai koefisien variasi yang dihitung dengan cara berikut:
KV =terukurkadarratarata
terukurkadarsimpangan
__
__
x 100%
c. Penetapan parameter linearitas. Linearitas metode yang dapat
diterima jika nilai r ≥ 0,99 (Rohman, 2009).
d. Penetapan parameter Limit of Detection (LOD). LOD dapat
dihitung dengan menggunakan rumus:
LOD =
Dimana Sy/x adalah simpangan baku residual dan b adalah nilai slope.
G. Analisis Hasil
Perbedaan disolusi kurkumin pada dispersi padat dan serbuk campuran
fisik isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5 diuji dengan menggunakan
unpaired-t-test untuk data yang berdistribusi normal dan uji Mann-Whitney untuk
data yang berdistribusi tidak normal, sedangkan untuk melihat pengaruh proporsi
drug load terhadap disolusi kurkumin pada menit ke-60 diuji dengan
menggunakan uji korelasi Spearman dan regresi linear dengan taraf kepercayaan
33
95% serta dibuat kurva hubungan pengaruh proporsi drug load terhadap disolusi
kurkumin.
34
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Isolat Ekstrak Rimpang Kunyit (Curcuma domestica C 95)
Serbuk kunyit yang digunakan dalam penelitian ini merupakan serbuk
isolat ekstrak kering rimpang kunyit yang diperoleh dari PT. Phytochemindo
Reksa. Serbuk isolat ekstrak rimpang kunyit ini berupa serbuk berwarna kuning
jingga, tidak larut dalam air, kandungan air sebesar 1,50% dan mengandung
kurkuminoid sebesar 97,20%.
B. Pembuatan Dispersi Padat Isolat Ekstrak Rimpang Kunyit – HPMC E-5
Pembuatan dispersi padat ini bertujuan untuk memodifikasi kelarutan
kurkumin. Dispersi padat dalam penelitian ini dibuat melalui metode penguapan
pelarut. Peningkatan kelarutan dan disolusi pada sistem dispersi padat dapat
terjadi karena adanya pengurangan ukuran partikel zat aktif hingga tingkat
molekular, efek solubilisasi dari bahan pembawa yang larut air serta terbentuknya
struktur amorphous zat aktif dalam bahan pembawa.
Serbuk dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5
disiapkan dengan cara melarutkan masing-masing bahan yaitu serbuk isolat
ekstrak rimpang kunyit dan HPMC E-5 ke dalam etanol 70%. Tujuan
digunakannya etanol 70% sebagai pelarut karena baik kurkumin maupun HPMC
E-5 larut dalam etanol 70%, selain itu etanol mudah menguap dan relatif tidak
35
toksik jika dibandingkan dengan pelarut orgnik lainnya. Larutan serbuk kunyit
dalam etanol dan larutan HPMC E-5 dalam etanol dicampur dengan menggunakan
magnetic stirer hingga homogen.
Larutan serbuk kunyit - HPMC E-5 dihilangkan pelarutnya dengan
menggunakan spray dryer dengan suhu inlet sebesar 110°C dan suhu outlet
sebesar 70 ± 2° C. Suhu inlet dan outlet ini diperoleh dari hasil orientasi. Pada
suhu inlet 110°C dihasilkan serbuk dispersi padat yang tidak lengket (sticky).
Suhu outlet merupakan suhu yang tidak tetap namun pada suhu inlet 110°C akan
menghasilkan suhu outlet yang berkisar pada range suhu 70 ± 2° C. Pump speed
yang digunakan dalam pembuatan dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit –
HPMC E-5 ini adalah sebesar 4 mL/ menit. Pump speed perlu diatur agar larutan
isolat ekstrak rimpang kunyit-HPMC E-5 dapat disedot dan disemprot sehingga
menghasilkan serbuk kurkumin yang berbentuk amorphous.
Proses spray drying yang dilakukan menggunakan ukuran nozzle 1 mm.
Setelah seluruh larutan serbuk kunyit – HPMC E-5 habis tersedot, serbuk dispersi
padat yang terbentuk dikumpulkan. Pengambilan serbuk diusahakan dilakukan
dalam ruangan dengan RH 50, hal ini bertujuan agar serbuk kurkumin hasil spray
drying tidak kembali lagi ke bentuk awalnya, yaitu bentuk kristal. Kurkumin yang
terkandung dalam serbuk kunyit berbentuk kristal dan dengan adanya proses
penghilangan pelarut secara cepat menggunakan medium udara panas maka
kurkumin akan berada dalam bentuk amorphous. Molekul dalam bentuk
amorphous memiliki kelarutan yang lebih tinggi dalam air dibandingkan dengan
36
bentuk kristalnya. Hal ini dikarenakan bentuk amorphous terdiri atas molekul-
molekul yang tersusun tidak beraturan sehingga ikatan antar molekulnya mudah
diputus oleh molekul lain. Bentuk amorphous memiliki energy state yang tinggi
atau dengan kata lain sifatnya metastabil karena susunan molekulnya tidak
beraturan sehingga molekul yang berbentuk amorphous memiliki kecenderungan
untuk berinteraksi dengan molekul lain untuk mencapai kondisi stabilnya. Adanya
sedikit air baik itu air dari medium maupun udara akan membuat molekul bentuk
amorphous akan dengan cepat menyerap air sehingga sifatnya berubah menjadi
kristal. Maka dari itu perlu adanya pengontrolan Relative Humidity (RH) ruangan
dan RH penyimpanan.
Keseluruhan proses baik dari pencampuran bahan hingga proses spray
drying diusahakan agar terlindung dari cahaya. Hal ini disebabkan karena
kurkumin yang terkandung dalam serbuk kunyit dapat mengalami degradasi
fotokimia seperti yang pernah dilaporkan oleh Tonnesen dan Karlsen (1986)
bahwa kurkumin dalam pelarut organik (etil asetat, kloroform, metanol dan
asetonitril) mengalami degradasi dengan adanya paparan sinar UV dan sinar
tampak.
C. Pembuatan Serbuk Campuran Fisik Isolat Ekstrak Rimpang
Kunyit - HPMC E-5
Serbuk campuran fisik dibuat dengan cara menimbang serbuk isolat
ekstrak rimpang kunyit dan HPMC E-5 sesuai dengan hasil perhitungan dari hasil
37
dispersi padat yang diperoleh. Kemudian serbuk kunyit dan HPMC E-5 dicampur
dalam mortir hingga homogen dan dimasukkan ke dalam kapsul untuk diuji
disolusi. Penentuan proporsi drug load 0,66%, 1% dan 2% dilakukan dengan
menentukan jumlah kurkumin dan HPMC E-5 yang diinginkan dalam sistem
dispersi padat. Dalam penelitian ini jumlah kurkumin yang diinginkan adalah
sebesar 40 mg dan jumlah HPMC E-5 yang diinginkan adalah sebanyak 2 g, 4 g
dan 6 g. Maka alasan dipilihnya proporsi drug load 0,66%, 1%, dan 2% karena
untuk efisiensi penimbangan dari kurkumin maupun HPMC E-5.
Serbuk campuran fisik dibuat sebagai kontrol yaitu, untuk melihat
adakah perbedaan disolusi kurkumin yang diformulasi dalam bentuk dispersi
padat dengan kurkumin yang dibuat dengan pencampuran fisik biasa. Serbuk
campuran fisik digunakan sebagai pembanding dan untuk mengetahui adakah
perubahan susunan molekul kurkumin dari bentuk kristal menjadi bentuk
amorphous saat pembentukan sistem dispersi padat. Untuk lebih meyakinkan
bahwa serbuk dispersi padat yang dihasilkan benar-benar berbentuk amorphous
maka perlu dilakukan analisis thermal dengan Differential Scanning Calorimetry
(DSC) dan penetapan pola difraksi sinar X. Namun dalam penelitian ini tidak
dilakukan kedua pemeriksaan ini.
D. Penentuan Panjang Gelombang Serapan Maksimum (λmaks)
Panjang gelombang serapan maksimum (λmaks) adalah panjang
gelombang saat suatu senyawa dalam hal ini kurkumin menghasilkan serapan
38
yang paling besar. Penentuan panjang gelombang serapan maksimum kurkumin
ini bertujuan untuk melihat pada panjang gelombang berapakah kurkumin yang
dilarutkan dalam metanol p.a menghasilkan absorbansi yang paling maksimal.
Panjang gelombang serapan maksimal yang diperoleh ini nantinya digunakan
untuk penetapan kadar kurkumin hasil uji disolusi.
Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang serapan maksimum agar
dengan adanya sedikit perubahan kecil dari kadar larutan yang akan dianalisis
dapat memberikan perbedaan hasil serapan yang besar. Dengan demikian,
sensitivitas metode akan semakin meningkat. Spektra serapan disekitar panjang
gelombang serapan maksimum relatif datar sehingga pada kondisi ini hukum
Lambert-Beer dapat terpenuhi dan apabila dilakukan pengukuran ulang atau
replikasi, kemungkinan terjadinya kesalahan yang disebabkan oleh pengukuran
ulang dan faktor lain menjadi kecil (Skoog, dkk, 1998).
Penetapan panjang gelombang serapan maksimum dilakukan dengan cara
mengukur panjang gelombang dari seri baku kurkumin dengan tiga kadar yang
berbeda, yaitu pada kadar terendah 1,584 x 10-3 mg/mL, kadar tengah 3,168 x 10-3
mg/mL dan kadar tertinggi 4,752 x 10-3 mg/mL. Tujuan dari pengukuran pada tiga
seri baku ini adalah untuk memastikan apakah setiap kadar memiliki serapan
maksimum pada panjang gelombang yang sama.
Penentuan panjang gelombang serapan maksimum kurkumin dilakukan
pada rentang panjang gelombang 400 – 600 nm. Rentang panjang gelombang ini
dipilih untuk melihat apakah ada pergeseran panjang gelombang serapan
39
maksimum yang didapat dibandingkan dengan panjang gelombang serapan
maksimum teoritis kurkumin, yaitu 421 nm (Kaewnopparat, 2009).
