nangka contoh

7/23/2019 nangka contoh

1/49

EFEKTIVITAS EKSTRAK

DAUN NANGKA (Artocarpus heterophyllus)

UNTUK PENGOBATAN

INFEKSI BAKTERIAeromonas hydrophila

PADA BENIH IKAN MAS (Cyprinus carpio)

USULAN PENELITIAN

ENOK MARLINA

NPM 230110090036

UNIVERSITAS PADJADJARAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

PROGRAM STUDI PERIKANAN

JATINANGOR

2013


2/49

EFEKTIVITAS EKSTRAK

DAUN NANGKA (Artocarpus heterophyllus)

UNTUK PENGOBATAN

INFEKSI BAKTERIAeromonas hydrophila

PADA BENIH IKAN MAS (Cyprinus carpio)

Diajukan untuk Melaksanakan Penelitian

ENOK MARLINA

NPM 230110090046

UNIVERSITAS PADJADJARAN

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

PROGRAM STUDI PERIKANAN

JATINANGOR

2013


3/49

JUDUL : EFEKTIVITAS EKSTRAK DAUN NANGKA

(Artocarpus heterophyllus) UNTUK PENGOBATAN INFEKSI

BAKTERI Aeromonas hydrophila PADA BENIH IKAN MAS

(Cyprinus carpio)

PENULIS : ENOK MARLINA

NPM : 230110090036

Jatinangor, April 2013

Menyetujui,

Komisi Pembimbing, Dekan,

Roffi Grandiosa, S.Pi., M.Sc.

NIP. 19750716 200112 1 003

Dr. Ayi Yustiati, Ir., M.Sc.

NIP. 19620413 198603 2 003

Anggota,

Drs. Walim Lili M.Si.

NIP. 19571026 198803 1 004


4/49

iii

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kepada Tuhan YME, yang telah memberikan berkat dan

karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan usulan penelitian yang

berjudul, Efektivitas Ekstrak Daun Nangka (Artocarpus heterophyllus) untuk

Pengobatan Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Benih Ikan Mas

(Cyprinus carpio).

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih kepada semua

pihak yang telah membantu dalam penyelesaian penelitian ini, terutama kepada:

1. Roffi Grandiosa, S.Pi., M.Sc. sebagai komisi pembimbing yang selalu

memberikan masukan dan dorongan kepada penulis.

2. Drs. Walim Lili, M.Si. sebagai anggota pembimbing sekaligus sebagai dosen

wali yang telah banyak memberikan masukan dan motivasi kepada penulis.

3. Dr. Yuli Andriani, S.Pi., M.Si. sebagai dosen penelaah, atas masukan yang

berharga untuk menyempurnakan penelitian ini.

4. Dr. Ayi Yustiati, Ir., M.Sc. sebagai Dekan Fakultas Perikanan dan Ilmu

Kelautan Universitas Padjadjaran.

5. Dr. Ir. Junianto, MP. sebagai Ketua Program Studi Perikanan Fakultas

Perikanan dan Ilmu Kelautan.

6. Orang tua, adik dan keluarga yang selalu mendoakan, memberikan motivasi

dan perhatiannya baik secara materi juga moril kepada penulis.

7. Euis Rahmawati Akbar S.Farm. dan Ayesha Putri S.Farm. yang telah banyak

membantu dan memberikan masukan dalam penulisan usulan penelitian ini.

8. Josua F. T., Nitya Dvimurti, Ratih Azizah, Murni Purnaningsih, Astri D. U.

dan Eka Hariani atas bantuan, dukungan dan perhatian yang selalu diberikan

kepada penulis.

9. Ahmad Nur Rohman, Ai Siti Rohmah, dan Cut Tsutjinurani yang telah

membantu, mendukung, menemani dan memberikan motovasi kepada

penulis.


5/49

iv

10. Teman-teman FPIK UNPAD angkatan 2009 yang telah membatu,

mendukung dan memberikan motivasi kepada penulis dalam menyelesaikan

penelitian ini.

11. Seluruh civitas akademi Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas

Padjadjaran atas bantuannya dalam menyelesaikan studi penulis.

12. Semua pihak yang telah membantu dalam menyelesaikan penelitian ini baik

langsung maupun secara tidak langsung.

Demikian skripsi ini penulis buat. Semoga dapat bermanfaat bagi seluruh

civitas akademika Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan (FPIK) Universitas

Padjadjaran (UNPAD). Atas perhatiannya penulis ucapkan terimakasih.

Jatinangor, April 2013

Enok Marlina


6/49

v

DAFTAR ISI

Bab Halaman

DAFTAR GAMBAR ................................................................ vii

DAFTAR TABEL ..................................................................... viii

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................ xi

I PENDAHULUAN1.1 Latar Belakang ......................................................................

1.2 Identifikasi Masalah .............................................................

1.3 Tujuan Penelitian ..................................................................

1.4 Kegunaan Penelitian .............................................................

1.5 Kerangka Pemikiran .............................................................1.6 Hipotesis ...............................................................................

1

3

3

3

36

II TINJAUAN PUSTAKA2.1 Ikan Mas ..............................................................................

2.1.1 Klasifikasi Ikan Mas ..........................................................

2.1.2 Habitat dan Morfologi Ikan Mas .......................................

2.2 BakteriAeromonas hydrophila ............................................

2.2.1 KlasifikasiAeromonas hydrophila ...................................

2.2.2 KarakteristikAeromonas hydrophila ................................

2.2.3 Gejala Klinis SeranganAeromonas hydrophila ................

2.3 Nangka .................................................................................

2.3.1 Ekologi dan Klasifikasi Nangka .......................................2.3.2 Morfologi Nangka .............................................................

2.3.3 Jenis Nangka ......................................................................

2.3.4 Manfaat Nangka ................................................................

2.3.5 Kandungan Senyawa Daun Nangka ..................................

2.4 Kualitas Air ..........................................................................

7

7

8

9

9

9

10

11

1112

13

13

14

15

III BAHAN DAN METODE3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ..............................................

3.2 Alat dan Bahan ....................................................................

3.2.1. Alat Penelitian ..................................................................

3.2.2. Bahan Penelitian ...............................................................

3.3 Metode Penelitian..................................................................3.4 Prosedur Penelitian................................................................

3.4.1 Penelitian Pendahuluan .....................................................

3.4.2 Penelitian Utama ...............................................................

3.5 Parameter yang Diamati ......................................................

3.5.1 Gejala Klinis ......................................................................

3.5.2 Kelangsungan Hidup .........................................................

3.5.4 Kualitas Air .......................................................................

17

17

17

19

2020

20

24

25

25

26

26


7/49

vi

3.6 Analisis Data ........................................................................ 26

DAFTAR PUSTAKA .............................................................. 27

LAMPIRAN .............................................................................. 30


8/49

vii

DAFTAR GAMBAR

Nomor Judul Halaman

1

2

3

Ikan Mas (Cyprinus carpio) .................................................

Aeromonas hydrophila .........................................................

Daun Nangka ........................................................................

7

9

12


9/49

viii

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Halaman

1

2

3

Hasil Pengamatan Uji Zona Hambat pada Metode Difusi

AgarAeromonas hydrophila ...............................................

Hasil Pengamatan Kontrol Uji Zona Hambat pada Metode

Difusi Agar ...........................................................................

Hasil Uji LC50 48 Jam Ekstrak Daun Nangka pada Benih

Ikan Mas ...............................................................................

22

22

23


10/49

ix

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul Halaman

1

2

3

4

5

6

7

8

Pembuatan Ekstrak Daun Nangka ........................................

Hasil Uji Fitokimia ...............................................................

Pembuataan Konsentrasi Ektrak Daun Nangka ....................

Pembuatan MediaNutrien Agar(NA) ................................

Pembuatan Larutan Bakteri Kepadatan 108

cfu/ml dengan

Spektrofotometer ..................................................................

Gambar Hasil Uji Zona Hambat ...........................................

Uji LC50 Perendaman Ektrak Daun Nangka .........................

Tata Letak Perlakuan ............................................................

.

31

32

33

34

35

36

37

39


11/49

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sektor kelautan dan perikanan merupakan salah satu sumber andalan

dalam pembangunan perikanan di Indonesia. Dalam memenuhi besarnya

permintaan terhadap persediaan ikan maka penerapan intensifikasi budidaya tidak

dapat dihindarkan. Produksi dari perikanan budidaya sendiri secara keseluruhan

diproyeksikan meningkat dengan rata-rata 4,9 % per tahun. Target tersebut

didasarkan pada potensi pengembangan daerah perikanan budidaya yang

memungkinkan di wilayah Indonesia. Melihat besarnya potensi pengembangan

perikanan budidaya serta didukung peluang pasar internasional yang masih

terbuka luas, diharapkan sumbangan produksi perikanan budidaya semakin besar

terhadap produksi nasional dan penerimaan devisa negara, keterkaitannya dalam

penyerapan angkatan, serta peningkatan kesejahteraan petani/nelayan di Indonesia

(Sukadi 2004).

Ikan mas merupakan salah satu jenis ikan yang banyak diminati

masyarakat terutama bagi masyarakat Jawa Barat. Namun masalah yang selalumuncul dalam budidaya intensif jika tidak dikelola dengan baik adalah terjadinya

penurunan kualitas air pada media budidaya sehingga menimbulkan berbagai

dampak penyakit. Ikan mas di waduk Cirata Kecamatan Cipeundeuy Kabupaten

Bandung Barat mengalami kematian massal yang menyebabkan petani ikan

mengalami kerugian. Sedikitnya 35 ton ikan milik petani diketahui mati. Hal ini

diduga karena terjadinya perubahan cuaca dan terjangkitnya penyakit (Pikiran

Rakyat 2008a).

