ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
2
دانشگاه آزاد اسالمی واحد علوم تحقیقاتدانشکده علوم
عنوان پروژهکـروماتوگـرافی مـایـع مـایسلی
و کاربـرد آن در شناسایی ترکیبات آمـینه
ارائه بهآقای دکتر پرویز آبرومند
گردآورندهمنیره رحمانی
درسروشهای فیزیکی و شیمیایی جداسازی
1393آبان
3
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
کروماتوگرافی مایع مایسلی
تکنیک
و فاز متحرک مایسل
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
اجزاء دستگاه
Krafft point amp Cloud point
کارایی و بازده ستون
فاز ساکن
مقاالت
4
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
فاز ساکن یک ماده غیرقطبی
قطبی Rفاز متحرک یک حالل نسبتا
مثل آب متانول استونیتریل تتراهیدروفوران
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در سرعت حرکت
اجزا مختلف آنالیت می باشد
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
5
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
روش ایزوکراتیک
انواع فاز متحرک روش
گرادیانت
6
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
7
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
3
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
کروماتوگرافی مایع مایسلی
تکنیک
و فاز متحرک مایسل
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
اجزاء دستگاه
Krafft point amp Cloud point
کارایی و بازده ستون
فاز ساکن
مقاالت
4
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
فاز ساکن یک ماده غیرقطبی
قطبی Rفاز متحرک یک حالل نسبتا
مثل آب متانول استونیتریل تتراهیدروفوران
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در سرعت حرکت
اجزا مختلف آنالیت می باشد
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
5
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
روش ایزوکراتیک
انواع فاز متحرک روش
گرادیانت
6
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
7
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
4
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
فاز ساکن یک ماده غیرقطبی
قطبی Rفاز متحرک یک حالل نسبتا
مثل آب متانول استونیتریل تتراهیدروفوران
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در سرعت حرکت
اجزا مختلف آنالیت می باشد
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
5
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
روش ایزوکراتیک
انواع فاز متحرک روش
گرادیانت
6
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
7
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
5
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
روش ایزوکراتیک
انواع فاز متحرک روش
گرادیانت
6
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
7
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
6
Injector
Detector
Column
Solvents
Mixer
Pumps
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
7
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
7
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
8
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
9
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
10
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
11
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
12
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
13
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
14
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
15
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
16
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
17
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
18
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
19
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
20
Injector
Detector
Column
Solvents
Pumps
Mixer
Chromatogram
Start Injection
mAU
time
کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
21
کروماتوگرافی مایع مایسلی
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
فاز متحرک یک محلول آبی مایسلی
افزودن مقداری متانول یا استونیتریل جهت حفظ بازده ستون
