Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ lá trầu không và thử...

22/09/2014

1

Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ lá trầu không và thử hoạt tính sinh học

Ths : Leâ Nhaát ThoángThs : Leâ Nhaát Thoáng

BAÙO CAÙO SEMINAR PIPER BETLE L.

MÔÛ ÑAÀU MÔÛ ÑAÀU -- ÑAËT VAÁN ÑEÀÑAËT VAÁN ÑEÀ-- Caây coù nguoàn goác töø Malaysia, hieän moïc hoang vaø Caây coù nguoàn goác töø Malaysia, hieän moïc hoang vaø troàng ôû nhieàu nöôùc thuoäc vuøng nhieät ñôùi.troàng ôû nhieàu nöôùc thuoäc vuøng nhieät ñôùi.

-- Y hoïc daân gian: chöõa vieâm muû chaân raêng, boûng, Y hoïc daân gian: chöõa vieâm muû chaân raêng, boûng, naáu nöôùc röûa veát thöông, trò choác lôû, …naáu nöôùc röûa veát thöông, trò choác lôû, …

-- Y hoïc hieän ñaïi: laù Traàu khoâng coù taùc duïng khaùng Y hoïc hieän ñaïi: laù Traàu khoâng coù taùc duïng khaùng khuaån toát, ñaëc bieät laø treân vi khuaån ñöôøng raêng khuaån toát, ñaëc bieät laø treân vi khuaån ñöôøng raêng mieäng, hoâ haáp treân vaø ñöôøng tieâu hoaù.mieäng, hoâ haáp treân vaø ñöôøng tieâu hoaù.

PIPER BETLE L.

TÌNH HÌNH NGHIEÂN CÖÙU NGOAØI NÖÔÙCTÌNH HÌNH NGHIEÂN CÖÙU NGOAØI NÖÔÙC

-- BS. L. Jenie (Indonesia) ñaõ chöùng minh ñöôïc taùc BS. L. Jenie (Indonesia) ñaõ chöùng minh ñöôïc taùc duïng khaùng khuaån toát cuûa cao Traàu treân caùc loaøi vi duïng khaùng khuaån toát cuûa cao Traàu treân caùc loaøi vi khuaån gaây beänh phoå bieán. khuaån gaây beänh phoå bieán.

-- TS. Johji Yamaha (Reseach Institute of Production TS. Johji Yamaha (Reseach Institute of Production Development Development -- Kioto Kioto -- Nhaät Baûn): chieát xuaát cao Nhaät Baûn): chieát xuaát cao Traàu khoâng laøm thuoác.Traàu khoâng laøm thuoác.

-- Nhaät Baûn, Thaùi Lan, Indonesia, Aán Ñoä … ñaõ Nhaät Baûn, Thaùi Lan, Indonesia, Aán Ñoä … ñaõ nghieân cöùu söû duïng cao chieát ethanol töø laù Traàu nghieân cöùu söû duïng cao chieát ethanol töø laù Traàu khoâng laøm thuoác döôùi daïng keïo chewingkhoâng laøm thuoác döôùi daïng keïo chewing--gum, daïng gum, daïng cream … phoøng trò beänh raêng mieäng vaø tieâu hoaù. cream … phoøng trò beänh raêng mieäng vaø tieâu hoaù.


TÌNH HÌNH NGHIEÂN CÖÙU TRONG NÖÔÙCTÌNH HÌNH NGHIEÂN CÖÙU TRONG NÖÔÙC

-- GS. TS. Ñoã Taát Lôïi ñaõ coù bieân soaïn veà phaân loaïi GS. TS. Ñoã Taát Lôïi ñaõ coù bieân soaïn veà phaân loaïi thöïc vaät, thaønh phaàn hoaù hoïc, taùc duïng, coâng duïng thöïc vaät, thaønh phaàn hoaù hoïc, taùc duïng, coâng duïng cuûa Traàu khoâng. cuûa Traàu khoâng.

-- GS. TS. Nguyeãn Xuaân Duõng vaø coäng söï ñaõ nghieân GS. TS. Nguyeãn Xuaân Duõng vaø coäng söï ñaõ nghieân cöùu veà thaønh phaàn hoaù hoïc cuûa tinh daàu laù Traàu cöùu veà thaønh phaàn hoaù hoïc cuûa tinh daàu laù Traàu khoâng ôû Hueá.khoâng ôû Hueá.