Parasit yang menyerang dapat berupa protozoa, cacing, bakteri, virus,

jamur dan berbagai mikroorganisme lainnya. Parasit golongan bakteri yang

sering menyerang adalahAeromonas hydrophila. Gejala yang muncul yaitu warna

tubuh ikan terlihat suram, tidak cerah, kulit kesat dan melepuh. Cara bernapas

tampak megap-megap, kantung empedu mengembung dan terjadi luka borok yang


12/49

2

memerah di bagian tubuh ikan seperti kulit, ginjal, hati, dan limpa (Tim Lentera

2002).

Para petani maupun pengusaha ikan banyak menggunakan berbagai bahan

kimia maupun antibiotik dalam pengendalian penyakit tersebut. Namun

pemakaian bahan kimia dan antibiotik secara terus menerus dengan konsentrasi

yang kurang tepat, akan menimbulkan masalah baru berupa meningkatnya

resistensi mikroorganisme terhadap bahan tersebut. Selain itu, masalah lainnya

adalah bahaya yang ditimbulkan terhadap lingkungan sekitarnya, ikan yang

bersangkutan, dan manusia yang mengkonsumsinya (Kompas 2013).

Berkaitan dengan permasalahan tersebut, perlunya alternatif bahan obat

yang lebih aman yang dapat digunakan dalam pengendalian penyakit ikan. Salah

satu alternatifnya adalah menggunakan tumbuhan obat tradisional yang bersifat

anti parasit, anti jamur, antibakteri, dan antiviral. Beberapa keuntungan

menggunakan tumbuhan obat tradisional antara lain relatif lebih aman, mudah

diperoleh, murah, tidak menimbulkan resistensi, dan relatif tidak berbahaya

terhadap lingkungan sekitarnya.

Beberapa tumbuhan obat tradisional yang diketahui dapat dimanfaatkan

dalam pengendalian berbagai agen penyebab penyakit ikan adalah daun sirih

(Piper betle), daun jambu biji (Psidium guajava), sambiloto

(Andrographi spaniculata), dan daun nimba (Azadirachta indica). Daun sirih

diketahui berdaya antioksidasi, antiseptik, bakterisida, dan fungisida. Tanaman

sambiloto bersifat antibakteri, sedangkan daun jambu biji selain bersifat

antibakteri juga bersifat antiviral (Sugianti 2005).

Salah satu tumbuhan yang berkhasiat sebagai tanaman obat adalah nangka

(Artocarpus heterophyllus). Daun nangka diketahui berkhasiat melancarkan air

susu dan sebagai obat koreng (Hutapea 1993). Menurut Prakash dkk.(2009), daun

nangka dalam pengobatan tradisional digunakan sebagai obat demam, bisul, luka

dan penyakit kulit. Daun nangka diketahui mengandung flavonoid, saponin dan

tanin yang berperan sebagai zat antibakteri (Tarigan dkk. 2008)

Berdasarkan kemampuan antibakteri tersebut, dalam penelitian ini

digunakan ekstrak daun nangka untuk mengobati infeksi Aeromonas hydrophila


13/49

3

khususnya yang menyerang ikan mas. Pengobatan melalui sistem perendaman

dalam ekstrak daun nangka merupakan cara yang baik karena senyawa antibakteri

yang larut dalam air dapat diserap oleh kulit, insang, hati dan ginjal benih ikan

mas (Sukamto 2007). Namun sampai saat ini belum diketahui efektivitas ekstrak

daun nangka untuk mengobati infeksi bakteri Aeromonas hydrophila yang

menyerang benih ikan mas.

1.2 Identifikasi Masalah

Sejauhmana efektivitas ekstrak daun nangka untuk mengobati infeksi

bakteriAeromonas hydrophila terhadap kelangsungan hidup benih ikan mas.

1.3 Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui konsentrasi terbaik dari ekstrak

daun nangka dalam menghasilkan kelangsungan hidup tertinggi pada benih ikan

mas yang terinfeksi bakteriAeromonas hydrophila.

1.4 Kegunaan Penelitian

Hasil dari penelitian diharapkan dapat memberikan informasi kepada

peneliti serta pembudidaya ikan mengenai konsentrasi yang efektif dari

penggunaan ekstrak daun nangka untuk mengobati infeksi bakteri

Aeromonas hydrophilapada benih ikan mas.

1.5 Kerangka Pemikiran

Upaya dalam melakukan budidaya untuk memenuhi kebutuhan ikan mas

sering mengalami kendala kerugian akibat serangan bakteri yang menyebabkan

tingkat kematian tinggi dan berdampak pada harga jual ikan mas melonjak tinggi

seperti yang terjadi di Kabupaten Kuningan akibat dari kurangnya stok ikan mas

yang berasal dari kolam jaring terapung Waduk Djuanda atau Waduk Jatiluhur,

Purwakarta dan di Waduk Cirata serta Saguling mengalami kasus kematian masal

(Pikiran Rakyat 2013b).


14/49

4

Jenis mikroorganisme yang sering menyerang benih ikan mas dari

golongan bakteri adalah Aeromonas hydrophila yang merupakan suatu bakteri

berbentuk batang, gram negatif, motil/bergerak dengan flagella polar, yang pada

umumnya terdapat pada perairan dengan bahan organik yang tinggi. Bakteri gram

negatif adalah organisme yang tidak dapat menahan zat pewarna setelah dicuci

dengan alkohol 95 % (Kabata, 1985). Penyakit yang disebabkan oleh bakteri

Aeromonas hydrophila dinamakan penyakit Motile Aeromonas Septicemia

(MAS). Nama lain dari penyakit ini adalah bacterial hemorrhagi septicemia atau

disebut hemorragic septicemia (McDaniel 1979), infectious dropsy, penyakit

merah,pastmerah (Kabata 1985) atau yang lebih dikenal dengan nama penyakit

bercak merah (Eidman dkk. 1981).

Terdapat berbagai macam cara yang dapat dilakukan untuk menanggulangi

serangan bakteri, baik itu menggunakan bahan kimia maupun tradisional. Cara

yang biasa dilakukan yaitu dengan penyuntikan, pengusapan, perendaman, atau

melalui pakan yang telah dicampur obat. Cara perendaman merupakan cara paling

efektif dibandingkan dengan penyuntikan karena dapat mempermudah dalam

proses pengobatan terutama untuk ikan dalam jumlah banyak dengan ukuran yang

kecil (Supriadi dan Rukyani 1990).

Obat yang dapat digunakan untuk menanggulangi penyakit yang

disebabkan Aeromonas hydrophila diantaranya dengan menggunakan herbal,

salah satunya adalah daun nangka. Daun nangka direkomendasikan oleh praktisi

medis ayurveda sebagai obat antidiabetes karena ekstrak daun nangka efektif

dalam mengurangi kadar glukosa darah, tidak merusak organ tubuh bagian dalam

dan bebas dari efek racun meskipun digunakan dalam jangka waktu yang cukup

lama (Chandrika dkk. 2006). Daun nangka diharapkan dapat dimanfaatkan

sebagai alternatif untuk mengatasi kendala seranganAeromonas hydrophilapada

budidaya ikan mas mengingat potensi herbal cukup tinggi dan ketersediaan di

wilayah Jawa Barat cukup tinggi.

Berdasarkan hasil skrining fitokimia yang dilakukan oleh Chandrika dkk.

(2006), ekstrak daun nangka mengandung flavonoid, saponin dan tanin. Selain itu

ekstrak daun nangka juga mengandung senyawa bioaktif terpenoida (Tarigan dkk.


15/49

5

2008). Senyawa-senyawa flavonoid umumnya bersifat antioksidan dan banyak

digunakan sebagai salah satu komponen bahan baku obat-obatan. Senyawa-

senyawa flavonoid dan turunannya dari tanaman nangka memiliki fungsi fisiologi

tertentu. Ada dua kategori fungsi fisiologi senyawa flavonoid tanaman nangka

berdasarkan sebarannya di Indonesia. Senyawa flavonoid tanaman nangka yang

tumbuh di Indonesia bagian barat diduga berfungsi sebagai antibakteri. Sedangkan

yang tumbuh di Indonesia bagian timur berfungsi sebagai antivirus (Aryo 2007).

Mekanisme kerja senyawa flavonoid dapat mendenaturasi protein sel bakteri dan

merusak membran sel bakteri tanpa dapat diperbaiki lagi (Pelczar dan Chan

1986). Saponin merupakan senyawa yang berfungsi sebagai antimikroba

(Robinson 1995). Tanin diketahui dapat menghambat aktivitas metabolisme dan

pertumbuhan mikroba (Sugoro dkk. 2004).

Herbal dapat dipersiapkan dalam bentuk ekstrak dan filtrat. Bentuk ekstrak

tanaman nangka dapat dipersiapkan dengan ekstrak etanol yang diharapkan

mengandung zat antibakteri. Pada penelitian sebelumnya telah banyak digunakan

ekstrak tanaman yang diketahui mengandung zat antibakteri, seperti ekstrak

bawang putih dan cengkeh yang memperlihatkan aktivitas antimikroba yang

tinggi (Leuschner dan Zamparini 2002), ekstrak daun kipahit dapat digunakan

untuk menghambat dan mengobati infeksi bakteri (Maharani dan Supriadi 2006),

ekstrak daun pepaya yang diketahui memiliki sifat sebagai bakteriostatik (Rahman

2008).

