第23回浜松オンコロジーフォーラム 2019年 4月 13日

NPO法人がん情報局 1

3年間の米国留学で学んだこと

静岡県立総合病院 乳腺外科 松沼亮一

海外留学のイメージ

• 行ってはみたいけど自分には関係ない

• 留学すれば英語は自然に身につく

• 1年もすれば外国人と対等に議論できる

• 研究留学より臨床留学

• たくさんの外国人の知り合いができる

• お金は何とかなる

• 屁理屈が多い

• 研究留学から帰ってきたばかりの人は臨床能力が… 〇△×△△

×

×

×

いつ留学しようと思ったか

●自分の周りで大学院卒業後に留学する人が増えていった。

●彼らのほとんどは基礎研究で留学していた。

●乳がん診療においても基礎医学の知識はますます要求されている。

●日本の乳がん研究は欧米よりもかなりの周回遅れという現実。

●海外留学の後押しをしてくれた。

大学院に行くまで留学しようとは思わなかった

→機会があるのであれば、挑戦してみようと思った。

留学先を決める

→C.AはまずはCVを送って言われCVを送ったが、SABCSでおまえは誰だという感じであり実際ポジションもないとのこと。

→A.Sは乳腺外科の知り合いに紹介するということであったがその方も無理無理という返事。

→C.Pはポジションがないと一発リジェクト。

などなど…

自分でもいくつかアプライしたがことごとくリジェクト

プロテオゲノミクスの分野で著名なEllis先生のところにアプライしてみたいと渡辺先生に相談したところ、「ああ、Maｔthew Ellisなら昼飯一緒に食べたことあるよ。メールしてみるよ。」と！！実際、Ellis先生もたまたま人が欲しかったみたいで自分でお金を持ってくるならいいよという条件で受け入れてくれた。

タイミングが合わないと難しい。そもそも英語のレベルで敬遠されがち

Baylor College of Medicine, Matthew Ellis lab

2014年7月からスタート

Houston Astros champion parade

Congratulations, Houston Astros! Our hometown heroes have #EarnedHistory and are World Series Champions for the first time in franchise history! This is a memorable moment for our city and a time to celebrate, especially after the challenges Houston has faced over the past several months. In honor of our World Champions, and to allow our parents, students, and staff to enjoy the festivities and parade, all HISD schools and district offices will be closed on Friday, November 3, 2017. This decision was also made because we anticipate heavy traffic and congestion surrounding our schools during afternoon dismissal times. Let’s help our city celebrate! We are #HoustonStrong and we are #HISDStrong.

Sincerely,

HISD Superintendent

第23回浜松オンコロジーフォーラム 2019年 4月 13日

NPO法人がん情報局 2

Hurricane Harveyでの洪水Publications from Ellis lab

•Haricharan S et.al. Mammary Ductal Environment Is Necessary for Faithful Maintenance of Estrogen Signaling in ER(+) Breast Cancer. Cancer Cell. 2016 March 14;29(3):249-50.

•Haricharan S et al. Loss of MutL Disrupts Chk2-dependent Cell Cycle Control Through CDK4/6 to Promote Intrinsic Endocrine Therapy Resistance in Primary Breast Cancer. Cancer Discov. 2017 October;7(10):1-16.

•Lei JT et al. Functional Annotation of ESR1 Gene Fusions in Estrogen Receptor-Positive Breast Cancer. Cell Rep. 2018.

•Anurag M et.al. Comprehensive Profiling of DNA Repair Defects in Breast Cancer Identifies a Novel Class of Endocrine Therapy Resistance Drivers. Clin Cancer Res. 2018 Oct 1;24(19):4887-4899.

•Anurag M et.al. The prognostic effects of somatic mutations in ER-positive breast cancer. Nat Commun. 2018 Sep 4;9(1):3476.

•Matsunuma R et.al. DPYSL3 modulates mitosis, migration, and epithelial-to-mesenchymal transition in claudin-low breast cancer. Proceedings of the National Academy of Sciences. 2018 Nov.

•Endocrine Receptor and Breast Cancer

Identification and Verification of ESR1 Fusions

In-Frame ESR1 Fusions Confer Estrogen-Independent and Fulvestrant-Resistant Growth

Active ESR1 Fusions Promote Migration

Growth Driven by ESR1 Fusions Can Be Suppressed with CDK4/6 Inhibitor Treatment

第23回浜松オンコロジーフォーラム 2019年 4月 13日

NPO法人がん情報局 3

お気に入り

Chipotle Fajitas A Go Go

IPA beer

cBioPortal: http://www.cbioportal.org/?vm=r

よく利用したWebデータセット

ER+Any ERDPYSL3

VIM

r=0.67

mRNA expression (TCGA)

Kaplan Meier Plotter: http://kmplot.com/analysis/

CDK4 CDK6

よく利用したWebデータセット

CCLE: https://portals.broadinstitute.org/ccle

Oncomine: https://www.oncomine.org/resource/login.html

よく利用したWebデータセット

0 2 0 0 0 4 0 0 0 6 0 0 0 8 0 0 0 1 0 0 0 0

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L U Z P 1 low

L U Z P 1 h ig h

**

Oncologist. 2010;15 Suppl 5:39-48

Claudin-low subtype

第23回浜松オンコロジーフォーラム 2019年 4月 13日

NPO法人がん情報局 4

Claudin-low subtype

Mol Oncol. 2011 Feb;5(1):5-23

WH

IM P

DX

Mo

de

ls

WHIM：Washington University Human in Mouse lines.-Obtained from patients with advanced disease or larger primary tumors.