-- Tuy vaäy, vieäc chieát xuaát vaø söû duïng cao Traàu trong Tuy vaäy, vieäc chieát xuaát vaø söû duïng cao Traàu trong caùc saûn phaåm laøm thuoác vaãn chöa ñöôïc taùc giaû naøo caùc saûn phaåm laøm thuoác vaãn chöa ñöôïc taùc giaû naøo nghieân cöùu taïi Vieät Nam.nghieân cöùu taïi Vieät Nam.

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

2

PIPER BETLE L.

MUÏC TIEÂU CUÛA ÑEÀ TAØI MUÏC TIEÂU CUÛA ÑEÀ TAØI 1. NGHIEÂN CÖÙU QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT CAO 1. NGHIEÂN CÖÙU QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT CAO TÖØ LAÙ CAÂY TRAÀU KHOÂNG (TÖØ LAÙ CAÂY TRAÀU KHOÂNG (PIPER BETLEPIPER BETLE L.).L.).

2. NGHIEÂN CÖÙU XAÂY DÖÏNG TIEÂU CHUAÅN CÔ SÔÛ 2. NGHIEÂN CÖÙU XAÂY DÖÏNG TIEÂU CHUAÅN CÔ SÔÛ CHO LAÙ TRAÀU KHOÂNG (CHO LAÙ TRAÀU KHOÂNG (FOLIUM PIPERIS BELTEFOLIUM PIPERIS BELTE) ) NGUYEÂN LIEÄU VAØ CAO TRAÀU KHOÂNG NGUYEÂN LIEÄU VAØ CAO TRAÀU KHOÂNG ((EXTRACTUM PIPERIS BETLEEXTRACTUM PIPERIS BETLE) THAØNH PHAÅM.) THAØNH PHAÅM.

3. NGHIEÂN CÖÙU THÖÛ TAÙC DUÏNG KHAÙNG 3. NGHIEÂN CÖÙU THÖÛ TAÙC DUÏNG KHAÙNG KHUAÅN, ÑOÄC TÍNH CAÁP LD50 CUÛA CAO TRAÀU KHUAÅN, ÑOÄC TÍNH CAÁP LD50 CUÛA CAO TRAÀU KHOÂNG. KHOÂNG.


THÖÏC NGHIEÄM THÖÏC NGHIEÄM 1. KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG QUY TRÌNH CHEÁ BIEÁN LAÙ 1. KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG QUY TRÌNH CHEÁ BIEÁN LAÙ TRAÀU KHOÂNG NGUYEÂN LIEÄU (TRAÀU KHOÂNG NGUYEÂN LIEÄU (FOLIUM PIPERIS BETLEFOLIUM PIPERIS BETLE).).

2. KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG TIEÂU CHUAÅN LAÙ TRAÀU 2. KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG TIEÂU CHUAÅN LAÙ TRAÀU KHOÂNG NGUYEÂN LIEÄU (KHOÂNG NGUYEÂN LIEÄU (FOLIUM PIPERIS BETLEFOLIUM PIPERIS BETLE).).

3. XAÂY DÖÏNG QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT CAO TÖØ LAÙ TRAÀU 3. XAÂY DÖÏNG QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT CAO TÖØ LAÙ TRAÀU KHOÂNG.KHOÂNG.

4. KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG TIEÂU CHUAÅN CAO TRAÀU 4. KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG TIEÂU CHUAÅN CAO TRAÀU KHOÂNG THAØNH PHAÅM (KHOÂNG THAØNH PHAÅM (EXTRACTUM PIPERIS BETLEEXTRACTUM PIPERIS BETLE).).

5. NGHIEÂN CÖÙU THÖÛ TAÙC DUÏNG KHAÙNG KHUAÅN, ÑOÄC 5. NGHIEÂN CÖÙU THÖÛ TAÙC DUÏNG KHAÙNG KHUAÅN, ÑOÄC TÍNH CAÁP LD50 CUÛA CAO TRAÀU KHOÂNG. TÍNH CAÁP LD50 CUÛA CAO TRAÀU KHOÂNG.