Hasil pengukuran panjang gelombang serapan maksimum ketiga seri
baku kurkumin (Lampiran 18) menunjukkan bahwa baik pada kadar terkecil
(1,584 x 10-3 mg/mL), kadar tengah (3,168 x 10-3 mg/mL) maupun kadar tertinggi
(4,752 x 10-3 mg/mL) memberikan panjang gelombang yang sama, yaitu 421,6
nm.
Panjang gelombang yang diperoleh dalam penelitian ini berbeda 0,6 nm
dari panjang gelombang serapan maksimum kurkumin teoritis, yaitu 421 nm.
Menurut Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan (1995) bahwa
perbedaan selisih panjang gelombang serapan maksimum antara hasil percobaan
dengan hasil teoritis tidak boleh lebih dari 2 nm. Maka dari itu panjang
gelombang yang diperoleh dalam penelitian ini sudah memenuhi persyaratan
panjang gelombang serapan maksimum yang ditetapkan oleh Direktorat Jenderal
Pengawasan Obat dan Makanan (1995). Panjang gelombang serapan maksimum
421,6 nm digunakan selanjutnya untuk pengukuran absorbansi larutan baku
kurkumin maupun sampel yang akan dianalisis.
E. Pembuatan Kurva Baku
Kurva baku dibuat agar diperoleh persamaan yang nantinya dapat
digunakan untuk menghitung kadar kurkumin yang terdisolusi. Kurva baku
diperoleh dengan cara membuat lima seri kadar dari tiga replikasi larutan baku
40
kurkumin dan kelima seri kadar diukur pada panjang gelombang serapan
maksimum hasil pengukuran yaitu 421,6 nm. Seri kadar baku dibuat dengan kadar
1,584 x 10-3 mg/mL; 2,376 x 10-3 mg/mL; 3,168 x 10-3mg/mL; 3,96 x 10-3
mg/mL; dan 4,752 x 10-3 mg/mL. Kelima seri kadar baku ini dipilih berdasarkan
hasil orientasi sebelumnya, dimana dipilih kadar seri baku yang memberikan
serapan pada rentang 0,2 hingga 0,8.
Dari hasil pengukuran seri larutan baku kurkumin, diperoleh data sebagai
berikut.
Tabel VI. Data pengukuran absorbansi seri larutan baku kurkumin danpersamaan kurva baku
Kurva baku I Kurva baku II Kurva baku IIIKadar(mg/mL)
AbsorbansiKadar(mg/mL)
AbsorbansiKadar(mg/mL)
Absorbansi
1,584 . 10-3
2,376. 10-3
3,168. 10-3
3,96 . 10-3
4,752 . 10-3
0,2360,3290,4610,5980,705
1,584 . 10-3
2,376. 10-3
3,168 10-3
3,96 . 10-3
4,752 . 10-3
0,2050,3820,4250,5890,685
1,584 . 10-3
2,376. 10-3
3,168. 10-3
3,96 . 10-3
4,752 . 10-3
0,2070,3330,4170,5600,697
A = -0,017B = 152,3990r = 0,9981
A =-9,6 x 10-3
B = 147,3485r = 0,9878
A = -0,04B = 152,3990r = 0,9966
Persamaan kurva baku:Y = Bx + AY = 152,3990x – 0,017
Persamaan kurva baku:Y = Bx + AY = 147,3485x – 0,0096
Persamaan kurva baku:Y = Bx + AY = 152,3990x – 0,04
Berdasarkan data pada tabel VI. maka diperoleh tiga buah persamaan
kurva baku yang berbeda. Dari ketiga persamaan kurva baku tersebut dipilih
persamaan kurva baku yang paling linier. Linieritas dinyatakan sebagai koefisien
korelasi yang dilambangkan dengan huruf r.
41
Tabel VII. Kriteria keberterimaan yang disarankan untuk mengevaluasilinieritas metode (Rohman, 2009)
Uji Level* Kisaran** Kriteria keberterimaanPengujian 5 50% - 150% r ≥ 0,999; intersep –y ≤ 2,0%Disolusi 5-8 10% – 150% r ≥ 0,99; intersep –y ≤ 5,0%Pengotor 5 LOQ – 2% r ≥ 0,98
Menurut Rohman (2009) bahwa untuk uji disolusi kriteria keberterimaan
koefisien korelasi (r), yaitu ≥ 0,99. Dari ketiga koefisien korelasi dari masing-
masing kurva baku diketahui bahwa koefisien korelasi semua persamaan kurva
baku ≥ 0,99. Ini menunjukkan bahwa semua persamaan kurva baku telah
memberikan hubungan korelasi yang baik antara kadar kurkumin dengan serapan.
Persamaan kurva baku yang dipilih adalah persamaan kurva baku I,
yaitu Y= 152,3990x – 0,017 dengan nilai r = 0,9981. Persamaan ini dipilih karena
persamaan kurva baku I memberikan nilai r yang paling besar dibandingkan
dengan nilai r pada dua kurva baku yang lainnya. Diharapkan dengan dipilihnya
persamaan kurva baku yang memiliki nilai r yang paling besar maka akan
memberikan korelasi yang baik pula antara kadar kurkumin dan serapan.
Gambar 4. Kurva baku kadar kurkumin vs serapan
42
Dari kurva baku kadar kurkumin vs serapan terlihat bahwa seiring
dengan meningkatnya kadar kurkumin dalam larutan maka serapannya juga
meningkat secara proporsional. Hal ini karena hubungan korelasi yang terjadi
antara kadar kurkumin dengan serapan adalah linier.
F. Validasi Metode Analisis
Uji disolusi termasuk dalam metode analisis kategori III (Anonim, 2007).
Kategori III mensyaratkan parameter validasi metode presisi, sedangkan
parameter-parameter yang lain mungkin diperlukan, tergantung pada sifat spesifik
tes. Pada penelitian ini parameter validasi yang digunakan, yaitu:
1. Akurasi
Akurasi adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil
analisis dengan kadar analit yang sebenarnya dan dinyatakan sebagai persen
perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan. Mulja dan Hanwar (2003)
memberikan batas % recovery yang masih dapat diterima untuk uji bioanalisis,
yaitu 80 - 120%. Tabel VIII menunjukkan rentang recovery yang diperoleh dalam
penelitian ini adalah 93,48 – 98,41%. Rentang recovery ini sudah masuk dalam
rentang recovery yang dipersyaratkan, yaitu 80 – 120%, sehingga dapat dikatakan
bahwa metode penetapan kadar kurkumin secara spektrofotometri visibel telah
memenuhi persyaratan akurasi.
43
Tabel VIII. Data % recovery
Replikasi AbsorbansiKadarteoritis
(mg/mL)
Kadarterukur
(mg/mL)
%recovery
(%)
Rata-rata %recovery
(%)0,236 1,584 x 10-3 1,6601 x 10-3 104,800,205 1,584 x 10-3 1,4567 x 10-3 91,96I0,207 1,584 x 10-3 1,4698 x 10-3 92,79
96,52
0,461 3,168 x 10-3 3,1365 x 10-3 99,010,425 3,168 x 10-3 2,9003 x 10-3 91,55II0,417 3,168 x 10-3 2,8478 x 10-3 89,89
93,48
0,705 4,752 x 10-3 4,7376 x 10-3 99,700,685 4,752 x 10-3 4,6063 x 10-3 96,93III0,697 4,752 x 10-3 4,6851 x 10-3 98,59
98,41
2. Presisi
Presisi atau keseksamaan suatu metode analisis dinyatakan sebagai
koefisien variasi (KV). Menurut Anonim (2004) bahwa untuk nilai KV yang
masih dapat diterima untuk sampel dengan kadar 0,1–1,0 % adalah ≤ 10 %.
Berdasarkan pengukuran pada tiga replikasi seri larutan baku dengan kadar
1,6601x10-3 mg/mL; 3,1365x10-3 mg/mL; dan 4,7376x10-3 mg/mL diperoleh nilai
CV berturut-turut 7,44; 5,19 dan 1,41. Hasil ini menunjukkan bahwa presisi dari
metode analisis kurkumin secara spektrofotometri visibel telah memenuhi
persyaratan presisi atau keseksamaan.
Tabel IX. Hasil koefisien variasi metodeKadar (mg/mL)
Replikasi I Replikasi II ReplikasiIIIX SD CV (%)
1,6601x10-3 1,4567x10-3 1,4698x10-3 1,5289x10-3 1,1384x10-4 7,443,1365x10-3 2,9003x10-3 2,8478x10-3 2,9615x10-3 1,5378x10-4 5,194,7376x10-3 4,6063x10-3 4,6851x10-3 4,6763x10-3 6,6088x10-5 1,41
44
3. Linieritas
Linearitas merupakan kemampuan suatu metode (pada rentang tertentu)
untuk mendapatkan hasil uji yang secara langsung proporsional dengan
konsentrasi (jumlah) analit di dalam sampel. Linieritas dinyatakan sebagai
koefisien korelasi (r), dimana semakin besar nilai r maka semakin baik korelasi
antara kadar dan serapan.
Berdasarkan pengukuran yang telah dilakukan maka diperoleh nilai r,
0,9981. Nilai r ini sudah memenuhi persyaratan keberterimaan koefisien korelasi
untuk uji disolusi menurut Rohman (2009), yaitu r ≥ 0,99. Dengan demikian dapat
dikatakan bahwa metode penetapan kadar kurkumin terdisolusi secara
spektrofotometri visibel memiliki korelasi yang baik antara kadar kurkumin
dengan serapan yang diperoleh.
4. Limit of Detection (LOD)
LOD adalah jumlah analit terkecil yang ada dalam sampel yang masih
dapat dideteksi oleh metode analisis. Hasil pengukuran LOD yang dilakukan
diperoleh nilai LOD sebesar 2,46 x 10-5 mg/mL, maka kadar minimal kurkumin
yang harus terkandung dalam sampel agar tetap dapat terdeteksi oleh metode ini
adalah ≥ 2,46 x 10-5 mg/mL.
