OPTIMASI ASAM TARTRAT DAN NATRIUM BIKARBONAT DALAM … · OPTIMASI ASAM TARTRAT DAN NATRIUM...
Transcript of OPTIMASI ASAM TARTRAT DAN NATRIUM BIKARBONAT DALAM … · OPTIMASI ASAM TARTRAT DAN NATRIUM...
OPTIMASI ASAM TARTRAT DAN NATRIUM BIKARBONAT
DALAM FORMULA GRANUL EFFERVESCENT
EKSTRAK HERBA PEGAGAN (Centellae asiaticae Herba)
DENGAN METODE DESAIN FAKTORIAL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh
Ignatius Alfa Mardhiprasetya
NIM: 058114095
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2009
ii
OPTIMASI ASAM TARTRAT DAN NATRIUM BIKARBONAT
DALAM FORMULA GRANUL EFFERVESCENT
EKSTRAK HERBA PEGAGAN (Centellae asiaticae Herba)
DENGAN METODE DESAIN FAKTORIAL
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh
Ignatius Alfa Mardhiprasetya
NIM: 058114095
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2009
iii
iv
seggenap keemerdek
a
y
Perg
“Ambil
kaanku, i
apa saja y
ang telah
Kep
semua k
seg
gunakan
cin
sebab su
ah ya Tu
ingatank
yang kup
Eng
h membe
pada-Mu
kupersem
galanya i
nlah itu m
Beril
ta-Mu da
udah cuk
v
uhan dan
ku, budik
punyai d
kaulah
erikan it
-lah, ya T
mbahkan
itu milik
menurut
lah aku
an rahm
kuplah it
n terimala
ku serta s
dan kumi
u kepada
Tuhan,
n kemba
k-Mu.
kehenda
at-Mu
tu bagiku
Kupers
Tuhan
Ayah B
Sahaba
Almam
ah
segenap
iliki
aku.
li;
ak-Mu.
u.”
(
sembahka
yang mah
Bunda terc
t setia,
materku
kehenda
(St. Ignat
an untuk:
ha kasih,
cinta,
akku;
ius L.)
:
vi
vii
KATA PENGANTAR
Syukur kepada Allah Yang Mahakasih atas kasih karunia dan spirit ilahi yang
mengalir tiada henti sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“Optimasi Asam Tartrat dan Natrium Bikarbonat dalam Formula Granul Effervescent
Ekstrak Herba Pegagan (Centellae asiaticae Herba) dengan Metode Desain
Faktorial” sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) di
Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Penulis mengucapkan syukur dan terima kasih kepada semua pihak yang
telah membantu proses penyusunan skripsi ini, khususnya:
1. Ayah dan Bunda tercinta atas kasih sayang, doa dan ruang hatinya.
2. Fakultas Farmasi dan Civitas Akademika Universitas Sanata Dharma yang telah
meletakkan dasar spiritualitas ignasian; nilai-nilai humanitas dan pengembangan
kesadaran ilmiah.
3. Rita Suhadi, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata
Dharma Yogyakarta.
4. Agatha Budi Susiana Lestari, M.Si, Apt dan Yohanes Dwiatmaka, M.Si selaku
dosen pembimbing yang telah memberikan perhatian, bimbingan, motivasi dan
pendampingan selama proses penelitian dan penyusunan skripsi; memfasilitasi
diperolehnya standar ekstrak herba pegagan, sehingga penulis tidak hanya dapat
menyelesaikan skripsi dengan baik, tetapi juga mengembangkan kesadaran
ilmiah.
5. Dr. C J Soegihardjo yang telah memberi standar asiatikosida.
viii
6. Bayu, rekan kerja penulis, atas kerja sama, bantuan dan dukungan selama proses
penyusunan skripsi.
7. Laboran atas bantuan selama penulis menempuh perkuliahan dan proses
penyusunan skripsi di Fakultas Farmasi Univeristas Sanata Dharma.
8. Lina Chang, Yokhe dan Fian yang membantu penulis tetap memiliki semangat
berjuang, tetap bertahan dan terus berkembang di Fakultas Farmasi tercinta.
9. Reno, Bagas dan semua teman-teman kost atas semua hal yang kita bagi
bersama.
10. Teman-teman mahasiswa farmasi atas kerjasama dan persahabatan yang tulus
sehingga menciptakan suasana kekeluargaan yang nyaman.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sempurna. Penulis
mengharapkan kritik dan saran untuk penyempurnaan skripsi ini dan pengembangan
ilmu pengetahuan dan teknologi. Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi
perkembangan ilmu kefarmasian yang berpijak pada nilai-nilai humanitas.
Penulis
ix
x
DAFTAR ISI
HALAMAN SAMPUL …………………………..….…………………...
HALAMAN JUDUL ...………………………………………………….
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ………………………...
HALAMAN PENGESAHAN …………………………………………..
HALAMAN PERSEMBAHAN ………………………………………..
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH
UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ……………………………….
KATA PENGANTAR ………………………………………...………..
PERNYATAAN KEASLIAAN KARYA ……………………...………
DAFTAR ISI ……………………………………………………...…….
DAFTAR TABEL ….……………………………………………….......
DAFTAR GAMBAR ………………………………...………………….
DAFTAR LAMPIRAN ………………………………………………....
INTISARI ………………………………………...……………………..
ABSTRACT ………………………………………………………………
BAB I. PENGANTAR ..……………………………………………......
A. Latar Belakang …………………………………………………
1. Perumusan masalah …………………………………….....
2. Keaslian penelitian ……………………………………….
3. Manfaat penelitian ………………………………………...
B. Tujuan Penelitian .…...…………………………....……………
i
ii
iii
iv
v
vi
viii
ix
xiv
xv
xvi
xvii
xviii
xix
1
1
3
3
3
4
xi
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ….……………………………...
A. Herba Pegagan .………………………...……………...…….…..
1. Asal simplisia …………………………..….…………….....
2. Kandungan kimiawi ……………………………………….
3. Penggunaan ………………………………………………...
4. Dosis ………………………………………………………..
5. Toksikologi …………………………………………………
B. Ekstrak ………………………………………………………….
C. Maserasi ………………………………………………………..
D. Image J …………………………………………………………
E. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ……………………………….
F. Sediaan Granul Effervescent …………………………………...
1. Sumber asam …………………………………………….
2. Sumber basa ………………………………………………..
3. Bahan pengisi ………………………………………………
4. Bahan pengikat ……………………………………………..
5. Bahan pemanis ……………………………………………..
G. Granulasi Basah ………..……………………………………….
H. Sifat Fisik Granul Effervescent ………………………………...
1. Kecepatan alir ………………………………………………
2. Waktu larut …………………………………………………
3. Kandungan lembab granul …………………………………
4. pH larutan ……………………………………..……………
5
5
5
5
6
6
6
7
7
8
9
10
11
11
12
12
13
13
14
14
15
15
15
xii
I. Desain Faktorial ………………………………………………..
J. Landasan Teori …………………………………………………
K. Hipotesis Penelitian ………...…………………………………..
BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ……………………………
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ………………………………..
B. Variabel penelitian, Keterbatasan Penelitian dan Definisi
Operasional ………………………………………………….….
1. Variabel penelitian ………………………………………..
2. Keterbatasan Penelitian ………………………………....
3. Definisi operasional …………..…………………...………..
C. Bahan Penelitian dan Alat Penelitian …………………………..
1. Bahan penelitian …………..………………………..………..
2. Alat penelitian …………..……….…………………………..
D. Tata Cara Penelitian ……………………………………………
1. Pembuatan serbuk simplisia herba pegagan …………...….
2. Ekstraksi herba pegagan …………………….……...…….
3. Standarisasi ekstrak herba pegagan ….…………..………
4. Penentuan dosis …………………………………...………
5. Penentuan level rendah dan level tinggi asam tartrat dan
natrium bikarbonat …………………………….….………..
6. Optimasi formula granul effervecent ekstrak herba pegagan
dengan kombinasi asam tartrat dan natrium bikarbonat
………………………………………………………………
16
18
19
20
20
20
20
21
21
22
22
22
22
22
23
23
25
25
26
xiii
7. Pembuatan granul effervescent ekstrak herba pegagan …....
8. Uji sifat fisik granul ……...………………………………..
9. Penentuan persamaan dan contour plot sifat fisik granul .….
E. Analisis Hasil …………………………………………………..
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ……………………………...
A. Pembuatan Serbuk Simplisia Herba Pegagan …………………..
B. Hasil Ekstraksi Herba Pegagan …………………………..…….
C. Hasil Standarisasi Ekstrak Herba Pegagan ………......................
1. Hasil uji organoleptis …………………….….…….………
2. Hasil uji daya lekat …………….....…………..……………
3. Hasil uji viskositas ……………………….……..…………
4. Hasil uji kandungan lembab …………….……..………….
5. Hasil uji kualitatif ………………….…..…..……....……..
6. Hasil penetapan kadar asiatikosid …………...……………
D. Pembuatan Granul Effervescent Ekstrak Herba Pegagan .............
E. Hasil Uji Sifat Fisik Granul Effervescent ………...…………….
1. Uji kecepatan alir ………………………..…………...…..
2. Uji kandungan lembab ……………….….………...……..
3. Uji waktu larut …………………………..……………….
4. Uji pH larutan ……………………………………………..
F. Optimasi Formula ………………………………………………
1. Kecepatan alir ………………………………...………….
2. Kandungan lembab ……………………...………………..
27
28
29
29
31
31
31
33
34
34
35
35
36
38
38
40
41
44
47
49
51
51
52
xiv
3. Waktu larut ………………………………...……………...
4. pH larutan ………………………………...………………
5. superimposed contour plot …………….………...……….
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ………………………………..
A. Kesimpulan ……………………………………………………
B. Saran …………………………………………………………...
DAFTAR PUSTAKA …………………………………………...……...
LAMPIRAN …………………………………………………………....
BIOGRAFI PENULIS ………………………………………………....
53
54
55
57
57
57
58
61
87
xv
DAFTAR TABEL
Tabel I Rancangan Percobaan Desain Faktorial dengan Dua Faktor
dan Dua Level ……………….………………………………
Tabel II Level Rendah dan Tinggi Sumber Asam dan Basa yang
Digunakan ...............................................................................
Tabel III Formula Granul Effervescent Ekstrak Herba Pegagan ...........
Tabel IV Organoleptis Ekstrak Herba Pegagan .....................................
Tabel V Data Daya Lekat, Viskositas, Kandungan Lembab dan Kadar
Asiatikosid ..............................................................................
Tabel VI Hasil Deteksi Standar Asiatikosid dan Asiatikosid dalam
Ekstrak Herba Pegagan dengan KLT ………………………
Tabel VII Hubungan antara Kadar Asiatikosid Baku dengan Luas Area
Bercak ………………………...………………………...…...
Tabel VIII Data Sifat Fisik Granul Effervescent ………...……………..
Tabel IX Hasil Perhitungan Efek Berdasarkan Desain Faktorial ….......
Tabel X Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon Kecepatan Alir
Granul ……………………………………………………….
Tabel XI Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon Kandungan
Lembab Granul ……………..……………………………….
Tabel XII Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon Waktu Larut
Granul ………………………………………………….....…
Tabel XIII Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon pH Larutan
Granul …………………………………………………....…
17
26
26
33
34
37
38
41
41
43
46
48
50
xvi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Struktur Asiatikosid ………………………………...………
Gambar 2 Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b)
terhadap Kecepatan Alir Granul ……………………………
Gambar 3 Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b)
terhadap Kandungan Lembab Granul ………………………
Gambar 4 Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b)
terhadap Waktu Larut Granul ………………………………
Gambar 5 Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b)
terhadap pH Larutan ………………………..……….………
Gambar 6 Contour Plot Kecepatan Alir Granul Effervescent ………….
Gambar 7 Contour Plot Kandungan Lembab Granul Effervescent …...
Gambar 8 Contour Plot Waktu Larut Granul Effervescent …………….
Gambar 9 Contour Plot pH Larutan ………………………………...….
Gambar 10 Contour Plot Super Imposed ………………...………………
5
42
45
47
49
52
53
54
55
56
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Surat Keterangan Resmi Simplisia Herba Pegagan ……….....
Lampiran 2 Notasi dan Formula Desain Faktorial ………………………
Lampiran 3 Data Pengujian Ekstrak ……………...……………………...
Lampiran 4 Data Penetapan Kadar Asiatikosida ……………...…………
Lampiran 5 Data Sifat Fisik Granul …………………...………………...
Lampiran 6 Perhitungan Desain Faktorial …………………...………….
Lampiran 7 Perhitungan Yate’s Treatment …………………...………….
Lampiran 8. Dokumentasi ……………………...…………….…………..
61
62
63
64
65
67
74
83
xviii
INTISARI
Penelitian ini menggunakan kombinasi asam tartrat dan natrium bikarbonat
sebagai eksipien dalam granul effervescent ekstrak herba pegagan (Centellae asiaticae Herba) dan diharapkan dapat menghasilkan granul effervescent dengan sifat yang memenuhi persyaratan. Pada penelitian ini digunakan desain faktorial dengan dua faktor dan dua level.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui faktor asam tartrat, natrium bikarbonat, atau interaksi keduanya yang berpengaruh dominan terhadap sifat fisik granul, serta mengetahui area komposisi optimum campuran asam tartrat dan natrium bikarbonat yang dapat menghasilkan sifat fisik granul effervescent yang dikehendaki.
Sifat fisik granul effervescecent yang diuji adalah kecepatan alir (>10 g/detik), waktu larut granul (<150 detik), kandungan lembab granul (≤0,99%) dan pH larutan (5-7). Hasil penelitian menunjukkan asam tartrat memberi efek dominan pada waktu larut granul effervescent. Natrium bikarbonat memberi efek dominan pada pH larutan dan kandungan lembab granul. Interaksi asam tartrat-natrium bikarbonat memberi efek dominan pada kecepatan alir granul. Area pada contour plot super imposed diduga merupakan kombinasi optimum asam tartrat dan natrium bikarbonat terbatas pada level yang diteliti.
Kata kunci: granul effervescent, asam tartrat, natrium bikarbonat, desain faktorial dan herba pegagan (Centellae asiaticae Herba).
xix
ABSTRACT
This research applied combination of tartaric acid and sodium bicarbonate as
excipient to produce effervescent granule of Centellae asiaticae Herba extract with certain physical characteristics. The research used factorial design method with two factors and two levels.
The aims of this research were to observe dominant factor and the interaction effect between tartaric acid and sodium bicarbonate, to find out the optimal area of tartaric acid and sodium bicarbonate mix to produce effervescent granul which fulfill the granul requirements.
The physical characteristics of effervescent granule, evaluated were flow rete (>10 g/second), dissolve time (<150 second), moisture content (≤0,99%) and solution pH (5-7). The result showed that tartaric acid dominant in dissolve time. Sodium bicarbonate dominant in solution pH and moisture content. The interaction tartaric acid-sodium bicarbonate dominant in flow rate. The area in contour plot super imposed was supposed as the optimum combination of tartaric acid and sodium bicarbonate in the tested level.
Key word: effervescent granules, tartaric acid, sodium bicarbonat, factorial design and Centellae asiaticae Herba.
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Penyakit degeneratif dewasa ini menjadi salah satu momok penyakit yang
implikasinya sangat mempengaruhi kualitas dan produktivitas seseorang. Apabila
tidak segera ditangani dengan tepat, penyakit ini dapat menyebabkan kondisi
komplikatif yang lebih parah. Sebagai langkah antisipatif dibutuhkan tindakan
preventif sejak dini, dalam proses perkembangannya, masyarakat mulai melihat
sediaan obat alam sebagai alternatif terapi dengan efek samping yang minimal dan
lebih aman dibanding obat-obat sintesis.
Banyak dilakukan usaha eksplorasi untuk mengembangkan obat dari bahan
alam terutama dari kekayaan hayati di Indonesia. Merupakan hal positif jika
keanekaragaman hayati Indonesia menjadi kekayaan bagi anak bangsa sendiri.
Penelitian pada salah satu bahan obat alam lokal dilakukan, yaitu herba pegagan atau
kaki kuda (Centellae asiaticae Herba). Ekstrak herba pegagan mengandung zat aktif
saponin triterpen pentasiklis, asiatikosid. Zat ini diketahui memiliki aktivitas yang
dapat digunakan untuk penanganan penyakit degeneratif melalui perbaikan kualitas
pembuluh darah. Berbagai uji klinis menunjukkan pemakaian untuk chronical
venous insufficiency dan varicose veins. Penelitian pada subjek dengan penyakit
jantung dan tekanan darah tinggi yang mengkonsumsi herba pegagan menunjukkan
penurunan signifikan pada tekanan darah diastolik dibandingkan pada subjek yang
diberi placebo (Anonim, 2008b).
