Principios de normalización, estandarización, validación y calibración

Ávila, G., Bermúdez, M., Calvo, C., Des Bouillons,R. & Díaz,C.

Normalización

Actividad que permite definir una guía a seguir sobre cómo debe ser un sistema, producto o servicio, de manera que todas las organizaciones que lo desarrollen sigan el mismo modelo. Con ello se consigue que estos cumplan unos criterios mínimos con los que pueden ser evaluados y comparados para establecer un nivel de calidad determinado.

Normalización

Normas

Aplicación repetitiva

Unificar criterios

Lenguaje común

Organismo autorizado

Normas Tipos

;l

¿Qué es?

Es un documento técnico establecido por consenso:

1) Especificaciones técnicas voluntarias

2) Elaborada con participación de las partes involucradas

3) Resultado de la experiencia y desarrollo tecnológico

Básicas

Terminológicas

Producto

Seguridad Organización

Servicio

Ingeniería

Públicas

Organismos de Normalización

Internacionales Regionales Nacionales

Organismos de Normalización InternacionalAntecedentes

- XX: Comprensión de la importancia de establecer normas - 1926: ISA→ promover el comercio internacional y precedente inmediato

de ISO.

No gubernamental

Federación de Org. Nacionales

1 por país

Normas internacionales

Voluntarias

Desarrollo conjunto y ofrecimiento mundial

Consenso Internacional

-ISO 9001

-ISO 14001

-ISO 22 000

-ISO 13485

- ISO/IEC 17025:2005

-ISO 10012

- “Requisitos generales para la competencia de laboratorios de ensayo y calibracion”.

- Gestión de procesos de mediciónLa Lanorma

La norma dice ¿Qué hay que hacer?

El laboratorio dice ¿Cómo?

- Gestión de calidad

- Gestión Ambiental

- Gestión de Inocuidad de alimentos

- Dispositivos Biomédicos

Calibración

Conjunto de operaciones que establecen, en condiciones especificadas, la relación entre los valores de una magnitud indicados por un instrumento de medida o un sistema de medida, o los valores representados por una medida materializada o por un material de referencia, y los valores correspondientes de esa magnitud realizados por patrones.

Comparación de un estándar de medición, o de un equipo, con estándar o un equipo de mayor exactitud; para detectar y cuantificar imprecisiones y reportarlas o eliminarlas mediante un ajuste.

Resultados Certificado

Conceptos

Patrón

Valor de medición materializado, aparato o sistema de medida con el que se intenta definir, realizar, conservar o reproducir una unidad física o bien uno o varios valores conocidos de una magnitud con el fin de que sirva de comparación a otros elementos de medida

Trazabilidad

Propiedad del resultado de una medición o patrón tal que pueda relacionarse con referencias determinadas (patrones nacionales o internacionales) por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo todas las incertidumbres determinadas.

Metrología 1. 2. 3.

Científica Legal Comercial/ Industrial

- Francia- Investigaciones- Equipo patrón

(masa)- Trazabilidad

- Boston- Labcal - 22 labs

secundarios

Métodos de calibración● Medición directa

● Medición indirecta: Fórmula matemática

● Sustitución: para masa

● Equilibrio: nulo o cero

● Simulación: respuesta de voltaje o resistencia

● Diferencial: volumen de un sólido (* medición directa)

Combinación de ellosCalibrar con la mínima incertidumbre medible posible

Nivel del Laboratorio Nivel de patrones Precio de la calibración$

¿Por qué calibrar?● Cuando se utilizan equipos de medición de manera continua, la exactitud y la precisión varían

gradualmente a causa del desgaste de sus partes o por interferencias causadas por acumulación de polvo y/o mugre.

● Verificar el buen funcionamiento de los equipos

● Responder a los requisitos establecidos por las normas de calidad

● Garantizar la fiabilidad y trazabilidad de las medidas

● Lograr la estandarización de procesos - eliminación de variables

● Da validez

● El equipo debe ser calibrado antes y después del proceso de validación

Calibración- 3100 equipos calibrados - 93% se calibra a nivel nacional- Departamento de Calibración interno: 3

técnicos y un ingeniero- 300-400 cal/mes- Reportan a la sección de calidad - Plan mayor: etiquetar, almacenar,

calibrar, entrenar.- Softwares: seguimiento- USA y Japón

Estudio RyR (reproducibilidad-repetibilidad)● Te dice que % de error está aplicando

El técnicoEl proceso de medición El equipo

Estudiar los posibles motivos para así reducir la variabilidad de la medición de un proceso

Mayor exactitud

● Se debe trabajar con parámetros

30%No está bien

de error* Proceso confiable y reproduciblePor ejemplo:

ISO/IEC 17025:2005 Establece los requisitos que deben cumplir los laboratorios de ensayos y calibración para demostrar:

1) Operan un SGC eficaz y en mejora continua.

2) Técnicamente competentes.3) Capaces de producir resultados de

ensayos y calibración confiables.

Contenido

❖ Requisitos de gestión: administrativos (Normas 9000).

