NEW DELHI METALO-BETA-LACTAMASE

NDM

Marcelo Pillonetto LACEN/PR Curitiba, 04 de julho de 2013

Resistência Bacteriana

Previa ao uso de antimicrobianos

Resistência intrínseca

Resistência adquirida

S.aureus x Penicillium – Natureza

Em 1942 – 10% de resistência

Resistência Bacteriana

Fleming – 1945

Uso equivocado da penicilina

Seleção e propagação de formas mutantes

Doses baixas:

Falha e propiciam desenv. de formas R,

Disseminação para pessoas suscetíveis

Histórico da Resistência Bacteriana

1960-70

S. aureus

1970-80

Entero- bactérias

1980-90

MRSA

1990-1995

AmpC

Histórico da Resistência Bacteriana

1995-2000

VRE/ VISA/VRSA

2000-2005

ESBL / OXA-23

2005-2010

KPC / SPM

2010-2015

NDM - 1

E Atualmente?

Todas ainda circulam:

KPC

ESBL, ampC

Pseudomonas MBL (SPM)

Acinetobacter oxa-23

VRE (vanA), MRSA

Micobacterias, S. pneumoniae

GN GP

E o que vem pela frente?

KPC – Tigeciclina e Polimixina – R

Pseudomonas – Polimixina e Colistina – R

Acinetobacter – Polimixina e Colistina – R

OXA-48 e outras CRE

E……..

O que é a NDM?

NMD

New Delhi Metalo-Beta-Lacmase tipo 1

NDM-1

É uma enzima da classe das metalo-beta-

lactamases (grupo B de Ambler)

Veiculada por plasmídeos (gene blaNDM)

Hidrolisa todos beta- lactâmicos.

Onde surgiu a NDM?

NDM - Origins

Novembro de 2007 – Sueco tratado na Índia

Cidade de Ludhiana – abscesso glúteo

Dezembro de 2007 – Nova cirurgia

Cidade de New Delhi – úlcera de decúbito

Janeiro de 2008 – Suécia

Bactéria multiR isolada da urina

Metalo-beta-lactamase: New Delhi MBL -1 (NDM-1)

NDM - Origins

2008 – India, Paquistao, Inglaterra Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae

Novembro de 2010 – Canada, EUA, Japao, Europa, Australia Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae

Novembro de 2011 – Guatemala Klebsiella pneumoniae

Junho e Agosto de 2012 – Uruguai e Colombia Providencia rettgeri e Klebsiella pneumoniae

Novembro de 2012 – Paraguai Acinetobacter baumannii

Worldwide distribution of NDM-1-producing E. coli and K. pneumoniae isolates.

Poirel L et al. Antimicrob. Agents Chemother.

2011;55:5403-5407

NDM - Origins

Abril, 2013 – Brasil –

Porto Alegre, RS

Providencia rettgeri e Enterobacter cloacae

5 casos

01 infeccao seguida de obito

04 colonizacoes

Caso indice de novembro de 2012

Figure 1 Numbers of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae referred from UK laboratories to the UK Health Protection Agency's national reference laboratory from 2003 to 2009 The predominant gene is bla NDM-1 , which was first identified in 2008. The...

Karthikeyan K Kumarasamy , Mark A Toleman , Timothy R Walsh , Jay Bagaria , Fafhana Butt , Ravikumar Balakrishnan ...

Emergence of a new antibiotic resistance mechanism in India, Pakistan, and the UK: a molecular, biological, and epidemiological study

The Lancet Infectious Diseases Volume 10, Issue 9 2010 597 - 602

Como suspeitar de NDM?

Suspeita de NDM

Observar:

Enterobactérias Resistentes a Carbapenêmicos Providencia rettgeri

Enterobacter cloacae e outras spp

Klebsiella pneumoniae

Escherichia coli

Acinetobacter baumannii Região de Foz do Iguaçu

Turismo médico no Paraguai

Como pesquisar NDM?

Enterobactérias R a Carbapenêmicos

Grupo CESP

Pesquisar NDM IMI e MER e

IMI e MER + EDTA

Se Positivo Provavel MBL

Enviar LACEN

Se neg : PCR para

carbapenemases

Nao CESP

NDM: IMI , MER, ERT e

IMI , MER, ERT + EDTA

AmpC Cloxacilina

KPC Ac. Fenilborônico

32

2

Como interpretar?

NDM CESP E NÃO-CESP

Halo de (IMP/MER+ EDTA) – halo (IMP/MER)

≥ 5 mm

Em função da positividade do teste fenotípico para (MBL) metalo-betalactamase (bloqueio enzimático com EDTA) será realizada PCR para blaNDM.

≤ 5 mm: Pesquisa fenotípica de MBL negativa

Grupo CESP: pesquisar KPC por métodos moleculares

CESP: Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia, Morganella e Hafnia

KPC NÃO-CESP

Halo de (IMP/MER+ AFB ) – halo (IMP/MER) ≥ 5 mm

E

Halo de (IMP/MER+ CLOX ) – halo (IMP/MER) ≤ 5 mm

A detecção de KPC foi realizada por bloqueio enzimático com ácido fenilborônico, método com especificidade superior a 99%. A confirmação por PCR poderá ser realizada mediante solicitação específica ou envio a laboratório de referência.

CESP: Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia, Morganella e Hafnia

AmpC plasmidial + perda de porina – NAO-CESP

Halo de (IMP/MER+ AFB ) – halo (IMP/MER) ≥ 5 mm

E

Halo de (IMP/MER+ CLOX ) – halo (IMP/MER) ≥ 5 mm

A detecção de AmpC plasmidial foi realizada por bloqueio enzimático pelo ácido fenilborônico e potenciação com cloxacilina. A expressão de AmpC plasmidial, quando associada à perda de porinas pode causar resistência aos carbapenêmicos.

CESP: Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Providencia, Morganella e Hafnia

Outras situações

Diferenças de halo de (IMP/MER+ AFB ) – halo (IMP/MER) Todos ≤ 5 mm

Oxa-48 ou perda de porina

Nas enterobactérias não pertencentes ao grupo CESP, a negatividade dos testes fenotípicos para KPC, metalo-betalactamases e AmpC , mas resistência a carbape-nêmicos podem indicar a presença da carbapenemase OXA-48 ou perda deporinas.

Como interpretar?

Metodos

Todas as cepas CRE (IMP e/ou ERT e/ou MER)

Teste de Hodge

Pesquisa molecular de blaKPC e blaNDM

Protocolo CDC – qPCR Duplex

Pesquisa de NDM, KPC e OXA-48

qPCR automatizado

TESTES DE BLOQUEIO ENZIMATICO

Aguardando aquisição de insumos.

O que o LACEN faz?

Testes realizados até 03/07/2013

Pesquisa de NMD (qPCR)

Acinetobacter baumannii

150 testes

Todos negativos

Enterobactérias (CESP e NAO-CESP)

Aprox. 329 isolados

Todos negativos para NDM

Marcelo Pillonetto

Serviço de Bacteriologia Molecular

marcelopilonetto@gmail.com

41-3299-3245/3243