2
Pemanfaatan ekstrak ini memerlukan pemakaian jangka panjang sehingga
perlu dibuat dalam bentuk sediaan yang nyaman bagi pasien. Sediaan granul
effervescent diharapkan dapat menutupi rasa ekstrak herba pegagan yang kurang
enak sehingga memberi kenyamanan bagi pasien. Effervescent menghasilkan gas
CO2 hasil reaksi sumber asam dan sumber basa karbonat dengan air sehingga
menimbulkan sensasi segar saat dikonsumsi.
Komposisi sumber asam, sumber basa menjadi faktor penting yang
mempengaruhi kualitas sediaan granul effervescent. Penggunaan ekstrak herba
pegagan dalam formula ikut mempengaruhi sifat fisik sediaan. Untuk itu dilakukan
optimasi campuran asam tartrat sebagai sumber asam dan natrium bikarbonat sebagai
sumber basa agar didapat granul effervescent yang memenuhi parameter sifat fisik
granul yang memenuhi syarat, yaitu kecepatan alir, kandungan lembab, waktu larut
dan pH larutan.
Metode yang dipilih untuk mengoptimasi komposisi sumber asam dan
sumber basa dalam sediaan granul effervescent ekstrak herba pegagan adalah desain
faktorial. Metode ini mampu mengevaluasi efek dari berbagai faktor dan interaksinya
secara bersamaan, melihat efek sumber asam, efek sumber basa, atau interaksi
keduanya yang dominan dalam menentukan respon sifat fisik granul effervescent.
Melalui pendekatan ini diperoleh persamaan berdasarkan desain faktorial dan
contour plot untuk mengetahui komposisi optimal campuran dalam level yang diteliti
untuk menghasilkan granul effervescent yang memenuhi persyaratan. Komposisi
optimal tersebut diharap menghasilkan sediaan granul effervescent herba pegagan
yang berkualitas.
3
1. Perumusan masalah
a. Apakah ekstrak herba pegagan dapat diformulasikan menjadi sediaan granul
effervescent yang memenuhi persyaratan kualitas yang dikehendaki?
b. Manakah di antara faktor yang diteliti (asam tartrat, natrium bikarbonat atau
interaksi keduanya) yang dominan terhadap sifat fisik granul effervescent herba
pegagan yang dikehendaki?
c. Apakah ditemukan area komposisi yang optimum dari asam tartrat dan natrium
bikarbonat yang dapat menghasilkan sifat fisik granul effervescent herba pegagan
yang dikehendaki?
2. Keaslian penelitian
Sejauh pustaka yang telah ditelusuri peneliti, penelitian mengenai optimasi
campuran asam tartrat dan natrium bikarbonat dalam formula granul effervescent
ekstrak herba pegagan (Centellae asiaticae Herba) dengan metode desain faktorial
belum pernah dilakukan. Penelitian yang hampir serupa (Wibisono, 2009) yaitu
optimasi asam sitrat dan natrium bikarbonat dalam formula granul effervescent
ekstrak herba pegagan (Centellae asiaticae Herba).
3. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
Penelitian ini diharapkan dapat memberi informasi yang bermanfaat dalam
pengembangan ilmu kefarmasian, khususnya dalam penggunaan campuran asam
4
tartrat dan natrium bikarbonat yang optimal dalam formula sediaan granul
effervescent ekstrak herba pegagan.
b. Manfaat metodologis
Penelitian ini diharapkan memberi pengetahuan tentang komposisi asam
tartrat dan natrium bikarbonat dalam formula sediaan granul effervescent ekstrak
herba pegagan melalui metode optimasi desain faktorial.
c. Manfaat praktis
Penelitian ini dapat digunakan untuk referensi pembuatan sediaan granul
effervescent ekstrak herba pegagan yang nyaman digunakan, praktis, dan berguna
bagi masyarakat.
B. Tujuan Penelitian
1. Mengetahui apakah ekstrak herba pegagan dapat diformulasikan menjadi sediaan
granul effervescent yang memenuhi persyaratan kualitas yang dikehendaki.
2. Mengetahui faktor dari sumber asam dan sumber basa atau interaksinya yang
dominan terhadap sifat fisik granul effervescent herba pegagan.
3. Mengetahui apakah ditemukan area komposisi optimum dari campuran sumber
asam dan sumber basa yang dapat menghasilkan sifat fisik granul effervescent
herba pegagan yang dikehendaki, terbatas pada level yang diteliti.
5
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Herba Pegagan
1. Asal simplisia
Centellae asiaticae Herba yang lebih dikenal dengan herba kaki kuda atau
herba pegagan merupakan simplisia yang berasal dari bagian di atas tanah tanaman
Centella asiatica (L) Urban (Fam. Apiaceae/Umbelliferae) yang biasa dikenal
dengan nama herba kaki kuda atau pegagan (Anonim, 1999).
2. Kandungan kimiawi
O
O O
O O
O
O
HO
OH
OH
HO
OH
OH
HO
HO
HO
OH
OH
OH
Gambar 1. Struktur asiatikosid (Anonim, 2008a)
Asiatikosid merupakan senyawa glikosida triterpenoid yang berasal dari
tanaman pegagan. Asiatikosid dilaporkan memiliki efek yang positif untuk
mengobati penyakit lepra, sebagai antiinflamasi, antimikrobial, dan antioksidan.
Total triterpenoid yang mengandung asiatikosid, asam asiatik, madekosid, dan asam
madekasat secara signifikan dapat memproduksi kolagen dan memperbaiki masalah
kulit (Kormin, 2005). Menurut Heinrich, Barnes, Gibbsons, and Williamson, (2004)
6
herba ini mengandung saponin yang antara lain terdiri dari asiatikosid, brahminosid,
centellosid, madekasoid, dan thankunisid.
Anonim (2008a) menyebutkan bahwa senyawa aktif saponin triterpenoid
pentasiklis, terdiri dari: (1) asiatikosid (ester asam asiatik dan rantai trisakarida yang
terdiri dari ramnosa dan dua glukosa), (2) madekosid (ester asam madekasid dan
rantai trisakarida yang terdiri dari ramnosa dan dua glukosa) dan (3) sejumlah kecil
saponin seperti centellosid, brahmosid serta centellosaponin B, C dan D.
3. Penggunaan
Penelitian secara klinis membuktikan efek penyembuhan terhadap gangguan
vena tangkai bawah. Herba ini dapat meningkatkan sistem kekebalan, memacu
peremajaan, penguat saraf, dan berefek sedatif lemah. Tanaman ini dapat juga
digunakan untuk penyakit kulit, seperti keloid (Heinrich dkk., 2004). Telah
dilakukan juga penelitian pada herba pegagan untuk mengatasi penyakit kerusakan
vena dan varicose veins (Anonim, 2008b).
4. Dosis
Untuk terapi Venous Insufficiency, digunakan 3 sampai 6 tablet Madecassol®
(10 mg TECA) per hari (Anonim, 2008b).
5. Toksikologi
Pada pemakaian secara topikal pernah dilaporkan terjadi alergi dan
fotosensitif kulit. Pada pemakaian sediaan injeksi dan pemakaian lokal mungkin
terjadi rasa nyeri terbakar (Heinrich dkk., 2004).
7
B. Ekstrak
Ekstrak merupakan sediaan sari pekat tumbuhan atau hewan yang diperoleh
dengan cara melepaskan zat aktif dari masing-masing bahan obat, menggunakan
menstruum yang cocok, uapkan semua atau hampir semua dari pelarutnya dan sisa
endapan atau serbuk diatur untuk ditetapkan standarnya (Ansel, 1989).
Menurut Voigt (1994), pengelompokan ekstrak menurut sifat-sifatnya:
1. Ekstrak encer (extractum tennum)
Ekstrak encer memiliki konsistensi madu dan dapat dituang.
2. Ekstrak kental (extractum spissum)
Ekstrak kental liat dalam keadaan dingin dan tidak dapat dituang. Kandungan
airnya berjumlah sampai 30%.
3. Ekstrak kering (extractum siccum)
Ekstrak kering memiliki konsistensi kering dan mudah digosongkan. Melalui
penguapan cairan pengekstrasi dan pengeringan sisanya terbentuk suatu produk,
yang sebaiknya menunjukkan kandungan lembab tidak lebih dari 5%.
Ekstrak kental herba pegagan adalah ekstrak yang dibuat dari seluruh bagian
tumbuhan Centella asiatica (L.) Urban., mengandung triterpenoid asiatikosid tidak
kurang dari 0,9%.
C. Maserasi
Di antara semua metode ekstraksi, maserasi yang paling sering digunakan.
Keuntungan dibandingkan perkolasi dan ekstraksi countercurrent adalah sampelnya
yang sedikit. Homeopathic mother tinctures yang dibuat farmasis pada skala
8
laboratorium, dapat dibuat dengan cara yang sama pada teknik dan produksi skala
batch (Heyden dan Son, 1989).
Dilihat dari segi teknologi farmasinya, maserasi merupakan pilihan metode
yang tepat, karena proses operasional metode ini mudah dilakukan dan menghasilkan
ekstrak secara maksimal. Proses maserasi tidak membutuhkan operator khusus
karena metode ini dapat dikerjakan oleh kebanyakan orang berdasarkan prosedur
kerja yang ada. Proses yang dilakukan dalam maserasi bisa dikontrol dengan
menyamakan semua kondisi percobaan. Secara ekonomis, maserasi merupakan
metode yang membutuhkan biaya lebih murah daripada metode ekstraksi yang lain.
Dengan demikian, proses ekstraksi yang dilakukan akan lebih terstandar karena
proses maserasi dapat dikontrol dengan mudah (Ansel,1989).
Derajat pencampuran ekstraksi harus dijaga sebaik mungkin. Hal tersebut
berlaku untuk sampel kecil dimana endapan dapat secara efektif terpisah dengan
sentrifugasi, tetapi untuk sekala besar perlu diperhatikan endapan yang tersuspensi
akan mempersulit filtrasi. Jenis dan intensitas pengadukan pada maserasi kinetik
merupakan faktor yang penting. Peningkatan kecepatan pengadukan dari 20-30
rev/min menjadi 50-250 rev/min pada bucket mixer memberi pengaruh signifikan
pada hasil ekstraksi (Heyden dan Son, 1989).
D. Image J
Image J adalah suatu software Java yang dirancang untuk memproses dan
menganalisis suatu gambar, seperti gambar sel secara 3 dimensi, gambar radiologis,
atau sistem multi gambar perbandingan sistem hemologi. Image J dirancang dan
9
dibuat menjadi program yang lebih mudah dipahami dan digunakan untuk proses
mempelajari suatu gambar. Image J dapat digunakan untuk menghitung area,
statistik, nilai piksel dan intensitas dari suatu objek gambar, seperti penggunaan KLT
densitometer (Anonim, 2008c). Lempeng KLT yang telah dielusi kemudian dihitung
intensitas bercaknya menggunakan program Image J (Zeligs and Bradlow, 2006).
E. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Kromatografi Lapis Tipis adalah metode pemisahan secara fisikokimia.
Lapisan yang memisahkan, yang terdiri dari bahan berbutir-butir (fase diam),
ditempatkan pada penyangga berupa plat gelas, logam dan lapisan lain yang cocok.
Campuran yang akan dipisahkan, berupa larutan, ditotolkan berupa bercak atau pita
(awal). Setelah plat atau lapisan ditaruh di dalam bejana tertutup rapat yang berisi
larutan pengembang yang cocok (fase gerak), pemisahan terjadi selama perambatan
kapiler (pengembangan) (Stahl, 1985).
Menurut Stahl (1985), jarak pengembangan pada kromatogam biasanya
dinyatakan dengan angka Rf atau hRf. Angka Rf berjangka antara 0,00 dan 1,00
dapat ditentukan dua desimal. hRf adalah angka Rf dikalikan faktor 100 (h),
menghasilkan nilai berjangka 0 sampai 100.
Rf =
10
F. Sediaan Granul Effervescent
Granul effervescent adalah granul atau serbuk kasar sampai kasar sekali dan
mengandung unsur obat dalam campuran kering, biasanya terdiri dari unsur asam
(asam sitrat, asam tartrat, asam fumarat) dan unsur basa (natrium karbonat, natrium
bikarbonat) yang bila ditambahkan dengan air, asam dan basanya bereaksi
membebaskan karbondioksida sehingga menghasilkan buih (Ansel, 1989).
Dalam cakupan farmasetika, istilah effervescent berarti terbentuknya
gelembung udara dalam cairan sebagai hasil dari reaksi kimia. Terbentuknya gas
dalam suatu sediaan effervescent umumnya merupakan hasil dari reaksi sumber asam
dan sumber basa. Sumber asam yang digunakan dapat berupa asam organik maupun
anorganik, dan berbentuk anhidrat maupun garam asam. Di sisi lain, sumber basa
dalam sediaan effervescent berupa komponen alkali yang dapat menghasilkan gas,
ketika bereaksi dengan sumber asam maupun air, dan biasanya merupakan perkursor
gas karbondioksida, oksigen maupun klorindioksida (Robinson and McGinity, 2002).
Keuntungan bentuk effervescent sebagai suatu sediaan obat dibandingkan
dengan bentuk sediaan oral konvensional adalah penyiapan larutan dalam waktu
seketika dengan dosis yang tepat, sehingga memudahkan bagi pasien yang
mengalami kesukaran ketika menelan obat dalam bentuk tablet dan kapsul. Selain
itu, sediaan effervescent juga menghasilkan rasa yang enak karena adanya karbonat
yang membantu memperbaiki rasa beberapa obat tertentu (Lindberg, Engfors dan
Ericsson, 1992).
11
Bahan tambahan yang digunakan dalam pembuatan granul effervescent:
1. Sumber asam
Sumber asam pada penelitian ini adalah asam tartrat. Asam tartrat sebagai
sumber asam memiliki sifat hablur yang tidak berwarna atau serbuk putih, tidak
berbau, rasa sangat asam. Memiliki kelarutan tinggi dalam air, mudah larut dalam
etanol 95%, dan sukar larut dalam eter (Mohrle, 1989). Pada suhu 20°C kelarutannya
139 g/100ml (Anonim, 2009a). Asam tartrat mengabsorbsi kelembaban secara tidak
signifikan pada kelembaban relatif di atas 65%. Pada kelembaban relatif lebih dari
75% asam tartrat mengabsorbsi kelembaban secara signifikan (Lindberg dkk., 1992).
2. Sumber basa
Natrium bikarbonat atau sodium bikarbonat pada penelitian ini digunakan
sebagai sumber basa. Sodium bikarbonat adalah sumber karbon dioksida utama
dalam sistem effervescent. Sodium bikarbonat biasa digunakan dalam formula
effervescent dan dapat menghasilkan larutan yang jernih setelah tablet mengalami
disintegrasi karena sifatnya yang larut sempurna dalam air (Mohrle, 1989). Pada
suhu 20°C kelarutannya 8,7 g/100ml (Anonim, 2009b). Pemerian: serbuk hablur,
putih.setabil di udara kering, tetapi dalam udara lembab perlahan-lahan terurai.
Larutan segar dalam air dingin, tanpa dikocok, bersifat basa terhadap lakmus.
Kebasaan bertambah jika larutan didiamkan, digoyang kuat, atau dipanaskan.
Kelarutan: larut dalam air, tidak larut dalam etanol (Anonim,1995). Natrium
bikarbonat bersifat tidak higroskopis dan pada temperatur ruangan mempunyai
kandungan lembab kurang dari 1% (Lindberg dkk.,1992).
12
3. Bahan pengisi
Pada pembuatan sediaan obat dalam jumlah kecil, diperlukan bahan pengisi
yang memungkinkan suatu formulasi, karena bahan pengisi ini menjamin granul
mempunyai ukuran dan massa yang dibutuhkan (Voigt, 1994). Laktosa merupakan
bahan pengisi yang paling banyak dipakai, umumnya dalam bentuk monohidrat,
bersifat inert, stabil dan larut dalam air (Banker dan Anderson, 1986).