❖ Requisitos técnicos: competencia del laboratorio (personal, instalaciones, condiciones ambientales, métodos y validación) y validez de resultados.

❖ Cubre: -Normalizados - No normalizados (cliente) - LaboratorioCumplir con el 100% de

los requisitos

Algunos Puntos de Ejemplo

Verificación -La validación y la verificación no son propiamente normas, aunque forman parte de las normas relacionados con el control de calidad .

-Revisión a un servicio o producto con el objetivo de garantizar sus especificaciones de calidad

-Amplio abanico de aspectos relacionados al producto. Se debe aplicar tanto en la fase de desarrollo, como el escalamiento y la producción comercial.

-Mantener las especificaciones definidas durante el desarrollo del producto a lo largo de todo el ciclo de vida.

Verificación

Revisión Servicios-productos-Procesos

Características de funcionalidad y

calidad

Desarrollo

Escalamiento

Producción

Mantenerlas a lo largo del ciclo de

vida

Pruebas y modelado

Verificación-Modelado del Producto o partes del producto, servicio o sistema

-Repaso o revisión de resultados de modelado

-Repetir pruebas regularmente para asegurar la continuidad de las especificaciones del diseño. los requerimientos y las regulaciones

-Usualmente es un proceso interno

-Deben generarse registros para temas de auditorías para acreditar por ISO o por cualquier otra compañía acreditadora.

Estandarización de ensayos de laboratorioDiseñar un procedimiento de operación estándar que minimice la variabilidad debida a diferentes analistas y diferentes condiciones del laboratorio o entidad.

“Disminuir error sistemático entre analistas”

Aspectos claves en la estandarización1. Buscar si hay métodos normalizados2. Miembros del laboratorio o empresa participen.3. Capacitación del personal.4. Que el procedimiento estándar sea la forma más fácil, segura y mejor.5. Documentar.6. Demostrar mediante evidencia objetiva que el método es capaz de generar

resultados estadísticamente válidos y confiables en las condiciones de trabajo del laboratorio.

7. Paso inicial hacia la validación.

Ejemplo

- Cambio de la enzima B-glucoronidasa en lugar de la enzima Zimolasa

- Paso de incubación extra a 100°C.- Se evalúo la calidad de ADN. (124,9

±30,2 ng/μl) (A260/A280 nm = 1,86±0,1)

Validación de un Proceso- FDA: Process Validation: General Principles and Practices 2011:

“process validation is defined as the collection and evaluation of data, from the process design stage through commercial production, which establishes scientific evidence that a process is capable of consistently delivering quality product”

- Entradas variables+proceso controlado=Producto uniforme- Proceso continuo de retroalimentación- Todas las etapas

Etapas de ValidaciónEtapa 1 – Diseño de Proceso : El proceso de manufactura se diseña de acuerdo a partir del conocimiento del desarrollo y el escalamiento

Etapa 2 – Cualificación del Proceso: El diseño se pone a prueba para ver si es capaz de manufactura comercial reproducible

Etapa 3 – Verificación Continua del Proceso: Aseguramiento contínuo durante la producción de que el proceso se mantiene controlado, con resultados uniformes.

Validación exitosa

Cada lote

Certeza razonable de sus características

Identidad

Fuerza

Calidad

Pureza

Potencia

Conocimiento del producto y el proceso

Datos A escala

laboratorio piloto, y

comercial

Identificar Fuentes de Variación

Detectar presencia y Grado de Variación

Definir Impacto de Variación

En proceso

En producto

Controlar variación, tomando en cuenta riesgos para el producto

Control del Proceso

Todo el Ciclo de vida

Deben revalidarse las variaciones

Equipo

Insumos Personal y capacitacion

Ambiente de Produccion

Cambios del Proceso

Otras consideraciones-Procedimientos de control=monitoreo de procesos o etapas con potencial de generar variaciones de calidad

-Validez estadística

-Corroboración las especificaciones deseadas

-Equipo calibrado y revisado = programa planificado siempre de manera uniforme

-Los parámetros y atributos clasificarse por qué tan críticos son y asignarles medidas de control proporcionales.

Validación de ensayos de laboratorio: Definiciones“Proceso de evaluación sistemático para demostrar que el método cumple con los requisitos necesarios para el uso que se le va a otorgar” Acevedo (2014)

“Verificación de que los requisitos especificados son adecuados para el uso previsto” Instituto Nacional de la Salud, Colombia, 2014

“Proceso que determina la idoneidad de una prueba, que se ha desarrollado, optimizado y estandarizado adecuadamente para un fin concreto. La validación incluye estimaciones de las características de rendimiento analítico y diagnóstico de una prueba” Organización mundial de la Salud Animal (2012)

“Repetibilidad, el análisis no debe diferir significativamente entre analistas o el mismo analista en tiempos distintos” Profesor de Química, TEC

GUÍA PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS. ECA-MC-PO01-G01

INTE-ISO/IEC 17025

INTE-ISO 15189

Estrategias de evaluación de los laboratorios de ensayo y de calibración.