نمونه به ستون تزریق می شود و همراه فاز متحرک در طول
ستون حرکت می کند
اجزاء نمونه با سرعت های متفاوت و ستون )فاز ساکن( را ترک
می کنند
اساس جداسازی در این کروماتوگرافی اختالف در قطبیت اجزا
مختلف آنالیت می باشد
ترکیب با قطبیت بیشتر کمتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
سریع تر از ستون خارج می شود
ترکیب با قطبیت کمتر بیشتر با فاز ساکن برهمکنش داشته و
دیر تر از ستون خارج می شود
پیک های مرتبط با اجزای مختلف توسط دتکتور مشخص می
شوند
در انتها کروماتوگرام رسم می شود
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
22
و فاز مایسلمتحرک
مایسل ترکیبی از سورفکتانت ها
سورفکتانت(surfactant )( مخفف کلماتSurface active agent )
می باشد
سورفاکتانت ها ترکیبی با یک سر آب دوست و یک سر آبگریز می
باشد
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
23
و فاز مایسلمتحرک
سورفاکتانت باعث کاهش نیروی کشش سطحی می شوند
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
24
و فاز مایسلمتحرک
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
25
Zwitterionic
و فاز مایسلمتحرک
Nonionic
Cationic
Anionic
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
26
و فاز مایسلمتحرک
اجتماع مقدار مشخصی از سورفاکتانت ها مایسل را ایجاد می کند
این مقدارCMCنام دارد
Critical Micellar Concentration
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
27
و فاز مایسلمتحرک
نحوه ی تشکیل مایسل ها
>
>
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
28
فاز ساکن
)فاز ساکن یک ماده غیرقطبی )اکثرا زنجیره های کربنی
برهمکنش ترکیبات غیرقطبی با فاز ساکن بیشتر و دیرتر از ستون
خارج می شوند
برهمکنش ترکیبات قطـبـی با فاز ساکن کمتر و سریعتر از ستون
خارج می شوند
غیر قطبی مثل( ستون اکثرا توسط ترکیبات آلکیلیC18 پوشش )
داده می شوند
نگهداری شود100ستون باید در متانول
قبل از شروع تست متانول با آب جایگزین می شود
ستون آب برای شستشو و زدودن کامل 30حداقل به میزان
متانول مورد نیاز است
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
29
کارایی و بازده ستون
یکی از معایبMLCکاهش کارایی به مرور زمان می باشد
باعث پهن شدگی پیک می شود
در نتیجه قدرت تفکیک نتایج کاهش می یابد
pH ستون
عوامل موثر بر کارایی ستون غلظت مایسل در فاز متحرک
میزان ترکیبات آلی اضافه
شده در فاز متحرک و نوع آنها
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
30
Krafft point amp Cloud point
Krafft Pointدمایی است که در آن مایسل تشکیل می شود
Cloud Point دمایی است که در آن حاللیت مایسل ها به طور
کاهش می یابد ناگهانی
درKrafft Point در ا اـم اـست ـشفاف ول محـل Cloud Point ول محـل
کـدر است
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
31
Krafft point amp Cloud point
جدول مقایسه یKrafft وCloud Point برای یک سورفکتانت
مشترک
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
32
اجزاء دستگاه
اجزاء دستگاه کروماتوگرافی مایع مایسلی همانند دستگاهHPLC و
RP-HPLC می باشد
که شامل مخازن حالل موتور یا پمپ اینجکتور ستون و دتکتور
می باشد
فاز متحرک
اینجکتور
ستون
پمپ
دتکتور
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
33
اجزاء دستگاه
>
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
34
کاربرد کروماتوگرافی مایسلی
عدم نیاز به مراحل آماده سازی نمونه بر خالف سایر
کروماتوگراف ها
امکان تزریق مستقیم نمونه به دستگاه کروماتوگرافی
همچنین سمیت کمتر به دلیل کاهش میزان حالل های آلی
کاهش تغییر در ساختار فاز متحرک در آزمایشگاه در طوالنی مدت
به دلیل پایداری بیشتر ساختار آنها نسبت به حالل های آلی
همه ی این عومل باعث افزایش کاربرد این روش می شود
برخی از کاربردهای این روش شامل
آنالیز پروتئینbull
آنالیز پالسما bull
آنالیز ترکیبات داروییbull
جداسازی ترکیبات باردار و خنثی از یکدیگرbull
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
35
مـقاالت
بررسی فاز ساکن
بررسی فاز متحرک
MLCآنالیز آنتی هیستامین با
MLC آنالیز بیوژنیک آمین ها باED و
سنتز آنتی هیستامین
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
36
تاثیر فاز ساکن بر کارایی
کروماتوگرافی مایع مایسلی
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