Kadar yang digunakan dalam pengukuran sampel dalam penelitian ini
telah melewati kadar LOD sehingga kemungkinan kadar tersebut dapat terdeteksi
oleh metode analisis. Nilai LOD dalam penelitian ini hanya sebagai tambahan
informasi, karena metode analisis kategori III tidak mempersyaratkan parameter
45
LOD. Namun agar kadar kurkumin dalam dispersi padat yang dibuat dapat
dideteksi oleh metode analisis maka perlu dilakukan perhitungan nilai LOD
terlebih dulu.
G. Uji Disolusi
Uji disolusi dilakukan untuk memperoleh gambaran pelepasan kurkumin
yang dibuat dalam dispersi padat maupun serbuk campuran fisik ke dalam
medium disolusi. Melalui uji disolusi maka dapat diperkirakan waktu yang
dibutuhkan oleh sejumlah obat (kurkumin) dalam kapsul untuk larut dalam suatu
medium pada kondisi tertentu.
Uji disolusi dilakukan menggunakan alat disolusi tipe II (paddle),
dengan menggunakan medium cairan lambung buatan tanpa pepsin dengan pH 1,2
(Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995). Pengujian
dilakukan pada menit ke 5, 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 150, 180 menit dan pada
suhu medium 37 ± 0,5°C dengan kecepatan putaran paddle 50 rpm. Cuplikan
diambil sebanyak 5 mL dan setelah pengambilan cuplikan ke dalam medium
disolusi ditambahkan dengan medium disolusi yang baru dengan jumlah yang
sama. Cuplikan yang telah diambil selanjutnya diukur absorbansinya dengan
menggunakan spektrofotometer visibel pada panjang gelombang maksimum,
421,6 nm.
Data hasil uji disolusi dispersi padat dan serbuk campuran fisik isolat
ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5 dapat dilihat pada tabel X.
46
Tabel X. Hasil perhitungan persentase kurkumin terdisolusi dalam dispersipadat dan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5
Rata-rata kurkumin terdisolusi (%)(X±SD)
Menitke-
DP drugload 2%
SCF drugload 2%
DP drugload 1%
SCF drugload 1%
DP drugload 0,66%
SCF drugload 0,66%
5 0,77 ± 0,17 1,87 ± 1,59 2,07 ±0,27 1,32 ± 0,34 3,47 ± 0,42 1,90 ± 0,45
10 1,02 ± 0,32 1,04 ± 0,35 2,38 ± 0,35 1,26 ± 0,23 3,28 ± 0,10 2,67 ± 0,97
20 1,02 ± 0,21 1,06 ± 0,27 2,58 ± 0,43 1,37 ± 0,42 3,31 ± 0,24 1,93 ± 0,50
30 1,19 ± 0,32 1,27 ± 0,43 2,73 ± 0,39 1,23 ± 0,19 3,44 ± 0,34 2,44 ± 0,70
45 1,34 ± 0,45 1,34 ± 0,23 2,47 ± 0,20 1,30 ± 0,31 3,76 ± 0,10 2,25 ± 0,98
60 1,63 ± 0,93 1,30 ± 0,43 2,62 ± 0,23 1,28 ± 0,27 3,99 ± 0,06 2,73 ± 0,97
90 1,87 ± 0,70 1,77 ± 0,94 2,75 ± 0,21 1,43 ± 0,53 5,27 ± 0,78 3,92 ± 2,42
120 2,01 ± 0,89 1,75 ± 0,59 3,02 ± 0,15 1,32 ± 0,34 6,56 ± 1,92 2,83 ± 0,95
150 2,03 ± 1,17 1,69 ± 0,41 3,35 ± 0,27 1,59 ± 0,54 5,66 ± 0,62 2,93 ± 1,07
180 2,15 ± 1,32 1,90 ± 0,49 3,35 ± 0,35 1,78 ± 0,63 5,24 ± 0,45 3,57 ± 0,75
Keterangan : DP = Dispersi Padat
SCF = Serbuk Campuran Fisik
Dari hasil pengukuran persentase kurkumin terdisolusi tiap waktu
diperoleh nilai Standar Deviasi (SD) yang tinggi. Hal ini mungkin disebabkan
karena metode analisis yang digunakan terlalu kasar sehingga perlu dilakukan
validasi metode analisis dan penetapan kadar dengan menggunakan alat yang
sensitifitasnya lebih tinggi seperti High Performance Liquid Chromatography
(HPLC) agar hasil yang diperoleh lebih valid.
Saat pengujian disolusi terhadap dispersi padat maupun serbuk campuran
fisik isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5 diketahui bahwa hingga menit ke-
180 serbuk tidak seluruhnya habis terdisolusi. Pada menit ke-180 serbuk dispersi
padat maupun serbuk campuran fisik belum terbasahi seluruhnya. Hal ini
disebabkan karena HPMC membentuk lapisan seperti gel yang membuat penetrasi
47
air ke dalam serbuk menjadi sulit, sehingga proses disolusi menjadi lebih lambat.
Maka dapat diketahui bahwa HPMC E-5 kemungkinan dapat digunakan sebagai
bahan pembawa untuk obat-obatan controlled release.
H. Hubungan Proporsi Drug load Terhadap Disolusi Kurkumin
Berdasarkan hasil pengukuran persentase kurkumin yang terdisolusi
dalam dispersi padat dan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit –
HPMC E-5 dapat dibuat kurva hubungan antara waktu disolusi terhadap
persentase kurkumin yang terdisolusi masing-masing proporsi drug load yang
ditunjukkan pada gambar 5.
Gambar 5a
48
Gambar 5bs
Gambar 5c
Gambar 5. Kurva hubungan waktu terhadap persentase kurkuminterdisolusi pada dispersi padat dan serbuk campuran fisik isolat ekstrak
rimpang kunyit-HPMC E-5 dengan drug load (a) 0,66%, (b) 1% dan (c) 2%
49
Untuk menganalisis data perbedaan disolusi kurkumin pada dispersi
padat dan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5 dapat
digunakan analisis statistik. Unpaired-t-test digunakan untuk menganalisis data
yang berdistribusi normal sedangkan untuk data yang berdistribusi tidak normal
digunakan uji Mann-Whitney. Hasil uji dinyatakan dengan nilai p yang
menyatakan nilai signifikansi perbedaan.
Tabel XI. Data disolusi kurkumin dari dispersi padat isolat ekstrak rimpangkunyit-HPMC E-5 dengan berbagai proporsi drug load
Rata-rata kurkumin terdisolusi (%)
Menitke-
Dispersi padat drugload 0,66%
Dispersi padat drugload 1%
Dispersi padat drugload 2%
5 3,47 ± 0,42 (*) 2,07 ±0,27(*) 0,77 ± 0,17
10 3,28 ± 0,10 2,38 ± 0,35(*) 1,02 ± 0,32
20 3,31 ± 0,24(*) 2,58 ± 0,43(*) 1,02 ± 0,21
30 3,44 ± 0,34 2,73 ± 0,39(*) 1,19 ± 0,32
45 3,76 ± 0,10 2,47 ± 0,20(*) 1,34 ± 0,45
60 3,99 ± 0,06(*) 2,62 ± 0,23(*) 1,63 ± 0,93
90 5,27 ± 0,78 2,75 ± 0,21(*) 1,87 ± 0,70
120 6,56 ± 1,92(*) 3,02 ± 0,15(*) 2,01 ± 0,89
150 5,66 ± 0,62(*) 3,35 ± 0,27(*) 2,03 ± 1,17
180 5,24 ± 0,45(*) 3,35 ± 0,35(*) 2,15 ± 1,32
(*) = menunjukkan perbedaan yang signifikan dengan serbuk campuran fisik
(p<0,05)
Untuk melihat ada tidaknya perbedaan disolusi kurkumin pada dispersi
padat dengan serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit-HPMC E-5
maka dilakukan pengujian statistik. Dari hasil uji statistik, diperoleh nilai p > 0,05
pada disolusi kurkumin menit ke 10, 30, 45, dan 90. Nilai p > 0,05 menunjukkan
bahwa tidak ada perbedaan yang signifikan pada disolusi kurkumin dengan drug
load 0,66% yang diformulasi dalam bentuk dispersi padat dan serbuk campuran
50
fisik. Dilihat dari gambar 5a maka dapat diketahui bahwa profil disolusi dispersi
padat lebih tinggi dibandingkan dengan serbuk campuran fisik namun diketahui
terdapat SD yang overlapping pada menit ke-10, 30 dan 90 dan secara statistik
diperoleh nilai p > 0,05. Maka dapat disimpulkan bahwa pembuatan dispersi padat
isolat ekstrak rimpang kunyit-HPMC E-5 dengan drug load 0,66% memberikan
peningkatan disolusi kurkumin yang tidak signifikan dibandingkan dengan serbuk
campuran fisik.
Dari gambar 5a dapat dilihat bahwa peningkatan disolusi dispersi padat
dengan proporsi drug load 0,66% mengalami fluktuasi. Pada menit ke 120 hingga
menit ke 180 terjadi penurunan persentase kurkumin yang terdisolusi. Hal ini
dapat disebabkan karena lapisan gel yang melapisi serbuk dispersi padat
kemungkinan semakin tebal sehingga menyebabkan sulitnya air untuk menembus
lapisan gel tersebut. Proporsi drug load yang kecil, yaitu 0,66% menunjukkan
bahwa semakin banyak jumlah HPMC E-5 yang terkandung dalam sistem dispersi
padat. Jumlah HPMC E-5 yang banyak ini menyebabkan penyerapan air ke dalam
sistem dispersi padat tiap replikasi berbeda. Pada tiap replikasi ketebalan lapisan
gel yang terbentuk berbeda-beda, sehingga penulis tidak dapat mengontrol
penyerapan air yang sangat sedikit akibat pembentukan lapisan gel tersebut. Maka
dari itu pada drug load 0,66% SD-nya sangat tinggi.
Hasil uji statistik untuk perbedaan disolusi kurkumin pada dispersi padat
dan serbuk campuran fisik dengan proporsi drug load 1% diperoleh nilai p < 0,05
dari menit ke 5 hingga menit ke-180. Nilai p < 0,05 menunjukkan bahwa ada
51
perbedaan yang signifikan antara disolusi kurkumin yang diformulasikan dalam
bentuk dispersi padat dengan disolusi serbuk campuran fisik. Maka dapat
diketahui bahwa dengan pembentukan dispersi padat isolat ekstrak rimpang
kunyit - HPMC E-5 dengan drug load 1% dapat memberikan peningkatan disolusi
kurkumin yang signifikan dibandingkan dengan serbuk campuran fisiknya.