Penelitian sebelumnya mengenai penggunaan ekstrak daun nangka belum

pernah dilakukan sehingga dilakukan uji pendahuluan dengan melakukan uji zona

hambat dan uji LC50 untuk memperoleh konsentrasi yang dapat diterapkan pada

aplikasi pengobatan. Berdasarkan penelitian pendahuluan, uji zona hambat ekstrak

daun nangka terhadap Aeromonas hydrophila, pada konsentrasi 100.000 ppm

dapat menghambat pertumbuhan Aeromonas hydophila terbesar dengan adanya

zona bening pada kertas saring dengan diameter rata-ratanya adalah 10,08 mm.

Konsentrasi terkecil yang dapat menghambat pertumbuhanAeromonas hydrophila

pada konsentrasi 10 ppm dengan diameter rata-ratanya 6,96 mm. Berdasarkan


16/49

6

hasil analisis uji in vitro, diketahui bahwa semakin tinggi konsentrasi yang

digunakan akan semakin besar zona hambat yang dihasilkan.

Hasil uji LC50 48 jam setelah dianalisis menggunakan EPA Probhit

Analysis diperoleh nilai konsentrasi 101.910 ppm yang mematikan ikan sebanyak

50 % selama 48 jam. Berdasarkan analisis uji zona hambat dan LC50 48 jam yang

dilakukan, maka konsetrasi efektif untuk menghambat pertumbuhan bakteri

Aeromonas hydrophila adalah dibawah nilai LC50 48 jam dan diatas nilai uji zona

daya hambat terkecil yaitu sebesar 30 ppm.

1.6 Hipotesis

Pemberian ekstrak daun nangka pada konsentrasi 30 ppm dengan lama

perendaman 48 jam merupakan perlakuan yang efektif untuk pengobatan benih

ikan mas yang terinfeksi bakteriAeromonas hydrophila.


17/49

7

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Ikan Mas

2.1.1 Klasifikasi Ikan Mas

Ikan mas merupakan ikan yang sangat adaptif terhadap lingkungan baru

sehingga menjadikan ikan mas banyak tersebar hampir di seluruh penjuru dunia.

Ikan mas banyak memiliki sebutan. Bahasa Inggris disebut common carp. Di

Pulau Jawa, ikan mas dikenal dengan masmasan atau lauk mas. Sementara di

Sumatra, ikan mas dikenal dengan sebutan ikan rayo atau ikan mameh.

Klasifikasi ikan mas berdasarkan ilmu taksonomi dikelompokan sebagai

berikut (Khairuman dan Amri 2011) :

Filum : Chordata

Kelas : Osteichthyes

Ordo : Cypriniformes

Family : Cyprinidae

Genus : Cyprinus

Spesies : Cyprinus carpio

Gambar 1. Ikan Mas (Cyprinus carpio)

(Sumber : Dokumentasi Pribadi)

Terdapat delapan strain ikan mas yang dikenal di Indonesia. Beberapa

strain ikan mas unggulan adalah ikan mas majalaya, punten, sinyonya, merah,

taiwan, kumpay, karper, kaca, dan kancra domas. Strain ikan mas yang paling


18/49

8

unggul dan banyak diminati masyarakat adalah majalaya, sinyonya, taiwan dan

jenis hibrida (Tim Lentera 2002).

2.1.2 Habitat dan Morfologi Ikan Mas

Habitat yang disukai ikan mas adalah perairan dengan kedalaman 1 meter

yang mengalir pelan, dan subur yang ditandai melimpahnya pakan alami,

misalnya rotifer, rotatoria, udang-udang renik dan lain-lain. Sebaliknya larva ikan

mas menyukai perairan dangkal, tenang dan terbuka. Sedangkan benih ikan mas

yang berukuran cukup besar lebih menyukai perairan yang agak dalam, mengalir

dan terbuka. Di negara tropis ikan mas berpijah pada musim hujan. Waktu

pemijahan biasanya bertepatan dengan turunnya hujan. Kesiapan proses

pemijahan induk dapat terganggu jika media hidupnya tercemar, kandungan

oksigen terlarut menurun dan kondisi kesehatan induk menurun (Djarijah 2011)

Ikan mas memiliki ciri morfologi dengan bentuk tubuh agak memanjang

dan memipih tegak (compressed), mulut terletak dibagian tengah ujung kepala

(terminal) dan dapat disembulkan (protaktil). Dibagian anterior mulut terdapat

dua pasang sungut. Diujung dalam mulut terdapat gigi kerongkongan (pharyngeal

teet) yang terbentuk atas tiga baris gigi geraham. Secara umum hampir seluruh

tubuh ikan mas ditutupi oleh sisik. Sisik ikan mas berukuran relatif besar dan

digolongkan kedalam tipe sisik sikloid (lingkaran). Sirip punggungnya (dorsal)

memanjang dengan bagian belakang berjari keras dan bagian akhir (sirip ketiga

dan keempat) bergerigi. Letak sirip punggung bersebrangan dengan permukaan

sirip perut (ventral). Sirip duburnya (anal) mempunyai ciri seperti sirip punggung,

yakni berjari keras dan bagian akhirnya bergerigi. Garis rusuknya (linea lateralis

atau gurat sisi) tergolong lengkap, berada di pertengahan permukaan tubuh

dengan bentuk melintang dari tutup insang sampai ke ujung belakang pangkal

ekor (Khairuman dan Amri 2011).


19/49

9

2.2 BakteriAeromonas hydrophila

2.2.1 KlasifikasiAeromonas hydrophila

Awalnya Aeromonas hydrophila dikenal dengan nama

Bacilus hydrophilus fuscus, pertama kali diisolasi dari kelenjar pertahanan katak

yang mengalami pendarahan septicemia. Kluiver dan Van Niel pada tahun 1936

mengelompokkan genus Aeromonas. Tahun 1984, Popoff memasukan genus

Aeromonas ke dalam famili Vibrionaceae. Aeromonas hydrophila diisolasi dari

manusia dan binatang sampai dengan tahun 1950. Bakteri ini memiliki nama

sinonimA. formicans danA. liquefaciens (Sismeiro et al. 1998).

Klasifikasi bakteri Aeromonas hydrophila berdasarkan ilmu taksonomi

sebagai berikut (Holt et. al. 1994) :

Filum : Protophyta

Kelas : Schizomycetes

Ordo : Pseudanonadeles

Family : Vibrionaceae

Genus : Aeromonas

Spesies :Aeromonas hydrophila

Gambar 2.Aeromonas hydrophila

(Sumber : http://www.trbimg.com/img-4fb27f3e/turbine/la-na-nn-flesh-eating-

bacteria-20120515-001/600)

2.2.2 KarakteristikAeromonas hydrophila

Aeromonas hydrophila merupakan bakteri yang hidup di air tawar yang

mengandung bahan organik tinggi. Ciri utama bakteri ini adalah bentuknya seperti

batang, ukurannya 14,4 x 0,41 mikron, bersifat gram negatif, tidak berspora,

bersifat motil (bergerak aktif) karena mempunyai satu flagel yang keluar dari satu


20/49

10

kutubnya, hidup di lingkungan bersuhu 15300C dan pH 5,59 (Afrianto dan

Liviawaty 1992). Bakteri ini dapat bertahan dalam lingkungan aerob maupun

anaerob dan dapat mencerna material-material seperti gelatin dan hemoglobin.

Aeromonas hydrophila resisten terhadap chlorine serta suhu yang dingin (Krieg

dan Holt 1984).

Aeromonas hydrophila menginfeksi semua jenis ikan air tawar. Infeksi

biasanya berkaitan dengan kondisi stres akibat kepadatan, malnutrisi, infeksi

parasit, kualitas air yang buruk dan fluktuasi suhu air yang ekstrim. Serangan

bersifat akut. Jika kualitas lingkungan air terus menurun, kematian yang

ditimbulkan bisa mencapai 100% (Bachtiar 2010).

Aeromanas hydrophila menyebabkan penyakit Motile Aeromonas

Septicemia (MAS) atau penyakit bercak merah. Bakteri ini menyerang berbagai

jenis ikan air tawar seperti lele dumbo (Clarius gariepinus), ikan mas

(Cyprinus carpio), gurami (Osphronemus gouramy) dan udang galah

(Macrobrachium rosenbergii). Pengendalian bakteri ini sulit karena memiliki

banyak strain dan selalu ada di air serta dapat menjadi resisten terhadap obat-

obatan (Kamiso dan Triyanto 1993)

2.2.3 Gejala Klinis SeranganAeromonas hydrophila

Aeromanas hydrophila dikenal juga sebagai bakteri oportunis karena

biasanya menimbulkan masalah pada ikan yang sedang mengalami stres.

Penularan bakteri ini berlangsung melalui air, kontak badan, kontak dengan

peralatan yang telah tercemar atau karena pemindahan ikan yang terserang

Aeromonas hydrophila dari satu tempat ke tempat lain. Ikan yang terserang

bakteri ini biasanya akan memperlihatkan gejala berupa (Cahyono 2011) :

Warna tubuh berubah menjadi agak gelap,

Kulit kasar, timbul pendarahan dan selanjutnya menjadi borok,

Kemampuan berenang menurun dan sering megap-megap di permukaan air

karena insang rusak dan sulit bernafas,

Sering terjadi pendarahan pada organ bagian dalam seperti hati, ginjal

maupun limpa. Perut sering terlihat agak kembung,


21/49

11

Seluruh sirip rusak dan berwarna keputihan,

Mata rusak dan agak menonjol.