WHIM12 ： Claudin-low model

Cell Rep. 2013 Sep 26; 4(6)PDX

Me

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DPYSL3

p=4.73e-78

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-4

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6

The DPYSL3 phosphoprotein and mRNA are enriched in CLOW breast cancer.

DPYSL3: dihydropyrimidinase-like 3-nervous systemに高発現。 cell migrationや axon guidanceに関わる。-癌領域においては転移サプレッサーかプロモーターか明らかでない。乳癌においては機能の報告はない。

21PDXsのうちWHIM12で特に高い発現を示すもの 引用数との関係 METABRIC dataset

(クリニカルデータ)

B

A

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********

WHIM12

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WH

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0h 72h 96h

IncuCyte Growth Confluence

DPYSL3 is required for proliferation in DPYSL3-expressing CLOW breast cancer.

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NPO法人がん情報局 5

A

C

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shLuc shDPYSL3_1 shDPYSL3_2

Co

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Number of chromosomes

PI

2N 4N 4N 8N8N 2N

shDPYSL3_1shLuc shDPYSL3_2

Co

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Loss of DPYSL3 induces multi-nucleation and polyploidy.

E

β-actin

Vimentin

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WHIM12

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Vimentin & DAPI

F

0

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tin ****

Loss of DPYSL3 induces multi-nucleation and polyploidy.

Bollong et.al PNAS 2017

(p-Vimentin)

DPYSL3

Multi-nucleation

VIMP

shL

uc

MM

C+

12h0h 24h 40h

shD

PY

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3

MM

C+

WHIM12

SUM159

Ctrl

SUM159

DPYSL3

0h 12h 24h

DPYSL3-V5

V5

GAPDH

+-

SUM159

DPYSL3

DPYSL3 controls migration in CLOW breast cancer.

β-actin

DPYSL3

SNAIL

WHIM12 cells WHIM12

TWIST

sh

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3

H&E CD44 CD24

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**

*

DPYSL3

SNAIL

TWIST

β-actin

DNA-PKcs

WHIM12 tumors

DPYSL3 modulates migration via EMT.

DPYSL3 regulates EMT makers negatively.

DPYSL3

EMT

p=0.72 p=3.48e-07 p=0.00256

p=1.11e-09 p=0.242 p=3.36e-05

p=1.68e-09

SNAI1

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SNAI2 TWIST1 TWIST2

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ZEB1 ZEB2 VIM

p=7.18e-86

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DPYSL3

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B

HMLE / EMT model system

DPYSL3

SNAIL

TWIST

DNA-PKcs

DPYSL3

SNAIL

TWIST

β-actin

HMLE-TWIST cells

siDPYSL3 +-

D

N-Cadherin

DPYSL3

SNAIL

β-actin

SNAIL +-

WHIM12

C

DPYSL3 provides a negative feedback on EMT.

DPYSL3

EMTDPYSL3

PAK2

PAK1

WHIM12

DAPK3

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PKM

Input IP: DPYSL3

WHIM12

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p-P

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PAK2

p-PAK2

DPYSL3

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*

DPYSL3

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PAK2

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FRAX597

shDPYSL3

- + - +

p-Vimentin

Vimentin

PAK2 is a critical DPYSL3-interacting kinase that promotes migration.

第23回浜松オンコロジーフォーラム 2019年 4月 13日

NPO法人がん情報局 6

Acknowledgements

Baylor College of Medicine University of North Carolina

・Lester and Sue Smith Breast Center

・ Verna and Marrs McLean Department of Biochemistry and Molecular Biology

・ Department of Molecular & Human Genetics

・ Huffington Center on Aging

・ Lineberger Comprehensive Cancer Center

Anna MalovannayaAlexander B. Saltzman

Mei Leng

Chonghui ChengDan Cao

Ergun Sahin

Charles M. PerouCheng Fan

Eric ChangKimberly R. Holloway

Svasti HaricharanMeenakshi AnuragZeyi ZhengNindo PunturiAri GaoLeonardo Robert da SilvaVaishnavi Devarakonda

Matthew J. EllisDoug W. Chan

Beom-Jun KimPurba SinghJonathan T. LeiAiri HanMeghaShyam KavuriJunkai WangSinem Seker

Montreal Neurological Institute and Hospital

Alyson Fournier

・ Neurology and Neurosurgery, Anatomy and Cell Biology

University of Houston

Meghna TrivediSendurai A. Mani

MD Anderson Cancer center