Dari gambar 5b dapat dilihat bahwa ada penurunan persentase disolusi
kurkumin pada menit ke-30 sampai menit ke-45. Hal ini kemungkinan disebabkan
oleh adanya proses swelling pada HPMC E-5 ketika kontak dengan air, sehingga
membentuk lapisan tipis yang menyerupai gel. Lapisan ini dapat mempengaruhi
penetrasi air yang masuk ke dalam partikel serbuk dispersi padat sehingga
menyebabkan proses pelepasan zat aktif menjadi tertunda.
Pada gambar 5c dapat dilihat bahwa profil disolusi dipersi padat lebih
tinggi dibandingkan dengan serbuk campuran fisik namun dari gambar juga
terlihat adanya overlapping SD dispersi padat dan serbuk campuran fisik. Hal ini
berarti dengan pembuatan dispersi padat dengan drug load 2% maka akan
memberikan peningkatan disolusi kurkumin yang tidak signifikan.
Dari hasil uji statistik untuk disolusi kurkumin pada dispersi padat dan
serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit - HPMC E-5 dengan proporsi
drug load 2%, diperoleh nilai signifikansi p > 0,05 untuk seluruh waktu pengujian
disolusi. Nilai p > 0,05 menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna
antara disolusi kurkumin yang diformulasikan dalam bentuk dispersi padat dengan
disolusi kurkumin dalam serbuk campuran fisik. Maka dari hasil uji statistik ini
52
dapat diketahui bahwa pembentukan dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit-
HPMC E-5 memberikan peningkatan disolusi kurkumin yang tidak signifikan
dibandingkan dengan serbuk campuran fisik.
Dispersi padat dengan proporsi drug load 2% tidak memberikan
peningkatan kelarutan yang signifikan bagi kurkumin bila dibandingkan dengan
serbuk campuran fisik, hal ini disebabkan karena semakin besar proporsi
kurkumin yang terkandung dalam sistem dispersi padat maka proporsi pembawa
yang ada semakin sedikit. HPMC E-5 merupakan polimer hidrofilik yang dapat
meningkatkan kelarutan obat-obatan lipofilik seperti kurkumin. Namun apabila
jumlah HPMC E-5 sedikit maka disolusi kurkumin menjadi semakin kecil.
Jika dibandingkan dengan serbuk campuran fisik, dispersi padat
memberikan profil disolusi yang lebih baik. Hal ini disebabkan karena dengan
pembentukan dispersi padat, kurkumin yang molekulnya bersifat kristal diubah
menjadi bentuk amorphous dengan bantuan spray dryer. Pada saat proses spray
drying, kurkumin yang awalnya berbentuk kristal dengan adanya penghilangan
pelarut (etanol 70%) yang secara cepat sehingga membuat molekul kurkumin
tidak sempat menata dirinya dan molekulnya tersusun tidak beraturan dan menjadi
bentuk amorphous.
Bentuk amorphous memiliki energy state yang besar dan untuk membuat
kondisinya stabil maka bentuk amorphous memiliki kecenderungan untuk
menyerap air dengan cepat, baik air dari udara maupun dari medium yang ada.
Maka dari itu ketika dispersi padat kontak dengan air maka obat yang terdispersi
53
dalam matriks akan lebih cepat larut. Jadi kurkumin yang diformulasikan dalam
dispersi padat akan dengan mudah melarut dalam medium disolusi dibandingkan
dengan kurkumin yang diformulasikan dalam serbuk campuran fisik karena dalam
serbuk campuran fisik kurkumin masih berada dalam bentuk kristal.
Pada serbuk campuran fisik, karena tidak diberi perlakuaan apapun maka
kurkumin yang ada dalam sistem tersebut molekulnya masih berbentuk kristalin.
Bentuk kristalin memiliki susunan molekul yang teratur dan rapat, sehingga
membuat molekul air sulit untuk masuk. Maka dari itu disolusi kukumin pada
dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit-HPMC E-5 memiliki profil yang
lebih tinggi dibandingkan dengan serbuk campuran fisik.
Pembentukan dispersi padat juga menghasilkan ukuran partikel yang
kecil, karena saat pembentukan dispersi padat serbuk telah terlebih dahulu
didispersikan dalam pelarut yang sesuai dan ketika dilakukan proses spray maka
dispersi tersebut akan melewati nozzle dengan ukuran yang kecil sehingga
dihasilkan partikel yang fines (halus). Ukuran partikel juga berpengaruh terhadap
disolusi obat. Menurut Aulton (2002), dengan semakin kecilnya ukuran partikel
maka luas permukaan spesifiknya akan semakin besar sehingga luas kontaknya
dengan medium akan semakin besar dan kemungkinan partikel akan terbasahi
sempurna akan semakin besar dengan demikian akan mempercepat disolusinya.
54
Gambar 6. Hubungan persentase kurkumin terdisolusi vs waktu padadispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5
Dari ketiga kurva hubungan persentase kurkumin terdisolusi terhadap
waktu diketahui bahwa dispersi padat dengan drug load 0,66%, 1% dan 2%
menghasilkan profil disolusi kurkumin yang lebih baik dibandingkan dengan
serbuk campuran fisik dengan proporsi drug load yang sama. Dispersi padat
dengan drug load yang semakin kecil yaitu, dengan proporsi drug load 0,66%
memberikan disolusi yang lebih tinggi dibandingkan dengan proporsi drug load
1% dan 2%. Hal ini dikarenakan semakin kecil proporsi drug load maka jumlah
pembawa yang ada dalam sistem semakin banyak jika dibandingkan dengan
jumlah pembawa yang terkandung dalam dispersi padat dengan proporsi drug
load yang besar, sehingga dispersi padat dengan proporsi drug load yang kecil
akan menghasilkan disolusi yang lebih tinggi.
55
Pengaruh proporsi drug load terhadap disolusi kurkumin dilihat melalui
jumlah kurkumin yang terlarut dalam media disolusi pada menit ke-60. Dipilih
waktu 60 menit karena seperti yang dilaporkan Kaewnopparat (2009), bahwa laju
disolusi kurkumin murni dan serbuk campuran fisik kurkumin dapat diabaikan
dan kurang dari 1% kurkumin murni dan serbuk campuran fisik yang terlarut,
sedangkan kurkumin yang diformulasikan dalam dispersi padat menunjukkan
peningkatan laju disolusi dalam 60 menit.
Untuk pengujian normalitas data digunakan uji Shapiro-Wilk karena data
yang diuji jumlahnya kurang dari 50. Berdasarkan hasil uji Shapiro-Wilk, nilai
signifikansi (p) untuk drug load adalah 0,007 sedangkan nilai signifikansi untuk
persentase kurkumin terdisolusi dalam waktu 60 menit adalah 0,318. Menurut
Dahlan (2009), apabila nilai p < 0,05 menunjukkan bahwa kelompok data
mempunyai distribusi tidak normal. Dari hasil uji Shapiro-Wilk maka diketahui
bahwa dari dua variabel yang diteliti ternyata ada satu variabel yang memiliki
nilai signifikansi atau p< 0,05 yang menunjukkan bahwa distribusi data tidak
normal.
Untuk melihat korelasi antara proporsi drug load terhadap persentase
kurkumin terdisolusi dalam dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC
E5 maka digunakan uji korelasi Spearman. Dipilih uji Spearman karena data yang
diperoleh memiliki distribusi tidak normal.
Berdasarkan hasil statistik dengan korelasi Spearman maka diperoleh
nilai koefisien korelasi (nilai r) proporsi drug load terhadap persen kurkumin
56
terdisolusi adalah -0,887. Jika nilai r yang didapat berada pada rentang 0,80 –
1,000 ini berarti terdapat korelasi yang sangat kuat antara variabel yang diuji.
Nilai p < 0,05 menunjukkan bahwa terdapat korelasi yang bermakna diantara
variabel yang diuji (Dahlan, 2009).
Nilai koefisien korelasi (r) -0,887 menunjukkan bahwa ada korelasi yang
kuat antara proporsi drug load dengan disolusi kurkumin. Nilai p < 0,005
menunjukkan bahwa terdapat korelasi yang bermakna antara proporsi drug load
dengan disolusi kurkumin. Arah korelasi yang bertanda negatif (-) menujukkan
bahwa korelasi yang terjadi antar variabel adalah berlawanan arah, artinya
semakin besar nilai satu variabel maka semakin kecil variabel lainnya. Sehingga
dapat diketahui bahwa semakin besar proporsi drug load maka semakin kecil
persentase kurkumin terdisolusi dan sebaliknya semakin kecil proporsi drug load
maka semakin besar persentase kurkumin terdisolusi. Hal ini sesuai dengan yang
dilaporkan oleh Waard, dkk. (2008) bahwa semakin besar proporsi drug load
maka semakin sedikit obat yang terlarut. Besarnya proporsi drug load
menunjukkan bahwa semakin sedikit jumlah pembawa hidrofilik dalam hal ini
HPMC E-5 yang ada dalam sistem dispersi padat sehingga akan memperlambat
disolusi kurkumin.
57
Gambar 7. Profil persentase kurkumin terdisolusi
Untuk melihat hubungan antara proporsi drug load terhadap disolusi
kurkumin maka dilakukan analisis regresi linear. Dari profil persentase kurkumin
terdisolusi diatas dapat diketahui bahwa semakin besar proporsi drug load maka
semakin kecil persentase kurkumin yang terdisolusi. Berdasarkan hasil pengujian
antara proporsi drug load dengan persentase kurkumin terdisolusi maka diperoleh
persamaan regresi linier yaitu y = -1,550x + 4,606. Persamaan ini memiliki nilai
signifikansi pada ANOVA < 0,05, sehingga persamaan ini layak digunakan untuk
meramalkan persentase kurkumin yang terdisolusi apabila drug load ditingkatkan
atau diturunkan dari proporsi drug load yang diteliti. Nilai Adjusted R Square
yang diperoleh sebesar 0,694, hal ini berarti bahwa persamaan tersebut mampu
menjelaskan 69,4% persentase disolusi kurkumin yang diramalkan, sedangkan
30,6% lainnya ditentukan oleh variabel lain yang tidak diteliti.
