Modified expression of two receptor kinase genes in hexaploid oat (Avena sativa L.) on inoculation...

8
Modi¢ed expression of two receptor kinase genes in hexaploid oat (Avena sativa L.) on inoculation with crown rust DAVIS W. CHENG*, SHAN HE and K.C. ARMSTRONG { 1 Department of Biological Sciences, College of Science, Wayne State University, Biological Sciences Building, 5047 Gullen Mall, Detroit, Michigan 48202USA and 2 Eastern Cereal and Oilseed Research Centre, AAFC, Ottawa, Ontario, K1A 0C6, Canada (Accepted for publication 07 October 2002) An Lrk10 type of receptor kinase gene maps to three homoeologous linkage groups (KO4_12, KO5, and KO6) and also to a 4th (KO13) and a 5th unlinked locus. In linkage group KO4_12 it mapsto the same location as the rust resistance genes Pg3, Pg9, Pc44, Pc46, Pc50, Pc68, Pc95, and PcX. In this study, we used a short DNA fragment, encoding the extracellular domain of a receptor kinase gene as a probe to isolate receptor kinase gene-containing genomic DNA clones in hexaploid oat. One large genomic DNA clone was identi®ed, which had two distinct receptor kinase genes, ALrk10 and Ork10, located head to head and sharing a putative bi-directional promoter. ALrk10 consists of three exons and two introns, Ork10 consists of 4 exons and 3 introns, and each encodes full length, functional receptor kinase proteins. Both genes are present in multiple copies in hexaploid oat genomes. They are expressed constitutively in leaf tissues of both resistant and susceptible plants. Their expression, however, was turned o or down in susceptible or compatible fungal-plant combinations, but remained unchanged in resistant or incompatible crown rust pathogen-plant combinations. The two coordinately expressed receptor kinase genes show a direct response to crown rust pathogen attack in oat plants. These results indicate that the receptor kinase genes, ALrk and Ork, are involved in the oat plants ability to respond to rust pathogen attack. Crown Copyright * c 2003 Published by Elsevier Science Ltd. All rights reserved. Keywords: Lrk10; Ork; molecular organization; molecular structure; regulation; rust resistance. INTRODUCTION World oat production is often limited by rust disease. The cultivation of resistant cultivars is considered to be the most economical and environmentally safe method to reduce yield losses caused by this disease. Genes that provide resistance to oat rust include up to 97 dierent genes (Pc1 to Pc96, and PcX) that provide resistance to races of crown rust (Puccinia coronata f. sp Avenae Erik) and 17 dierent genes (Pg1 to Pg17) that provide resistance to races of stem rust (P. graminis Pers. f Avenae Eriks & Henn) [20 , 32 ] Simons et al., 1978). Molecular markers have been identi®ed for Pc68 [35 ], PcX [11 ], Pc91 and Pc92 [38 ], three unnamed Pc genes transferred from A. sterilis [6 , 50 ], resistance to rust isolates PC54 and PC59 [7 ], Pc71 [8 ], Pg3 [35 ], Pg9 [33 , 11 ], and Pg13 [33 , 11 , 22 ]. Most of the Pc and Pg resistance genes are dominant while others are semi-dominant or recessive [30 ]. None of these genes have been cloned and analyzed to determine their molecular structure and function. A number of disease resistance genes have been isolated in plants [2 , 3 , 5 , 12 , 13 , 19 , 27 , 31 , 32 , 34 , 41 , 47 ]. Many of them encode receptor kinases that could participate in the protein-protein interaction and signal transduction pathway that might underly gene-for-gene recognition in disease resistance [42 , 24 ]. The receptor kinases are a large family of enzymes. Classi®cation of plant receptor kinases is usually based on the structure of the extracellular domains and have been de®ned as three [46 , 4 ] or four major classes [21 , 25 ]. These consist of the S-domain, the leucine-rich repeat (LRR), the epidermal growth factor, the lectin-like class, and a serine-threonine kinase class. Most R genes belong to the nucleotide- binding (NB)- LRR class which can be divided into those that carry amino-terminal homology to the Toll and Interleukin-1 receptor (TIR) genes and those that contain a coiled coil (CC) [32 ]. In addition, Xa21 is an LRR kinase, Cf-9 an LRR with extracellular LRRs, and Pto(that gives resistance to Pseudomonas syringae in tomato) is a cytoplasmic serine/threonine kinase with myristola- tion site [25 , 44 ]. Some genes are cytoplasmic e.g. N giving resistance to tobacco TMV and RPS2 giving resistance to P. syringae of Arabidopsis, and others are Physiological and Molecular Plant Pathology (2002) 61, 281±288 doi:10.1006/pmpp.2003.0441 0885-5765/03/$ - see front matter Crown Copyright * c 2003 Published by Elsevier Science Ltd. All rights reserved. * To whom all correspondence should be addressed. E-mail: [email protected] { To whom all correspondence should be addressed. E-mail: armstrong [email protected]

Transcript of Modified expression of two receptor kinase genes in hexaploid oat (Avena sativa L.) on inoculation...

������� ������� �� �� ���� � ����� ���� �� ��������� �� ������ ������ ��� �� ��������� ��� ����� ����

����� �� ��� � ��� ��� ���� ��������������������� �� ���� ��������� � ��� �������� ����� ����� ����������� �� ���� �������� ��� ����� ���� �� �� �� �������� ��� ���� �!"�"��# ��� �$������ ����� ��� %� ���� &������ ������� ##'�� %���(�� %������ )*# ��+� ������

��������� �� �!"#$���$�� %& ����"� �%%�'

�� ,�-*� �(�� �� ������ )$��*� +��� ,��* �� �- �� -�,���#�+�!* #$�)�+� + �!�* ���./��� ��0� �����1' ��� �#*� �� � .�- ����2' ��� � 0�- !�#$�)�� #��!*� �� #$�)�+� + �!� ��./�� $� ,��* �� �-� *�,�#����$�� �* �-� !*� �*$*����� +���* .�/� .�0� .���� .��+� .���� .�+!� .�0�� ��� .�1� �� �-$* *�!�(� 3� !*��� *-� � ��� � �+,���� �����$�+ �-� �4� ���##!#� ��,�$� �� � ������ )$��*� +��� �* � � �"� �� $*�#��� ������ )$��*� +���5�����$�$�+ +���,$� ��� �#���* $� -�4��#�$� ���� ��� #� +� +���,$� ��� �#���3�* $����$6��� 3-$�- -�� �3� �$*�$��� ������ )$��*� +���*� #,�-*� ��� %�-*�� #������ -��� �� -��� ���*-� $�+ � �!���$7� "$5�$ ���$���# � �,��� � #,�-*� ���*$*�* �� �- �� �4��* ��� �3� $�� ��*� %�-*� ���*$*�*�� . �4��* ��� 2 $�� ��*� ��� ���- ������* �!## #��+�-� �!���$���# ������ )$��*� � ���$�*� 8��- +���* � �� �*��� $� ,!#�$�#� ���$�* $� -�4��#�$� ��� +���,�*� �-�( � � �4� �**�� ���*�$�!�$7�#( $� #��� �$**!�* ��"��- �*$*���� ��� *!*����$"#� �#���*� �-�$ �4� �**$��� -�3�7� � 3�* �! ��� �9 � ��3� $� *!*����$"#� � ��,���$"#� �!�+�#5�#��� ��,"$���$��*� "!� �,�$��� !��-��+�� $� �*$*���� � $���,���$"#� � �3� !*����-�+��5�#��� ��,"$���$��*� �-� �3� ��� �$����#( �4� �**�� ������ )$��*� +���* *-�3 � �$ ��� �*���*� �� � �3� !*� ���-�+�� �����) $� ��� �#���*� �-�*� �*!#�* $��$���� �-�� �-� ������ )$��*� +���*�#,�- ��� %�-� � � $�7�#7�� $� �-� ��� �#���* �"$#$�( �� �*���� �� !*� ���-�+�� �����)�

� �3� ���( $+-� �� �%%2 :!"#$*-�� "( #*�7$� ��$���� ;��� �## $+-�* �*� 7���

��� ��� ,�-*�< %�-< ,�#��!#� � +��$=��$��< ,�#��!#� *� !��! �< �+!#��$��< !*� �*$*������

������������

�� #� ��� � ��!��$�� $* ����� #$,$��� "( !*� �$*��*�� �-��!#�$7��$�� �� �*$*���� �!#�$7� * $* ���*$�� �� �� "� �-�,�*� �����,$��# ��� ��7$ ��,����##( *��� ,��-�� �� ��!�� ($�#� #�**�* ��!*�� "( �-$* �$*��*�� ����* �-��� �7$�� �*$*����� �� ��� !*� $��#!�� !� �� >& �$9� ���+���* �.�* �� .�0+� ��� .�1' �-�� � �7$�� �*$*����� �� ���* �� � �3� !*� �.������� ������ �� *� #����� $)' ����& �$9� ��� +���* �.�* �� .�*�' �-�� � �7$�� �*$*����� �� ���* �� *��, !*� �.2 �������� .���2 � #����� $)* ? ���'@"� � /"A �$,��* �� �#�� �>&B'� ��#��!#� ,� )� * -�7�"��� $����$6�� �� .�+! @/�A� .�1 @**A� .�0* ��� .�0"@/!A� �- �� !���,�� .� +���* � ��*�� �� � �, #2 ����� ��@+ � ��A� �*$*����� �� !*� $*�#���* :�0. ��� :�0> @�A�.��* @!A� .�/ @/�A� .�0 @// � **A� ��� .�*/ @// � ** � ""A���*� �� �-� .� ��� .� �*$*����� +���* � � ��,$����3-$#� ��-� * � � *�,$5��,$���� � ���**$7� @/�A� ���� ���-�*� +���* -�7� "��� �#���� ��� ���#(=�� �� ���� ,$���-�$ ,�#��!#� *� !��! � ��� �!���$���

� �!,"� �� �$*��*� �*$*����� +���* -�7� "��� $*�#����$� �#���* @" � / � �� *" � */ � *0 � "� � /* � /" � /�� �* � ��A� ���(�� �-�, ������ ������ )$��*�* �-�� ��!#� �� �$�$���� $��-� � ���$�5� ���$� $��� ���$�� ��� *$+��# � ��*�!��$�����-3�( �-�� ,$+-� !��� #( +���5�� 5+��� ���+�$�$�� $��$*��*� �*$*����� @�" � "�A� �-� ������ )$��*�* � � �#� +� ��,$#( �� ��=(,�*� �#�**$6���$�� �� �#��� ������ )$��*�* $* !*!�##( "�*�� �� �-� *� !��! � �� �-��4� ���##!#� ��,�$�* ��� -�7� "��� ��6��� �* �- ��@�+ � �A � ��! ,�C� �#�**�* @"* � "�A� �-�*� ���*$*� �� �-��5��,�$�� �-� #�!�$��5 $�- ����� �;��'� �-� ��$�� ,�#+ �3�- ����� � �-� #���$�5#$)� �#�**� ��� � *� $��5�- ���$��)$��*� �#�**� ��*� � +���* "�#��+ �� �-� �!�#���$��5"$��$�+ ��8'5 ;�� �#�** 3-$�- ��� "� �$7$��� $��� �-�*��-�� �� ( �,$��5�� ,$��# -�,�#�+( �� �-� ��## ������� #�!)$�5� ������ ����' +���* ��� �-�*� �-�������$� � ��$#�� ��$# ���' @/"A� �� ���$�$��� 1�"* $* ��;�� )$��*�� �30 �� ;�� 3$�- �4� ���##!#� ;��*� ���.���-�� +$7�* �*$*����� �� .�������� �������� $� ��,���'$* � �(���#�*,$� *� $��D�- ���$�� )$��*� 3$�- ,( $*��#�5�$�� *$�� @"� � ��A� ��,� +���* � � �(���#�*,$� ��+� �+$7$�+ �*$*����� �� ��"���� ��� ��� �:�� +$7$�+ �*$*����� �� .2 �������� �� #��4������� ��� ��-� * � �

. ��� ���� ��� � ��� �� . ��� .�� �� ��%%�' ��� �B�E�BB��$F�%��%%1D�,����%%2�%..�

%BB050&10D%2DG 5 *�� � ��� ,���� � �3� ���( $+-� �� �%%2 :!"#$*-�� "( #*�7$� ��$���� ;��� �## $+-�* �*� 7���

�� 3-�, �## �� �*�������� *-�!#� "� ��� �**��� 5,�$#F�-��+�3BBBH,*����,� �� 3-�, �## �� �*�������� *-�!#� "� ��� �**��� 5,�$#F

� ,*� ��+ )�H�,��+ ���

,�," ��� �**��$����� 1�"* � $�� "#�*� �!�+!*' ��� �30�-�� +$7�* �*$*����� �� .2 �������� �� ��,��� @"�A�

,�-*�� � +��� #������ ��� �-� ,�*� !*� �*$*����� #��!*�� 3-���� $* � *� $��D�- ���$�� )$��*� �-�� �����$�* ���4� ���##!#� ��,�$�� � � ��*,�," ��� ��,�$� ��� ��(���#�*,$� )$��*� ��,�$� ��� $* � �*!,�"#( #������ $��-� �#�*,� ,�," ��� @*�A� �� -�7� �#���� �-��4� ���##!#� ��,�$�* �I�' �� ��� ������ )$��*�+���* !*$�+ � $,� * $�$�$�##( ��*$+��� � �, �-� ,�-*�+��� �� 3-���� �-� �4� ���##!#� ��,�$�* �� ��� ������ )$��*� +���* � � -$+-#( ��#(,� �-$� 3$�-$� ��� *���$�*��� -�7� "��� ,����� �� #��$ �� ��! #$�)�+� + �!�* $�-�4��#�$� ��� ��� � 6��- ��#(,� �-$*, $* !�,�������- �� #$�)�+� + �!�* ��./��� ��0� ��� ��1 �� �5*���� �� + �!� � �� 3-��� ��� �-� ��! �-� ���2� ��#$�)�+� + �!� 2 �� 3-��� @0A� ��� �� �-� �J;: #��$,����� "( �-$* +��� � �+,��� $* �$+-�#( #$�)�� �� � ,�C� !*� �*$*����� +��� �#!*�� �� #$�)�+� + �!� ��./���,�-*� -�* �#*� "��� ,����� $� �-� -�4��#�$� ��� K�+#�L IK��,L � �** @/+A ��� $� �$�#�$� #���� ������� I #2 (������@"+ � �0A� �-� � $,� * ,��� �� $*�#��� �-� I� !*�� $� �-$**�!�( �� +��� �4� �**$��� �,�#$6�� I�* �� �-� �D� ����5+���,�* � �, ��./��� ��0� ��� ��1 � �, ,��( ���*���$�* ��� ����**$��* @0 � *�A� $� � �**� �� �-$* *�!�(� 3�$*�#���� ��� �-� ���� $=�� � #�,"�� �#��� �� ($�+ �3���,�#��� #��+�- ������ )$��*� +���*� #,�-*� ��� %�-*����� $�7�*�$+���� �-� �!���$�� �� �-�, $� -�4��#�$� ����#2 ������ ;�' !*$�+ � $,� * �� �-� ��,�#��� +��� ��� �� �-� I� ��,�$�� �! �*!#�* *!++�*� �-�� �-� ������ )$��*� +���* � � $�7�#7�� $� �-� �*$*����� �*���*� �+�$�*�� �3� !*� ���-�+��* $� ��� �#���*�

����� �� �����

. ��� ������� �

�- �� #$��* �� -�4��#�$� ��� �#2 ������ ;�' 3� � !*�� $� �-�+��� �4� �**$�� *�!�(� ;$��* ��>&.5� ��� ��>115��� ( �-� +���* .��! ��� .�+!� �*����$7�#(� �-�� +$7� �*$*����� �� �-� � �3� !*� ���-�+�� ��� ���.0 ������.�� �*����$7�#(� �-� ���* ���.0 ��� ���.� � ��$9� ���$�#* !*�� �� �$*�$�+!$*- �-� +���* .��! ��� .�+!��-� �!#�$7� �!��� $* *!*����$"#� �� "��- ���*� �-�*���#$�+* 3� � + �3� $� � + �3�- ��"$��� �� ���� �! $�+�� �B - ��(#$+-� �� $�� ��� �0�� �� � 1 - �� ) �� $����-� $���!#��$�� ��� �7�#!��$�� �� !*� $�����$�� 3�*"�*�� �� � �7$�!* ,��-��* @**A� ���5��(*5�#� *���#$�+*3� � �-�##��+�� 3$�- � �3� !*� $*�#���* ���.� ������.0 �* 3�## �* �-� �� $� �%��M ,$�� �# �$# KK8�(�#LL$� �$*�$##�� 3��� ' �-�� 3� !*�� �� � ��� � �-� ���-�+��*�� � *�#!�$��* �%�%� + �,D�% ,# �� #$+-� ,$�� �# �$#'����� $���!#��$�� �-�( 3� � �#���� $� � ��3 �-�,"� ���0�� �� �. -� �-� #��� �$**!�* �� ,��� �4� ���$�� 3� ���##����� $��� #$N!$� �$� �+�� �� %� 2� 1� ��� �. -� ���

�-�� 2� 1� ��� �� ��(* ���� � �$6�$�# $���!#��$�� 3$�- � 3$�-�!� !*� ���-�+��*� �-$* �4�� $,��� 3�* ���� �3$���:#���* �-�� 3� � �� ��(* �#� 3� � �#*� $���!#���� *$��� ���-$* *��+� ,��! � �#��� �*$*����� -�* !*!�##( "�����7�#����� ��-� �$**!�* $��#!�$�+ ���*� *��,*� #��7�*�-���*� ��� ,��! � *���* 3� � �#*� ��##����� � �, �-��� ,�# + �3$�+ ��� �#���* �� ���#(=� �-� *���$�#�4� �**$�� �� ������ )$��*� +���*�

�5# ��� &5# �� ����

����# ��� 3�* $*�#���� ��� �! $6�� "( !*$�+ �� ����*�#��$�� �$� �8��- $�+� ����-�$,'� �-� ,���3�* $*�#���� �$ ���#( � �, �-� ����# ��� ���!#��$��3$�- �-� ,�+���$� "���* �O�$�( ,��-�� �8��- $�+� ����-�$,'�

5�� ��� 4 � ��� ����

�� �-� � "#�� ���#(*$* 3�* �� �� ,�� 3$�- � �� �-5� ���I5�#( �$� ��,"$��� P�����'� �% �+ �� ����# ����� ���- *�,�#� 3� � !*�� �� �#��� ��-� �*$* $� � ���M�����! �� �+� �*� +�# ���� �$�+ �� �-� ,��!����! � L*,��-�� ��,"$��� P�����'� � ��� � �+,��� �� B>0 "���; )���� � �7$�!*#( �#���� � �, �-� �4� ���##!#� ��,�$� �� �� ��� ������ )$��*� +��� $� ��� �!#�$7� KK�+#�LL @0A 3�* #�"�#�� 3$�- �-� �$+5#�"�#$�+ ���������$�� )$� ����-� �$�+��*�$�*' ��� !*�� �* �-�������$�� � �"� �� +��� �4� �**$��� ��*-$�+ *� $�+���(3�* ������ %��M���� �0 ,$� �� ��, ��,�� ��! � ������� �-�� %������� %��M ���� �0 ,$� �� 1B�� �3$���

&������ ������������ ��� ����

�3� ��$ * �� �#$+��!�#���$��* 3� � ��*$+��� ��� !*�� �*� $,� * $� �-� �,�#$6���$�� ��� �#��$�+ �� �-� ����� �, �-� � ��*� $��* �� ��� ������ )$��*� +���* #,�-*���� %�-*�� �-� �� 3� � � $,� �� �-� #,�-*� +������*$*�* �� � �0,� �� *�N!���� ���������������5���������� �#,�-*�J�' #������ �� �-� � ��*#��$��*�� � *$�� �� �4�� � ��� �-� �7� *� � $,� �� �-� *�,�#��+�- ��������������������������#,�-*���' #������ �� �-� � ��*#��$�� *��� *$�� �� �4��2� �-� �� 3� � � $,� �� �-� %�-*� +��� ���*$*�* �� �-��0,� *�N!���� ����������������������5��� �%�-*�J�' ��� �-� �7� *� � $,� �� *�N!����������������������������� �%�-*���'�����-� ��$ �� � $,� * ��#( ��7� $�+ �-� �4� ���##!#� ��,�$� �� �-� #,�- +��� *�N!���� �; )���' �* ��� ���� �7$�!*#( @0A 3�* �#*� !*�� �� ��5:�� ���#(*$* �� �-�#,�- +��� �4� �**$��� �-� 6 *� *� ��� �� ���� 3�**(��-�*$=�� !*$�+ � J$ *� �� ��� ���� �(��-�*$*�$� ��8� J� ,����*' �-�� �����$�* �� �5��7� *�� ��*� $���*� �0 PD!#'� ��5:�� 3�* ����!���� !*$�+�-� �$��� ��� �!"� ��5:�� �$� ����-� ���#$��

�B� �2 �2 � ��� �� �#�

��$����'� �-� ����$�� ,$4�! �* 3� � *�� !� $� �3� ,�*�� ,$4�* ���� �$�+ �� ���-� ���-�$��# $�*� !��$��� 3-� ���*�� �$4 � 3�* ���: ��% ,� ���-' � !#� ���*�$�-$"$�� ��% PD!#' � !#� 6 *� *� ��� ���� ��,�#����0% �+D!#' � !#� �� 3� � ��� �7� *� � $,� * ��% �,�#D!#' %�&0 !# ���-� �:� 3��� �B�0 !#< ��*�� �$4 � 3�*0I ��5:�� "!9� ������$�* ��0 ,� �+�#�' �% !#���=(,� ,$4 ���� ��� 4���� $+- J$��#$�( :���(*��,' � !#� �:� 3��� �. !#� �0 !# �� ���- ��*�� �$4 3�* ����� �� � %��0 ,# �-$�53�##�� :�� �!"� ���,$4��� �* �� �4�� $,����# ���� �#� � *���$6� ��$ ��� $,� * �� �B� ��� �4� �**$�� ��� � ��,���$�� � $,� �2 F� ��$�' � �, ��,,� �$�# ��,"$��� P�����'3�* !*�� �� ,��$�� �-� �#��$7� �N!�#$�( �� ,�����,�#��� �,�!��* !*�� � �, ���- *�,�#�� �-� ����$��*�� ��5:�� � �6#� 3�* *�� ��� "( -���$�+ �� >.�� �� 0 ,$� ��##�3�� "( 2% �(�#�* �� ����$�� �>.�� �� �0 *�0%�� �� � ,$� ��� 1B�� �� 2 ,$�' ��� "( �4���*$�� ��&.�� �� �% ,$� ��� �-�� ,�$���$��� �� .�� !��$# !*����7� �# �$9� ��� �!,"� * �� :�� �(�#�* ��%� ��� �0�'3$�- �-� *�,� ����$�� ����$�$�� 3� � �#*� !*�� �� ��*� �-���5:�� �O�$���( �� "��- #,�-*� ��� %�-*� +���*� �-��,�#$6�� ���� � ��!��* 3� � *!"C����� �� �#��� ��-� 5�*$* $� � ���M �+� �*� +�#�

������ �5# �4���� ��������� ��� ��6����� ��������

� -�4��#�$� ��� �#���� ������ ;' +���,$� ��� #$" � (3�* ���*� !���� $� � #�,"�� 7���� � �, � !*� �*$*������!#�$7� �+#� ��� 3�* )$��#( � �7$��� "( � ����#�:-$##$�* �P�$7� *$�( �� �$���*���� P�����'� �!"5+���,$���� #$" � ( �,�#$6���$��� *� ���$�+ ��� *�N!���$�+3� � ����!���� "( !*$�+ �-� *����� � � ����! �* @/0A��-� *�,� ��� � �"� �* �-�� !*�� �� �� �-� � "#�����#(*$* 3�* !*�� �� *� ��� ��� *�#��� �� ��*$�$7� +���,$���� �#���*� �-� *�#����� +���,$� ��� �#���* 3� �*!"�#���� $��� �-� �P��B 7���� $� �-� �,� � �#��$�+*$��� �-� *!"�#���� +���,$� ��� � �+,���* 3� �*�N!����� � �, "��- �$ ���$��* "( !*$�+ �-� *����� ��$���4(�!�#���$�� �� ,$���$�� ,��-��� �-� +���,$���� *�N!����* 3� � ��������� !*$�+ ���:#��������-���FDD+���,���"*���!��)D-�"$�D' ��� ������� �-���FDD+���*�,$����!D�������-�,#'� : ��$���� �,$�� ��$�*�N!���� ��� � ���$� ��,�$�* 3� � ��7�#���� !*$�+ �-�*���3� � ;�*� +��� ��������� ���� P�����' �������� ��� ����� ��4� P�����'�

�� ���

7( ������� -����� ����� ����� ���3�3 ���

�� ��� +���,$� ��� �#��� �; )���� �����$�+ �-��4� ���##!#� ��,�$� �� � ������ )$��*� +��� � �, �-�-�4��#�$� ��� �!#�$7� �+#�� 3�* !*�� �* � � �"� �� *� ���

�-� #�,"�� +���,$� ��� #$" � (� ��7� �# ��*$�$7�#�,"�� �#���* 3� � $*�#���� ��� �-� +���,$� ����#��� �:�% � ��Q%B21&>' 3-$�- 3�* #� +� �-�� �� )"$� #��+�-� 3�* !*�� $� �-$* *�!�(� � 8;���� *�� �-$��$����� �-�� $� �����$��� �3� ���� ���$�+ � �,�* ������*$�� *� ���* ��� � $����� $� �7� *� �$ ���$��*�J$+� �#'� �-�*� �3� ��J* ������� �3� ������ )$��*�+���* � ,�-*� ��� %�-*� �-�� 3� � .&��M *$,$#� �� �-�3-�#� #��+�- �� 3-��� ��*,$� �#��� ��*�. �-�� ������*�3� ������ )$��*� +���* 7�-*� ��� ,�-*� �-�� � � �#*�� $����� $� �-� �7� *� �$ ���$�� @*�A� �-� ��� #,�-*� ���%�-*� +���* R��)�� � ��,,�� � �,��� �+$�� ��� 3� �� ��*� $"�� $� �7� *� �$ ���$��*� �-� � 3� � �- �� *��* ������ "�4�* #������ $� �-$* ��,,�� � �,��� �+$������ 3�* $� �-� ,$��#�� �-� ��-� �3� 3� � ��� �-� *�� ������* �� #,�-*� ��� %�-*� ���$�+ �+$��*� 4��D$�� ��� ��$��$�� ��� �$ ��� *�N!���� ��,�� $*�� 3$�- 3-��� ������ )$��*� +���* �7��#�� 2 �4��* ��� � $�� ��* $��-� #,�-*� +��� ��� . �4��* ���� *,�##' ��� 2 $�� ��* $��-� %�-*� +��� �J$+� �#'� �-� ���!��� #,�-*� � ���$����*$*��� �� 12> �,$�� ��$�* �-�� *-� �� &2��M-�,�#�+( 3$�- � �� �*����$�+ 3-��� ;���. � ���$����,�� ��$7� *�!�( $��$����� �-�� �-� ��� �;���%� ���$� �����$�* � *$+��# ����$�� �� �-� �,$�� �� ,$��#���##�3�� *�N!���$�##( "( �� �4� ���##!#� ��,�$�� �� ��*,�," ��� ��,�$�� � �-� +�� ��,�$� ��� ��(���#�*,$� )$��*� ��,�$� �� �-� �� "�4(# �� ,$��#�J$+� ��'� �-� ����% � ���$� 3�* &�� �,$�� ��$�*#��+� *-� �� 1%��M -�,�#�+( 3$�- � �� �*����$�+3-��� ����. � ���$� ��� ��#( ���*$*��� �� �� �4� �5��##!#� ��,�$�� � � ��*,�," ��� ��,�$� ��� ��(���#�*,$� )$��*� ��,�$�� �� *$+��# ����$�� *�N!����3�* $����$6�� 3$�-$� �-$* � ���$� �J$+� ��'�

%�� ������� -����� ����� ��� �����8�� � �9������� �� �����������

�3� ��$ * �� � $,� *� �; )�%J� ��� �; )�%���� )�%J�� ��� � )�%��� 3� � !*�� $� �-� ��5:�����#(*$* �� ������ )$��*� +���* #,�-*� ��� %�-*�� �*����$7�#(� $� �$9� ��� �$**!�* �� ��� �#���*� �* *-�3� $��J$+� �'� "��- #,�-*� ��� %�-*� +���* 3� � *���$6��##(�4� �**�� ��#( $� #��� �$**!�* �� ��� �#���* �* �������� 3$�-�! *����� � ��5:�� ����$�$�� �2% �(�#�* �� ����$��'��-� � 3� � �3� ��5:�� � �+,���* �� #,�-*� � ��5*� $��*� � #��+� � ��*� $�� #,�-*�5; �� ��2 )" ��� �*-� �� � ��*� $�� #,�-*�5� �� %�1 )"� 3-� ��* �-� � 3�*��#( ��� ��5:�� � �+,��� �� �-� %�-*� � ��*� $�� ����B )"� �-� �#��$7� �,�!��* �� �-� #��+� � ��*� $��#,�-*�5; 3�* -$+-� �-�� �-�� �� �-� *-� �� � ��*� $��#,�-*�5�� ��$�-� #,�-*� �� %�-*� 3� � �4� �**�� $� ���� *��,� -��� ��� ,��! � *���*�

���8�� �9������� �( ������� -����� ����� �� �9�� �� �� :�7��� *��$7� ;�' �B2

%�� ������� -����� ����� ��� ���� ���� �������� � �� �������� ���� ��� ����

����!#��$�� �� �%5��(*5�#� ��� �#���* 3$�- � ��,���$"#�� �� $���,���$"#� � �3� !*� ���-�+��� ��� ���.� � ���.0� *-�3�� � �$9� ���$�# �-��+� �� �4� �**$�� ��#,�-*� ��� %�-*� +���* $� #$��* .��! ��� .�+!� �� �-� �"#�� �J$+� 2#' !*$�+ �-� I� ��,�$� �* � �"� *-�3���-�� #,�-*� 3�* �4� �**�� $� #��� �$**!�* �� �## �-�*� #$��*��*��� �� �-� *���#$�+ *��+� � $� �� $���!#��$�� 3$�- !*���-$* �*!#� 3�* �#*� �"��$��� "( ��5:�� !*$�+ � $,� *�� �-� ��,�#��� +��� #,�-*� ��� %�-*� �J$+� 2�'��3�7� � �-� �4� �**$�� ����� � �� �-�*� +���* 3�*�#�� �� !��� $���!#��$�� �� �#���* 3$�- 7$ !#��� !*����-�+��*� ���� $���!#��$�� 3$�- �-� !*� ��� ���.0�-� #,�-*� +��� 3�* �! ��� �9 $� *!*����$"#� �!� ��� ���*!*����$"#� :�1B �#���*� "!� �,�$��� !��-��+�� $� �-� �*$*���� :�.B �#���*� �-�� �-�##��+�� "( �-� ��-� !*�

���� ���.�� �-� #,�-�% +��� 3�* �! ��� �9 $� �-�*!*����$"#� �!� �� ��� :�.B �#���*� "!� �,�$���!��-��+�� $� �-� �*$*���� :�1B �#���* �J$+� 2#'� �-��3� � ��*� $��*� �; )�%5; ��� �; )�%5�� 3� � �#*� "��-*!�� �**�� $� �*���*� �� $���!#��$�� 3$�- �-� 7$ !#��� !*� ���-�+�� �J$+� 2�' �* *-�3� "( �-� �� �-� � !*$�+�-� I� ��,�$�� ��5:�� ���#(*$* �� #,�-*� +����4� �**$�� !*$�+ � $,� * C!*� ��7� $�+ �-� I� ��,�$��; )��� *�N!����' �� �-� ��� #,�-*� +��� �7��#�� �-�*�,� �4� �**$�� ����� � �* �-�� "( !*$�+ �-� � $,� *��7� $�+ �-� $����� ���$�+ �+$�� �� #,�-*� +��� �������� *-�3�'� �!�� �**$�� �� �-� � +���* 3�* �"*� 7�� ��2 - ����� ��� *-�3�' ��� #�*��� !��$# ���7� ( ���4� �**$�� � �, ��( � �� 2�

4� �**$�� �� �-� � +���* 3�* ��� *!�� �**�� 3-��$���!#���� 3$�- ��#( �-� %��M KK8�(�#LL ,$�� �# �$#*�#!�$�� �� 3�* *!�� �**$�� �"*� 7�� 3-�� ��5��(5�#�

J��� �� ��' �$�+ �, �� �-� ,�#��!#� � +��$=��$�� �� #,�-*� ��� %�-*� +���* $� ��� �#��� �:�% � ��Q%B21&>'� �-� �4��* � �$��$����� �* � �- �!+- . $� *�#$� "�4�*� �-� 3-$�� "�4�* �� �*��� �-� $�� ��*� ��� $* �-� *�� � ����� �� ���- +���� �- �� ����"�4�* � � �� �*����� "( *�#$� �7�#*� �-� � ��*� $��$���# �$ ���$��* �� "��- #,�-*� ��� %�-*� +���* � � $��$����� "( � �3*��8' �,$�� ��$� *�N!���� �� �;���% ��� ����% � ���$�*� �-� � ��$���� ��,�$�* �� "��- �;�� ��� ��� � ���$�* � � #�"�#�� �

�B. �2 �2 � ��� �� �#�

�#���* 3� � $���!#���� 3$�- !*� *�� �*� �-$* 3�*� �*!,�"#( "���!*� ��5��(5�#� �#���* -�� ��7�#����,��! � �#��� �*$*����� ��� !*� �!*�!#�* 3� � ��� �� ,���

�� �� ���

P*$�+ � *-� � ��� � �+,��� �����$�$�+ �-� �4� ���##!#� ��,�$� �� �-� ��� ������ )$��*� +��� �* � � �"�� 3�-�7� $*�#���� � #� +� ��� �#��� �:�% � � �, �� ���+���,$� ��� #$" � (� �:�% � �����$�* �3� �$*�$���

������ )$��*� +���* %�-*� ��� #,�-*� �-�� � � #������$� -���5��5-��� ��*-$��� �-$* ����� � �� � +��$=��$�� ���-� �3� ������ )$��*� +���* ,�*� �*�,"#�* �-� ,�-*���� 7�-*� +���* ��!�� $� �-� 3-��� ��*,$� �#��� ��*�.�3-$�- $* 7� ( *$,$#� �� � ��-� 3-��� ��*,$�* ��*�> �����*22 @*�A� �-� ��,,�� � �,��� �+$�� *-� �� "("��- #,�-*� ��� %�-*� +���* �����$�* �- �� *��* �� ����"�4�*� �3� �� �-�, � � #������ ��� �-�$ *�� � �����* ������ $* $� �-� ,$��#�� �� $��$����* �-�� �-$* � �,��� ��!#� "� � "$5�$ ���$���# � �,��� � �-� �+!#��$�� ��� ��*� $��$�� �� �3� ��C����� +���* � $����� -��� �� -���

J��� �� ����$�# ���#(*$* �� ��' #,�-*� ��� �8' %�-*� +��� �4� �**$�� $� �$9� ��� �$**!�* �� ��� �#���* "( ��5:��� J$7� ,�C� �$**!�*$��#!�$�+ ���* ��'� *��,* ��'� #��7�* �;'� -���* �' ��� ,��! � *���* ���' 3� � ��##����� � �, �3� ��� �!#�$7� * �!��� ��� :�1B��-� � $,� * !*�� �� �-$* ���#(*$* ��7� �-� ���$ � ���$�+ �+$��* �� #,�-*� ��� %�-*� +���* �*����$7�#(� �-� ,�#��!#� *$=�* ���

��,�* �� ���- � ��*� $�� � � $��$����� �� �-� #��� ��� $+-� *$��* �*����$7�#(� �B� ��� 3�* !*�� �* � ��,,�� *����� � �

J��� 2� �� �-� � "#�� ���#(*$* �� #,�- +��� �4� �**$�� $� �- �� ��� �!#�$7� * ��!���� ��>&.5� �.��!'� ��>115��.�+!'' �� % -� �. -���� &� - ���� $���!#��$�� 3$�- �-� !*� ���-�+��� ��' :#���* $���!#���� 3$�- � �3� !*� ���.0< �8' :#���* $���!#���� 3$�- � �3� !*� ���.�� �B� ��� �B� ���* �7��#�� "( P� #$+-� $� �-� +�# 3� � *-�3� �� �-� "����, �� ����# �* ����# ��� *�,�#� #���$�+

*����� �*� �-� �*�$,���� ,�#��!#� *$=�* �� ���- #,�- � ��*� $�� 3� � *-�3� �� �-� #��� �

���8�� �9������� �( ������� -����� ����� �� �9�� �� �� :�7��� *��$7� ;�' �B0

"( � �!�# � �,��� 3�* $����$6�� $� �-$�)�� @*!A� -!,��@�!A� (��*� @"!A� ��� $� "���� $� @��A� �-� ��� #,�-*�+��� �����$�* 2 �4��* ��� � $�� ��* ��� �-� %�-*� +��� .�4��* ��� 2 $�� ��*� 8��- �;���% ��� ����% � �� ��*,�," ��� � ���$�* *!++�*�$�+ �-�( � � *$+��#$�+,�#��!#�* � ��*,$��$$�+ *$+��#* �� �** �-� ��## ,�," �����-� I� ��,�$� 3�!#� "� � *$+��# ������ ��� �-��(���#�*,$� ��,�$� ,�( �-�*�-� (#��� ��-� ��3�5*� ��, ,�#��!#�*�

�! �*!#�* ��*� $"� �-��+�* $� � ��*� $�� #�7�#* �� #,�-��� %�- $� ��,���$"#� ����$��* "��3��� � �3� !*� ���*��� ���� �-� �*!#�* $��$���� �-�� �-� +����*' � ��4� �**�� ���*�$�!�$7�#( $� �%5��(5�#� *���#$�+ #��� �$**!��� �����-$* �*!#� $* ���*$*���� 3$�- �-� ���*�$�!�$7��4� �**$�� �� ������ )$��*� +����*' $� �-� �#�*,�,�," ��� �� #��� �$**!� �� 3-��� @*+A� �� $��� ���$��*3$�- ��,���$"#� ���* �� !*�� �-� �4� �**$�� $* *(*��,$5��##( �! ��� �9 � *� ��+#( *!�� �**�� 3$�-$� 2 - ��� �� !� �� ��� �4$,���#( 2 ��(*� �!*� �!*�!#�* 3� � �� ,�� $���,���$"#� ��,"$���$��* �* � �*!#� �� $���!#��$�� "!� �-��7( $�����$�� �*!#�$�+ � �, *������ ( $�����$��* 3�*��� �"*� 7�� ��� �-$* ,�( �4�#�$� �-� ���7� ( �� +����4� �**$�� ���� 2 ��(*� �� ���$�$��� �-� ���7� ( ���4� �**$�� ��!#� "� �#���� �� �-� ��7�#��,��� �� ,��! ��#��� �*$*������ �-� $���!#��$�� �� ��5��(5�#� �#���* �$���� �*!#� $� �-� *!�� �**$�� �� �4� �**$�� �� #,�-*� ���%�-*� � !*� ��7�#��,����

�-� #,�- ��� %�- +���* �� ��� � � ��� �-� � � ������ '+���* �-�� ���+�$=� ��� *���$6�$�(� �� �-$* *�!�(��-� ������ )$��*� +���*� #,�- ��� %�- � � �! ��� �9"( �3� ���*� ���.� ��� ���.0� �� .2 ������� ���.� $*7$ !#��� �+�$�*� �-� �*$*����� +��� .�+! �-�� ,��* �� �#��!* ��� �-� #,�-*� ������ )$��*� #��!* �� #$�)�+�+ �!� ��./��� ����,"$���$�� 3�* �"*� 7�� "��3����-� .�+! ��� �-� #,�-*� #��!* @0A� ������#( .��! �-��+$7�* �*$*����� �� ���.0 $* ��� #$�)�� �� .�+! � �� ��()��3� #,�-*� � %�-*� #��!*� (�� �-� � 7$ !#��� ���*

*��, �� *!�� �** �-� *�,� +���*� �-� ��� �� �-� � ���*���!���$�� �� �-� ������ )$��*� +���* $� !*� �*$*����������� "� �* � ������ �5+��� �-�� ���+�$=�* #��� ���$�* �� *���$6� ���* �� � �3� !*�� �-$* $* ���*$*����3$�- �7$����� �-�� �� �- �,�*�,� �� �� 3-��� � #�3� �N!���( �� ���,"$���$�� $* ��!�� "��3��� ,�-*� ����-� !*� �*$*����� #��!* ,�*� @*� � �/A�

� �#���L* �*���*� �� ���-�+�� �����) $�7�#7�* �-����$7��$�� �� 7� $�!* �����*� �*���*� ���-3�(* ��� �-����$7��$�� �� *�7� �# ��:� ��*����* @"/A� �-� *!�� �*5*$�� �� +���* $�7�#7�� $� �$*��*� �*$*����� $* ��� ��� ,�##( ��� ��� �-���,���� "!� *!�� �**$�+ �-�*� ������ )$��*� +���*� #,�-*� ��� %�-*�� ,�( � �7��� �-��4� �**$�� �� 7� $�!* �����*� �*���*� ,��-��$*,*� ������ @"0A ��� ��� �-�� 1 +��� � ��*� $��* 3� � � ��� ��5�$�##( $��!��� "( $���,���$"#� $*�#���* �� ��� *��, !*� "(�.E2% - ���� $���!#��$��� �-$* � ��!��$�� �� �����*�+��� � ��*� $��* � ������ �-� �� ,��$�� �� -�!*�� $�#,��-� ��##* ��� -(�� *��*$�$7� ��## ����-� �-� 8�* +����� R�4 $* �#*� � +��� �-�� $* !� �+!#���� $� �*���*� �� ���,���$"#� !*� $*�#��� @"A ��� -�,�#�+!�* � � ��!�� $�,�$=�� 3-���� "� #�(� ���� � ��� ��� �� "� � ��5�( �#$��505�� "�4(#�*� ��-(� �+���*� �-�� $* $�7�#7�� $� �-�����"�#$*, �� � �#$�� �� +#!��,���'� ��-� *�!�$�* ���$*��*� �*$*����� -�7� ���!*�� �� �-� �-� ���� $=��$�� ��*(*��,* $� 3-$�- +���* *!�- �* �-� �&) ������ )$��*�+���* $� � �"$���*$* @*A � � $��!���� �� �-� ��-� -�����-� ,�$=� &�*3� +��� $* �� �8�5;�� �#�** �� � +����-�� *-�3* �� �-��+� $� � ��*� $�� #�7�# 3$�- $���!#��$���� 7$ !#��� � �7$ !#��� !*� ���* @*"A ��� �-� "� #�( &��*+���� 3-$�- $* � ��*� $"�� �� � 7� ( #�3 #�7�#� $* � +���3$�- �. �4��* ���$�+ �� � )$��*� ��,�$�* ��� ��**�**$�+-�,�#�+( �� �5 ������ )$��*�* @�A� �-� �!���$�� �� �-�#,�- ��� %�- ����� $� ��� $* !�)��3� "!� $� ,�( "� �-�� �7$ !#��� ��� �� !*� $* �"#� �� *!�� �** ������ )$��*�+���* �-�� � � $,�� ���� $� �-� �*$*����� *$+��#� ��*�!��$�� ���-3�( ��� $� �-� �#���* �"$#$�( �� � ��!��

J��� .� ��5:�� ���#(*$* �� �-� �4� �**$�� �� #,�-*� ��� %�-*� +���* $� #��� �$**!�* �� �3� ��� �!#�$7� * �!��� ��� ��>115� �.�+!'�#���* ���� % ���' ��� �. - �� $���!#��$�� 3$�- !*� ���-�+�� ���.�� �-� ,�#��!#� *$=�* ��� ��,�* �� ���- � ��*� $��* 3� �

$��$����� �� �-� #��� ��� $+-� *$��* �*����$7�#(� �B� ��� 3�* !*�� �* � *�,�#� #���$�+ *����� � *-�3� �� �-� "����,�

�B1 �2 �2 � ��� �� �#�

� �����*� �*���*�� ��� ,���# �� �4�#�$� �-� ���$�� �� &+���* *!++�*�* �-�� �-�( ������ �-� 7$ !#���� �� +�� $��#���* � �, �-� ���$�� �� �-� �!�+�# #�� � ���$�* @/"A� ���-$* *���� $�� #,�-*� ��� %�-*� ,�( "� �-� � $,� ( �� *������ (' �� +�� �� #�� � ���$�* ��� �-�( � � *!�� �**��$� 7$ !#��� �!�+�#5-�*� ��,"$���$��*�

�4��#�$� ��� �#���� ������ ;�' �����$�* �- �� *��* ���- �,�*�,�* �� �� ��� � @/� � ��A� �� $����$6�� �� #��*�>E�� ���$�* �� #,�-*� ������ )$��*� +���*� -�7�,����� ��! #��$ �� ������ )$��*� +���* $� �-�-�4��#�$� ��� +���,� @0A ��� -�7� *-�3� ,� � �-����� ���( �� � #��!* @0 � *�A� � �-�#�+!�* �� ,�-*� $� 3-���� � ��!�� �� �- �,�*�,� ��� �8� ��� �� ����� �#�+!�* �� 2�� 28� ��� 2� @*�� *�A� �� $* ��� )��3�$� �## ���$�* �� �-�*� ������ )$��*� +��� ��,$#$�* � ��!���$���# $� �*���*� �� !*� ���-�+��* $� ���* � $� �##�!���$���# ���$�* � � *!�� �**�� "( � 7$ !#��� ��� �� !*��: $,� * � �, �-� �; )��� I� 3$## �,�#$�( ,�,"� * ���-$* +��� ��,$#( � �, "��- �D�5 ��� �5+���,�* ��-�4��#�$� ��� @*�A $� � �** � �, #$�)�+� + �!�* ��./�����0� ��� ��1 ��� $� ��!�-� �* 3$## �#*� -(" $�$=� ��� �+,���* �-�� ,�� �� �-� �"�7� #$�)�+� + �!�* ��� �#*��� ���2 ��� �� !�,����� � �+,���* @0A� �-� �� �-� �*!*$�+ �-$* � �"� 3�!#� *!++�*� �-�� �� -��* �## �!���$���#+���* �� �-$* ��,$#( �� #$�)�+� + �!�* ��./��� 0� ��� 1� � *!�� �**�� ��� ��**$"#( �#*� �#���� +���* �� ���2��� ��-� -�,���#�+�!* #$�)�+� + �!�*� : $,� * �� �-��!## #,�-*� ��� %�-*� +��� ��6��� $� �-$* *�!�( ,�( "�*���$6� �� � �� �$�!#� #,�- +��� "!� �-$* $* ��� (��)��3� ��� �N!$ �* �! �-� *�!�(� �#��$�+ ��� �-� ��5�� $=��$�� �� ��-� +���,$� ��� ���� +���* �� #,�-*���� %�-*� $* $� � �+ �** ��� 3$## ��� �� � �!##� !��� *����$�+ �� �-�$ �#� $� �-� �#���5 !*� ���-�+��$��� ���$�� $� ����

�� �-$* *�!�(� 3� ��!�� �-�� #,�-*� ��� %�-*� 3� �"��- *���$6��##( �4� �**�� $� #��� �$**!�* �� ��� �#���*� ���!� �� �#���*� "��- #,�-*� ��� %�-*� +��� � ��*� $��*3� � *!�� �**�� "( "��- 7$ !#��� ���* �� !*� "!� $� #$��*.��! ��� .�+!� �-� +���* 3� � *!�� �**�� ��#( "( �-�7$ !#��� ��� �� !*�� �-� *!�� �**$�� �� ��� ������ )$��*� +���* $� �*���*� �� 7$ !#��� !*� ���-�+�� �����)$* 6 *� ��� ��� $� �-$* ���� �

�-� �!�-� * � �*��� �! �-��)* �� S!�)� ��� ��,���(�� �-�$ 6����$�# *!��� � �� �-$* �*�� �- � �C����

���������

�� ��� �� ��� �� �������� �� ����� ��� � �� � ������!�� � �� "��� �� ����#� $�� % ��� �� �%%����: )$��*� *$+��#$�+ ��*���� $� � �"$���*$* $�����$,,!�$�(� 5����� &�'F >&&E>B2�

�� �(�))� ��� ��#���� �*� ���� � +�� � �, ��������� ��� -�� ��� ��(�� ��� �%%�� � �#��� +���!�5 �+!#���� �� !*� $�����$�� *$��*� . ��� . ��� �� �./F�1>E�B%�

2� "��� �$� *���� "0� 1 #��� 1� "���� *�� %� ��!��� ����!� �� ����, �� %�������2 "�� �>>.� &.�" #��4������ � � ����F � #�!�$��5 $�- ����� �#�** �� �#����$*��*� �*$*����� +���*� ������� .�'F �B01E�B1%�

.� "��� 1�� ���� ��� �>>1� :#��� � ��*,�," ��� ������ *F ��3 �$���* $� �-� *$+��#$�+ �!==#�� 7;�� .�F&%E&2�

0� "���,,��� �� ������� 0� *�!�� 1� *��� �� +� $�� �� �� 1��� �� %��))����� "� �%%�� �-� "� #�( *��, !*�5 �*$*����� +��� ��+� $* � ��7�# �$*��*�5 �*$*����� +���3$�- -�,�#�+( �� ������ )$��*�*� .5#� //F >2�BE>222�

1� "�� ��� ���� ��� �(3�� ��� ��� �� �>>.� ��*� $��$��� �+,��� #��+�- ��#(,� �-$*, #$�)�� �� +���* �� �*$*����� �� � �3� !*� �.������� ������' $� ��� 5$*�+��$�#$��* �� -�4��#�$� ��� �#���� ������'� ����� 45F B�2EB2��

&� "�� ��� ���� ��� �>>1� � �3� !*� �*$*����� #��$ ��#$�)�+� + �!�* . ��� �2 �� �!#�$7���� ���� <2 =����2 65F.�&E.2��

B� "�� ��� ���� ��� �>>B� $+-5 �*�#!�$�� ,���$�+��C����� �� �-� :�&� � �3�5 !*� �*$*����� #��!* $�-�4��#�$� ���� � ��2 �����2 &F �2E���

>� � ��, 1�� ��������, *�� ������ 0� ��, � ��� +� %��(#��� �� ��-��( �� $�!� �� ���� %�� �%%�������$� ��� �-(*$��# ,���$�+ �� �� ; )�%5#$)� ������ )$��*� +��� $� -�4��#�$� ��� �#���� ������ ;�'� ����� &'F�%%E�%>�

�%� � ��, 1�� �������, *�� 1����� �� ��-��( �$�!� �� ���� %1� �%%2� �*�#��$�� ��� $����$6���$���� � $�$���� �- �,�*�,� � ������ 5#$)� )$��*� +���*�; )�%' � �, �$�#�$�� ��� ��#�$�� ��� -�4��#�$� *���$�* ���-� +��!*� #���� ����� &�F $� � �**�

��� � ��, �� +���� 0*� "���� �1� +�!�� 1-� �>>.������$6���$�� �� �-� *��, !*� �*$*����� +��� .�0 ��� $�*�**��$��$�� 3$�- � �3� !*� �*$*����� ��� ����*�� ,� ���$�* $� KK�!,���LL ���� ����� 45F ..%E..&�

��� ����� 0� 1��� �� �(�))� �� %�� 7� -�� �� +�#��� %���(�� �� �>>>� ��#��!#� �-� ���� $=��$�� �� �-�,�$=� ���5� !*� �*$*����� -��#��(�� ��� $�* ,!����*�7 � . ��� �� ��F �210E�2&1�

�2� ���(� ��� ����� �� ������� �� +������ *�"��� *���� ��� +�2�8�� �� *� ����� �1�� �>>&��-� ���� $=��$�� �� �-� ��,��� �3� +��� �� �*$*����� ���#���*�� $!, �!#7!, $����$6�* *�N!����* �-�� ���� ,$�� ���+�$�$���# *���$6�$�( $� �3� ��� �30� . ��� <2 /F��%>E���.�

�.� $����� �� *��� "� �>>>� $+- +��� ���*$�( $* ���*� 7���� *(����$� #��$ �� *,�## ��� #� +� +���,� + �**�*� .��25�� 2 #���2 ���2 /�F B�10EB�&%�

�0� $����� �� %� � ���(� �� *��� "� �>>&� ��#��!#� �#��$�+ �� � ��3 ������ 5#$)� )$��*� +��� ������� �� �-�; �% �$*��*� �*$*����� #��!* �� 3-���� . ��� <2 ��F .0E0��

�1� $����� �� ���2�� �� *9�#�� �� *��� "� �>>B���#��!#� �-� ���� $=��$�� �� � ��3 �(�� �� ������ 5#$)�)$��*� �( �-' +��� ��,$#( $� 3-���� . ��� � ��2 �� 2 45F>.2E>02�

�&� $����� �� ���,�� �� ����� *� ��� �� *��� "� �%%����#��!#� �7�#!�$�� �� ������ 5#$)� )$��*� +���* $�-�4��#�$� 3-���� ����������� �7�#!�$�� �� � �-�#�+*���� ��#(�#�$�$=��$�� ��� ,��-��$*,* �� #���# �� ��+�5,���* �� �� �#�+�!* #��$� . ��� . ��� 2 �.'F �2%.E�2�2�

�B� ��� �� :��� +� �>>0� ���#(*$* �� �-� �-$�)�� �:��D���� "$5�$ ���$���# � �,��� �� �� ��7� �! $���!�#���$�� *(��-�*$*� <2 �� 2 � ��2 .5;F �.%2E�.�%�

�>� ���� ��� ��!��! �� %���#� -� �� <�! �� ���! ��%���� �� =���� ��� 1�,� ��� �>>0� �� !��! � �� �-�

���8�� �9������� �( ������� -����� ����� �� �9�� �� �� :�7��� *��$7� ;�' �B&

#��4������ &.�* +��� ���"#$�+ �!�# *���$6�$�( �$*��*� �*$*������ ������� .�/F B.2EB.1�

�%� +�!�� 1-� � ��, �� "���� �1� ������ �� �>>%���-� $����� �� �*$*����� �� .������� ������ ������ ���.2 �������� ������ $� ��� ����**$�� �� #���� ����� �� � �,���$�� ����� 44F �>BE�%��

��� +�!�� 1�� �>>>� :#��� � ���$� *� $��D�- ���$�� )$��*�*F�#�**$6���$�� ��� �!���$��*� #��2 &��2 . ��� . ��� 2 . ���� 2 ';F >&E�2��

��� +���� 0*� � ��, �� "���� �1� �>>�� ��� ����*�� ,� ���$�* �**��$���� 3$�- �*$*����� �� *��, !*� �� ���*������ 4'F ��%E��0�

�2� ���� �� >����2 �� "�,�� �� +��� +� �%%�� ��,�#�4$�(�� �** ��#) ��� $���+ ��$�� �� �#��� ��: )$��*� *$+��#$�+�����2 %����� . ���2 �� 2 'F .�0E.�.�

�.� ����� �1�� �>>&� � )$��*� 3$�- )��� �(�*� 5����� 46'F2>&E2>B�

�0� ����� �1�� �%%�� :!��$�+ )��3#��+� �� �#��� �$*��*� �*$*����� +���* �� 3� )� ����2 %����� . ���2 �� 2 &F�B�E�B&�

�1� *����� ��� ��� �� +��! �"� �%%�� � �*� $��$��� �+,��� #��+�- ��#(,� �-$*, "�*�� #$�)�+� ,�� �� ��$�#�$� #���� ���,"$���� $�" �� #$�� ���!#��$��� �����&&F �>�E�%.�

�&� ������� ��� $����,� -�� �(�))� ��� -�� ��� �>>0��-� ,+ +��� �� R�4 !*� �*$*����� $* �#���� �� �-�#��4������ "���� $�# �*$*����� +��� &.�" ��� �-� ��"����7$ �# �*$*����� +��� 5� . ��� �� 5F ��>0E��%1�

�B� ������ �� ����(� �� ��� �� ��� �>>�� �-� P��,�# $* �"$5�$ ���$���# � �,��� �#�,��� �N!$ �� �� �-� �4� �*5*$�� �� "��- �-� �#,+* ��� �#,+" +���* �� �-�����-� �,(��* �#,+ #��!*� ������� �������� ..F �B�E�B>�

�>� ��� *�� "�� �� ��� %��� ��� %2#� ��� �>>B���,�� �# ���!,!#��$�� ����� �* �� �����*� +��� � ��5*� $��* $� �#��$�� �� �*$*���� ����$��* $� ��� $���!#����3$�- .������� ��������� . ��� 2 � 2 . ��� .�� 2 '.F >0E��.�

2%� ��� +�� % ��� �-� �>>�� �����$�* ��� ��-� $�����$� ���� %�� ������� ��� 7�� � �� ��F �� *-�## ���� �##* �� ��*� �,� $��� ���$��( �� �+ ���,( ���� ���� �� ��$���� ���$��( �� �,� $�� ���� ���$*�� ���:�0%>E0&��

2�� ����� �"� "�������� ���� %+� � �����,�� ��$��( �� �� ��� %3��( �� �� �� -�� -1������( %1� �>>2� ���5"�*�� �#��$�+ �� � � ���$�)$��*� +��� ����� $�+ �$*��*� �*$*����� $� ��,���� �������.�.F �.2�E�.21�

2�� 0��� ��� :� �� ��� �� � �, �+� 1�, ��� ���3$�+�-� ����� � �, �-� �����F�5+��� � ��!��* ��� �-�$ $��� ���$��* 3$�- ��-� � ���$�* � �, -�*� ��� ���-�+������� %����� . ��� �� �� &F �BBE�>.�

22� >?1����, �� �%� � ��, �� ��, � ��� $�!� ������ %�� �>>1� ;���#$=��$�� �� *��, !*� �*$*�����+���* ��� �**��$���� ,�#��!#� ,� )� * $� �!#�$7���� ����. ����� �� 6�F &�>E&�&�

2.� ����� �� ����� ��� %2#� @� $���� �0� %� ��!� ���� !�� "��2�� -�� ������ �� 1�� �� 1���� �������� �1�� �>>&� �-� � �"$���*$* ��3�( ,$#��3 �*$*����� +��� &..� *-� �* *$,$#� $�( �� �-� ��## ���$��� #�!)$�5� ������ * 3$�- 5 ��� ,+� . ��� <2 /FB&>EB>.�

20� ������ ��� � ��, �� �����A�� ���( �� ���� %��$�!� �� �>>2� �����$6���$�� �� � ��:� ,� )� �� �-�*��, !*� +��� .�/� 7#� 6'F &%�E&%0�

21� ����(��� @�� +�))�� 1�� ��� �� +��! �"� �%%��� #$�)�+� ,�� �� -�4��#�$� ��� "�*�� �� + �** ���-� ��� �#���* ��� $�* �#��$��*-$� �� ��-� ��� ,��*� �����&&F �.>E�10�

2&� �9 � ( �� �>>�� �-� �- �,�*�,�* �� #����� ��F�- �,�*�,� ��+$��� $�+ $� �#���*F+����$�*� " ���$�+��7�#!�$��� :� � � �!��� :�� �*!�-$(� �� ��*� #*�7$� ��$���� :!"#$*-� * 8���F �-� ���-� #���*� :��..&E.10�

2B� �����( ��� ����� +�� � ��3� ��� �>>.� �����$6���$���� �J;: ,� )� * #$�)�� �� � �3� !*� �*$*����� +���*.�0* ��� .�0" $� ���� ��� ������� 4&F >.%E>..�

2>� %�#���� �� $����� -$� ������ �� �>B>� � ��� ��� ����># ,�4����� ����� � ������ �$�$��� ��#� �� $�+� "� ;�"� ��� ( : �**�

.%� %��,� �� $��2 �� -83��� 1� �>>1� ���#(*$* �� �-�$�(���� � ������ ��� �� $�- (*�"���$�� ������ +���F �*�,"#���� �� �-� $�� ���� �� � � ���5�� "$5�$ ���$���#� �,��� �+$�� ��� -�,�#�+( 3$�- -(� �4�,��� ����5�� *� <2 ������� 2 �56F ���&E��2��

.�� %��, �B� ��, ��� � �� ��� *�� +%� �� �B� +����� ����!��� �� ��, "� : � �C� : � �+� $�A�� �����! �� �>>0� � ������ )$��*�5#$)� � ���$� ������� "(�-� $�� �$*��*� �*$*����� +��� 1�3"*� ������� .5;F�B%.E�B%1�

.�� %������2 "�� ����#� $�� "��� "�� -�� ��� ������1�� �>>0� ��#��!#� +����$�* �� �#��� �$*��*� �*$*������������� .�6F 11�E11&�

.2� %���� 0� $����� �� ������ �� %� ,�� �) -� *��� "��%%%� �!"+���,� �- �,�*�,� 3�#)$�+ $� 3-���F�.0%5)" �-(*$��# ����$+ $� � $�$�!, ,�������!, ;�*���* �-� ; �% �*$*����� #��!* $� -�4��#�$� 3-����� $�$�!, ��*�$7!, ;�'� .��2 5�� 2 #���2 ���2 /5F�2.21E�2..��

..� ��, C� $��!����� �1� : �� �� +����� 1�� �� B������ �"� �>>1� :-(*$��# $��� ���$�� �� �7 :�� ��� �-�:�� )$��*� ��6��* � ���+�$�$�� �7��� $�7�#7�� $� �#����$*��*� �*$*������ ������� .5&F �%1%E�%12�

.0� � ��� +� �>>�� �(��+����$�* �� #����� %�� ������� ������ � ��� ��F �� *-�## �� �� �##* �� ��*� �,� $������$��( �� �+ ���,( ���� ��� � �� ��$���� ���$��( ���,� $�� ���� ���$*��� �$*� � .&2E0%&�

.1� ���� ��� �>>.� �� !��! � ��� �!���$�� �� �-� ������ 5#$)� )$��*�* �� -$+-� �#���*� . ��� � ��2 �� 2 .�F�0>>E�1%>�

.&� � �� � %� 1���� *��� %�� � �� 1� +� �� ���� ��"��� "� �>>.� �-� � ��!�� �� �-� ��"���� ,�*�$� 7$ !* �*$*����� +��� 5F *$,$#� $�( �� ��## ��� �-� $�� #�!)$�5� ������ � �� 56F �%��E���0�

.B� C� � $� "���� ��� 0���� +� � �#��� ������)<� � "�� %����� -� �>>&� �*�#��$�� ����-� ���� $=��$�� �� �-� 5�&" +��� 3-$�- #$�* -��� ��-��� 3$�- �-� -!,�� �&�#* +���� =���� � 2 �����2�F �%0&E�%1��

.>� B� � C� ���� ��� �%%%� �� ���-� �� �J;:5��� �� �5� ��*��*��5"�*�� ,�� �� �$�#�$� �7���� ����� &4F&21E&.>�

0%� B� � C� "�� ��� ���� ��� �>>1� ��,�� ��$7� ,���$�+�� -�,���#�+�!* + �!� � �+$��* ��� +���* �� �*$*������� �"#$+��� "$�� ��-* $� �7���� � ��!,� ��� T�� ,�(*������ 4/F �00E�1.�

�BB �2 �2 � ��� �� �#