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

KHAÛO SAÙT TIEÂU CHUAÅN LAÙ TRAÀU KHOÂNG KHAÛO SAÙT TIEÂU CHUAÅN LAÙ TRAÀU KHOÂNG

KHAÛO SAÙT THÖÏC VAÄT KHAÛO SAÙT THÖÏC VAÄT -- VI HOÏCVI HOÏC

KHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁTKHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁT

KHAÛO SAÙT ÑÒNH TÍNH KHAÛO SAÙT ÑÒNH TÍNH -- ÑÒNH LÖÔÏNG ÑÒNH LÖÔÏNG


KHAÛO SAÙT THÖÏC VAÄT KHAÛO SAÙT THÖÏC VAÄT -- VI HOÏC VI HOÏC

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

3

PIPER BETLE L.

1.1. Maûnh moâ meàm vôùi teá baøo chöùa chaát tieát maøu Maûnh moâ meàm vôùi teá baøo chöùa chaát tieát maøu vaøngvaøng

2.2. Khoái teá baøo chöùa chaát tieát maøu vaøng naèm rieâng Khoái teá baøo chöùa chaát tieát maøu vaøng naèm rieâng reõreõ

3.3. Bieáu bì coù 4 teá baøo keøm ñaëc tröngBieáu bì coù 4 teá baøo keøm ñaëc tröng

4.4. Teá baøo khí khoång coù / khoâng coù teá baøo keømTeá baøo khí khoång coù / khoâng coù teá baøo keøm

5.5. Maûnh maïch xoaénMaûnh maïch xoaén

6.6. Ñoaïn loâng che chôû cuûa cuoáng laù vaø gaân laù Ñoaïn loâng che chôû cuûa cuoáng laù vaø gaân laù

4


KHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁT KHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁT

00%00%11.65%11.65%2.45%2.45%4.18%4.18%11.99%11.99%Trung Trung bình bình

0011.20%2.52%4.27%11.94%Laàn 3Laàn 3

0011.90%2.36%4.08%12.01%Laàn 2Laàn 2

0011.85%2.48%4.18%12.02%Laàn 1Laàn 1

% taïp% taïp% döôïc lieäu qua % döôïc lieäu qua raây 0.35 mmraây 0.35 mm

Tro khoâng Tro khoâng tan / HCltan / HCl

Tro toaøn Tro toaøn phaàn phaàn Ñoä aåm Ñoä aåm

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

ÑÒNH TÍNH DÒCH CHIEÁT LAÙ TRAÀU KHOÂNGÑÒNH TÍNH DÒCH CHIEÁT LAÙ TRAÀU KHOÂNG

5g boät laù 5g boät laù

Dòch chieát Dòch chieát ñònh tính ñònh tính

100ml H2O / coàn 95%

Ñun hoài löu caùch

thuyû / 30’

Loïc

Dòch loïc Dòch loïc 0.5g than hoaït

Ñun caùch thuyû / 15’

Loïc

Dòch chieát nöôùc Dòch chieát nöôùc Dòch chieát coàn 95%Dòch chieát coàn 95%

TT NaOH 10%TT NaOH 10% Dd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam

TT diazoniumTT diazonium Dd cam ñoû camDd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam

TT FeCl3TT FeCl3 Dd xanh luïc + Dd xanh luïc + Dd xanh luïc + Dd xanh luïc +

LiebermanLiebermanVoøng tieáp xuùc ñoû naâu Voøng tieáp xuùc ñoû naâu + lôùp maøu luïc khueách + lôùp maøu luïc khueách taùn töø döôùi leân taùn töø döôùi leân

Voøng tieáp xuùc ñoû naâu + Voøng tieáp xuùc ñoû naâu + lôùp maøu luïc khueách taùn lôùp maøu luïc khueách taùn töø döôùi leân töø döôùi leân

Ñònh tính Ñònh tính alkaloid alkaloid Phaûn öùng yeáu Phaûn öùng yeáu


DÒCH CHIEÁT NÖÔÙC

DÒCH CHIEÁT COÀN

Phaûn öùng ñònh tính alkaloid / dc nöôùc

a b c d

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

4

PIPER BETLE L.