Competencia técnica, capacidad del laboratorio para emitir resultados fiablesConfirmar, verificar

Consideraciones preliminares1. Objetivo de la prueba.

2. Variables que pueden afectar la realización de la prueba.

3. Matriz.

4. Factores que intervienen en el rendimiento.

5. Cualitativa o cuantitativa.

6. Situación: Normalizado, Normalizado modificado o no normalizado.

Guía de Validación - ECA1. -Determinar los parámetros de desempeño (cuadro 3)

2. -Establecer los criterios de aceptación

3. -Evaluación de los resultados de la validación por comparación directa o por la

aplicación de pruebas estadísticas (comparar parámetros con criterios)

4. -Declaración de la conformidad del método

5. -Alcance: Normalizado, normalizado modificado o no normalizado

evaluar

Verificación de algunos parámetros

Adicional las modificaciones Desarrollado por

el Lab

Informe de Validación1) Objetivo2) Los ítems que se van a ensayar o a calibrar y el ámbito3) Personas que participaron (responsable técnico Doc. Campos/Mariel C.)4) Equipos patrones y Reactivos (Detalle de insumos, controles metro y amb.)5) Metodología

Descripción parámetros y criterios y evaluación diseño experimental

6) Resultados y conclusiones: Resumen resultados, tratamiento estadístico y conclusiones

7) Evidencia de Revisión y aprobación Justificación técnica de parámetro no determinado

Sí parámetros NO documentados → declaración de complimiento en plan de validación de común acuerdo con el cliente.

Validación de IFI Mal de ChagasECA

Chinche Triatoma inmediata

Robustez de la Técnica

La habilidad de reproducir el método en diferentes laboratorios o bajo diferentes circunstancias sin la ocurrencia de diferencias inesperadas en los resultados obtenidos. International Conference on Harmonisation

of Technical Requirements for the Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH) "

❏ 2 Temperaturas de Incubación❏ 2 Tiempos de Incubación❏ Cantidad de muestra y Conjugado por

pocillo❏ Tiempo de Lectura

8 ensayos

7 PUNTOS CRÍTICOS

" Capacidad de un método para mantenerse sin cambios ante pequeñas pero deliberadas variaciones en los parámetros del método, que provee una indicación de su confiabilidad durante el uso normal. "

2 estándares 1 UI Suero Humano Liofilizado

2011

unidad discreta de tipificación Tipo 1 y 2

CaracterizarlosDeterminar el Título

1:60

Montar2 muestras 1 por estándarpor duplicado

Especificidad y sensibilidad 100 muestras: tantas (+) y tantas (-)

Malaria, Leishmania, Hepatitis B y C, y

Sífilis

● Determinar si hay reacción cruzada.● Ya están caracterizadas

Hay o no concordancia

A partir de una fórmula que se basa en falsos (+) y (-)

Tabla de contingencia de 2x2

Calcular a mano o con programas

estadísticos

● La tabla era con la IFI y el gold standard (en este caso no es otra técnica, sino las tres técnicas de

diagnóstico juntas)

Capacidad del método de dar negativo cuando las muestras no tienen el analito

Capacidad del método de dar positivo cuando las muestras tienen el analito

Precisión: proximidad entre los resultados de mediciones independientes, bajo las mismas condiciones

● Uso de guía EP12-A2 de Clinical and Laboratory Standards Institute

Hacen normas para hacer evaluaciones

para determinar la eficiencia de ensayos cualitativos

● Punto de corte: es el punto que me dice a mí, de aquí para arriba tengo resultados

positivos, y de aquí para abajo aunque vea fluorescencia, es negativo (1:40)

● C50: en este punto específico, las probabilidades son: 50%(+) y 50%(-), en ese punto yo no tengo certeza estadística, lo ideal es que mi punto de corte coincida con este valor

● Entonces en el ensayo, determino si verdaderamente la concentración que tomo como punto de corte coincide con la C50 o no, en caso de que no sea, uno debe plantear si cambia el punto de corte o como trata con eso

● Intervalo C5-C95, es de incertidumbre

Límite de DetecciónLímite de detección: Concentración mínima de un analito en la matriz de una muestra que puede ser detectada, pero no necesariamente cuantificada, bajo condiciones analíticas específicas.

El límite de detección, expresado como la concentración cL, o la cantidad qL, se deriva de la medida más pequeña xL, que puede detectarse con certeza razonable por un procedimiento analítico dado. El valor de xL es dado por la ecuación: xL = xbl + ksbl donde xbl es la media de las mediciones del blanco y sbl la desviación estándar de las mediciones del blanco y k es un factor numérico elegido de acuerdo al nivel de confianza deseado.

Muestras blanco, muestras de 1:40 y 1:80 → De cada muestras 60 repeticiones

EP17-A: Protocolo para la determinación de límites de detección y límites de cuantificación¨ del CLSI.

Principios de normalización, estandarización, validación y calibración

Ávila, G., Bermúdez, M., Calvo, C., Des Bouillons,R. & Díaz,C.

OTRAS DEFINICIONES DE PARÁMETROS