Maka dari penelitian ini dapat diketahui bahwa ada korelasi antara
proporsi drug load dengan disolusi kurkumin. Korelasi diantara keduanya adalah,
58
dengan semakin tingginya proporsi drug load maka semakin kecil disolusinya, hal
ini karena jumlah HPMC E-5 yang terkandung dalam dispersi padat semakin
sedikit dengan demikian kurkumin yang terdisolusi hanya sedikit. Proporsi drug
load yang kecil, menunjukkan jumlah HPMC E-5 yang banyak sehingga disolusi
kurkumin akan semakin besar.
59
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa
peningkatan disolusi kurkumin yang paling baik terjadi pada dispersi padat isolat
ekstrak rimpang kunyit-HPMC E-5. Dispersi padat dengan drug load 0,66%
memberikan profil disolusi yang lebih tinggi, dan dari uji disolusi diperoleh
bahwa disolusi kurkumin meningkat seiring dengan meningkatnya jumlah HPMC
E-5 dalam dispersi padat.
B. Saran
1. Perlu melihat glass transition temperature dari serbuk dispersi padat dan
serbuk campuran fisik dengan menggunakan Differential Scanning
Calorimetry (DSC).
2. Serbuk dispersi padat kurkumin-HPMC E-5 dapat dikembangkan menjadi
sediaan controlled released.
60
DAFTAR PUSTAKA
Abdou, H.M., Hanna, S., dan Muhammad, N., 2000, Dissolution, in Remingtong(Ed), The Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, UniversityScience of Philadelphia, Philadelphia, pp. 654-660.
Aggarwal, B.B., Bhatt, I.D., Ichikawa, H., Ahn, K.S., Sethi, G., Sandur, S.K.,dkk., 2006, Curcumin – Biological and Medicinal Properties,http://www.indsaff.com/10%20Curcumin%20biological.pdf, diaksestanggal 19 Agustus 2010.
Anonim, 2004, Guidelines For The Validation Of Analytical Methods For ActiveConstituent, Agricultural And Veterinary Chemical Products,http://www.apv,a.gov.au, diakses pada tanggal 23 Oktober 2010
Anonim, 2007, The United States Pharmacopeia 30th The National Formulary25th, United States Pharmacopeal Convention, inc. New York.
Ansel, 1985, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi Keempat, diterjemahkanoleh Farida Ibrahim, hal. 616-619, UI Press, Jakarta.
Aulton, M.E., 2002, Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design, Secondedition, Churchill Livingstone, New York, pp. 239.
Banakar, U.M., 1992, Pharmaceutical Dissoluting Testing, Marcel Dekker, Inc.,New York, pp. 289-195.
Bee, T., dan Rahman, M., 2010, A Review of Major technologies,Pharmaceutical Technology, Vol.34, No.9.
Chiou, W.L. dan Riegelman, S., 1971, Pharmaceutical Applications of SolidDispersions Systems, J. Pharm. Sci., 60(9), 1281-1302.
Dabbagh, M.A., dan Taghipour, B., 2007, Investigation of Solid DispersionTechnique in Improvement of Physicochemical Characteristic ofIbuprofen Powder, Iranian. J. Pharm. Sci., 3(2): 69-76.
Dahlan, M. S., 2009, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, hal.157, 164,Salemba Medika, Jakarta
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, FarmakopeIndonesia, jilid IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, JakartaDonatus, 1994
61
Donatus, I.A., 1994, Antaraksi Kurkumin Dengan Paracetamol: Kajian TerhadapEfek Farmakologi dan Toksikologi, Disertasi, 176-181, UniversitasGadjah Mada, Yogyakarta.
Guterres,S.S., Beck, R.C.R., Pohlmann, A.R., 2009, Spray drying Technique ToPrepare Innovative Nanoparticulated Formulations For DrugAdministration: A Brief Overview, Brazillian Journal of Physics, 39,205-209.
Harmita, 2004, Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya,Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol.1, No.3, 117-135.
Kaewnopparat, N., Kaewnopparat, S., Jangwang, A., Maneenaun, D., Chuchome,T., Panichayupakaranant, P., 2009, Increased Solubility, Dissolution andPhysicochemical Studies of Curcumin-Polyvinylpyrrolidone K-30 SolidDispersions, http://www.waset.org/journals/waset/v55/v55-40.pdf,diakses tanggal 19 Agustus 2010.
Khan, K. A., 1975, The Concept of Dissolution Efficiency, Journal of Pharm.Pharmacol, Vol. 27, No.I, 48-49.
Koester,L. S., Mayorga, P., dan Bassani, V.L., 2003, Carbamazine/ βCD/HPMCSolid Dispersions. I. Influence of Spray-Drying Process and βCD /HPMC on the Drug Dissolution Profile, Drug Development andIndustrial Pharmacy, Vol. 29, No.2, pp. 139-144.
Kris, 2006, Kunyit, Si Kuning yang Kaya Manfaat,http://itd.unair.ac.id/index.php?option=com_content&task=view&id=592&Itemid=1, diakses tanggal 26 Desesmber 2010
Kuttan, R., Bhanumathy, P., Nirmala, K. dan George, M. C., 1985, PotentialAnticancer Activity of Turmeric (Curcuma longa), Cancer Lett, 29 (2),197-202
Leung, M.H.M., dan Kee, T.W., 2009, Effective Stabilization of Curcumin byAssociation to Plasma Proteins Human Serum Albumin and Fibrinogen,Langmuir, 25 (10), 5773-5777.
Lewis, S., Dhirendra, K.,Undupa, N., dan Atin, K., 2009, Solid Dispersions: AReview, Pak. J. Pharm. Sci., 22(2), 234-246.
Maiti, K., Mukherjee, K., Gantait, A., Saha, B.P., Mukherjee, P.K., 2007,Curcumin-Phospolipid Complex: Preparation, Therapeutic Evaluationand Pharmacokinetic Study in Rats, Int. J. Pharm., 330, 155-163.
62
Martin, A., Swarbrick, J., dan Cammarata, A., 1983, Farmasi Fisik, Edisi III, hal845, UI Press.
Mulja, H.M., dan Suharman, 1995, Analisis Instrumental, Airlangga UniversityPress, Surabaya, pp. 26-33.
Mulja, M., dan Hanwar, D., 2003, Prinsip-Prinsip Cara Berlaboratorium yangBaik (Good Laboratory Practice), Majalah Farmasi Airlangga, Vol. IIINo.2, 71-76.
Onoue, S., Takahashi, H., Kawabata, Y., Seto, Y., Hatanaka, J., Timmermann, B.,dkk., 2010, Formulation Design and Photochemical Studies onNanocrystal Solid Dispersion of Curcumin With Improved OralBioavailability, J.Pharm. Sci., 99, 1871-1881.
Paradkar, A., Ambike, A.A., Jadhav, B.K., Mahadik, K.R., 2004, Characterizationof Curcumin-PVP Solid Dispersion Obtained by Spray drying, Int. J.Pharm., 271, 281-286.
Prasad, N.S., 1997, Spectrophotometric Estimation of Curcumin, Indian Drugs,34(4), 227-228.
Rohman, A., 2009, Kromatografi Untuk Analisis Obat, Cetakan I, Graha Ilmu,Yogyakarta, pp. 227.
Roth, H.J., dan Blaschke, G., 1994, Pharmaceutical Analysis, diterjemahkan olehSarjoko Kisman dan Slamet Ibrahim, Gadjah Mada University Press,Yogyakarta, pp. 359-361
Rukmana, R., 1999, Kunyit, 13, 17-18, Kanisius, Yogyakarta.
Serajudin, A.T., 1999, Solid Dispersion of Poorly Water-Soluble Drugs: EarlyPromises, Subsequent Problems, and Recent Breakthroughs, J. Pharm.Sci., 88, 1058-1066.
Shargel, L., Wu-Pong, S., dan Yu, A. B. C., 2005, Applied Biopharmaceutics &Pharmacokinetics, 5th Edition, Mc Graw Hill Companies, Singapore, pp.417.
Sharma, D., Soni, M., Kumar, S., Gupta, G.D., 2009, Solubility Enhancement –Eminent Role in Poorly Soluble Drugs, Research J. Pharm. and Tech.,2(2), 220-224.
Sharma, O. P., 1976, Antioxidant activity of Curcumin and Related Compounds,Biochem. Pharmacol., 25 (15), 1811-1812
63
Sharma, R. A., Gescher, A. J., dan Steward, W. P., 2005, Curcumin: The Story SoFar, Eur. J. Cancer, 41, 1955-1968.
Shaw, F.V., 1997, Spray drying as an Alternative Granulation Technique,Handbook of Pharmaceutical Granulation Technology, Vol.81,p. 75-76,
Sinha, S., Ali, M., Baboota, S., Ahuja, A., Kumar, A., dan Ali, J., 2010, SolidDispersion as an Approach for Bioavailability Enhancement of PoorlyWater-Soluble Drug Ritonavir,
Skoog, D.A., West, D.M., Holler, F.J., 1994, Analytical Chemistry, AnIntroduction, 6th Ed, Saunders Collage Publishing, Philadelphia, pp. 403-407.
Sonali, D., Tejal, S., Vaishali, T., dan Tejal, G., 2010, Silymarin-SolidDispersions: Characterization and Influence of Preparation Methods onDissolution, Acta Pharm, 60, 427-443.
Srimal, R. C. dan Dhawan, B. N., 1973, Pharmacology of Diferuloylmethane(Curcumin), a non-steroidal anti-inflamatory agent, J. Pharm.Pharmacol., 25 (6), 447-52.
Srinarong, P., Kouwen, S., Visser, M. R., Hinrichs, W. L. J., dan Frijlink, H.W.,2009, Effect of Drug-Carrier Interaction on Dissolution Behavior ofSolid Dispersion Tablets, Pharmaceutical Development and Technology,1-9.