ÑÒNH TÍNH BAÈNG SAÉC KYÙ LÔÙP MOÛNG ÑÒNH TÍNH BAÈNG SAÉC KYÙ LÔÙP MOÛNG

1. Dòch chieát coàn cuûa laù 1. Dòch chieát coàn cuûa laù

2. Dòch coàn cuûa cao chieát 2. Dòch coàn cuûa cao chieát

UV 254nm UV 365nm


XAÙC ÑÒNH HAØM LÖÔÏNG CHAÁT CHIEÁT ÑÖÔÏC XAÙC ÑÒNH HAØM LÖÔÏNG CHAÁT CHIEÁT ÑÖÔÏC

% chaát chieát ñöôïc baèng coàn 95% % chaát chieát ñöôïc baèng coàn 95% (phöông phaùp noùng)(phöông phaùp noùng)

% chaát chieát ñöôïc baèng nöôùc % chaát chieát ñöôïc baèng nöôùc (phöông phaùp noùng)(phöông phaùp noùng)

Laàn 1Laàn 1 16.853 28.089

Laàn 2Laàn 2 16.853 30.337

Laàn 3Laàn 3 16.322 29.213

Trung Trung bình bình 16.67616.676 29.21329.213

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

TIEÂU CHUAÅN CHAÁT LÖÔÏNG LAÙ TRAÀU KHOÂNGTIEÂU CHUAÅN CHAÁT LÖÔÏNG LAÙ TRAÀU KHOÂNGChæ tieâu kieåm nghieäm Chæ tieâu kieåm nghieäm Möùc tieâu chuaån Möùc tieâu chuaån

1. Moâ taû 1. Moâ taû Boät xanh naâu nhaït tôùi naâu nhaït, muøi Boät xanh naâu nhaït tôùi naâu nhaït, muøi ñaëc tröng, kích thöôùc 1.5 ñaëc tröng, kích thöôùc 1.5 –– 4mm 4mm

2. Boät döôïc lieäu 2. Boät döôïc lieäu Coù caùc caáu töû ñaëc tröng Coù caùc caáu töû ñaëc tröng

3. Ñònh tính: 3. Ñònh tính: -- TT NaOH 10%TT NaOH 10%-- TT diazoniumTT diazonium-- TT FeCl3 TT FeCl3

-- Dd cam ñoû camDd cam ñoû cam-- Dd cam ñoû camDd cam ñoû cam-- Dd xanh luïc roõ Dd xanh luïc roõ

4. Haøm löôïng chaát chieát ñöôïc / coàn 95%4. Haøm löôïng chaát chieát ñöôïc / coàn 95% 13%13%

5. Ñoä aåm 5. Ñoä aåm 13%13%

6. Tro toaøn phaàn 6. Tro toaøn phaàn 6%6%

7. Tro khoâng tan / HCl7. Tro khoâng tan / HCl 4%4%

8. Taïp: 8. Taïp: -- döôïc lieäu qua raây 0.35 mmdöôïc lieäu qua raây 0.35 mm-- taïp voâ cô vaø höõu cô taïp voâ cô vaø höõu cô

15%15% 1%1%


KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT KHAÛO SAÙT VAØ XAÂY DÖÏNG QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT CAO TÖØ LAÙ TRAÀU KHOÂNG (CAO TÖØ LAÙ TRAÀU KHOÂNG (FOLIUM PIPERIS BETLEFOLIUM PIPERIS BETLE))

Boät laù Traàu Boät laù Traàu

Chieát hoài löu / 2(h)

Dòch chieát Coâ chaân khoâng

Cao seät

Dm chieát: coàn X%Dm chieát: coàn X%

Theâm coàn, ñeå laéng / maùt

Cao thaønh phaåmCao thaønh phaåmKhoaùng

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

5

PIPER BETLE L.