Laktosa adalah gula yang diperoleh dari susu dalam bentuk anhidrat atau
mengandung 1 molekul air (hidrat). Pemerian: serbuk atau massa hablur, keras, putih
atau putih krem. Tidak berbau dan rasa sedikit manis. Stabil di udara tetapi mudah
menyerap bau. Kelarutan: mudah (dan pelan-pelan) larut dalam air dan lebih mudah
larut dalam air mendidih, sangat sukar larut dalam etanol, tidak larut dalam
kloroform dan eter (Anonim, 1995).
4. Bahan pengikat
Bahan pengikat merupakan suatu bahan yang dapat mengikat bahan-bahan
lain menjadi satu. Bahan pengikat diperlukan untuk membantu menghasilkan suatu
granul (Lindberg dkk., 1992). Polivinil-pirolidon (PVP) merupakan bahan pengikat
yang paling efektif untuk granul effervescent (Mohrle,1989). Polivinil pirolidon
mudah larut mudah larut dalam air, dapat meningkatkan kelarutan bahan obat dalam
air dan tidak meninggalkan residu. (Voigt, 1994). Penggunaan PVP sebagai pengikat
pada konsentrasi 0,5%-5% (Parikh, 1997). PVP dapat digunakan untuk granulasi
basah ataupun untuk granulasi kering (Lachman, Lieberman, Herbert dan Joseph,
1989).
13
5. Bahan pemanis
Pemanis pada sediaan effervescent digunakan untuk memperbaiki rasa dan
meningkatkan acceptability. Pada penelitian ini bahan pemanis yang digunakan
adalah aspartam. Aspartam termasuk tiga pemanis yang paling banyak digunakan
dalam industri makanan dan obat, selain sukrosa dan sakarin. Aspartam merupakan
pemanis yang dihasilkan dari sintesis kimia, sehingga para formulator harus
mempertimbangkan lagi dalam menggunakan aspartam sebagai pemanis obat.
Meskipun demikian penggunaannya masih bisa tetap dianjurkan namun dengan
sangat dibatasi (Lachman dkk., 1989).
G. Granulasi Basah
Granulasi basah meliputi pencampuran bahan-bahan kering dengan
granulating fluid untuk menghasilkan massa granul. Granulasi basah dapat dilakukan
dengan 3 cara, yaitu dengan pemanasan, dengan cairan nonreaktif, dan dengan cairan
reaktif.
1. Dengan pemanasan
Metode klasik dalam granulasi effervescent meliputi pelepasan air dari
formulasi bahan hidrat pada temperatur rendah untuk membentuk massa granul.
Bahan yang sering digunakan untuk metode ini adalah asam sitrat. Jika jumlah air
yang ada dalam asam sitrat maksimal, maka persentase kandungan air dalam asam
sitrat adalah 8,5% (Mohrle,1989).
14
2. Dengan cairan nonreaktif
Granulating fluid secara perlahan-lahan ditambahkan ke dalam campuran
komponen formula hingga granulating fluid tersebut terdistribusi merata. Bahan
pengikat larut alkohol seperti PVP dilarutkan ke dalam granulating fluid kemudian
ditambahkan ke dalam campuran komponen. Massa yang terbentuk dikeringkan
dalam oven. Setelah granul kering, diayak untuk mendapatkan ukuran partikel yang
diperlukan (Mohrle,1989).
3. Dengan cairan reaktif
Granulating fluid yang sering digunakan dalam metode ini adalah air. Proses
ini susah dikendalikan saat massa granul yang terbentuk harus cepat dikeringkan
untuk menghentikan reaksi effervescent yang terjadi. Bahan-bahan yang dipilih harus
dengan cepat melepaskan air yang telah diserap. Setelah formulasi lengkap, granul
langsung dapat dihasilkan (Mohrle,1989).
H. Sifat Fisik Granul Effervescent
Uji sifat fisik granul perlu dilakukan untuk mengetahui apakah granul
mempunyai sifat fisik yang baik atau tidak.
1. Kecepatan alir
Menurut Guyot (cit., Fudholi, 1983), apabila waktu yang diperlukan 100
gram serbuk untuk mengalir lebih lama dari 10 detik (T>10) dapat dikatakan bahwa
dalam fabrikasi pada skala industri akan dijumpai kesulitan dalam hal regularitas
berat tablet.
15
2. Waktu larut
Granul effervescent yang baik diharapkan terlarut dalam waktu 60-150 detik
membentuk larutan yang jernih. Dengan kata lain residu yang tidak larut harus
seminimal mungkin (Wehling dan Fred, 2004).
3. Kandungan lembab granul
Kandungan lembab dapat mempengaruhi sifat fisika kimia sediaan padat.
Keseimbangan kandungan lembab dapat mempengaruhi aliran dan karakteristik
kompresi serbuk, kekerasan granul, serta stabilitas obat. Granul sebaiknya tidak
terlalu kering, persyaratan kandungan lembab untuk granul effervescent < 1% (Allen,
2007).
4. pH larutan
Uji pH larutan dilakukan dengan memasukkan indikator (elektroda) alat uji
pH yaitu pH meter elektrik ke dalam larutan granul effervescent. pH larutan
merupakan salah satu karakteristik utama dalam sediaan effervescent. Konsistensi pH
larutan pada berbagai batch memberikan indikasi bahwa distribusi bahan-bahan
dalam proses pembuatan sediaan effervescent homogen. Adanya variasi pH larutan
yang besar menandakan bahwa campuran bahan atau granul asam-basa tidak
homogen. pH larutan juga merupakan parameter yang penting karena dapat
mempengaruhi rasa dari larutan effervescent (Avani, Shah, Dua, dan Renuka, 2006).
16
I. Desain Faktorial
Desain faktorial adalah pendekatan eksperimental yang dilakukan dengan
meneliti efek dari suatu variabel eksperimental dengan menjaga variabel yang lain
konstan. Desain faktorial digunakan dalam percobaan untuk menentukan secara
simulasi efek dari beberapa faktor dan interaksinya yang signifikan. Signifikan
berarti adanya perubahan dari level rendah ke level tinggi pada faktor-faktor yang
menyebabkan terjadinya perubahan yang besar pada respon (Bolton,1997).
Desain faktorial dua level berarti ada dua faktor (misal A dan B) yang
masing-masing faktor diuji pada dua level yang berbeda, yaitu level rendah dan level
tinggi. Tablet dapat mengandung lebih dari satu jenis bahan penyusun, oleh karena
itu penting dan menarik untuk memprediksi sifat-sifat campuran yang terdiri dari
bahan-bahan dengan sifat masing-masing. Dengan desain faktorial dapat didesain
suatu percobaan untuk mengetahui faktor dominan yang berpengaruh secara
signifikan terhadap suatu respon. Desain faktorial mengandung beberapa pengertian,
yaitu faktor, level, efek, dan respon. Faktor merupakan setiap besaran yang
mempengaruhi respon (Voigt, 1994). Level merupakan nilai atau tetapan untuk
faktor. Pada percobaan dengan desain faktorial perlu ditetapkan level yang diteliti
yang meliputi level rendah dan level tinggi. Efek adalah perubahan respon yang
disebabkan variasi tingkat dari faktor. Efek faktor atau interaksi merupakan rata-rata
respon pada level tinggi dikurangi rata-rata respon pada level rendah. Respon
merupakan sifat atau hasil percobaan yang diamati. Respon yang diukur harus
dikuantitatifkan (Bolton,1997).
17
Adanya interaksi dapat dilihat dari grafik hubungan respon dan level. Jika
grafik menunjukkan grafik sejajar, maka dapat dikatakan bahwa tidak ada interaksi
antara eksipien dalam menentukan respon. Jika grafik menunjukkan garis yang tidak
sejajar, maka dapat dikatakan bahwa ada interaksi antara eksipien dalam menentukan
respon (Bolton,1997).
Tabel I. Rancangan Percobaan Desain Fakorial dengan Dua Faktor dan Dua Level
Formula Faktor I Faktor II Interaksi
1 - - + a + - - b - + - ab + + +
Optimasi campuran dua bahan (dua faktor) dengan dua level desain faktorial (two
level factorial design) dilakukan berdasarkan rumus (Bolton,1997) :
Y = b0 + b
1(A)
+ b
2(B)
+ b
12 (AB)
Y = respon hasil atau sifat yang diamati.
A, B
= level bagian A dan B yang nilainya dari -1 sampai +1.
b0, b
1, b
2, b
12 = koefisien, dapat dihitung dari hasil percobaan.
Besarnya efek dapat dicari dengan cara menghitung selisih antara rata-rata
respon pada level tinggi dan rata-rata respon pada level rendah. Perhitungan efek :
Efek faktor I =
Efek faktor II =
Efek interaksi =
18
J. Landasan Teori
Pemanfaatan ekstrak herba pegagan secara oral diindikasikan untuk
mengurangi gejala Venous Insufficiency. Hal ini diperkuat melalui penelitian pada
subjek dengan penyakit jantung dan tekanan darah tinggi yang mengkonsumsi herba
pegagan menunjukkan penurunan signifikan pada tekanan darah diastolik
dibandingkan pada subjek yang diberi plasebo.
Pencegahan maupun penanganan penyakit degeneratif tersebut memerlukan
terapi preventif menggunakan ekstrak herba pegagan. Terapi preventif tersebut
membutuhkan sediaan yang dapat digunakan secara praktis, mudah, nyaman dan
berkhasiat. Salah satu bentuk sediaan farmasi yang dapat menjawab kebutuhan
tersebut adalah granul effervescent. Effervescent memberikan rasa yang
menyenangkan karena menghasilkan CO2 sehingga dapat menutupi rasa yang tidak
enak.
Granul effervescent yang akan diteliti adalah granul dengan campuran asam
tartrat dan natrium bikarbonat sebagai sumber asam dan sumber karbonat yang
diformulasi secara granulasi basah. Asam tartrat memiliki kelarutan yang tinggi
dalam air. Pada kelembaban relatif lebih dari 65% asam tartrat mengabsorsi
kelembaban secara tidak signifikan. Natrium bikarbonat mudah larut dalam air dan
bersifat tidak higroskopis. Asam tartrat jika direaksikan dengan air akan terhidrolisa
kemudian melepaskan asam yang dalam proses selanjutnya akan bereaksi dengan
natrium bikarbonat untuk menimbulkan gas CO2.
Komposisi asam tartrat dan natrium bikarbonat sangat mempengaruhi sifat
fisik dan kimiawi sediaan effervescent yang dihasilkan. Untuk mendapatkan
19
komposisi asam tartrat dan natrium bikarbonat yang optimum dilihat dari sifat fisik
granul effervescent meliputi kecepatan alir, pengetapan, kandungan lembab, waktu
larut dan pH larutan dilakukan optimasi dengan metode desain faktorial. Metode ini
dapat digunakan untuk mengidentifikasi efek masing-masing faktor, maupun efek
interaksi antar faktor. Desain faktorial memiliki efisiensi yang maksimal untuk
memperkirakan efek yang dominan dalam menentukan respon.
K. Hipotesis Penelitian
1. Diduga ekstrak herba pegagan dapat diformulasikan menjadi sediaan granul
effervescent yang memenuhi persyaratan kualitas yang diharapkan.
2. Diduga antara asam tartrat dan natrium bikarbonat serta interaksinya terdapat
faktor dominan yang menentukan sifat fisik granul effervescent ekstrak herba
pegagan yang memenuhi persyaratan.
3. Pada komposisi tertentu, campuran asam tartrat dan natrium bikarbonat diduga
dapat menghasilkan granul effervescent yang memenuhi persyaratan.
20
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk dalam jenis penelitian eksperimental murni
menggunakan desain faktorial dengan dua faktor dan dua level.
B. Variabel Penelitian, Keterbatasan Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel penelitian
a. Variabel bebas
Jumlah sumber asam dan sumber basa masing-masing pada level rendah dan
level tinggi, yaitu:
1) Asam tartrat: 1000 mg (level rendah) dan 1600 mg (level tinggi)
2) Natrium bikarbonat: 1117,2 mg (level rendah) dan 1789,2 mg (level tinggi)
b. Variabel tergantung: Sifat fisik granul effervescent ekstrak herba pegagan,
meliputi kecepatan alir, waktu larut, kandungan lembab, dan pH larutan.
c. Variabel pengacau terkendali meliputi: kelembaban relatif ruangan (RH ± 60%),
suhu ruangan (± 18oC), suhu pengeringan bahan dan granul effervescent, lama
pencampuran granul effervescent.
21
2. Keterbatasan Penelitian
Penelitian berlangsung di ruang aseptis Laboratorium Formulasi Teknologi
Sediaan Steril pada kondisi yang tidak memenuhi syarat untuk sediaan effervescent
yaitu RH 60%. Pengukuran kandungan lembab dilakukan di Laboratorium Kimia
Analisa pada kondisi RH dan suhu ruangan.
3. Definisi operasional
a. Ekstrak herba pegagan adalah ekstrak kental yang diperoleh dari proses
maserasi simplisia herba pegagan dengan pelarut etanol 70%, dengan
kandungan lembab 12,34% dan kadar asiatikosid 1,4195%, kemudian
dikeringkan dengan laktosa.
b. Standarisasi ekstrak herba pegagan meliputi uji organoleptis, uji daya lekat,
uji viskositas, uji kandungan lembab, uji kualitatif dan penetapan kadar
asiatikosid.
c. Granul effervescent ekstrak herba pegagan adalah suatu sediaan padat yang
mengandung ekstrak herba pegagan sebagai bahan obat dengan sumber asam
(asam tartrat) dan sumber basa (natrium bikarbonat) yang bereaksi cepat pada
penambahan air dengan menghasilkan gas CO2.
d. Sifat fisik granul effervescent meliputi kecepatan alir granul lebih dari 10
g/detik, waktu larut granul kurang dari 150 detik, kandungan lembab granul ≤
0,99% dan pH larutan 5-7.
e. Area Optimum adalah area dimana jumlah perbandingan asam tartrat dan
natrium bikarbonat menghasilkan granul effervescent dengan sifat fisik yang
memenuhi persyaratan.
22
C. Bahan dan Alat Penelitian
1. Bahan penelitian
Bahan baku berupa serbuk simplisia herba pegagan. Bahan kimia kualitas
teknis berupa etanol 96%, aquades. Bahan kimia kualitas farmasetis berupa asam
tartrat, sodium bikarbonat, laktosa, PVP K.30, dan aspartam. Bahan kimia kualitas
analitik meliputi silica gel GF254, pereaksi Lieberman-Burchard, etanol, metanol,
kloroform, TECA (Titrated Extracts of Centella Asiatica).
2. Alat penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini berupa grinder, maserator,
ayakan, TLC set, neraca elektrik (Mettler Toledo GB 3002), alat pengukur waktu alir
(Laboratorium FTS-Padat USD), moisture analyzer (SinarTM IR Balance 6100),
stopwatch (Illuminator, Casio), pengayak granul (Laboratory Sieve, IML), oven
(Mermet), vaccum rotary evaporator (Buchi Rotavapor No.105108, Switzerland),
lemari pendingin (Refrigerator, Toshiba), alat-alat gelas (Pyrex).
D. Tata Cara Penelitian
1. Pembuatan serbuk simplisia herba pegagan
Simplisia kering yang sudah dibersihkan dari pengotor dikeringkan kembali
dengan oven pada suhu 40°C selama 1 hari. Setelah itu simplisia kering diserbuk
menggunakan mesin penyerbuk kemudian diayak sehingga diperoleh serbuk dengan
ukuran no. 8/24.
23
2. Ekstraksi herba pegagan
Ekstrak dibuat secara maserasi, menggunakan pelarut etanol 70%. Satu
bagian serbuk simplisia dimasukkan ke dalam ekstraktor, ditambah 10 bagian etanol
70%, dibiarkan terendam selama 6 jam sambil sekali-sekali diaduk, lalu didiamkan
selama 24 jam. Maserat dipisahkan dan proses maserasi diulang 2 kali dengan
prosedur yang sama. Semua maserat dikumpulkan dan diuapkan dengan vaccum
rotary evaporator hingga diperoleh ekstrak kental (Anonim, 2004).