Sriningsih, Kadarsih, S., dan Sumaryono, W., 2004, Pengeringan Sari BuahMengkudu Secara Spray drying, Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia,Vol.2, No.1, 18-20.
Stankovic, I., 2004, Curcumin, Chemical and Technical Assessment, 61st JECFA.
Sudarsono, 1996, Tumbuhan Obat, PPOT, UGM, Yogyakarta, p.56.
Tonnesen, H. H. dan Karlsen, J., 1985, Studies on Curcumin and Curcuminoids;V. Alkaline Degradation of Curcumin, Z. Lebensm Unters Forsch, 180,132-134
Tonnesen, H.H., Masson, M., dan Loftsson, T., 2002, Studies of Curcumin andCurcuminoids. XXVII. Cyclodextrin Complexation: Solubility, Chemicaland Photochemical Stability, Int. J. Pharm., 244, 127-135.
Waard, H., Hinrichs, W.L., Visser, M.R., Bologna, C., Frijlink, H.W., 2008,Unexpected Differences in Dissolution Behavior of Tablets Prepared
64
From Solid Dispersions With a Surfactant Physically Mixed orIncorporated, Int. J. Pharm., 349, 66-73
Wang, Y. J., Pan, M. H., Cheng, A. L., Lin, L. I., Ho, Y. S., Hsieh, C. Y., dkk.,1997, Stability of Curcumin in Buffer Solutions and Characterization ofIts Degradation Products, J. Pharm. Biomed. Anal., 15 (12), 1867-1876.
65
LAMPIRAN
Lampiran 1. Tabel hasil penimbangan baku kurkumin dan contohperhitungan kadar larutan baku kurkumin
Penimbangan baku kurkumin
Replikasi I
Berat kertas 0,1332 gram
Berat kertas + zat 0,1433 gram
Berat kertas + sisa 0,1334 gram
Berat zat 0,0099 gram
Perhitungan Kadar Larutan Baku Kurkumin
Serbuk kurkumin dilarutkan dalam metanol p.a hingga volume 25,0 mL
Larutan stok kurkumin = = 0,3960 mg/mL
Diambil 1,0 mL larutan stok kurkumin, diencerkan dengan metanol p.a hingga
volume 10,0 mL
Larutan intermediet = 1 mL x 0,3960 mg/mL = c x 10,0 mL
c = 0,0396 mg/mL
Perhitungan Kadar Seri Larutan Baku Kurkumin
1. Dari larutan intermediet diambil 0,4 mL kemudian diencerkan dengan
metanol p.a hingga volume tepat 10,0 mL, sehingga diperoleh kadar:
0,4 mL x 0,0396 mg/mL = c x 10,0 mL
c = 1,584 x 10-3 mg/mL = 1,5840 µg/mL
66
2. Dari larutan intermediet diambil 0,6 mL kemudian diencerkan dengan
metanol p.a hingga volume tepat 10,0 mL, sehingga diperoleh kadar:
0,6 mL x 0,0396 mg/mL = c x 10,0 mL
c = 2,376 x 10-3 mg/mL = 2,3760 µg/mL
3. Dari larutan intermediet diambil 0,8 mL kemudian diencerkan dengan
metanol p.a hingga volume tepat 10,0 mL, sehingga diperoleh kadar:
0,8 mL x 0,0396 mg/mL = c x 10,0 mL
c = 3,168 x 10-3 mg/mL = 3,1680 µg/mL
4. Dari larutan intermediet diambil 1,0 mL kemudian diencerkan dengan
metanol p.a hingga volume tepat 10,0 mL, sehingga diperoleh kadar:
1,0 mL x 0,0396 mg/mL = c x 10,0 mL
c = 3,96 x 10-3 mg/mL = 3,9600 µg/mL
5. Dari larutan intermediet diambil 1,2 mL kemudian diencerkan dengan
metanol p.a hingga volume tepat 10,0 mL, sehingga diperoleh kadar:
1,2 mL x 0,0396 mg/mL = c x 10,0 mL
c = 4,752 x 10-3 mg/mL = 4,7520 µg/mL
67
Lampiran 2. Tabel Data Pengukuran Serapan Seri Larutan Baku Kurkumindan persamaan kurva baku kurkumin
AbsorbansiKadar(mg/mL) Intermediet I Intermediet II Intermediet III
1,584 x 10-3 0,236 0,205 0,2072,376 x 10-3 0,329 0,382 0,3333,168 x 10-3 0,461 0,425 0,4173,960 x 10-3 0,598 0,589 0,5604,752 x 10-3 0,705 0,685 0,697
Persamaan kurva baku
Kurva baku Koefisien korelasi dan regresi Persamaan garis linierI A = -0,017
B = 152,3990r = 0,9981
Y = 152,3990 X -0,017
II A = -0,0096B = 147,3485r = 0,9878
Y = 147,3485 X – 0,0096
III A = -0,04B =152,3990r =0,9966
Y = 152,3990 X – 0,04
68
Lampiran 3. Gambar kurva baku
Kurva Baku I
Kurva Baku II
69
Kurva Baku III
70
Lampiran 4. Data validasi metode analisis
Data dan Contoh Perhitungan Perolehan Kembali
Replikasi AbsorbansiKadarteoritis
(mg/mL)
Kadarterukur
(mg/mL)
%recovery
(%)
Rata-rata %recovery
(%)0,236 1,584 x 10-3 1,6601 x 10-3 104,800,205 1,584 x 10-3 1,4567 x 10-3 91,96I0,207 1,584 x 10-3 1,4698 x 10-3 92,79
96,52
0,461 3,168 x 10-3 3,1365 x 10-3 99,010,425 3,168 x 10-3 2,9003 x 10-3 91,55II0,417 3,168 x 10-3 2,8478 x 10-3 89,89
93,48
0,705 4,752 x 10-3 4,7376 x 10-3 99,700,685 4,752 x 10-3 4,6063 x 10-3 96,93III0,697 4,752 x 10-3 4,6851 x 10-3 98,59
98,41
Contoh perhitungan perolehan kembali (replikasi I)
Kadar terukur merupakan kadar yang diperoleh dengan cara memasukkan nilai
serapan dari hasil pengukuran ke dalam persamaan kurva baku.
Perhitungannya adalah sebagai berikut:
Y = 152,3990 X – 0,017
a. Absorbansi (Y) = 0,236
0,236 = 152,3990 X – 0,017
X = 1,6601 x 10-3 mg/mL
b. Absorbansi (Y) = 0,461
0,461 = 152,3990 X – 0,017
X = 3,1365 x 10-3 mg/mL
c. Absorbansi (Y) = 0,705
0,705 = 152,3990 X – 0,017
X = 4,7376 x 10-3 mg/mL
71
Contoh perhitungan % recovery
% recovery =tungkadarterhi
urkadarterukx 100%
Replikasi I
% recovery = x 100% = 104,80%
% recovery = x 100% = 99,01%
% recovery = x 100% = 99,70%
Rata-rata % recovery = = 101,17%
Rentang % recovery = 93,48% - 101,17%
Dua replikasi lain dihitung dengan cara yang sama.
Data dan Contoh Perhitungan Koefisien Variansi (CV)
Kadar (mg/mL)
Replikasi I Replikasi II Replikasi IIIX SD
CV
(%)
1,6601x10-3 1,4567x10-3 1,4698x10-3 1,5289x10-3 1,1384x10-4 7,44
2,2704x10-3 2,6181x10-3 2,2966x10-3 2,3950x10-3 1,9363x10-4 8,08
3,1365x10-3 2,9003x10-3 2,8478x10-3 2,9615x10-3 1,5378x10-4 5,19
4,0355x10-3 3,9764x10-3 3,7861x10-3 3,9327x10-3 1,3032x10-4 3,31
4,7376x10-3 4,6063x10-3 4,6851x10-3 4,6763x10-3 6,6088x10-5 1,41
72
Perhitungan CV
CV = x 100%
1. CV = x 100% = 7,44%
2. CV = x 100% = 8,08%
3. CV = x 100% = 5,19%
4. CV = x 100% = 3,31%
5. CV= x 100% = 1,41%
Perhitungan Limit of Detection (LOD)
Kadar
(mg/mL)SD
1,584 x 10-3
2,376 x 10-3
3,168 x 10-3
3,960 x 10-3
4,752 x 10-3
1,2523 x 10-3
LOD =
=3990,152
0012523,03x= 2,46 x 10-5 mg/mL
73
Lampiran 5. Contoh Perhitungan Drug load
HPMC E-5 (mg) Kurkumin (mg) Drug load (%b/b)
2000 40 2
4000 40 1
6000 40 0,66
Jumlah kurkumin yang akan diuji sebesar 40 mg.
HPMC E-5 yang digunakan adalah 2000 mg, 4000 mg dan 6000 mg.