37
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بدلیل قدرت کم شویش فاز متحرک) ترکیبات مایسلی( با ستون
های رایج
و همچنین انتقال جرم کم
در تحقیقات گذشته اندازه ی منافذ فاز ساکن افزایش یافتند
آنگستروم اجازه ی 150زیرا فاز ساکن رایج با ابعاد منافذ کمتر از
عبور مایسل ها نمی دهد
در نتیجه قدرت شویش فاز متحرک کاسته می شود
و کاهش کارایی ستون در ادامه مشاهده می گردد
دلیل ممناعت ورود 2اگر مایسلحاصل سورفکتانت یونی باشد به
ایجاد میگردد
اثر الکتروستاتیکی )دافعه( bull
اثر فضایی )بزرگ بودن ابعاد مایسل نسبت به ابعاد منافذ(bull
اگر مایسل حاصل سورفاکتانت غیر یونی باشدتنها عامل فضایی
تاثیر گذار خواهد بود
مقدمه
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
38
افزودن الکل های کوتاه زنجیره و عوامل افزایش کارایییکی از
افزایش دما می باشد
پروپانول به فاز متحرک و افزایش 3در تحقیقاتی تاثیر افزایش
بررسی شدCdeg 40دما تا
پروپانول و دمای 5 بناربراین در این تحقیق Cdeg 40 مورد
استفاده قرار گرفت
رسید 38 به 82 از CMCبا افزودن کمی الکل کوتاه زنجیر bull
(SDS)برای
به دلیل کاهش میزان جذب مونومر آزاد سورفکتانت توسط فاز bull
متحرک
افزایش منافذ آزاد جهت عبور فاز متحرک و آنالیت و افزایش bull
کارایی
مقدمه
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
39
مقدمه
ترکیبات پیوند داده شده با عامل موثر دیگر بر کارایی فاز ساکن
ستون هستند
تاثیر متفاوتC3 C8C18
موارد بررسی در این تحقیق
(C18هفت ستون یک ستون معمولی و رایج )منافذ کوچک bull
شش ستون متفاوتbull
بررسی آنالیز ترکیبات آلکیل فنونbull
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
40
مقدمه
ترکیبات آلکیل فنون مورد بررسی
ساختار شیمیایی
نام ترکیبات
Acetophenone
Propiophenone
Heptanophenone
Octanophenone
Nonanophenone
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
41
Agilent HP Liquid Chromatograph
Mobile-phase degasser
Pump
Diod array detector
Column thermostat
Autosampler
تجهیزات
آنگستروم70ستون با منافذ
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
ستونC14غیر متخلخل
ستونC3 آنگستروم300 با منافذ
ستونC8 آنگستروم300 با منافذ
ستونC18 آنگستروم300 با منافذ
آنگستروم1000ستون فلوئوره با منافذ
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
42
ستون یکبار در فاز آلی-آبی و یکبار در 7بررسی آلکیلفنون ها با
فاز مایسلی
ستونC18برای استوفنون و پروپیفنون استفاده شد
4555محلول آلی-آبی شامل( VVاز متانول و آب )
( از پروپانول و 595محلول مایسلی شامل )SDS
دمای ستونCdeg 40
11 تا 005سرعت جریان مختلف از mLmin
به دلیل متخلخل نبونC14 07 حدکثر سرعت جریان mLmin
حجم نمونه تزریق شده مطابق پیشنهاد شرکت سازنده ستون
محاسبه ضریب نفوذ
)محاسبه کاهش ارتفاع صفحات با فرایند آماری )نرم افزار
فرایند
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
43
نتیجه
005انتخاب غلظتmMبرای آزمایش
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
44
نتیجه
ستونC18 آنگستروم70 با منافذ
افزایش شیب به معنی مقاومت در برابر انتقال جرم
کاهش کارایی ستون
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
45
نتیجه
ستونC14
تخت بودن نمودار فاز مایسلی مقاومت کم در برابر انتقال جرم
جذب سورفاکتانت در فاز ثابت
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
46
نتیجه
ستونC3C8C18 آنگستروم300 با منافذ
عملکرد بهتر ستونC3 به دلیل تغییرات کمتر در شیب و نزدیک
منحنی به هم2بودن
به دلیل جذب کمتر سورفاکتانتC3
C8
C18
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
47
نتیجه
ستونC4 آنگستروم1000 با منافذ
بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر
جذب کم سورفکتانت
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
48
نتیجه
آنگستروم1000 فلوئوره با منافذ ستون بررسی افزایش کارایی با منافذ بزرگتر و قطبیت بیشترانتقال جرم مناسب درستونجذب کمتر سورفکتانت
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
49
بررسی اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک به عنوان
dinitrophenyl amino-24مودیفایر در جداسازی
acids با کروماتوگرافی مایع مایسلی
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
50