3. Standarisasi ekstrak herba pegagan
a. Pemeriksaan organoleptis
Pemeriksaan organoleptis meliputi warna, bau, rasa dan konsistensi ekstrak.
b. Uji kandungan lembab ekstrak
Ekstrak ditimbang sebanyak 5 g lalu masukkan ke dalam alat moisture
analyzer, ditunggu selama 15 menit. Kemudian dicatat kandungan lembab
ekstrak yang muncul pada alat.
c. Uji viskositas
Uji ini menggunakan viscotester elektrik VT-04-E. Ekstrak dimasukkan ke
dalam bejana stainless steel dan dipilih rotor nomor 4. Rotor dipasang pada alat
uji dan diatur sehingga rotor tercelup dalam ekstrak, kemudian alat dihidupkan.
Dicatat skala yang ditunjukkan oleh rotor no. 4
24
d. Uji daya lekat
Uji dilakukan dengan 2 gelas objek. Gelas objek ditandai seluas 2,5 × 2,5 cm
kemudian ditentukan titik tengahnya. Kurang lebih 50 mg ekstrak diletakkan
pada titik tengah tersebut kemudian ditutup dengan gelas objek lain dan
ditekan dengan beban 1 kg selama 5 menit. Kedua gelas objek yang sudah
saling melekat dipasang pada alat uji dengan diberi beban 80g. dicatat waktu
yang digunakan hingga kedua gelas objek terpisah.
e. Uji kualitatif
Uji kualitatif dilakukan dengan mengukur harga Rf bercak pada sampel herba
pegagan dan dibandingkan dengan harga Rf standar asiatikosid.
f. Penetapan kadar asiatikosid
Ditimbang 500 mg ekstrak, dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan dilarutkan
dalam 10 mL metanol. Masing-masing sebanyak 1 µL larutan uji dan larutan
asiatikosid baku dalam metanol dengan 4 konsentrasi yang berbeda ditotolkan
pada lempeng silika gel GF254, dielusi dengan fase gerak kloroform-metanol-air
(65:25:4) selanjutnya disemprot dengan pereaksi Liebermann-Bourchard,
dipanaskan dalam oven pada temperatur 105ºC selama 10 menit, segera
scanning, kemudian bercak dianalisis menggunakan software image J. Kadar
asiatikosid dihitung dalam % b/b dengan membandingkan kurva baku
(Pramono, 2004).
25
4. Penentuan dosis
Dosis ekstrak herba pegagan yang digunakan untuk terapi Venous
Insufficiency, 3 sampai 6 tablet Madecassol® (10 mg Titrated Extract Centela
asiatica) (Anonim, 2008a). TECA mengandung asiatikosid : madekosid : air 58,5 :
41,4 : 0,1 (Soegihardjo dan Koensoemardiyah, 1995). Dengan demikian 10 mg
TECA mengandung 5,85 mg asiatikosid. Pada penelitian ini digunakan dosis
asiatikosid 5,85 mg untuk mendapatkan efek terapi Venous Insufficiency.
Berdasarkan hasil image J, kadar rata-rata asiatikosid pada ekstrak herba
pegagan adalah sebesar 1,4195 %. Jika dosis asiatikosid tiap formula granul
effervescent 1 x minum sebesar 5,85 mg, maka berat ekstrak yang digunakan adalah:
,,
x 100 mg = 412,12 mg ≈ 412 mg
5. Penentuan level rendah dan level tinggi asam tartrat dan natrium bikarbonat
2 NaHCO3 + C4H6O6 → 2H2O + 2CO2 + Na2C4H4O6
Asam tartrat BM=150 ; Natrium bikarbonat BM= 84
a. Level rendah
25100 4 1 1
150 6,667 . 10 3mol
2NaHCO3 + C4H6O6 → 2H2O + 2CO2 + Na2C4H4O6
0,0133 ∼ 6,667 . 10
Massa NaHCO3 = 0,0133 x 84 = 1,1172 gram
Jadi, level rendah untuk asam tartrat (C4H6O6) = 1 gram dan level rendah
untuk basa Na Bikarbonat (NaHCO3) = 1,1172 gram.
26
b. Level tinggi
40100 4 1,6 1,6
150 10,670 . 10 3mol
2NaHCO3 + C4H6O6 → 2H2O + 2CO2 + Na2C4H4O6
0,0213 ∼ 10,670 . 10 3
Massa NaHCO3 = 0,0213 x 84 = 1,7892 gram
Jadi, level tinggi untuk asam tartrat (C4H6O6)= 1,6 gram dan level tinggi
untuk basa Na Bikarbonat (NaHCO3) = 1,7892 gram.
Tabel II. Level Rendah dan Tinggi Sumber Asam dan Sumber Basa yang Digunakan
Formula Asam tartrat (mg) Natrium bikarbonat (mg) 1 1000 1117,2 a 1600 1117,2 b 1000 1789,2 ab 1600 1789,2
6. Optimasi formula granul effervescent ekstrak herba pegagan dengan kombinasi
asam tartrat dan natrium bikarbonat
Tabel III. Formula Granul Effervescent Ekstrak Herba Pegagan
Bahan (mg) Formula (mg) 1 a b ab
Ekstrak Centellae Herba 412 412 412 412 Asam Tartrat 1000 1600 1000 1600 Natrium bikarbonat 1117,2 1117,2 1789,2 1789,2 Laktosa 1200 1200 1200 1200 Polivinil pirolidon 3 % 15 15 15 15 Aspartam 100 100 100 100
27
7. Pembuatan granul ekstrak herba pegagan
Pembuatan granul diawali dengan menimbang bahan-bahan sesuai dengan
formula masing-masing. Proses pembuatan granul effervescent dilakukan dalam
ruangan dengan suhu 18oC dan kelembaban relatif (RH) ± 60%. Sebagai bahan
pengikat digunakan larutan PVP 3% dalam etanol 96%.
a. Pembuatan serbuk ekstrak herba pegagan
Ekstrak kental herba pegagan seberat 412 g dicampurkan dengan 1200 g
laktosa, kemudian diaduk sampai homogen sampai terbentuk massa yang
dapat dibuat granul. Ayak dengan ayakan no 14, granul yang terbentuk
kemudian dikeringkan dalam oven ± 40o C selama 1 hari. Kemudian granul
ekstrak yang sudah kering dibuat menjadi serbuk dan diayak dengan ayakan
no. mesh 24.
Pembuatan granul asam
Granul asam dibuat dengan mencampurkan asam tartrat dan serbuk ekstrak
sampai homogen. Kemudian ditambahkan larutan PVP 3% dalam etanol 96%
sedikit demi sedikit, secukupnya sampai terbentuk massa yang dapat
digranul. Kemudian ayak dengan ayakan no. 14. Massa granul dikeringkan
dalam oven pada suhu ± 40oC sampai bobot konstan selama 2 hari. Setelah
kering granul asam diayak dengan ayakan no. mesh 16.
b. Pembuatan granul basa
Granul basa dibuat dengan mencampurkan natrium bikarbonat, aspartam, dan
larutan PVP 3% sebagai pengikat. Adonan lembab tersebut kemudian diayak
dengan ayakan no. 14, lalu dikeringkan dalam oven pada suhu ± 40oC sampai
28
bobot konstan selama 2 hari. Granul basa yang sudah kering kemudian diayak
dengan ayakan no. mesh 16.
Granul asam dan basa dicampur homogen dengan menggunakan cube mixer
selama 5 menit dengan kecepatan putar 50 rpm. Kemudian dilakukan uji sifat
fisik granul.
8. Uji sifat fisik granul
a. Kecepatan alir
Ditimbang 100 g granul, dimasukkan ke dalam corong yang ujung tangkainya
tertutup. Kemudian tutup pada ujung tangkai dibuka dan granul dibiarkan
mengalir keluar sampai habis. Waktu yang dipergunakan dicatat
menggunakan stopwatch.
b. Kandungan lembab
Uji kandungan lembab dilakukan dengan alat moisture analyzer. Sebanyak 5
gram campuran granul asam dan basa dimasukkan ke dalam cawan
alumunium, kemudian pengukuran dilakukan dengan pemanasan pada suhu
105oC selama 15 menit atau sampai bobot granul relatif konstan (Ansel,
1989).
c. Waktu larut
Masukkan granul sesuai bobot granul pada tiap formula ke dalam gelas yang
berisi 200 ml air. Catat waktu yang diperlukan granul untuk larut dalam air
dengan stopwatch (Mohrle, 1989).
29
d. pH larutan
Sejumlah granul sesuai bobot tiap formula yang sudah dilarutkan dalam 200
ml air pada suhu 15-20°C, diukur pH larutan setelah tidak terjadi lagi reaksi
effervescent, yang ditandai dengan tidak lagi terbentuk gas karbondioksida.
9. Penentuan persamaan dan countour plot sifat fisik granul
Respon untuk semua kombinasi dapat diprediksi dengan persamaan desain
faktorial, Y = bo + b1XA + b2XB + b12XAXB, di mana:
Y = respon hasil percobaan yang diamati
XA = level faktor I: asam tartrat
XB = level faktor II: natrium bikarbonat
XAXB = level faktor I (asam tartrat) dikalikan level faktor II
(natrium bikarbonat)
bo = Rata-rata hasil semua percobaan
b1, b2, b12 = koefisien yang dihitung dari hasil percobaan
E. Analisis Hasil
Data kuantitatif yang diperoleh dianalisis secara matematis menggunakan
persamaan desain faktorial. Berdasarkan persamaan desain faktorial ini akan dibuat
contour plot sifat fisik granul effervescent ekstrak herba pegagan. Masing-masing
contour plot disatukan menjadi super imposed untuk mengetahui area komposisi
optimum sumber asam dan sumber basa, terbatas pada level yang diteliti.
30
Tingkat signifikansi perbedaan pengaruh dua faktor dan interaksinya
dianalisis secara analitik menggunakan analisis Yate’s treatment. Pada uji statistik
digunakan hipotesis alternatif (Hi) yakni adanya hubungan antara faktor (asam tartrat,
natrium bikarbonat, dan interaksi keduanya) dengan respon. H0 (hipotesis null)
merupakan kebalikan dari Hi yang menyatakan tidak adanya hubungan antara faktor
dengan respon. Nilai F yang didapatkan dari perhitungan Yate’s treatment
dibandingkan dengan nilai Ftabel. Hi diterima apabila nilai Fhitung lebih besar dai Ftabel.
Taraf kepercayaan yang digunakan untuk uji statistik adalah 95%. Derajad bebas
faktor dan interaksi (experiment) sebagai numerator adalah 1, dan derajad bebas
experimental error sebagai denominator adalah 20, sehingga diperoleh harga Ftabel
untuk faktor dan interaksi pada semua respon adalah F0,05(1,20) = 4,35.
31
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Pembuatan Serbuk Simplisia Herba Pegagan
Pada penelitian ini simplisia herba pegagan diperoleh dari industri jamu
godhog Merapi Farma Herba berlokasi di daerah Kaliurang. Keaslian simplisia
dinyatakan melalui surat keterangan resmi dari industri tersebut (Lamp. 1). Herba
pegagan basah diperoleh dari daerah Magelang kemudian dikeringkan oleh Merapi
Farma Herba.
Sebelum simplisia diserbuk, terlebih dahulu dimasukkan dalam oven selama
1 hari dengan suhu 40oC, untuk memastikan bahwa simplisia yang digunakan benar-
benar kering sehingga dihasilkan sebuk yang baik. Jika simplisia belum kering, tidak
akan terbentuk serbuk, yang dihasilkan berupa serat-serat herba. Setelah kering
kemudian dibuat serbuk dengan mesin penyerbuk. Serbuk kemudian diayak dengan
ayakan no. 8/24 sehingga diperoleh serbuk yang halus. Serbuk yang halus memiliki
permukaan yang luas sehingga kontak dengan cairan penyari lebih maksimal. Tetapi
serbuk yang terlalu kecil justru menyumbat penyaring dan bisa lolos saringan.
Melalui penyerbukan dengan cara ini, 5 kg simplisia herba pegagan menghasilkan 4
kg serbuk.
B. Hasil Ekstraksi Herba Pegagan
Ekstraksi herba pegagan dilakukan dengan metode maserasi mengunakan
pelarut etanol 70%. Cairan penyari yang digunakan adalah etanol, karena senyawa
asiatikosid dapat larut dalam etanol terutama etanol 70%. Penyari etanol 95% jarang
32
digunakan karena terlalu banyaknya klorofil yang akan ikut terlarut sehingga ekstrak
yang diperoleh akan sangat lengket dan sulit untuk dikeringkan (Pramono, 2004).
Monografi ekstrak tumbuhan Indonesia menetapkan maserasi sebagai metode
standar untuk ekstraksi herba pegagan. Berdasar monografi tersebut, herba pegagan
memiliki kandungan asiatikosid cukup besar yaitu lebih besar dari 0,9%. Jumlah ini
dapat dicapai dengan maserasi berulang. Melalui ekstraksi dengan maserasi, pada
penelitian ini diperoleh ekstrak herba pegagan dengan kandungan asiatikosid 1,4%.
Selain itu, maserasi dipilih karena tidak memerlukan pemanasan. Hal ini penting
karena asiatikosid tidak tahan pemanasan. Maserasi merupakan metode yang
sederhana, dilakukan dengan merendam serbuk herba pegagan di dalam etanol 70%,
sehingga asiatikosid yang bersifat kurang polar dapat terlarut dengan mudah.
Serbuk simplisia direndam dalam cairan penyari selama 6 jam, 30 menit
sekali diaduk untuk menjaga serbuk tetap tersuspensi, sehingga tercapai suatu
keseimbangan konsentrasi bahan ekstraktif yang lebih cepat ke dalam cairan. Proses
tersebut diulang 2 kali dengan jenis dan jumlah pelarut yang sama untuk
mengekstrak kandungan asiatikosid dalam serbuk secara optimal.
Maserat yang dihasilkan dikumpulkan, kemudian diuapkan dengan bantuan
vaccum rotary evaporator. Alat ini membentuk lapisan tipis cairan ekstrak pada
dinding labu melalui putaran labu di dalam cairan penangas. Melalui perluasan
permukaan, penguapan akan berlangsung dalam waktu yang lebih singkat. Selain
memperluas permukaan penguapan, vaccum rotary evaporator juga bekerja dengan
menurunkan tekanan sistem sehingga penguapan tidak memerlukan suhu yang tinggi.
Suhu penguapan yang relatif rendah akan menjaga kestabilan ekstrak.
33
Setelah penguapan tersebut, ekstrak masih dalam konsistensi cair. Untuk
mendapat ekstrak kental, ekstrak cair tersebut dipanaskan dalam oven pada suhu
40oC selama 2 hari. Melalui ekstraksi dengan langkah di atas, 100 g serbuk simplisia
menghasilkan kurang lebih 20 g ekstrak kental.
Dalam formulasi effervescent, akan lebih baik jika menggunakan ekstrak
kering. Ekstrak kering memiliki kandungan air minimal sehingga menciptakan
kondisi yang baik bagi sediaan effervescent. Tetapi ekstrak herba pegagan yang
dibuat sulit dijadikan ekstrak kering. Jika pemanasan dilanjutkan, ekstrak justru
menjadi hitam dan rusak.
C. Hasil Standarisasi Ekstrak Herba Pegagan
Standarisasi ekstrak bertujuan mendapatkan kriteria-kriteria ekstrak herba
pegagan yang digunakan dalam penelitian. Kriteria ini nantinya menjadi acuan sifat
ekstrak pada produksi granul effervescent herba pegagan selanjutnya, untuk
mendapatkan granul dengan sifat fisis yang sama pada penelitian ini. Kriteria yang
diuji meliputi: organoleptis, daya lekat, visikositas, kandungan lembab ekstrak, dan
kandungan asiatikosid.
Tabel IV. Organoleptis Ekstrak Herba Pegagan
Parameter organoleptis Hasil Bentuk Kental Warna Hijau tua
Bau Manis (khas) Rasa Agak pahit
34
Tabel V. Data Daya Lekat, Viskositas, Kandungan Lembab dan Kadar Asiatikosid
Uji X±SD Daya lekat 48,81 ± 5,68 detik Viskositas ( > 400 dPa.S)
Kandungan lembab 12,34 ± 0,66 % Kadar asiatikosid 1,42± 0,23 %
Keterangan: X = Nilai rata-rata (6 replikasi) SD = Standar deviasi
1. Hasil uji organoleptis
Pemeriksaan organoleptis dilakukan sebagai pengenalan awal terhadap
ekstrak sebelum penelitian. Pemeriksaan yang dilakukan berupa penampakan fisik
meliputi bentuk warna, bau, dan rasa. Pengujian dilakukan menggunakan
pancaindera dan hasilnya tertera pada tabel IV.