Drug load = x 100%
a. Drug load dengan bahan pembawa HPMC E-5 2000 mg adalah:
Drug load = x 100% = 1,96% ≈ 2%
b. Drug load dengan bahan pembawa HPMC E-5 4000 mg adalah:
Drug load = x 100% = 0,99 ≈1%
c. Drug load dengan bahan pembawa HPMC E-5 6000 mg adalah:
Drug load = x 100% = 0,66%
74
Lampiran 6. Data Penimbangan Serbuk Kunyit dan HPMC E-5 UntukPembuatan Dispersi Padat
Pembuatan dispersi padat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5 dengan drug
load 1%
a. Penimbangan serbuk kunyit
Serbuk kunyit yang harus ditimbang jika yang diharapkan didalam
serbuk kunyit tersebut mengandung 40 mg kurkumin dengan jumlah persen
kehilangan 80% (hasil orientasi) maka serbuk kunyit yang harus ditimbang
sebanyak: 350,8772 mg
Replikasi 1(gram)
Replikasi 2(gram)
Replikasi 3(gram)
Berat alumunium foil 0,3081 0,1701 0,2025Berat alumunium + serbukkunyit
1,7127 1,5768 1,6080
Berat alumunium + sisa 0,3091 0,1731 0,2046Berat serbuk kunyit 1,4036 1,4037 1,4034
b. Penimbangan HPMC E-5
Replikasi 1(gram)
Replikasi 2(gram)
Replikasi 3(gram)
Berat alumunium foil 0,3099 0,3061 0,3419Berat alumunium + HPMCE-5
16,3103 16,3037 16,3442
Berat alumunium + sisa 0,3102 0,3072 0,3441Berat zat 16,0001 16,0001 16,0001
75
c. Dispersi padat hasil spray drying
Replikasi 1(gram)
Replikasi 2(gram)
Replikasi 3(gram)
Berat alumunium 0,5855 0,6178 0,6328Berat alumunium + serbukdispersi padat
3,2810 3,5216 4,5115
Berat serbuk dispersi padat 2,6955 2,9038 3,8787
Masing – masing dispersi padat dibuat untuk 4 kapsul maka serbuk dispersi padat
hasil spray drying untuk satu kapsul adalah:
Replikasi 1 = = 0,673875 g = 673,875 mg
Replikasi 2 = = 0,72595 g = 725,95 mg
Replikasi 3 = = 0,969675 g = 969,675 mg
76
Lampiran 7. Data Contoh Perhitungan Serbuk Kunyit dan HPMC E-5 yangHarus Ditimbang Untuk Pembuatan Serbuk Campuran Fisik
Contoh pembuatan serbuk campuran fisik dengan drug load 1%.
a. Replikasi 1
% kehilangan = x 100%
= x 100%
= 84,51 %
Jumlah serbuk kunyit yang ditimbang untuk pembuatan dispersi padat = 1,4036 g
Hasil serbuk dispersi padat = 2,6955 g
Jumlah serbuk kunyit yang yang hilang = 1,4036 x 84,51 % = 1,1862 g
Maka jumlah serbuk kunyit yang terdapat dalam serbuk dispersi padat hasil spray
dried
= 1,4036 g – 1,1862 g
= 0,2174 g = 217,4 mg
Serbuk kunyit yang digunakan mengandung 97,20% kurkuminoid dan didalam
kurkuminoid mengandung 60% kurkumin maka jumlah kurkumin yang terdapat
di dalam serbuk dispersi padat hasil spray drying:
= 217,4 mg x 0,6 x 0,9720
= 126,7877 mg
Karena dalam formula pembuatan dispersi padat masing-masing dikalikan dengan
4 maka kurkumin yang ada dalam satu formula = = 31,6970 mg
Pada uji disolusi serbuk dispersi padat diambil sebanyak 190 mg.
Kurkumin yang ada dalam 190 mg serbuk dispersi padat adalah:
= x 31,6970 mg = 8,9370 mg
Jumlah serbuk kunyit yang harus ditimbang
= 8,9370 mg : 0,9720 ; 0,6
= 15,3241 mg
77
Maka serbuk campuran fisik kurkumin-HPMC E5 drug load 2% dibuat dengan
menimbang:
- Serbuk kunyit = 15,3241 mg
- HPMC E5 = 190 mg – 15,3241 mg
= 174,6759 mg
b. Replikasi 2
% kehilangan = x 100%
= x 100%
= 83,32 %
Jumlah serbuk kunyit yang ditimbang untuk pembuatan dispersi padat = 1,4037 g
Hasil serbuk dispersi padat = 2,9038 g
Jumlah serbuk kunyit yang yang hilang = 1,4037 x 83,32 % = 1,1696 g
Maka jumlah serbuk kunyit yang terdapat dalam serbuk dispersi padat hasil spray
dried
= 1,4037 g – 1,1696 g
= 0,2341 g = 234,1 mg
Serbuk kunyit yang digunakan mengandung 97,20% kurkuminoid dan didalam
kurkuminoid mengandung 60% kurkumin maka jumlah kurkumin yang terdapat
di dalam serbuk dispersi padat hasil spray drying:
= 234,1 mg x 0,6 x 0,9720
= 136,5271 mg
Karena dalam formula pembuatan dispersi padat masing-masing dikalikan dengan
4 maka kurkumin yang ada dalam satu formula = = 34,1318 mg
Pada uji disolusi serbuk dispersi padat diambil sebanyak 190 mg.
Kurkumin yang ada dalam 190 mg serbuk dispersi padat adalah:
= x 34,1318 mg = 8,9332 mg
Jumlah serbuk kunyit yang harus ditimbang
78
= 8,9332 mg : 0,9720 ; 0,6
= 15,3176 mg
Maka serbuk campuran fisik kurkumin-HPMC E5 konsentrasi 2% dibuat dengan
menimbang:
- Serbuk kunyit = 15,3176 mg
- HPMC E5 = 190 mg – 15,3176 mg
= 174,6824 mg
c. Replikasi 3
% kehilangan = x 100%
= x 100%
= 77,71 %
Jumlah serbuk kunyit yang ditimbang untuk pembuatan dispersi padat = 1,4034 g
Hasil serbuk dispersi padat = 3,8787 g
Jumlah serbuk kunyit yang yang hilang = 1,4034 x 77,71 % = 1,0906 g
Maka jumlah serbuk kunyit yang terdapat dalam serbuk dispersi padat hasil spray
dried
= 1,4034 g – 1,0906 g
= 0,3128 g = 312,8 mg
Serbuk kunyit yang digunakan mengandung 97,20% kurkuminoid dan didalam
kurkuminoid mengandung 60% kurkumin maka jumlah kurkumin yang terdapat
di dalam serbuk dispersi padat hasil spray drying:
= 312,8 mg x 0,6 x 0,9720
= 182,4250 mg
Karena dalam formula pembuatan dispersi padat masing-masing dikalikan dengan
4 maka kurkumin yang ada dalam satu formula = = 45,6063 mg
Pada uji disolusi serbuk dispersi padat diambil sebanyak 190 mg.
79
Kurkumin yang ada dalam 190 mg serbuk dispersi padat adalah:
= x 45,6063 mg = 8,9362 mg
Jumlah serbuk kunyit yang harus ditimbang
= 8,9362 mg : 0,9720 ; 0,6
= 15,3227 mg
Maka serbuk campuran fisik kurkumin-HPMC E5 konsentrasi 2% dibuat dengan
menimbang:
- Serbuk kunyit = 15,3227 mg
- HPMC E5 = 190 mg – 15,3227 mg
= 174,6773 mg
Perhitungan jumlah serbuk kunyit dan HPMC E-5 yang harus ditimbang untuk
pembuatan serbuk campuran fisik dengan drug load 2% dan 0,66% dihitung
dengan cara yang sama seperti diatas.
80
Lampiran 8. Tabel persen kurkumin terdisolusi dan cara perhitungannya pada serbuk dispersi padat isolat ekstrak rimpang
kunyit – HPMC E-5
Tabel pengukuran absorbansi kurkumin masing-masing drug load
Menitke-
Absorbansi dispersi padat dengandrug load 2%
Absorbansi dispersi padat dengandrug load 1%
Absorbansi dispersi padat dengandrug load 0,66%
Replikasi1
Replikasi2
Replikasi3
Replikasi1
Replikasi2
Replikasi3
Replikasi1
Replikasi2
Replikasi3
5 0,003 0,01 0,001 0,012 0,019 0,012 0,024 0,016 0,017
10 0,02 0,002 0,013 0,023 0,013 0,021 0,017 0,016 0,018
20 0,015 0,005 0,015 0,029 0,016 0,021 0,017 0,015 0,02
30 0,025 0,017 0,007 0,031 0,022 0,02 0,019 0,015 0,022
45 0,033 0,021 0,008 0,021 0,023 0,017 0,021 0,023 0,022
60 0,057 0,023 0,006 0,023 0,026 0,019 0,025 0,024 0,024
90 0,058 0,024 0,024 0,026 0,027 0,021 0,047 0,033 0,033
120 0,068 0,024 0,026 0,03 0,026 0,03 0,074 0,039 0,04
150 0,077 0,029 0,014 0,038 0,033 0,03 0,049 0,039 0,037
180 0,085 0,031 0,014 0,038 0,033 0,03 0,04 0,04 0,032
81
Tabel perhitungan persentase kurkumin terdisolusi masing-masing drug load
Menitke-
Drug load 2% Drug load 1% Drug load 0,66%
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
5 0,71 0,96 0,64 1,92 2,38 1,92 3,95 3,18 3,28
10 1,32 0,68 1,07 2,64 1,98 2,51 3,28 3,18 3,37
20 1,14 0,78 1,14 3,04 2,18 2,51 3,28 3,09 3,57
30 1,50 1,21 0,86 3,17 2,58 2,45 3,47 3,09 3,76
45 1,78 1,36 0,89 2,51 2,64 2,25 3,67 3,86 3,76
60 2,64 1,43 0,82 2,64 2,84 2,38 4,05 3,95 3,95
90 2,68 1,46 1,46 2,84 2,91 2,51 6,17 4,82 4,82
120 3,03 1,46 1,54 3,11 2,84 3,11 8,78 5,40 5,50
150 3,36 1,64 1,11 3,63 3,31 3,11 6,37 5,40 5,21
180 3,64 1,71 1,11 3,63 3,31 3,11 5,50 5,50 4,72
Tabel rata-rata dan nilai SD %kurkumin terdisolusi masing-masing drug load
Menitke-
rata-rata % kurkuminterdisolusi drug load 2%
SD rata-rata % kurkuminterdisolusi drug load 1%
SD rata-rata % kurkuminterdisolusi drug load 0,66%
SD
5 0,77 0,17 2,07 0,27 3,47 0,42
10 1,02 0,32 2,38 0,35 3,28 0,10
20 1,02 0,21 2,58 0,43 3,31 0,24
82
30 1,19 0,32 2,73 0,39 3,44 0,34
45 1,34 0,45 2,47 0,20 3,76 0,10
60 1,63 0,93 2,62 0,23 3,99 0,06
90 1,87 0,70 2,75 0,21 5,27 0,78
120 2,01 0,89 3,02 0,15 6,56 1,92
150 2,03 1,17 3,35 0,27 5,66 0,62
180 2,15 1,32 3,35 0,27 5,24 0,45
Contoh perhitungan kadar kurkumin dalam dispersi padat isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5 dengan drug load 2%
Misalnya pada menit ke-5, nilai absorbansi = 0,003
Y = 152,3990 X – 0,017
0,003 = 152,3990 X – 0,017
X = 0,00013123 mg/mL
Kadar kurkumin dalam 5 mL medium disolusi, adalah:
= 0,00013123 mg/mL x 5 mL
= 0,00065615 mg
Kadar kurkumin dalam 900 mL medium disolusi, adalah:
= 0,00065615 mg x 900 mL / 5mL
= 0,1181 mg
% kurkumin terdisolusi = x 100% = 0,71%
Untuk perhitungan % kurkumin terdisolus dua proporsi drug load yang lain dihitung dengan cara yang sama.