Chæ tieâu khaûo saùt Chæ tieâu khaûo saùt X = 25%X = 25% X = 50%X = 50% X = 96%X = 96%

Thöû Thöû tinh tinh khieát khieát vaø H%vaø H%

Ñoä aåm Ñoä aåm 16.09%16.09% 18.93%18.93% 15.19%15.19%

Tro toaøn phaàn Tro toaøn phaàn 4.93%4.93% 4.58%4.58% 4.20%4.20%

Tro khoâng tan trong acid Tro khoâng tan trong acid 1.36%1.36% 1.29%1.29% 1.24%1.24%

Hieäu suaát chieát xuaát H%Hieäu suaát chieát xuaát H% 18.30%18.30% 18.45%18.45% 18.06%18.06%

MIC MIC ((g/mlg/ml ))

Streptococcus faecalis Streptococcus faecalis 20482048 20482048 256256

Staphylococcos aureus Staphylococcos aureus 512512 512512 256256

Escherichia coli Escherichia coli 10241024 10241024 512512

Pseudomonas aeruginosaPseudomonas aeruginosa 10241024 10241024 256256

MRSAMRSA 512512 512512 256256


QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT QUY TRÌNH CHIEÁT XUAÁT

Boät laù Traàu Boät laù Traàu

Chieát hoài löu / 2(h)

Dòch chieát Coâ chaân khoâng

Cao seät

Dm chieát: coàn 96%Dm chieát: coàn 96%

Theâm coàn, ñeå laéng / maùt

Cao thaønh phaåmCao thaønh phaåmKhoaùng

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

KHAÛO SAÙT TIEÂU CHUAÅN CAO TRAÀU KHOÂNG KHAÛO SAÙT TIEÂU CHUAÅN CAO TRAÀU KHOÂNG

MOÂ TAÛ MOÂ TAÛ

KHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁTKHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁT

KHAÛO SAÙT ÑÒNH TÍNH KHAÛO SAÙT ÑÒNH TÍNH

HAØM LÖÔÏNG KIM LOAÏI NAËNGHAØM LÖÔÏNG KIM LOAÏI NAËNG

ÑOÄ VOÂ KHUAÅN ÑOÄ VOÂ KHUAÅN


KHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁT KHAÛO SAÙT ÑOÄ TINH KHIEÁT

Ñoä aåm (%)Ñoä aåm (%) Tro toaøn phaàn (%)Tro toaøn phaàn (%) Tro khoâng tan / HCl (%)Tro khoâng tan / HCl (%)

Laàn 1 Laàn 1 15.2315.23 4.9414.941 1.261.26

Laàn 2Laàn 2 14.5614.56 4.9414.941 1.291.29

Laàn 3Laàn 3 15.2115.21 4.8234.823 1.201.20

Trung bình Trung bình 15.0015.00 4.9014.901 1.251.25

Tyû leä Tyû leä cao : coàn 95% cao : coàn 95%

(g/ml)(g/ml)1 : 11 : 1 1 : 21 : 2 1 : 31 : 3 1: 41: 4

Dung dòch Dung dòch thu ñöôïc thu ñöôïc

Trong suoát, Trong suoát, xanh naâu, hôi xanh naâu, hôi

saùnh saùnh


saùnhsaùnh


saùnhsaùnh

Trong suoát, Trong suoát, xanh naâuxanh naâu

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

6

PIPER BETLE L.

ÑÒNH TÍNH DÒCH CHIEÁT CAO LAÙ TRAÀU KHOÂNGÑÒNH TÍNH DÒCH CHIEÁT CAO LAÙ TRAÀU KHOÂNG

5g cao chieát 5g cao chieát

Dòch chieát Dòch chieát ñònh tính ñònh tính

50ml coàn 95%

Ñun hoài löu caùch

thuyû / 30’

Loïc

Dòch loïc Dòch loïc 0.5g than hoaït

Ñun caùch thuyû / 15’

Loïc

Dòch chieát cuûa cao coàn 96%Dòch chieát cuûa cao coàn 96%

TT NaOH 10%TT NaOH 10% Dd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam

TT diazoniumTT diazonium Dd cam ñoû cam Dd cam ñoû cam

TT FeCl3TT FeCl3 Dd xanh luïc + Dd xanh luïc +

LiebermanLieberman Voøng tieáp xuùc ñoû naâu + lôùp maøu Voøng tieáp xuùc ñoû naâu + lôùp maøu luïc khueách taùn töø döôùi leân luïc khueách taùn töø döôùi leân