Menurut Herwig (1979),Aeromonas hydrophila adalah penyebab penyakit

ikan yang dikenal dengan Haemorrhagic septicemia, motile aeromonas

septicaemia, ulcer disease atau red sore, red pest, dan infectious dropsy.

Gejala klinis infeksi bakteriAeromonas hydrophila yaitu :

1. Abdominal dropsy, dicirikan dengan menumpuknya/terakumulasinya cairan

pada ruang viscera,

2. Ulcerative (ulkus), dicirikan lesio pada kulit dan otot,

3. Bacterial haemoragic septicaemia, yang dicirikan oleh adanya perdarahan

pada otot, juga biasa disebut red disease, red pest dan infectious dropsy.

2.3 Nangka

2.3.1 Ekologi dan Klasifikasi Nangka

Nangka diyakini berasal dari India, yaitu di wilayah Ghats bagian barat.

Saat ini nangka telah menyebar luas di berbagai daerah tropik, terutama di Asia

Tenggara. Dalam bahasa Inggris, nangka dikenal sebagaijackfruit. Pohon nangka

umumnya berukuran sedang sampai sekitar 20 m tingginya, walaupun ada yang

mencapai 30 m. Batang bulat silindris, sampai berdiameter sekitar 1 m. Tajuknya

padat dan lebat, melebar dan membulat. Seluruh bagian tumbuhan apabila dilukai

akan mengeluarkan getah putih pekat.

Nangka dapat tumbuh baik di iklim tropis. Tanaman ini menyukai wilayah

dengan curah hujan lebih dari 1500 mm per tahun dimana musim keringnya tidak

terlalu keras. Nangka kurang toleran terhadap udara dingin, kekeringan dan

penggenangan (Sudarma 2012).

Klasifikasi tumbuhan nangka, sebagai berikut (Rukmana 2008) :

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Kelas : Dicotyledonae

Ordo : Morales

Famili : Moraceae

Genus : Artocarpus

Spesies :Artocarpus heterophyllus


22/49

12

Gambar 4. Daun Nangka

(Sumber : Dokumentasi Pribadi)

Indonesia memiliki banyak sebutan untuk tanaman nangka seperti Panah

(Aceh), pinasa, sibodak, nangka atau naka (Batak), baduh atau enaduh (Dayak),

binaso, lamara atau malasa (Lampung), naa (Nias), kuloh (Timor), dan nangka

(Sunda dan Madura) (Rukmana 2008).

2.3.2 Morfologi Nangka

Nangka berdaun tunggal, tersebar, bertangkai 14 cm, helai daun agak

tebal, kaku, bertepi rata, bulat telur sampai memanjang dengan pangkal

menyempit sedikit demi sedikit, dan ujung pendek meruncing. Daun penumpu

bulat telur lancip, panjang sampai 8 cm, mudah rontok dan meninggalkan bekas

berupa cincin, permukaan atas daun berwarna hijau tua mengkilap, kaku, dan

permukaan bawah daun berwarna hijau muda.

Tumbuhan nangka berumah satu, perbungaan muncul pada ketiak daun

pada pucuk yang pendek dan khusus, yang tumbuh pada sisi batang atau cabang

tua. Bunga jantan dalam bongkol berbentuk gelendong, 13 38 cm berwarna

hijau tua dengan serbuk sari kekuningan dan berbau harum samar apabila masak.

Bunga nangka disebut babal. Setelah melewati umur masaknya, babal akan

membusuk (ditumbuhi kapang) dan menghitam di pohon sebelum akhirnya

terjatuh. Bunga betina dalam bongkol tunggal atau berpasangan, silindris atau

lonjong dan berwarna hijau tua (Rukmana 2008).

Buah nangka relatif besar dan berbiji banyak. Kulitnya berduri lunak.

Setiap biji dibalut oleh daging buah (endokarp) dan dami (eksokarp) yang


23/49

13

mengandung gelatin. Buah nangka merupakan buah majemuk yakni berbunga

banyak dan tersusun tegak lurus pada tangkai buah, membentuk bangunan besar

yang kompak, dan bentuknya bulat hingga bulat lonjong. Kulit buah berwarna

hijau hingga kuning kemerahan. Daging buah tipis hingga tebal. Setelah matang,

daging buah berwarna kuning merah, lunak, manis dan aroma spesifik. Pohon

nangka berakar tunggang dengan akar samping yang kuat dan dalam (Sunarjono

2010).

2.3.3 Jenis Nangka

Jenis kultivar tanaman nangka di Indonesia lebih dari 30 kultivar dan di

Pulau Jawa terdapat lebih dari 20 kultivar. Sehingga dilakukan pengelompokan

nangka berdasarkan kesamaannya. Beberapa macam pengelompokan tanaman

nangka (Sudarma 2012) :

Berdasarkan ukuran pohon dan buah nangka terbagi dua golongan yaitu:

Nangka buah besar : tinggi mencapai 2030 m, diameter batang mencapai

80 cm dan umur mulai berbuah sekitar 510 tahun.

Nangka buah kecil : tinggi mencapai 69 m, diameter batang mencapai

1525 cm dan umur mulai berbuah sekitar 1824 bulan.

Berdasarkan kondisi daging buah nangka dapat dibedakan menjadi :

Nangka bubur dengan daging buah tipis, lunak agak berserat dan membubur,

beraroma keras mudah lepas dari buah, rasanya asam manis, dan berbau

harum tajam.

Nangka salak dengan daging buah tebal, keras, mengeripik, agak kering, rasa

manis agak pahit, dan tidak terlalu harum/aromanya kurang keras

Nangka cempedak dengan daging buah tipis dan beraroma harum spesifik.

2.3.4 Manfaat Nangka

Tanaman nangka tergolong serba guna. Buahnya yang muda dapat disayur

dan buah yang telah matang enak dimakan serta dapat dijadikan berbagai macam

olahan makanan. Beberapa daerah di Indonesia, penduduknya tidak hanya

memanfaatkan buah nangka sebagai bahan pangan saja, tetapi juga sebagai obat


24/49

14

tradisional untuk mengatasi demam, disentri atau malaria. Kulit batangnya yang

berserat, dapat digunakan sebagai bahan tali serta memiliki fungsi sebagai

antikanker, anti virus, antiinflamasi, diuretil dan antihipertensi (Ersam T. 2001).

Getahnya digunakan dalam campuran untuk memerangkap burung, menambal

perahu dan lain-lain. Daun nangka merupakan pakan ternak yang disukai

kambing, domba maupun sapi. Daun tanaman ini juga direkomendasikan oleh

pengobatan ayurveda sebagai obat antidiabetes karena ekstrak daun nangka

memberi efek hipoglikemi yaitu menurunkan kadar gula darah (Chandrika dkk.

2006). Selain itu daun nangka juga berkhasiat melancarkan air susu dan sebagai

obat koreng (Hutapea 1993). Menurut Prakash dkk (2009), daun nangka dalam

pengobatan tradisional digunakan sebagai obat demam, bisul, luka dan penyakit

kulit.

2.3.5 Kandungan Senyawa Daun Nangka

Daun nangka saat ini selain digunakan sebagai pakan ternak juga telah

digunakan sebagai obat tradisional. Daun nangka mengandung flavonoid, saponin

dan tannin. Flavonoid dan saponin merupakan senyawa yang mempunyai aktivitas

antibakteri yang cara kerjanya dengan merusak membran sitoplasma dan

mendenaturasi protein sel (Robonson 1995).

Senyawa flavonoid merupakan salah satu metabolit sekunder,

kemungkinan keberadaannya dalam daun dipengaruhi oleh adanya proses

fotosintesis sehingga daun muda belum terlalu banyak mengandung flavonoid.

Senyawa flavonoid tersebut terbukti secara empirik sebagai antikanker, antivirus,

antiinflamasi, diuretik dan antihipertensi (Ersam 2001). Mekanisme kerja senyawa

flavonoid dengan cara mendenaturasi protein sel bakteri dan merusak membran

sel bakteri tanpa dapat diperbaiki lagi (Pelczar dan Chan 1986). Selain itu,

flavonoid bersifat antiinflamasi sehingga dapat mengurangi peradangan dan

membantu mengurangi rasa sakit bila terjadi pendarahan atau pembengkakan pada

luka, bersifat antibakteri dan antioksidan serta mampu meningkatkan kerja sistem

imun karena leukosit sebagai pemakan benda asing lebih cepat bekerja dan sistem

limpa lebih cepat diaktifkan (Angka 2004).


25/49

15

Saponin merupakan salah satu senyawa yang dihasilkan tumbuhan

berfungsi sebagai antivirus, antibakteri, meningkatkan kekebalan tubuh.

Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri adalah menurunkan tegangan

permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan

mengakibatkan senyawa intraseluler bakteri akan keluar (Robinson 1995).

Saponin sering digunakan untuk disinfeksi media budidaya sehingga peranannya

sebagai antimikroba telah diuji. Namun saponin apabila digunakan dalam

konsentrasi tinggi dapat menjadi racun kuat untuk ikan dan amfibi dan saponin

sulit untuk diidentifikasi (Sugoro dkk. 2004). Tanin merupakan senyawa fenol

yang larut dalam air dan tanin pada tanaman merupakan senyawa fenolik yang

memiliki daya antiseptik (Pelczar dan Chan 1986). Penggunaan tanin sangat

efektif untuk mencegah serangan bakteri di dareah tropis dan subtropis. Efek

antibakteri tanin melalui reaksi dengan membran sel, inaktivasi enzim, dan

inaktivasi fungsi materi genetik (Ajizah 2004).