84
Lampiran 9. Tabel persen kurkumin terdisolusi pada serbuk campuran fisik isolat ekstrak rimpang kunyit – HPMC E-5
Tabel pengukuran absorbansi kurkumin masing-masing drug load
Menitke-
Absorbansi serbuk campuran fisikdengan drug load 2%
Absorbansi serbuk campuran fisikdengan drug load 1%
Absorbansi serbuk campuran fisikdengan drug load 0,66%
Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3
5 0,002 0,086 0,018 0 0,009 0 0,008 0 0
10 0,004 0,009 0,023 0 0,006 0 0 0,02 0,012
20 0,005 0,013 0,02 0 0,011 0 0,009 0 0
30 0,005 0,023 0,028 0 0,005 0 0 0,013 0,012
45 0,018 0,016 0,028 0 0,008 0 0,018 0,001 0
60 0,007 0,02 0,031 0 0,007 0 0 0,015 0,019
90 0,009 0,061 0,028 0 0,014 0 0,021 0,05 0
120 0,013 0,043 0,04 0 0,009 0 0,001 0,017 0,019
150 0,027 0,021 0,043 0 0,016 0,005 0,025 0,012 0,003
180 0,029 0,028 0,052 0 0,019 0,011 0,011 0,025 0,024
85
Tabel perhitungan persentase kurkumin terdisolusi masing-masing drug load
Menitke-
Drug load 2% drug load 1% Drug load 0,66%
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
%kurkuminterdisolusi
5 0,68 3,67 1,25 1,12 1,72 1,12 2,41 1,64 1,64
10 0,75 0,93 1,43 1,12 1,52 1,12 1,64 3,57 2,80
20 0,79 1,07 1,32 1,12 1,85 1,12 2,51 1,64 1,6485
30 0,79 1,43 1,61 1,12 1,45 1,12 1,64 2,89 2,80
45 1,25 1,18 1,61 1,12 1,65 1,12 3,38 1,74 1,64
60 0,86 1,32 1,71 1,12 1,59 1,12 1,64 3,09 3,47
90 0,93 2,78 1,61 1,12 2,05 1,12 3,67 6,46 1,64
120 1,07 2,14 2,03 1,12 1,72 1,12 1,74 3,28 3,47
150 1,57 1,36 2,14 1,12 2,18 1,45 4,05 2,80 1,93
180 1,64 1,61 2,46 1,12 2,38 1,85 2,70 4,05 3,95
86
Tabel rata-rata dan SD % kurkumin terdisolusi
Menitke-
rata-rata % kurkuminterdisolusi drug load 2%
SD rata-rata % kurkuminterdisolusi drug load 1%
SD rata-rata % kurkuminterdisolusi drug load 0,66%
SD
5 1,87 1,59 1,32 0,34 1,90 0,45
10 1,04 0,35 1,26 0,23 2,67 0,97
20 1,06 0,27 1,37 0,42 1,93 0,50
30 1,27 0,43 1,23 0,19 2,44 0,70
45 1,34 0,23 1,30 0,31 2,25 0,98
60 1,30 0,43 1,28 0,27 2,73 0,97
90 1,77 0,94 1,43 0,53 3,92 2,42
120 1,75 0,59 1,32 0,34 2,83 0,95
150 1,69 0,41 1,59 0,54 2,93 1,07
180 1,90 0,49 1,78 0,63 3,57 0,75
87
Lampiran 10. Uji normalitas data disolusi kurkumin dengan drug load0,66%,1% dan 2%
Hipotesis
H1 : data normal
Ho : data tidak normal
Ho ditolak bila nilai p > 0,05
Uji normalitas data disolusi kurkumin dengan drug load 0,66%
Data disolusikurkumin menit ke-
P (Shapiro-Wilk)Dispersi padat Serbuk campuran fisik
5 0,229 0,00010 0,942 0,77820 0,771 0,00030 0,852 0,12345 0,942 0,09860 0,000 0,37890 0,000 0,827120 0,050 0,192150 0,293 0,803180 0,000 0,127
Apabila kedua nilai p yang diperoleh > 0,05 maka Ho ditolak, berarti distribusidata normal.
Uji normalitas data disolusi kurkumin dengan drug load 1%
Data disolusikurkumin menit ke-
P (Shapiro-Wilk)Dispersi padat Serbuk campuran fisik
5 0,000 0,00010 0,357 0,00020 0,745 0,00030 0,325 0,00045 0,637 0,00060 0,856 0,00090 0,314 0,000120 0,747 0,590150 0,747 0,590180 0,747 0,825
Apabila kedua nilai p yang diperoleh > 0,05 maka Ho ditolak, berarti distribusidata normal.
88
Uji normalitas data disolusi kurkumin dengan drug load 2%
Data disolusi kurkuminmenit ke-
P (Shapiro-Wilk)Dispersi padat Serbuk campuran fisik
5 0,400 0,34510 0,760 0,49320 0,000 0,98330 0,897 0,40245 0,938 0,29160 0,641 0,90990 0,000 0,710120 0,086 0,179150 0,434 0,503180 0,437 0,059Apabila kedua nilai p yang diperoleh > 0,05 maka Ho ditolak, berarti distribusidata normal.
Jika data berdistribusi normal maka digunakan uji komparatif yaitu, uji T-tidakberpasangan dan jika data berdistribusi tidak normal digunakan uji Mann-Whitney.
Lampiran 11. Data nilai signifikansi disolusi kurkumin pada dispersi padatdan serbuk campuran fisik
Disolusi menit ke- Signifikansi (p)Drug load 0,66% Drug load 1% Drug load 2%
5 0,046 0,043 0,35410 0,393 0,046 0,96420 0,046 0,046 0,82530 0,116 0,046 0,79545 0,114 0,046 0,99260 0,046 0,046 0,61390 0,507 0,046 0,825120 0,039 0,016 0,693150 0,028 0,016 0,669180 0,046 0,036 0,782
Parameter Nilai Interpretasip < 0,05
>0,05
Terdapat perbedaan yangbermakna antara duavariabel yang diujiTidak terdapat perbedaanyang bermakna antara duavariabel yang diuji
89
Lampiran 12. Hasil uji normalitas proporsi drug load dan persentasekurkumin terdisolusi dalam waktu 60 menit
90
Lampiran 13. Uji korelasi Spearman proporsi drug load dan persentasekurkumin terdisolusi dalam waktu 60 menit
Parameter Nilai Interpretasi
Kekuatankorelasi (r)
0,000 – 0,1990,20 – 0,3990,40 – 0,5990,60 – 0,790,80 – 1,000
Sangat lemahLemahSedangKuatSangat kuat
Nilai p
p < 0,05
p > 0,05
Terdapat korelasi yang bermakna antaradua variabel yang diujiTidak terdapat korelasi yang bermaknaantara dua variabel yang diuji
Arah korelasi
+ (positif)
-(negatif)
Searah, semakin besar nilai satu variabelsemakin besar pula nilai variabel lainnyaBerlawanan arah, semakin besar nilaisatu variabel, semakin kecil nilai variabellainnya
91
Lampiran 14. Hasil uji regresi linear antara proporsi drug load dengandisolusi kurkumin
92
Lampiran 15. Gambar spray dryer dan alat uji disolusi
Spray dryer
(untuk membuat serbuk dispersi padat)
Alat uji disolusi tipe 2 (paddle)
93
Lampiran 16. Pernyataan jaminan keaslian bahan kurkumin standar hasilsintesis
94
Lampiran 17. Certificate of Analysis serbuk kunyit Curcuma domestica C 95
95
Lampiran 18. Hasil scaning panjang gelombang maksimum
Intermediet I, konsentrasi rendah (1,584 x 10-3 mg/mL)
Intermediet I, konsentrasi tengah (3,168 x 10-3 mg/mL)
96
Intermediet I, konsentrasi tinggi (4,752 x 10-3 mg/mL)
Intermediet II, konsentrasi rendah (1,584 x 10-3 mg/mL)
97
Intermediet II, konsentrasi tengah (3,168 x 10-3 mg/mL)
Intermediet II, konsentrasi tinggi (4,752 x 10-3 mg/mL)
98
Intermediet III, konsentrasi rendah (1,584 x 10-3 mg/mL)
Intermediet III, konsentrasi tengah (3,168 x 10-3 mg/mL)
99
Intermediet III, konsentrasi tinggi (4,752 x 10-3 mg/mL)
100
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi yang berjudul “PengaruhProporsi Drug Load Terhadap DisolusiDispersi Padat Spray Dried Isolat EkstrakRimpang Kunyit (Curcuma domestica C 95) -HPMC E-5” ini bernama lengkap Reka Sudi,dilahirkan di Lahat pada tanggal 7 September1989. Penulis merupakan putri sulung daripasangan Bapak Sudi dan Ibu Eva, dan memilikidua adik yang bernama Hera Sudi dan DesionSudi. Penulis telah menyelesaikan masa studinyadi TK Santo Yosef Lahat (1994-1995), SD SantoYosef Lahat (1995-2001), SLTP Santo YosefLahat (2001-2004), SMA Santo Yosef Lahat(2004-2007) dan melanjutkan kuliah di FakultasFarmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta(angkatan 2007). Selama menjadi mahasiswa,
penulis pernah aktif dalam berbagai kegiatan dan organisasi kemahasiswaan,diantaranya menjadi anggota BEMF Farmasi Divisi Kesejahteraan Mahasiswaperiode 2007-2008 dan panitia TITRASI (2008). Selain itu penulis juga pernahmenjadi asisten Praktikum Farmakologi Dasar (2010).