1. oáng chöùng

2. TT NaOH 10%

3. TT diazonium

4. TT FeCl3

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

ÑÒNH TÍNH BAÈNG SAÉC KYÙ LÔÙP MOÛNG ÑÒNH TÍNH BAÈNG SAÉC KYÙ LÔÙP MOÛNG

1. Dòch chieát coàn cuûa laù

2. Dòch coàn cuûa cao chieát

UV 254nm UV 365nm


KHAÛO SAÙT HAØM LÖÔÏNG KIM LOAÏI NAËNG KHAÛO SAÙT HAØM LÖÔÏNG KIM LOAÏI NAËNG

KIM LOAÏI KHAÛO SAÙT KIM LOAÏI KHAÛO SAÙT ÑÔN VÒ ÑÔN VÒ KEÁT QUAÛ KEÁT QUAÛ PHÖÔNG PHAÙP PHÖÔNG PHAÙP

Hg Hg ppm ppm 0.0070.007Tk: AOAC 971 Tk: AOAC 971 –– 2121

(AAS)(AAS)

As As ppmppm 2.192.19Tk: AOAC 986.15Tk: AOAC 986.15

(AAS)(AAS)

Pb Pb ppmppmKhoâng phaùt Khoâng phaùt hieän thaáy, hieän thaáy,

MLOD = 15 MLOD = 15

Tk: AOAC 986.15Tk: AOAC 986.15(CPI)(CPI)

Toång kim loaïi naëng Toång kim loaïi naëng quy ra chì quy ra chì ppmppm < 10< 10 Tk: TCVN 6972 Tk: TCVN 6972 --

20012001

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

7

PIPER BETLE L.

KHAÛO SAÙT ÑOÄ NHIEÃM KHUAÅN CUÛA CAO KHAÛO SAÙT ÑOÄ NHIEÃM KHUAÅN CUÛA CAO

Loaïi VKLoaïi VK VK hieáu khí + naám moác VK hieáu khí + naám moác VK kî khí VK kî khí

Keát quaû Keát quaû ((--)) ((--))

-- Phöông phaùp thöû: caáy tröïc tieáp (DÑVN III)Phöông phaùp thöû: caáy tröïc tieáp (DÑVN III)

-- Moâi tröôøng thöû: Soybean Moâi tröôøng thöû: Soybean –– casein (VK hieáu khí + casein (VK hieáu khí + naám moác), Fluid Thioglycolat (VK kî khí)naám moác), Fluid Thioglycolat (VK kî khí)


KHAÛO SAÙT HOAÏT TÍNH KHAÙNG KHUAÅN KHAÛO SAÙT HOAÏT TÍNH KHAÙNG KHUAÅN

--Phöông phaùp thöûPhöông phaùp thöû: phöông phaùp pha loaõng treân moâi tröôøng raén: phöông phaùp pha loaõng treân moâi tröôøng raén

Chuûng vi khuaån Chuûng vi khuaån MIC (MIC (g/ml)g/ml)

Streptococcus faecalis ATCC 29212Streptococcus faecalis ATCC 29212 256256

Staphylococcus aureus ATCC 29213Staphylococcus aureus ATCC 29213 256256

Escherichia coli 25922Escherichia coli 25922 512512

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 512512

Staphylococcus aureus Staphylococcus aureus khaùng methicillin khaùng methicillin 256256

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

KHAÛO SAÙT ÑOÄC TÍNH CAÁP LD50 KHAÛO SAÙT ÑOÄC TÍNH CAÁP LD50

--Phöông phaùp thöû: Phöông phaùp thöû:

--Ñoäng vaät thí nghieäm: chuoät nhaét caû hai gioáng, ñaït tieâu chuaån Ñoäng vaät thí nghieäm: chuoät nhaét caû hai gioáng, ñaït tieâu chuaån thí nghieäm, naëng 20 thí nghieäm, naëng 20 2g.2g.

--Maãu thöû: 1.5g (CX) cao + hoãn hôïp (1.5ml coàn + 1.5 ml Maãu thöû: 1.5g (CX) cao + hoãn hôïp (1.5ml coàn + 1.5 ml glycerin), theâm H2O töø töø ñeán ñuû 50ml, khuaáy troän kyõ ñeå taïo glycerin), theâm H2O töø töø ñeán ñuû 50ml, khuaáy troän kyõ ñeå taïo hoãn dòch mòn.hoãn dòch mòn.