کروماتوگرافی مایع مایسلی کاهش کارایی آن می یکی از معایب
باشد
بررسی مودیفایر
مودیفایر الکل کوتاه زنجیره مثا متانول اتانول یا پروپانول
بعضی از مواقعacetonitrile و tetrahydrofurane
در این تحقیق اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک مورد بررسی قرار گرفت
در تحقیقات قبلی مشتق سازی های آمینو اسید انجام شده
24در این تحیق از-dinitrofluorobenzene )DNFB(استفاده شد
مقدمه
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
51
مقدمه
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
52
تجهیزات و مواد اولیه
Agilent HP Liquid Chromatograph
spectrophotometric detectorPump
Delta Pak C18
Autosampler
pH meter
The sodium dodecyl sulfate )SDS 98(
sodium hydroxide
hydrochloric acid
ethanol 1-propanol 1-butanol 1-pentanol 1-hexanol
acetic 1-propanoic 1-butanoic1- pentanoic and 1-
hexanoic acid
Double distilled water
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
53
تیتراسیون پتانسیومتری جهت تعیین pH
محاسبهpKa از pHبا کمک نرم افزار اکسل
فرایند
>
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
54
فرایند
نحوه محاسبه pKa از pH
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
55
نتیجه
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
56
نتیجه
بنابراین می توان اسید کربوکسیلیک آلیفاتیک را با الکل هم تعداد
کربن جایگزین کرد
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
57
نتیجه
کروماتوگراف آمینو
اسیدها
acetic
acid
ethanol
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
58
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
propanoic
acid
1-
propanol
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
59
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
butanoic acid 1-butanol
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
60
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
Pentanoic
acid
1-
pentanol
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
61
نتیجه
کروماتوگراف آمینو اسیدها
hexanoic
acid
1-hexanol
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
62
نتیجه
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
63
نتیجه
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
64
نتیجه
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
65
قدرت فاز متحرک جهت حرکت آنالیت در فاز ساکن
نتیجه
اسید با تعداد اتم بیشتر میل ترکیبی بیشتری با مایسل ها دارد
بنابراین اسیدکربوکسیلیک جایگزین خوبی
برای الکل است
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
66
آنالیز آنتی هیستامین با کروماتوگرافی مایع مایسلی
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
67
هیستامین از دی کربوکسیله شدن آمینواسید هیستیدین در بدن
بوجود می آید
فعال کردن گیرنده ها
نوعی پاسخ ایمنی
با فعالیت گیرنده ها ترشح مری یا ترشح اسید معده ایجاد می گردد
تعدادی گیرنده در بینی چشم دستگاه تنفسی و پوست وجود دارد
داروهای آنتی هیستامین گیرنده را غیر فعال می کند
اما عالئمی نظیر خواب آلودگیپریشانی گیجی عدم هماهنگی و
می شود
اهمیت زیاد تعیین مقدار کمی آنتی هیستامین در کنترل کیفیت
داروسازی بسیار
تعیین مقادیر کمی آنتی هیستامین با روشهای ذیل انجام میگیردجذب اتمیbullگاز کروماتوگرافیbullاسپکتروفتومتریbullکروماتوگرافی مایع bull
مقدمه
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
68
داروسازی ایالت متحده(USP) پیشنهاد روش اسپکتروفتومتری و
کروماتوگرافی
قبل از اسپکتروفتومتری باید استخراج با هگزان اتر یا کلروفرم
انجام شود
و شامل مراحل دیگری مثل تبخیر نیز می باشد
استفاده زیاد حالل آلی در کروماتوگرافی
اما در کروماتوگرافی مایسلی شرایط بهتر است
جداسازی بر اساس آبگریزی بار الکتریکی و ابعاد
می توان مواد با طبیعت مختلف را شناسایی کرد
ساخت فاز متحرک آسان و بدون مصرف زیاد حالل الی
آنالیز ترکیبات دارویی مختلف و متنوع
مقدمه
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
69
سورفکتنانت cetyltrimethylammonium bromide
حل کردن سورفکتانت در بافر های مختلف جهت تنظیمpH
هیدروکسید سدیم
هیدروکلریک اسید
پروپانول و بوتانول
داروهای آنتی هیستامین