2.4 Kualitas Air

Air merupakan media yang paling utama bagi kehidupan ikan. Air yang

memadai, baik kuantitas maupun kualitas dalam budidaya ikan sangat

menentukan keberhasilan budidaya tersebut. Bila kondisi air tidak memenuhi

syarat dapat menjadi sumber penyakit yang paling berbahaya sehingga

mengakibatkan kematian bagi ikan air tawar (Effendie 2003).

Suhu merupakan salah satu faktor yang penting yaitu sebagai faktor

pengontrol yang dapat mempengaruhi aktivitas fisiologis dan kimiawi organisme

perairan. Suhu optimal di dalam air bergantung pada spesies dan berbagai

parameter seperti pertumbuhan, perkembangan, konversi pakan, dan ketahanan

penyakit (Handajani dan Samsundari 2005). Suhu air optimal untuk

pertumbuhaannya ikan mas adalah 22280C (Tim Lentera 2002).

Nilai pH menunjukan konsentrasi ion H+

dalam perairan . Semakin rendah

pH, perairan semakin asam, air yang bersifat asam tidak sesuai untuk

pemeliharaan ikan. Derajat keasaman (pH) yang ideal bagi kehidupan ikan

berkisar antara 6,78,2 (Tim Lentera 2002).


26/49

16

Kandungan oksigen terlarut (DO) yang baik untuk kehidupan ikan mas

ialah pada 35 mg/L (Tim Lentera 2002). Jika kandungan oksigen terlarut dalam

media pemeliharaan tidak optimal, ikan mas akan membuka mulutnya dan selalu

berada di permukaan air, bahkan bila air tidak segera diganti dapat menimbulkan

kematian.

Amonia yang terkandung dalam suatu perairan berasal dari kotoran ikan.

Amonia tingkat keseimbangannya sangat dipengaruhi oleh pH air, suhu dan

salinitas. Kadar amonia akan meningkat pada pH dan suhu tinggi serta kadar

garam dan kesadahan rendah. Kadar amonia tinggi dalam air secara langsung

dapat mematikan organisme perairan yakni melalui pengaruhnya terhadap

permeabilitas sel, mengurangi konsentrasi ion dalam tubuh, meningkatkan

konsumsi oksigen dalam jaringan, merusak insang dan mengurangi kemampuan

darah mengangkut oksigen. Kisaran amonia yang dapat ditolerir oleh ikan mas

adalah kurang dari 1 mg/L (Boyd 1982).


27/49

17

BAB III

BAHAN DAN METODE

3.1 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi dan

Laboratorium Akuakultur Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas

Padjadjaran. Penelitian dilaksanakan dalam dua tahap yaitu penelitian

pendahuluan dan penelitian utama. Penelitian pendahuluan dilaksanakan pada

bulan Januari 2013 sampai dengan Februari 2013. Penelitian utama dilaksanakan

pada bulan April 2013 sampai dengan Mei 2013.

3.2 Alat dan Bahan

3.2.1. Alat Penelitian

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian adalah :

1. Peralatan yang digunakan untuk uji zona hambat ekstrak daun nangka

terhadap bakteri :

Alumunium foil digunakan untuk membungkus alat-alat.

Autoclave dengan tekanan 1 atm, pada suhu 1210

C untuk

mensterilkan alat dan media.

Bunsen untuk mensterilkan alat inokulasi bakteri.

Erlenmeyer 250 mL merk Pyrex sebagai alat untuk menempatkan

media agar.

Falcon Centrifuge Tube 15 mL sebagai alat untuk membuat larutan

bakteriAeromonas hydrophila.

Gelas ukur 1 L merk Pyrex sebagai alat untuk mengukur volume

bahan cair yang akan digunakan.

Hot plates dan magnetic stirer sebagai alat untuk menghomogenkan

media agar.

Inkubator sebagai tempat untuk inkubasi bakteri.


28/49

18

Jangka sorong digital ketelitian 0,1 mm sebagai alat untuk mengukur

zona bening yang terbentuk.

Jarum ose sebagai alat untuk mengambil biakan bakteri.

Kapas sebagai penutup pada tabung reaksi.

Kertas saring Whatman no. 42 dengan diameter 5 mm sebagai kertas

cakram untuk menentukan zona bening.

L glass sebagai alat untuk meratakan bakteri dalam petri dish.

Laminar air flow sebagai ruang kerja aseptis dengan bantuan

sterilisasi UV.

Mikropipet merk Eppendorf sebagai alat untuk mengambil suspensi.

Parafilm sebagai segel cawan petri untuk mencegah kontaminasi.

Petri dish merk Pyrex sebagai tempat pembiakan bakteri sebanyak 6

buah.

Plastik tahan panas sebagai pembungkus alat-alat setelah sebelumnya

dibungkus oleh alumunium foil untuk disterilisasi.

Spektrofotometer Genesys 10 UV sebagai alat untuk menghitung

kepadatan mikrooganisme.

Timbangan analitik merk Precisa ketelitian 0,001 g sebagai alat untukmenimbang bahan.

2. Peralatan yang digunakan untuk uji LC50 :

Aerator, selang aerasi dan batu aerasi sebagai alat untuk memasok O2

pada setiap akuarium dan bak fiber.

Akuarium ukuran 20 x 40 x 30 cm3

sebagai wadah penelitian sebanyak

8 buah.

Serok kain kasa sebagai alat untuk mengambil ikan mas.

Software Epa Probhit Analysis untuk menganalisis nilai toksisitas

ekstrak daun nangka.


29/49

19

3. Peralatan yang digunakan dalam penelitian utama :

Aerator, selang aerasi dan batu aerasi sebagai alat untuk memasok O2

pada setiap akuarium dan bak fiber

Akuarium ukuran 20 x 40 x 30 cm3

sebagai wadah penelitian sebanyak

15 buah.

Alat Suntik dengan ketelitian 0,1 mL sebagai alat untuk

menginfeksikan bakteri pada ikan.

Serok kain kasa sebagai alat untuk mengambil ikan

4. Peralatan yang digunakan untuk pengukuran kualitas air :

DO meter merk Hanna HI-3810 sebagai alat untuk mengukur oksigen

terlarut.

pH meter merk Lutron pH-44 sebagai alat untuk mengukur dan

mengontrol derajat keasaman air.

Termometer dengan ukuran 00C100

0C sebagai alat untuk mengukur

suhu air.

3.2.2. Bahan Penelitian

Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah :

1. Ikan Uji

Ikan uji yang digunakan adalah ikan mas dengan ukuran 710 cm berasal

dari Balai Benih Ciparay.

120 ekor untuk uji pendahuluan LC50 48 jam ekstrak daun nangka dan

30 ekor untuk stok.

225 ekor untuk penelitian utama dan 75 untuk stok.

2. Daun Nangka

Daun nangka diperoleh dari PEDCA FPIK UNPAD Jatinangor-Sumedang.

3. Bakteri

Bakteri yang digunakan adalah Aeromonoas hydrophila yang berasal dari

Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar, Bogor.


30/49

20

4. Media Bakteri

Media yang digunakan untuk kultur adalah Nutrien Agar merk dagang

Oxoid dengan dosis pembuatan 28 gram/L.

5. Aquades dan alkohol

Aquades dan alkohol digunakan untuk mencuci preparat dan alat yang

telah digunakan.

6. Etanol 96 %

Etanol digunakan sebagai bahan pelarut ekstrak daun nangka.

7. NaCl Fisiologis 0,9 %

NaCl fisiologis sebagai larutan suspensi bakteri.

8. Pakan

Pakan yang digunakan merupakan pelet komersil merk PF-600 dengan

kandungan protein 39 %.

3.3 Metode Penelitian

Metode penelitian dilakukan secara eksperimental dengan menggunakan

Rancangan Acak Lengkap (RAL) yang terdiri atas lima perlakuan. Setiap

perlakuan diulang sebanyak tiga kali. Perlakuan yang diberikan adalah

perendaman benih ikan mas dalam larutan ekstrak daun nangka dengan

konsentrasi berbeda. Konsentrasi yang digunakan dalam penelitian, didasarkan

atas penelitian pendahuluan.

3.4 Prosedur Penelitian

3.4.1 Penelitian Pendahuluan

1. Pembutan Ekstrak Daun Nangka

Pembuatan ekstrak daun nangka dilakukan untuk mendapatkan stok

ekstrak yang digunakan dalam penelitian. Tahapan pembuatan ekstrak daun

nangka (Lampiran 1).


31/49

21

2. Uji Fitokimia Daun Nangka

Uji fitokimia daun nangka dilakukan untuk mengetahui kandungan yang

terdapat di dalam daun nangka. Pengujian dilakukan yaitu uji kandungan alkaloid,

falvonoid, saponin dan tanin. Tahapan pengujian fitokimia (Lampiran 2).

3. Uji Zona Hambat

Uji zona hambat dilakukan untuk mengetahui kemampuan ekstrak daun

nangka sebagai antibakteri dalam menghambat metabolisme kerja bakteri

Aeromonas hydrophila. Uji zona hambat dilakukan pada berbagai konsentrasi

yaitu 100.000 ppm, 10.000 ppm, 1000 ppm, 100 ppm dan 10 ppm dengan tiga kali

ulangan dan kontrol menggunakan ampisilin dengan konsetrasi 10.000 ppm,

1000 ppm dan 100 ppm dengan dua kali ulangan.