2. Hasil uji daya lekat
Daya lekat dilihat berdasarkan waktu yang diperlukan untuk memisahkan 2
gelas objek yang sebelumnya telah dilekatkan dengan ekstrak. Semakin lama kedua
gelas objek melekat, maka daya lekatnya semakin tinggi. Uji ini dilakukan untuk
mengetahui kemampuan ekstrak dalam mengikat bahan tambahan yang akan
digunakan dalam pembuatan granul. Semakin lama waktu yang diperlukan untuk
melepaskan kedua objek gelas maka kemampuan ekstrak cenderung semakin kuat
untuk menghasilkan daya ikat antar partikel untuk membentuk granul. Diperoleh
daya lekat ekstrak herba pegagan 48,81±5,68 detik (tabel V), menunjukkan bahwa
ekstrak sangat lengket dan berpotensi menimbulkan permasalahan saat granulasi.
35
3. Hasil uji viskositas
Uji viskositas dilakukan menggunakan viscotester tipe VT-04 E dengan rotor
no. 4. Alat ini bekerja dengan prinsip penghambatan perputaran rotor oleh ekstrak
yang diuji. Semakin kental ekstrak yang dihasikan, maka semakin besar pula daya
hambat ekstrak terhadap perputaran rotor. Bentuk dan ukuran rotor harus disesuaikan
dengan konsistensi ekstrak agar rotor dapat tetap berputar dalam ekstrak yang diuji.
Ekstrak herba pegagan yang diuji sangat kental sehingga rotor no. 4 tidak
dapat berputar. Oleh sebab itu disimpulkan bahwa ekstrak memiliki visikositas di
atas 400 dPa.S (Tabel V), melebihi kemampuan ukur alat (400 dPa.S). Dalam
pembuatan granul, viskositas ekstrak yang terlalu tinggi akan mempersulit
pencampuran. Hal tersebut diatasi dengan mengeringkan ekstrak dengan laktosa.
4. Hasil uji kandungan lembab
Pengujian kandungan lembab dilakukan dengan menggunakan alat moisture
analyzer. Alat ini bekerja dengan mengukur selisih bobot ekstrak sebelum dan
setelah dipanaskan pada suhu 105o C selama 15 menit. Bobot ekstrak akan menyusut
karena lembab di dalamnya hilang akibat pemanasan. Dari penyusutan bobot tersebut
dapat diketahui persentase kandungan lembab di dalam ekstrak. Pada pemeriksaan
ini didapatkan rata-rata kandungan lembab ekstrak sebesar 12,34±0,66% (Tabel V).
Jadi dapat disimpulkan bahwa ekstrak herba pegagan pada penelitian ini sudah sesuai
dengan penggolongan ekstrak kental yakni kandungan lembab kurang dari 30%
(Voigt, 1994).
36
5. Hasil uji kualitatif
Rf 1,00 - bercak I Rf 0,50
- bercak II
Rf 0,00 S1 S2 S3 S4 X1 X2 X3
Foto 1. Identifikasi Asiatikosida dengan KLT
Fase gerak : kloroform: metanol: air (65:25:4) Fase diam : silica gel GF254 Standar : TECA (Titrated Ectract of Centella Asiatica) Jarak Pengembangan : 15 cm Penampak bercak : Lieberman-Burchard
Keterangan gambar: S1 = TECA dengan kadar asiatikosid 2,34 µg/µl S2 = TECA dengan kadar asiatikosid 0,936 µg/µl S3 = TECA dengan kadar asiatikosid 0,655 µg/µl S4 = TECA dengan kadar asiatikosid 0,374 µg/µl X1 = Sampel 1 X2 = Sampel 2 X3 = Sampel 3 Bercak I = Asiatikosid Bercak II = Madekosid
37
Tabel VI. Hasil Deteksi Standar Asiatikosid dan Asiatikosid dalam Ekstrak Herba Pegagan dengan KLT
Bercak Rf
Standar 0,81 ± 0,01 Sampel 1 0,82 Sampel 2 0,82 Sampel 3 0,83
Sistem Kromatografi Lapis Tipis (KLT) menggunakan fase gerak kloroform:
methanol: air dengan perbandingan 65:25:4, fase diam yang digunakan silika gel
GF254. Sistem ini merupakan fase normal karena menggunakan fase gerak non polar
dan fase diam polar. Sebagai baku standar digunakan TECA dengan kandungan
asiatikosid : madekosid : air (58,5 : 41,4 : 0,1) (Soegihardjo dan Koensoemardiyah,
1995). Kromatogram disemprot dengan pereaksi Lieberman-Burchard sebagai
pereaksi penampak bercak, kemudian dipanaskan dalam oven selama 10 menit
dengan suhu 105o C.
Hasil deteksi memperlihatkan 2 bercak pada baku dan 3 bercak pada sampel.
Bercak I merupakan asiatikosid kemudian bercak II merupakan madekosid.
Asiatikosid merupakan senyawa yang kurang polar sehingga afinitasnya terhadap
fase gerak lebih besar dari pada fase diam. Madekosid lebih polar dari asiatikosid
sehingga lebih terikat pada fase diam. Bercak ketiga diperkirakan senyawa triterpen
lain yang strukturnya mirip dengan asiatikosid.
Bercak asiatikosida pada standar memiliki Rf 0,81 ± 0,01, dan harga rata-rata
Rf asiatikosida pada sampel 0,82. Rf sampel sama dengan standar sehingga dapat
disimpulkan bahwa sampel mengandung senyawa asiatikosid.
38
6. Hasil penetapan kadar asiatikosid
Penetapan kadar asiatikosid dilakukan dengan metode KLT, dan pengukuran
menggunakan program image J. Image J merupakan program dari NIH (The
National Institute of Health) yang dapat digunakan untuk menganalisis ukuran
bercak melalui image. Image J dapat menghitung area dan nilai pixel dari area yang
sudah ditentukan.
Pembuatan kurva baku dilakukan dengan 4 seri larutan baku yakni 0,37; 0,66;
0,94; 2,34 µg/µl (Tabel VII).
Tabel VII. Hubungan antara Kadar Asiatikosid Baku dengan Luas Area Bercak
Kadar asiatikosid (µg/µl) AUC 0,37 1815075 0,66 3419045 0,94 4599581 2,34 18071492
Berdasarkan hasil analisis hubungan antara kadar asiatikosid vs area
kromatogram, terlihat ada hubungan yang linier antara kenaikan kadar dan luas AUC
yang dihasilkan. Persamaan garis regresi untuk kurva baku, yaitu Y = 2838499,64 X
– 2188507,45 dengan nilai koefisien korelasi r = 0,9935.
Hasil uji penetapan kadar asiatikosida dalam ekstrak herba pegagan
didapatkan kadar rata-rata sebesar 1,42 % dengan nilai SD 0,23 %.
D. Pembuatan Granul Effervescent Ekstrak Herba Pegagan
Pembuatan granul dilakukan menggunakan metode granulasi basah dengan
cairan non reaktif. Granul dibuat dalam 3 macam, yaitu granul ekstrak, granul asam,
39
dan granul basa. Granul ekstrak dibuat terlebih dahulu dengan mencampurkan
ekstrak kental herba pegagan dengan laktosa. Ekstrak kental dibentuk menjadi granul
untuk memudahkan pembuatan granul asam. Ekstrak kental memiliki daya lengket
dan viskositas besar sehingga sulit homogen dengan bahan-bahan lainnya. Supaya
mudah dicampur, ekstrak kental digranul menggunakan laktosa. Granul ekstrak
kemudian dikeringkan selama 1 hari pada suhu ± 40oC (hasil orientasi), selanjutnya
granul diserbuk untuk mempermudah pencampuran dengan bahan-bahan lainnya.
Granul asam dibuat dengan mencampurkan serbuk ekstrak herba pegagan,
asam tartrat, dan larutan PVP 3% sebagai pengikat. PVP dilarutkan dalam etanol
96% karena bisa dengan cepat menguap sehingga meminimalisir kandungan air.
Serbuk ekstrak dicampurkan dalam granul asam karena asiatikosid lebih stabil dalam
suasana asam. Granul basa dibuat dengan mencampurkan natrium bikarbonat,
aspartam, dan larutan PVP 3%. Berdasar hasil orientasi, aspartam yang dicampurkan
dalam granul basa menghasilkan larutan effervescent dengan rasa yang lebih enak.
Granul basah yang terbentuk diayak dengan ayakan no 14, kemudian
dikeringkan dalam oven pada suhu 40oC selama 2 hari. Natrium bikarbonat akan
terdekomposisi menjadi natrium karbonat pada suhu di atas 50oC (Lindberg et al.,
1988) sehingga akan mempengaruhi jumlah CO2 yang dihasilkan (Natrium
bikarbonat dan natrium karbonat menghasilkan jumlah CO2 yang berbeda) oleh
karena itu digunakan suhu pengeringan 40oC.
Granul kering diayak lagi dengan ayakan no 16 untuk mendapatkan granul
dengan ukuran tertentu. Setelah diayak, granul asam dan basa kemudian dicampur
menggunakan cube mixer (50 rpm selama 5 menit). Kecepatan putar mixer dan
40
waktu pencampuan yang digunakan didasarkan pada pengamatan visual yang
menunjukkan campuran sudah homogen.
Pada penelitian ini faktor yang dioptimasi adalah asam tartrat dan natrium
bikarbonat. Jumlah asam tartrat yang digunakan untuk level rendah 1000 mg dan
level tinggi 1600 mg dan natrium bikarbonat yang digunakan adalah 1117,2 mg
untuk level rendah dan 1789,2 mg untuk level tinggi. Penentuan level rendah dan
tinggi asam didasarkan pada pernyataan Wehling dan Fred (2004) yang mengatakan
bahwa sumber asam yang digunakan dalam pembuatan sediaan effervescent adalah
sebesar 25-40% dari bobot 1 formula. Pada level rendah digunakan asam tartrat
sebanyak 25%, sedangkan pada level tinggi asam digunakan asam tartrat sebanyak
40%, dari 4 g berat satu formula.
Granul effervescent ekstrak herba pegagan menghasilkan larutan dengan rasa
manis, ada sedikit rasa asam dan aroma khas pegagan. Kandungan CO2 di dalam
larutan memberi sensasi segar. Larutan berwarna kuning kecoklatan, dan jernih.
E. Hasil Uji Sifat Fisik Granul Effervescent
Granul effervescent ekstrak herba pegagan diuji sifat-sifatnya meliputi
kecepatan alir, kandungan lembab, waktu larut dan pH larutan. Hasil uji tertera pada
tabel VIII.
41
Tabel VIII. Data Sifat Fisik Granul Effervescent
Sifat fisik Granul (n=6)
Formula 1 a b ab
Kecepatan alir (g/detik) 46,87±1,93 46,17±1,71 45,96±3,23 48,84±0,96
Kandungan lembab (%) 0,963±0,137 1,007±0,085 0,960±0,054 0,953±0,078
Waktu larut (detik) 61,90±10,52 79,46±5,84 63,70±4,02 70,72±2,45
pH larutan 5,21±0,61 4,36±0,23 6,20±0,14 6,35±0,09
Melalui perhitungan desain faktorial diperoleh nilai efek yang menunjukkan
faktor yang paling dominan antara asam tartrat, natrium bikarbonat, atau interaksi
keduanya dalam menentukan sifat fisik granul effervescent. Hasil perhitungan nilai
efek berdasar dicantumkan dalam tabel IX.
Tabel IX. Hasil Perhitungan Efek Berdasarkan Desain Faktorial
Sifat fisik granul Nilai efek A B Interaksi
Kecepatan alir 2,18 1,76 , Kandungan lembab 0,04 | , | | , |
Waktu larut , | 6,94 | | 10,54 | pH larutan | 0,70| , 1
Keterangan : Efek A = efek asam tartrat Efek B = efek natrium bikarbonat Efek interaksi = efek interaksi campuran antara asam tartrat dan natrium bikarbonat
1. Uji kecepatan alir
Pengujian kecepatan alir bertujuan untuk mengetahui kecepatan alir granul
yang dihasilkan. Kecepatan alir yang dikehendaki lebih besar dari 10 g/detik.
Menurut Guyot (cit., Fudholi, 1983), apabila waktu yang diperlukan 100 gram serbuk
untuk mengalir lebih lama dari 10 detik (T>10) dapat dikatakan bahwa dalam
42
fabrikasi pada skala industri akan dijumpai kesulitan dalam hal regularitas berat
tablet.
Data hasil pengujian menunjukkan semua formula memiliki kecepatan alir
granul yang diinginkan.
a b
Gambar 2. Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b) terhadap Kecepatan Alir Granul
Berdasarkan perhitungan desain factorial, diperoleh efek asam tartrat dalam
menentukan kecepatan alir granul adalah 2,18, efek natrium bikarbonat 1,76, dan
efek interaksi keduanya sebesar 3,58. Efek asam tartrat, natrium bikarbonat dan
interaksi asam tartrat-natrium bikarbonat bernilai positif, menunjukkan bahwa
ketiganya meningkatkan kecepatan alir granul.
Gambar 2a, menunjukan bertambahnya jumlah asam tartrat akan menurunkan
kecepatan alir granul pada penggunaan level rendah natrium bikarbonat dan akan
meningkatkan kecepatan alir granul pada penggunaan level tinggi basa. Demikian
juga pada gambar 2b menunjukkan bertambahnya jumlah natrium bikarbonat akan
menurunkan kecepatan alir granul pada penggunaan level rendah asam dan
meningkatkan kecepatan alir pada penggunaan level tinggi asam tartrat. Kedua garis
45,00
46,00
47,00
48,00
49,00
1000 1150 1300 1450 1600
Kecepa
tan Alir (g/detik)
Asam Tartrat (mg)
Level Rendah Basa Level Tinggi Basa
45,00
46,00
47,00
48,00
49,00
1117,2 1285,2 1453,2 1621,2 1789,2
Kecepa
tan Alir (g/detik)
Natrium Bikarbonat (mg)
Level Rendah Asam Level Tinggi Asam
43
yang saling berpotongan pada gambar 2a dan 2b menunjukkan adanya interaksi antar
faktor.
Perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan 95% (F tabel 4,35)
untuk respon kecepatan alir granul diperlihatkan pada tabel X.
Tabel X. Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon Kecepatan Alir Granul
Source of Variation
Degrees of freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 33,105 6,621 Treatment 3 30,904 10,301
a 1 7,100 7,100 2,501b 1 4,607 4,607 1,623
ab 1 19,197 19,197 6,762Experimental
error 20 56,780 2,839
Total 23 120,790
Keterangan a= asam tartrat; b= natrium bikarbonat; ab= interaksi
F hitung interaksi lebih besar dari F tabel, menunjukkan adanya interaksi
antara asam tartrat dan natrium bikarbonat. Interaksi keduanya memiliki pengaruh
signifikan dan berperan dominan dalam mempengaruhi kecepatan alir granul.
Masing-masing faktor asam tartrat dan natrim bikarbonat pengaruhnya tidak
signifikan terhadap kecepatan alir granul.
Interaksi asam tartrat dan natrium bikarbonat memberikan pengaruh yang
signifikan terhadap kecepatan alir granul. Interaksi yang terjadi dimungkinkan tidak
terjadi secara langsung, antara asam tartrat dan natrium bikarbonat, melainkan dalam
wujud granul asam (asam tartrat, ekstrak herba pegagan, laktosa, PVP) dan granul
basa (natrium bikarbonat, aspartam, PVP) yang memiliki bentuk dan ukuran tertentu,
yang saling mendukung sehingga berpengaruh dalam meningkatkan respon.
44
2. Uji kandungan lembab
Pengukuran kandungan lembab dilakukan untuk mengetahui kandungan
lembab yang terkandung dalam granul effervescent herba pegagan. Kandungan
lembab merupakan faktor kritis dalam sediaan effervescent, karena adanya
kandungan lembab yang tinggi dapat menyebabkan reaksi effervescent prematur,
yang menyebabkan sediaan tidak dapat dikonsumsi. Persyaratan kandungan lembab
dalam sediaan granul effervescent adalah <1% (Allen, 2007). Kandungan lembab
juga penting bagi sediaan yang berasal dari bahan alam, sehingga kadar airnya perlu
dijaga pada tingkat yang rendah karena pada kandungan air yang tinggi akan mudah
ditumbuhi bakteri atau jamur. Pengukuran kandungan lembab pada penelitian ini
menggunakan alat moisture analyzer pada suhu 105oC, selama 15 menit.