045فیلترmicrom
مواد اولیه
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
70
Agilent 1100 chromatograph with an isocratic pump
UVndashvis detector
HP-Chemstation software
Spherisorb octadecyl-silane column
mobile phase flow rate was 10 mL minminus1
micropH 2000 pH-meter
تجهیزات
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
71
آماده سازی نمونه قرص
50 mg
002 MCTAB
قرص پودر شده
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
72
Ilvicoآماده سازی نمونه قرص and Delor
عدد قرص10توزین
پودر کردن آنها
حل کردن پودر در متانول
انحالل ماده ی حاصله درCTAB
سانترفیوژ
تزریق ماده ی شفاف به کروماتوگراف
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
73
آماده سازی نمونه کپسول
عدد کپسول3توزین
انحالل در
CTAB 002M
انحالل در فاز متحرکآماده سازی نمونه
پمادانحالل کامل پماد در پروپانول
با همزن مغناطیسی و حرارت مالیم
انحالل در فاز متحرک
سانتریفیوژ و فیلتر و تزریق در
آماده سازی نمونه کروماتوگرافشربت
انحالل کامل شربت در فاز متحرک
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
74
نتایج
1با توجه به جدول log P و log K در تعیین نوع
سورفکتانت موثر است
مقدار ثابت تفکیک به پروتون2 یا 1با توجه به دارا بودن
و آبگریز بودن ترکیبات دارویی
سورفکتانت مورد نظر بایستی کاتیونی باشد
آنیونی جذب نمونه و سورفکتانتbull
غیر یونی زمان ماندن نمونه در ستون افزایش می یابدbull
آنیونی دفع آنالیت و سورفکتانت و کاهش زمان ماندن در bull
ستون
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
75
نتایج
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
76
نتایج
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
77
نتایج
با کاهشPhزمان ماندن در ستون کاسته شد زیرا درpH پایین نمونه حالت یونی داشته و دافعه نمونه با
سورفکتانت بیشتر می شودبنابراینpH 3برای تمام آزمون ها انتخاب شد با کاهش افزایشCTAB زمان ماندن در ستون کاسته می
شد 004بنابراین غلظتMانتخاب گردید بوتانول در مقایسه با پروپانول کارایی سیستم بیشتری
ایجاد می کرد
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
78
نتایج
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
79
نتایج
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
80
نتایج
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
81
نتایج
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
82
نتایج
r 0999 برای تمامی ترکیبات بیشتر از
درصد10 انحراف استاندارد حداکثر تا
LOD 18 تا 003 ازmicrogmL
در حد تلورانس 110 تا 91بازیابی( USP)
آماده سازی نمونه بسیار آسان
روش ساده و سریع و تکرارپذیر
سمیت کم به خاطر کاهش چشمگیر حالل های آلی
جایگزین مناسب برایRP-HPLC
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
83
EDو MLCآنالیز بیوژنیک آمین ها با
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
84
بیوژنیک آمین ها از دی کربوکسیله شن آمینواسید ها بوجود می آید
مثل هیستامین سروتونین تیرامین و
این ترکیبات دارای حلقه ی فنیل و گروه آمینی و گروه اسیدی
هستند
مقدمه
تحریک گیرنده موجود در
قلب و کلیه
افزایش دفع سدیم
تحریک گیرنده موجود در قلب و
ریه و روده
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
85
مقدمه
حاصل تغییر ساختار
دوپامین
عاملی برای تشخیص
سرطان
حاصل تغییر ساختار سروتنین
موجود در سرم خون بیماران
سرطانی
حاصل پروتئین غذاهای فاسد
موجب میگرن می شود
و به دلیل فعالیت سلول های سرطانی
نئوروبالستوما
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
86
مقدمه
نیاز به روش جهت تعیین کمی برای اندازه گیری این ترکیبات
و پی بردن به دالیل افزایش آن از قبیل غذاهای پروتئین دار
و دارو و تومورهای سرطانی
آماده سازی نمونه برایHPLC با حالل های آلی یا جذب روی
آلومینا و
این روش ها گزینشی عمل نکرده و بازیابی کمی دارند
جداسازی همزمان ترکیبات آب دوست و آب گریز با
کروماتوگرافی مایع مایسلی
بدون نیاز به آماده سازی نمونه پیچیده و زمان بر و تزریق
مستقیم نمونه
UV و ED دتکتور مورد بررسی قرار گرفت
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
87
مواد اولیه
SDS
KCl
MeOH
HCl
BAs
تجهیزات
UV-vis-NIR
Spectrophtometer
pH meter
Agilent chromatograph
Autosampler