Langkah kerja untuk uji zona hambat sebagai berikut :

1. Peralatan dan bahan yang digunakan untuk uji zona hambat disterilisasi

terlebih dahulu dengan autoclavepada suhu 1210C dan tekanan 1 atm selama

15 menit.

2. Pembuatan konsentrasi ekstrak daun nangka dilakukan dengan cara

pengenceran dengan aquades (Lampiran 3).

3. Pembuatan media NA sebagai media pertumbuhan Aeromonas hydrophila

(Lampiran 4).

4. Pembuatan larutan bakteri dengan kepadatan 108

cfu/mL pada tabung falcon

(Lampiran 5).

5. Pengambilan suspensi cairan bakteri kepadatan 108

cfu/mL sebanyak 0,1 mL

dengan pipet ukur kemudian teteskan diatas permukaan agar yang telah

memadat.

6. Meratakan penyebaran bakteri dalam media agar menggunakan L glass.

7. Meletakan kertas cakram yang telah dipersiapkan diatas media petri dish agar

NA yang telah diinokulasi dengan bakteriAeromonas hydrophila.

8. Meneteskan ekstrak daun nangka dengan konsentrasi sebesar 10 ppm, 100

ppm, 1000 ppm, 10.000 ppm dan 100.000 ppm ke atas kertas cakram.


32/49

22

9. Metode pengerjaan dilakukan secara steril di ruang laminar air flow untuk

mencegah kontaminasi.

10. Menginkubasikan selama 1824 jam pada suhu 270

C.

11. Diameter zona hambatan yang dihasilkan berupa zona bening pada uji ini

kemudian diamati.

Hasil pengamatan uji zona hambat yang disebabkan oleh ekstrak daun nangka

pada metode difusi agar dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2.

Tabel 1. Hasil pengamatan uji zona hambat pada metode difusi agar

Perlakuan

(ppm)

Zona Hambat Ulangan ke- Rata-rata

(mm) I II III

100.000 9,52 10,69 10,03 10,08

10.000 8,86 9,2 9,12 9,06

1000 8,24 9,16 8,79 8,73

100 8,03 8,66 7,04 7,91

10 7,27 7,21 6,41 6,96

Tabel 2. Hasil pengamatan kontrol uji zona hambat pada metode difusi agar

Perlakuan

(ppm)

Zona Hambat Ulangan ke- Rata-rata

(mm) I II

10.000 9,81 9,16 9,48

1000 8,17 8,36 8,26

100 8,07 7,94 8,01

Berdasarkan tabel diatas, diketahui konsentrasi minimum rata-rata yang

dapat menghambat pertumbuhan bakteri adalah pada konsentrasi 10 ppm dengan

diameter zona hambat rata-rata 6,96 mm dan konsentrasi yang dapat menghambat

pertumbuhan terbesar adalah 100.000 ppm dengan diameter zona hambat rata-rata

10,08 mm. Kontrol yang dilakukan untuk penelitian ini mengunakan ampisilin

karena diketahui bahwa ampisilin merupakan antibiotik yang dapat mengobati

infeksi ringan sampai sedang yang disebabkan oleh bakteri dan telah banyak

diaplikasikan dalam bidang kesehatan.


33/49

23

Berdasarkan hasil uji zona hambat dapat diketahui bahwa semakin

bertambahnya konsentrasi ekstrak yang diberikan, maka zona hambat yang

dihasilkan juga semakin besar (Lampiran 6). Sehingga semakin besar konsetrasi

ekstrak maka semakin efektif untuk membunuh bakteriAeromonas hydrophila.

4. Uji LC50 (Lethal Concentration 50 %) Perendaman Ekstrak Daun Nangka

Uji LC50perendaman ekstrak daun nangka dilakukan untuk mendapatkan

konsentrasi ekstrak dengan mortalitas ikan mas sebanyak 50 % selama 48 jam.

Perlakuan pada uji LC50 dilakukan dengan dua ulangan pada konsentrasi 50 ppm,

100 ppm, 300 ppm, dan 600 ppm (Lampiran 3).

Ikan uji dimasukan ke dalam wadah perlakuan berupa akuarium dengan

padat penebaran 15 ekor/akuarium. Sebelum dilakukan uji LC50 ikan mas terlebih

dahulu diaklimatisasi selama 7 hari dan diberi pakan pelet secara adlibitum.

Kemudian akuarium diisi ekstrak daun nangka sesuai perlakuan.

Hasil uji LC50 perendaman ekstrak daun nangka terhadap benih ikan mas

yang dilakukan pada penelitian pendahuluan dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3. Hasil uji LC50 48 jam ekstrak daun nangka pada benih ikan mas

PerlakuanMortalitas pada jam ke-

Jumlah24 48

A1 15 Tidak dihitung lagi 15

A2 15 Tidak dihitung lagi 15

B1 14 - 14

B2 14 - 14

C1 9 - 9

C2 11 - 11

D1 - - 0

D2 - - 0

E1 - - 0

E2 - - 0

Keterangan : A = Ekstrak daun nangka konsentrasi 600 ppm

B = Ekstrak daun nangka konsentrasi 300 ppm

C = Ekstrak daun nangka konsentrasi 100 ppm

D = Ekstrak daun nangka konsentrasi 50 ppm

E = Tanpa perendaman ekstrak daun nangka (0 ppm)


34/49

24

Kelangsungan hidup ikan dalam uji LC50 dianalisis melalui program Probit

Analysis menggunakan software dari US Environmental Protection Agency (US

EPA). Nilai LC50 yang diperoleh adalah 101,910 ppm ekstrak daun nangka dapat

mengaikbatkan mortalitas benih ikan mas sebanyak 50 % dalam waktu 48 jam

(Lampiran 7).

Berdasarkan hasil zona hambat dan uji LC50, konsentrasi yang efektif

untuk menghambat pertumbuhan Aeromonas hydrophila berada diatas nilai zona

hambat terkecil dan dibawah nilai LC5048 jam. Sehingga perlakuan yang

digunakan dalam penelitian ini adalah :

Perlakuan A = Tanpa perendaman ekstrak daun nangka (0 ppm)

Perlakuan B = Ekstrak daun nangka konsentrasi 20 ppm

Perlakuan C = Ekstrak daun nangka konsentrasi 30 ppm

Perlakuan D = Ekstrak daun nangka konsentrasi 40 ppm

Perlakuan E = Ekstrak daun nangka konsentrasi 50 ppm

Model umum rancangan yang digunakan adalah :

= + + (Gaspersz 1991)

Keterangan :

Xij = Hasil pengamatan pada perlakuan ke-i ulangan ke-j

I = Rata-rata umum

j = Pengaruh perlakuan ke-i

ij = Pengaruh faktor randomperlakuan ke-i ulangan ke-j

3.4.2 Penelitian Utama

Penelitian utama dilakukan dengan rancangan perlakuan berdasarkan

penelitian pendahuluan. Perlakuan tersebut yaitu pada konsentrasi ekstrak daun

nangka 0 ppm, 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm.

Prosedur yang dilakukan selama penelitian adalah sebagai berikut :

1. Persiapan wadah perlakuan sebanyak 15 buah.

2. Wadah perlakuan diisi dengan air sebanyak 15 L.

3. Penempatan wadah perlakuan.


35/49

25

4. Ikan uji dimasukan ke dalam wadah perlakuan yang telah disiapkan dengan

kepadatan 15 ekor per wadah.

5. Ikan dipelihara selama 7 hari dan diberi pakan pelet secara adlibitum.

6. Penginfeksian bakteri Aeromonas hydrophila dengan kepadatan

108

cfu/mL sebanyak 0,1 mL dengan cara menyuntikkan pada tubuh ikan

secara intramuscular.

7. Ekstrak daun nangka dipersiapkan sesuai perlakuan yaitu 20 ppm, 30 ppm,

40 ppm, 50 ppm (Lampiran 3).

8. Pengamatan gejala klinis. Jika gejala klinis telah nampak, baru dilakukan

perendaman dengan ekstrak daun nangka sesuai perlakuan selama 48 jam.

9. Setelah 48 jam perendaman, air pemeliharaan diganti dengan air baru tanpa

diberi ekstrak daun nangka selama masa pemeliharaan.

10. Pada masa pemeliharaan dilakukan penyiponan dan pergantian air.

11. Pemberian pakan pelet komersil secara adlibitum dengan frekuensi dua kali

sehari yaitu pukul 08.00 dan 16.00 WIB.

12. Pengamatan kelangsungan hidup dilakukan setiap hari selama masa

pengobatan (2 hari) dan masa pemeliharaan (14 hari).

3.5 Parameter yang Diamati

3.5.1 Gejala Klinis

Gejala klinis yang diamati adalah kerusakan tubuh dan tingkah laku ikan

yang mencakup respon terhadap pakan dan uji refleks (respon terhadap kejutan)

dengan cara mengetuk kaca akuarium. Perubahan gejala klinis yang disebabkan

oleh serangan bakteriAeromonas hydrophila yaitu warna tubuh ikan menjadi agak

gelap, kulit kasar dan timbul pendarahan selanjutnya menjadi borok, kemampuan

berenang turun dan sering megap-megap di permukaan air karena insang rusak

dan sulit bernapas, perut terlihat agak kembung, seluruh sirip rusak dan berwarna

keputihan, serta mata rusak dan agak menonjol (Cahyono 2011). Pengamatan

dilakukan setiap hari selama masa pengobatan (2 hari) dan masa pemeliharaan

(14 hari).