Pembuatan granul effervescent pada penelitian ini dilakukan di dalam
ruangan dengan RH yang relatif tinggi (± 60%). Syarat RH ruangan untuk
pembuatan granul effervescent seharusnya 25%. Iklim tropis di Indonesia
menyebabkan kondisi RH yang tinggi. Untuk mengatasi kondisi tersebut, digunakan
dehumidifier dan air conditioner (AC) untuk membantu menurunkan kelembapan
ruangan, namun dehumidifier dan AC hanya mencapai RH 60%.
Usaha lain yang dilakukan untuk meminimalkan kandungan lembab pada
sediaan adalah melakukan pengeringan bahan sebelum dilakukan formulasi, dengan
suhu 40oC selama 1 hari (orientasi) pada RH 60%, tujuannya untuk mengurangi
jumlah hidrat pada bahan. Sebelum pengujian kandungan lembab, granul effervescent
dikeringkan kembali dalam oven pada suhu 40oC selama 2 hari (bobot konstan)
sehingga kandungan lembab dalam sediaan turun.
45
Moisture analyzer berada di lantai 4 gedung laboratorium farmasi sedangkan
granulasi dilakukan di lantai 1. Untuk menghindari penyerapan lembab selama
pemindahan, granul disimpan dalam wadah kedap udara. Pengukuran kemudian
dilakukan dengan moisture analyzer pada suhu dan kelembaban kamar.
Hasil pengukuran kandungan lambab granul memenuhi persyaratan untuk
semua formula.
a b
Gambar 3. Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b) terhadap Kandungan Lembab Granul
Berdasarkan perhitungan desain faktorial didapat efek asam tartrat dalam
menentukan kandungan lembab granul effervescent adalah 0,04. Efek natrium
bikarbonat adalah | 0,06|, dan efek interaksi asam tartrat-natrium bikarbonat adalah
| 0,06|. Natrium bikarbonat dan interaksi asam-basa memiliki efek bernilai negatif,
hal ini menunjukkan natrium bikarbonat dan interaksi asam-basa dapat menurunkan
kandungan lembab granul effervescent. Natrium bikarbonat dan interaksi asam-basa
memiliki kekuatan sama untuk menurunkan kandungan lembab granul karena
memiliki nilai efek sama, keduanya lebih dominan dibandingkan efek asam tartrat.
0,95%
0,96%
0,97%
0,98%
0,99%
1,00%
1,01%
1000 1150 1300 1450 1600
Kand
ungan Lemba
b (%
)
Asam Tartrat (mg)
Level Rendah Basa Level Tinggi Basa
0,95%
0,96%
0,97%
0,98%
0,99%
1,00%
1,01%
1117,2 1285,2 1453,2 1621,2 1789,2
Kand
ungan Lemba
b (%
)
Natrium Bikarbonat (mg)Level Rendah Asam Level Tinggi Asam
46
Peningkatan jumlah asam tartrat akan meningkatkan kandungan lembab
granul pada level rendah basa, dan menurunkan kandungan lembab pada level tinggi
basa (gambar 3a), sedangkan pada gambar 3b peningkatan jumlah natrium
bikarbonat akan menurunkan kandungan lembab pada kedua level asam.
Diperkirakan ada interaksi antar faktor karena kedua garis yang pada gambar 3a dan
3b saling berpotongan.
Perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan 95% (F tabel 4,35)
untuk respon kandungan lembab granul diperlihatkan pada tabel XI.
Tabel XI. Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon Kandungan Lembab
Granul
Source of Variation
Degrees of freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 0,017 0,003 Treatment 3 0,011 0,004
a 1 0,002 0,002 0,257b 1 0,005 0,005 0,613
ab 1 0,004 0,004 0,477Experimental
error 20 0,157 0,008
Total 23 0,185
Keterangan a= asam tartrat; b= natrium bikarbonat; ab= interaksi
Berdasarkan perhitungan dengan yate’s treatment, tidak ada faktor yang
signifikan dan tidak ada interaksi asam tartrat dan natrium bikarbonat karena F
hitung semua faktor lebih kecil dari F tabel. Faktor asam tartrat dan natrium
bikarbonat diberi perlakuan yang sama, dalam hal ini suhu dan lama pengeringan
sehingga tidak berpengaruh signifikan. Kandungan lembab lebih dipengaruhi oleh
kondisi RH lingkungan.
47
3. Uji waktu larut
Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui waktu yang diperlukan granul
effervescent ekstrak herba pegagan untuk larut dalam air. Persyaratan waktu larut
granul effervescent adalah antara 60-150 detik. Pengamatan waktu larut granul
dilakukan dengan melarutkan sejumlah granul sesuai dengan formula dalam 200 ml
air. Proses larutnya granul effervescent dimulai dengan adanya penetrasi air ke dalam
granul, selanjutnya adanya penetrasi air akan membuat asam dan basa bereaksi untuk
menghasilkan gas CO2 yang menyebabkan granul hancur dan kemudian larut.
a b
Gambar 4. Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b) terhadap Waktu Larut Granul
Berdasarkan hasil perhitungan desain faktorial didapatkan efek asam tartrat
dalam menentukan waktu larut granul effervescent adalah 24,58, efek natrium
bikarbonat adalah | 6,94 |, dan interaksi antara asam tartrat-natrium bikarbonat
adalah | 10,54 |. Efek asam tartrat bernilai positif menunjukan bahwa faktor ini
meningkatkan waktu larut granul (menurunkan kelarutan). Efek natrium bikarbonat
60,00
65,00
70,00
75,00
80,00
1000 1150 1300 1450 1600
Waktu Larut (d
etik)
Asam Tartrat (mg)
Level Rendah Basa Level Tinggi Basa
60,00
65,00
70,00
75,00
80,00
1117,2 1285,2 1453,2 1621,2 1789,2
Waktu Larut (d
etik)
Natrium Bikarbonat (mg)
Level Rendah Asam Level Tinggi Asam
48
dan interaksi asam tartrat-natrium bikarbonat bernilai negatif berarti menurunkan
waktu larut granul (meningkatkan kelarutan).
Peningkatan jumlah asam tartrat dapat meningkatkan respon waktu larut
granul baik pada level rendah maupun level tinggi natrium bikarbonat (Gambar 4a).
Peningkatan jumlah natrium bikarbonat akan meningkatkan respon waktu larut
granul pada level rendah asam tartrat, dan menurunkan respon pada level tinggi asam
tartrat (Gambar 4b). Diperkirakan ada interaksi antar faktor karena kedua garis yang
pada gambar 4a dan 4b saling berpotongan.
Perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan 95% (F tabel 4,35)
untuk respon waktu larut granul diperlihatkan pada tabel XII.
Tabel XII. Perhitungan Yate’s Treatment pada Respon Waktu Larut Granul
Source of Variation
Degrees of freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 263,140 52,628 Treatment 3 1145,359 381,786
a 1 906,142 906,142 31,705b 1 72,211 72,211 2,527
ab 1 167,007 167,007 5,843Experimental
error 20 571,614 28,581
Total 23 21698,600
Keterangan a= asam tartrat; b= natrium bikarbonat; ab= interaksi
Perhitungan Yate’s treatment waktu larut granul menunjukkan F hitung
interaksi lebih besar dari F tabel menandakan adanya interaksi. F hitung asam tartrat
lebih besar dari F tabel menunjukkan pengaruh yang signifikan dan peran dominan
dalam menentukan waktu larut granul. Natrium bikarbonat tidak berpengaruh
signifikan karena F hitungnya lebih kecil dari F tabel.
49
Kelarutan asam tartrat jauh lebih besar dari natrium bikarbonat sehingga
asam tartrat berperan dominan. Pada suhu 20°C kelarutan asam tartrat 139 g/100 ml
sedangkan natrium bikarbonat 8,7 g/100 ml. Reaksi effervescent menyebabkan
adanya interaksi oleh kedua faktor.
4. Uji pH larutan
Pengujian ini bertujuan untuk mengetahui pH larutan effervescent ekstrak
herba pegagan. Nilai pH larutan dengan standar deviasi kecil menunjukkan campuran
granul yang homogen. Pada penelitian ini ditetapkan range pH 5-7 untuk membantu
kesetabilan asiatikosid dalam kondisi asam. Selain itu, pH yang terlalu rendah
berpotensi mengiritasi lambung.
Ekstrak herba pegagan pada sediaan effervescent memberikan pengaruh
tertentu sehingga pH larutan tidak dapat dihitung berdasarkan reaksi penetralan
Berdasarkan hasil pengujian didapatkan semua formula menghasilkan larutan
effervescent dengan pH yang dikehendaki.
a b Gambar 5. Pengaruh Level Asam Tartrat (a) dan Natrium Bikarbonat (b) terhadap pH
Larutan Granul Effervescent
4,00
5,00
6,00
7,00
1000 1150 1300 1450 1600
pH
Asam Tartrat (mg)Level Rendah Basa Level Tinggi Basa
4,00
5,00
6,00
7,00
1117,2 1285,2 1453,2 1621,2 1789,2
pH
Natrium Bikarbonat (mg)
Level Rendah Asam Level Tinggi Asam
50
Berdasarkan perhitungan desain faktorial efek asam tartrat dalam menentukan
pH larutan granul effervescent adalah | 0,70|, besar efek dari natrium bikarbonat
adalah 2,98, dan interaksi asam tartrat-natrium bikarbonat adalah 1. Asam tartrat
bernilai negatif menunjukkan bahwa efek ini menurunkan pH larutan. Natrium
bikarbonat dan interaksi asam tartrat-natrium bikarbonat bernilai positif berarti
meningkatkan pH larutan.
Gambar 5a menunjukkan bahwa peningkatan asam tartrat akan menurunkan
pH larutan pada level rendah natrium bikarbonat, dan meningkatkan pH larutan pada
level tinggi natrium bikarbonat. Pada gambar 5b menunjukkan bahwa dengan
peningkatan jumlah natrium bikarbonat akan menaikan respon pH larutan
effervescent baik pada level rendah maupun level tinggi asam tartrat. Diperkirakan
ada interaksi antar faktor karena kedua garis yang pada gambar 5a dan 5b saling
berpotongan.
Perhitungan Yate’s treatment dengan taraf kepercayaan 95% (F tabel 4,35)
untuk respon pH larutan granul effervescent diperlihatkan pada tabel XIII.
Tabel XIII. Perhitungan Yate’s treatment pada Respon pH Larutan Granul
Source of Variation
Degrees of freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 0,538 0,108 Treatment 3 15,482 5,161
a 1 0,711 0,711 8,358b 1 13,276 13,276 156,121
ab 1 1,495 1,495 17,581Experimental
error 20 1,701 0,085
Total 23 17,720
Keterangan a= asam tartrat; b= natrium bikarbonat; ab= interaksi
51
Hasil perhitungan pada tabel XIII menunjukkan F hitung interaksi lebih besar
dari F tabel menandakan adanya interaksi antara asam tartrat dan natrium bikarbonat
dalam mempengaruhi respon pH larutan. Pengaruh natrium bikarbonat dalam
mempengaruhi pH larutan lebih dominan dibandingkan asam tartrat.
Natrium bikarbonat berperan menghasilkan CO2 pada larutan effervescent.
Meningkatnya kadar CO2 menyebabkan pH larutan meningkat. Hal ini yang
menyebabkan natrium bikarbonat berperan dominan meningkatkan pH larutan.
F. Optimasi Formula
Formula granul effervescent dikatakan optimum apabila formula tersebut
memiliki sifat fisik yang baik sesuai yang dikehendaki. Uji sifat fisik yang dilakukan
sebagai kontrol kualitas granul effervescent adalah kecepatan alir, waktu larut, pH
dan kandungan lembab.
1. Kecepatan alir
Persamaan desain faktorial yang diperoleh dari perhitungan kecepatan alir
granul adalah Y = 59,47 – 1,11.10-2XA – 1,02.10-2 XB + 8,88.10-6XA XB
Berdasarkan persamaan tersebut dapat diperoleh suatu area contour plot
kecepatan alir granul effervescent ekstrak herba pegagan, tertera pada gambar 6.
52
Gambar 6. Contour Plot Kecepatan Alir Granul
Melalui contour plot tersebut, dapat ditentukan area komposisi yang optimum
dari granul effervescent ekstrak herba pegagan untuk mendapatkan respon kecepatan
alir yang diinginkan, terbatas pada level yang diteliti. Menurut Guyot (cit., Fudholi,
1983), apabila waktu yang diperlukan 100 gram serbuk untuk mengalir lebih lama
dari 10 detik (T>10) dapat dikatakan bahwa dalam fabrikasi pada skala industri akan
dijumpai kesulitan dalam hal regularitas berat tablet. Berdasarkan contour plot
tersebut dipilih semua area karena memenuhi kecepatan alir yang dikehendaki yakni
di atas 10 g/detik.
2. Kandungan lembab
Persamaan desain faktorial yang diperoleh dari kandungan lembab granul
effervescent adalah Y = 0,71 + 2,50.10-4XA + 1,49.10-4XB – 1,49.10-7XA XB.
Berdasarkan persamaan tersebut diperoleh area contour plot kandungan
granul effervescent ekstrak herba pegagan, tertera pada gambar 7.
1117,2
1285,2
1453,2
1621,2
1789,2
1000 1150 1300 1450 1600
Kecepatan Alir Granul Effervescent (g/detik)
46,3 g/detik 47 g/detik 47,7 g/detik 48,5 g/detik
Asam Tartrat (mg)
Natrium
Bikarbo
nat (m
g)
53
Gambar 7. Contour Plot Kandungan Lembab Granul Effervescent
Melalui contour plot tersebut ditemukan area optimum yang memenuhi
persyaratan kandungan lembab granul effervescent ekstrak herba pegagan yang
dikehendaki terbatas pada level yang diteliti. Menurut Allen (2007), kandungan
lembab granul effervescent < 1%, pada penelitian ini digunakan kandungan lembab ≤
0,99 %. Formula I (asam tinggi-basa tinggi), formula b (asam rendah-basa tinggi),
dan formula ab (asam rendah-basa rendah) seluruhnya berada pada area ≤ 0,99 %.
3. Waktu larut
Persamaan desain faktorial yang diperoleh dari waktu larut granul
effervescent adalah Y = 0,44 + 5,85.10-2 XA + 2,88.10-2 XB – 2,61.10-5XA XB.
Berdasarkan persamaan tersebut diperoleh area contour plot waktu larut
granul effervescent ekstrak herba pegagan, tertera pada gambar 8.
54
Gambar 8. Contour Plot Waktu Larut Granul Effervescent
Melalui contour plot tersebut, dapat ditentukan adanya area optimum dari
granul effervescent ekstrak herba pegagan untuk memperoleh waktu larut yang
dikehendaki terbatas pada level yang diteliti. Waktu larut dari granul effervescent
yang dikehendaki adalah kurang dari 2,5 menit (Wehling dan Fred, 2004).
Berdasarkan contour plot semua kurva memenuhi persyaratan waktu larut sehingga
dapat dipilih semua area untuk contour plot tersebut.
4. pH larutan
Persamaan desain faktorial yang diperoleh dari pH larutan granul effervescent
adalah Y = 7,74 – 4,19.10-3XA – 1,01.10-3XB + 2,48.10-6XA XB.
Berdasarkan persamaan tersbut diperoleh area contour plot pH larutan granul
effervescent ekstrak herba pegagan, tertera pada gambar 9.
1117,2
1285,2
1453,2
1621,2
1789,2
1000 1150 1300 1450 1600
Waktu Larut Granul Effervescent (detik)
63 detik 67 detik 72 detik 77 detik
Asam Tartrat (mg)
Natrium
Bikarbo
nat (m
g)
55
Gambar 9. Contour Plot pH Larutan Granul Effervescent
Berdasarkan hasil contour plot dapat ditentukan area optimum dari granul
effervescent ekstrak herba pegagan untuk mendapatkan pH larutan yang dikehendaki
terbatas pada level yang diteliti. Asiatikosid stabil pada pH asam, pada penelitian ini
dipilih pH 5-7 untuk pH larutan optimum. pH yang terlalu asam berpotensi
menyebabkan iritasi lambung dan member rasa larutan yang terlalu asam. Oleh
karena itu dipilih area dengan rentang pH larutan 5-7.