Electrochemical detector
HP Chemstation
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
88
آماده سازی نمونه
1 در فاز متحرک به نسبت میلی لیتر از سروم خون
رقیق شد15
045فیلتر با غشاءmicrom
بدون نیاز به مراحل پیچیده و زمانبر آماده سازی نمونه
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
89
نتایجبهینه سازی پتانسیل
اکسیداسیون
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
90
نتایجتعیین مشخصه های فاز
متحرک 3انتخاب pHبه دلیل مولکولی بودن نمونه
بازدهی باال در غلظت مایسل و الکل کمتر
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
91
نتایج
به EDبرتری UV
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
92
نتایجبه EDبرتری
UV
UV ED
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
93
نتایجبررسی تکرارپذیری و
دقت روش
دقت متوسط باED به دلیل آلوده شدن دتکتور)شستشو
الکترود(
بیوآمین ها حساس به نور و دما و اکسید می شوند ) نمونه
تازه باشد(
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
94
نتایج
بازیابی
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
95
نتایج
بدون نیاز به حالل آلی حتی باکمترین درصد
دقیقه12انجام آزمایش در بدون نیاز به آماده سازی نمونهفقط فیلتر نمونه
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
96
پتنت مورد مطالعه
CARBOSTYRILS COUMARINS AND THIOCOUMARINS
Zimmer Hans Willi James M Holbert
Publication date Nov 22 1966Filing date Oct 23 1961Priority date Oct 23 1961
Publication number US3287459 A
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
97
ترکیباتی که در این پتنت سنتز می شوند کاربردهای ذیل را دارند
مقدمه
به عنوان مواد واسطه در ساخت داروهاآنتی باکتری هاضد انعقادهاآنتی هیستامین
این ترکیبات در نتیجه ی سه مرحله واکنش شیمیایی حاصل می گردند که به ترتیب به این گونه اند
هالوژن دار کردن1
دی هیدروهالوژنه کردن2
نوآرایی3
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
98
مقدمه
یک ترکیب ضروری مورد استفادهalpha substituted gamma-butyrolactones
که از واکنش جانشینی بر روی حلقه یgamma-butyrolactone حاصل می گردد
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
102102
1استفاده ار تری متیل آمین در مرحله
ساعت 2رفالکس به مدت انتقال مخلوط به ظرف هم حجم آب جهت تشکیل رسوب مواد حاصلهجدا کردن آنها سپس ترکیب حاصله با شرایط ذیل هالوژن دار می شود این شرایط واکنش برای هالوژن دار کردن هر سه نوع آمین نوع
کاربردی می باشد3و21
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml acetic acidbull009 mol bromine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف برم و اسید استیک اضافهbull مانول داغ حل شودml 10ترکیب حاصل را در bullC ˚98-96ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull-1005تعدادی کریستاله کردن مجدد تا نقطه ذوب bull
1015 Cحاصل گردد ˚
123شرایط واکنش برم دار کردن آمین نوع
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
103103
هالوژن دار کردن ترکیبات مورد نظر
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol chlorine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف کلر و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش کلر دار کردن آمین نوع
bull03 mol alpha-(o-aminobenzal)-butyrolactonebull60 ml CCl4bull009 mol iodine ساعت ماندن در دمای اتاق24bullسپس تقطیر جهت حذف ید و تتراکلریدکربن اضافهbull
123شرایط واکنش ید دار کردن آمین نوع
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
104
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
فرم کلی دی هیدرو هالوژن دار کردن ترکیبات
A به عنوانH یاCH3
X به عنوان هالوژن
Y به عنوان OS و NH
که در اینجا
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
105105
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
شرایط مورد نیاز واکنش حضور عامل گیرندهHX ویا حرارت
حالل مورد استفاده اسید استیک به مقداری که تمام ماده ی مورد نظردر حالل کامال حل گردد
بعد از رفالکسHXاز سیستم خارج می گردد
در ضمن افزودن مقدار جزئیHXسرعت واکنش دی هیدرولوژن شدن را افزایش می دهد
به دلیل ایجادOHordmدر حین واکنش بایستی این گروه عاملی ماسک شود