-- dung moâi ñoái chöùng: hh H2O chöùa 6% coàn vaø glcerin (ñoàng dung moâi ñoái chöùng: hh H2O chöùa 6% coàn vaø glcerin (ñoàng löôïng, TT/TT)löôïng, TT/TT)


Nhoùm Nhoùm Theå tích cho uoáng Theå tích cho uoáng

(ml/10g chuoät)(ml/10g chuoät)Lieàu maãu thöû Lieàu maãu thöû (g/kg chuoät)(g/kg chuoät)

Soá chuoät Soá chuoät thí thí

nghieäm nghieäm

Soá Soá chuoät chuoät cheát cheát

11 0.20 ml dm * 4 laàn 0.20 ml dm * 4 laàn (nhoùm chöùng)(nhoùm chöùng)

-------------------- 1010 00

22 0.10 ml hoãn dòch thöû 0.10 ml hoãn dòch thöû 0.300.30 1010 00

33 0.20 ml hoãn dòch thöû * 1 laàn 0.20 ml hoãn dòch thöû * 1 laàn 0.600.60 1010 00

44 0.20 ml hoãn dòch thöû * 2 laàn0.20 ml hoãn dòch thöû * 2 laàn 1.201.20 1010 00



BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

8

PIPER BETLE L.

KEÁT QUAÛ:KEÁT QUAÛ:--Chuoät nhoùm 1 vaø 2 (Chuoät nhoùm 1 vaø 2 (möùc lieàu 0.30 g/kgmöùc lieàu 0.30 g/kg): hoaït ñoäng vaø ): hoaït ñoäng vaø aên uoáng bình thöôøngaên uoáng bình thöôøng

--Caùc nhoùm thöû khaùc (Caùc nhoùm thöû khaùc (0.60 0.60 –– 2.40 g/kg2.40 g/kg): coù bieåu hieän ): coù bieåu hieän giaûm hoaït ñoäng, thôû yeáu, ngoài hoaëc naèm yeân. giaûm hoaït ñoäng, thôû yeáu, ngoài hoaëc naèm yeân. Sau 30’Sau 30’chuoät trôû laïi hoaït ñoäng bình thöôøng.chuoät trôû laïi hoaït ñoäng bình thöôøng.

--Sau 24hSau 24h, chuoät taát caû caùc nhoùm hoaït ñoäng vaø aên uoáng , chuoät taát caû caùc nhoùm hoaït ñoäng vaø aên uoáng bình thöôøng.bình thöôøng.

--Khoâng xaùc ñònh ñöôïc lieàu gaây cheát LD50 duø Khoâng xaùc ñònh ñöôïc lieàu gaây cheát LD50 duø ñaõ cho chuoät uoáng hoãn dòch thöû ñeán lieàu toái ña.ñaõ cho chuoät uoáng hoãn dòch thöû ñeán lieàu toái ña.


TIEÂU CHUAÅN CHAÁT LÖÔÏNG CAO TRAÀU KHOÂNGTIEÂU CHUAÅN CHAÁT LÖÔÏNG CAO TRAÀU KHOÂNGChæ tieâu kieåm nghieäm Chæ tieâu kieåm nghieäm Möùc tieâu chuaån Möùc tieâu chuaån

1. Moâ taû1. Moâ taû Cao seät, xanh naâu, muøi haêng maïnh, vò cay noàng ñaëc tröng.

2. Ñònh tính2. Ñònh tính: : -- TT NaOH 10%TT NaOH 10%-- TT diazoniumTT diazonium-- TT FeCl3 TT FeCl3 -- SKLM SKLM

- Dd cam ñoû cam- Dd cam ñoû cam- Dd xanh luïc roõ - Coù caùc veát chính töông öùng maøu saéc vaø Rf vôùi caùc veát cuûa dòch chieát traàu khoâng chuaån.

3. Haøm löôïng chaát bay hôi 3. Haøm löôïng chaát bay hôi 16%

4. Tro toaøn phaàn 4. Tro toaøn phaàn 8%

5. Tro khoâng tan / HCl5. Tro khoâng tan / HCl 4%

6. Ñoä tan 6. Ñoä tan 2g cao phaûi tan hoaøn toaøn, cho dd trong suoát vôùi 4ml coàn 95%

BAÙO CAÙO SEMINAR

PIPER BETLE L.