5. Superimposed contour plot
Melalui contour plot masing-masing uji sifat fisik granul, dibuat suatu
contour plot super imposed dengan menggabungkan area optimum dari masing-
masing contour plot uji sifat fisik granul effervescent, kemudian ditentukan area
56
komposisi optimum campuran asam tartrat-natrium bikarbonat sebagai formula
optimum granul effervescent ekstrak herba pegagan, terbatas pada level yang diteliti.
Formula optimum granul effervescent ekstrak herba pegagan, dapat diprediksi
dengan mencari area komposisi optimum untuk seluruh uji sifat fisik granul
effervescent yang dilakukan. Kurva area optimum uji sifat fisik granul effervescent
yang telah dipilih digabungkan dalam suatu contour plot super imposed. Pada level
yang diteliti, ditemukan area komposisi optimum campuran asam tartrat-natrium
bikarbonat untuk semua uji sifat fisik granul effervescent ekstrak herba pegagan.
Gambar 10. Contour Plot super Imposed Granul Effervescent Ekstrak Herba Pegagan
57
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian yang telah dilakukan maka dapat diambil beberapa
kesimpulan, sebagai berikut:
1. Ekstrak herba pegagan dapat diformulasi menjadi sediaan granul effervescent.
Rasa larutan effervescent yang dihasilkan manis dan sedikit asam dengan sensasi
segar.
2. Asam tartrat memberi efek dominan pada waktu larut granul effervescent.
Natrium bikarbonat memberi efek dominan pada pH larutan. Interaksi asam
tartrat-natrium bikarbonat memberi efek dominan pada kecepatan alir granul.
3. Ditemukan area komposisi optimum asam tartrat dan natrium bikarbonat.
B. Saran
1. Perlu dilakukan optimasi formula dengan bahan pengisi lain yang dapat
berfungsi sebagai pengering.
2. Perlu dilakukan penelitian serupa dengan level asam dan basa yang sama pada
kondisi ruangan yang memenuhi persyaratan (RH 25%, suhu 25oC).
58
DAFTAR PUSTAKA
Anonim 1986, Sediaan Galenik, 5-20, Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
Jakarta
Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, 48, 488, 601, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
Anonim, 1999, WHO Monographs on Selected Medicinal Plants, Vol 1, 77-83, World Health Organization, Geneva
Anonim, 2004, Monografi Ekstrak Tumbuhan Indonesia, vol 1, 77-79, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta
Anonim, 2008a, Medicina Systemica, http://www.adaptogeno.com, diakses pada 11 September 2008
Anonim, 2008b, Madecassol® tab, Drug Info MIMS Indonesia, http://www.mims.com/madecassol tab, diakses pada 24 Juli 2009
Anonim, 2008c, http://www.scientistsolution.com/t11475-image+j.html, diakses tanggal 20 okober 2008
Anonim, 2009a, Material Data Sheet Tartaric Acid MSDS, http://www.sciencelab.com, diakses tanggal 22 Juli 2009
Anonim, 2009b, Material Data Sheet Sodium Bicarbonate MSDS, http://www.sciencelab.com, diakses tanggal 22 Juli 2009
Allen, 2007, Effervescent Oral Care Compositions and Methods Of Use, http://www.wipo.int/pctdb/en/wo.jsp?wo=200703827&DISPLAY=DESC, diakses tanggal 12 maret 2009
Ansel, H. C., 1989, Introduction to Pharmaceutical Dosage Form, diterjemahkan oleh Farida Ibrahim, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi, Edisi IV, 147-148, 214, 607-608, Indonesia University Press, Jakarta
Avani, Shah, T., Dua, R., Renuka, 2006, Effervescent tablet, http://www.pharmpedia.com/Effervescent_tablet, diakses tanggal 11 Januari 2009
Banker, G.S., and Anderson, N.R., 1986, Tablet, in Lachman, L. Lieberman, H.A., and Kanig, L., The Theory and Practice of Industrial Pharmacy, diterjemahkan oleh Siti Suyatmi, Jilid II, Ed. III, 463-737, Universitas Indonesia Press, Jakarta
59
Bolton, S., 1997, Pharmaceutical Statistics, Practical and Clinical Application, 3rd
Ed., 308-337, Marcel Dekker, Inc., New York
Fudholi, A, 1983, Metodologi Formulasi Dalam Kompresi Direk, Medika 7, 586-
593, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta
Heinrich, M., Barnes, J., Gibbsons, S., and Williamson, E.M., 2004, Fundamentals of Pharmacognosy and Phytotherapy, 280, Elsever Science Ltd., London
Kormin, S., 2005, The Effect of Heat Processing On Triterpene Glycosides and Antioxidant Activity of Herbal Pegagan (Centella asiatica L. Urban) Drink, 20
Lachman, Lieberman L.,Herbert,A.,dan Joseph B.S., 1989, Pharmaceutical Dosage Form, 105, 107, 120, Marcel Dekker Inc, New York
Lindberg, N., Engfors, H., Ericsson, T., 1992, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Effervescent Pharmaceutical in Swarbricck, J., Boylan, J.C., Vol 5, 45-47, 50, 56-59, Marcel Dekker, Inc., New York
Mohrle, R., 1989, Effervescent Tablet, in Lieberman, H.A., Lachman, L., (eds), Pharmaceutical Dosage Form, Tablet, Vol. I, 287-305, Penerbit Warner Lambert Company, Morris Pliains, New Jersey
Parikh, M., 1997, Handbook of Pharmaceutical Granulation Technology, 63-64, Marcel Dekker, New York
Pramono, S., 2004, Standarisasi ekstrak herba pegagan (Centella asiatica (L.) Urban) berdasarkan kadar asiatikosida secara KLT-densitometri, Majalah Farmasi Indonesia, Vol. 15, no 3, 118-123, Universitas Gadjah Mada Press, Yogyakarta
Robinson, J.R., and Mc Ginity, J.W., 2002, Effervescent Granules and Methods for Their Preparation, United States Patent: 6,488,961 http://www.pharmcast.com Diakses pada 11 September 2008
Soegihardjo, C. J. dan Koensoemardiyah, 1995, Produksi Asiatikosida dan Senyawa Sekerabat dengan Kultur Suspensi Sel dari Centella Asiatica L. Urban, Fakultas Farmasi Universitas Gajah Mada, Yogyakarta.
Stahl, E., 1985, Drug Analysis by Chromatography and Microscopy : a practical supplement to to pharmacopias, diterjemahkan oleh Kosasih P. dan Soediro, 205-207, ITB, Bandung
Voigt, R., 1994, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Ed V, 141-142, 564, 577-578, diterjemahkan oleh Soendari Noerono, UGM Press, Yogyakarta
60
Wehling and Fred, 2004, Effervescent Composition Including Stevia, http://www.patentstorm.us/patent/6811793.html, diakses tanggal 11 Januari 2009
Wibisono, B. P., 2009, Optimasi Asam Sitrat dan Natrium Bikarbonat dalam Formula Granul Effervescent Ekstrak Herba Pegagan (Centellae asiaticae Herba) Dengan Metode Desain Faktorial, skripsi, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
Zeligs, M. A., and Bradlow H. L., 2006, Diindolylmethane (DIM), formed spontaneously from Indole-3-carbinol (I3C), is the dominant anti-proliferative indol in cell culture media after adding I3C, http://www.aidic.it/IBIC2008/webpapers/86Alupuli.pdf, diakses tanggal 22 Desember 2008
61
Lampiran 1. Surat Keterangan Resmi Simplisia Herba Pegagan
62
Lampiran 2. Notasi dan Formula Desain Faktorial
1. Notasi
Formula Faktor A Faktor B Interaksi 1 - - + a + - - b - + - ab + + +
2. Formula Desain Faktorial
Formula Asam Tartrat (mg)
Natrium Bikarbonat (mg)
1 1000 1117,2 a 1600 1117,2 b 1000 1789,2 ab 1600 1789,2
63
Lampiran 3. Data Pengujian Ekstrak
1. Organoleptis
Warna : Hijau tua / Hijau kehitaman
Bau : Manis (Khas)
Rasa : Pahit
2. Uji Kadar Air
Replikasi Kandungan lembab (%)
1 12,55 2 11,06 3 12,47 4 12,39 5 13,02 6 12,52 X 12,34
SD 0,66
3. Uji Daya Lekat
Replikasi Daya lekat (detik) 1 46,23 2 45.68 3 58.89 4 48.21 5 51.14 6 42.70 X 48,81
SD 5,68
64
Lampiran 4. Data Penetapan Kadar Asiatikosida
1. Kurva baku
Kadar asiatikosida
(µg/µl)
AUC
A = -2188507,45 B = 2838499,64 R = 0,9935
0,37 1815075 0,66 3419045 0,94 4599581 2,34 18071492
Totolan sebanyak 3 µl Persamaan kurva baku : Y = 2838499,64X – 2188507,45
2. Penetapan Kadar asiatikosida dalam ekstrak pegagan
Sampel AUC Kadar (%) Rata-rata (%) 1 4882581 1,66
1.42 2 3785338 1,40 3 2898660 1,19
65
Lampiran 5. Data Sifat Fisik Granul
1. Kecepatan alir (gram/detik)
No Formula 1 Formula a Formula b Formula ab 1 43,10 43,86 41,49 50,00 2 47,85 45,66 48,54 48,31 3 46,95 48,54 45,05 48,54 4 47,17 45,05 49,26 50,00 5 48,54 46,30 43,10 47,62 6 47,62 47,62 48,31 48,54 X 46,87 46,17 45,96 48,84
SD 1,92 1,71 3,23 0,96
2. Kandungan lembab (%)
No Formula 1 Formula a Formula b Formula ab 1 1,12% 0,90% 1,02% 0,90% 2 0,86% 1,08% 0,90% 0,96% 3 0,96% 0,98% 0,92% 0,90% 4 0,78% 0,92% 1,02% 1,10% 5 1,12% 1,08% 0,92% 0,96% 6 0,94% 1,08% 0,98% 0,90% X 0,96% 1,01% 0,96% 0,95%
SD 0,14 0,09 0,05 0,08
3. Waktu larut (detik)
No Formula 1 Formula a Formula b Formula ab 1 57,67 72,32 59,06 73,12 2 66,99 86,81 68,19 69,78 3 76,97 84,72 58,87 68,79 4 47,30 73,97 63,42 72,28 5 55,37 77,53 65,34 73,04 6 67,07 81,41 67,33 67,28 X 61,90 79,46 63,70 70,72
SD 10,52 5,84 4,02 2,45
66
4. pH larutan
No Formula 1 Formula a Formula b Formula ab 1 4,17 4,30 6,12 6,25 2 5,22 4,38 6,22 6,42 3 4,85 4,81 6,17 6,25 4 5,63 4,26 6,35 6,38 5 5,69 4,23 5,97 6,46 6 5,68 4,20 6,34 6,34 X 5,21 4,36 6,20 6,35
SD 0,61 0,23 0,14 0,09
67
Lampiran 6. Perhitungan Desain Faktorial
1. Kecepatan Alir Formula Asam tartrat Na- Bikarbonat Interaksi Respon
1 - - + 46,87 a + - - 46,17 b - + - 45,96 ab + + + 48,84
Efek asam tartrat = 46,87 46,17 – 45,96 48,84
2 2,18
Efek Na- Bikarbonat = 46,87– 46,17 45,96 48,842 1,76
Efek interaksi = 46,87 46,17 – 45,96 48,84 2 3,58 DOMINAN
Faktor A = level asam sitrat (1000 mg; 1600 mg) Faktor B = level natrium bikarbonat (1117,2 mg; 1789,2 mg)
Persamaan Y = bo + b1 (XA) + b2 (XB) + b12(XA) (XB)
Formula 1 46,87 = b0 + 1000b1 + 1117,2b2 + 1117200b12 (1) Formula a 46,17 = b0 + 1600b1 + 1117,2b2 + 1787520b12 (2) Formula b 45,96 = b0 + 1000b1 + 1789,2b2 + 1789200b12 (3) Formula ab 48,84 = b0 + 1600b1 + 1789,2b2 + 2862720b12 (4)
• Eliminasi (1) dan (2)
46,87 = b0 + 1000b1 + 1117,2b2 + 1117200b12
46,17 = b0 + 1600b1 + 1117,2b2 + 1787520b12 -
0,7 = -600b1 – 670320b12 (5)
• Eliminasi (3) dan (4) 45,96 = b0 + 1000b1 + 1789,2b2 + 1789200b12
48,84 = b0 + 1600b1 + 1789,2b2 + 2862720b12 - -2,88 = -600b1 – 1073520b12 (6)
• Eliminasi (5) dan (6) 0,7 = -600b1 – 670320b12 - 2,88 = -600b1 – 1073520b12 -
3,58 = 403200b12 b12 = 8,88.10-6
68
• Eliminasi (1) dan (3)
46,87 = b0 + 1000b1 + 1117,2b2 + 1117200b12 45,96 = b0 + 1000b1 + 1789,2b2 + 1789200b12 _
0,91 = -672b2 – 672000b12 (7)
• Subtitusi b12 ke persamaan (5) 0,7 = -600b1 – 670320 (8,88.10-6) 0,7 = -600b1 – 5,95 b1 = -1,11.10-2
• Subtitusi b12 ke persamaan (7) 0,91 = -672b2 – 672000 (8,88.10-6) 0,91 = -672b2 – 5,97 b2 = -1,02.10-2
• Substitusi b1, b2, b12 ke persamaan (1) 46,87 = b0 + 1000 (-1,11.10-2) + 1117,2 (-1,02.10-2) + 1117200 (8,88.10-6) 46,87 = b0 – 11,09 – 11,43 + 9,92 b0 = 59,47 jadi, persamaannya:
Y = 59,47 – 1,11.10-2XA – 1,02.10-2 XB + 8,88.10-6XA XB
2. Kandungan Lembab
Formula Asam tartrat Na- Bikarbonat Interaksi Respon
1 - - + 0,96 a + - - 1,01 b - + - 0,96 ab + + + 0,95
Efek asam tartrat = 0,96 1,01 – 0,96 0,95
2 0,04
Efek Na- Bikarbonat = 0,96 – 1,01 0,96 0,952
| 0,06|
Efek interaksi = 0,96 – 1,01 – 0,96 0,952 | 0,06|
Faktor A = level asam sitrat (1000 mg; 1600 mg) Faktor B = level natrium bikarbonat (1117,2 mg; 1789,2 mg)
69
Persamaan
Y = bo + b1 (XA) + b2 (XB) + b12(XA) (XB)
Formula 1 0,96 = b0 + 1000b1 + 1117,2b2 + 1117200b12 (1) Formula a 1,01 = b0 + 1600b1 + 1117,2b2 + 1787520b12 (2) Formula b 0,96 = b0 + 1000b1 + 1789,2b2 + 1789200b12 (3) Formula ab 0,95 = b0 + 1600b1 + 1789,2b2 + 2862720b12 (4)
• Eliminasi (1) dan (2)
0,96 = b0 + 750b1 + 750b2 + 562500b12
1,01 = b0 + 1200b1 + 750b2 + 900000b12 -
-0,05 = -600b1 – 670320b12 (5)
• Eliminasi (3) dan (4) 0,96 = b0 + 750b1 + 1500b2 + 1125000b12
0,95 = b0 + 1200b1 + 1500b2 + 1800000b12 - 0,01 = -600b1 – 1073520b12 (6)
• Eliminasi (5) dan (6) -0,05 = -450b1 – 337500b12 0,01 = -450b1 – 675000b12 -
-0.06 = 403200b12 b12 = -1,49.10-7
• Eliminasi (1) dan (3) 0,96 = b0 + 750b1 + 750b2 + 562500b12 0,96 = b0 + 750b1 + 1500b2 + 1125000b12 _
0 = -672b2 – 672000b12 (7)
• Subtitusi b12 ke persamaan (5) -0,05 = -600b1 – 670320 (-1,49.10-7) -0,05 = --600b1 + 0,10 b1 = 2,50.10-4
• Subtitusi b12 ke persamaan (7) 0 = -672b2 – 672000 (-1,49.10-7) 0 = -672b2 + 0,10 b2 = 1,49.10-4
70
• Substitusi b1, b2, b12 ke persamaan (1) 0,96 = b0 + 1000 (2,50.10-4) + 1117,2 (1,49.10-4) + 1117200 (-1,49.10-7) 0,96 = b0 + 0,18 + 0,10 – 0,10 b0 = 0,71 jadi, persamaannya: Y = 0,71 + 2,50.10-4XA + 1,49.10-4XB – 1,49.10-7XA XB
3. Waktu Larut granul
Formula Asam tartrat Na- Bikarbonat Interaksi Respon 1 - - + 61,90 a + - - 79,46 b - + - 63,70 ab + + + 70,72
Efek asam tartrat = 61,90 79,46 – 63,70 70,722 24,58 DOMINAN
Efek Na- Bikarbonat = 61,90 79,46 63,70 70,722
| 6,94 |
Efek interaksi = 61,90 79,46 63,70 70,722 | 10,54 |