36/49

26

3.5.2 Kelangsungan Hidup

Kelangsungan hidup ikan mas diamati dengan cara menghitung jumlah

ikan yang mati setiap hari selama masa pengobatan. Rumus kelangsungan hidup

Effendie (1997) :

=

%

Keterangan: KH = Tingkat kelangsungan hidup ikan (%)

Nt = Jumlah ikan uji yang hidup pada akhir penelitian (ekor)

No = Jumlah ikan uji yang hidup pada awal penelitian (ekor)

3.5.3 Kualitas Air

Parameter kualitas air yang diukur antara lain suhu, pH, DO, dan amoniayang diukur dua kali, yaitu pada tahap awal penelitian (hari pertama), tahap

pertengahan penelitian (hari ketujuh), dan pada tahap akhir penelitian (hari

keempat belas).

3.6 Analisis Data

Pengaruh perlakuan perendaman benih ikan mas dalam ekstrak daun

nangka terhadap kelangsungan hidup dianalisis menggunakan Anova (Analisis of

Variance) atau uji F dan jika terdapat pengaruh pada perlakuan dilanjutkan

dengan uji jarak berganda Duncan pada taraf kepercayaan 95 % (Gasperz 1991).

Gejala klinis yang terjadi dianalisis secara deskriptif.


37/49

27

DAFTAR PUSTAKA

Ajizah, A. 2004. Sensitivitas Salmonella typhimurium Terhadap Ekstrak Daun

Jambu Biji (Psidium guajava) Bioscientie. Vol. 1, No 1. Program Studi

Biologi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat

Angka, S. L. 2004. Penyakit Motil Aeromonas Septicemia Pada Ikan Lele Dumbo

Clarias sp. Forum Pascasarjan. Vol :27

Aryo. 2007. Artoindonesianin untuk Anti tumor.

http://ariyo.wordpress.com/category/kimia/page/3/. Diakses pada tanggal 2

Maret 2013.

Bachtiar, E., Mulyani, Y., dan Angraeni, S., R. 2010. Petunjuk Praktikum Kimia

Bahan Hayati Laut. Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas

Padjajaran.

Boyd, C. E. 1982. Water Quality in Warm Fish Pond. Auburn University,

Agricultural Experiment Nation, Alabama. 359 hal.

Cahyono, B. 2011.Budidaya Ikan di Perairan Umum. Yogyakarta : Kanisius

Chandrika, U. G. I., Wedage, W. S., Wokramasinghe, S. M. D. N1 dan Fernando

W. S2. 2006. Hypoglycaemic Action Of The Flavonoid Fraction

Of Artocarpus heterophyllus Leaf . Srilanka : University of

Jayewardenepura

Djarijah, S, A. 2011. Pembenihan Ikan Mas. Yogyakarta : Kanisius

Effendie, H. 2003. Telaah Kualitas Air Bagi Pengelolaan Sumber Daya dan

Lingkungan Perairan. Yogyakarta : Kanisius

Effendie, M. 1997.Biologi Perikanan. Yogyakarta : Yayasan Pusat Nusatama

Eidman, M. K., Sumawidjaja, S. dan Hardjosworo, A. S. L. 1981. Wabah

Penyakit Bercak Merah Ikan. Laporan Kelompok Kausal Team Crash

Program Penanggulangan Epidemi Penyakit Ikan. Institut Pertanian

Bogor.

Ersam, T. 2001. Senyawa Kimia Mikromolekul Beberapa Tumbuhan Artocarpus

Hutan Tropika Sumatra Barat. Bandung : Institut Teknologi Bandung.

Fujaya Y. 2004. Fisiologi Ikan. Rineka Cipta: Jakarta.

Gaspersz, V. 1991. Metoda Peancangan untuk Ilmu-Ilmu Pertanian dan Ilmu-

ilmu Teknik Biologi. Bandung : CV Armico.

Herwig, N. 1979. Handbook of Drugs and Chemicals used in the Treatment of

Fish Disease. United States of America: Charles C. Thomas


38/49

28

Holt, J. G. dan Krieg N. R., Sneath P. H. A., Staley J. T. 1994. Bergeys Manual

of Determinative Bacteriology. United States of America Baltimore:

Williams & Wilkins Company.

Hutapea, J. R. 1993.Inventaris Tanaman Obat Indonesia,edisi II. Jakarta: Depkes

RI Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan.

Leuschner, R. G. K. dan Zamparini, J. 2002. Effects of spices on growth and

survival of Escherichia coli 0157 and Salmonella enterica serovar

Enteritidis in broth model systems and mayonnaise. Food Control 13: 399

404.

Kabata, Z. 1985. Parasites And Diseases Of Fish Cultured In The Tropics. Taylor

And Francis London Philadelphia. Page 92 107.

Kamiso, H. N. dan Triyanto. 1993. Vaksinasi Aeromonas hydrophila untuk

Menanggulangi Penyakit MAS pada Lele Dumbo. Abstrak. SimposiumPerikanan Indonesia I. Jakarta.

Khairuman, H. dan Amri, K. 2011. Buku Pintar Budidaya dan Bisnis 15 Ikan

Konsumsi. Jakarta : AgroMedia Pustaka.

Kompas. 2013. Penanganan Resistensi Antibiotik Mendesak.

http://health.kompas.com/read/2013/02/25/10401158/Penanganan.Resisten

si.Antibiotik.Mendesak. Diakses pada tanggal 10 Maret 2013.

Krieg, N. R. dan Holt J. G. 1984.Bergeys Manual of Systematic Bacteriology. Ed

ke-1.United States of America Baltimore: Williams & Wilkins Company.

Maharani, F. dan Supriadi, H. 2006. Evaluasi Potensi Penggunaan BeberapaMateri Bahan Alami Bagi Upaya Penanggulangan Penyakit Ikan Gurame

(Osphronnemus gouramy). Prosiding Seminar Nasional Tahunan III Hasil

Penelitian Perikanan Dan Kelautan, Yogyakarta. halaman : 227 235.

McDaniel, D. 1979. Procedures For Detection And Identification Of Certain Fish

Patogen. Reviced. Fish Health American Fisheries Society. Page 42 82.

Pikiran Rakyat. 2008a. Lima Ton Ikan Mas Mati di Waduk Cirata.

http://www.pikiran-rakyat.com/node/78516. Diakses pada tanggal 10

Maret 2013.

Pikiran Rakyat. 2013b. Harga Ikan Air Tawar di Kuningan Melonjak.http://m.pikiran-rakyat.com/node/222954. Diakses pada tanggal 11 Maret

2013.

Pleczar, M. J. dan E. C. S. Chan. 1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi Jilid 1.

Jakarta: Univeristas Indonesia


39/49

29

Prakash, Om., K. Rajesh., Anurag, M. dan Rajiv, G. 2009.

Artocarpus heterophyllus (Jackfruit): An overview. India : Review Article

Vol.3 Issue 6 page 353-358

Rahman, M. F. 2008. Potensi Antibakteri Ekstrak Daun Pepaya Pada Ikan

Gurami Yang Diinfeksi Bakteri Aeromonas hydrophila. Fakultas

Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor.

Robinson, T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Penerjemah

Padmawinata K. Bandung : Institut Teknologi Bandung

Rukmana, R. 2008.Budidaya Nangka. Yogyakarta: Kanisius

Sismeiro et al. 1998. Aeromonas hydrophila Adenylyl Cyclase: a New Class of

Adenylyl Cyclase with Thermophilic Properties and Sequences

Similiarities to Proteins From Hyperthermophilic Archaebacteria. J

Bakteriol 180: 3339-3344.

Sudarma, J. H. 2012. Pembibitan Tanaman Buah Mudah Murah & Hasil

Melimpah. Jakarta : Bola Bintang Publishing.

Sugianti, B. 2005. Pemanfaatan Tumbuhan Obat Tradisional Dalam

Pengendalian Penyakit Ikan. Institut Pertanian Bogor.

Sugoro, I.I. Gobel, N. Lelananingtyas dan W. T. Sasongko. 2004. Pengaruh

Variasi Konsentrasi Tanin Terhadap Produksi Gas Secara In Vitro.

Prosding Presentasi Ilmiah Keselamatan dan Radiasi Lingkungan X.

Puslitbang Teknologi Isotop dan Radiasi. Batan.

Sukadi, F. 2004. Kebijakan Pengendalian Hama Dan Penyakit Ikan DalamMendukung Akselerasi Pengembangan Perikanan Budidaya. Seminar

Nasional Penyakit Ikan dan Udang IV di Univ. Jenderal Soedirman,

Purwokerto, 18 19 Mei 2004.

Sukamto. 2007. Cara-Cara Pengobatan Ikan dengan Menggunakan Ekstrak

Tanaman Herbal. Warta Puslitbangbun. Vol. 13 No. 3

Sunarjono, H. 2010.Berkebun 21 Jenis Tanaman Buah. Jakarta: Penebar Swadaya

Supryadi, H. dan A. Rukyani, 1990. Imunoprofilaksis dengan Cara Vaksinasi

Pada Usaha Budidaya Ikan. Prosding Seminar Nasional II Penyakit Ikan

dan Udang. Balai Penelitian Perikanan Air Tawar. Bogor.Tarigan J. Br., Zuhra, J. F. dan Sihotang, H. 2008. Skirining Fitokimia Tumbuhan

Yang Digunakan Oleh Pedagang Jamu Gendong Untuk Merawat Kulit

Wajah Di Kecamatan Medan Baru. Sumatra : Universitas Sumatara Utara.