بنابراین ترکیباتی که حاویOH NH و SHباشد واکنش از این فرم کلی پیروی نمی کند
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
106
استون200ml( در I از ترکیب )gr 25حل کردن bull ساعت2رفالکس مخلوط مورد نظر به مدت bullاستون طی تبخیر حذف می شودbull بدست می آیدgr 206( به میزان Iaترکیب )bull123ordm C-122با نقطه ی ذوب bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 1
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
107107
اسید 200ml( در Ia از ترکیب )gr 166حل کردن bullاستیک
در اسید استیکBr2 از 145grحل کردن bull به هم 30ordm C ساعت و دمای 6 ترکیب در طی 2این bull
افزوده می شوند(حاصل می گرددIIaماده ی )bullبا تبخیر میزان اسید استیک موجود در محیط حذف می bull
گرددbull15grاز محصول ایجاد می گردد
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 2
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
108108108
در خال(IIa) ماده ییک با تقطیر اسید استbull
و ریکریستالیزه کردن ماده ی حاصل در متانولbull
( حاصل می گرددIIIaماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 3
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
109109109
C ˚180( با استون در دمایIIIa) گرم از ماده ی 10حرارت bull
ساعت2به مدت
C ˚157-156حذف استون و ایجاد بلور با دمای ذوب bull
( حاصل می گرددIIIbماده ی )bull
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 4
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
110110110
اسید استیک20ml( در IIIbماده ی )2gr انحالل bull
HBr قطره 6افزودن bull
ساعت4رفالکس به مدت bull
bull08 gr 157-156 رسوب دراتانول با دمای ذوب˚ C
ترکیبات شرایط واکنش دی هیدرو هالوژنه کردن SH و OH NHحاوی
دی هیدرو هالوژنه 2کردن
مرحله 5
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
111
نو آرایی3
آخرین مرحله جهت تولید محصول
با فرم کلی
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
112
نو آرایی3
نو آرایی مشتقات آمینی برای تولید آنتی هیستامین
18اسید استیک به مدت 100ml( در Iماده ی )10grرفالکس bull
ساعت
15ml HBrدر حضور bull
-2-)3 کریستال 91grسرد کردن ترکیبات و ایجاد bull
bromoethyl-)carbostyril
1روش
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
خنک شود
C ˚196-195ایجاد کریستال با نقطه ذوب bull
carbostyril (-hydroxiethyl-2-)3با نام bull
روش 2
نو آرایی3
114
پایان
Slide 1
Slide 2
Slide 3
Slide 4
Slide 5
Slide 6
Slide 7
Slide 8
Slide 9
Slide 10
Slide 11
Slide 12
Slide 13
Slide 14
Slide 15
Slide 16
Slide 17
Slide 18
Slide 19
Slide 20
Slide 21
Slide 22
Slide 23
Slide 24
Slide 25
Slide 26
Slide 27
Slide 28
Slide 29
Slide 30
Slide 31
Slide 32
Slide 33
Slide 34
Slide 35
Slide 36
Slide 37
Slide 38
Slide 39
Slide 40
Slide 41
Slide 42
Slide 43
Slide 44
Slide 45
Slide 46
Slide 47
Slide 48
Slide 49
Slide 50
Slide 51
Slide 52
Slide 53
Slide 54
Slide 55
Slide 56
Slide 57
Slide 58
Slide 59
Slide 60
Slide 61
Slide 62
Slide 63
Slide 64
Slide 65
Slide 66
Slide 67
Slide 68
Slide 69
Slide 70
Slide 71
Slide 72
Slide 73
Slide 74
Slide 75
Slide 76
Slide 77
Slide 78
Slide 79
Slide 80
Slide 81
Slide 82
Slide 83
Slide 84
Slide 85
Slide 86
Slide 87
Slide 88
Slide 89
Slide 90
Slide 91
Slide 92
Slide 93
Slide 94
Slide 95
Slide 96
Slide 97
Slide 98
Slide 99
Slide 100
Slide 101
Slide 102
Slide 103
Slide 104
Slide 105
Slide 106
Slide 107
Slide 108
Slide 109
Slide 110
Slide 111
Slide 112
Slide 113
Slide 114
113
اتانول1000ml( در Iماده ی )10grانحالل bull
چند روز در تماس با اشعه ی المپ حبابی تنگستن تا ایجاد bull
تغییر رنگ
تقطیر اتانول و به دست آمدن رسوب بیرنگ با دمای ذوب bull
140-170˚ C
رسوب حاصل در کمترین مقدار اتانول داغ حل شده و سپس bull
![What is HPLC? High Performance Liquid Chromatography High Pressure Liquid Chromatography (usually true] Hewlett Packard Liquid Chromatography (a joke)](https://static.fdocuments.net/doc/165x107/56649c855503460f9493c784/what-is-hplc-high-performance-liquid-chromatography-high-pressure-liquid-chromatography.jpg)