Faktor A = level asam sitrat (1000 mg; 1600 mg) Faktor B = level natrium bikarbonat (1117,2 mg; 1789,2 mg)
Persamaan
Y = bo + b1 (XA) + b2 (XB) + b12(XA) (XB)
Formula 1 61,90 = b0 + 1000b1 + 1117,2b2 + 1117200b12 (1) Formula a 79,46 = b0 + 1600b1 + 1117,2b2 + 1787520b12 (2) Formula b 63,70 = b0 + 1000b1 + 1789,2b2 + 1789200b12 (3) Formula ab 70,72 = b0 + 1600b1 + 1789,2b2 + 2862720b12 (4)
• Eliminasi (1) dan (2)
61,90 = b0 + 750b1 + 750b2 + 562500b12
79,46 = b0 + 1200b1 + 750b2 + 900000b12 -
-17,56 = -600b1 – 670320b12 (5)
71
• Eliminasi (3) dan (4) 63,70 = b0 + 750b1 + 1500b2 + 1125000b12
70,72 = b0 + 1200b1 + 1500b2 + 1800000b12 - -7,02 = -600b1 – 1073520b12 (6)
• Eliminasi (5) dan (6) -17,56 = -600b1 – 670320b12 -7,02 = -600b1 – 1073520b12 -
-10,54 = 403200b12 b12 = -2,61.10-5
• Eliminasi (1) dan (3) 61,90 = b0 + 750b1 + 750b2 + 562500b12 63,70 = b0 + 750b1 + 1500b2 + 1125000b12 _
-1,80 = -672b2 – 672000b12 (7)
• Subtitusi b12 ke persamaan (5) -17,56 = -600b1 – 670320 (-2,61.10-5) -17,56 = -600b1 – 17,52 b1 = 5,85.10-2
• Subtitusi b12 ke persamaan (7) -1,80 = -672b2 – 672000b12 (-2,61.10-5) -1,80 = -672b2 + 17,57 b2 = 2,88.10-2
• Substitusi b1, b2, b12 ke persamaan (1) 61,90 = b0 + 1000 (5,85.10-2) + 1117,2 (2,88.10-2) + 1117200 (-2,61.10-5) 61,90 = b0 + 58,47 + 32,20 – 29,20 b0 = 0,44 jadi, persamaannya: Y = 0,44 + 5,85.10-2 XA + 2,88.10-2 XB – 2,61.10-5XA XB
72
4. pH larutan
Formula Asam tartrat Na- Bikarbonat Interaksi Respon 1 - - + 5,21 a + - - 4,36 b - + - 6,20 ab + + + 6,35
Efek asam tartrat = 5,21 4,36 – 6,20 6,352 | 0,70|
Efek Na- Bikarbonat = 5,21 – 4,36 6,20 6,352 2,98 DOMINAN
Efek interaksi = 5,21 4,36 6,20 6,352 1
Faktor A = level asam sitrat (1000 mg; 1600mg) Faktor B = level natrium bikarbonat (1117,2 mg; 1789,2mg)
Persamaan
Y = bo + b1 (XA) + b2 (XB) + b12(XA) (XB)
Formula 1 5,21 = b0 + 1000b1 + 1117,2b2 + 1117200b12 (1) Formula a 4,36 = b0 + 1600b1 + 1117,2b2 + 1787520b12 (2) Formula b 6,20 = b0 + 1000b1 + 1789,2b2 + 1789200b12 (3) Formula ab 6,35 = b0 + 1600b1 + 1789,2b2 + 2862720b12 (4)
• Eliminasi (1) dan (2)
5,21 = b0 + 750b1 + 750b2 + 562500b12
4,36 = b0 + 1200b1 + 750b2 + 900000b12 -
0,85 = -600b1 – 670320b12 (5)
• Eliminasi (3) dan (4) 6,20 = b0 + 750b1 + 1500b2 + 1125000b12
6,35 = b0 + 1200b1 + 1500b2 + 1800000b12 - -0,15 = -600b1 – 1073520b12 (6)
• Eliminasi (5) dan (6) 0,85 = -450b1 – 337500b12 - 0,15 = -450b1 – 675000b12 -
1 = 403200b12 b12 = 2,48.10-6
73
• Eliminasi (1) dan (3) 5,21 = b0 + 750b1 + 750b2 + 562500b12 6,20 = b0 + 750b1 + 1500b2 + 1125000b12 _
-0,99 = -672b2 – 672000b12 (7)
• Subtitusi b12 ke persamaan (5) 0,85 = -600b1 – 670320 (2,48.10-6) 0,85 = -600b1 – 1,66 b1 = -4,19.10-3
• Subtitusi b12 ke persamaan (7)
-0,99 = -672b2 – 672000b12 (2,48.10-6) -0,99 = -672b2 – 1,67 b2 = -1,01.10-3
• Substitusi b1, b2, b12 ke persamaan (1)
5,21 = b0 + 1000 (-4,19.10-3) + 1117,2 (-1,01.10-3) + 1117200 (2,48.10-6) 5,21 = b0 – 4,19 – 1,12 + 2,77 b0 = 7,74 jadi, persamaannya: Y = 7,74 – 4,19.10-3XA – 1,01.10-3XB + 2,48.10-6XA XB
74
Lampiran 7. Perhitungan Yate’s Treatment
Faktor : a. Asam tartrat
b. Natrium Bikarbonat
1. Kecepatan alir
Replikasi a1 a2 b1 b2 b1 b2
1 43,103 41,494 43,860 50,000 2 47,847 48,544 45,662 48,309 3 46,948 45,045 48,544 48,544 4 47,170 49,261 45,045 50,000 5 48,544 43,103 46,296 47,619 6 47,619 48,309 47,619 48,544
2yΣ = total sum of squares
2yΣ = (43,103)2 + (41,494)2 + (43,860)2 + (50,000)2 + (47,847)2 + (48,544)2 +
(45,662)2 + (48,309)2 + (46,948)2 + (45,045)2 + (48,544)2 + (48,544)2 +
(47,170)2 + (49,261)2 + (45,045)2 + (50,000)2 + (48,544)2 + (43,103)2 +
(46,296)2 + (47,619)2 + (47,619)2 + (48,309)2 + (47,619)2 + (48,544)2 _
( )24
1127,029 2
= 53045,545 – 52924,756 = 120,790
Ryy = replicate sum of square
Ryy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
1127,0294
192,091185,562191,476189,081190,362178,457 2222222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++++
= 52957,861 – 52924,756 = 33,105
Tyy = treatment sum of squares
Tyy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
1127,0296
293,016277,026275,756281,231 22222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++
= 52955,660 – 52924,756 = 30,904
75
Eyy = experiment al error sum of squares
= 120,790 – 33,105 – 30,904
= 56,780
Ayy = sum of squares associated with the different level of a
= ( ) ( ) ( )24
1127,02912
570,041556,988 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 52931,856 – 52924,756 = 7,100
Byy = sum of squares associated with the different level of b
= ( ) ( ) ( )24
1127,02912
568,772558,257 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 52929,362 – 52924,756 = 4,607
Source of Variation
Degrees of freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 33,105 6,621 Treatment 3 30,904 10,301
a 1 7,100 7,100 2,501b 1 4,607 4,607 1,623ab 1 19,197 19,197 6,762
Experimental error 20 56,780 2,839
Total 23 120,790
F a = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 839,2100,7
= 2,501
F b = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 839,2
4,067 = 1,623
76
F ab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 839,2
19,174 = 6,762
F tabel (1,20) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,35
2. Kandungan Lembab
Replikasi a1 a2 b1 b2 b1 b2
1 1,120 1,020 0,900 0,900 2 0,860 0,900 1,080 0,960 3 0,960 0,920 0,980 0,900 4 0,780 1,020 0,920 1,100 5 1,120 0,920 1,080 0,960 6 0,940 0,980 1,080 0,900
2yΣ = total sum of squares
2yΣ = (1,120)2 + (1,020)2 + (0,900)2 + (0,900)2 + (0,860)2 + (0,900)2 + (1,080)2 +
(0,960)2 + (0,960)2 + (0,920)2 + (0,980)2 + (0,900)2 + (0,780)2 + (1,020)2 +
(0,920)2 + (1,100)2 + (1,120)2 + (0,920)2 + (1,080)2 + (0,960)2 + (0,940)2 +
(0,980)2 + (1,080)2 + (0,900)2 _ ( )24
23,300 2
= 22,805 – 22,620 = 0,185
Ryy = replicate sum of square
Ryy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
23,3004
3,9004,0803,8203,7603,8003,940 2222222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++++
= 22,638 – 22,620 = 0,017
77
Tyy = treatment sum of squares
Tyy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
23,3006
5,7206,0405,7605,780 22222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++
= 22,631 – 22,620 = 0,011
Eyy = experiment al error sum of squares
= 0,185 – 0,017 – 0,011
= 0,157
Ayy = sum of squares associated with the different level of a
= ( ) ( ) ( )24
23,30012
11,76011,540 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 22,622 – 22,620 = 0,002
Byy = sum of squares associated with the different level of b
= ( ) ( ) ( )24
23,30012
11,48011,820 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 22,625 – 22,620 = 0,005
Source of Variation
Degrees of
freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 0,017 0,003 Treatment 3 0,011 0,004
a 1 0,002 0,002 0,257b 1 0,005 0,005 0,613ab 1 0,004 0,004 0,477
Experimental error 20 0,157 0,008
Total 23 0,185
78
F a = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 008,0002,0
= 0,257
F b = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 008,0
0,005 = 0,613
F ab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 008,0
0,004 = 0,477
F tabel (1,20) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,35
3. Waktu Larut
Replikasi a1 a2b1 b2 b1 b2
1 57,670 59,060 72,320 73,120 2 66,990 68,190 86,810 69,780 3 76,970 58,870 84,720 68,790 4 47,300 63,420 73,970 72,280 5 55,370 65,340 77,530 73,040 6 67,070 67,330 81,410 67,280
2yΣ = total sum of squares
2yΣ = (57,670)2 + (59,060)2 + (72,320)2 + (73,120)2 + (66,990)2 + (68,190)2 +
(86,810)2 + (69,780)2 + (76,970)2 + (58,870)2 + (84,720)2 + (68,790)2 +
(47,300)2 + (63,420)2 + (73,970)2 + (72,280)2 + (55,370)2 + (65,340)2 +
(77,530)2 + (73,040)2 + (67,070)2 + (67,330)2 + (81,410)2 + (67,280)2 _
( )24
72737800,43 2
79
2yΣ = 116055,131 – 114075,018 = 1980,113
Ryy = replicate sum of square
Ryy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
437,27378004
283,090271,280256,970289,350291,770262,170 2222222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++++
= 114338,158 – 114075,018 = 263,140
Tyy = treatment sum of squares
Tyy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
437,27378006
424,290476,760382,210371,370 22222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++
= 115220,377 – 114075,018 = 1145,359
Eyy = experiment al error sum of squares
= 1980,113 – 263,140 – 1145,359
= 571,614
Ayy = sum of squares associated with the different level of a
= ( ) ( ) ( )24
437,273780012
901,050753,580 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 114981,160 – 114075,018 = 906,142
Byy = sum of squares associated with the different level of b
= ( ) ( ) ( )24
437,273780012
806,500848,130 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 114147,229 – 114075,018 = 72,211
80
Source of Variation
Degrees of
freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 263,140 52,628 Treatment 3 1145,359 381,786
a 1 906,142 906,142 31,705b 1 72,211 72,211 2,527ab 1 167,007 167,007 5,843
Experimental error 20 571,614 28,581
Total 23 1980,113
F a = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 581,28142,906
= 31,705
F b = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 581,28
72,211 = 2,527
F ab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 581,28
167,007 = 5,843
F tabel (1,20) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,35
4. pH larutan
Replikasi a1 a2 b1 b2 b1 b2
1 4,170 6,120 4,300 6,250 2 5,220 6,220 4,380 6,420 3 4,850 6,170 4,810 6,250 4 5,630 6,350 4,260 6,380 5 5,690 5,970 4,230 6,460 6 5,680 6,340 4,200 6,340
81
2yΣ = total sum of squares
2yΣ = (4,170)2 + (6,120)2 + (4,300)2 + (6,250)2 + (5,220)2 + (6,220)2 + (4,380)2 +
(6,420)2 + (4,850)2 + (6,170)2 + (4,810)2 + (6,250)2 + (5,630)2 + (6,350)2 +
(4,260)2 + (6,380)2 + (5,690)2 + (5,970)2 + (4,230)2 + (6,460)2 + (5,680)2 +
(6,340)2 + (4,200)2 + (6,350)2 _ ( )24
17606,636 2
= 751,330 – 733,610 = 17,720
Ryy = replicate sum of square
Ryy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
636,176064
22,56022,35022,62022,08022,24020,840 2222222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++++
= 734,148 – 733,610 = 0,538
Tyy = treatment sum of squares
Tyy = ( ) ( ) ( ) ( ) ( )24
636,176066
38,10026,18037,17031,240 22222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +++
= 749,091 – 733,610 = 15,482
Eyy = experiment al error sum of squares
= 17,720 – 0,538 – 15,482
= 1,701
Ayy = sum of squares associated with the different level of a
= ( ) ( ) ( )24
636,1760612
64,28068,410 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 734,321 – 733,610 = 0,711
82
Byy = sum of squares associated with the different level of b
= ( ) ( ) ( )24
636,1760612
75,27057,420 222
−⎟⎟⎠
⎞⎜⎜⎝
⎛ +
= 746,886 – 733,610 = 13,276
Source of Variation
Degrees of freedom
Sum of Squares
Mean Squares F
Replicates 5 0,538 0,108 Treatment 3 15,482 5,161
a 1 0,711 0,711 8,358 b 1 13,276 13,276 156,121 ab 1 1,495 1,495 17,581
Experimental error 20 1,701 0,085
Total 23 17,720
F a = errorerimentalforsquaresmean
effectaforsquaresmeanexp
= 085,0711,0
= 8,358
F b = errorerimentalforsquaresmean
effectbforsquaresmeanexp
= 085,0
13,276 = 156,121
F ab = errorerimentalforsquaresmean
effectabforsquaresmeanexp
= 085,0
1,495 = 17,581
F tabel (1,20) dengan tingkat kepercayaan 95% adalah 4,35
83
Lampiran 8. Dokumentasi
Herba Pegagan
Ekstrak Kental Herba Pegagan
84
Serbuk Ekstrak Herba Pegagan
Formula I
85
Formula a
Formula b
86
Granul Formula ab
87
BIOGRAFI PENULIS
Ignatius Alfa Mardhiprasetya, penulis skripsi ini,
dilahirkan di Purwokerto, 13 Maret 1987, dari pasangan
Chris Sumardhi dan C.M. Prasetyani. Penulis pernah
menempuh pendidikan di TK Santa Maria Purwokerto
(1991-1993), SD Santa Maria Purwokerto (1993-1999),
SMP Bruderan Purwokerto (1999-2002), SMA Negeri 1
Purwokerto (2002-2005), dan melanjutkan di Fakultas
Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Dalam
kerangka mewujudkan spirit Ignasian, penulis aktif
dalam berbagai kegiatan kemahasiswaan: Asisten Praktikum Biokimia dan
Praktikum Formulasi Teknologi Sediaan Solid, Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas
Farmasi 2006 (Divisi Kesejahteraan Mahasiswa), Paduan Suara Mahasiswa Cantus
Firmus, Inisiasi Fakultas Farmasi 2007 (Pubdekdok), Pharmacy Performance 2007
(Perlengkapan), Pengobatan Gratis Fakultas Farmasi USD 2007 (Pubdekdok),
Pementasan Sendra Tari Teatrikal Komunitas Tari Genta Rakyat USD 2008 (Divisi
Artistik Panggung).