Tim Lentera. 2002. Pembesaran Ikan Mas di Kolam Air Deras. Jakarta : PT

AgroMedia Pustaka.


40/49

30

LAMPIRAN


41/49

31

Lampiran 1. Pembuatan Ekstrak Daun Nangka

(a) (b) (c)

(d) (e)

Keterangan :

(a) Daun nangka segar dicuci kemudian dikeringkan (kering udara) 4 - 7 hari.

(b) Daun nangka kering dihaluskan dengan cara diblender.

(c) Daun nangka halus direndam dengan etanol 96 % selama 24 jam.

Perendaman dilakukan 3 kali.

(d) Supernatan diambil, kemudian dievaporasi dengan vakum rotavapour pada

suhu 600

C dengan kecepatan 120 rpm.

(e) Ekstrak daun nangka siap pakai.


42/49

32

Lampiran 2. Uji Fitokimia Daun Nangka

No. Zat yangDiuji

Proses Pengujian Hasil Positif Gambar

1. Alkaloid 1 g sampel dilarutkan dalam 5 mL

kloroform, ditambah 3 tetes ammonia(NH4OH) 10% lalu dikocok. Lapisan

klorofom diambil kemudian dilarutkan

dalam 1 mL H2SO4 2N, dikocok,ditambahkan satu tetes pereaksi Meyer

(Kl+HgCl2).

Terbentuk

endapan putih

2. Flavonoid 1 g sampel dihaluskan kemudian

dididihkan dengan 25 mL metanol

selama 10 menit, disaring dan pelarutdiuapkan sampai kering. Ditambahkankloroform dan air suling (1:1) sebanyak

5 mL, dikocok dan didiamkan hinggaterbentuk dua lapisan kloroform air

(lapisan kloroform di bawah dan lapisanair di bagian atas). Lapisan air diambil

kemudian ditambahkan 0,1 g bubuk

magnesium, 5 tetes asam klorida pekatdan amil alkohol.

Terbentuk warna

kuning

kemerahansampai merah

3. Saponin 1 g sampel dimasukan kedalam beakerglass dan ditambahkan 20 mL akuades

kemudian dipanaskan selama 5 menitdan disaring dalam keadaan panaskemuidan filtrat tersebut diambil

sebanyak 10 mL dan dikocok dengan

kuat secara vertikal selama 10 detik.

Terbentuk busayang stabil tidak

kurang dari 1 -10cm, tidak hilangpada penambahan

satu tetes HCl 2N

4. Tanin 2 mL filtrat hasil penyaringan pada uji

saponin dimasukan ke dalam tabungreaksi dan ditambahkan 1 2 tetespereaksi FeCl3 1%.

Terbentuk warna

biru tua atau hijaukehitaman

Sumber : Bachtiar dkk 2010


43/49

33

Lampiran 3. Pembuataan Konsentrasi Ektrak Daun Nangka

Pembuatan konsetrasi ektrak daun nangka untuk uji zona hambat :

0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml

larutan stok larutan stok larutan stok larutan stok

9

0,9 ml 0,9 ml 0,9 ml 0,9 ml

akuades akuades akuades akuades

100.000 ppm 10.000 ppm 1000 ppm 100 ppm 10 ppm

(0,1 g ektrak +

0,9 ml akuades)

Pembuatan konsetrasi ektrak daun nangka untuk uji zona LC50 :

A = 600 ppm = 600 mg/L = 9 g/15 L

B = 300 ppm = 300 mg/L = 4,5 g/15 L

C = 100 ppm = 100 mg/L = 0,15 g/15 L

D = 50 ppm = 50 mg/L = 0,75 g/15 L

Pembuatan konsentrasi ekstrak daun nangka untuk penelitian utama

B = 20 ppm = 20 mg/L = 0,3 g/15 L

C = 30 ppm = 30 mg/L = 0,45 g/15 L

D = 40 ppm = 40 mg/L = 0,6 g/15 L

E = 50 ppm = 50 mg/L = 0,75 g/15 L


44/49

34

Lampiran 4. Pembuatan MediaNutrien Agar (NA)

Bahan

NA (28 g/L) = 1,05 g

Aquades = 37,5 ml

Cara Pembuatan Media NA:

Memasukan NA dan aquades kedalam labu Erlenmeyer

Memasukan magnetik stirer agar NA dan akuades homogen kemudian ditutup

dengan alumunium foil.

Memanaskan larutan pada hotplates sampai mendidih.

Memasukan media kedalam autoclavepada suhu 1210C pada tekanan 1 atm

selama 15 menit.


45/49

35

Lampiran 5. Pembuatan larutan bakteri kepadatan 108

cfu/mL dengan

Spektrofotometer

Langkah-langkah pembuatan larutan bakteri kepadatan 108

cfu/mL dengan

menggunakan spektrofotometer adalah sebagai berikut :

1. Isolasi Aeromonas hydrophila dari media NA dari tabung reaksi.

Penumbuhannya di cawan petri yang sudah berisi media NA.

2. Inkubasi dalam inkubator pada suhu 270C selama 24 jam.

3. Pemanenan bakteri secara aseptik kedalam Falcon Centrifuge Tube yang

telah berisi larutan NaCl fisiologis.

4. Penghitungan kepadatan dengan spektrofotometer dengan panjang gelombang

540 nm dan absorban (OD) 0,235

5. Apabilah belum diperoleh nilai OD tersebut, penambahan larutan NaCl

fisiologis atau stok bakteri harus dilakukan hingga diperoleh absorban 0,235.

6. Dari pengukuran dapat diasumsikan bahwa OD 0,235 setara dengan

kepadatan bakteri 108cfu/mL


46/49

36

Lampiran 6. Gambar Uji Zona Hambat

Hasil Uji Zona Hambat

(a) (b) (c)

(d) (e) (f)

Keterangan :

(a) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 100.000 ppm

(b) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 10.000 ppm

(c) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 1000 ppm

(d) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 100 ppm

(e) Zona bening pada konsentrasi ekstrak 10 ppm

(f) Zona bening pada konsentrasi 10.000 ppm 1000 ppm, 100 ppm

(ampisilin/kontrol)


47/49

37

Lampiran 7. Uji LC50 Perendaman Ekstrak Daun Nangka

a. Prosedur

Rancangan percobaan untuk ekstrak herbal daun nangka pada benih ikan

mas masing-masing 15 ekor menggunakan 4 perlakuan dengan 2 ulangan, lama

waktu pemeliharaan selama 2 hari, dengan prosedur kerja:

Benih ikan mas direndam menggunakan ekstrak daun nangka dengan

konsentrasi yang berbeda, diamati kematian ikan setiap jam untuk

perhitungan menentukan LC50

b. Hasil Analisis Probit

Analisis nilai toksisitas (LC50) dengan menggunakan Software Epa

Probhit Analysis Version 1,5

EPA PROBI T ANALYSI S PROGRAMUSED FOR CALCULATI NG LC/ EC VALUES

Ver si on 1. 5

LC50 daun nangka

Propor t i onObserved Respondi ng Predi ct ed NumberNumber Pr oport i on Adj ust ed f or Proport i on

Conc. Exposed Resp. Respondi ng Cont r ol s Respondi ng

50. 0000 30 0 0. 0000 0. 0000 0. 0889100. 0000 30 20 0. 6667 0. 6667 0. 4857300. 0000 30 28 0. 9333 0. 9333 0. 9795600. 0000 30 30 1. 0000 1. 0000 0. 9996

Chi - Squar e f or Het er ogenei t y ( cal cul at ed) = 10. 058Chi - Squar e f or Het er ogenei t y

( t abul ar val ue at 0. 05 l evel ) = 5. 991Mu = 2. 008218

Si gma = 0. 229437

Par amet er Est i mat e St d. Er r . 95% Conf i dence Li mi t s- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -- - - - - - - - - -I nt ercept - 3. 752818 3. 349210 ( - 18. 164467, 10. 658831)Sl ope 4. 358500 1. 689636 ( - 2. 912002, 11. 629004)

Theor et i cal Spontaneous Response Rat e = 0. 0000


48/49

38

Lampiran 7. (lanjutan)

LC50 daun nangka

Est i mated LC/ EC Val ues and Conf i dence Li mi t s

Poi nt Exposur e Concent r at i onLC/ EC 1. 00 29. 818LC/ EC 5. 00 42. 738LC/ EC 10. 00 51. 781LC/ EC 15. 00 58. 943LC/ EC 50. 00 101. 910LC/ EC 85. 00 176. 200LC/ EC 90. 00 200. 569LC/ EC 95. 00 243. 007LC/ EC 99. 00 348. 302

Analisis nilai toksisitas (LC50) dengan menggunakan Software Epa

Probhit Analysis Version 1,5 untuk perendaman ekstrak daun nangka terhadap

benih ikan mas adalah 101.910 ppm.


49/49

39

Lampiran 8. Tata Letak Perlakuan

Keterangan : A, B, C, D, dan E = Perlakuan

1, 2, 3 = Ulangan

E1

A 1

D2

D1

B2

E2

B1

C2

C 1

A 2

A3

D3

E 3

B 3

C3

nangka contoh

Documents

Transcript of nangka contoh