KEÁT QUAÛKEÁT QUAÛ Khaûo saùt, xaây döïng quy trình thu haùi, cheá bieán laù Traàu khoâng Khaûo saùt, xaây döïng quy trình thu haùi, cheá bieán laù Traàu khoâng nguyeân lieäu. nguyeân lieäu.

Khaûo saùt ñeå xaây döïng TCCS cho laù Traàu khoâng nguyeân lieäu. Khaûo saùt ñeå xaây döïng TCCS cho laù Traàu khoâng nguyeân lieäu.

Xaây döïng TCCS cho laù Traàu khoâng nguyeân lieäu.Xaây döïng TCCS cho laù Traàu khoâng nguyeân lieäu.

Khaûo saùt caùc quy trình chieát cao töø laù Traàu khoâng.Khaûo saùt caùc quy trình chieát cao töø laù Traàu khoâng.

Xaây döïng quy trình chieát cao töø laù Traàu khoâng baèng coàn 96%.Xaây döïng quy trình chieát cao töø laù Traàu khoâng baèng coàn 96%.

Khaûo saùt haøm löôïng kim loaïi naëng, ñoä voâ khuaån vaø caùc chæ tieâu Khaûo saùt haøm löôïng kim loaïi naëng, ñoä voâ khuaån vaø caùc chæ tieâu ñeå xaây döïng TCCS cho cao chieát töø laù traàu khoâng.ñeå xaây döïng TCCS cho cao chieát töø laù traàu khoâng.

Xaây döïng TCCS cho cao chieát töø laù Traàu khoâng.Xaây döïng TCCS cho cao chieát töø laù Traàu khoâng.

Nghieân cöùu thöû hoaït tính khaùng khuaån vaø ñoäc tính caáp treân cao Nghieân cöùu thöû hoaït tính khaùng khuaån vaø ñoäc tính caáp treân cao Traàu khoâng ñeå ñònh höôùng tieáp theo cho caùc nghieân cöùu veà sau.Traàu khoâng ñeå ñònh höôùng tieáp theo cho caùc nghieân cöùu veà sau.


THAÛO LUAÄN THAÛO LUAÄN

CTY HONSU (NHCTY HONSU (NHẬẬT BT BẢẢN)N) TCCS TCCS ĐĐAÕ XAÂY DÖÏNG AÕ XAÂY DÖÏNG

Tro toaøn phaàn Tro toaøn phaàn 8.0% 8.0% Tro toaøn phaàn Tro toaøn phaàn 8.0%8.0%

Tro khoâng tan / HClTro khoâng tan / HCl 1.0%1.0% Tro khoâng tan / HClTro khoâng tan / HCl 4.0%4.0%

Caén sau khi bay hôi Caén sau khi bay hôi 50 50 –– 60%60% Haøm löôïng chaát bay hôi Haøm löôïng chaát bay hôi 16%16%

Haøm löôïng nöôùc Haøm löôïng nöôùc 10%10% Haøm löôïng coàn Haøm löôïng coàn

Haøm löôïng coàn Haøm löôïng coàn 20 20 –– 30%30% Ñoä tan Ñoä tan 2g cao tan hoaøn toaøn vaø 2g cao tan hoaøn toaøn vaø taïo dd trong suoát vôùi taïo dd trong suoát vôùi 4ml coàn 95% 4ml coàn 95%

BAÙO CAÙO SEMINAR

22/09/2014

9

PIPER BETLE L.

THAÛO LUAÄN THAÛO LUAÄN

Tea tree oil Tea tree oil Cao Traàu khoâng Cao Traàu khoâng Penicilline G.Penicilline G.

S. faecalis S. faecalis 50005000 256256 0.010.01

S. aureusS. aureus 20002000 256256 0.030.03

E. coliE. coli 20002000 512512 128128

P. aeruginosae P. aeruginosae 1000010000 256256 RR

MRSA MRSA 20002000 256256 128128

BAÙO CAÙO SEMINAR

XIN CAÛM ÔN CAÙC BAÏNXIN CAÛM ÔN CAÙC BAÏN

ÑAÕ LAÉNG NGHE ÑAÕ LAÉNG NGHE

Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ lá trầu không và thử...

Documents

Transcript of Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu từ lá trầu không và thử...